FACULTAD de MEDICINA

DEPARTAMENTO DE CIRUGIA, OFTALMOLOGIA, OTORRI-NOLARINGOLOGIA Y FISIOTERAPIA

TESIS DOCTORAL

ESTUDIO DE LOS EFECTOS DE DIFERENTES DROGAS DE ADICCION A NIVEL DEL HIGADO. VALORACION HISTOLOGICA Y MORFOMETRICA

Presentada por Doña Ana María Vaquero Saldaña, para optar al grado de

doctora por la Universidad de Valladolid

Dirigida por: Prof. Javier Agudo Bernal

Prof. Carlos Vaquero Puerta

Departamento de Cirugía, Oftalmología, Otorrinolaringología y Fisioterapia

ESTUDIO DE LOS EFECTOS DE DIFERENTES DROGAS DE ADICCION A NIVEL DEL HIGADO. VALORACION HISTOLOGICA Y MORFOMETRICA

DIRECTORES: PROF. JAVIER AGUDO BERNAL PROF. CARLOS VAQUERO PUERTA

DOCTORANDA: ANA MARIA VAQUERO SALDAÑA

Valladolid abril 2012

INTRODUCCION

AGRADECIMIENTOS

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

AGRADEC

AGRADECIMIENTOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

Quisiera en primer lugar mostrar mi agradecimiento a los Di-rectores de la Tesis Profesores Agudo Bernal y Vaquero Puerta puesto que sin ellos este trabajo nunca hubiera sido posible A los integrantes de la Delegación de Sanidad del Ministerio de Sanidad del Plan Nacional contra la droga, que facilitaron la droga de decomiso para poder realizar el estudio También quisiera agradecer el trabajo realizado por la técnica de laboratorio María Victoria Valdivieso Rodríguez por el pro-cedimiento de las piezas histológicas para su valoración por microscopía óptica, así como la medición de las estructuras en el estudio morfométrico. A la técnico Maria Teresa Fernández, por el trabajo de proce-samiento de las muestras que se utilizaron para el estudio ultra-estructural del hígado. Al Profesor de Bioestadística de la Facultad de Medicina de la Universidad de Valladolid, Agustín Mayo al facilitar que alum-nos en prácticas en Bioestadística realizaran el estudio estadís-tico de los datos. A todos los integrantes del Laboratorio de Cirugía Experimental por su participación directa o indirecta en el estudio

INTRODUCCION

INDICE

INDICE

Prologo 1 Introducción 4 Generalidades 5 Definición de drogas 5 Definición de drogadicción 6 Tipos de drogas 7 Según su dependencia 7 Según sus efectos 8 Adicción a las drogas 17 Daños orgánicos de las drogas 18 Drogas utilizadas en el estudio 21 Cocaína 21 MDMA. Éxtasis 31 Heroína 39 .. El hígado 48 Fisiología del hígado 52 Histología hepática 53 Descripción del hígado del ratón 56 Anatómica 56 Histológica 58 La morfometría hepática 71 Planteamiento del problema y objetivos del trabajo 76 Material y Métodos 79

Animal de laboratorio 80 Protocolo experimental 80

Grupo de animales estudiados 81 Técnicas histológicas microscópicas 82 Técnicas histológicas

Ultraestructurales 84 Estudio morfométrico

de las preparaciones 86 Análisis estadístico 89

Resultados 90 Tasa de mortalidad 91 Estudio ponderal 92 Estudio macroscópico de los animales 93 Estudio bajo microscopia óptica 94 Valoración subjetiva 94 Estudio morfométrico 97 Estudio bajo microcopía electrónica 107 Valoración subjetiva 107 Estudio morfométrico 110 Discusión 118

Conclusiones 137

Bibliografía 140

PROLOGO

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica, ultraestructural y morfométrica

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PROLOGO

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

Vivimos en una cultura de la droga, desde la mañana cuando tomamos ca-

feína o tefilina, al desayuno, hasta la noche, en que podemos relajarnos al

volver a la casa, con un aperitivo alcohólico, o un inductor del sueño con

un somnífero, recetado por el medico, estamos utilizando diferentes sus-

tancias, que afectan sobre el Sistema Nervioso Central, para enfrentarnos

a las peripecias de la cotidianeidad. Muchos además se activan a medida

que trascurre el día, aspirando nicotina.

Aun cuando las drogas han estado presentes en todas las culturas y en to-

das las épocas, hoy son más las personas que consumen drogas, hay más

cantidad y hay mas facilidades para conseguirlas.

Cuando se realiza una encuesta y se pregunta por los mayores problemas

de la sociedad actual, siempre sale nombrado dentro de los cinco primeros

puestos, el "problema de las drogas". Y cuando se consulta a la gente el

por qué de este problema, siempre se nombra como un problemas de po-

bres y marginales. Y hace mucho tiempo que dejo de ser un problema ca-

llejero y de marginales, y esto ocurrió cuando las drogas fueron el mejor

negocio para algunos y la peor desgracia para otros.

El consumo de sustancias es cada vez más permisivo, esto hace creer a las

personas "que no sucede nada si se consume".

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica, ultraestructural y morfométrica

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PROLOGO

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

La drogadicción y todo lo asociado a ellas es una gran pérdida de econó-

mica para quienes sufran, sobre todo para los estados quienes deben

combatirlas desde muchos aspectos a la vez.

INTRODUCCION

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

5

GENERALIDADES SOBRE LAS DROGAS

DE ADICCION

Definición de drogas

Son aquellas sustancias cuyo consumo

puede producir dependencia, estimula-

ción o depresión del sistema nervioso

central, o que dan como resultado un

trastorno en la función del juicio, del

comportamiento o del ánimo de la per-

sona23.

Es toda sustancia capaz de alterar el or-

ganismo y su acción psíquica la ejerce

sobre la conducta, la percepción y la

conciencia. La dependencia de la droga

es el consumo excesivo, persistente y

periódico de toda sustancia tóxica26.

El término drogas visto desde un punto

de vista estrictamente científico es prin-

cipio activo, materia prima. En ese sen-

tido droga puede compararse formal-

mente dentro de la farmacología y de-

ntro de la medicina con un fármaco, es

decir que droga y fármaco pueden utili-

zarse como sinónimos. Los fármacos son

un producto químico empleado en el

tratamiento o prevención de enferme-

dades. Los fármacos pueden elaborarse

a partir de plantas, minerales, animales,

o mediante síntesis. Existe una segunda

concepción que es de carácter social,

según ésta las drogas son sustancias

prohibidas, nocivas para la salud, de las

cuales se abusan y que en alguna forma

traen un perjuicio individual y social29.

Luego nos queda el problema dónde

actúan estas sustancias, ya que todas

estas drogas tienen un elemento básico

en el organismo que es el sistema ner-

vioso central el cual es la estructura más

delicada y el más importante que tiene

el ser humano, y si estas sustancias act-

úan sobre esas estructuras dañándolas,

perjudicándolas, indudablemente que

van constituir a un elemento grave y

peligroso para la colectividad; para la

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salud individual y lógicamente para la

salud pública50.

La Dependencia es el estado del indivi-

duo mediante el cual le crea y mantiene

constantemente un deseo de ingerir

alguna substancia. Si este deseo se man-

tiene por mecanismos metabólicos y su

falta crea un síndrome de abstinencia,

se denomina dependencia física. Si la

dependencia se mantiene por mecanis-

mos psicosociales, suele definirse como

dependencia psíquica o psicosocial105.

Las drogas se dividen en narcóticos, co-

mo el opio y sus derivados la morfina, la

codeína y heroína; estimulantes, como

el café, las anfetaminas, el crack y la co-

caína, y alucinógenos, como el LSD, la

mezcalina, el peyote, los hongos

çpsilocibios y los derivados del cáñamo,

como el hachís130.

1. Definición de drogadicción.

Es una enfermedad que tiene su asiento

en el cerebro de un gran número de se-

res humanos. La enfermedad se caracte-

riza por su cronicidad o larga duración,

ser evolutiva y con recaídas. La droga-

dicción tiene una dependencia psíquica,

en donde el individuo siente una impe-

riosa necesidad de tomar droga o, en

caso contrario, un desplome emocional

cuando no la ingiere y una dependencia

física producida por los terribles sínto-

mas de abstinencia al no ingerirla. La

drogadicción causa problemas físicos,

psicológicos, sociales y financieros153.

Se denomina drogadicción al estado

psíquico y en muchas ocasiones físico,

causado por la interacción entre un or-

ganismo vivo y una droga190. Desde el

punto de vista psíquico se caracteriza

por modificaciones del comportamien-

to, y por otras reacciones que compren-

den siempre un impulso irreprimible al

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tomar la droga en forma continua o pe-

riódica con el fin de experimentar sus

efectos psíquicos y a veces para evitar el

malestar producido por la privación. Al

hablar de dependencia de una droga se

refiere al uso compulsivo de este pero

hay que diferenciar la dependencia físi-

ca y psíquica. En la primera se presenta

el Síndrome de Abstinencia al dejar de

consumir y en la segunda dicho síndro-

me no se presenta166.

Se debe entender que el adicto seguirá

siendo un adicto mientras viva, es decir,

que el individuo se rehabilita para poder

vivir sin consumir la droga y, de allí en

adelante, éste será un adicto en remi-

sión, no estará usando la droga, pero

para mantenerse en ese estado de abs-

tinencia o remisión no podrá bajar la

guardia154

3. Tipos de Drogas173

Según Su Grado De Dependencia

Las Drogas "Duras", son aquellas que

provocan una dependencia física y psi-

cosocial, es decir, que alteran el com-

portamiento psíquico y social del adicto,

como el opio y sus derivados, el alcohol,

las anfetaminas y los barbitúricos192.

Las drogas "Blandas", son las que crean

únicamente una dependencia psicoso-

cial, entre las que se encuentran los de-

rivados del cáñamo, como el hachís o la

marihuana, la cocaína, el ácido lisérgico,

más conocido como LSD, así como tam-

bién el tabaco. Esta división de duras y

blandas, es cuestionada, y se podría de-

cir que las duras son malas y las blandas

son buenas o menos malas, pero admi-

nistradas en mismas dosis pueden tener

los mismos efectos nocivos98.

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8

Según sus efectos22,142

Narcóticos:

La palabra narcótico es un vocablo grie-

go que significa "cosa capaz de adorme-

cer y sedar". Esta palabra se usa con

frecuencia para referirse a todo tipo de

drogas psico activas, es decir, aquellas

que actúan sobre el psiquismo del indi-

viduo. Se pueden dividir en:

.Opio, opiáceos y sucedáneos sintéticos.

.Neurolépticos o tranquilizantes mayo-

res.

.Ansiolíticos o tranquilizantes menores.

.Somníferos o barbitúricos.

.Grandes narcóticos o anestésicos gene-

rales.

Es una droga con composiciones y orí-

genes distintos, que tienen en común su

efecto en el organismo, aunque este se

manifieste en manera y de grado dife-

rentes22, 142.

Neurolepticos o Tranquilizantes Mayo-

res:

Se trata de sustancias utilizadas para

tratar la depresión, las manías y las psi-

cosis, y muchas de ellas se venden sin

prescripción médica en la mayoría de

farmacias, entre estas están fenotiazi-

nas, el haloperidol y la reserpina.

Producen un estado de indiferencia

emocional, sin alterar la percepción ni

las funciones intelectuales, sumamente

tóxicos, poseen efectos secundarios ta-

les como parkinsonismo, destrucción de

células de la sangre, arritmia cardiaca,

anemia, vértigos, entre otros22,

Ansiolíticos o Tranquilizantes Menores:

Habitualmente usados para tratar las

neurosis, estas drogas constituyen la

mitad de todos los psicofármacos con-

sumidos en el mundo, a pesar de que

producen un síndrome de abstinencia

muy grave. En dosis mayores funcionan

como hipnóticos o inductores del sueño:

algunos se usan como relajantes muscu-

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lares. Producen letárgica, estupor y co-

ma, con relativa facilidad. Al abandonar

su consumo pueden aparecer episodios

depresivos, desasosiego o insomnio.

Somníferos ó Barbitúricos:

Su uso puede provocar lesiones en el

hígado o en los riñones, producir erup-

ciones cutáneas, dolores articulares,

neuralgias, hipotensión, estreñimiento y

tendencia al colapso circulatorio. La in-

toxicación aguda puede llegar a provo-

car la muerte. La dependencia física se

genera entre las 4 o las 6 semanas.

Grandes Narcóticos:

Existen varias sustancias usadas en

anestesia general que merecen estar

incluidas en este grupo por su capacidad

de producir sopor y estupefacción, ma-

yor que la de cualquier estupefaciente

en sentido estricto. En dosis leves pro-

duce una primara fase de excitación

cordial, como el alcohol y luego seda-

ción y sopor. También generan toleran-

cia y, en consecuencia, adicción, pu-

diendo ocasionar intoxicaciones agudas,

e incluso la muerte167.

Opio y sus derivados:

Con el nombre popular de adormidera o

amapola se conoce el fruto del cual se

obtiene el opio y sus derivados. Es un

polvo de color tostado. Se extrae de los

granos que contiene el fruto y entre sus

usos medicinales se encuentran la su-

presión del dolor, el control de los es-

pasmos y el uso como antitusígeno. En-

tre sus derivados se encuentra la morfi-

na, la heroína, la metadona y la codeína,

todos ellos pueden brindar extraordina-

rios beneficios terapéuticos si son rece-

tados y controlados por un médico22.

Los opiáceos se presentan como polvo

para fumar o solución inyectable. Este

narcótico produce un estado de euforia

y ensoñación; una sensación de éxtasis

que se acorta rápidamente a causa de la

tolerancia, cuyos efectos físicos son:

epidermis enrojecida, pupilas contraí-

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das, náuseas, decaimiento de la función

respiratoria, pérdida de reflejos, falta de

respuesta a los estímulos, hipotensión,

desaceleración cardíaca, convulsiones y

riesgo de muerte75.

Alucinógenas:

Las drogas conocidas como alucinóge-

nos son fármacos que provocan altera-

ciones psíquicas que afectan a la per-

cepción. La palabra "alucinógeno" hace

referencia a una distorsión en la percep-

ción de visiones, audiciones y una gene-

ración de sensaciones irreales. La aluci-

nación es un síntoma grave de la psico-

sis de la mente y su aparición distorsio-

na el conocimiento y la voluntad. Los

alucinógenos se consideran productos

psicodélicos que inhiben los mecanis-

mos de defensa del yo, y facilitan la dis-

tribución de la sensibilidad así como la

aparición de imágenes desconcertantes.

LSD (Ácido Lisérgico):

El LSD es una sustancia semi sintética,

derivado del ergot, extracto éste del

cornezuelo del centeno, usado en medi-

cina al final de la edad media. También

fue muy utilizado en obstetricia para

evitar hemorragias puerperales y pro-

mover la contracción del útero. En un

principio fue utilizado con fines terapéu-

ticos de alcohólicos, cancerosos y otros

pacientes terminales para ayudarles a

superar su enfermedad. Posteriormente

fue abandonada la práctica al compro-

barse los resultados adversos, tales co-

mo suicidios a causa de las engañosas

imágenes y terroríficas visualizaciones.

También se comprobó que podía desen-

cadenar esquizofrenia y deterioros men-

tales variados. Descubierto en 1938 se

considera el ácido lisérgico como el alu-

cinógeno más poderoso, aunque no el

más nocivo.

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Éxtasis o MDMA:

La metilendioximetanfetamina (MDMA),

normalmente conocida como "éxtasis",

"ectasi" o "X-TC", es un droga sintética

psicoactiva con propiedades alucinóge-

nas de gran potencial de emotivo y per-

turbador psicológico, con propiedades

similares a las anfetaminas17,96. Durante

los años 60 se utilizó con fines terapéu-

ticos dado que según determinados sec-

tores de la psiquiatría ayudaba a la co-

municación y al tratamiento de neurosis

fóbicas. El éxtasis produce efectos

psíquicos de gran potencial perturbador.

Inicialmente el sujeto experimenta sen-

saciones de confianza y excitación, a las

que siguen un estado de hiperactividad

e incremento en los pensamientos mor-

bosos. Los efectos del estimulante se

diluyen provocando trastornos sicólo-

gos, como confusión, problemas con el

sueño(pesadilla, insomnio), deseo in-

contenible de consumir nuevamente

droga, depresión, ansiedad grave y pa-

ranoia. Estos efectos han sido reporta-

dos incluso luego de varias semanas de

consumo. También se han informado

casos graves de psicosis. Entre los

síntomas físicos pueden citarse: ano-

rexia, tensión y trastornos musculares

similares a los presentes en la enferme-

dad de parkinson, bruxismo, náuseas,

visión borrosa, desmayo, escalofrío y

sudoración excesiva131. Se realiza una

descripción más pormenorizada, en el

apartado de drogas utilizadas en el es-

tudio.

Metanfetamina:

El individuo que usa "Ice" piensa que la

droga le proporciona energía instantá-

nea. La realidad es que la droga acelera

el sistema nervioso, haciendo que el

cuerpo utilice la energía acumulada. Los

efectos que causa al organismo varían

de acuerdo a la cantidad de droga utili-

zada. Entre los síntomas observados se

encuentran los siguientes: lesión nasal

cuando la droga es inhalada; sequedad y

picor en la piel; acné; irritación o infla-

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mación; aceleración de la respiración y

la presión arterial; lesiones del hígado,

pulmones y riñones; extenuación cuan-

do se acaban los efectos de la dro-

ga(necesidad de dormir por varios días);

movimientos bruscos e incontrolados de

la cara, cuello, brazos y manos pérdida

del apetito; depresión aguda cuando

desaparecen los efectos de la droga124.

MDA:

La MDA, es una droga similar a la anfe-

tamina que también ha sido objeto de

abuso, presentando efectos psico-físicos

similares a los de la MDMA. Está droga

destruye las neuronas productoras de

serotonina, que regulan directamente la

agresión, el estado de ánimo, la activi-

dad sexual, el sueño y la sensibilidad al

dolor116.

Cannabis sativa-hachis-marihuana:

El Cannabis Sativa es un arbusto silves-

tre que crece en zonas templadas y tro-

picales, con una altura de seis metros,

extrayéndose de su resina el hachís. Su

componente más relevante es el delta-

9-THC, conteniendo la planta más de

sesenta componentes relacionados. Se

consume preferentemente fumada,

aunque pueden realizarse infusiones

con efectos distintos. Un cigarrillo de

marihuana puede llegar a contener 150

mg. de THC, y llegar hasta el doble si

contiene aceite de hachís, lo cual puede

llevar al síndrome de abstinencia si se

consume de 10 a 20 días. La dependen-

cia se considera primordialmente

psíquica. Los síntomas característicos de

la intoxicación son: ansiedad, irritabili-

dad, temblores, insomnios. Puede pre-

sentarse en distintas modalidades de

consumo, sea en hojas que se fuman

directamente, en resina del arbusto o en

aceite desprendido de este último. De la

modalidad en que se presente la droga

dependerá su denominación: "marihua-

na" es el nombre de las hojas del cáña-

mo desmenuzadas, que después de se-

carse y ser tratadas pueden fumarse

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(también es conocida como hierba, ma-

rijuana, mariguana, mota, mafú, pasto,

María, monte, moy, café, chocolate,

etc.), su efecto es aproximadamente

cinco veces menor que el del hachís. El

nombre hachís (también conocido como

hashis) deriva de los terribles asesinos

(hashiscins) árabes, que combatieran en

las cruzadas en los años 1090 y 1256. El

hachís se obtiene de la inflorescencia

del cáñamo hembra, sustancia resinosa

que se presenta en forma de láminas

compactas con un característico olor.

Durante los años sesenta comienza el

consumo casi masivo de la marihuana

así como de otras alucinógenas como el

peyote, el LSD, etc. A pesar de ser una

sustancia ilegal, su consumo sigue en

aumento. La marihuana común contiene

un promedio de 3% de THC, pudiendo

alcanzar el 5,5 %. La resina tiene desde

7,5 % llegando hasta 24%. El hachís (re-

sina gomosa de las flores de las plantas

hembras) tiene un promedio de 3.6%,

pero puede a tener 28%. El aceite de

hachís, un líquido resinoso y espeso que

se destila del hachís, tiene un promedio

de 16% de THC, pero puede llegar a te-

ner 43%. El THC afecta a las células del

cerebro encargadas de la memoria. Eso

hace que la persona tenga dificultad en

recordar eventos recientes (como lo que

sucedió hace algunos minutos), y hace

difícil que pueda aprender mientras se

encuentra bajo la influencia de la droga.

Estimulantes

Tradicionalmente usados para combatir

la fatiga, el hambre y el desánimo, los

estimulantes provocan una mayor resis-

tencia física transitoria gracias a la acti-

vación directa del sistema nervioso cen-

tral162.

Estimulantes vegetales:

El café, té, el mate, la cola, el caco, el

betel y la coca son plantas que crecen

en muchas partes del mundo, a pesar

que suelen consumirse repetidas veces

en el día, son sustancias tóxicas que po-

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seen efectos secundarios. Aunque los

estimulantes vegetales son considera-

dos como inocuos, conviene moderar su

consumo ya que se trata de sustancias

tóxicas susceptibles de producir efectos

secundarios nocivos.

Coca

La coca, hoja del arbusto indígena ame-

ricano, pertenece al grupo de los esti-

mulantes. Su consumo es ancestral en

ciertas partes de Latinoamérica, donde

es una práctica habitual el mascar las

hojas. Su efecto sobre el sistema nervio-

so central es menor que los de la cocaí-

na. La coca es consumida mascándola

con algún polvo alcalino como cenizas o

cal. También es fumada tanto sola como

mezclada con tabaco y marihuana. Está

comprobado que tiene síntomas de abs-

tinencia, depresión, fatiga, toxicidad y

alucinaciones. 121

Estimulantes Químicos

Cocaína

Es un poderoso estimulante de corta

duración que actúa sobre el sistema

nervioso central. La cocaína proviene

del árbol de la coca que crece en Améri-

ca del Sur. La cocaína (clorhidrato de

cocaína) de mayor consumo en los esta-

dos unidos es un polvo blanco y cristali-

no que se extrae de las hojas de la coca.

La cocaína que se compra en la calle es

una mezcla de cocaína pura y de otras

sustancias que se le añaden para au-

mentar las existencias y las ganancias

del vendedor. Estas sustancias con las

cuales se mezcla son: talco. Harina,

laxantes, azúcar, anestesia local y otros

estimulantes y polvos129.

La cocaína que se puede fumar es preci-

samente la que se obtiene en la calle, la

que se convierte en base pura al elimi-

nar la sal de hidroclorido y otras sustan-

cias que se la haya añadido. La única

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forma de introducirla al sistema es

fumándola.

Síntomas del uso de la cocaína: tenden-

cias suicidas, cambios drásticos en el

ánimo, perdida de amigos y antiguos

valores, abortos, malformaciones

congénitas en los hijos de madres con-

sumidoras, pérdida de peso, como re-

sultado de perdida del apetito, dolores

de cabeza crónicos, Enfermedades res-

piratorias, deficiencia de vitaminas,

adicción y muerte. Las señales del uso

de cocaína son pupilas dilatadas, boca y

nariz seca, mal aliento, humedad de los

labios con frecuencia, actividad excesi-

va, dificultad en quedarse quieto,

hablador pero la conversación carece de

continuidad, nariz supurante, catarro o

sinusitis crónica ó problemas nasales,

disminución repentina de calificaciones

escolares y desempeño laboral, facilidad

para caer en problemas o susceptibili-

dad a accidentarse, uso o posesión de

parafernalia, incluyendo cucharitas, cu-

chillas de afeitar, espejos. Pequeñas bo-

tellas con polvo blanco, absorbentes de

plástico, vidrio o metal, pipas de vidrio y

antorchas o soplete en miniatura. La

cocaína es una de las drogas más adicti-

vas que hay, ya que su efecto, aunque

fuerte es de corta duración.

Otra forma de usar Cocaína es la Pasta

Base, también denominado "crack, ba-

zuco", forma más peligrosa de cocaína

que se puede fumar es una pasta de

cocaína hecha usando gasolina o ácido

sulfúrico para extraer una pasta fuma-

ble, la pasta se seca y se fuma en una

pipa o se tritura para hacer un cigarrillo.

Durante el desplome, el consumidor se

siente cansado, ansioso e irritado. El uso

de la cocaína proporciona un alivio in-

mediato a estos síntomas y crea un ciclo

de uso para evitar los efectos resultan-

tes no placenteros. Generalmente,

mientras mayor sea la euforia peor

serán las consecuencias del desplome.

El síndrome de retirada, seguido del uso

prolongado y extensivo de la droga,

puede causar irritación, nauseas, agita-

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ción, desordenes en el dormir, depre-

sión aguda, dolores musculares y una

intensa ansia por la droga107. Se am-

pliará la información sobre esta droga

en la referencia a las drogas utilizadas

en el estudio.

Anfetaminas

Fueron sintetizadas por primera vez en-

tre la última década del siglo XIX y la

primera del siglo XX. Los primeros expe-

rimentos clínicos se iniciaron hacía

1930, y desde 1935 se comercializó con

gran difusión en el Reino Unido, Francia

y Alemania. Durante la segunda guerra

mundial fue utilizada indiscriminada-

mente por todos los bandos dado el

carácter de euforizante que contiene la

sustancia y la agresividad. Las anfetami-

nas fueron utilizadas como estimulantes

luego en forma de inhalaciones para el

tratamiento de catarros y congestiones

nasales, más tarde como píldoras contra

el mareo y para disminuir el apetito en

el tratamiento de la obesidad y, final-

mente, como antidepresivo. Presentan

una elevada tolerancia que produce

habituación y necesidad de dosis pro-

gresivamente más elevada. El consumo

de este excitante está ampliamente ex-

tendido y distribuido por todas las clases

sociales. A diferencia de lo que sucede

con la cocaína que la consumen prefe-

rentemente los sectores medios y altos,

las anfetaminas son consumidas tanto

por ejecutivos que pretenden sobreexci-

tación como por amas de casa que bus-

can un anoréxico para sus dietas o por

estudiantes que preparan exámenes. Al

incidir en el sistema ortosimpático cau-

san hipertensión, taquicardia, hiper-

glucemia, midriasis, vasodilatación, pe-

riférica, hiperpnea, hiporexia, etc. El

estado de ánimo del adicto oscila entre

la distrofia y la hipomanía así como an-

siedad, insomnio, cefalea, temblores y

vértigo. Pueden aparecer cuadros de-

presivos y síndrome paranoides anfe-

tamínicos. A dosis normales sus efectos

varían de acuerdo al individuo y las con-

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diciones de ingesta. Pueden producir

efectos placenteros, hiperactividad y

sensación desbordante de energía, pero

también causan temblor, ansiedad, irri-

tabilidad, ira inmotivada y repentina y

trastornos amnésicos e incoherentes. En

la última fase se describe depresión,

cuadros paranoides y delirios paranoi-

des, alucinaciones y trastornos de con-

ducta. Tales situaciones se producen

cuando las dosis suministradas gene-

ralmente por vía endovenosa supera los

dos gramos. Tomadas en dosis impor-

tantes son causantes de confusión, ten-

sión, ansiedad aguda y miedo. El con-

sumo de anfetamina produce en el

cuerpo los siguientes síntomas:

Acelera el ritmo cardiaco y pulmonar,

Dilata las pupilas, Reduce el apetito,

Produce sequedad en la boca, Sudores,

Dolores de cabeza, Pérdida de visión,

mareos, insomnio, ansiedad, A largo

plazo y/o usadas en dosis elevadas

ocasionan: Temblores, Pérdida de

coordinación, Colapso físico, daño a

riñones y tejido, mal nutrición, aumento

repentino de presión sanguínea que

puede producir la muerte por ataque,

fiebre muy alta o insuficiencia

cardiaca81.

4. Adicción a las drogas

La drogadicción, drogodependencia o

también llamada dependencia a sustan-

cias psico activas es la imperiosa necesi-

dad que una persona tiene por consu-

mir cualquier clase de drogas (bebidas

alcohólicas, marihuana, cocaína, in-

halantes, tranquilizantes, alucinógenos,

etc.) 73. Esta necesidad no desaparece a

pesar de que la persona consumidora o

usuaria sufra las consecuencias negati-

vas producidas al momento de consu-

mirlas o después de dejar de usarlas. Se

trata más de una necesidad psicológica

que física186.

En nuestro país es un problema que va

en aumento cada día, involucrando a

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

18

menores de edad y a más mujeres de las

que uno puede imaginarse. Se dice que

de 10 a 15 de cada 100 personas tiene

problemas con su manera de beber o

debido a su consumo de drogas ilegales

o de las de prescripción médica, obteni-

das por algún método inadecuado.

También se dice que de esos 10 a 15 de

cada 100 personas, al menos 2 ó 3 son

mujeres. No estamos hablando de todas

las personas en general sino solamente

de aquellos que están comprendidos en

el rango de los 14 a los 60 años de edad,

es decir las edades más productivas en

la vida de cualquier persona42,43.

5. Daños orgánicos que causan las dro-

gas66:

Cerebelo: es el centro de la mayoría de

las funciones involuntarias del cuerpo. El

abuso severo de drogas daña los nervios

que controlan los movimientos motores,

lo que resulta en pérdida de coordina-

ción general. Los adictos crónicos expe-

rimentan temblores y agitación incon-

trolable.

Corazón: El uso de drogas puede produ-

cir "Síndrome de Muerte Súbita". Las

dos sustancias que más frecuentemente

han causado estas muertes son el tolue-

no y el gas butano7.

Medula Ósea: Se ha comprobado que

las drogas causan el envenenamiento

esta, causando causa leucemia

Nervios Craneales, Nervios Ópticos Y

Acústicos: las drogas atrofian estos ner-

vios, causando problemas visuales y po-

bre coordinación de los ojos. Además,

destruye las células que envían el sonido

al cerebro. Ello deriva en graves posibi-

lidades de cegueras y sorderas.

Sangre: las drogas bloquean química-

mente la capacidad de transportar el

oxigeno en la sangre9.

Sistema Respiratorio: se puede producir

asfixia cuando no se desplaza totalmen-

te el oxigeno en los pulmones. Además

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

19

se presentan graves irritaciones en las

mucosas nasales y tracto respiratorio.

Cerebro: Las drogas, introducidas en

nuestro cuerpo por diferentes vías, lle-

gan alojadas en el torrente sanguíneo

hasta el cerebro atravesando la barrera

hematoencefálica. Una vez que han lle-

gado al cerebro, lugar donde reside el

control de las funciones superiores del

ser humano, alteran su normal funcio-

namiento actuando sobre unas sustan-

cias bioquímicas naturales llamadas

'Neurotransmisores'. Las señales nervio-

sas viajan a través de las células nervio-

sas, denominadas neuronas, que están

conectadas entre sí por las sinapsis. En

la sinapsis es donde se liberan los neu-

rotransmisores, que actúan sobre la si-

guiente neurona en unos puntos especí-

ficos llamados receptores. La interacción

de los neurotransmisores en los recep-

tores produce una serie de cambios que

permiten que la información vaya de

una neurona a otra. Las drogas alteran

el funcionamiento cerebral modificando

la producción, la liberación o la degra-

dación de los neurotransmisores cere-

brales de tal forma que se produce una

modificación del proceso natural de in-

tercomunicación neuronal y en la pro-

ducción y recaptación de los neuro-

transmisores8.

De esta forma es como las drogas lo-

gran alterar nuestra percepción senso-

rial, la sensación de dolor o bienestar,

los ritmos de sueño-vigilia, la activación,

etc. Estos cambios bioquímicos que se

producen en el seno del cerebro se tra-

tan con medicación con el objeto de

restablecer el equilibrio natural y permi-

tir el normal funcionamiento de nuestro

sistema neurológico11.

Aparato digestivo: El hígado, es una de

las vísceras que se consideran que se

puede dañar más a nivel del aparato

digestivo, donde se han descrito diver-

sas alteraciones, información obtenidas

a nivel de autopsias de cadáveres de

drogadictos y biopsias de los pacien-

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

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Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

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tes38, algunas muy graves como el fallo

hepaático76

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INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

21

DROGAS UTILIZADAS EN EL ESTUDIO

COCAINA

La cocaína es una droga estimulante del

sistema nervioso central, concretamen-

te del sistema dopaminérgico. Su fórmu-

la química es C17H21NO4

Se extrae de la hoja de coca, una planta

originaria de Sudamérica que es usada

por los indígenas para inhibir el hambre,

la sed y el cansancio. Combate también

el mal de altura, el dolor de encía, dolor

estomacal, y otras tantas dolencias74.

La cocaína es un estimulante adictivo

que afecta directamente al cerebro. Ha

sido llamada la droga de los ochenta y

noventa por su gran popularidad y uso

durante esas décadas. Sin embargo, la

cocaína no es una droga nueva. En rea-

lidad, es una de las drogas más antiguas.

La sustancia química pura, el clorhidrato

de cocaína, se ha venido

usando por más de 100 años, mientras

que las hojas de la coca se han ingerido

Aspectos de la cocaina

Estructura química de la cocaína

(1R,2R,3S,5S)-3-(benzoiloxi)-8-metil-8-

azabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxilato de

metilo

Número CAS

50-36-2

Código ATC

N01BC01

Fórmula química C17H21NO4

Peso molecular 303,35 g/mol

Metabolismo Hepático

Excreción Renal

Status legal Psicotrópico:

Lista I (Estados Unidos)

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Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

22

por miles de años. A mediados del siglo

XIX, se extrajo por primera vez la coca

pura de la hoja de la planta Erytroxilon,

que crece principalmente en Perú y Bo-

livia. A principios del siglo XX, la cocaína

se convirtió en el ingrediente principal

en la mayoría de los tónicos y elixires

que se crearon para tratar numerosas

enfermedades, incluyendo la Coca-Cola

y el Vin Mariani. En la actualidad es una

droga clasificada bajo la Lista I en Esta-

dos Unidos ("Schedule I") junto con

otros estimulantes como la anfetamina

y el LSD, lo que significa que se le atri-

buye gran potencial de abuso, pero

puede ser administrada por un médico

para usos terapéuticos legítimos, como

por ejemplo, anestesia local en ciertos

tipos de cirugías de los ojos, oídos y gar-

ganta.

Básicamente hay dos formas químicas

de la cocaína: las sales y los cristales de

cocaína (como base libre). El clorhidra-

to, la forma más común del polvo de

cocaína, se disuelve en agua, y cuando

se abusa, puede ser usada en forma in-

travenosa o intranasal (por la nariz). La

base libre se refiere a un compuesto

que no ha sido neutralizado por ácido

para producir la sal correspondiente.

Esta forma de la cocaína se puede fu-

mar, ya que no se descompone como sí

lo hace el clorhidrato46.

La cocaína usualmente se vende ilegal-

mente en forma de un polvo blanco,

fino y cristalino. Los traficantes gene-

ralmente la mezclan con otras sustan-

cias, tales como maicena, talco o azúcar;

o con ciertas drogas como la procaína

(un anestésico local de estructura quí-

mica parecida), o con otros estimulan-

tes, como las anfetaminas (por ejemplo,

metanfetamina). También se vende en

una forma llamado "crack", roca, y ba-

zuco (en Colombia y el Caribe), en forma

de piedrecitas blancas o amarillas pro-

cesada con amoníaco o bicarbonato de

sodio, que generalmente se fuma en

pipa de vidrio. Esa forma es muy popu-

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INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

23

lar en las clases media y baja y causa

más adicción que la forma cristalina.

Esta droga se conoce como cocaína, co-

ca, merca, camerusa, pala, filete de mer-

luza, perico, pichi, papa, papuza, "la del

diego", farlopa, fariña... además de

otras muchas denominaciones depen-

diendo de la zona.

Los efectos son inmediatos y consisten

en una elevación de la autoestima y la

confianza en uno mismo, acompañado

de una gran locuacidad, excitación (pu-

diendo llegar a la extrema irritabilidad).

El efecto dura relativamente poco tiem-

po (unos 30-60 minutos) y en cuanto

empieza a declinar el sujeto experimen-

ta ansiedad por recibir otra dosis. A lar-

go plazo, su uso descontrolado produce

adicción, desórdenes mentales y muer-

te, bien sea por efectos físicos directos,

suicidio, o accidentes118.

Planta de coca

La cocaína es un alcaloide que se obtie-

ne de la hoja de coca, planta que crece

en sudamérica, de la cual existen 200

variedades de las cuales solo 4 producen

dicho alcaloide:

• Erythroxylum coca o coca

boliviana: originaria de Perú y Bolivia.

• Erythroxylum coca variedad

ipadu o coca del amazonas: orginaria de

zonas cercanas al río Amazonas.

• Erytrhoxylum novo granatense o

coca colombiana: originaria de Colom-

bia(Aunque la eradicacion de la mata de

coca a detenido el cultivo de esta) y Ec-

uador.

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

24

• Erytrhoxylum truxillense o coca

de Trujillo: originaria de la vertiente ori-

ental de la cordillera de los Andes y el

Perú.

El contenido de alcaloides en la planta

está ente 0,1 y 0,8 %, el componente

principal es la cocaína. La fórmula quí-

mica de la cocaína es del metilestero del

benzoilecgonin de giro izquierdo

(2R,3S)-3-bensoiloxitropan-2-metileste-

ro de carbón ácido con la fórmula empí-

rica de C17H21NO4. Además contiene

cinamilcocaina, benzoilecgonina, trujilli-

na, así como el alcaloide anexo tropa-

caína. La planta de la coca es cultivada

en Sudamérica y Java en alturas entre

600 a 1.000 metros. Los principales paí-

ses de cultivo son Colombia, Perú, Boli-

via y Java. Para la elaboración y consu-

mo de la coca se conocen diferentes

métodos y preparaciones: hojas de coca,

pasta de coca, hidrocloruro de cocaína y

alcaloide de cocaína; cada uno presenta

diferentes niveles de potencia e intoxi-

cación, debido a los variados niveles de

pureza . Una de las formas más comu-

nes para su uso y consumo es el crack,

que es un alcaloide de la cocaína que se

extrae de una sal en polvo mezclándola

con bicarbonato sódico y secándola en

pequeñas piedras. El crack difiere de

otras formas de cocaína por ser fácil-

mente vaporizable y cuando se inhala

sus efectos son muy rápidos36.

Pasta de coca

Se necesitan una gran variedad manipu-

lación química para su producción según

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

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Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

25

la forma en que se requiera su extrac-

ción o se puede usar esta para llegar a

su forma más pura y refinada:

a) Producción de pasta de coca: quero-

seno, gasolina u otros disolventes orgá-

nicos parecidos; álcalis, por ejemplo

carbonatos de sodio, potasio o calcio,

hidróxido de sodio u óxido de calcio;

ácidos, por ejemplo: el sulfúrico.

b) Producción de cocaína base: oxidan-

tes, por ejemplo: permanganato de po-

tasio o peróxido de hidrógeno; ácido

sulfúrico; álcalis, por ejemplo: solución

acuosa de amoniaco.

c) Producción de clorhidrato de cocaína:

solventes orgánicos, por ejemplo: éter

etílico, acetona, metiletilcetona o tolue-

no y ácido clorhídrico.

Para la preparación de la pasta básica de

cocaína, se procede a la alcalinización de

la hoja de coca, secado, extracción con

solvente orgánico22, precipitación con

ácido fuerte (ácido sulfúrico), disolución

del residuo en agua y precipitación últi-

ma con álcalis.

Consumo 42 :

La preponderancia anual del uso de co-

caína se estima que afecta a 13,3 millo-

nes de personas o el 0,23 por ciento de

la población mundial. El mayor consu-

midor per cápita de cocaína es España

donde un 2,6% de la población la con-

sume, Estados Unidos, el mayor merca-

do del narcótico se coloca en segundo

lugar con un índice de consumidores del

2,5%. Le siguen Irlanda (2,4%), Reino

Unido (2,1%) Canadá (1,9%) y Argentina

(1,9%). Unos 475.000 españoles han

aspirado cocaína en noviembre de 2006

y 350.000 son menores de 35 años.

Según el European Monitoring Centre

for Drugs and Drug Addiction, en su in-

forme del 2005, la cocaína avanza como

droga de moda en Europa y cada quinto

europeo (entre 15 y 34 años) consume

marihuana, éxtasis o cocaína. Diez por

ciento de los muertos por drogas ilega-

les en Europa se le atribuyen a la cocaí-

na. Con nueve millones de personas en

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

26

Europa habrían consumido cocaína y

unos 1,5 millones de europeos son ‘con-

sumidores actuales’. En Alemania un 1,7

por ciento habría consumido cocaína en

los últimos doce meses. España y Gran

Bretaña son líderes en consumo de co-

caína, con casi cinco por ciento de los

adúltos jóvenes y con ello rebasando las

cifras de consumo de anfetaminas y

éxtasis. Además del cocainismo, se in-

crementó el consumo de marihuana. El

cannabis es la droga más consumida

diariamente en Europa con tres millones

de consumidores. En los países recién

incorporados a la Unión Europa el con-

sumo de sustancias ilegales tuvo un gran

repunte15,81.

Historia: Los primeros arbustos de coca

fueron llevados en 1750 de Sudamérica

hacia Europa. En 1859 se alcanzó por

primera vez el aislamiento del alcaloide

por Albert Niemann. En 1898 se logró la

explicación de la constitución y en 1902

la síntesis por Richard Willstätter. Desde

1879 se empleó la cocaína para tratar la

dependencia en morfina. Hacia 1884 se

empezó a usar como anestésico en clíni-

cas en Alemania. Aproximadamente al

mismo tiempo Sigmund Freud escribió

sobre sus efectos en su obra Über Co-

ca153 (sobre la coca).

“El efecto psicológico de la Cocainum

mur. e dosis de 0,05 a 0,10 gramos

consiste en la excitación y la euforia

retenida, la que no se diferencia mucho

de la euforia de las personas sanas. Falta

totalmente el sentimiento de alteración

que acompaña a la excitación por alco-

hol, también falta el efecto

característico inmediato del alcohol de

ansiedad. Se tiene la sensación de

incremento del autocontrol, se siente

gran vigor y de capacidad de trabajo.

Pero si se trabaja se extraña la excelente

y elegante excitación e incremento de

las fuerzas intelectuales por alcohol, té

o café. Se es simplemente normal y se

tiene pronto el esfuerzo de creer que se

está bajo el efecto de algo.”

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

27

La primera receta de la bebida refres-

cante Coca-Cola contenía hasta 1903 un

extracto de las hojas de coca (y por ello

el nombre), de modo que un litro de

Coca Cola contenía 250 miligramos de

cocaína, la cual fue sustituida más tarde

por cafeína. El uso de cocaína en Europa

fue amplio y legal en la primera tercera

parte del siglo XIX. La peligrosidad de la

sustancia fue reconocida lentamente.

El médico peruano Carlos Gutiérrez-

Noriega (1906-1950) -en colaboración

con Zapata– en su libro titulado “Estu-

dios sobre la coca y cocaína en el Perú”

(1947) 153 indica:

“La coca “droga que actúa como un

narcótico de las sensaciones vitales,

pues suprime el hambre, la fatiga de los

organismos debilitados, la sed, el frío y

las más elementales aspiraciones

humanas”, fue en estas circunstancias

un factor indispensable para adaptar al

organismo a tan deficientes y anómalas

condiciones de vida. Esta droga ha

actuado como un extraordinario auxiliar

del pueblo andino durante cuatro siglos,

para sobrellevar la miseria más

extremada”.

Efectos y usos medicinales

La cocaína aumenta el riesgo de sufrir

trombosis, derrame cerebral e infarto

de miocardio, acelera la arterioesclero-

sis y provoca paranoia transitoria en la

mayoría de los adictos. La cocaína es el

anestésico local más conocido. Debido a

la alta peligrosidad de adicción y la

marcada toxicidad no se emplea más. La

cocaína sirve como sustancia para

muchos anestésicos locales, como por

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

28

ejemplo: lidocaína, benzocaina y

escandicaína.

En 1884 se introdujo por primera vez en

terapias de oftalmología. El empleo de

cocaína, de acuerdo con la ley de pres-

cripción de sustancias anestésicas de

Alemania, está permitido aún hoy en

día. La cocaína se utiliza contra dolores

de dientes en 1885.

Cocaísmo:

El mascar las hojas de coca mezcladas

con harina de caliza se le conoce como

cocaísmo. Con ello se tienen raramente

síntomas de adicción, ya que la cocaína

con la caliza se transforma en ecgonina.

El mascar las hojas de coca es hasta hoy

común en las comunidades indígenas de

las zonas de cultivo, al contrario de la

toma de cocaína pura. Entre sus efectos,

bajo esta forma de consumo, están122:

Disminuye la sensación de la enferme-

dad de las alturas y el hambre. El co-

caísmo bajo consumo regular ataca los

dientes.

En el Perú se conoce como "Chacchar"

que proviene del quechua "chakchay"

que significa masticar, para ello las hojas

de coca se mezclan con "llipta" que es la

ceniza obtenida de la quinua, tabaco,

maíz o cualquier otra planta rica en sus-

tancias alcalinas, a la cual se le adiciona

sal eventualmente. El hecho de chac-

char es un acto ritual o social en las co-

munidades andinas del Perú, bajo un

contexto magico-religioso. Cabe men-

cionar que la hoja de coca esta verde

pero seca y en estas condiciones no sir-

ve para producir cocaína148.

Potencial de adicción y otros peligros:

Después de la embriaguez con cocaína

se presentan en algunos consumidores

una fuerte depresión. Este estado in-

duce al cocainómano a tomar rápido de

nuevo la droga, para así evitar la

"depresión por cocaína"

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INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

29

Cocaína en polvo

. Este mecanismo es peligroso, ya que

puede conducir a una dependencia de la

droga. El consumo regular de cocaína

puede conducir a una rápida dependen-

cia psicológica (adicción), pero no a una

dependencia física. Un efecto específico

aquí es (que es más remarcado cuando

se fuma cocaína base crack) la “codicia

episódica”: aún en consumidores inex-

pertos el efecto de la droga puede con-

ducir a la ansiedad extrema de consumir

más, cuando el efecto disminuye. En el

caso extremo la dinámica del consumo

(llamado “binges” en inglés: episodios

de períodos cortos de tiempo en que

ocurre el consumo) puede tener como

consecuencia que dure algunas horas o

días. Un caso especial del consumo de

cocaína de larga duración es la aparición

de la llamada locura dermatozóica, en la

que el consumidor está convencido de

que los insectos se mueven debajo de su

propia piel. Además con la dependencia

de cocaína se tiene a menudo un dete-

rioro de la conciencia del adicto –esto

en el contexto de que el efecto del au-

mento de la autoestima, en conjunto

con la dinámica de consumo, hace des-

vanecer la conciencia social (por ello la

cocaína es denominada a veces como

“ego-droga”).

Riesgos para la salud:

El riesgo de morir por una sobredosis de

cocaína es para los consumidores de

cocaína aproximadamente 20 veces

menor que para los consumidores de

heroína. En Alemania menos del 2% de

los muertos por drogas mueren por una

sobredosis de cocaína. El riesgo de morir

por una intoxicación de mezcla es sensi-

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

30

blemente mayor. Cerca del 6% de los

muertos debido a drogas en Alemania

se deben a una intoxicación de mezcla.

La cocaína puede producir psicosis co-

caínica, síndrome de conducta que

guarda gran parecido con la esquizofre-

nia paranoide, con la que a veces se ha

confundido. Aspirar la cocaína puede

lesionar las membranas nasales, fumarla

daña los pulmones y la inyección es pe-

ligrosísima por la alta probabilidad de

sobredosis en esta forma de administra-

ción. La dosis mortal de cocaína, en in-

yección intravenosa única, es de un 1

gramo aproximadamente.

Además, la notable estimulación que

provoca a menudo ha llevado a tener o

provocar accidentes a los consumido-

res155.

Pureza de la cocaína

La cocaína que se encuentra en el mer-

cado ilegal de drogas raramente es pu-

ra. De acuerdo con el Informe de la Ofi-

cina Federal de Investigación Criminal

de Alemania de 2003 se diluye en las

categorías más bajas, que se encuentran

en promedio por clorhidrato de cocaína

del 85% en muestras de un kilogramo de

peso y en muestras del gramo a un kilo-

gramo en el orden del 60%. En muestras

menores a un gramo se tiene alrededor

de 35% de clorhidrato de cocaína. El

promedio de grado de pureza contenido

en muestras de cocaína base en mues-

tras del orden de un kilogramo es de

85% (porcentaje de clorhidrato de co-

caína) y sorprendentemente se ha man-

tenido en los últimos 10 años práctica-

mente estable. Sin embargo, en mues-

tras del orden de un gramo a un kilo-

gramo se ha reducido en un 10% el con-

tenido de grado de pureza, mientras

que las menores a un gramo se ha redu-

cido en un 20%.151

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INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

31

MDMA (Éxtasis)

La MDMA, llamada "Adam", "Éxtasis" o

"XTC" en la calle, es una droga sintética

psicoactiva (que altera la mente) con

propiedades alucinógenas y similares a

las de la anfetamina. Su estructura

química es parecida a la de otras dos

drogas sintéticas, la MDA y la

metanfetamina, las cuales producen

daño cerebral17.

Polvo de MDMA

El MDMA puro o semi-puro se

estructura en forma de cristal, que se

desmenuza con facilidad para su

manejo.

El MDMA (3,4-meti lendi oxi metanfe-

tamina), conocido vulgarmente como

tacha, es una droga psicoactiva de ori-

gen sintético derivada del éxtasis, con

propiedades estimulantes y neurotóxi-

cas y de sabor amargo. Suele relacionar-

se y confundirse con el MDA y otros de-

rivados de la anfetamina.

El MDMA se particulariza por sus efec-

tos empatógenos, relativos a una sensa-

ción subjetiva de apertura emocional e

identificación afectiva con el otro. Estas

propiedades distintivas estarían media-

das por un incremento en los niveles del

neurotransmisor serotonina en las si-

napsis neuronales y otros neurotransmi-

sores, principalmente la noradrenalina

y, en menor medida, la dopamina. La

actividad de la serotonina se ha relacio-

nado funcionalmente con los estados de

ánimo y el humor20.

Estructura química:

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

32

La fórmula química del MDMA es:

C11H15NO2 Se trata de una sustancia que

puede generar y genera momentos de

maxima comodidad sin tener en cuenta

una postura en concreto. Se trata de

una molécula perteneciente al grupo de

las fenetilaminas, emparentada estruc-

turalmente con el alcaloide mescalina, y

derivada química de la metanfetamina.

También está relacionada con el MDA

(metilendioxianfetamina), un compues-

to precursor, con efectos fisiológicos

similares. Tanto la metanfetamina como

el MDA, se han vinculado con potencia-

les efectos neurotóxicos113.

Estructura química del MDMA

Historia:

En 1912, los laboratorios Merck en

Darmstadt, sintetizaron de modo acci-

dental el MDMA. El hallazgo no fue se-

guido de estudios farmacológicos y, has-

ta 1953, el descubrimiento permaneció

en el registro de patentes sin ninguna

aplicación concreta. Es rotundamente

falso, por mucho que se afirme en multi-

tud de documentos, que se ensayara en

humanos como anorexígeno o para usos

bélicos. La primera comunicación cientí-

fica sobre efectos fisiológicos en seres

humanos es de 1976 y se debe al quími-

co y farmacólogo Alexander Shulgin96.

Pastillas de MDMA grabadas con monogramas

distintivos

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INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

33

En 1985, el MDMA fue prohibido en Es-

tados Unidos, en tanto que la Organiza-

ción Mundial de la Salud (OMS) incluyó

al MDMA en la Lista I de psicotrópicos,

entre los fármacos sin usos terapéuti-

cos, sólo admisibles en experimentos

con animales. Al caer en la prohibición,

quedaron interrumpidas varias investi-

gaciones sobre los efectos de esta dro-

ga. Algo que no quedó claro para algu-

nos en la historia de esta droga fue lo

drástico de su prohibición, ya que no

existían entonces pruebas de efectos

nocivos, peligrosos o fatales, siendo la

adicción menor que en otros fármacos

debido a la baja tolerancia que el cuerpo

humano desarrolla a la droga, y siendo

la sobredosis algo improbable también.

Se la incluyó en la "Lista I" junto con

drogas como LSD, heroína, cocaína y

otras drogas de riesgos altamente de-

mostrados. Se dijo que detrás de esta

prohibición existían intereses económi-

cos de grandes compañías farmacéuti-

cas fabricantes de antidepresivos y otras

drogas legales que no tenían competen-

cia con los resultados del MDMA. Su-

mado a esto estaban las investigaciones

hechas por algunos profesionales con

resultados altamente satisfactorios en el

tratamiento de algunos traumas psi-

cológicos y problemas de parejas. La

evidencia de los daños en la neurogéne-

sis en adultos y el impedimento de la

frontalización, proceso en el que el ce-

rebro alcanza su madurez y que se pro-

duce hacia al final de la adolescencia,

han dejado obsoleta esta discusión147. El

MDMA alcanza su auge de consumo ile-

gal entre la población más joven en los

años 90, en los que emerge como algo

novedoso, desligado de la figura del

"yonqui" (prototipo de drogadicto de los

años 70 y 80). El MDMA se suele vincu-

lar con un consumo masivo en ciertos

festivales de música electrónica, por lo

general en las fiestas Rave. Sin embargo,

no es exclusivamente el único contexto

"lúdico" en que se consume esta dro-

ga55.

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

34

Efectos:

Algunos efectos temporales y más o

menos inmediatos por su consumo,

derivados de la liberación de serotonina

son: signos de euforia, gran dilatación

de las pupilas, pérdida de control de los

músculos de uno u ambos ojos (que

comienza a vibrar al intentar enfocar la

vista en un punto), pérdida de

sensibilidad (lo que provoca la ausencia

de sed y en caso de descuido la

deshidratación), empatía o

ensalzamiento de la amistad (por lo que

se investiga como tratamiento para

algunas enfermedades psicológicas),

aumento de la temperatura corporal,

hipertensión y pérdida de control de los

músculos del maxilar inferior. El meca-

nismo de acción se atribuye al rol del

MDMA como agonista directo de los

receptores neuronales presinápticos de

serotonina142. De esta manera, el

MDMA induce la liberación de estos

neurotransmisores desde las vesículas

en las terminales presinápticas de las

neuronas, hacia el espacio sináptico,

propagando la señal por toda la red

neuronal. Estos cambios neuroquímicos

se manifiestan fisiológicamente

produciendo templanza emocional y

apertura afectiva, comunicación

desinhibida, empatía (entactogénesis).

Además, el MDMA preserva también los

efectos estimulantes típicos de la

anfetamina, que refuerzan los ya

descritos, produciendo sensación de

gran energía física, con aumento de la

actividad motora (hiperactividad),

bienestar general y euforia. El subidón

se manifiesta en forma de oleadas con

sensaciones de euforia, alegría, felici-

dad, empatía in crescendo y de una sen-

sación de ligereza mental y física116. El

MDMA puro suele tener una bajada

muy tranquila y facilidad para dormir,

sin embargo las pastillas de clubbing son

las que van acompañadas de estados

depresivos, debido a que la liberación

de serotonina inducida pudo haber de-

pletado (vaciado) temporalmente las

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

35

vesículas que alojan los neurotransmiso-

res de reserva. En ese caso, se

produciría una caída brusca en los

niveles extracelulares de serotonina,

que tardaría varios días en

recomponerse. Para evitar estas

consecuencias es frecuente la

administración de un antidepresivo

Inhibidor de la Recaptación de la

Serotonina (IRS), sobre todo la

fluoxetina, unas 6 horas después de la

ingesta de MDMA. Evidencia científica

preliminar (en ratas) asocia esta práctica

con una acción neuroprotectora, pro-

filáctica contra la posible toxicidad del

MDMA153. Esto es particularmente pre-

dicado por algunas agrupaciones civiles

dedicadas a promover políticas de re-

ducción de daños71.

HenryContrariamente a lo que sugiere

las creencias populares, el MDMA no

tiene efectos afrodisíacos, alguien la

llamó sensual mas no sexual. Su utilidad

para facilitar la introspección con un

temor reducido ha sido comprobada en

algunos contextos terapéuticos,

llevando a la FDA (Food and Drug Ad-

ministration) estadounidense a aprobar

en el 2001 su experimentación en

pacientes con trastorno de estrés

postraumático22.

En el 2004, la DEA (Drug Enforcement

Agency) otorgó las primeras licencias

para adquirir esta droga legalmente. Los

representantes de la clase médica que

participan en estos ensayos, se han ma-

nifestado en favor de modificar el status

legal del MDMA, proponiendo que sea

retirado de la Lista I e incluido en la Lista

III de psicotrópicos. El MDMA atraviesa

la barrera hematoencefálica del cere-

bro, pero además la daña, como de-

muestran los experimentos de Brian

Yamamoto (Universidad de Boston) con

ratas. Al parecer hace que la barrera se

vuelva más permeable y por tanto más

vulnerable a agentes patógenos57.

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

36

Peligros para la salud:

Síntomas físicos y psicológicos. Muchos

de los problemas que enfrentan los

usuarios de MDMA son similares a los

producidos por el uso de anfetaminas y

cocaína123. Estos son:

• Dificultades psicológicas,

incluidas confusión, depresión,

problemas para dormir, ansias de usar la

droga, ansiedad severa y paranoia du-

rante el uso y a veces semanas después

de usar la MDMA (en algunos casos se

han informado episodios psicóticos) 133.

• Síntomas físicos tales como

tensión muscular, apretar los dientes

involuntariamente, náuseas, visión

borrosa, movimientos oculares rápidos,

desmayo y escalofríos o sudores.

• Aumentos en la frecuencia

cardíaca y la tensión arterial, lo cual

representa un riesgo particular para

personas con enfermedad circulatoria o

cardíaca.

Efectos a largo plazo. Investigaciones

recientes relacionan el uso de la MDMA

con el deterioro a largo plazo de las

partes del cerebro que son cruciales pa-

ra el pensamiento y la memoria44. Se

estima que la droga causa daños a las

neuronas que utilizan la sustancia

química serotonina para comunicarse

con otras neuronas. La MDMA también

está relacionada en su estructura

química y sus efectos con la

metanfetamina, la cual ha demostrado

producir la degeneración de las

neuronas que con tratamiento con el

neurotransmisor dopamina. El deterioro

de las neuronas que con tratamiento

con dopamina es la causa subyacente

de los trastornos motores presentes en

la enfermedad de Parkinson. Los

síntomas de esta enfermedad

comienzan con falta de coordinación y

temblores y con el tiempo pueden

resultar en una forma de parálisis22.

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

37

Modos de empleo:

El MDMA se puede conseguir en forma

de polvo cristalino, y en caso de ser de

alta calidad, en cristales, de ahí que se le

llame también crystal. También se

comercializa en pastillas que suelen

llevar compactantes y aglutinantes.

Cápsulas de MDMA.

Se ingieren normalmente en dosis pe-

queñas, con la intención de controlar el

efecto, lo que es difícil por el descono-

cimiento de la pureza y su contenido en

MDMA. La dosis normal para un adulto

suele ser 100mg a 120mg y suele inge-

rirse o bien en cápsulas (denominadas

"bombitas" con una cubierta superior de

papel de arroz), comprimidas en pasti-

llas e incluso de forma directa. También

se esnifa en rayas siendo sus efectos

más severos y dañinos al tomar contac-

to más directamente con el cerebro y es

molesto por los pequeños cristales que

contiene. El problema con las pastillas

de club que se le suele atribuir al MDMA

es el componente de las mismas, suelen

tener como base de la pastilla anfetami-

nas y otras drogas como MDA, DXM,

heroína, ketamina u otras sustancias

casi todas ellas alucinógenas que sí ge-

neran adicción física y que además

combinadas con el MDMA pueden llegar

a ser altamente peligrosas. Estas mez-

clas realizadas en las pastillas se pueden

deber a varios motivos, entre ellos el

hecho de que puede ser más "divertido"

el que la pastilla contenga algún alu-

cinógeno o energizante que permita

estar en una fase durante mucho tiem-

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

38

po. Otra posibilidad es el conocimiento

de los fabricantes de esta droga de que

el MDMA no puede llegar a causar adic-

ción física debido a la tolerancia que el

cuerpo desarrolla, lo que llevaría a una

baja en el consumo111.

El cuerpo humano desarrolla tolerancia

a esta droga, por lo que el consumo

continuo de la misma lleva a la paulatina

ausencia de efectos, debido a esto una

persona que ingiere la droga semanal-

mente, probablemente después de uno

o dos meses no sienta los efectos de la

misma o estos sean casi imperceptibles.

Cabe aclarar que el uso más común de

la droga es netamente lúdico funda-

mentalmente en fiestas y discotecas, sin

embargo investigaciones hechas por

psicólogos y psiquiatras demuestran que

esta droga tiene un potencial altísimo

como tratamiento de ciertos desórde-

nes mentales como paranoía, fóbias,

esquizofrenia, etc. e incluso en el trata-

miento de parejas en crisis, debido a las

cualidades empáticas de la droga que

generan una gran apertura al diálogo67.

Sobredosis:

En casos de toxicidad por sobredosis,

puede producirse hipertermia y síndro-

me serotoninérgico. Existe riesgo de

deshidratación en usuarios con alta acti-

vidad física que olvidan beber agua, da-

do que la droga puede inhibir la percep-

ción del cansancio y la sed, siendo ésta

hasta ahora la única causa de muerte

derivada debido a los consumidores que

olvidan hidratarse y ventilar el cuerpo,

menospreciando la importancia de esto

debido a los efectos eufóricos y de

bienestar de la droga. En contraste,

también han sido registrados casos de

hiponatremia (deficiencia de sodio) por

exceso de agua. Pero quizás el mayor

peligro proviene del hecho de que otras

drogas, más peligrosas (como PMA,

DXM o metanfetamina), se añaden a las

pastillas de éxtasis o muchas veces sim-

plemente se venden como tales. Por

otra parte, la ingestión de alcohol agra-

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Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

39

va los riesgos potenciales ya que el

alcohol colabora con la deshidrata-

ción. No hay información disponible

sobre los efectos de la droga a largo

plazo en humanos, debido a que el

status legal de esta sustancia impedía

tales investigaciones hasta el 2001,

cuando se autorizaron los ensayos

clínicos antes mencionados113.

HEROINA

Descripción:

La morfina es un alcaloide fenantreno

del opio siendo preparado el sulfato

por neutralización con ácido sulfúrico.

La morfina, es una sustancia contro-

lada, opioide agonista utilizada en

premedicación, anestesia, analgesia,

tratamiento del dolor asociado a la

isquemia miocárdica y para la disnea

asociada al fracaso ventricular iz-

quierdo agudo y edema pulmonar. La

morfina es un polvo blanco, cristalino,

Datos de la heroina

Nombre (IUPAC) sistemático

(5α,6α)-7,8-didehydro-4,5-epoxy-

17-methylmorphinan-3,6-diol diacetate (ester)

Identificadores

Número CAS 561-27-3

Código ATC N02AA09

Pub Chem 3592

Datos químicos

Fórmula C21H23NO5

Peso mol. 369.41

Fármacocinética

Biodisponibilidad <35%

Unión proteica 0% (morfina metabo-

lite 35%)

Metabolismo hepatico

Vida media 2-3 hours

Excreción 90% renal como

glucuronides, rest

biliar

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

40

inodoro y soluble en agua. La estructura

molecular es (C17H19NO3)2 H2SO4

5H20 con un peso molecular 758.83. El

sulfato de morfina es quimicamente

designado como sulfato 7,-8-Didehidro-

4, 5-epoxi-17-metill-(5a,6a)morfinan-

3,6-diol sulfato (2:1)(sal), pentahidrato,

con la siguiente fórmula estructural:

Estructura química de la heroína

La heroína es una droga altamente adic-

tiva e ilegal en la mayoría de los países

del mundo. Pertenece a los opiáceos, de

los cuales es el más abusado y el de ac-

ción más rápida. La heroína se prepara a

partir de la morfina, sustancia que se

encuentra naturalmente en los conduc-

tos lactirífaros de la cápsula de la Papa-

ver somniferum o adormidera, desde

donde se extrae mediante cortes super-

ficiales por donde supura látex (opio).

Generalmente se vende en forma de

polvo blanco o marrón, o como una sus-

tancia negra pegajosa conocida en las

calles como "goma" o "alquitrán ne-

gro"39,40.

Origen:

En 1883, el quimico alemán Heinrich

Dreser, aisló un opiáceo nuevo gracias a

la acetilación del clorhidrato de morfina,

obteniendo diacetilmorfina, que es el

nombre científico de la heroína. Resulta

interesante que en principio se pensó en

la heroína como un sustituto de la mor-

fina, la cual producía gran adicción, y

por ese motivo se eligió su nombre. En

poco tiempo se demostró que la adic-

ción generada por utilizar este com-

puesto era mucho más intensa en com-

paración con la morfina51.

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

41

Etimología:

La acción de esta nueva droga sobre las

vías respiratorias era tal que se creyó

que había sido vencida definitivamente

la tuberculosis, por lo que Bayer registró

la marca comercial Heroin (Heroína).

Este nombre, bajo el que este nuevo

producto sintético ha pasado a hacerse

conocido, se creó combinando el

"Heros" latín (héroe) y el sufijo medici-

nal "-in" (como en koffein / cafeína),

creando a la vez la conotación muy ven-

dible de la "Femme Heroine". La heroína

sin refinar se conoce como brown sugar

(azúcar moreno); y ya refinada como

horse (caballo) o sencillamente abrevia-

da como H60.

Mecanismos de Acción:

El preciso mecanismo de acción de la

morfina y otros opioides no es conocido,

aunque se cree que esta relacionado

con la existencia de receptores estéreo

específicos opioides presinápticos y

postsinápticos en el sistema nervioso

central (SNC) y otros tejidos. Los opioi-

des imitan la acción de las endorfinas

produciendo una inhibición de la activi-

dad de la adenilciclasa. Esto se manifies-

ta por una hiperpolarización neuronal

con supresión de la descarga esponta-

nea y respuestas evocadas. Los opioides

también interfireren en el transporte

transmembrana de iones calcio y actua

en la membrana presináptica interfe-

riendo con la liberación del neurotrans-

misor22.

Farmacodinamia, Farmacocinética y Me-

tabolismo95

Farmacodinamia:

El efecto primario de la morfina se ma-

nifiesta en el SNC y órganos que contie-

nen músculo liso. La morfina produce

analgesia, euforia, sedación, disminu-

ción de la capacidad de concentración,

náuseas, sensación de calor en el cuer-

po, pesadez en los miembros, sequedad

de boca, y prurito. La morfina es impro-

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

42

bable que produzca depresión miocárdi-

ca o hipotensión directamente. Sin em-

bargo, la reducción del tono del sistema

nervioso simpático en las venas periféri-

cas produce un estancamiento con re-

ducción del retorno venoso, gasto car-

diaco y presión arterial. La morfina pue-

de reducir la presión arterial por inducir

histamino liberación, o bradicardia por

aumento de la actividad del vago. La

morfina puede también tener un efecto

directo depresor sobre el nodo sinusal y

actuar disminuyendo la conducción por

el nodo aurículo-ventricular. La morfina

produce depresión respiratoria dosis

dependiente principalmente mediante

un efecto depresor directo sobre el cen-

tro de la respiración en el cerebro. Este

se caracteriza por disminución de la res-

puesta al dióxido de carbono aumento

de la PaCO2 basal y desplazamiento de

la curva de respuesta al CO2 a la dere-

cha. La morfina disminuye el flujo san-

guíneo cerebral y la presión intracraneal

con ventilación controlada. La morfina

puede causar rigidez muscular, espe-

cialmente en los músculos abdominales

y torácicos, cuando es administrada a

grandes dosis. La morfina puede causar

espasmo del tracto biliar y aumentar las

presiones del conducto biliar común que

puede asociarse a distress epigástrico o

cólico biliar. El estreñimiento puede

acompañar a la terapia con morfina se-

cundaria a la reducción de las contrac-

ciones peristálticas de los intestinos y

aumento del tono del esfinter pilórico,

válvula ileocecal y esfinter anal. La mor-

fina puede causar vómitos y náuseas por

estimulación directa de la zona trigger

quimioreceptora en el suelo del cuarto

ventrículo, por aumento de las secre-

ciones gastrointestinales y disminución

de la propulsión intestinal. La morfina

aumenta el tono y la actividad peristálti-

ca del ureter. La morfina deprime el re-

flejo de la tos por efecto directo sobre la

médula16.

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Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

43

Farmacocinética y Metabolismo:

La morfina es administrado normalmen-

te por vía intravenosa en el periodo pe-

rioperatorio con una iniciación del efec-

to de menos de un minuto con un efec-

to analgésico pico que aparece a los 20

minutos de la inyección. La morfina in-

tramuscular tiene una iniciación del

efecto de unos 15-30 minutos, y un

efecto pico de 45-90 minutos. La absor-

ción de la morfina del tracto gastroin-

testinal no es fiable, sin embargo, esto

no excluye su uso con dosis más grandes

para lograr niveles analgésicos. La dura-

ción de acción es de unas 4 horas. Los

niveles plasmáticos de morfina no se

correlacionan con la actividad farma-

cológica, reflejando una demora en la

penetración de la morfina a través de la

barrera hematoencefálica. La pobre pe-

netración de la morfina en el SNC es por

su relativamente pobre solubilidad en

lípidos (1), 90% de ionización a pH fi-

siológico , unión a las proteinas, y con-

jugación con el ácido glucurónico .

La morfina es metabolizada primaria-

mente por conjugación con el ácido glu-

curónico en el hígado y otro lugares,

especialmente en riñones. Alrededor del

5-10% de la morfina aparece como mor-

fina-6-glucuronido, un metabolito activo

que produce analgesia y depresión de la

ventilación acumulándose en pacientes

con insuficiencia o fallo renal.

La vida media de eliminación es de 114

minutos para la morfina y de 173 minu-

tos para la morfina-3-glucuronido, un

inactivo y predominante metabolito.

Indicaciones y uso:

La morfina está indicada para el control

del dolor severo y se usa en premedica-

ción, analgesia, anestesia, tratamiento

del dolor asociado con isquemia

miocárdica, y/o disnea asociada con el

fallo ventricular izquierdo agudo y ede-

ma pulmonar145.

Precauciones: Puede aparecer depre-

sión neonatal debido a que la placenta

no ofrece dificultad al paso de los opioi-

des por la placenta. El uso crónico en la

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

44

madre de opioides puede producir adi-

ción intrauterina. La morfina debe ser

utilizada con precaución en pacientes

con traumatismo craneoencefálico o

patología intracraneal. La morfina pue-

de oscurecer el curso clínico de estos

pacientes y la depresión ventilatoria

puede conducir a un aumento de la pre-

sión intracraneal.

Contraindicaciones, Reacciones Adver-

sas, Interacción de Drogas

Contraindicaciones:

La morfina está contraindicada en pa-

cientes con hipersensibilidad a la droga,

en pacientes con depresión respiratoria

en ausencia de equipo de resucitación y

en pacientes con asma agudo o severo.

La respuesta anafiláctica a la morfina es

rara. Más normalmente se ve una libe-

ración de histamina por los mastocitos.

Reacciones Adversas

Cardiovascular:

Hipotensión, hiper-

tensión, bradicardia,

y arritmias

Pulmonar:

Broncoespasmo,

probablemente debi-

do a efecto directo

sobre el músculo liso

bronquial

SNC:

Visión borrosa,

síncope, euforia, dis-

foria, y miosis

Gastrointestinal:

Espasmo del tracto

biliar, estreñimiento,

náuseas y vómitos,

retraso del vaciado

gástrico

Las reacciones alérgicas incluyen prurito

y urticaria.

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

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45

Interacción de Drogas

La depresión ventilatoria puede ser po-

tenciada por anfetaminas, fenotiazinas,

antidepresivos tricíclicos, e inhibidores

de la monoamino oxidasa. Las drogas

simpaticomiméticas pueden aumentarla

analgesia producida por los opioides.

Los efectos sobre el sistema nervioso

central y respiratorio son potenciados

por el alcohol, sedantes, narcóticos, an-

tihistamínicos, fenotiazinas, butirofeno-

nas, inhibidores de la aminooxidasa,

antidepresivos tricíclicos y cimetidi-

na5,113.

Dosis y Administración.

Intravenosa

2-15 mg (0.05-0.2

mg/kg en pacientes

pediátricos; máximo

15 mg); Induccción

dosis de 1 mg/kg IV.

Oral:

10-30 mg cada 4 horas

si es necesario; libera-

ción lenta, 15-60 mg

cada 8-12 horas.

Intramuscular/

subcutanea:

2.5-20 mg (0.05-0.2

mg/kg en pacientes

pediátricos; máximo

15 mg).

Rectal: 10-20 mg cada 4

horas.

Intratecal: Adultos, 0.2 a 1.0 mg.

Epidural: Adultos, 3 a 5 mg.

Vías de Administración de la morfina

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46

La morfina puede utilizarse por vía oral,

intramuscular, intravenosa, subcutanea,

rectal o como analgésico intratecal o

epidural. Las dosis deben ser individuali-

zadas tomando en cuenta la edad, peso,

estado físico, medicaciones, patología

asociada, tipo de anestesia utilizado, y

procedimiento quirúrgico21.

Formas de adulteración:

Como todos los opiáceos de venta ilícita,

la heroína puede adulterarse con quini-

na, lactosa, azúcar, bórax y otros fárma-

cos depresores del SNC como barbitúri-

cos y sedantes o contaminarse con bac-

terias, virus, hongos o partículas. Se han

reportado algunos casos de sustitución

total de heroína por pentazocina. La

droga llamada Speedball no es más que

cocaína mezclada con heroína. Diversas

leyendas urbanas dicen que la heroína

de la calle también puede ser cortada

con estricnina u otros venenos, extre-

mos que no están precisamente docu-

mentados.

Heroína asiática de alta calidad

Ya que los consumidores de heroína no

saben la fuerza real de la droga o su

verdadero contenido, están en riesgo de

sufrir una sobredosis o incluso de morir.

Consumo:

La heroína se administra generalmente

endovenosa, aunque también es habi-

tual la administración por vía nasal o

fumada. En este último caso se suele

realizar utilizando papel de plata. Los

efectos de esta droga comienzan entre

los 3 y los 5 minutos después de haber

sido inyectada o inhalada y duran entre

tres y cuatro horas. Al llegar al cerebro

la heroína ocupa los receptores opioi-

des, principalmente los receptores que

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INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

47

funcionan en el área de la analgesia y

deprimen la respiración; y los recepto-

res delta que, según teorías recientes,

pueden estar más vinculados con el es-

tado anímico que con la analgesia. Esta

droga destruye unos neurotransmisores

llamados endorfinas que generan sensa-

ciones, provocando discapacidad cere-

bral bloqueando todas la arterias y pue-

de llegar a ser una muerte cerebral.

Usos terapéuticos:

A partir de su aparición, la heroína se

utilizó principalmente para tratar la tu-

berculosis por su capacidad para supri-

mir el reflejo de la tos. Pronto se vio que

su efecto anestésico no era mayor que

el de la morfina, pero era más activa por

lo que podía utilizarse en dosis menores

logrando el mismo efecto con las consi-

guientes ventajas a nivel de acumula-

ción en los tejidos. Sin embargo, algo

más la diferenciaba de la morfina: cier-

tos efectos estimulantes y no sólo

analgésicos, por lo que durante mucho

tiempo se recomendó como cura para el

hábito producido por la morfina. Ac-

tualmente el clorhidrato de heroína se

utiliza muy poco ya sólo como antitusí-

geno en casos severos. Además el efec-

to de la heroína es más potente que el

de la morfina, pero menos duradero.

Los usuarios que comparten las agujas

(práctica que poco a poco está cayendo

en desuso) u otros materiales de inyec-

ción corren el riesgo de contagiarse con

el VIH, algunas hepatitis y cualquier en-

fermedad infecciosa. En España, un 59%

de los afectados por el virus del sida, se

infectaron por vía parenteral (inyectada)

entre 1981 y 1998.

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48

EL HIGADO

El hígado es la glándula más voluminosa

del cuerpo y una de las más importantes

en cuanto a la actividad metabólica del

organismo. Desempeña funciones úni-

cas y vitales como la síntesis de proteí-

nas (asimilación), elaboración de la bilis

(necesaria para la digestión y absorción

de las grasas), función desintoxicante,

almacén de vitaminas, glucógeno, etc.

Además, es el responsable de eliminar

de la sangre las sustancias que pueden

resultar nocivas para el organismo,

transformándolas en otras inocuas87.

Anatomía hepática:

El hígado está localizado en la región del

hipocondrio derecho del abdomen

(normalmente no sobrepasa el límite del

reborde costal), llenando el espacio de

la cúpula diafragmática, donde puede

alcanzar hasta la quinta costilla, y se

relaciona con el corazón a través del

centro frénico, a la izquierda de la cava

inferior. Normalmente es blando y de-

presible, y está recubierto por una

cápsula fibrosa. Sobre esta cápsula fi-

brosa se aplica el peritoneo en la mayor

parte de la superficie del hígado (excep-

to en el área desnuda del hígado). El

bilis producido por el hígado actúa en el

intestino delgado.

Aspectos generales

• Forma: se compara con la mitad

superior del ovoide horizontal, de gran

extremo derecho, alargado

transversalmente.

• Coloración: rojo pardo.

• Consistencia: firme. Está

constituido por un parénquima,

rodeado por una fina cápsula fibrosa,

llamada cápsula de Glisson.

• Longitud: en el adulto es de

aproximadamente 28cm por 15 cm en

sentido antero-posterior y 8 cm de

espesor a nivel del lóbulo derecho.

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49

• Peso aproximado: en el cadáver

es de 1500 g y en el ser vivo pesa 2400 g

aproximadamente. Esta diferencia se

debe a que en vida está lleno de sangre.

Está dividido en cuatro lóbulos:

• Lóbulo derecho, situado a la

derecha del ligamento falciforme.

• Lóbulo izquierdo, extendido

sobre el estómago, situado a la

izquierda del ligamento falciforme

• Lóbulo cuadrado, visible

solamente en la cara inferior del hígado.

Se encuentra limitado por el surco um-

bilical a la izquierda, el lecho vesicular a

la derecha y el híleo del hígado por

detrás.

• Lóbulo de Spigel, situado entre

el borde posterior del híleo por delante,

la vena cava por detrás.

Clínicamente, y quirúrgicamente sobre

todo, se emplea el concepto de segmen-

to hepático, basándose en las divisiones

arteriales y en el hecho de que haya po-

cas anastomosis entre segmentos. Si

miramos por la cara anterosuperior del

hígado podemos distinguir de derecha a

izquierda un segmento posterior, en el

borde del lado derecho, seguido de un

segmento anterior, un segmento medial

y un segmento lateral que forma el lími-

te izquierdo102.

Cara superior del hígado.

El hígado se relaciona principalmente

con estructuras situadas al lado derecho

del abdomen, muchas de las cuales de-

jan una impresión en la cara inferior del

lóbulo derecho del hígado. Así tenemos

de atrás a delante la impresión cólica, la

impresión duodenal, pegada a la fosa

cística, y la impresión renal, menos mar-

cada. En la cara inferior del lóbulo iz-

quierdo están la impresión gástrica y la

escotadura del esófago en el borde pos-

terior. Las relaciones con el diafragma y

con el corazón completan los órganos

vecinos al hígado.

La base del hígado da entrada al hilio

hepático, que no es sino la zona de en-

trada del omento (epiplón) menor con la

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50

vena porta, la arteria hepática y la salida

del conducto hepático. El omento

(epiplón) menor (fijado en una promi-

nencia de la cara inferior denominada

tubérculo omental) reviste el fondo de

los surcos de la base del hígado (surco

del ligamento venoso, surco del liga-

mento redondo) y alcanza el borde pos-

terior de la cara inferior, donde el peri-

toneo que lo recubre pasa a revestir el

diafragma y la pared posterior forman-

do el ligamento hepatorrenal. Por de-

lante el peritoneo reviste la cara dia-

fragmática hasta su límite superior,

donde salta a revestir la cara abdominal

del diafragma. Entre los dos repliegues

de peritoneo que saltan de la superficie

del hígado al diafragma queda com-

prendida la cara desnuda del hígado,

zona en la que el peritoneo no recubre

la cápsula hepática. Por esta zona la ca-

va inferior se relaciona con el hígado y

recibe las venas hepáticas.

Cara inferior del hígado:

En la cara diafragmática se encuentra el

ligamento falciforme, el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical. Por su

borde libre corre el ligamento redondo

del hígado (restos de la vena umbilical

embrionaria). Este resto de la vena um-

bilical se une a las venas subcutáneas

periumbilicales que irradian desde el

ombligo, las cuales drenan en la vena

ilíaca externa y finalmente en la cava

inferior. En casos patológicos con hiper-

tensión portal estas venas se dilatan

dando lugar al fenómeno de la cabeza

de medusa.

El ligamento falciforme puede ser consi-

derado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porción no desarrollada

del septum transversum por la invasión

embrionaria del brote duodenal) que se

extiende por el mesogastrio ventral y

que contribuye a la formación del híga-

do. Este ligamento, al llegar a la parte

posterior de la cara diafragmática del

hígado se divide en dos hojas, dando

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Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

51

lugar al ligamento coronario (límite su-

perior del área desnuda del hígado).

Cada una de estas hojas se dirige hacia

cada uno de los bordes derecho e iz-

quierdo del hígado, en donde se une a la

hoja peritoneal de la cara visceral del

hígado que se refleja sobre el diafragma,

formando los ligamentos triangulares

derecho e izquierdo (éste último más

definido que el derecho).

La estructura del hígado va a seguir es-

trechamente las divisiones de la vena

porta. Tras la división en ramos segmen-

tarios, las ramas de la vena porta,

acompañadas de las de la arteria hepá-

tica y de las divisiones de los conductos

hepáticos, se encuentran juntos en el

espacio porta (vena interlobulillar, arte-

ria interlobulillar y conductillos interlo-

bulillares).

Circulación sanguínea del hígado:

La circulación hepática es de carácter

centrípeta y está formada por el sistema

porta y la arteria hepática. El sistema

porta constituye el 70*75% del flujo

sanguíneo (15 ml/min) y contiene san-

gre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y

bazo. La circulación general depende de

la arteria hepática, rama del tronco cel-

íaco, que contiene la sangre oxigenada

(irrigación nutricia) 93,94.

Cada espacio porta se encuentra en la

confluencia de los lobulillos hepáticos,

que son formaciones más o menos

hexagonales de células hepáticas y que

posee en el centro la vena centrolobuli-

llar. La confluencia de venas centrolobu-

lillares da lugar a las venas hepáticas,

que finalmente drenan en la vena cava

inferior. Por lo tanto, la sangre rica en

nutrientes de la absorción intestinal

(vena porta) y en oxígeno (arteria hepá-

tica) se mezcla en los sinusoides hepáti-

cos (espacios entre hepatocitos), para

elaborar los metabólicamente y sinteri-

zar las sales biliares. Fenómenos infec-

ciosos, tóxicos, inflamatorios, etc., des-

estructuran los lobulillos hepáticos y los

espacios porta, conduciendo a la hiper-

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52

tensión portal porque este flujo vascular

está obstaculizado143.

Según los últimos estudios que se han

desarrollado sobre los componentes del

hígado se ha encontrado que éste tiene

la capacidad de producir gastrina y ayu-

dar al estómago en el vaciamiento

gástrico, ya que posee un citocromo

llamado AS*57. Este órgano productor

es el que excreta a la urea

El drenaje linfático del hígado corre a

cargo de vasos que desembocan hacia la

cava inferior o hacia los ganglios hepáti-

cos que siguen el recorrido inverso de la

arteria hepática. ...

Inervación del hígado

El hígado recibe sus nervios del plexo

solar, del neumogástrico izquierdo y

derecho y también del frénico derecho

por medio del plexo diafragmático. El

aporte nervioso también le viene del

plexo celíaco que inerva al hepático,

mezcla de fibras simpáticas y para-

simpáticas. Estos nervios llegan al híga-

do junto a la arteria hepática85,171

Fisiología del hígado:

El hígado desempeña múltiples funcio-

nes en el organismo como son41 (David):

• Producción de bilis: el hígado

excreta la bilis a la vía biliar y de

allí al duodeno. La bilis es

necesaria para la digestión de

los alimentos.

• Metabolismo de los carbo-

hidratos:

o Gluconeogénesis: es la

formación de glucosa a partir de

ciertos aminoácidos, lactato y

glicerol.

o Glucogenólisis: es la

formación de glucosa a partir del

glucógeno.

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53

o Glucogénesis: es la

síntesis de glucógeno a partir de

glucosa.

• Eliminación de insulina y de

otras hormonas.

• Metabolismo de los lípidos:

o Síntesis de colesterol.

o Producción de

triglicéridos.

• Síntesis de proteínas: como la

albúmina, lipoproteínas.

• Síntesis de factores de

coagulación como el fibrinógeno

(I), protrombina (II), globulina

aceleradora (V), proconvertina

(VII), Factor Xmas (IX) y factor

Stuart-Prower (X).

• Detoxificación de la sangre:

o Neutralización de

toxinas, la mayoría de fármacos y

de la hemoglobina.

• Transformación del amonio en

urea.

• Depósito de múltiples

sustancias como:

o glucosa en forma de

glucógeno (un reservorio

importante de aprox. 150 g)

o vitamina B12, hierro,

cobre...

• En el primer trimestre del

embarazo, el hígado es el principal

órgano de producción de glóbulos

rojos en el feto. A partir de la

semana 42 de la gestación, la médula

ósea asume esta función.

Histología hepática:

El tejido hepático es un tejido estable.

Presenta una gran capacidad de regene-

ración en respuesta a estímulos exter-

nos, como lesiones o procesos tumora-

les. Sin embargo las lesiones crónicas

como el alcoholismo e infecciones hepá-

ticas implican una pérdida constante y

prolongada del parénquima sin existir

proliferación compensatoria. Como re-

sultado el parénquima hepático es re-

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54

emplazado por tejido fibroso y acúmu-

los de grasa produciendo así cirrosis103.

Mak El parénquima hepático está for-

mado por61 :

• Lobulillos hepáticos: son

subunidades irregularmente

hexagonales formadas por láminas

fenestradas de hepatocitos que se

disponen en forma radiada en torno a

una vena central o vena centrolobulillar,

ubicada en el centro del lobulillo.

• Espacios porta o tríadas: son

áreas triangulares situados en los

ángulos de los lobulillos hepáticos,

constituidas por un estroma conjuntivo

laxo, que contienen en su interior una

rama de la arteria hepática, una rama de

la vena porta, un capilar linfático y un

conductillo biliar. La bilis producida por

los hepatocitos se vierte en una red de

canalículos dentro de las láminas de

hepatocitos y fluye en forma centrípeta

al lobulillo hacia los conductillos biliares

de los espacios porta.

• Sinusoides hepáticos: son

capilares que se disponen entre las

láminas de hepatocitos y donde

confluyen desde la periferia de los

lobulillos las ramas de la arteria hepática

y vena porta. La sangre fluye desde las

tríadas a la vena central, circulando en

forma centrípeta. La pared de los

sinusoides está formada por una capa

discontinua de células endoteliales

fenestradas que carecen de membrana

basal. En los sinusoides confluyen la

circulación hepática y porta. Estos

drenan su contenido a la vena hepática

central, de ésta a las venas hepáticas

derecha e izquierda y finalmente a la

vena cava inferior.

• Espacio de Disse: es un estrecho

espacio perisinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las

láminas de hepatocitos, ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma

sanguíneo que baña libremente la

superficie de los hepatocitos. En el

espacio de Disse se produce el

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55

intercambio metabólico entre los

hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepática. En este

espacio también se encuentran células

almacenadoras de grasa o células de Ito,

de forma estrellada y función poco

conocida101.

• Células de Küpffer: son

macrófagos fijos pertenecientes al

sistema fagocítico mononuclear que se

encuentran adheridos al endotelio y

emiten sus prolongaciones hacia el

espacio de Disse. Su función es fagocitar

eritrocitos envejecidos y otros

antígenos. Además actúan como células

presentadoras de antígeno.

• Los hepatocitos constituyen

alrededor del 80% de la población

celular del tejido hepático. Son células

poliédricas con 1 ó 2 núcleos esféricos

poliploides y nucléolo prominente.

Presentan el citoplasma acidófilo con

cuerpos basófilos y son muy ricos en

orgánulos. Además en su citoplasma

contienen inclusiones de glucógeno y

grasa. La membrana plasmática de los

hepatocitos presenta un dominio sinus-

oidal con microvellosidades que mira

hacia el espacio de Disse y un dominio

lateral que mira hacia el hepatocito

vecino. Las membranas plasmáticas de

dos hepatocitos contiguos delimitan un

canalículo donde será secretada la bilis.

La presencia de múltiples orgánulos en

el hepatocito se relaciona con sus

múltiples funciones, como son la síntesis

de proteínas (albúmina, fibrinógeno y

lipoproteínas del plasma), el

metabolismo de hidratos de carbono, la

formación de bilis, el catabolismo de

fármacos y tóxicos y el metabolismo de

lípidos, purinas y gluconeogénesis172.

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56

DESCRIPCION ANATOMICA DEL HIGADO

DEL RATON

El hígado en la rata y ratón32,69,

presenta algunas diferencias anatómicas

respecto a otros animales y en relación al

humano.

La mayor parte del hígado se

encuentra en estrecho contacto con el

diafragma, dentro de la caja torácica y se

extiende en sentido ventral a lo largo de

la pared abdominal, sobrepasando las

costillas. La superficie diafragmática es

convexa. La superficie visceral se

encuentra en contacto con el estómago,

la porción descendente del duodeno, la

transversa del colon, el yeyuno y el bazo.

El lóbulo caudado contacta con el riñón

derecho. El esófago pasa dorsalmente

formando una escotadura en el reborde

hepático (impresión esofágica).

El hígado es dividido por

hendiduras profundas en tres lóbulos:

izquierdo, medio y derecho. El lóbulo

izquierdo está formado por un gran

lóbulo lateral situado a la izquierda y que

se une a los demás lóbulos por medio de

los vasos y de tejido intersticial

únicamente, y por otro lóbulo más

pequeño en posición medial, que se

localiza, en su mayor parte, craneal al

anterior. Está separado del lóbulo medio

por una fisura profunda que recibe la

inserción del ligamento falciforme.

La porción supraportal del

estrecho lóbulo intermedio se extiende

cranealmente y hacia la derecha y se

superpone a la parte derecha del hígado.

De su superficie visceral emerge

el lóbulo caudado, que presenta una

forma acabada en punta y se extiende

hacia el dorso y la derecha. Su superficie

dorsal (impresión renal) contacta con la

cara ventral del riñón. Dos procesos

papilares con forma de disco sobresalen a

la izquierda de la porción hepática de la

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57

vena porta. El dorsal se extiende hacia el

lado derecho del esófago a través de la

curvatura menor hacia la superficie

caudal del estómago. El proceso papilar

ventral alcanza la superficie craneal del

estómago. El pequeño lóbulo derecho del

hígado no está dividido. Situado

dorsalmente al lóbulo caudado, también

está el riñón derecho. El hígado

representa el 4,15% del peso corporal.

La vena cava caudal penetra en el

hígado por el margen mediocaudal del

proceso caudado y recibe siete venas

segmentarias antes de abandonar el

hígado por la cara craneodorsal del lóbulo

supraportal. Tres de ellas, que provienen

de la parte izquierdo- ventral del hígado,

convergen para formar un tronco común

que afluye a la vena cava inferior. La

arteria hepática y la vena porta penetran

en el espacio portal hepático

ventralmente respecto al lugar de

entrada de la vena cava y se dividen

siguiendo un patrón similar.

Los conductos biliares, que se

unen de forma parecida, fluyen hacia el

área portal para formar el conducto

hepático. Este es un tubo con una

longitud de 12-45 mm. y de 1 mm. de

diámetro que se cruza dorsalmente con el

comienzo del duodeno. Se desliza entre

los lóbulos del cuerpo del páncreas hasta

la apertura a la luz del duodeno, que está

situada a 7-35 mm. distalmente respecto

del píloro. En su recorrido el conducto

recibe varios conductos hepáticos.

Desemboca en el duodeno formando una

papila de aspecto cónico y 1 mm. de

altura. Tanto la rata como el ratón no

poseen vesícula biliar144.

Los ligamentos del hígado son

muy finos. El epiplon menor se dirige

hacia la superficie visceral caudalmente y

se inserta a lo largo de una línea que se

inclina a través del lóbulo lateral

izquierdo y entre los dos procesos

papilares hacia el espacio portal hepático.

En la cara diafragmática la línea de

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inserción del ligamento falciforme se

extiende desde la fisura que separa los

lóbulos medial izquierdo y medial, hacia

el ligamento coronario que se inserta

alrededor de la desembocadura de la

vena cava inferior. Desde ahí se deslizan

dorsolateralmente las líneas de inserción

de ambos ligamentos triangulares.

DESCRIPCION HISTOLOGICA DEL HIGADO DEL

RATON

La unidad básica estructural del

hígado es el lobulillo hepático, concepto

introducido por Kiernan87. Mide

aproximadamente 1-2 mm. de diámetro y

está constituido por una vena central

rodeado en su periferia por los espacios

porta (en número de 3 ó 4) que contienen

las ramas de la vena porta, la arteria

hepática y el conducto biliar, así como los

vasos linfáticos y nervios.

Entre ambos sistemas vasculares

y de forma radial se extienden las

trabéculas de células hepáticas y los

sinusoides intercelulares.

Rappaport et al144 y la escuela de

Toronto sustituyeron el concepto de

lobulillo, como unidad estructural, por el

de acini, como una unidad estructural y

funcional. Según este concepto, cada

acini está formado por un espacio porta

central con su conducto biliar, su rama

arterial y su rama venosa portal, que

aportan la sangre a los sinusoides,

situándose en la periferia las venas

centrales. Cada acini mide unos 2 mm.

Estos acinis simples se reúnen en un

número de tres para formar acinis

complejos, los cuales a su vez constituyen

el aglomerado de acinis, porción del

parénquima hepático compuesta por 3 ó

4 acinis complejos que rodean un espacio

porta.

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59

Representación esquemática de un acini.

Cada acini está subdividido en

tres zonas. Los hepatocitos en la zona I,

muy próximos a las venas axiales,

corresponden al área periportal del

clásico lobulillo y reciben sangre muy rica

en oxígeno y nutrientes. Es considerada

metabólicamente como la zona más

activa y en ella suceden los fenómenos de

regeneración hepática . Las zonas II y III

son las más periféricas y están alejadas de

los vasos axiales y son más susceptibles a

la anoxia y a algunas formas de lesión por

tóxicos. La zona III corresponde al área de

la zona lobulillar del lobulillo clásico.

Diagrama comparativo del acini hepático con las zonas 1,

2 y 3 del lóbulo hepático (línea punteada). El tracto portal

contiene una vénula portal (v) una arteriola hepática (a) y

el conducto hepático (d). (t): vénula terminal hepática.

En los hepatocitos de la zona I es

mayor el tamaño y el número de

mitocondrias y la actividad de la

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60

fosforilación oxidativa es más intensa,

mientras que en los hepatocitos de la

zona III la glucólisis anaerobia es más

marcada produciéndose una mayor

acumulación del glucógeno.

En la estructura hepática

podemos distinguir tres partes: una

porción mesenquimatosa, compuesta por

el tejido conjuntivo de la cápsula de

Glisson y de los espacios porta, así como

fibras reticulares, etc; y una porción

parenquimatosa, cuyos principales

elementos son las células hepáticas o

hepatocitos y los sinusoides.

ESTRUCTURA DE LOS HEPATOCITOS:

Los hepatocitos constituyen la

unidad funcional elemental del hígado y

representan el 60% de todos sus

elementos celulares, ocupando

aproximadamente el 80% del parénquima

hepático.

Los hepatocitos tienen un núcleo

central y único, que mide unas 12 micras

de diámetro, frecuentemente

pleomórfico y de diferente tamaño

según las zonas, siendo los de mayor

tamaño los de la zona media. Ocupa algo

más del 7% del volumen celular y

presenta uno o más nucleolos.

El núcleo está separado del

citoplasma por una doble membrana con

gran actividad metabólica. La lámina

exterior de la membrana nuclear se

continúa con las laminillas del retículo

endoplásmico. Entre ambas láminas,

externa e interna, existe un espacio

perinuclear de unas 5 milimicras124.

La membrana nuclear está

perforada por un gran número de poros

que comunican y permiten el intercambio

de sustancias entre el nucleoplasma y el

citoplasma

El núcleo contiene ADN como

componente principal, el cual se dispone

en forma de gránulos o cúmulos que

constituyen la cromatina nuclear.

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61

El citoplasma está rodeado de

una membrana de aspecto diferente

según su situación. La cara sinusoidal

presenta unas microvellosidades de unas

0,5 milimicras de longitud que aumenta la

superficie y mantiene una gran capacidad

absortiva y secretora. Estas

microvellosidades delimitan, junto con las

células endoteliales de los sinusoides y las

células de Kupffer, el espacio Disse y por

él transcurren fibras de reticulina de la

trama de sostén de las trabéculas

hepáticas. Las microvellosidades

comunican libremente con el espacio

sinusoidal a través de poros existentes en

el citoplasma de las células endoteliales82.

La superficie canalicular del

hepatocito está también recubierta de

microvellosidades y forma con la unión

de dos hepatocitos adyacentes el canículo

biliar, los cuales drenan en los colangiolos

periportales o dúctulos terminales

(conductos de Hering) que constituyen el

comienzo del sistema biliar72.

Por el contrario, la superficie de

la membrana que linda con células

vecinas es lisa y recta, aunque tiene

excrecencias que encajan con

concavidades de las células adyacentes.

Alrededor de los canículos

biliares, las células que limitan a éstos, se

adhieren unas con otras mediante

desmosomas, barras transversales y

complejos de unión.

Las células hepáticas están

separadas de sus vecinas por un espacio

que mide unos 100 a 200 Armstrongs.

El citoplasma celular contiene

una gran cantidad de organelas y

sistemas de membrana (8) que ocupan

aproximadamente la mitad del volumen

celular y que describimos a continuación:

- El retículo endoplásmatico rugoso (RER)

está formado por un sistema de túbulos

y de vesículas limitadas por membranas

que llevan ribosomas adosados. Estos se

encargan de sintetizar proteínas que son

mandadas a los túbulos y forman

pequeños gránulos que alcanzan el

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62

aparato de Golgi, condensándose y

formándose gránulos coalescentes que

se invaginan hacia el citoplasma con una

envoltura de la membrana del complejo

de Golgi y constituyen gránulos

secretores. En la superficie del retículo

endoplásmico se adsorben muchas

enzimas proteínicas que sintetizan

sustancias o las transportan a través de

las membranas del retículo.

- El retículo endoplámico liso (REL) está

formado por estructuras tubulares y

vesículas carentes de ribosomas. Se

encuentra localizado entre el RER y el

aparato de Golgi. A este nivel se realiza la

conjugación de la bilirrubina. Interviene

en la síntesis de triglicéridos a partir de

acidos grasos libres. Actúa en la síntesis y

degradación del glucógeno. Se encarga

de la detoxicación y transformación de

muchos medicamentos, drogas y

sustancias. Parece jugar un papel no muy

aclarado en la síntesis del colesterol.

Finalmente, parece que también realiza

funciones de transporte de

determinadas sustancias, como puede

ser la glucosa.

- El aparato de Golgi probablemente sea

una parte especializada del retículo

endoplásmico y está compuesta de 3 a 5

cisternas aplanadas, dispuestas

paralelamente, y por vesículas de

diferente tamaño. Suele localizarse

próximo al canículo biliar y a veces al

núcleo. Juega un importante papel en el

almacenamiento de sustancias

secretadas por la célula y en la prepación

temporal de las mismas para su

secreción final. En este sentido participa

en la formación y secreción de bilis y así

se suele observar migraciones del mismo

a la zona del canículo biliar en el

momento de la síntesis de ácidos

biliares.

- Los lisosomas están constituidos por

vesículas de 0,3 a 1 micras o más de

diámetro, rodeadas de membranas y que

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63

contienen enzimas hidrolíticas que

hidrolizan proteinas, glucógeno, ácidos

nucleicos, mucopolisacáridos, etc.

Participan en el secuestro y degradación

de sustancias inútiles y en la eliminación

de células lesionadas. Son capaces de

almacenar pigmentos, ferritina, etc.

Esquema estructural del hepatocito

- Las mitocondrias, en número de 1000 o

más, son corpúsculos de unas 0,3 a 0,75

micras, ovoides o alargadas, cubiertas

por una doble membrana. La membrana

interior emite unas prolongaciones en

forma de hoja que dan lugar a crestas

mitocondriales. Contienen estructuras

cristalinas cargadas de material

enzimático, las cuales proporcionan la

energía necesaria para el metabolismo

celular, a través de los procesos de

fosforilación oxidativa. Son más

numerosas en los hepatocitos de las

zonas centrolobulillares. Son ricas en

fosfolípidos. En ellas se producen las

reacciones del ciclo de Krebs, la beta-

oxidación de ácidos grasos, la biosíntesis

de fosfolípidos y de nucleótidos, etc. 68

- Los microcuerpos, también llamados

peroxisomas, se forman a partir de los

extremos lisos del REL y contienen

peroxidasas. Tienen un tamaño entre 0,3

a 0,5 micras de diámetro.

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

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64

- Los microtubulos y microfilamentos son

estructuras que proporcionan el soporte

citoesquelético, manteniendo la forma

celular. Intervienen en el movimiento de

los materiales intracitoplásmicos.

- Los Gránulos de glúcogeno ocupan gran

parte del volumen de la célula hepática y

adquieren una disposición policíclica en

forma de rosetas.

- Otros compuestos citoplásmicos son:

pigmentos (generalmente lipofucsina)

partículas de naturaleza lipídica, etc.

ESTRUCTURA DE LOS SINUSOIDES:

Constituyen la red vascular

celular, tienen un tamaño de unas 20 a 30

milimicras de diámetro y están

delimitadas por las células endoteliales,

las células de Kupffer y las células del Ito.

Las células endoteliales realizan

funciones de pinocitosos, no de

fagocitosis. Sus prolongaciones celulares

se entrecruzan y forman una red laxa con

numerosos orificios, a través de los cuales

fluye plasma bañando el espacio de Disse.

En la luz del sinusoide están las

células de Kupffer con función

eritrofagocitaria fundamentalmente,

formando parte del sistema retículo-

endotelial. Intervienen en procesos

inmunitarios y forman anticuerpos y

globulinas.

Las células del Ito están en los

espacios Disse y son ricas en RER y

depósitos de grasa. Están relacinados con

los depósitos de vitamina A.

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

65

IRRIGACION HEPATICA

La arteria celiaca es una rama

visceral impar y mediana que nace de la

cara arterial de la arteria aorta

abdominal, porción terminal de este vaso

que recorre el abdomen desde que

emerge por el orificio aórtico

diafragmático hasta la región pubiana

donde se divide en las arterias ilíacas

comunes.

Se localiza entre el peritoneo y la

columna vertebral del animal, a la

izquierda de la vena cava caudal con la

que comparte la adventicia, estando

rodeada de filetes nerviosos, ganglios y

vasos linfáticos, cubierta por las vísceras

abdominales y proyectándose a la

derecha de la curvatura menor.

La región celiaca de la cara

anterior de la arteria aorta, desde el

orificio aórtico del diafragma y por

encima de la arteria mesentérica

superior, la delimitan la curvatura menor

del estómago, el píloro, duodeno, hígado

y los pilares diafragmáticos, y está

cubierta por un doble peritoneo, el

parietal posterior y el epiplon menor

gastrohepático.

La arteria celiaca, tiene una

longitud común corta y un diámetro

menor que el de la arteria mesentérica

superior. Se divide en tres ramas que

llevan el nombre del órgano visceral que

irrigan. Las ramas arteriales están

destinadas a las vísceras del plano

supramesocólico, y son las siguientes:

arteria gástrica izquierda, arteria

hepática y arteria esplénica.

1. La arteria gástrica izquierda es la de

menor calibre con el origen más cefálico

de las tres ramas del tronco común. Se

distingue bien porque tiene un trayecto

particular. Se dirige arriba, a la izquierda y

hacia adelante de una forma

prácticamente vertical hasta llegar a un

punto de la curvatura menor donde se

acoda para luego descender a lo largo de

toda ella irrigándola en toda su longitud,

describiendo una curvatura convexa hacia

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

66

arriba y a la izquierda. Se anastomosa con

la arteria gástrica derecha y con la arteria

gastroepiploica por una rama, pasando

por encima de la pared dorsal del

estómago.

2. La arteria hepática se dirige

hacia la derecha en busca del hilio

hepático, al que alcanza siguiendo el

borde derecho del epiplon menor.

Termina en el hígado donde se

anastomosa con la vena porta hepática.

En su trayecto da origen a la arteria

pilórica y a la arteria gastoduodenal que

da tres ramas, la arteria gástrica derecha,

arteria pancreático-duodenal y arteria

gastroepiploica derecha, que irrigan la

curvatura del estómago, páncreas y

porción cefálica del duodeno y curvatura

mayor respectivamente.

3. La arteria esplénica nace en el

mismo nivel que la arteria hepática,

dirigiéndose hacia la izquierda,

recorriendo todo el estómago hasta

alcanzar el hilio del bazo. Se bifurca en

dos ramas, las arterias esplénicas

izquierda y derecha. Cada una de ellas

emite en el curso de su trayecto ramas

secundarias que irrigan el estómago y el

páncreas.

INERVACION HEPATICA

Los estudios sobre la inervación

hepática adquieren pleno desarrollo en la

década de los 60, tras los estudios de

Sutherland171 y los trabajos publicados

en 1969 por Unguary y Donath179. Ellos

apuntaban que el hígado estaba inervado

por el sistema nervioso autónomo y que

los hepatocitos se encuentran en íntimo

contacto con fibras colinérgicas,

presumiblemente vagales, mientras que

los vasos sólo reciben inervación

simpática143.

La existencia de dos plexos

extrahepáticos, uno anterior, que rodea

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

67

la arteria hepática, y otro posterior,

detrás de la vena porta, fueron descritos

por Karuper85

Las fibras nerviosas

intrahépaticas discurren por los tractos

porta siguiendo las ramificaciones de la

arteria hepática y ambas, fibras

adrenérgicas y colinérgicas, se observan

en la adventicia de las ramas de la arteria

hepática y en menor proporción en la

periferia de las venas portales.

Siguiendo las ramificaciones

vasculares las fibras penetran en el lóbulo

hepático y contactan con las células

hepáticas que están situadas más

próximas al espacio porta. Ya en pleno

parénquima las ramas nerviosas se

ramifican en fibras intralobulillares y

forman un fino plexo, que siguiendo el

tejido conectivo intralobulillar, alcanza a

los conductos biliares, espacio de Disse,

sinusoides, etc. predominando a este

nivel la inervación adrenérgica, que actúa

en la regulación del tronco vascular y del

flujo sanguíneo, mientras que el

parasimpático intervendría en el

metabolismo celular179.

FISIOLOGIA DE LA CIRCULACION HEPATICA

El conocimiento de las relaciones

entre el hígado, su aporte sanguíneo y el

estado homeostático general del

organismo ha sufrido un renacimiento en

las últimas décadas. Sin embargo, la

mayor orientación conceptual en casi

todos los aspectos de nuestro

conocimiento en el papel y regulación de

la circulación hepática ha tenido lugar

más recientemente.

El hígado recibe el 25% del gasto

cardiaco aún cuando sólo constituye el

2,5% del peso corporal total. Las células

parenquimatósas hepáticas son las más

ampliamente perfundidas de todos los

órganos de la economía.

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

68

Como vimos antes, el hígado

recibe su aporte sanguíneo

principalmente de la arteria hepática y de

la vena pota. Sin embargo, en ciertas

situaciones el hígado puede recibir

aportes arteriales de las arterias frénicas.

Los aportes arteriales hepáticos y venosos

portales convergen a la entrada de los

sinusoides hepáticos; dicho aporte es

controlado por los esfínteres de apertura

del músculo liso vascular. En algunas

especies también existen esfínteres de

músculo liso vascular a la salida de los

sinusoides hepáticos, cuya contribución a

la regulación normal de la resistencia

vascular hepática es incierta.

Además de estos conductos principales

de flujo sanguíneo existen conexiones

intrahepáticas presinusoidales entre las

circulaciones arterial hepática y venosa

portal, las cuales pueden seguir dos

patrones por lo menos de anastomosis

directas arterio-portales y conexiones a

través de las redes capilares peribiliares,

por ejemplo, rutas arteriobilio-portales.

Estas conexiones arterioportales

proporcionán vínculos entre dos sistemas

permitiendo a la sangre pasar desde un

sistema aferente arterial de alta presión a

un sistema venoso portal de baja presión,

lo cual permite alguna posible explicación

de algunas interrelaciones funcionales

entre el sistema arterial hepático y

venoso portal.

Sin embargo, los cortocircuitos

no sirven para explicar todas las

interaciones entre los sistemas venoso

portal y arterial hepático y en este

sentido se ha sugerido que los esfínteres

que guardan la entrada a los sinusoides

desde la arteria hepática o la vena porta

presentan ritmicidad cíclica. Así, un

agente presente en circuito aferente

podría acceder a los esfínteres

reguladores de la afluencia sanguínea y,

alterando la ritmicidad antes referida,

alterar la resistencia vascular total.

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Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

69

Los estudios de distribución del

flujo sanguíneo son escasos, pero se cree

que no existen diferencias notables entre

los diferentes lóbulos hepáticos en lo que

se refiere a la proporción de sangre

arterial hepática y venosa portal recibida

por cualquiera de ellos.

Asimismo, la elevación de la

presión venosa, la redución del flujo

venoso portal y la estimulación de los

nervios hepáticos o la infusión de

norepinefrina no da por resultado una

redistribución del flujo sanguíneo en el

hígado.

El flujo sanguíneo portal supone

alrededor del 66% del flujo total y,

aunque el hígado no regula el flujo portal,

sí que regula la presión portal.

El flujo arterial hepático está

regulado por un sistema regulatorio

intrínseco único: la respuesta

amortiguadora arterial hepática, la cual

mantiene constante el flujo sanguíneo

hepático total. El flujo sanguíneo no está

regulado por las demandas metabólicas

del hígado. El sistema amortiguador

(compensador) hepático tambien juega

un papel manteniendo las presiones

intrahepáticas y el volumen hepático. El

volumen sanguíneo hepático se compone

de volúmenes comprimidos y

expandidos. El volumen comprimido

depende de la presión intrahepática y la

distensibilidad (compliance) vascular. El

volumen expandido es el volumen

teóricamente restante en un órgano de

compresión cero. Las presiones y los

flujos sanguíneos no se alterarían si el

volumen expandido no existiese. La

constricción activa de los vasos de

capacitancia da por resultado transformar

el volumen expansivo a volumen

comprimido. Virtualmente la presión

intrahepática es igual a la presión venosa

portal en condiciones basales y está

regulada por los esfinteres venosos

hepáticos. La vasoconstricción hepática

activa puede motivar la contracción de

estos esfínteres y alguna constricción

presinusoidal también. Los esfínteres

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

70

parecen ser pasivamente distensibles y

esta característica sirve para mantener las

presiones intrahepáticas y portales a unos

niveles bastante constantes, de modo

que si disminuye el aflujo, aumenta la

resistencia del esfínter y se previene la

caida de la presión. La presión

intrahepática mantiene la permeabilidad

sinusoidal y permite que todos los

sinusoides sean uniformemente

perfundidos incluso a niveles bastante

bajos. El intercambio de fluidos y solutos

entre la sangre y las circulaciones

parenquimatosas se afecta por la barrera

de circulación sinusoidales. Las

fenestraciones endoteliales tamizan

(criban) algunos componentes

plasmáticos de alto peso molecular como

lipoproteínas y puede tamizar

parcialmente a la albúmina así como a los

múltiples componentes que viajan en la

circulación unidos a la albúmina. Como se

ha dicho antes, la vena porta aporta la

mayor parte de sangre que llega al hígado

y esta tasa de flujo sanguíneo sufre una

amplia variación según las actividades del

organísmo. EL hígado no es capaz de

controlar directamente el flujo venoso

portal. Se sabe que la activación máxima

de las zonas de resistencia intrahepática

producirá un aumento de 2-3 veces en la

presión portal sin alterar el flujo venoso

portal. Así el único control del flujo

sanguíneo en el hígado es debido a la

arteria hepática41.

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

71

LA MORFOMETRIA HEPATICA

La morfometría surgió como un

intento de estudiar objetivamente y

cuantitativamente los cambios

histológicos y citológicos en diversas

situaciones patológicas. De esta manera

se pretende obviar los errores por

comisión y omisión del patólogo que

estudia cierta preparación histológica y

elimina la subjetividad de la evaluación

cualitativa, haciendo que los exámenes

histológicos sean objetivamente

comparables.

De esta forma, la morfometría

hepática se va abriendo camino en la

valoración de la patología de este órgano,

tanto a nivel clínico como experimental,

bien por microscopía óptica como

electrónica193.

Uno de los campos en que la

morfometría hepática ha sido usada es el

de la obstrucción biliar. Así, Jones et al ()

han hallado que en la obstrucción biliar

experimental en la rata existe un

aumento en el número de células del

espacio intersticial, y una disminución en

el tamaño de las mismas, así como una

reducción en el retículo endoplásmico liso

y rugoso. También describen un descenso

en la cantidad del complejo de Golgi y en

el número de mitocondrias y ribosomas.

En este mismo campo, Yamauchi et al193

describen una reducción en el volumen

del parénquima hepático que, además

disminuye proporcionalmente al tiempo

transcurrido de obstrucción. Estos

mismos autores22 describen también un

aumento en el área nuclear y en el índice

mitótico, a la vez que observan una

constancia en el peso del parénquima

hepático, lo que sugiere que la pérdida de

hepatocitos se compensa con la

regeneración de los mismos. También

observan un hinchamiento mitocondrial.

Concluyen que todas estas

modificaciones podrían deberse a un

proceso adaptativo.

El tema de la cirrosis hepática y

sus aspectos morfométricos ha concitado

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

72

la atención de diversos investigadores. En

este sentido, dos parecen ser los

parámetros más estudiados:

1.- El porcentaje de tejido conectivo o de

colágeno hepático en animales

experimentales, pero también en

clínica.

2.- El número total de hepatocitos a

nivel experimental o clínico.

La validez del método

morfométrico ha sido probada a nivel

experimental por Buschmann y Ryoo25

quienes informan que los cambios

sufridos por las estructuras

parenquimatosas se correlacionaron en

buen grado con el desarrollo de fibrosis

hepática, lo cual consistió en un aumento

en el tamaño nuclear, citoplásmico y

mitocondrial. Aparentemente los cambios

adaptativos citoplásmicos se

correlacionaron perfectamente bien con

la fibrosis. Estos mismos autores25

analizan biopsias de pacientes con cirrosis

alcohólica hepática con el fin de valorar

los datos morfométricos diagnósticos y

pronósticos de la cirrosis humana. En este

mismo campo de la lesión alcohólica

hepática la morfometría ha sido

empleada para valorar la incidencia del

estrés en esta enfermedad, hallando que

dicho factor es un factor agravante. Mak

y Lieber103 describen el cambio en

porcentaje de linfocitos a células

transicionales en la enfermedad hepática

alcohólica.

La morfometría se ha empleado

para valorar los efectos de diversas

drogas y sustancias sobre el hígado. Así,

Romert y Mathiessen150 han valorado

experimentalmente los efectos del etanol

sobre el hígado. Por otra parte, Hall et al

han descrito los efectos del metotrexate

sobre la cantidad de colágeno hepático.

Sorense ha evaluado el efecto a nivel

experimental de la indometacina en el

hígado. También la morfometría se ha

empleado para dilucidar los efectos

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

73

hepatoprotectores de algunas sustancias

tales como cyanidanol183. A nivel clínico,

Portmann et al137, al estudiar biopsias de

hígado tras sobredosis de paracetamol

encuentran un volumen de hepatocitos

inferior al 40% en las biopsia realizadas

dentro de los diez días siguientes a la

sobredosis de los pacientes que murieron

por esta causa. Paralelamente, Lange-

Brock el al92 al estudiar pacientes con

insuficiencia hepática encuentran una

gran reducción en el porcentaje de

parénquima hepático (normal 85±5%) en

los pacientes que mueren de esta

enfermedad pero dicha reducción es

menor en pacientes que mueren de

sepsis, edema cerebral o hemorragia que

en los que la muerte es debida

únicamente a insuficiencia hepática.

Un extenso capítulo y de singular

importancia es el de la morfometría en

las neoplasias hepáticas. EL diagnóstico

precoz del cáncer hepático ha sido

abordado por Gianinni et al62, quienes

han intentado en sus estudios identificar

y diferenciar por métodos morfométricos

a las células precancerosas mediante

estudios del factor de forma nuclear y

citoplásmico. Sin embargo, concluyen que

la relación núcleo/citoplasma no es

distinta en células normales que en

precancerosas y que la única diferencia

entre ellas es un menor tamaño de las

células preneoplásicas. Por otra parte,

Enzmann y Bannasch22 tras administrar

en ratas N-nitrosomorfolina, un agente

carcinogenético, estudian, entre otros

parámetros, el tamaño nuclear y la

relación núcleo/citoplasma en los

hepatocitos de las zonas periportales y

perivenosa. Encuentran un aumento del

citoplasma y núcleo de las dos zonas.

Estos cambios regresan en los

hepatocitos de la zona periportal y

persisten en los hepatocitos de la zona

perivenosa.

Otro apartado de singular

importancia dentro del diagnóstico de las

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

74

neoplasias hepáticas lo constituye el

diagnóstico diferencial entre éstas y otras

enfermedades. Así, Iwasaki et al22,

emplean la medición de área, diámetro

máximo y factor de forma de los

pseudolóbulos en pacientes cirróticos

para diferenciarlos de las neoplasias

hepáticas. Nagato et al119, describen que

el tamaño celular medio y la relación

núcleo/citoplásmica fueron los

parámetros más útiles para distinguir

entre el carcinoma hepatocelular y

microtrabecular y la cirrosis. En este

sentido, los trabajos de Zeppa et al197,

emplean las mediciones de área,

perímetro y diámetro máximo nucleares

para distinguir entre cirrosis con atipia y

hepatocarcinoma bien diferenciado. Por

otra parte, Matturi y Bauer108, amplian

el espectro a otras situaciones

patológicas y sugieren que las

denominadas células displásicas grandes

deben ser consideradas como elementos

hiperplásicos, mientras que las

denominadas células displásicas

pequeñas deben ser tenidas en cuenta

como células preneoplásicas. Los

parámetros morfométricos empleados

por Motorhasi et al117, para distinguir

entre hepatocarcinoma bien diferenciado

y lesiones "carcinoma-like" han sido:

1.- Factor de forma nuclear: debe

considerarse carcinoma si éste es inferior

a 0,93.

2.- Relación nucleo-citoplasma mayor de

0,3.

3.- Densidad celular mayor de 40 células

por campo.

4.- Area nuclear mayor de 50 micrones.

Los cambios morfométricos que

aparecen en el trasplante hepático han

sido estudiados también por Hillan et al22

.

La morfometría de la isquemia

hepática de diversas causas y bajo

distintas situaciones ha sido estudiada a

nivel agudo. Schellens et al160, describen

que tras periodos prolongados de

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

75

isquemia aguda existe una tendencia a la

disposición hexagonal de las conexiones

de los hepatocitos que sería característica

de las células dañadas irreversiblemente.

Por otra parte, Sasase158 describe que a

los treinta minutos de isquemia aguda

existe un incremento en el número de

mitocondrias, lo que sería un mecanismo

compensador para disminuir el daño

isquémico al hepatocito. Sin embargo,

tras sesenta minutos de isquemia esta

proliferación es limitada, lo que causa un

cambio necrótico severo en los

hepatocitos.

La relación de la isquemia

hepática con el tiempo ha sido estudiada

desde el punto de vista morfométrico por

Momci y Koga114, en su trabajo sobre la

preservación hepática con soluciones

conservadoras. Describen que los

primeros fenómenos isquémicos

consisten en un aumento en el área

hepatocítica total, así como una

alteración de la microcirculación y la

formación de bullas en el citoplasma.

Posteriormente, dichas bullas rellenan los

sinusoides para existir una franca

degeneración en los hepatocitos tras 48

horas de isquemia y preservación en frío.

INTRODUCCION

PLANTEAMIENTO DEL TRABAJO OBJETIVOS DEL TRABAJO

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PLANTEAMIENTO DEL TRABAJO Y OBJETIVOS

INTRODUCCION

El consumo ilegal de drogas psicoestimulantes ha adquirido en las últimas décadas

proporciones epidémicas, tanto es así que se ha venido a considerar en épocas recientes

como uno de los peores azotes de la humanidad. El creciente interés científico por los

aspectos clínicos, neuroquímicos y sociales de dicho fenómeno se ha traducido en una serie

de estudios de investigación tanto clínica como experimental centrados en las bases

nerviosas y químicas del abuso de las drogas y sobre las alteraciones tanto a nivel

morfológico como bioquímico que las drogas producen a nivel de los distintos órganos.

Gracias a estos estudios vamos comprendiendo las alteraciones que producen las drogas y

los mecanismos responsables de dichas alteraciones.

El hígado es la víscera mas importante que dispone el organismo humano implicado en el

metabolismo de las diferentes sustancias tanto intrínsecas como introducidas desde el

exterior en el organismo. Su posibilidades de desarrollar alteraciones de las drogas en el

hígado son grandes y muy especialmente en las dosis que las mismas se introducen en el

cuerpo humano. Algunos aspectos ya han sido estudiados sobre todo a nivel de autopsias

practicadas a los drogadictos pero la información se muestra insuficiente y muy

especialmente teniendo en consideración el escaso número de estudios desarrollados a

nivel experimental. Estudios cuantitativos sobre las alteraciones provocadas por las drogas

tampoco son muy numerosos, por lo que se muestra como muy interesante incrementar

la información sobre las repercusiones de distintas drogas y muy especialmente sobre el

hígado cuantificando las alteraciones utilizando el método morfométrico.

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

PLANTEAMIENTO DEL TRABAJO Y OBJETIVOS

INTRODUCCION

OBJETIVOS DEL TRABAJO

1. Valorar las repercusiones morfológicas de diferentes drogas de abuso en el híagado

2. Evidenciar sus repercusiones histológicas en el hígado

3. Valorar las repercusiones en el hepatocito a nivel ultraestructural

4. Cuantificar las alteraciones mediante morfometria

5. Intentar correlacionar la sintomatología con las bases morfológicas alteradas en los

diferentes niveles organizativos

INTRODUCCION

MATERIAL Y METODOS

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

MATERIAL Y METODOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

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ANIMAL DE LABORATORIO Para realizar el presente trabajo experimental, se ha procedido a la elección del ratón albino, concretamente las de la raza Swiss-Webster, procedentes del animalario de la Facultad de Medicina de la Universidad de Valladolid. Los animales han permanecido en el estudio en las siguientes condiciones ambientales: - Temperatura entre 18-25°C. - Humedad relativa del aire 40-70%. - Ciclos de luz-oscuridad de 12 horas cada uno. Los animales han estado estabulados durante el estudio en un armario climatizado instalado en el Laboratorio de Cirugía experimental con control y supervisión diaria veterinaria de su estado Se han empleado animales macho de aproximadamente unos 50 g de peso al comienzo del experimento.

Ratón Swiss-Webster utilizado PROTOCOLO EXPERIMENTAL Para realizar este estudio experimen-tal nos hemos adaptado a la Directiva publicada por el Consejo de Europa en noviembre de 1986, que indica las dispo-siciones legales reglamentarias y admi-nistrativas de los Estados-Miembros con relación a la experimentación animal para protocolos experimentales (arts. 2, 5, 7, 8, 9 y 10) y a la legislación española sobre protección de los animales utilizados para experimentación y otros fines científicos REAL DECRETO 1201/2005, de 10 de octubre, sobre protección de los animales utilizados para experimentación y otros fines científicos. (B.O.E. núm 252, viernes, 21 de octubre de 2005, pp.34367-91).

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INTRODUCCION

MATERIAL Y METODOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

81

GRUPO DE ANIMALES Para dicho estudio se han utilizado un total de 48 animales, cuyas características han sido descritas previamente. Sobre el total de ratas se han hecho 5 grupos, uno Control y 4 experimentales GRUPOS ESTUDIADOS CONTROL Dosis 1 ml de suero fisiológico vía intraperitoneal durante 21 días 12 animales estudiados COCAINA Dosis 50 mg/kg de peso por vía intraperitoneal durante 21 días 12 animales estudiados NMDA (EXTASIS) estudiados Dosis 50 mg/kg de peso por vía intraperitoneal durante 21 días 12 animales estudiados HEROÍNA (DIACETIL MORFINA) Dosis 125 mg/kg de peso por vía intraperitoneal durante 21 días 12 animales estudiados Los animales han sido pesados tanto al principio como al final del estudio

Concluido este periodo, se procede a anestesiar los animales con clorhidrato de ketamina (Ketolar®) a las dosis de 60 mg/Kg de peso corporal10,173 y se procede a la realización de una laparotomía media previo rasurado de la zona. Abrimos la cavidad abdominal y bajo lupa de disección visualizamos las distintas vísceras y estructuras de la cavidad abdominal valorando su estado y obteniendo las fotografías necesarias para ilustrar cada caso y se procede a obtener un fragmento visceral del lóbulo anterior hepático que inmediatamente fueron sometidas a fijación con destino al estudio con microscopio òptico y ultraestructural. Por último se procedió al sacrificio del ratón, todavía bajo los efectos de la anestesia, por dislocación cervical.

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

MATERIAL Y METODOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

82

Vía de administración IP de las drogas y la anestesia

Exploración de la cavidad abdominal

Extracción del material hepático para su procesamiento

histológico y estudio ultraestructural

PROTOCOLO DE PROCESAMIENTO DE LAS PIEZAS PARA EL ESTUDIO BAJO MICROSCOPIA OPTICA 24 El espécimen obtenido para el estudio de microscopía óptica, según el protocolo anteriormente descrito, fue sometido a la metodología general requerida para este tipo de estudio, pasando por tanto, por los siguientes procesos: Fijación

La muestra obtenida fue fijada mediante la inmersión de la pieza en una solución de Formaldehído al 10%, preparado con 10cc de Formaldehído 37-40% y 90cc de agua destilada, previo lavado de la luz arterial con la misma solución fijadora. En esta solución fijadora se mantuvo el segmento aórtico en un recipiente de cristal oscuro duran-te 24 horas aproximadamente. Inclusión Transcurrido el tiempo de fijación de las piezas, se las lavó con agua destilada durante dos horas, para eliminar el exceso de fijador. Para la deshidratación, aclarado e infiltración en Paraplas utilizamos un

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

MATERIAL Y METODOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

83

procesador automático (Autotechnicon DUO, Mod. 2A), donde las muestras arteriales fueron sometidas a una serie de inmersiones secuenciales en diferentes soluciones según el siguiente protocolo: -alcohol al 70% I……....2 horas -alcohol al 70% II….…..2 horas -alcohol al 96% I….…….1 hora -alcohol al 96% II……….1 hora -alcohol al 100% I…….….1 hora -alcohol al 100% II……….1 hora -benzol I…..…...2 horas -benzol II…..…..2 horas -benzol III…......1 hora -paraplast I...........1 hora -paraplast II..........1 hora Una vez finalizados estos pases, las piezas fueron depositadas dentro de unos moldes metálicos que previamente se habían rellenado con paraplast fundido por calor, dejando posterior-mente que se enfriara pasando el paraplast con la pieza a su estado sólido. Cortes Los cortes de los bloques se hicieron con un Microtomo de rotación con una cuchilla biplana, a un grosor de 6 micras. El ángulo de inclinación de la cuchilla fue de 10º.

El grupo de cortes obtenidos, se introdujo en un baño a una temperatura de 45ºC. Los cortes seleccionados fueron recogidos en un portaobjetos desengrasado previa inmersión en una solución de alcohol-eter y cubierto con una mezcla de albúmina glicerinada que utilizamos como adhesivo. Posteriormente se dejaron secar en una estufa a 37ºC durante 24 horas. Desparafinación Tiene por objeto eliminar el paraplast de los cortes, de tal forma que los especímenes a estudio puedan tomar los colorantes -tinciones de hematoxilina-eosina y de fibras elásticas-. El proceso se llevó a cabo por inmersión secuencial, siguiendo los siguientes pasos: -xilol I.............................10 minutos -xilol II............................10 minutos -alcohol al 100% I..............2 minutos -alcohol al 100% II.............2 minutos -alcohol al 96%.................2 minutos -alcohol al 70%.................2 minutos Aclaramiento y montaje Una vez finalizada la tinción, se pasan las preparaciones por baños de alcohol etílico y xilol según la siguiente pauta:

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-alcohol al 70%..................5 minutos -alcohol al 96%..................5 minutos -alcohol al 100% I..............5 minutos -alcohol al 100% II.............5 minutos -xilol I ................................5 minutos -xilol II................................5 minutos En la parte final de esta fase, las preparaciones son cubiertas con una sustancia viscosa de índice de refracción igual al vidrio (EUKITT) y un cubreobjetos, dejándolos secar 24 horas. Las preparaciones morfológicas se valoraron con un microscópico fotó-nico NIKON, visualizando los segmentos histológicos a 40, 100, 400, y 1000 au-mentos. En éste último caso con objetivo de inmersión. Paralelamente a la observación de microscopía óptica, se realizaron fotografías de las preparaciones mediante un sistema de fotografía automática HFX-DX de NIKON acoplado al microscopio. PROTOCOLO DE PROCESAMIENTO DE LAS PIEZAS PARA EL ESTUDIO BAJO MICROSCOPIA ELECTRONICA DE TRANSMISION Para este estudio histológico, las piezas se procesaron siguiendo las indicaciones del Servicio Central de

Microscopía Electrónica de la Facultad de Medicina de Valladolid. Los pasos seguidos se describen a continuación: Fijación Se realizó por inmersión de las piezas en el liquido fijador (Glutaraldehído y buffer de cacodilato en una proporción de 10% y 90%, respectivamente, a una temperatura de 4ºC), inmediatamente después de su extracción, según exposición precedente. Posteriormente, se introdujeron las muestras en una nevera donde permanecieron a 4ºC durante 6-8 horas. Transcurrido este tiempo, las piezas se lavaron con buffer de cacodilato ajustado a la osmolaridad con sucrosa, y se mantuvieron en una solución de ácido ósmico al 2% diluido en buffer de cacodilato a 4ºC preparado 30 minutos antes, durante 1-2 horas. Pasado este tiempo se hicieron lavados repetidos con buffer de cacodilato. Deshidratación Para ello, sumergimos las muestras en una solución de acetona y óxido de propileno según la siguiente pauta: -Acetona al 30% en agua destilada .....15 minutos

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-Acetona al 50% en agua destilada .......30 minutos -Acetona al 70% en agua destilada .......30 minutos -Acetona al 70% y acetato de Uranilo al 2% ...30 minutos -Acetona al 90% en agua destilada ......30 minutos -Acetona al 100% I ................30 minutos -Acetona al 100% II ...............30 minutos -Acetona al 100% y sulfato de cobre I ..30 minutos -Acetona al 100% y sulfato de cobre II ..30 minutos -Oxido de propileno I ............30 minutos -Oxido de propileno II............30 minutos En el cuarto paso se añade acetato de Uranilo para que al tiempo que se realiza la deshidratación se produzca una tinción en bloque. El Sulfato de Cobre elimina el agua que haya podido tomar la acetona y el óxido de polipropileno, y disuelve la Araldita que utilizamos posteriormente, facilitando la inclusión. Impregnación Se realiza con resinas sintéticas, en este caso utilizamos la Araldita Durcapan de FLUKA, según la pauta siguiente:

-3/4 de Oxido de Polipropileno y 1/4 de la 1ª mezcla de inclusión a Tª ambien-te...1-2 horas -1/2 de Oxido de Polipropileno y 1/2 de la 1ª mezcla de inclusión a Tª ambien-te..1-2 horas -1/4 de Oxido de Polipropileno y 3/4 de la 1ª mezcla de inclusión a Tª ambien-te...1-2 horas -1ª mezcla de inclusión a Tª ambien-te..24 horas - 1ª mezcla de inclusión en estufa a 37ºC..24 horas - 2ª mezcla de inclusión en estufa a 50ºC…24 horas Para conseguir una mayor penetración de las resinas sintéticas a continuación se lavó con Oxido de Polipropileno. Inclusión

Es la fase de formación de los bloques, para lo cual utilizamos cápsulas de gelatina que rellenamos con la segunda mezcla de inclusión, introduciendo los especímenes a estudio en las mismas, orientados en el centro de la cápsulas y evitando que se introdujeran burbujas de aire en su inte-rior. Las cápsulas se mantuvieron en una estufa a 60-70ºC durante 48 horas. Cortes Una vez extraídas las cápsulas, los bloques fueron tallados y cortados

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según la técnica habitual, con una cuchilla de vidrio de 45º, en secciones transversales con un ultramicrotomo LKB-III. Se obtubieron dos tipos de cortes: -semifinos, de 1 micra de espesor, que fueron utilizados para controlar el área de sección y seleccionar con gran precisión las zonas de más interés para el posterior estudio al microscopio electrónico de transmisión. Estos cortes fueron visualizados en el microscopio óptico cubriendo la superficie con aceite de inmersión. -ultrafinos, de 700A de espesor, que fueron estudiados por microscopio electrónico de transmisión. Tinción Los cortes semifinos fueron colocados sobre un portaobjetos, tratado previamente con una solución de Cromoalumbre, en dos filas paralelas, sobre una gota de acetona al 20%. Se dejaron secar a 40ºC y se tiñeron con Azul de Toluidina al 1%. Los cortes ultrafinos se recogieron del ultramicrotomo sobre rejillas de cobre electrolítico de 100-300 mallas cada una, que situamos en una placa de Petri sobre una cubierta de parafina. Se tiñeron durante 30 minutos

con Acetato de Uranilo, se lavaron 3 veces con agua destilada y se secaron. Los contrastamos con una solución de Citrato de plomo 20 minutos, según el método de Reynols (1963), en ausencia total de Anhídrido Carbónico, para lo cual se cubrió la placa de Petri y se introdujeron en su interior comprimidos de Hidróxido Sódico durante 3 minutos. Finalmente lavamos 3 veces con agua bidestilada y desionizada, seca-mos y pasamos a observar los cortes en un microscopio electrónico ZEISS EM 10 CA realizando fotografías a 5.000 y a 10.000 aumentos. ESTUDIO MORFOMETRICO DE LAS PREPARACIONES El siguiente paso consistió en la medición de los distintos parámetros previa visualización de los cortes en un microscopio óptico (Nikon Labophot) usando un poder de resolución de x400 para la localización de los hepatocitos en sección transversal y más tarde de x1000 aumentos para su medición. De cada grupo se procedió a medir ciento ocho hepatocitos, seis hepatocitos por corte, de un total de tres cortes por portaobjetos y de un

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portaobjetos por animal. Las características para la medición fue de células hepáticas en sección transversal en que estuviera incluido el núcleo, despreciandose aquellas células que no tuvieran núcleo. Las preparaciones histológicas fueron analizadas mediante un sistema informático morfométrico (Nikon DS Cámara Contol Unit DS-L2), que consta de un microscopio óptico convencional al que se le ha acoplado un sistema óptico e informático que permite la proyección de la imagen del microscopio (Nikon Alphaphot-2 YS2) sobre una pantalla de ordenador de alta resolución. Asimismo tiene un lápiz óptico que permite la medición de los distintosd parámetros de la imagen de la pantalla Las mediciones se hicieron en unidades pixel, siendo un pixel igual a 0,1099 micras, el motivo de ello era debido a que no se podía conocer con exactitud en que proporción estaban aumentadas las imágenes celulares. Por ello no sería correcto tomar como unidad de medida la micra, ya que los resultados obtenidos se desvían mucho de los valores reales. Tomamos, pues, como referencia el pixel (unidad de imagen en la pantalla). Las mediciones se realizaron siempre por la misma persona, con el fin

de que no hubiera diferencias de interpretación. Los parámetros que se midieron en cada uno de los cortes fueron (Fig. 6): 1- Area del hepatocito 2- Perímetro del hepatocito 3- Factor de forma del hepatocito 4- Area del núcleo 5- Perímetro del núcleo 6- Factor de forma del núcleo 7- Relación nucleo citoplasma 8- Densidad-hepatocitos El Factor de Forma nos va a detectar posibles diferencias en la configuración celular entre las distintas series de animales. Hay que reseñar que el factor de forma de una estructura circular es igual a la unidad. Otro parámetro también analizado es la densidad de hepatocitos, entendida como el número de hepatocitos por campo fotográfico.

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a) Dibujo esquemático del hepatocito b) Dibujo esquemático para mediciones de área y perímetro celulares; c) Dibujo esquemático para mediciones de área y perímetro nucleares d) Dibujo esquemático para medición de número de hepatocitos. Procedimiento para medición morfo- métrica del hepatocito:

Imágenes del morfometro empleado en el estudio, de la pantalla, de las preparaciones histológicas hepáticas durante el proceso de medición y de la pantalla del sistema de cuantificación

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Imágenes de la base de datos creada para la cuantificación morfométrica Análisis estadístico Con los datos obtenidos de cada grupo y cada parámetro estudiado, se procedió a su introducción en forma de base de datos en un fichero Microsoft Access y Excel Posteriormente la valoración de la relación existente entre las distintas variables se ha realizado mediante un paquete estadístico denominado SPSS+ que dispone de pruebas estadísticas bivariantes útiles para el análisis de nuestros resultados.

De esta manera se calculó la "t" de Student Fischer cuando la comparación se establecía entre una variable cuantitativa de dos categorías. Por último se calculó el análisis de la varianza y la significación estadística de la misma para todos y cada uno de los parámetros estudiados entre los distintos grupos objeto de nuestro estudio. Los datos obtenidos de las diferentes determinaciones llevadas a cabo en los grupos a estudio fueron introducidos como matriz de datos en el programa estadístico comercial SPSS/PC+ con la ayuda de un ordenador personal Toshiba Personal System/2, Model 30. Calculamos para cada parámetro de los diferentes grupos la media y desviación estándar, lo que nos permitió analizar diferentes relaciones entre las mismas. Seguidamente, emparejamos las medias obtenidas en los diferentes gru-pos con igual tiempo de evolución comparándolas con las pruebas estadís-tica de la "t" de Student y análisis de la varianza, que nos permiten hallar si las diferencias encontradas son estadísti-camente significativas.

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RESULTADOS

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1. TASA DE MORTALIDAD De los 48 animales iniciales empleados en el estudio no ha fallecido ninguno perteneciente al grupo control en el protocolo experimental. En el grupo tratado con cocaína hemos detectado la muerte de 3 animales que se han repuesto, falleciendo 1 de estos últimos que también se ha repuesto, lo que ha representado el 30 % de los 16 empleados para completar este grupo. No se han podido determinar las causas del fallecimiento aunque sospechamos que haya sido una a efectos derivados de la droga administrada. En el grupo al que se le suministró éxtasis, se pudo comprobar la presentación de 4 fallecimientos que se repusieron, de los cuales 2 posteriormente fallecieron, reponiéndoles y falleciendo uno de estos últimos que también se repuso. El total de animales utilizados fueron 19. No se pudieron determinar de una forma, clara las causas de fallecimiento. Del grupo tratado con heroína fallecieron tres animales que se repusieron, falleciendo dos de estos últimos y falleciendo uno de estos dos que repuso con otro. En total se utilizaron 18 animales. (Tabla I y Fig.1) Sólo se utilizaron en el estudio los animales que completaron el periodo experimental. Grupo Control: no fallece ninguno de los 12 animales empleados

Grupo cocaína: fallecen 3 se reponen 3, fallece 1, se pone uno se utilizan 16 en total Grupo éxtasis: fallecen 4, se reponen, fallecen 2 se repone, fallece 1 (19 en total) Grupo heroína: fallecen 3, se repone, fallecen 2, se repone. Fallece 1, se repone (18 en total)

Tabla I. Valores de la Tasa de MORTALIDAD en los diferentes grupos estudiados Fig. 1. Histograma de la Tasa de Mortalidad

GRUPOS PORCENTAJE

CONTROL 0

COCAINA 25.00 %

EXTASIS 36.84 %

HEROINA 33.33 %

TASA DE MORTALIDAD DE LOS ANIMALES EN LOS DISTINTOS GRUPOS

ESTUDIADOS

020

40

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

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2. ESTUDIO PONDERAL El estudio ponderal de los animales distribuidos en los diferentes grupos ha mostrado que partiendo de pesos aproximados a los 50 gramos en todos los grupos, se ha evidenciado un discreto aumento del peso a lo largo del tiempo en el grupo control (de 51.5±16.6 a 57.8±11.6 gramos). En los grupos experimentales no se ha evidenciado este pequeño aumento ponderal a lo largo del tiempo y por el contrario se detectaba una disminución del mismo. Así en el grupo tratado con cocaína disminuían las cifras medias de 51,4±15.6 gramos al principio del estudio a 41.8±13.7 gramos al final, y en el grupo de éxtasis de 53.7±18.6 a 41.9±14.3 gramos. Las cifras del grupo tratado con heroína pasó de pesos medios de de 54.9±13.4 a 37.2±17.3 gramos (Tabla II y Fig. 2)

Tabla II. Valores de los pesos de los animales al comienzo del estudio y al finalizar el mismo en los diferentes grupos estudiados Fig. 2. Histograma de la evolución ponderal de los animales de los diferentes grupos

INICIAL FINAL

GRUPOS MEDIA Y D.S. MEDIA Y D.S.

SIGN. E.

CONTROL 51.5±16.6 57.8±11.6 p<0.01

COCAINA 51.4±15.6 41.8±13.7 p<0.01

EXTASIS 53.7±18.6 41.9±14.3 p<0.01

HEROINA 54.9±13.4 37.2±17.3 p<0.01

EVOLUCION PONDERAL DE LOS ANIMALES EN LOS DISTINTOS GRUPOS

ESTUDIADOS

0

50

100

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

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3. ESTUDIO MACROSCOPICO DE LOS ANIMALES Los animales estudiados se han controlado de forma rutinaria y diaria por el investigador, pudiéndose constatar las siguientes apreciaciones desde el punto de vista morfológico macroscópico: Aspecto general: Los animales pertenecientes al grupo tratado con cocaína, se han mostrado muy hipoactivos, presentando algunos animales cuadros convulsivos y algún signo neurológico extrapiramidal. También se evidenciaron heridas a nivel de la cola constatando que un animal la había perdido por completo. Los animales tratados con morfina mostraron también un comportamiento muy agresivo a la vez que se comportaron durante el experimento muy hiperactivos con un estado de de irritabilidad y nerviosismo. Los animales tratados con heroína mostraron un patrón similar de comportamiento y aspecto al grupo tratado con extasis. En todos los grupos tratados se disminuyó fundamentalmente su ingesta sólida. Sus deyecciones han sido normales semejantes a las del grupo control. No se ha observado patología relevante alguna salvo lo señalado. Los animales pertenecientes a los grupos experimentales han mostrado sobre todo

al final del estudio un aspecto depauperado. Han sido animales irritables, delgados y sobre todo era de resaltar un erizamiento del pelo con pérdida de su lustrosidad. Cavidad abdominal: Cuando se ha realizado la laparotomía a los animales, en todos los grupos experimentales, no se ha detectado en este tiempo grandes alteraciones a resaltar. Sus vísceras se encontraban con un aspecto más o menos normal. Ha sido de resaltar la falta de contenido intestinal existente a nivel del intestino delgado.

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3. ESTUDIO BAJO MICROSCOPIA OPTICA. VALORACION BAJO MICROSCOPIA OPTICA DEL HIGADO Con la tinción de hematoxilina-eosina las preparaciones se han visualizado con una coloración generalizada más o menos rosácea. Los citoplasmas han aparecido de color rosáceo, mientras que los núcleos se han destacado de color azulado. Las células se han mostrado ordenadas en cordones celulares formando lobulillos muy bien diferenciados diferenciándose una zona central que ha presentado la vena centrolobulillar. Siguiendo el esquema de organización hepática ha podido ser visualizado el espacio porta, diferenciándose fundamentalmente en el mismo, la vena porta, la arteria y otras formaciones menos nítidas como han sido los linfáticos y las ramificaciones nerviosas. Fig. 3 En el grupo intoxicado con cocaína a simple vista no se ha podido apreciar grandes alteraciones. La célula hepática ha captado los colorantes normalmente y no se ha podido apreciar grandes alteraciones a nivel de la vena centrolobulillar ni de los diferentes componentes del espacio porta. Sin embargo se han podido captar en algunas preparaciones alteraciones estructurales en los hepatocitos centrolobulares a veces imágenes de

necrosis periportal y mediozonal que en un limitado número de preparaciones también han sido centrolobulares En el grupo tratado con éxtasis se ha detectado cierta vacuolización centrolobular, cierto grado de necrosis centrolobular con un grado apreciable de fibrosis hepática. Ha llamado la atención la coagulación intravascular encontrada en los vasos hepáticos de algunos animales tratados y evaluados . En las preparaciones evaluadas de los animales tratados con heroína se ha apreciado infiltrados inflamatorios a nivel lobular y portal con aparición de células características de estado, un grado grande hipertrofia y de fibrosis del espacio de Diese y en algunas preparaciones ruptura del espacio interhepatocítico. Fig. 4,5,6,7,8,9,10 y 11

Fig.3 Imagen del lobulillo hepático alrededor de la vena centrolobulillar. Grupo control H.E. 100X .

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Fig.4 Imagen de la vena centrolobulillar del lobulillo hepático de un animal tratado con cocaína. H.E. 100X

Fig.5 Imagen de la vena centrolobulillar del lobulillo hepático de un animal tratado con extasis. H.E. 100X

Fig. 6 Imagen alrededor de la vena centrolobulillar en el grupo al que se le administró heroína. H.E. 100X

Fig 7. Imagen del espacio porta de un animal tratado con cocaína. H.E. 100X

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Fig.8 Imagen del espacio porta del lobulillo hepático un animal tratado con extasis. H.E. 100X

Fig.9 Imagen del espacio porta del lobulillo hepático de un animal tratado con heroína. H.E. 100X

Fig.10 Imagen a mayores aumentos de las células hepáticas de un animal de un grupo tratado con éxtasis. H-EE. 400X

Fig.11 Trombosis de la ena centrolobulillar de un a preparación perteneciente a un animal tratado con heroína HE 400X

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ESTUDIO MORFOMETRICO La valoración morfométrica del hígado la hemos centrado en dos aspectos, el primero sobre la célula hepática y la segunda sobre los vasos y canalículos biliares. Morfometría del hepatocito El área del hepatocito ha mostrado valores medios de 205±38 en el grupo control, siendo muy parecidos los valores obtenidos en los grupos experimentales tanto los tratados con cocaína , los que recibieron estasis como los que fueron intoxicados con heroína cuyas cifras fueron 198±39, 211±51 y 213±47 respectivamente. Las diferencias no fueron estadísticamente significativas (Tabla III y Fig. 12)

Tabla III. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del AREA HEPATOCITO en los distintos grupos estudiados Fig.12 Histograma de los valores del area del hepatocito en los distintos grupos estudiados

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 205±38

COCAINA 198±39 N.S.

EXTASIS 211±51 N.S.

HEROINA 213±47 N.S.

AREA DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS

190

195

200

205

210

215

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El perímetro del hepatocito sufrió cambios paralelos a los del área. De cifras de 52±7 del grupo control, se pudieron obtener las de 47±9, 53±13 y 55±17en los grupos intoxicados con cocaína, éxtasis y heroína sin significación estadística. (Tabla IV y Fig. 13)

Tabla IV. Valores medios junto con su significación standard y significación estadística del PERIMETRO HEPATOCITO en los distintos grupos estudiados

Fig.13 Histograma de los valores del perimetro del hepatocito en los distintos grupos estudiados

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 52±7

COCAINA 47±9 N.S.

EXTASIS 53±13 N.S.

HEROINA 55±17 N.S.

PERIMETRO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS

42

44

46

48

50

52

54

56

GRUPOS

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El factor de forma no sufrió cambios estadísticamente significativos en ninguno de los grupos experimentales con respecto a los datos del control. (Tabla V y Fig. 14)

Tabla V. Valores medios junto su desviación standard y significación estadística del FACTOR FORMA HEPATOCITO en los distintos grupos estudiados Fig.14 Histograma de los valores del factor de forma del hepatocito en los distintos grupos estudiados

El área nuclear del hepatocito ha sido uno de los parámetros que no ha sufrido variaciones estadísticamente significativas, estando sus valores muy próximos a los normales y sin ninguna tendencia de variación (Tabla VI y Fig. 15)

Tabla VI. Valores medios del AREA NUCLEO junto con la desviación standard y significación estadística en los diferentes grupos estudiados Fig. 15 Histograma de los valores del área del núcleo del hepatocito en los distintos grupos estudiados

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 0.8±0.1

COCAINA 0.8±0.1 N.S.

EXTASIS 0.9±0.2 N.S.

HEROINA 0.9±0.2 N.S.

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 34.14±6.24

COCAINA 33.23±7.35 N.S.

EXTASIS 32.67±8.44 N.S.

HEROINA 33.45±7.88 N.S.

FACTOR DE FORMA DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS

ESTUDIADOS

0,70,80,9

1

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

AREA DEL NUCLEO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS

GRUPOS ESTUDIADOS

30

35

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

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100

El perímetro del núcleo, a semejanza del parámetro anterior tampoco sufrió alteraciones con significación estadística. (Tabla VII y Fig. 16)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 20.78±3.22

COCAINA 19.79±3.21 N.S.

EXTASIS 19.56±323 N.S.

HEROINA 21.79±3.33 N.S. Tabla VII. Valores medios del PERIMETRO del NUCLEO junto con la desviación standard y significación estadística de los diferentes grupos estudiados Fig.16 Histograma de los valores del perímetro del nucleo del hepatocito en los distintos grupos estudiados

El factor de forma del núcleo tampoco evidenció alteraciones, siendo sus valores muy próximos a los ofertados por el grupo control. (Tabla VIII y Fig. 17)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 0.8±0.1

COCAINA 0.8±0.2 N.S.

EXTASIS 0.8±0.2 N.S.

HEROINA 0.8±0.2 N.S.

Tabla VIII. Valores medios del FACTOR de FORMA del NUCLEO junto con la desviación standard y significación estadística de los diferentes grupos estudiados Fig. 17 Histograma de los valores del factor de forma del hepatocito en los distintos grupos estudiados

PERIMETRO DEL NUCLEO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS

GRUPOS ESTUDIADOS

152025

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

FACTOR DE FORMA DEL NUCLEO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS

ESTUDIADOS

0

0,5

1

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

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Con respecto a la relación núcleo/citoplasma no se ha evidenciado valores en los grupos experimentales con diferencias estadísti- camente significativas con el grupo control. (Tabla IX y Fig. 18)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 0.16±0.02

COCAINA 0.17±0.02 N.S.

EXTASIS 0.15±0.02 N.S.

HEROINA 0.15±0.02 N.S.

Tabla IX. Valores medios del parámetro RELACION NUCLEO/CITOPLASMA junto con su desviación standard y significación estadística en los diferentes grupos estudiados Fig. 18 Histograma de los valores de la relación núcleo/citoplasma del hepatocito en los distintos grupos estudiados

La densidad celular, es decir el número de células hepáticas por campo histológico predefinido, ha mostrado unos valores semejantes en todos los grupos experimentales estudiados con respecto al grupo control. Los valores medios de del grupo control 9.14±3.31, se mostraron muy parecidos a los del grupo tratado con cocaína 9.12±3.88, los tratados con éxtasis 8.38±3.78 y los intoxicados con heroína de 8.12±3.29. No existieron diferencias estadísticamente significativas. (Tabla X y Fig. 19)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 9.14±3.31

COCAINA 9.12±3.88 N.S

EXTASIS 8.38±3.78 N.S.

HEROINA 8.12±3.29 N.S.

Tabla X. Valores medios de la DENSIDAD CELULAR por campo, junto con su desviación standard y significación estadística en los diferentes grupos estudiados

RELACION NUCLEO/CITOPLASMA DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS

ESTUDIADOS

0,14

0,16

0,18

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

102

Fig. 19 Histograma de los valores de la densidad celular en los distintos grupos estudiados El porcentaje de grasa por campo histológico, de detectar grasa en el grupo control del 3.21% al 6.23% del grupo tratado con cocaína, al 6.31% del tratado con éxtasis hasta 7.238% del de heroína. (Tabla XI y Fig. 20)

GRUPOS PORCENTAJE SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 3.21%

COCAINA 6.23% N.S.

EXTASIS 6.31% N.S.

HEROINA 7.23% N.S.

Tabla XI. Valores del parámetro PORCENTAJE GRASA por CAMPO HISTOLOGICO

Fig. 20 Histograma de los valores del porcentaje grasa/campo histológico en los distintos grupos estudiados Valoración morfométrica de los vasos y canalículos biliares El área de la luz de la arteria del espacio porta no ha sufrido variaciones en los grupos experimentales con respecto al grupo control. Incrementos estadísticamente significativos en todos los grupos experimentales con respecto al control. (Tabla XII Fig. 21)

DENSIDAD CELULAR EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS

789

10

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

PORCENTAJE GRASA/CAMPO HISTOLOGICO DEL HEPATOCITO EN

LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS

010

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

103

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 2561±425

COCAINA 2356±852 N.S

EXTASIS 2435±685 N.S

HEROINA 2349±759 N.S.

Tabla XII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del AREA de la LUZ DE LA ARTERIA del ESPACIO PORTA Fig. 21 Histograma de los valores del area de la luz de la arteria del espacio porta del hepatocito en los distintos grupos estudiados

El grosor de este vaso ha sufrido variaciones incrementándose su espesor en los grupos experimentales. Así se ha incrementado a valores de 183±23 en el grupo de cocaína, 178±42 en el grupo de éxtasis y 189±39 en el grupo de heparina en relación a los valores de 125±32 del grupo control, incrementos que se mostraron estadísticamente significativos (p<0.01) (Tabla XIII y Fig. 22)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 125±32

COCAINA 183±23 p<0.01

EXTASIS 178±42 p<0.01

HEROINA 189±39 p<0.01

Tabla XIII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del GROSOR de la PARED de la ARTERIA del ESPACIO PORTA en los diferentes grupos estudiados

AREA DE LA LUZ DE LA ARTYERIA DEL ESPACIO PORTA DEL

HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS

200025003000

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

104

Fig. 22 Histograma de los valores del grosor de la pared de la arteria del espacio porta del hepatocito en los distintos grupos estudiados El área de la de la luz de la vena del espacio porta no ha sufrido en ninguno de los grupos experimentales variaciones estadísticamente significativas con respecto al grupo control. (Tabla XIV y Fig. 23)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 3195±1088

COCAINA 2932±1182 N.S

EXTASIS 3229±1239 N.S

HEROINA 2830±1392 N.S.

Tabla XIV. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del área de la LUZ DE LA VENA del ESPACIO PORTA en los diferentes grupos estudiados

Fig.23 Histograma de los valores de la luz de la vena del espacio porta del hepatocito en los distintos grupos estudiados El grosor de la pared de esta vena también sufrió incrementos y mucho mas acentuado en el grupo tratado con cocaína (162±75) , del grupo intoxicado con éxtasis (150±39) y los de heroína (139±51) con respecto a los controles (97±29) con una significación estadística del p<0.01. (Tabla XV y Fig. 24)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 97±29

COCAINA 162±75 p<0.01

EXTASIS 150±39 p<0.01

HEROINA 139±51 p<0.01

Tabla XV. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del GROSOR de la PARED de la VENA del ESPACIO PORTA en los diferentes grupos estudiados

GROSOR DE LA PARED DE LA ARTERIA DEL ESPACIO PORTA DEL HEPATOCITO

EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS

0

200

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

LUZ D ELA VENA DEL ESPACIO PORTA DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS

GRUPOS ESTUDIADOS

25003000

3500

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

105

Fig. 24 Histograma de los valores del grosor de la pared de la vena del espacio porta del hepatocito en los distintos grupos estudiados En relación al calículo biliar, su área no sufrió variación estadísticamente significativa en el grupo de cocaína (593±116), éxtasis (591±143) y heroína (572±139) con respecto al control (599±128) sin diferencias estadística- mente significativas. (Tabla XVI y Fig. 25)

Tabla XVI. Valores medios del AREA de la LUZ DEL CANALICULO BILIAR del ESPACIO PORTA junto con su desviación estándar y significación estadística en los diferentes grupos estudiados

Fig. 25 Histograma de los valores del área de la luz del canalículo biliar del espacio porta del en los distintos grupos estudiados El grosor del canalículo no evidenció cambios en los grupos de cocaína (72±19), de éxtasis (79±24 y de heroína (72±27 con respecto al control (79±22) sin mostrar diferencias significativas. (Tabla XVII y Fig. 26)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 79±22

COCAINA 72±19 N.S.

EXTASIS 79±24 N.S

HEROINA 72±27 N.S

Tabla XVII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del GROSOR del CANALICULO BILIAR del ESPACIO PORTA en los diferentes grupos estudiados

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 599±128

COCAINA 593±116 N.S.

EXTASIS 591±143 N.S

HEROINA 572±139 N.S

GROSOR DE LA PARED DE LA VENA DEL ESPACIO PORTA DEL HEPATOCITO EN LOS

DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS

0100200

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

AREA DE LA LUZ DEL CANALICULO BILIAR DEL ESPACIO PORTA DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS

GRUPOS ESTUDIADOS

550600650

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

106

Fig. 26 Histograma de los valores del grosor del canalículo biliar del espacio porta del hepatocito en los distintos grupos estudiados El Área de la vena centrolobulillar, no sufrió variaciones en los grupos experimentales con respecto al control sin mostrar sus diferencias de valores significación estadística. (Tabla XVIII y Fig. 27)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 995±231

COCAINA 1140±319 N.S.

EXTASIS 1069±293

N.S.

HEROINA

1012±324

N.S.

Tabla XVIII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del AREA de la VENA CENTROLOBULILLAR en los diferentes grupos estudiados Fig. 27 Histograma de los valores del area de la vena centrolobulillar del hepatocito en los distintos grupos estudiados

GROSOR DEL CANALICULO BILIAR DEL ESPACIO PORTA DEL

HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS

6080

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

AREA DE LA VENA CENTROLOBULILLAR DEL

HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS

50010001500

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

107

4. ESTUDIO BAJO MICROSCOPIA ELECTRONICA A nivel ultraestructural, en las preparaciones pertenecientes a los animales controles se ha podido apreciar el núcleo celular claramente diferenciado. El núcleo, presenta una morfología más o menos redondeada con densidad electrodensa y a veces hipercromático con cierto grado de picnosis en algunos casos Fig. 28. No se ha detectado depósitos lipiditos a nivel nuclear. Se ha evidenciado el citoplasma con sus organelas claramente diferenciadas y más concretamente a lo que respecta a los retículos endoplásmico liso y rugoso este con sus ribosomas, las formaciones mitocondriales, las rosetas de glucógeno y el resto de estructuras sobre todo vacuolas y lisosomas entre otras. La administración de cocaína ha conllevado alteraciones tanto a nivel del retículo endoplásmico liso como rugoso con desestructurización, alteraciones de las mitocondrias derivando su forma a balonamiento, (Fig. 29), alteraciones de los microvilli y la aparición de acumulos lipídicos intracitoplasmáticos (Fig. 30). A nivel mitocondrial ha podido ser observado un incremento lo que podríamos considerar como vacuolas autofágica. Las alteraciones del retículo endoplasmico liso se ha centrado en su dilatación, las del rugosos en la

desaparición de los ribosomas y en las mitocondrias aparte de las de la rotura de la membrana mitocondrial. Discretas formaciones grasas se han podido evidenciar en algunas preparaciones en relación con el retículo endoplasmico liso con cierta continuidad entre las membranas de estas organelas y las que limitan las vacuolas grasas que en ocasiones tiene una disposición

Fig. 28 Imagen del núcleo celular en un hepatocito de un animal del grupo control. 4000X El tratamiento con éxtasis ha provocado la aparición de apoptosis celular, descenso subjetivo del número de rosetas de glucógeno e imágenes de rabdomiolisis. Las mitocondrias se han mostrado en los animales de este grupo seriamente alteradas con formas irregulares, muy alargadas y en algunos casos abalonadas con alteraciones en su envoltura de tipo herniación. Las crestas

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

108

se muestran fragmentadas o a veces han desaparecido. El interior mitocondrial se muestra floculado con imagen de distintas densidades donde alternan zonas muy claras con otras muy obscuras. Fig. 31 y 32 A veces se han detectado cristales electrodensos dando un aspecto geográfico. Existe una tendencia a la vacuolización de estas estructuras de aspecto diferentes a las formaciones grasas. De la misma forma parece evidenciarse un incremento de las cisternas del retículo endoplásmico liso a expensas del rugoso, cuya superficie celular parece disminuida. A la simple observación no se han podido evidenciar cambios a nivel nuclear o otras estructuras citoplasmáticas. Los lisosomas

Fig. 29 Mitocondrias a nivel citoplasmático con alteraciones en sus crestas en un animal tratado con cocaína. 10.000X

se ven incrementados en número y tamaño en los animales que se les intoxicaba con heroína presentado formas no redondeadas más bien ovoides y en algunos casos con aspectos irregulares. El interior muestra una matriz heterogénea en la densidad electrónica y a veces con la presencia de pequeños gránulos electrodensos entre zonas mas claras.

Fig. 30 Imagen del citoplasma del hepatocito con cierto grado de vacuolización. Grupo tratado con cocaína. 10.000X El tratamiento con heroína ha mostrado como alteraciones mas relevantes, un espesamiento de la pared sinusoidal de las células endoteliales, alteraciones mas o menos marcadas de los microvillis celulares, cierto grado de colagenización perisinusoidal con incremento del espesor de su pared y alteraciones en las células a nivel citoplasmático, cierta

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

109

fibrogénesis del espacio de Diese. Se ha podido observar en este grupo la presencia de estructuras citoplasmáticas trilaminares y la presencia de membranas citoplásmicas fusionadas junto con un retículo endoplásmico dilatado. Fig. 33 El Aparato de Golgi y el retículo endoplásmico liso, se muestran generalmente hipertrófico e hiperplásico aumentando la extensión de los mismos con una tendencia a la balonización. A nivel del retículo endoplásmico rugoso es posible observar una pérdida de la disposición paralela de las membranas de las cisternas y un incremento de la luz de las mismas a la vez de que existe una tendencia a la degranulación a veces con fragmentación membranosa.

Fig. 31 Imagen del citoplásmico con formaciones lipídicas Animal tratado con éxtasis 10.000X

Entre las alteraciones ha sido frecuente observar roturas de la membrana mitocondrial de tipo anillado o la presencia de filamentos helicoidales en el espacio intermembranoso. Es frecuente evidenciarse un redondeamiento de la membrana celular, dando la impresión de un hinchamiento de su citoplasma con gran presencia de vacuolas grasas de gran tamaño y que en algunas ocasiones toman contacto entre sí perdiendo su limitación confluyendo entre ellas. Estas inclusiones lipídicas parecen que no presentan membranas limitantes y presentan una estructura más o menos homogénea. Y también se ha podido observar un incremento del volumen mitocondrial.

Fig. 32 Imagen del Aparato de Golgi con formaciones de retículo endoplásmico rugoso. Animal tratado con éxtasis 10.000X

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

110

Fig. 33 Imagen ultraestructural donde se pueden visualizar desestructurización citoplasmático y gran número de formaciones lisosomiales. Animal tratado con heroína. 10.000X 4. ESTUDIO MORFOMETRICO La valoración morfométrica de las preparaciones estudiadas bajo microscopía electrónica de transmisión han ofertado los siguientes resultados: El AREA del NUCLEO, presentó unos valores en el Grupo CONTROL de 723.95±141.41. A nivel del grupo COCAINA, las cifras fueron de 823.98±173.72, los de EXTASIS 753.56±123.45 y los de HEROÍNA 739.34±154.47 sin mostrar las diferencias

significación estadística. (Tabla XIX y Fig. 34)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 723.95±141.41

COCAINA 823.98±173.72 N.S.

EXTASIS 753.56±123.45 N.S.

HEROINA 739.34±154.47 N.S.

Tabla XIX. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del AREA DEL NUCLEO en los distintos grupos estudiados Fig. 34 Histograma de los valores del area del nucleo del hepatocito en los distintos grupos estudiados

AREA DEL NUCLEO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS

ESTUDIADOS

600800

1000

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

111

El FACTOR de FORMA deL NUCLEO CELULAR, mostró valores de 0.90±0.07 en el grupo CONTROL y 0.89±0.09 en el COCAINA, 0.86±0.08 en el EXTASIS y 0.87±0.08 en el de HEROINA, sin ser estas diferencias mostradas estadísticamente significativas. (Tabla XX y Fig. 35)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 0.90±0.07

COCAINA 0.89±0.09 N.S.

EXTASIS 0.86±0.08 N.S.

HEROINA 0.87±0.08 N.S.

Tabla XX. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del FACTOR DE FORMA DEL NUCLEO en los distintos grupos estudiados Fig. 35 Histograma de los valores del factor de forma del nucleo del hepatocito en los distintos grupos estudiados

Los valores morfométricos correspon- dientes a la DENSIDAD MITOCONDRIAL, a nivel del grupo CONTROL fueron de 7.3±3.1 en relación a las cifras del grupo COCAINA que fueron de 3.2±1.1. EXTASIS de 4.8±2.2 y 4.1±2.1 en el de HEROÍNA. Las diferencias tuvieron significación estadística de p<0.05. (Tabla XXI y Fig. 36)

Tabla XXI. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística de la DENSIDAD MITOCONDRIAL por campo de estudio en los distintos grupos estudiados Fig. 36 Histograma de los valores de la densidad mitocondrial del hepatocito en los distintos grupos estudiados

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 7.3±3.1

COCAINA 3.2±6.1 p<0.01

EXTASIS 4.8±8.2 p<0.05

HEROINA 4.1±7.1 P<0.05

FACTOR DE FORMA DEL NUCLEO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS

GRUPOS ESTUDIADOS

0,840,860,880,9

0,92

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

DENSIDAD MITOCONDRIAL DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS

GRUPOS ESTUDIADOS

0

5

10

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

112

El AREA MITOCONDRIAL, en los animales estudiados mostraron valores CONTROLES de 0.53±0.18 y a nivel de los grupos experimentales COCAINA 1.89±0.32, EXTASIS 1.43±0.43 y HEROÍNA de 2.34±0.33, incrementos que fueron significativos con respecto al grupo CONTROL. (p<0.001). (Tabla XXII y Fig. 37)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 0.534±0.183

COCAINA 1.891±0.321 p<0.001

EXTASIS 1.439±0.433 p<0.001

HEROINA 2.342±0.332 P<0.001

Tabla XXII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del AREA MITONDRIAL en los distintos grupos estudiados Fig. 37 Histograma de los valores del área mitocondrial del hepatocito en los distintos grupos estudiados

El FACTOR de FORMA MITOCONRIAL, mostró variaciones estadísticamente significativas (p<0.05) en relación a los valores del grupo CONTROL 0.51±0.19 con respecto a los valores de los grupos de COCAINA 0.81±0.21, EXTASIS 0.71±0.24 y HEROÍNA 0.97±0.23 (Tabla XXIII y Fig. 38)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 0.510±0.193

COCAINA 0.811±0.212 p<0.05

EXTASIS 0.712±0.242 p<0.05

HEROINA 0.971±0.232 P<0.05

Tabla XXIII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del FACTOR DE FORMA MITOCONDRIAL en los distintos grupos estudiados Fig. 38 Histograma de los valores del factor de forma mitocondrial del hepatocito en los distintos grupos estudiados

AREA MITOCONDRIAL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS

ESTUDIADOS

0123

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

FACTOR DE FORMA MITOCONDRIAL HEPATOCITO EN

LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS

0

0,5

1

1,5

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

113

Los valores de DENSIDAD LISOSOMIAL, fueron en el grupo CONTROL de 2.7±2.1 y sufrieron incrementos en el grupo COCAINA de 6.3±3.2 (p<0.01), grupo de EXTASIS 5.4±3.2 (p<0.05) y HEROÍNA 8.3±3.1 (P<0.01) (Tabla XXIV y Fig. 39)

Tabla XXIV. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística de la DENSIDAD LISOSOMIAL en los distintos grupos estudiados Fig. 39 Histograma de los valores de la densidad lisosomial del hepatocito en los distintos grupos estudiados

Los valores del parámetro AREA LISOSOSMIAL fueron a nivel del grupo CONTROL de 0.64±0.16, 0.89±0.27 del de COCAINA, 0.98±0.23 del EXTASIS y 0.98±0.17 del de HEROINA, incrementos de los grupos experimentales con significación estadística en todos ellos de p<0.01. (Tabla XXV y Fig. 40)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 0.645±0.167

COCAINA 0.893±0.278 p<0.01

EXTASIS 0.987±0.234 p<0.01

HEROINA 0.986±0.179 P<0.01

Tabla XXV. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del AREA LISOSOMIAL en los distintos grupos estudiados Fig. 40 Histograma de los valores del area lisosomial del hepatocito en los distintos grupos estudiados

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 2.7±2.1

COCAINA 6.3±3.2 p<0.01

EXTASIS 5.4±3.2 p<0.05

HEROINA 8.3±3.1 P<0.01

DENSIDAD LISOSOMIAL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS

0

5

10

GRUPOS

CONTROL

COCAINA

EXTASIS

HEROÍNA

AREA LISOSOMIAL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS

ESTUDIADOS

00,5

11,5

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

114

El FACTOR de FORMA LISOSOMIAL, mostró un incremento de valores en los grupos experimentales con una significatividad estadística de p<0.01 mostrando cifras de 0.85±0.16 en el grupo COCAINA, 0.91±0.16 del grupo EXTASIS y 0.92±0.15 del de HEROINA, en relación de 0.53±0.12 del grupo CONTROL. (Tabla XXVI y Fig. 41)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 0.533±0.122

COCAINA 0.855±0.160 p<0.01

EXTASIS 0.911±0.165 p<0.01

HEROINA 0.922±0.155 P<0.01

Tabla XXVI. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del FACTOR DE FORMA LISOSOMIAL en los distintos grupos estudiados

Fig. 41 Histograma de los valores del factor de forma lisosomial del hepatocito en los distintos grupos estudiados El AREA del RETICULO ENDOPLASMICO, DISMINUYÓ en los grupos experimentales COCAINA (8.28±3.78), EXTASIS (8.56±2.89) y HEROINA (5.56±2.34) con respecto al CONTROL (28.34±7.15), diferencias estadísticamente significativas (p<0.001). (Tabla XXVII y Fig. 42)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 28.345±7.154

COCAINA 8.281±3.785 p<0.001

EXTASIS 8.563±2.892 p<0.001

HEROINA 5.562±2.340 P<0.001

Tabla XXVII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística de la AREA DEL RETICULO ENDOPLASMICO en los distintos grupos estudiados

FACTOR DE FORMA LISOSOMIAL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS

GRUPOS ESTUDIADOS

0

0,5

1

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

115

Fig. 42 Histograma de los valores del area del retículo endoplásmico del hepatocito en los distintos grupos estudiados La DENSIDAD de RIBOSOMAS por campo, también disminuyó de forma estadísticamente significativa (p<0.001) con respecto al grupo CONTROL (32.53±6.52), en los grupos experimentales COCAINA con valores de 9.83±4.16, EXTASIS con medias de 9.71±3.67, y HEROINA con cifras de 6.24±3.89. (Tabla XXVIII y Fig. 43)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 32.53±6.52

COCAINA 9.83±4.16 p<0.001

EXTASIS 9.71±3.67 p<0.001

HEROINA 6.24±3.89 P<0.001

Tabla XXVIII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística de la DENSIDAD RIBOSOMIAL en los distintos grupos estudiados

Fig. 43 Histograma de los valores de la densidad risosomial del hepatocito en los distintos grupos estudiados La DENSIDAD de ROSETAS de GLUCOGENO observada por campo también disminuyó de una forma estadísticamente significativa (p<0.001) en los grupos experimentales COCAINA (7.61±2.21), EXTASIS (8.67±3.32) y HEROINA(6.21±3.12) en relación a los valores del grupo CONTROL que fueron de 24.34±8.23. (Tabla XXIX y Fig. 44)

AREA DEL RETICULO ENDOPLASMICO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS

GRUPOS ESTUDIADOS

0

10

20

30

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

DENSIDAD RIBOSOMIAL DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS

GRUPOS ESTUDIADOS

0

20

40

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

116

Tabla XXIX. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística de la DENSIDAD DE ROSETAS DE GLUCOGENO en los distintos grupos estudiados Fig. 44 Histograma de los valores de la densidad de rosetas de glucógeno del hepatocito en los distintos grupos estudiados

El AREA de la VACUOLA GRASA, sufrió un incremento estadísticamente significativo (p<0.01) en los grupos experimentales con respecto al grupo CONTROL (6.44±1.23). El grupo COCAINA tuvo cifras de 16.42±3.25, el grupo EXTASIS de 18.56±7.44 y el HEROINA de 16.18±7.45. (Tabla XXX y Fig. 45)

Tabla XXX. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del AREA DE LA VACUOLA GRASA en los distintos grupos estudiados

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 24.34±8.23

COCAINA 7.61±2.21 p<0.001

EXTASIS 8.67±3.32 p<0.001

HEROINA 6.21±3.12 P<0.001

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 6.44±0.23

COCAINA 16.42±3.25 p<0.01

EXTASIS 18.56±7.44 p<0.01

HEROINA 16.18±7.45 P<0.01 DENSIDAD ROSETAS DE

GLUCOGENO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS

ESTUDIADOS

0

10

20

30

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

RESULTADOS

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

117

Fig. 45 Histograma de los valores del area de la vacuola grasa del hepatocito en los distintos grupos estudiados El FACTOR de FORMA de la VACUOLA GRASA, no mostró valores con diferencias estadísticamente significativas en los grupos experimentales con respecto al CONTROL. (Tabla XXXI y Fig. 46)

GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.

SIGNIFICACION ESTADIST.

CONTROL 0.83±0.21

COCAINA 0.81±0.22 N.S.

EXTASIS 0.92±0.23 N.S.

HEROINA 0.93±0.22 N.S.

Tabla XXXI. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del FACTOR DE FORMA DE LA VACUOLA GRASA en los distintos grupos estudiados Fig. 46 Histograma de los valores del factor de forma de la vacuola grasa del hepatocito en los distintos grupos estudiados

AREA DE LA VACUOLA GRASA DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS

ESTUDIADOS

05

101520

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

FACTOR DE FORMA DE LA VACUOLA GRASA DEL

HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS

0,70,80,9

1

GRUPOS

CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA

DISCUSION

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

DISCUSION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

119

Existen numerosas aportaciones

bibliografícas, de los efectos de las

drogas de adicción a diferentes niveles y

muy especialmente en lo que respecta a

las repercusiones psicológicas, del

comportamiento del individuo e incluso

lo que representa el sujeto adicto en la

sociedad27,40,59,141

Las drogas de adicción tienen la

característica en la mayoría de las

ocasiones, independientemente de la

dependencia que desde el punto de vista

psicológico, conlleva al individuo, que

actúen a nivel orgánico, administrandose

por diferentes vías, al incorporarse al

organismo, y sufrir en este una

trasformación metabólica que

interacciona con el cuerpo humano44,98 .

Estos compuestos químicos, tratados

desde el punto de vista interactivo, como

otros medicamentos o drogas que por

diferentes motivos a veces terapéuticos

son administrados al individuo

enfermo47,48,63,134.

Por regla general las drogas se

administran en el drogadicto con una

serie de circunstancias especiales y

peculiaridades, como son la

incorporación esporádica inicial, la

continuidad de su administración el

progresivo incremento en cuanto a la

frecuencia de administración y también

de dosis161. Interactúan las drogas en

diferentes órganos y sistemas en algunos

casos con el efecto que las confieren su

carácter aditivo y en otras con el perfil de

su interacción metabólica70,165.

Órganos y vísceras y muy especialmente

sistema nervioso, riñón, pulmón y en

especial el hígado interactúan con los

compuestos químicos para su

degradación, asimilación o

eliminación109,112.

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

120

El hígado por otra parte es el complejo

metabólico de trasformación de

diferentes compuestos algunos propios

del organismo, otros ajenos al mismo e

incorporados de forma artificial y en la

célula hepática se modifica, alteran,

reconvierten o se eliminan125,128. Esta

función hepática hace que la víscera

juegue un papel fundamental en el

metabolismo de estas sustancias, pero la

administración continuada, progresiva y

la dosis elevada puede conllevar el daño

hepático y en ocasiones la destrucción

tanto orgánica como funcional del

mismo132,157 .

En la bibliografía, se han encontrado

algunas aportaciones, no en muy elevado

número, de las repercusiones que las

diferentes drogas puedan ocasionar en el

hígado78,139,154,168. En la mayoría de las

ocasiones relacionados con estados ya

muy deteriorados de la funcionabilidad

hepática y con interacciones de otros

fármacos, drogas o situaciones

patológicas que el estado de drogadicción

conlleva, habiéndose aportado la

información después de graves

alteraciones de la función hepática y

desde el punto de vista morfológico en

estados ya terminales, puesto que la

información se ha ido obteniendo de los

estudios hepáticos de muestras viscerales

procedentes en la mayoría de los casos

de autopsias35,52,64,170,187

Por otro lado también se pueden

considerar escasos los estudios realizados

a nivel experimental y muy

especialmente de las repercusiones que

el estado de drogadicción ocasionado por

los diferentes compuestos causaban, a

nivel de los órganos91,120. Siempre en

estos estudios se ha dado preferencia o

prioridad a la valoración de las

repercusiones orgánicas que tenían las

drogas a nivel del sistema nervioso y muy

especialmente el central.

El hígado es una víscera muy compleja

desde el punto de vista de la

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

121

funcionabilidad y también de su

organización estructural morfológica a los

distintos niveles ya sea histológico como

ultraestructural13

Las repercusiones que compuestos

extraños incorporados de una forma

continuada anómala y en cantidades

excesivas en muchas ocasiones

incrementadas de forma paulatina, sin

lugar a dudas, deben de repercutir tanto

a nivel de la funcionabilidad del

hepatocito como en la alteración de

estructuras, algunas extremadamente

sensibles a la agresión que a la corta o a

la larga también representaran un

menoscabo tanto funcional como

orgánico del individuo1,4,83

En muchas ocasiones las repercusiones

de diferentes situaciones ocasionadas por

compuestos foráneos en el cuerpo

humano no producen las alteraciones lo

suficientemente ostensibles para que

sean claramente evidenciadas en una

valoración subjetiva histológica o

ultraestructural celular22104, por lo que la

cuantificaciones de las posibles lesiones

se puede mostrar como un instrumento

fundamental que ponga en evidencia

estos cambios y lo que puede ser más

relevante que los objetive con una

valoración cuantitativa, por lo que la

morfometría se muestra como esencial

en este tipo de estudios con el fin de

poder constatar claramente las posibles

alteraciones que determinados

compuestos, y en el caso que nos afectan,

las drogas a nivel de un órgano

fundamental para el organismo como es

el hígado79,99,100 .

Desde el punto de vista metodológico, a

nivel experimental, se pueden utilizar

diferentes especies animales con

efectividad19,49 como el mono o la rata,

pero la utilización del ratón como modelo

experimental en la valoración de los

efectos de las drogas de adicción a nivel

hepático ha sido anteriormente

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

122

contrastada por otros autores y

demostrado la validez del mismo88,90,110

mostrándose como un animal manejable,

de bajo coste y adecuabilidad a la hora de

realizar las extrapolaciones de datos a la

especie humana84.

El ratón como animal de laboratorio se

nos ha mostrado en nuestro estudio

como idóneo, por su bajo precio, fácil

obtención, cómodo manejo y estabula-

ción y sobre todo por ser un animal uti-

lizado previamente por otros autores

para este tipo de estudios28,140

La edad de los animales utilizados, ha

sido la correspondiente al adulto joven,

con el fin de que la misma no interfiriera

en los resultados buscando un reactivo

biológico sano, joven en plena actividad

biológico con objeto que las

consecuencias de la aplicación de la droga

pudieran atribuirse exclusivamente a la

misma54

Desde el punto de vista metodológico, la

vía de administración elegida pasa

suministrar los diferentes tipos de droga,

puede ser discutida en consideración a

factores metabólicos, fisiopatológicos y

de eliminación de las mismas34. Se ha

seleccionado la intraperitoneal

intentando una vía de fácil absorción,

adecuada para todos los tipos de droga

estudiados, y que la misma no pudiera

interferir a nivel de la incorporación en el

organismo de los animales y que estas

pudieran realizar su acción a nivel

hepático182. Se ha de considerar que la vía

intraperitorneal no es utilizada de forma

standarizada para la aplicación de drogas

en el ser humano tanto a nivel

terapéutico como es situaciones de

drogadicción, pero este hecho no lo

hemos considerado relevante al valorar

que no interferiría en los resultados a

tenor de lo aportado en otros estudios

experimentales3,30

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

123

Las dosis utilizadas de las diferentes

drogas en el estudio corresponden a los

datos encontrados en la bibliografía en

relación a las tasas idóneas de introxica-

ción para obtener los niveles adecuados

que pudieran ocasionar daños y a la vez

pudieran permitir sobrevivir a los ani-

males106, siendo las recomendada la vía

intraperitoneal a dosis de 50 mg/kg para

el extasis, 125 mg/kg para la heroína y

50 mg/kg para la morfina en relación

con el peso corporal del animal.

Sobre los daños detectados de forma

general a nivel hepático tras la

administración de drogas,

Las alteraciones hepáticas reflejadas en la

bibliografía, se muestran poco

homogéneas, a veces no cincidentes y en

algunos casos contradictorias. Así

podíamos reseñar algunas informaciones

relevantes aportadas por diferentes

autores:

Se han detectado, por un lado, la

presencia de membranas intra-

citoplasmáticas, semejantes a las que

aparecen en los animales intoxicados por

alcohol, en organismos sujetos a

intoxicación con drogas, consideradas

como expresión de sufrimiento celular189 .

La explicación de este fenómeno estaría

en las vesículas grasas rodeadas de

formaciones membranosas tendrían su

origen en el retículo endoplásmico liso y

serían producto de transformaciones

metabólicas. En cambio la dieta grasa

crearía acúmulos lipídicos sin esta

estructura envolvente derivado de una

acumulación simple de grasas159.

El posible origen de determinadas

vesículas lipídicas, tras sufrimiento

celular del hepatocito, a partir de las

cisternas del retículo endoplásmico liso

ha sido apuntado por Novikof y

Eldestein126 Porta y cols136, Ma101 y

Rosenblum152, al encontrar las inclusiones

lipídicas intracelulares envueltas de una

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

124

membrana en todo semejantes a la del

retículo endoplásmico liso138

Las alteraciones detectadas en las

mitocondrias sobre todo a nivel de la

desestructurización celular y cambios de

la forma y tamaño descritos en el estudio

en los diferentes grupos experimentales,

fueron señalados por Trump y cols177 y

Cheville31, como respuesta a la lesión y

adaptación celular a la agresión. Según

Trump y cols177, la lesión celular de

hinchazon mitocondrial y condensación

de su interior es una lesión reversible. Sin

embargo según Cheville31, este tipo de

lesión la considera irreversible.

Las alteraciones de los lisosomas y el

incremento del número de las mismas en

nuestro estudio, fueron encontrados por

López y cols97, Arstilla y cols6 y

Petersen135, en sus investigaciones sobre

hígado graso. Parece ser que existe una

correlación entre la gravedad de la lesión

celular y la aparición de este tipo de

organelas y que están relacionadas con el

metabolismo lipídico14,135

En el trabajo de Finol y cols56 se presen-

tan alteraciones a nivel intracellular en

las muestras de las biopsia hepáticas

sobre todo en lo que concierne a los

retículos endoplásmico rugoso y liso, a

las mitocondrias, a los núcleos celulares

y tambien a los microvilli. Estos autores

tambien refieren la detección de

depósitos lipídicos intracelulares y el

incremento de vacuolas autofágicas,

demostrando que la cocaina es un

tóxico hepatocelular importante a nivel

hepático184.

Maruta y cols106 en 1999, en trabajos

realizados en ratas con extasis, heroina

y cocaina relaciona los daños histológi-

cos con las concentraciones séricas de

drogas y estudian las repercusiones me-

diante la utilización de microscopía opti-

ca a nivel de diferentes órganos entre

ellos el hígado encontrando vacuoliza-

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

125

ción en el espacio centrolobulillar con

infiltrados eosinófilos que en algunos

animales evolucionan a necrosis en el

grupo tratado con heroína que en

ningún caso apareción en el grupo de

extasis . El componente inflamatorio

tenía una mayor intensidad

coincidiendo con la mayor nivel de

droga149,

A nivel hepático en los diferentes ani-

males de los grupos tratados, en los

animales tratados con cocaina las lesio-

nes histopatológicas fueron menores y

los autores lo relacionan y justifican con

una metabolización más rápida de esta

droga frente a la heroína y éxtasis141.

Powell y cols139 en 1994 aportan datos

de la inducción en animales de necrosis

perizonal y periportal que estos autores

atribuyen el daño detectado a la utiliza-

ción de dosis altas de esta droga en sus

estudios que concretan en la aparición

de degeneración de los hepatocitos de

la región periportal del lobulillo hepático

que se centran en los estudios con mi-

croscopía óptica en lo que definen como

gran desorganización del retículo en-

doplásmico considerando que existen

diferentes mecanismos para el desarro-

llo de los daños y que la repercusión

fundamental es la presencia de diferen-

tes componentes enzimáticos a nivel

sérico posiblemente por su liberación

por la destrucción celular considerándo-

los como indicadores del daño hepático

y en especial las aspartato y alamina

amino transferrasas así como los niveles

de citochrome P-450 o FAD-mono-

oxigenase cytochrome P-450 y FAD-

mono-oxigenase163,164.

Cascales y colaboradores28 en 1994 pub-

lican un trabajo para valorar el daño

hepático por sus repercusiones

bioquímicas tras la administración de

cocaina en el ratón. En los estudios

histopatológicos también detectan ne-

crosis periportal y perivenosa a nivel del

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

126

parénquima hepático aunque en la

valoración crónica de los animales y una

vez suspendida la intoxicación parece

detectarse una respuesta de

regeneración postnecrótica muy

especialmente si estos animales se les

administraba fenobarbital. Esta

regeneración se demostraba

fundamentalmente por la presencia de

células mitóticas33.

Powell139 señala que tras la

administración de cocaína a ratones que

durante el desarrollo del daño hepático

no se alteran los ribosomas hepáticos y

que la regeneración del hígado tras el

cese de la intoxicación se muestra su

regeneración con la normalización de

los patrones bioquímicos.

Wanless y cols187 no encuentran en los

pacientes serios daños en la histopato-

logía hepática tras la administración de

cocaína y que sólo es posible detectar

ciertas alteraciones de hiperplasia del

retículo endoplásmico pero nuca necro-

sis celular. Sin embargo detectaron en

las biopsias de os pacientes cierto grado

de esteatosis en los hepatocitos de las

muestras analizadas. Desde el punto de

vista funcional detectaron alteraciones

de los enzimas hepáticos sobre todo

descensos de la aminotransferasa con

alteraciones del tiempo de

protrombina18

Copeland35 a nivel clínico no detecta en

los pacientes estudiados grandes

alteraciones de soporte hepático que

sugieran hepatotoxicidad.

Gottfried65 demuestra que la cocaína es

un potente hepatotóxico a nivel del

ratón demostrando desde el punto de

vista ultraestructural grandes

dilataciones de las estructuras del

retículo endoplásmico rugoso a nivel de

los hepatocitos centrolobulares.

Además encontró serias alteraciones en

las membranas mitocondriales con la

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

127

dilatación del retículo endoplásmico

rugoso. Alteraciones en los hepatocitos

centrolobulares preceden a la muerte

celular. Se sugieren por los hallazgos

encontrados que la hepatotoxidad por

cocaína esta soportada en trastornos de

la peroxidación lipídica.

Trigueiro de Araujo y cols176 estudian

desde el punto de vista histopatológico

la acción de la heroína a nivel de sinu-

soides centrolobulares de biopsias

hepáticas de pacientes. Encuentra en

estos pacientes engrosamiento de la

pared de las células endoteliales de los

sinusoides e hipertrofia y fibrosis del

espacio de Disse. En pacientes adictos

alteraciones vasculares se encontraban

de forma constante. Consideraron que

existía un incremento funcional de la

célula sinusoidal.

Weller y cols188 analizaron la función

hepática en pacientes adictos a la

heroína mediante test funcionales y

estudios histológicos, detectaron un

aumento de enzimas como la aspartato

transaminasa. Las biopsias hepáticas

mostraron patrones de hepatitis crónica

con infiltrado inflamatorio periportal,

cambios grasos y la presencia de células

sinusoidales prominentes. En los

estudios ultraestructurales detectaron

estructura tubulares trilaminares

intracitoplasmáticas y membranas

destruidas junto con un retículo

endoplásmico dilatado. Sin embargo

estos autores apuntaron la posible

participación de otros factores sobre

todo infecciosos en el desarrollo de las

lesiones77,78.

Powel y cols139 en 1995 aportan datos

de la inducción en animales de necrosis

perizonal y periportal que estos autores

atribuyen el daño detectado a la utiliza-

ción de dosis altas de esta droga en sus

estudios que concretan en la aparición

de degeneración de los hepatocitos de

la región periportal del lobulillo hepático

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

128

que se centran en los estudios con mi-

croscopía optica en lo que definen como

gran desorganización del retículo en-

doplásmico considerando que existen

diferentes mecanismos para el desarro-

llo de los daños y que la repercusión

fundamental es la presencia de diferen-

tes componentes enzimáticos a nivel

sérico posiblemente por su liberación

por la destrucción celular considerándo-

los como indicadores del daño hepático

y en especial las aspartato y alamina

amino transferrasas así como los niveles

de citochrome P-450 o FAD-mono-

oxigenase cytochrome P-450 y FAD-

mono-oxigenase89

Weller y cols188 en 1984 señalan en su

artículo la presencia de alteraciones

funcionales hepáticas en los apacientes

drogadictos y alteraciones histológicas.

Los pacientes heroinómanos

frecuentemente una elevación de la

aspartato hidrogenasa. También

apuntan las interacciones que

infecciones concomitantes tan

frecuentes en estos enfermos pueden

suceder a nivel hepático. De esta forma

los patrones de hepatitis crónica

detectados en la biopsias de una serie

de enfermos no pueden determinarse

claramente su origen de abuso de

drogas o infección vírica que la totalidad

de los enfermos presentaban2.

Elsharkawy y cols53 en el año 2005, se-

ñalan que la fibrosis hepática es una

alteración que aparece frecuentemente

cuando confluyen diversas causas como

son la drogadicción, alcoholismo o in-

fección vírica hepática. La fibrosis es un

proceso patológico progresivo que los

miofibroblastos hepáticos responden

con proliferación ante la agresión a la

víscera con la sustitución del

parénquima por tejido conjuntivo con

especial predominio del colágeno. Hasta

hace poco tiempo se ha creído que este

proceso es irreversible, sin embargo

estudios experimentales y evidencia

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

129

clínica señala que puede evolucionar

recuperando situaciones iniciales. La

reversión del proceso fibrótico se

acompaña con la eliminación de las

células estrelladas hepática por apopto-

sis. Sin embargo recientes estudios en

roedores se ha tratado de inducir la

presencia de estas células para inducir la

desaparición de la fibrosis. También

habría que considerar el papel regulador

que juegan factores del crecimiento

como NGF, IGF-1, TGFbeta, receptores

de muerte celular como TRAIL y FAS),

componentes y reguladores de la matriz

extracelular como integritas, colágeno,

matriz de metaloproteasas, y sus tejidos

inhibidores y proteinas de transducción

o factores de transcripción como

Rho/Rho kinase, Jun N-terminal Kinase

(JNK), IkappaKinase (IKK), NF-kappa B).

Se empieza a conocer el potencial de

agentes farmacológicos tales como

gliotoxina, sulfasalazina, benzodiazepina

ligandos, curcumina and tanshinona que

inducen la apoptosis a las celulas

estrelladas referenciadas para inducir la

apoptosis y ser utilizadas

terapéuticamente.

Montiel-Duarte y cols115 en el 2002, se-

ñalan la hepatotoxidad del éxtasis aun-

que sus mecanismo de acción es todavía

pobremente conocido aunque se sospe-

chan mecanismos parecidos a lo que

suceden con neuronas serotoninergicas

o dopaminergicas. Sin embargo apuntan

los autores que no existe evidencia de

fenómenos de apoptosis en el hígado

inducidos por el extasis aunque si que se

han evidenciado a nivel experimental en

hepatocitos de rata aislados y en células

d el alinea estrellada hepática como

muestra la condensación cromatínica

por acumulación de fragmentos de

nucleosomas en el citoplasma celular37.

Beitia y cols12 en el año 2000 muestran

en su trabajo experimental que el éxta-

sis administrado a ratas incrementan los

niveles de triglicéridos y colesterol e

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

130

incrementan la actividad enzimática. De

la misma forma detectan un descenso

de los niveles de no detectan cambios

en la peroxidación lipídica y eran

onservadas células estrelladas

hepáticas. En contraste la

administración de extasis produce

alguna evidencia de stress oxidativo.

Ellis y cols52 en 1996 señalan que

drogadicción con éxtasis produce en

pacientes daño hepático con

rabdomiolisis y evidencia clara desde el

punto de vista bioquímico de daño

hepático. Desde el punto de vista his-

tológico detectan microvesiculas grasas

a nivel hepático con colestasis y colapso

masivo lobular.

Khakoo y cols86 en 1995 insisten el la

relación de la drogadicción con éxtasis y

la presencia de fibrosis hepática.

De forma genérica, Passarino y cols132

en 2005 señalan que las drogas de for-

ma genérica producen esteatosis hepá-

tica en el 66.5 % de los pacientes estu-

diados, se encuentra signos hepatitis en

el 64.5 % de los enfermos y sobre todo

las mujeres aunque no se puede concre-

tar la relación causa efecto de las drogas

sobre las alteraciones hepática pudién-

dose deberse estas a la patología con-

comitante195,196.

Considerar que en el trabajo de Finol y

cols56, se presentan alteraciones a nivel

intracelular en las muestras de las biop-

sias hepáticas sobre todo en lo que con-

cierne a los retículos endoplásmico ru-

goso y liso, a las mitocondrias, a los

núcleos celulares y también a los micro-

villi. Estos autores también refieren la

detección de depósitos lipídicos intrace-

lulares y el incremento de vacuolas au-

tofágicas, demostrando que la cocaina

es un tóxico hepatocelular importante a

nivel hepático90

En relación a nuestros resultados,

considerando los datos ofertados en la

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

131

bibliografía, se podrían realizar una serie

de comentarios y valoraciones, con

respecto a cada apartado del conjunto de

datos obtenido:

La más alta tasa de mortalidad recogida

en el estudio corresponde al grupo tra-

tado con extásis seguido por el de

heroína y menor el de cocaína. Se puede

considerar que la mortalidad se debe

concretamente a la actuación en el

organismo de la droga teniendo en

consideración que la manipulación de

los animales ha sido mínima y compara-

ble a la sufrida por el grupo control

donde no se ha registrado ningún

fallecimiento. Es posible que las dosis de

drogas utilizadas haya sido muy alta y en

periodos relativamente cortos de

tiempo, pero se han considerado

óptimas a tenor de los pocos datos

recogidos en la bibliografía para poder

provocar lesiones a nivel del órgano di-

ana que ha sido el hígado. Hay que

considerar que los animales utilizados

en el estudio han sido sanos libres de

patología y comorbilidades que existen

de forma muy frecuente en los

individuos de la especie humana que se

encuentran frecuentemente afectados

de procesos infecciosos como hepatitis,

sida o otras de asentamiento hepático

como la cirrosis. Además en muchas

ocasiones estos individuos se

administran varias drogas a la vez lo que

interaccionan e incrementan sus

efectos165.

La evolución ponderal de los animales

reflejo que la administración de las

diferentes drogas en los animales en los

grupos experimentales impedía el

adecuado incremento de peso que por

otra parte si que se verifica en el grupo

control. Independientemente de la

actuación de las drogas posiblemente,

aunque no se haya constatado en el

estudio, se deba a una disminución de la

ingesta por parte de los animales174.

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

132

Si que han existido cambios en los

animales experimentales desde el punto

de vista físico. Estos animales han mos-

trado un aspecto a veces similar al de

los drogadictos de la especie humana

con piel deslustrada pero con alguna

que otra alteración física como ha sido

las detectadas a nivel de la cola. Su

comportamiento y reacciones también

se ha visto alterada mostrándose en

muchas ocasiones irritables, nerviosos o

agresivos situación que también

coinciden en muchas ocasiones a la de

adictos a la drogadicción de la especie

humana175.

A nivel abdominal no se han detectado

grandes cambios ni tan siquiera a nivel

hepático por lo que la intoxicación no se

ha reflejado a nivel visceral

macroscópico. Sin embargo si que ha

repercutido sobre la situación del tubo

digestivo que se ha encontrado vacío y

libre de contenido posiblemente por la

restricción de la ingesta191.

Insistiendo en la utilización del ratón

como animal de laboratorio y reactivo

biológico de nuestro estudio, conside-

ramos que ha sido adecuado teniendo

en cuenta la similitud biológica del ratón

con la especie humana, los requerimien-

tos técnicos para desarrollar el modelo y

diseño experimental que no necesitaba

animales de gran tamaño y sobre todo

de experiencias previas para valorar a

nivel experimental los efectos de las

drogas de adicción aunque no muy nu-

merosos en su conjunto la mayoría se

han realizado en el ratón, independien-

temente que el ratón se considera idó-

neo en muchas investigaciones por su

fácil obtención156

Las dosis utilizadas para intoxicar a los

animales es difícil de precisar para la

obtención de la información sobre la

hepatoxicidad de las diferentes drogas.

La administración de dosis bajas podrían

no llegar a producir alteraciones y dosis

altas por el contrario provocar

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

133

situaciones irreversibles para los

animales. Los escasos estudios previos

experimentales con estas drogas

podrían orientar de las dosis más

adecuadas para desarrollar el estudio

sobre todo teniendo en cuenta que

algunos de ellos relacionaban ya algunas

alteraciones histopatológicas con las

funcionales con parámetros bioquímicos

y sobre todo valoraban los niveles

séricos alcanzados tras su

administración así como la aportación

de datos sobre su farmacocinética y

farmacodinámica. Las dosis utilizadas de

las diferentes drogas en el estudio

corresponden a los datos encontrados

en la bibliografía en relación a las tasas

idóneas de intoxicación para obtener los

niveles adecuados que pudieran

ocasionar daños y a la vez pudieran

permitir sobrevivir a los animales106

(Maruta y cols, 1999), siendo las

recomendada la vía intraperitoneal a

dosis de 50 mg/kg para el extasis, 125

mg/kg para la heroína y 50 mg/kg para

la morfina en relación con el peso cor-

poral del animal.

La vía de administración podría ser otro

punto de discusión teniendo en conside-

ración que habría que buscar la más si-

milar a la que los drogadictos utilizan. La

variabilidad de la utilización de la vía por

estos enfermos drogodependientes y las

limitaciones de la especie animal

utilizada hacían recomendable la

utilización de la vía intraperitoneal que

aunque no utilizada por la especie hu-

mana si que tiene muchos nexos de

unión desde el punto de vista de

incorporación del fármaco al organismo

con el respecto de parenterales y muy

especialmente la intravenosa. Es por

otra parte la vía mas frecuentemente

utilizada en los estudios farmacológicos

para la valoración de drogas

terapéuticas185,198.

La morfometría es una técnica de inves-

tigación que objetiva la evaluación de

las alteraciones desarrolladas liberándo-

Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,

ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

134

la de interpretaciones subjetivas por

parte del observador-investigador. Es

una técnica de desarrollo en las últimas

décadas que no se ha utilizado

profusamente posiblemente por el

desconocimiento de su existencia por

parte de muchos investigadores no

familiarizados con la histopatología y la

necesidad de disponer de los

dispositivos técnicos adecuados. Sin

embargo la cuantificación de las

lesiones oferta una información

fácilmente interpretable libre de

subjetividad y que puede ser pasada por

el tamiz del tratamiento matemático a

través de la aplicación de la

bioestadística127,146.

Los hallazgos a nivel histológico a nivel

experimental en la mayoría de las

ocasiones coincidía con la escasa

información recogida en la bibliografía

desde el punto de vista histopatológico.

Llama la atención que en todos los

grupos experimentales las drogas

aunque diferentes han desarrollado

alteraciones histológicas hepáticas por

lo que las tres ensayadas se pueden

considerar en mayor o menor grado

como hepatotóxicas. La cocaína provoca

en nuestro estudio alteraciones a nivel

de los hepatocitos centrolobulares.

También se detectaron imágenes de

necrosis en el espacio portal169.

El extasis a diferencia de la anterior dro-

ga desarrolla las necrosis a nivel centro-

lobular, induce fibrosis a nivel del

parénquima hepático y por otra parte

provoca coagulaciones intravasculares58.

La heroína también induce la formación

de acúmulos fibrosos con rupturas del

espacio interhepatocítico y por otra par-

te se han podido detectar infiltrados

inflamatorios 45

Maruta y cols22 en 1999, en trabajos

realizados en ratas con éxtasis, heroina

y cocaína relaciona los daños histológi-

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INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

135

cos con las concentraciones séricas de

drogas y estudian las repercusiones me-

diante la utilización de microscopía opti-

ca a nivel de diferentes órganos entre

ellos el hígado encontrando vacuoliza-

ción en el espacio centrolobulillar con

infiltrados eosinófilos que en algunos

animales evolucionan a necrosis en el

grupo tratado con heroína que en

ningún caso apareció en el grupo de

éxtasis . El componente inflamatorio

tenía una mayor intensidad

coincidiendo con la mayor nivel de

droga194

A nivel hepático en los diferentes ani-

males de los grupos tratados con dro-

gas. En los animales tratados con cocaí-

na las lesiones histopatológicas en nues-

tro studio fueron menores y los autores

lo relacionan y justifican con una meta-

bolización mas rápida de esta droga

frente a la heroína y éxtasis181.

Volver a considerar que en la revisión

documental realizada sobre el tema, las

aportaciones se pueden considerar es-

casas a pesar de la relevancia del pro-

blema, la alta incidencia y prevalencia

de la situación. Los trabajos detectados

no son muy numerosos y menos en las

últimas décadas. De la misma forma la

información de las repercusiones a nivel

orgánico se pueden considerar como

“escasas” no contemplando los aspectos

histopatológicos que se podrían

considerar como muy relevantes. Los

trabajos experimentales no se pueden

considerar numerosos y posiblemente

este hecho se puede relacionar con la

dificultad que en muchas ocasiones

existen para obtener la droga para la

intoxicación. En los clínicos la

información se podría considerar como

muy heterogénea aportando

información dispersa con la expresión

de aspectos psicológicos, bioquímicos,

pocos histopatológicos y mas en

consonancia con marcadores viscerales

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INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

136

pero que aportan una información en

muchas ocasiones inconexas140.

Los hallazgos ultraestructurales que se

han detectado en el grupo tratado con

cocaína las alteraciones se han centrado

a todos los niveles, incluido el núcleo

pero en especial los retículos

endoplásmicos rugosos y liso, las

alteraciones mitocondriales y cambios

en la densidad ribosomial y aparición de

vacuolas autofágicas178.

Tras el tratamiento con estasis las lesio-

nes se centraron en imágenes de apop-

tosis, descenso de las rosetas de glucó-

geno hepático y rabdomiolisis 92

La heroína a nivel ultraestructural en

nuestro estudio centro sus daños a nivel

de los sinusoides hepáticos y cierta fi-

brosis alrededor de estos vasos.

Debería de existir una correlación entre

las alteraciones morfológicas y las

bioquímicas y también desde el punto

de vista funcional lo que conllevaría que

lesiones morfológicas tuvieran su

repercusión a nivel de la función

hepática por un lado y por la relevancia

de esta víscera también con

repercusiones a otros niveles desde el

punto de vista metabólico180.

Por último considerar, que un estudio

experimental se realiza las valoraciones

causa-efecto en unas situaciones idea-

les de estudio y en animales sanos. Las

circunstancias de desarrollo de lesiones

a nivel de los diferentes órganos en los

pacientes adictos a la drogadicción, son

diferentes a las situaciones ideales de

experimentalidad, existiendo en los

primeros una variabilidad que hacen

que las repercusiones detectadas tanto

a nivel clínico, en su repercusión sin-

tomática y su expresión en las biopsias

hepáticas como en las autopsias, hacen

que circunstancias como diferente adic-

ción, pautas de drogadicción, tipos de

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

INTRODUCCION

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

137

drogas, combinación de diferentes dro-

gas, situación previa clínica de los dro-

gadictos, edad, patología concomitante,

hacen que nos muestren las repercusio-

nes no de una forma homogénea y sin

poder claramente discernir cuales son

los efectos puntuales de cada droga, la

correspondencia de dosis con el daño

celular y otros aspectos, por lo que se

hace imprescindible estudios que com-

binen la información de ambos aspectos

que nos delimiten claramente las reper-

cusiones de cada droga en cada órgano,

mostrando la importancia y entidad de

las mismas.

INTRODUCCION

CONCLUSIONES

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ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________

CONCLUSIONES

Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral

139

1. Éxtasis y heroína son las drogas que mayor tasa de mortalidad han presentado en el estudio

2. El grupo de heroína el que mayor pérdida de preso ha mostrado

3. Las alteraciones evaluadas a nivel microscópico han sido muy poco definidas, en especial en los animales tratados con extasis y heroína, y poco relevantes en el de cocaína

4. Las valoraciones morfométricas en los grupos experimentales a nivel del hepato-cito no han sido muy relevantes. Los vasos sufrieron aumento del calibre en to-dos los grupos experimentales, lo que sugiere cierto grado de vasodilatación vas-cular. Los canalículos biliares y otras estructuras permanecieron con valores normales

5. Las alteraciones ultraestructurales hepatocíticas se han mostrado con destruc-ciones de las organelas, como posible reflejo del sufrimiento celular. Estas alte-raciones han sido más relevantes en el grupo tratado con heroína.

6. Se asegurar que las alteraciones a nivel hepático, no han sido excesivamente re-levantes en el estudio, en parte, alejadas a las aportadas en algunos estudios clínicos, por lo que consideramos que en estos últimos se han sumado otra serie de factores potenciadores.

7. Como valoración final, podemos asegurar por los datos derivados del estudio, que ha sido la heroína la droga que mayores daños ha producido a nivel del hígado seguido del extasis y de la cocaína.

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