Defensa final r vegas

Laboratorio de Entomología "Herman Lent"

1

DefensaDefensa

Trabajo Especial de Grado

R. Vegas


2

Tutor: Tutor: Dr. Elis Dr. Elis Aldana.Aldana.

Jurado: Prof. Elis Aldana.

Prof. Elsa Nieves.

Prof. Laura Almeida.

Prof. Maritza Alarcón.

Laboratorio de Entomología “Herman Lent”Laboratorio de Entomología “Herman Lent”

Universidad de Los AndesUniversidad de Los Andes

Mérida - VenezuelaMérida - Venezuela

Determinación de respuestas no condicionadas en

Rhodnius proxilus Stål 1859, en condiciones de

laboratorio.

Determinación de respuestas no condicionadas en

Rhodnius proxilus Stål 1859, en condiciones de

laboratorio.


3

Rhodnius prolixusRhodnius prolixus

Principal Vector en Venezuela.

Asociación al domicilio humano.

Estudios del comportamiento alimenticio.


4

Comportamiento alimenticioComportamiento alimenticio

R. prolixus

Fisiología y Ecología sensorial

Psicología del Aprendizaje

Comportamiento

La orientación como respuesta innata

Categorías del aprendizaje:•No asociativo

•Asociativo


5

Hipótesis del TrabajoHipótesis del Trabajo

El comportamiento de búsqueda de alimento en R. prolixus revela respuestas innatas que pueden ser modificadas por la experiencia.


6

Objetivo GeneralObjetivo General

Estudiar las respuestas locomotoras y de orientación para la búsqueda de la fuente de alimentación en R. prolixus, en condiciones de laboratorio.


7

Objetivos EspecíficosObjetivos Específicos

Determinar la existencia de aprendizaje asociativo frente a estímulos de temperatura y olor.

Determinación del patrón locomotor de orientación frente al antebrazo humano como estímulo incondicionado.


8

Materiales y métodosMateriales y métodos


9

Material biológicoMaterial biológico

Adultos de R. prolixus.

Alimentados sobre gallina (Gallus gallus domesticus), mantenidos a 28 – 30 ºC y 65 – 70 %HR.

15 a 21 días de ayuno hasta el momento de los ensayos.


10

Test de Adquisición – Extinción.

Test de Adquisición – Extinción.


11

Test Adquisición - ExtinciónTest Adquisición - Extinción

Alimentador artificial de insectos hematófagos, descrito por Aldana et al. (2005).


12

Test de Adquisición-Extinción.Test de Adquisición-Extinción.

Estímulo no condicionado (EI): 36ºC.

Estímulo condicionado (EC): – Olor de Orina de Mapache

– Olor de Cebo de Ciervo.

6cm5cm

7cm

50cc


13

Test de Adquisición-Extinción.Adquisición

Test de Adquisición-Extinción.Adquisición

24 ensayos EC-EI (1 al 24) de 2 min.

c/u

Frecuencia de aproximación:

24 ensayos EC-EI (1 al 24) de 2 min.

c/u



14

Test de Adquisición-Extinción.Extinción

Test de Adquisición-Extinción.Extinción

24 ensayos EC-EI (24 al 48) de 2

min. c/u


24 ensayos EC-EI (24 al 48) de 2

min. c/u



15

Test de OrientaciónTest de Orientación


16

Test de OrientaciónTest de Orientación

Estímulo atrayente: Antebrazo humano.

El cuadrante de posición en un instante será aquel donde se encuentra el extremo anterior de la cabeza.


17

Test de OrientaciónTrayectoriasTest de OrientaciónTrayectorias

1 2 3 4

5 6 7 8

9 10 11 12

13 14 15 16

17 18 19 2021 22 23 24

1111

11 22 33 44

55 66 77 88

99 1010 1212

1313 1414 1515 1616

1717 1818 1919 2020

2121 2222 2323 2424


18

ResultadosResultados


19

Test Adquisición – Extinción Cebo de Ciervo (EC)Test Adquisición – Extinción Cebo de Ciervo (EC)

0,0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

1,0

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011121314151617181920212223 24252627282930313233343536373839404142434445464748

Ensayo

Fre

cu

en

cia

de a

pro

xim

ació

n

Olor Cebo de Ciervo (EC) + 36ºC (EI)

Temperatura 36ºC (EI)

Temp. ambiente (21-23ºC)

Temp. ambiente + olor Cebo de Ciervo (EC)

Figura 2.1. Frecuencia de aproximación de Rhodnius prolixus durante la fase de adquisición y extinción con cebo de ciervo como EC y la temperatura como EI.


20

Test Adquisición – Extinción Orina de Mapache (EC)Test Adquisición – Extinción Orina de Mapache (EC)

0,0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

1,0

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10111213 1415161718 1920212223 242526 2728293031 3233343536 37383940 4142434445 464748

Ensayo

Fre

cu

en

cia

de

ap

roxim

ac

ión

Olor Mapache (EC)

Temp. 36ºC (EI)

Temp. ambiente (21-23ºC)

Temp. ambiente con olor Mapache

Figura 2.2. Frecuencia de aproximación de Rhodnius prolixus durante la fase de adquisición y extinción con orina de mapache como EC y la temperatura como EI.


21

11

1 2 3 4

5 6 7 8

9 10 12

13 14 15 16

17 18 19 20

21 22 23 24

Test OrientaciónTest Orientación

AA BB

CC

EE FF

DD


22

Test de OrientaciónAntebrazo humano, sin fragancia.Test de OrientaciónAntebrazo humano, sin fragancia.

0,00

0,05

0,10

0,15

0,20

0,25

0,30

0,35

0,40

0,45

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A1

A2

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A10

A11

B1

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C1

C2

C3

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C5

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D10

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D14

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D17

E1

F1

Trayectoria

Fre

cuencia

de a

pro

xim

ació

n

Figura 3.1. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes enumerados

Figura 3.4. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes de letras

0,00

0,05

0,10

0,15

0,20

0,25

0,30

0,35

0,40

0,45

0,50

Trayectoria

Fre

cu

en

cia

de

ap

rox

ima

ció

nA, C, F

A, D, F

AB, C, E

B, CD, E

A, C, E

B, D, F

A, CD, F

B, C, E

B, D, E

AB, D, E

B, D, EF

AB, D, F

B, CD, F

B, CD, EF

AB, CB, E

AB, D, EF

AB, D, F

A, C, EF


23

Test de OrientaciónAntebrazo con fragancia AlmizcleTest de OrientaciónAntebrazo con fragancia Almizcle

0,00

0,05

0,10

0,15

0,20

0,25

0,30

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A1

A10

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A27

B3

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C9

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D1

D2

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D21

E1

E2

Trayectoria

Fre

cu

en

cia

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ap

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ima

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n

0,00

0,05

0,10

0,15

0,20

0,25

0,30

0,35

0,40

0,45

0,50

Trayectoria

Fre

cu

en

cia

de

ap

rox

ima

ció

nA, C, F

A, D, F

AB, C, E

B, CD, E

A, C, E

B, D, F

A, CD, F

B, C, E

B, D, E

AB, D, E

B, D, EF

AB, D, F

B, CD, F

B, CD, EF

AB, CB, E

AB, D, EF

AB, D, F

A, C, EF

Figura 4.1. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano fragancia almizcle a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes enumerados

Figura 4.2. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano fragancia almizcle a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes de letras


24

Test de OrientaciónAntebrazo con fragancia RudaTest de OrientaciónAntebrazo con fragancia Ruda

0,00

0,05

0,10

0,15

0,20

0,25

0,30

0,35

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A1

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A19

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B6

B9

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D1

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D9

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D21

D22

D23

D24

E3

E4

F2

F3

F4

F5

G1

Trayectoria

Fre

cu

en

cia

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ap

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ació

n

0,00

0,05

0,10

0,15

0,20

0,25

0,30

0,35

0,40

0,45

0,50

Trayectoria

Fre

cu

en

cia

de

ap

rox

ima

ció

nA, C, F

A, D, F

AB, C, E

B, CD, E

A, C, E

B, D, F

A, CD, F

B, C, E

B, D, E

AB, D, E

B, D, EF

AB, D, F

B, CD, F

B, CD, EF

AB, CB, E

AB, D, EF

AB, D, F

A, C, EF

Figura 5.1.Figura 5.1. Frecuencia de aproximación de Frecuencia de aproximación de R. prolixusR. prolixus al antebrazo al antebrazo humano fragancia ruda a través de las diferentes trayectorias descritas humano fragancia ruda a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes enumerados por cuadrantes enumerados

Figura 5.2. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano fragancia ruda a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes de letras


25

Discusión de los resultados

Discusión de los resultados

1) Test Adquisición – Extinción

2) Test de Orientación


26

Test Adquisición - ExtinciónTest Adquisición - Extinción

Falta de estudios de aprendizaje en insectos hematófagos.

Alonso et al. (2003).

Triatominos y los paradigmas del aprendizaje.


27

TestAdquisición - ExtinciónTestAdquisición - Extinción

Sulbarán (2005).

No se encontraron evidencias de aprendizaje asociativo en R. prolixus.

Números de ensayos

Intensidad del estímulo


28

TestAdquisición - ExtinciónTestAdquisición - Extinción

Intervalo de tiempo de exposición de EI – EC

Mientras más corto, mayor es la asociación

Intervalo entre ensayos


29

Lecciones para el futuroLecciones para el futuro


30

Qué funcionó bienQué funcionó bien

Memoria pre-imagal con los olores almizcle, cebo de ciervo u orina de mapache (Sulbarán, 2005).

Temperatura 36ºC (EI).


31

TestOrientaciónTestOrientación

Se evidenció un patrón de orientación del insecto hacia el antebrazo humano, revelado por dos trayectorias de aproximación con frecuencias superiores a 0,10 (B,D,F 0,36 y A,C,E 0,43) y además ocho trayectorias más con valores inferiores a 0,10.


32

TestOrientaciónTestOrientación

Trayectorias A,C,E y B,D,F

Trayectoria A,B,D,F0,00

0,05

0,10

0,15

0,20

0,25

0,30

0,35

0,40

0,45

0,50

Trayectoria

Fre

cu

en

cia

de a

pro

xim

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n

A, C, F

A, D, F

AB, C, E

B, CD, E

A, C, E

B, D, F

A, CD, F

B, C, E

B, D, E

AB, D, E

B, D, EF

AB, D, F

B, CD, F

B, CD, EF

AB, CB, E

AB, D, EF

AB, D, F

A, C, EF

0,00

0,05

0,10

0,15

0,20

0,25

0,30

0,35

0,40

0,45

0,50

Trayectoria

Fre

cu

en

cia

de

ap

roxim

ació

n

A, C, F

A, D, F

AB, C, E

B, CD, E

A, C, E

B, D, F

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B, C, E

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AB, D, E

B, D, EF

AB, D, F

B, CD, F

B, CD, EF

AB, CB, E

AB, D, EF

AB, D, F

A, C, EF

0,00

0,05

0,10

0,15

0,20

0,25

0,30

0,35

0,40

0,45

0,50

Trayectoria

Fre

cu

en

cia

de a

pro

xim

ació

n

A, C, F

A, D, F

AB, C, E

B, CD, E

A, C, E

B, D, F

A, CD, F

B, C, E

B, D, E

AB, D, E

B, D, EF

AB, D, F

B, CD, F

B, CD, EF

AB, CB, E

AB, D, EF

AB, D, F

A, C, EF


33

TestOrientación (Estudios Futuros)TestOrientación (Estudios Futuros)

Estas evidencias señalan un efecto sobre la fisiología sensorial en R. prolixus de las fragancias almizcle o ruda, y dan inicio a un nuevo tema de estudio de la fisiología de los receptores del insecto, que por escapar a los alcances del presente trabajo, no profundizaremos en el mismo.

Las sustancias almizcle y ruda para la realización de estudios futuros enfocados en la fisiología sensorial.

Consideración de estas fragancias como posible medida, en estudio, para el empleo de control vectorial de triatominos; sustancias no toxicas para el ser humano.


34

Conclusiones (Test Adquisición – Extinción)Conclusiones (Test Adquisición – Extinción)

No se hallaron evidencias de Condicionamiento Clásico en R. prolixus, con 36 ºC como EI y los olores orina de mapache y cebo de ciervo como EC.

La temperatura a 36 ºC demostró ser un EI efectivo para evocar la extensión de la probóscide y aproximación a la fuente alimenticia como Respuesta Incondicionada (RI) en R. prolixus.

Los olores empleados como EC, no evocan por si solos la RI, podrían ser empleados en estudios futuros de aprendizaje y comportamiento de orientación.


35

Conclusiones (Test de Orientación)Conclusiones (Test de Orientación)

El sistema experimental empleado en el test de orientación resultó ser eficiente para revelar las trayectorias de aproximación del insecto a un atrayente natural como el antebrazo humano en condiciones de laboratorio.

Los fragancias almizcle y ruda, demostraron tener

efecto sobre la orientación de R. prolixus.


36

Preguntas y comentariosPreguntas y comentarios

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