Curso Aseguramiento de Calidad de Los Resultados Abril-mayo 2014

8/9/2019 Curso Aseguramiento de Calidad de Los Resultados Abril-mayo 2014

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CURSO TALLERASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD

DE LOS ENSAYOS

Bióloga Glo ri a Es tu p iñán

Quím ico Edgar d Nin a

ABRIL-MAYO 2014

Oficina Académica de Extensión y Proyección Social.UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA

LA MOLINA


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INTRODUCCION

Los resultados de las mediciones aplican enprácticamente en todos los aspectos de la vidapor ejemplo:

Las pruebas de los productos alimenticiosadulterados,

Dosis terapéuticamente eficaces de los productosfarmacéuticos

La contaminación ambiental como por ejemplo enagua, el suelo y la calidad del aire basado en

valores límites y los resultados analíticos.Incluso nuestros cuerpos se convierten en objeto

de examen analítico cuando, nos sometemosdiagnóstico clínico.


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BENEFICIOS DE UN PROGRAMA DE ASEGURAMIENTO DECALIDAD DE LOS RESULTADOS

• Contribuye a la armonización y unificación delproceso de control de calidad al interior de loslaboratorios.

• Permite contar con un documento útil en el sistemade Aseguramiento de la Calidad para garantizar laveracidad, confiabilidad y reproducibilidad de losresultados.

• Generar propuestas de mejora continua de la calidaden forma integrada.

•Permite detectar tendencias de los datos generados


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CONSECUENCIAS DE LOS RESULTADOS INCORRECTOS

Afecta a la salud de las personasAfecta al medioambienteAfecta a la toma de decisiones

Castigo de un lote de productoPérdida de la confianza en el laboratorioDeterioro de la imagen comercial del LaboratorioAfecta a la imagen de los Organismos que

otorgaron algún reconocimiento al laboratorioEleva los costos al tener que realizar nuevos

ensayos


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CONCEPTOS FUNDAMENTALES

Calidad:Grado en el que un conjunto de característicasinherentes aun producto o servicio, cumple con losrequisitos.

Aseguramiento de calidadParte de la gestión de la calidad (actividadescoordinadas para dirigir y controlar), orientada aproporcionar confianza en que se cumplirán losrequisitos de la calidad


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Control de calidadParte de la gestión de la calidad orientada alcumplimiento de los requisitos de la calidad.

Programa de Aseguramiento de calidadDefinición de actividades, frecuencias y acciones atomar en el aseguramiento de la calidad.


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EVOLUCION HISTORICA DE LA CALIDAD

AÑOS

Antes:

Q = 0Inspección

mínima

1930 –1950

ControlEstadísticodel Proceso

1950 –1960

Controlde

Calidad

1960 – 1990

Aseguramientode la Calidad

1990 –2000

Gestiónde la

Calidad/Mejora

continua

2000 enadelante

Prevenciónde Riesgos

y Seguridad

Futuro

¿?

Responsable:Departamentode Control de

Calidad

Responsable:Producción

Responsable: TODOS


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EVOLUCION DE LA CALIDAD Y FACTORES QUEINTERVIENEN

ASECONTROL DE LACALIDAD

GESTION TOTAL DELA CALIDAD

ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD

HUMANO

ECONOMICO TECNICO


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¿ TENEMOS QUE IMPLEMENTAR UN SISTEMA DEASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD ?

MOTIVACIONES DE LAS EMPRESAS E INSTITUCIONES

PARA LA IMPLANTACION DE UN SISTEMA DE

ASEGURAMIENTO DE CALIDAD

Exigencias del mercado

Demanda del cliente.

Alta calidad (bajo riesgo).

Comercialización/ventas.

Prevención de defectos.

Menor tiempo de respuesta

Convencimiento de la necesidad decambio.Reducción de costos.Imagen de progreso

Innovación tecnológica.Acceso de nuevas pruebas

diagnósticas

Imitar las acciones de otro

Para igualarlo o excederlo(competencia)


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¿QUÉ VENTAJAS TENDREMOS AL IMPLEMENTAR UNPROGRAMA DE ASEGURAMIENTO DE CALIDAD?

OBLIGA A DEFINIRObjetivos.Políticas de calidad.Tareas.Responsabilidades.Métodos de medida.Criterios de evaluación

MEJORAS EXTERNASCalidad de los productos.Satisfacción del cliente.Imagen corporativa.Fidelidad de los clientes

REDUCE: Esfuerzos inútiles.Reprocesamientos.Costos.Recambio de Personal

MEJORAS INTERNASComunicación.Motivación.Control de proveedores.Capacidad de cambio yadaptabilidad de las personas.Productividad.

ENFATIZA LAS SIGUIENTES ACTIVIDADES:

Planificación.Prevención de problemas frente a inspección final.Revisiones periódicas.Mejora continua.Formación , entrenamiento

“CALIDAD ES HACER LAS COSAS BIEN A LA PRIMERA”


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GESTION DEL LABORATORIOSEGURIDADSERVICIO AL CLIENTE

CICLO DEL ASEGURAMIENTO DE CALIDAD

TOMA DE MUESTRAS

ENSAYOS DE COMPETENCIATECNICA

TRANSPORTE Y RECEPCIONMUESTRAS

CONTROL DE CALIDA DEL

PROCESOS ANALITICO

CONTROL DE DATOS

REPORTE DE RESULTADOS

PREANALITICO

ANALITICO

POST-ANALITICO


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COMO ESTABLECER UN PROGRAMA DEASEGURAMIENTO DE CALIDAD

1. Designar a una persona como responsabledel programa( liderado por lo Menos 1año)

2. Designar un Grupo de trabajo.

3. Establecer los objetivos del programa.

4. Procurar dentro de la organización elsuficiente conocimiento acerca de la calidad.

5. Establecer la organización de calidad y lasestructuras de responsabilidad.


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COMO ESTABLECER UN PROGRAMA DEASEGURAMIENTO DE CALIDAD

5. Identificar las funciones que deben ser controladasmediante procedimientos (actividades críticas).

6. Establecer las descripciones de los trabajos

7. Desarrollar el manual de Calidad8. Establecer la participación de los empleados en elprograma.

9. Preparar los procedimientos e instructivos de trabajo.

10.Implantar el programa.11. Auditar y revisar el programa


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ERRORES MAS COMUNES EN LA IMPLANTACIÓN DEPROCESOS DE MEJORAMIENTO

EN CALIDAD TOTAL

1. Concebirlo como algo adicional a lo que venimos haciendo.

2. Pretender "correr" antes de caminar.

3. Falta de asignación de recursos apropiados.

4. Desvinculación de la estrategia de la empresa.5. La alta gerencia sólo apoya.

6. El proceso sólo involucra a producción.

AUSENCIA DE CONOCIMIENTOPROFUNDO


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1. Debe existir una estructura en la cual lasresponsabilidades y autorizaciones involucrena todos los actores de las diferentes etapasdel proceso analítico estén claramente

definidas.2. Debe definirse los atributos o características

del método si es que la metodología analíticanormalizada no lo contempla.

3. Establecer controles internos

4. Establecer controles externos

5. Tomar en consideración la norma técnicaISO/IEC 17025 y la s Directrices delorganismo Acreditador

CRITERIOS GENERALES PARA IMPLEMENTAR DE UN PROGRAMADE ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD


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REQUISITO DE LA NORMA ISO/IEC 17025

a) El uso regular de materiales de referencia certificadoso un control de la calidad interno utilizandomateriales de referencia secundarios;

b) La participación en comparaciones interlaboratorios oprogramas de ensayos de aptitud;

c) La repetición de ensayos o calibraciones utilizando elmismo método o métodos diferentes;

d) La repetición del ensayo o de la calibración de losobjetos retenidos;

e) La correlación de los resultados para diferentescaracterísticas de un ítem.

5.9 Aseguramiento


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DIRECTRIZ PARA LA ACREDITACIÓN DE LABORATORIOS5.9 Aseguramiento de la calidad de los resultados de ensayo y calibración

a) El laboratorio debe establecer un programa para elaseguramiento de resultados debiendo considerar controles derutina y periódicos,

b) Evaluar la tendencia de los mismos con una frecuenciadeterminada por el laboratorio con el debido sustento técnico.

c) Nota.- la frecuencia de la evaluación de tendencias no debesuperar los doce meses.

d) Debe aplicar como mínimo 2 formas de control de calidad paracada método de ensayo o procedimiento de calibración.

e) Debe aplicar los procedimientos de control de calidad que elpropio método de ensayo o procedimiento de calibraciónestablezca que deban ser realizados.


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f) El laboratorio debe establecer y documentar los criteriospredefinidos de aceptación y rechazo para los datos decontrol de calidad obtenidos por el laboratorio. En casoel laboratorio los establezca, los criterios deben estarbasados inicialmente en referencia bibliografía técnica

reconocida; luego de un período, estos criterios deberánbasarse en datos estadísticos del propio laboratorio.

g) Además de otras actividades llevadas a cabo paracomprobar la validez de los resultados de ensayos ocalibraciones, el laboratorio debe participar de formaregular en ejercicios de inter comparación de acuerdo alo indicado a la Directriz Ensayos de Aptitud/Comparación Inter laboratorios SNA - acr- 13D.


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Ensayo Bilateral

Ensayos Interlaboratorios

EstudioColaborativoValidación demetodologías

Estudio deCertificación

Asignación devalores a MR

Ensayos de Aptitud

CompetenciaTécnica

Z-score │Z│≤2

PRUEBAS INTERLABORATORIOS

5.9 Aseguramiento de la calidad de resultados


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ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD EN ENSAYOSMICROBIOLOGICOS


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CONTENIDO – Implementación de un programa de aseguramiento de

calidad en un laboratorio de ensayo microbiológico: – Personal

– Instalaciones y Condiciones ambientales

– Equipos (Autoclaves, incubadoras, estufas y otrosequipos )

– Medios de cultivo, reactivos y agua para reactivo – Materiales de referencia ( cepas de referencia) y

patrones de referencia

– Tratamiento de muestras

– Herramientas estadísticas y Tratamiento de datos

– Principales Actividades de Control de Calidad

relacionadas a los diferentes tipos de métodos deensayo: Actividades de Primer, segundo y tercer nivel ySeguimiento de las Actividades.

– Control de calidad Externo


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INTERRELACION ENTRE COMPONENTES DE CC/ACPARA UN PROCESO ANALÍTICO

SISTEMA DEQC/AS

COMPARA-CIONESINTERLABO-

RATORIO


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INTRODUCCION AL ASEGURAMIENTO DE CALIDAD ENENSAYOS MICROBIOLOGICOS

Si bien es difícil estimar exactamente cual es el impacto realde los análisis y su calidad en todos los campos, lasorganizaciones incluidos los Laboratorios de ensayo,

enmarcadas dentro de un sistema de calidad requierenimplantar un Programa de Aseguramiento de calidad a finde garantizar que sus resultados son válidos y reproducibles.

La implantación de dicho programa nos permite identificarlas fuentes de error y poder implantar acciones oportunas.

Asimismo nos permite cumplir con los requisitosestablecidos para demostrar la competencia técnica dellaboratorio


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OBJETIVO DEL ASEGURAMIENTO DE CALIDAD

Obtener resultados analíticos válidos, ello involucrala demostración de la precisión y veracidad delproceso, competencia técnica demostrada del

personal, actividades autorizadas, planificadas yprogramadas a intervalos regulares, demostradas ydocumentadas.

Demostración de que los resultados analíticoscumplen con los criterios de evaluación

preestablecidos mediante herramientas estadísticasidóneas en cada caso.


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CONTROL DE CALIDAD Y ASEGURAMIENTO DECALIDAD

El Aseguramiento de calidad según ISO son todasaquellas acciones planificadas y sistemáticas,necesarias para suministrar confianza de que unproducto procedimiento ó servicio satisface losrequisitos de calidad establecidos.

El control de calidad es un conjunto de técnicasoperativas aplicadas al proceso analítico, estasincluyen el uso de blancos, uso de materiales dereferencia con niveles de concentración conocida,dichos mecanismos incluyen solo el inicio delproceso de aseguramiento de calidad, existenademás actividades como el aseguramiento decalidad externo para consolidar dicho proceso


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DIFERENCIAS GENERAL EN EL PROCESO ANALÍTCOBASADO EN EL OBJETIVO

Métodos estandarizados ASTM, ISO, ECCLES,CEN, IUPAC

Procedimientos para Intercomparacion de laboratorios Procesos analíticos Cuantitativos, los cuales varíanpueden ser a partir de un métodos estandarizadospero la equivalencia es verificada mediante métodosestandarizados

Otros Procedimientos analíticos cuantitativos Los cuales tienen muchos usos y objetivos enlaboratorios de organismos reguladoresgubernamentales. Estos también incluyenprocedimientos posteriores los cuales aun no han sidobien establecidos

Métodos de campo Procedimientos que han sido realizados fuera del

laboratorio, cuyo objetivo es realizar mediciones,métodos de campo cuantitativos o semicuantitativosdependiendo de la manipulación previa de la muestray procedimientos de aseguramiento de calidad

Test de Orientación/ procedimientos Rápidos( Screening)

Pueden ser cualitativos, advierten la presencia deciertas sustancias y permiten una concentraciónestimada dentro del orden de las magnitudes


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INTERRELACION ENTRE COMPONENTES DE CC/ACPARA UN PROCESO ANALÍTICO

ASEGURA-MIENTO DE

CALIDAD DELLABORATORIO


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PROGRAMA INTEGRAL QUE CONTEMPLE:

Actividades realizadas por el laboratorio y/o

organismos externos a fin de cumplir los

requisitos de calidad:

Control de calidad Interno

Control de calidad Externo


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CONTROLES DE CALIDAD

Comprenden:

Control de calidad interno:

Un programa de controles periódicos es necesariopara demostrar que se controlan diferentesaspectos como por ejemplola variabilidad entre analistas y entre equipos omateriales y otros, considera:

Uso de cepas de referencia.Participación en Ensayos Intralaboratorio.


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Ensayos cuantitativos: Control de la precisión: muestras naturales sin

inocular y/o muestras naturales inoculadas conmateriales de referencia.

Control de recuperación: muestras inoculadascon materiales de referencia.Ensayos cualitativos:

Debe incluir actividades que garanticen unadecuado control del límite de detección.


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Estas actividades de control de calidad debenrealizarse en la medida de lo posible conmuestras naturales tanto positivas (inoculadaso contaminadas naturalmente) como

negativas.

2. Control de calidad externo:

Participación en Ensayos de Aptitud y ensayosInterlaboratorio


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De acuerdo al Nivel de Control y a las responsabilidades para evaluar en los métodos de ensayo:

Actividades de Primer Nivel: Analista ó Técnico, se realizacon mayor frecuencia, es autocontrol , es supervisado por elsuperior inmediato.

Actividades de Segundo Nivel: Personal diferente al técnicoanalista y se lleva a cabo de manera periódica por unapersona diferente al analista

Actividades de Tercer Nivel: Responsabilidad de la Direccióndel laboratorio, Esquemas de evaluación externa y el uso deMRC, se lleva a cabo de manera planificada y periódica


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PRIMER NIVEL SEGUNDO NIVEL TERCER NIVEL

OBJETIVOS

Asegurar que

todos los

aspectos delprocedimiento se

encuentran bajo

control

Garantizar que

los diferentes

técnicos oanalistas o

diferentes

equipos obtienen

resultados

similares y que

no existe sesgo

Garantizar la

comparabilidad

interlaboratorio óEnsayo de

Aptitud


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PRIMER NIVEL SEGUNDO NIVEL TERCER NIVEL

ACTIVIDADES

Control de Blancos Control deDuplicados (DR)

Uso de Materialesde ReferenciaCertificados

Control de pruebascruzadas entreanalistas

Control deParalelos

Controles positivosy negativos

Muestras ciegas

Ensayos de Aptitudó EnsayosInterlaboratorio

Muestrasadicionadas Repetibilidad

Control de Mediosde Cultivo

Reproducibilidadintermedia

Control de

diluciones


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ESQUEMA DE ASEGURAMIENTO DE CALIDAD DE LOSRESULTADOS

CRITERIO DE FRECUENCIA


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MÉTODO PARÁMETROCRITERIO DEACEPTACIÓN

FRECUENCIAPROPUESTA

Determinación de la Precisión Analítica

Cuantitativo

( Numeración )

Precisión Analítica o

Criterio de Precisión

CP: < 3.27 RRenovar CP Anualmente

*Calcular cada vez que se

analice muestras

Repetición de Resultados de Recuentos en PlacaCuantitativo

( Numeración)Repetibilidad de

Resultados01 Analista: +/-5%

+ de 02 Analistas: +/-10%Mensual: 01 duplicado de

un batch de Muestras

Repetición de Resultados en muestras Duplicadas

Cuantitativo( Numeración )

Repetibilidad deResultados

+/- 10% entre resultadosde muestras duplicadas

01 duplicado cada batchde Muestras (día)

SemicuantitativoNMP


Resultados dentro delímites con el 95% de

confianza.

01 duplicado cada batchde Muestras (día)

Ensayos cualitativos(Presencia/ausencia)


Eficiencia al 100% Semestral

Confirmación de Resultados PositivosSemicuantitativo

NMPVerificación de

Resultados

Resultado e identificaciónde MO Ensayado

conforme

Trimestral

Prueba Inter Laboratorio o de AptitudCuantitativo (Numeración)

DesempeñoConforme

ó

z-score: < 2

Anual

Semicuantitativo NMP


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FACTORES QUE AFECTAN LA CALIDAD DELRESULTADO

En el desarrollo de un Método Microbiológico existenmuchos aspectos que contribuyen a obtener unresultado, como por ejemplo:

La naturaleza de la muestra, La aptitud de los materiales y reactivos La calidad del agua para reactivo La aptitud de los equipos

La pericia del analista en el desarrollo del método La resolución del analista para diferenciar colonias


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ACTIVIDADES DE CONTROL DE CALIDADINTERNO


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CONROL DE CALIDAD DE LOS METODOS DE ENSAYO

Para Métodos de Recuento en Placa:A. Índice de la dispersión de Poisson: D2

* Para Recuentos paralelos en una o más diluciones D2:Igual o menor a 3.84

B: Diferencia relativa RDEste Criterio es usado para el Control de la Calidad delos recuentos duplicados. Se trata de comparar losrecuentos de microorganismos obtenidos en una

misma dilución de muestra por dos analistas: elprimero: el evaluado y el segundo: el de “referencia

Para Todos los Métodos

C. Exactitud de los resultados


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A. ÍNDICE DE DISPERSIÓN DE POISSON : D2


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DISTRIBUCIÓN DE POISSON

Cuando los microorganismos están distribuidos

aleatoriamente en la muestra y no existen

interferencias, los recuentos bacterianos siguen una

distribución de Poisson.


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A. Índice de Dispersión de Poisson : D2

Este Criterio indica el Grado de Dispersión deresultados de recuentos microbiológicos

(homogeneidad en la distribución aleatoria)

obtenidos directamente o por confirmación, a partir

de una muestra “bien” homogeneizada.

UTILIDAD:

Evaluar la COMPETENCIA del analis ta para

homogeneizar la mues tra ensayada y para

determ inar erro res en la ejecuc ión del

procedimiento.

Criterio de aceptación para Recuentos paralelos en

una o más diluciones D2 : Igu al o meno r a 3.84


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CALCULOS.

INDICE DE DISPERSIÓN DE POISON : D2

A.1. Lectura De Recuentos (Paralelos) en Una Dilución (02 Placas):

D2 = (A – B )2 A: Recuento 1° placa(A + B) B :Recuento 2° placa

Para más de 02 placas

D2 = n Xi2 - ( Xi )2

Xi Xi : Recuento de cada placa

n : N° de placas


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A.2. Lectura de Recuentos en 02 DilucionesConsecutivas:

D2 = (C1 – aC2 )2

.a (C1 + C2)

C1:Recuento en V1, 1° placa: 1 ml

C2:Recuento en V2, 2° placa: 0.1 mla= V1V2


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D2 = (A – B )2 A: Recuento 1° placa(A + B) B :Recuento 2° placa

1. En una muestra de alimento se obtuvo los siguientes recuentos de

microorganismos aerobios mesófilos:

Dilución Placa 1° Placa 2°

-1 115 140

-2 12 09

D2 = (115 – 140 )2

(115 + 140)

D2 = 625

255

D2 = 2.45

2 E t d d d bt l i i t


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Para más de 02 placas

D2 = n Xi2 - ( Xi )2

Xi Xi : Recuento de cada placan : N° de placas

2. En una muestra de carne de pescado se obtuvo los siguientes

recuentos de coliformes totales en placa:

Dilución Placa 1° Placa 2° Placa 3° Placa 4° Placa 5°

-2 86 105 92 98 94

D2 = 5 (45 325) - ( 475 )2

475D2 = 2.105


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3. En una muestra de harina de papa se obtuvo los siguientes

recuentos de enterobacterias en placa:

Dilución Placa

-1 248

-2 28

D2

= (C1 –

aC2 )2

C1:Recuento en V1, 1°

placa: 1 mla (C1 + C2) C2:Recuento en V2, 2° placa: 0.1 ml

a= V1V2

a= V1 = 1 = 10V2 0.1

D2 = (248 – 10 (28))2

10 (248 + 28)D2 = (32) 2

10(276)D2 = 0.371


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DIFERENCIA RELATIVA: RD


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Este Criterio es usado para EVALUAR recuentos

duplicados. Se trata de comparar los recuentos de

microorganismos obtenidos en una misma dilución de

muestra por dos analistas: el primero, el evaluado y elsegundo, el de “referencia”.

UTILIDAD:

Evaluar la COMPETENCIA del ANALISTA para real izar el p ro ced im ien to de recuen to y cal if ic ar su

capac idad para d iferenc iar las co lon ias de las

par tícu las más pequeñas de muestr a.



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RD = C1 – C2 = ln C1 – ln C2ĉ

C1: 1° Recuento Analista 1C2: 2° Recuento Analista 2

ĉ: Promedio de Recuentos

Multiplicar por 100 para obtener resultados en

porcentajes.

CALCULOS


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CALCULOS

Cuando los dos recuentos los ha realizado la misma

persona el más apropiado es el valor absoluto de la

diferencia relativa (valor numérico sin signo)

•Para Recuentos dup l icados en una mism a di luc ión RD:

Leída por el m ismo analis ta : igual ó < 5%

Leída por 02 analis tas : igual ó < 10%


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1. En un ensayo de recuento de microorganismos aerobios mesófilos un

analista obtiene los siguientes resultados.

Determinar la diferencia relativa de sus recuentos comparados con el mismoy con el analista de mayor precisión en el Laboratorio, si luego se obtuvieron

los siguientes recuentos:


-2 224 215

-3 20 24


55/200

RD = C1 – C2ĉ

RD = 224 – 220222

RD = 224 – 214219

RD = 1.80 %

Dilución Placa 1° ANALISTA 1 ANALISTA 2

-2 224 220 214

RD = 4.56 %


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2. En un ensayo de recuento de microorganismos aerobios mesófilos un

analista obtiene los siguientes resultados.

Determinar la diferencia relativa de sus recuentos comparados con el mismoy con el analista de mayor precisión en el Laboratorio, si luego se obtuvieron

los siguientes recuentos:


-1 35 32

-2 04 02


57/200

RD = C1 – C2ĉ

RD = 35 – 3635.5

RD = 35 – 3334

RD = 2.82 %


-1 35 36 33

RD = 5.89 %


58/200

RD = C1 – C2ĉ

RD = 35 – 3434.5

RD = 35 – 3736

RD = 2.90 %


-1 35 34 37

RD = - 5.56 %


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VERACIDAD DE LOS RESULTADOS


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“VERACIDAD": GRADO DE CONCORDANCIAENTRE EL RESULTADO DEL ENSAYO Y UNVALOR DE REFERENCIA ACEPTADO.


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Detección de Microorganismos

Para los métodos de Detección de Microorganismos, losresultados deben poseer un 90% de eficiencia en la

recuperación del microorganismo contenido en una muestra de

control

Recuentos en PlacaEl analista debe ser capaz de recuperar u obtener un recuento

similar al de la muestra de control. Se acepta una desviación

(+/-) no mayor en 0.1 logaritmo del recuento de la muestra decontrol (POR EJEMPLO).

Método del NMP

Para los métodos del Número Más Probable los Resultadosdeben estar dentro de los límites para el 95% de confianza, de la

tabla de NMP obtenidos en una muestra de control.


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Aplicando el +/- 0. 1 , tendremos:

3.2538 y 3.0538.

Si aplicamos los antilogaritmos tendremos los

recuentos para cada valor obtenido:

antilog 3.2538 = UFC/g: 1793.907 óantilog 3.0538 = UFC/g: 1131.878

El recuento obtenido por el Analista a prueba

estará entre:

UFC/g 18 x 102 : y 11 x 102


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CRITERIOS DE EVALUACION PARACOMPETENCIA TECNICA DEL ANALISTA

A. Índice de Dispersión de Poisson : D2

B. Diferencia Relativa: RD

C. Exactitud de los Resultados

PARA METODOS DE RECUENTOS EN PLACA

PARA TODOS LOS METODOS


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PREGUNTAS

Porque es necesario evaluar la precisión

del analista?

Porque es necesario evaluar la veracidad

Cuando debo de hacer uso de los criterios

de veracidad y precisión?

Puedo obtener un valor verdadero a partir

de un ensayo cuantitativo?


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METODO DEL NMP•Coliformes•Coliformes Fecales

•Escherichia coli

•Staphylococcus aureus

METODO DEL NUMERO MAS PROBABLE

NUMERO MAS PROBABLE


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NUMERO MAS PROBABLE.

Usando tres tubos por serie o dilución, obtenemos unas

combinación:3- 1- 1 : NMP / g

El NMP según la tabla con el 95% de confianza, corresponde

al valor : 70Los límites para esta combinación (con el 95% de confianza)

son:

Límite superior: 280

Límite inferior : 20

Por tanto el recuento por el método del NMP obtenido por

el analista en prueba deberá estar entre estos dos

límites.

ASEGURAMIENTO DE CALIDAD EN ENSAYOS


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ASEGURAMIENTO DE CALIDAD EN ENSAYOSDE COLIFORMES EN AGUAS

• Para verificar la presencia de bacterias coliformes ypara proporcionar datos de control de calidad para el

análisis de muestras en aguas potables y no potables

utilizar el 10% (o un porcentaje fijo) de los tubos

positivos confirmados provenientes de la pruebacompleta.

• Utilice la prueba completa en al menos una muestra

positiva por periodo( puede ser mensual , bimensualtrimestral). Si no hay muestras positivas dentro de un

periodo deben realizarse usando una muestra positiva

con valor conocida.• Fuente: Standard Total Coliform Fermentation Technique SM 9221


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DETECCION DEMICROORGANISMOS

•Salmonel la sp

•Vibrio cho lerae

•Lister ia mono cytog enes •Clos t rid ium botu linum

•Escher ich ia co l i

•Staphy lococcus aureus


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DETECCION DE MICROORGANISMOS

Se dispone entre 10 a 15 muestras (entre positivas y

negativas para un patógeno determinado), las cuales son

analizadas para determinar el porcentaje de recuperacióndel microorganismo ensayado. De esta manera se calcula

la Eficiencia de recuperación del analista y la cual

generalmente no debe ser menor al 100%


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Cálculo de la eficiencia en la recuperación delmicroorganismo ensayado

E = ( a + d) x 100N

Donde:

a: Número de resultados positivos coincidentes con el resultado teórico

d: Número de resultados negativos coincidentes con el resultado teórico

N: Número de muestras ensayadas


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MUESTRA RESULT ADO

TEORICO

RESULTADO

PRACTICO

CLASIFICACION

1 - + Falso positivo

2 + + A

3 - - D

4 - - D

5 + + A

6 - + Falso positivo

7 - - D8 + + A

9 + + A

10 - - D

11 + + A

12 - - D13 + + A

14 + + A

15 + + A


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E = ( a + d) x 100N

CALCULOS

E = ( 8+ 5) x 100

15

E = 87 %

ENSAYOS INTRALABORATORIOS E


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ENSAYOS INTRALABORATORIOS EINTERLABORATORIOS

ENSAYOS INTRALABORATORIOS Ensayos microbiológicos cualitativos y cuantitativos. Evaluación e interpretación de los resultados. Utilidad de los resultados del Ensayo Intralaboratorio.

ENSAYOS INTERLABORATORIOS: Ensayos microbiológicos cualitativos y cuantitativos. Evaluación e interpretación de los resultados.

Utilidad de los resultados del Ensayo Interlaboratorio. Proveedores de Ensayos Interlaboratorios. Gráficos de control.


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** PRUEBA INTRALABORATORIO

Se usa para verificar que la competencia técnica del Laboratoriose mantenga en el tiempo a través de la comprobación y

comparación de los resultados obtenidos entre analistas y

determinar si alguno de ellos requiere ser re-entrenado.

Se basa en el desarrollo de Pruebas de Significancia las cualesplantean dos tipos de hipótesis:

Hipótesis nula Ho, que establece que NO HAY diferencia entre

valores.

Hipótesis alternativa H1, que establece que HAY diferencia entre

valores.

En el cálculo es necesario determinar el nivel de confianza

(generalmente 95%) y el número de grados de libertad (n-1)

Una vez planteada la hipótesis, se aplica el test o prueba de

significancia.

Para la Precisión


76/200

Para la Precisión

En este caso la precisión se calcula mediante el estadístico de

Fisher:

F, que evalúa la Homogeneidad de Varianzas de dos conjuntos de

datos.

Cálculo:1. F experimental:

F e x p = S12 (varianza de mayor valor)S2

2 (varianza de menor valor)

2. Si F exp < F crítico (tabla) Hay homogeneidad de

varianzas

3. Si F exp > F crítico (tabla) No Hay homogeneidad de

varianzas

Es usado para verificar la equivalencia entre analistas, esto es,

si ambos trabajan con la misma precisión.


77/200

ENSAYO: Recuento en Placa de Microorganismos


78/200

Muestra

Control

Analista 1 Logaritmo Analista 2 Logaritmo

UFC / g 1450 3,161 1230 3,090

1350 1400 3,146 1200 3,079

1450 3,161 1350 3,130

1500 3,176 1280 3,107

1380 3,140 1190 3,0761420 3,152 1520 3,182

1480 3,170 1540 3,188

1350 3,130 1420 3,152

1380 3,140 1390 3,143

1430 3,155 1400 3,146

MEDIA 3.1533 3.1293

DESVEST 0.0145 0.0403

VARIANZA 0.0002 0.0016

TEST DE LA F DE FISHER


79/200

F exp = S12 (varianza de mayor valor)S2

2 (varianza de menor valor)

F exp = S12 (0.0016)S2

2 (0.0002)

F exp = 8.0 F tab = 3.18 (para n-1= 9)

Conclusión:No Hay homogeneidad de varianzas, no hay equivalencia entre analistas

F exp > F tab


80/200

CONTROL DE CALIDAD DEL PROCESO

ANALITICO


81/200

MEDIOS DE CULTIVO1. Medios de cultivo:

Son necesarios para el aislamiento,mantenimiento, la reproducción y laidentificación de los microorganismos.

Contienen sustancias nutritivaspH adecuado

Deben estar estériles.

2. Incubación:Depende del metabolismo delmicroorganismo a cultivar.La atmósfera empleada.(aerobio,anaerobio)Tiempo.Temperatura.


82/200

CONTROLES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

Control visual y registroAlmacenamientoColorantes bacteriológicos

AntibióticosPreparación y dispensación

Control de pHControl de calidad de medios preparadosControl de esterilidad de medios de cultivoControl para medios de cultivo para aislamiento

e identificación bioquímica

CONTROL DE CALIDAD DE MEDIOS DE


83/200

CONTROL DE CALIDAD DE MEDIOS DECULTIVO PREPARADOS

Objetivo

Obtención de colonias típicas con cepas

de referenciaRecuperación

Selectividad

Garantizar que los microorganismosdiana se recuperen con una sensibilidadadecuada, Se comprobará:


84/200

FRECUENCIA DE LOS CONTROLES

Con cada lote nuevo preparado.Nota.

Los controles efectuados en un lote de medio de

cultivo deshidratado no garantizan la calidad delos lotes de medio preparado.

Debido a que algunos medios requieren aditivos

después de la esterilización, lo que modifica lascaracterísticas del medio inicial, las cuales debencontrolarse en cada lote de medio preparado.

CONTROL DE ESTERILIDAD DEL MEDIO DE


85/200

CONTROL DE ESTERILIDAD DEL MEDIO DECULTIVO

Debe efectuarse cuando se almacena el lote demedio

No debe utilizarse hasta ser evaluadoPuede hacerse un subcultivo del medio para

verificar la ausencia de crecimiento microbiano ( Ejemplo: Medios líquidos)Se rechaza el lote en caso se compruebe el

crecimiento.La esterilidad se controlará en cada lote de medio

preparado

CONTROLES PARA MEDIOS DE CULTIVO


86/200

CONTROLES PARA MEDIOS DE CULTIVOPARA AISLAMIENTO Y BIOQUIMICA

Uso de cepas de referencia como control

positivo y negativo

Cepas en buenas condiciones de conservacióny almacenamiento

La cepa debe presentar todas las características

típicas descritas en la formulación original del

medio.


87/200

USO DEL AGUA PARA PREPARACION DE


88/200

USO DEL AGUA PARA PREPARACION DEREACTIVOS Y MEDIOS DE CULTIVO

Usar solamente agua destilada ódesmineralizada

Previamente analizada, libre de trazas , metales

disueltos, microorganismos ó componentesinhibitorios

Verificar que el agua destilada utilizada esté

libre de aminas tóxicas u otros compuestos de

provenientes de calderasVerificar que el agua destilada esté excenta de

cloro residual o cloraminas

¿Qué es un cultivo de referencia?

Término colectivo que se refiere a cepas de


89/200

CULTIVOS DEREFERENCIA

Término colectivo que se refiere a cepas de

referencia, cepas de reserva y cultivos de

trabajo.

Diferencias entre cepas de referencia, cepas dereserva y cepas de trabajo.

Cepas de referencia

Microorganismos definidos por lo menos al nivel

de género y especie, catalogados y descritos

según sus características y preferiblemente de

origenconocido.[ISO 11133-1:2000] Normalmente obtenidos de

una colección nacional o internacional

reconocida.

Cepas de reserva

Cepas idénticas obtenidas mediante un único

subcultivo de una cepa dereferencia. [ISO 11133-1:2000]

Cepa de trabajo

Subcultivo primario obtenido de una cepa de

reserva. [ISO 11133-1:2000]

CONCEPTOS A TENER ENCUENTA


90/200

GESTION PARA LA ADQUISICIÓN

Tener en cu enta para laAdqu isic ión de cepas de referencia:

Proveedor calificado y Certificación:

Procedimiento que describa claramente

Manipulación.Mantenimiento de cepas dereferencia.

Métodos de conservación preparadosen el laboratorio.

Reconstitución /RepiqueControl de calidad de cepas.

CEPAS DE REFERENCIA


91/200

CEPAS DE REFERENCIA

Las cepas de referencia son microorganismosobtenidos directamente de una colección nacional

o internacional reconocida, cuando exista alguna.

Alternativamente también podrían utilizarse

cepas comerciales siempre que el laboratorio

pueda demostrar en el momento de su uso que

todas las propiedades relevantes sonequivalentes – EJ. ATCC

TRAZABILIDAD DE CULTIVOS DE


92/200

REFERENCIA

Un cultivo de referencia es trazable si cumplecon los requisitos taxonómicos definidos para

esa especie microbiana y con aquellas

características propias de esa cepa

Por tanto los resultados de estas evaluaciones

puedan ser reproducidos en otros laboratorios

de referencia

CEPAS DE REFERENCIA


93/200

Sub-cultivada una sola vez

*

(liofilización, nitrógeno líquido, ultracongelación rápida , etc)

Especificar tiempo y condiciones de almacenamiento

Mantener en las condiciones específicas

Descongelación / reconstitución

Especificar tiempo y condiciones de almacenamiento

CEPAS DE REFERENCIA

CEPAS DE RESERVA

CEPA DE TRABAJO

USO RUTINARIO

É


94/200

POR QUÉ ES NECESARIO UTILIZAR CEPAS DE

REFERENCIA? Para la validación de

métodos Asignación de valores a

otros cultivos

Comparación deresultados obtenidos pordistintos laboratorios

Controlar reactivos,métodos y procedimientos

Para alcanzar mayorconfiabilidad de los datos


95/200

ACTIVIDADES DE CONTROL DE CALIDAD

EXTERNO

CONTROL DE CALIDAD EXTERNO


96/200

CONTROL DE CALIDAD EXTERNO

Los programas de control de calidad entre laboratorios

son medios para establecer un sistema de criterios

acordados

Sobre la ejecución de ensayos que asegurará un nivel

aceptable de calidad de los datos y la Compatibilidad

entre laboratorios con intereses y / o necesidadessimilares


97/200

ENSAYOS INTERLABORATORIOS


98/200


Consiste en una serie de ensayos (determinaciones), de

una o más características (analitos)

Se realizan independientemente, por un grupo delaboratorios, sobre una submuestra tomada en forma

aleatoria de una muestra homogénea

Distribuida simultáneamente a los laboratoriosparticipantes, con diferentes propósitos.



99/200


Pueden realizarse con diferentes objetivos, pudiendo ser

usados por los laboratorios participantes y otros para:

Determinar el desempeño de laboratorios individuales,

para efectuar ensayos o mediciones específicas

Hacer el seguimiento del desempeño continuo dedichos laboratorios.

Identificar problemas en los laboratorios e iniciar

acciones correctivas que puedan estar relacionadas,

por ejemplo, con el desempeño del personal o con lacalibración del instrumental.



100/200


Establecer la efectividad y el grado de comparación de

nuevos métodos de ensayo o de medición

Hacer el seguimiento de los métodos establecidos.

Proveer confianza a los clientes de los laboratorios.

Identificar diferencias interlaboratoriales.

Determinar las características de desempeño de un

método, tales como repetibilidad, reproducibilidad e

incertidumbre. ( Ensayos colaborativos)

Asignar valores a materiales

ENSAYOS INTERLABORATORIOS Y ENSAYOS DE


101/200

APTITUD

Existen diferentes tipos de ensayos interlaboratorios, ysuelen clasificarse en:

Ensayos de Ap titu d (EA ):

Son también conocidos o llamados como ensayos de

intercomparación

Sirven para evaluar y demostrar la confiabilidad de los

datos que se informan.

Permite probar y comparar la performance entre

distintos laboratorios.

Ensayos Colaborativos, (donde se analiza la exactitud

de un método.)

ENSAYOSDE APTITUD


102/200

ENSAYOSDE APTITUD

El ensayo de aptitud es el uso de comparacionesinterlaboratorios con el fin de determinar el desempeño

de un laboratorio de ensayos o medición.

EVALUACION DE LA APTITUD


103/200


Está dada por el desvío entre un resultado particular respecto delvalor consensuado. Este desvío se mide mediante:

La diferencia entre el dato y el valor asignado,

La diferencia anterior expresada en porcentaje

La puntuación Z: es la medida del alejamiento del resultado de un

laboratorio particular respecto al valor consenso, medido enunidades de desviaciones estándar.

Z = (Xi- Xconsenso) / Desv.

Dónde: Xi= Resultado obtenido por el laboratorio i.

Xconsenso= Valor asignado o de consenso.

Desv.= Desviación estándar consensuado para ese analito en

particular.


104/200



105/200


La interpretación de la puntuación Z es la siguiente:

Satisfactorio |Z| ≤ 2

Cuestionable 2< |Z| < 3

No satisfactorio |Z| ≥ 3


106/200

PROGRAMA


107/200

UNIDAD I:

Metrología Química: Patrones y Trazabilidad

UNIDAD II:

Componentes de un Sistema de Aseguramiento de Calidad Analítica

UNIDAD III:

Aseguramiento de la Calidad Analítica de los Resultados

Control de Calidad Analítica

Evaluación de Parámetros de Desempeño

Programa


108/200

UNIDAD I

Metrología Química

“Aseguramiento de la Calidad en un laboratorio

de Ensayo Fisicoquímico”


109/200

CLASIFICACIÓN GENERAL DE PATRONES


110/200

PATRONES

DE TRABAJO

PATRONES DEREFERENCIA

PATRONESNACIONALES

PATRONESBÁSICOS

(S.I.)

METROLOGÍA FÍSICA De alta jerarquía metrológica,

coinciden con las unidades base del SI

Patrón reconocido por decisiónnacional, en un país, para ser usadocomo referencia en la asignación

de valores a otros patrones

Patrón de alta calidad metrológicadisponible en un lugar dado, del cualse derivan las mediciones realizadas

en dicho lugar

Patrón que se utiliza corrientementepara calibrar o verificar

Sistema Internacional de Unidades (SI)

http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_5/UNDADES%20SI.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_5/UNDADES%20SI.pptx


111/200

Magnitud básica Unidad Base Símbolo

Longitud metro m

Masa kilogramo kg

Tiempo segundo s

Temperatura Kelvin K

Cantidad de sustancia mol mol

Intensidad de corrienteeléctrica

ampere A

Intensidad luminosa candela cd


112/200

PATRONES ANALÍTICOS


113/200

Son materiales caracterizados por su

homogeneidad, estabilidad y por el hecho de tener

alguna propiedad (pureza, concentración,

absorbancia, masa, etc..) perfectamente definida

PATRONES PRIMARIOS



114/200

Estos materiales son importantes para establecer la trazabilidadde muchos resultados analíticos y deben reunir una serie de

requisitos:

Obtenerse con facilidad, purificarse, secarse y conservarse en

estado puro.

No alterarse al contacto con el aire al ser pesados y/o manipulados

Su nivel de impureza se podrá comprobar y no debe exceder

generalmente del 0,02%.

Poseer preferiblemente un alto peso molecular.

Ser fácilmente solubles en agua o en el disolvente apropiado en

condiciones de trabajo.

PATRONES PRIMARIOS


115/200

PATRONES PRIMARIOS


116/200

Materiales de Referencia:

Pesas certificadas.

M t i l d R f i

PATRONES PRIMARIOS


117/200


Los filtros de holmio (III) y didimio para la calibración y/overificación las medidas de Absorbancia y longitud de onda

en los espectrofotómetros UV/VIS.

M t i l d R f i

PATRONES PRIMARIOS

http://localhost/var/www/Curso%20de%20Metrologia%20-%20NTP%2017025/Parte%201/filtro%20-%201.pdf


118/200


Esferas de granulometría uniforme de referencia

PATRONES PRIMARIOS


119/200

Son materiales caracterizados por su alta pureza y el

conocimiento exacto de su composición estequiométrica. Seutilizan para la estandarización de otras sustancias o para

calibrar instrumentos de medición.

SUSTANCIA PURA

PATRONES PRIMARIOS


120/200

Materiales de Referencia: Sustancia Pura

Solución de KCl (Conductividad eléctrica). Solución de ftalato ácido de potasio (pH).

Soluciones de K2Cr 2O7 (medida de transmitancia)

M t i l d R f i S t i P

PATRONES PRIMARIOS


121/200

Materiales de Referencia: Sustancia Pura

Patrones Acido base:

Ftalato ácido de potasio (KHC8H4O4)

Carbonato de sodio (Na2CO3)


122/200



123/200

Son generalmente sustancias químicas conpropiedades no adecuadas para ser usados como

patrones primarios (baja pureza, estabilidadlimitada, composición no bien definida)

Se preparan y contrastan frente a patronesprimarios.

Dentro de los patrones secundarios también sepueden distinguir dos tipos: Los materialescontrastados y los materiales de referenciacertificados (MRC).

PATRONES SECUNDARIOS



124/200

A Materiales Contrastados:

Son de uso recurrente en valoraciones de soluciones, ejemplo:

Solución de NaOH

Solución de H2SO4

Solución de Na2S2O3 Solución de KMnO4

La preparación y estandarización de soluciones contrastadas

tienen que estar perfectamente documentadas.


125/200



126/200

Materiales de Referencia Certificado (MRC):

Hay diferentes tipos de material de referencia certificado:

MRC- puros : que suelen ser sustancia puras sólido o

disueltas en un disolvente adecuado y después avalados por

organismos competentes mediante una serie de ensayoprevios (homogeneidad, estabilidad) y de análisis (pureza,

concentración u otra propiedad).

Este tipo de material son patrones primarios.

Ejemplo:

Potassium Hydrogen Phthalate MRS

ICP Multi Element Standard Solution X MR



http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_5/CERTIFICADOS%20MATERIAL%20DE%20REFERENCIA/Taller/Multielemental%20ICP.pdfhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_5/CERTIFICADOS%20MATERIAL%20DE%20REFERENCIA/Taller/Biftalato%20de%20potasio.pdf


127/200


MRC-Matriz : en los que se certifica determinadoscomponentes en matrices concretas (ya sea totalmente

natural o con los analitos añadidos). Caen dentro de la

categoría de patrones secundarios ya que la certificación

supone su contraste con patrones primarios.

Ejemplo:

Metales pesados en suelo (CRM-141-143 del BCR)

Elementos metálicos en plantas (CRM-281 del BCR)

Metales traza en hola de espinaca (MRC 1570a del NIST, National Institute of

Standards and Technology, Estados Unidos)

Contenido de proteínas en ostras (CRM 1566b del NIST)


http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_5/CERTIFICADOS%20MATERIAL%20DE%20REFERENCIA/MRC-certificados.pdf


128/200


MRC-interno : Cuando sus magnitudes son avaladasinternamente en un laboratorio.

Organismos Suministradores

NIST : Instituto Nacional de Estándares y Tecnología (EEUU)

IRMM: Instituto de Materiales de Referencia y Medidas

(Unión Europea).

BCR: Oficina Comunitaria de Referencia (Europa)IAEA: Agencia Internacional de Energía Atómica (Australia)

S l ió d MRC l l b t i



129/200

Selección de MRC en el laboratorio

La selección correcta de estos materiales es una labor importante

que, suponiendo que exista disponibilidad, se efectúan sobre la

base de 3 consideraciones:

Que la matriz del MRC sea lo mas parecida posible a las de la

muestra que se va a analizar.

Que exista similitud respecto a la concentración del (de los)

analito (s).

Las incertidumbres de las concentraciones certificadas

deben ser pequeñas respecto a las incertidumbre admitidas

para los resultados finales.

E l d MRC l l b t i



130/200

Empleo de MRC en el laboratorio

Su uso se restringe, generalmente, a las siguientes aspectos

puntuales:

Validación de un método analítico

Comprobación de la equivalencia de métodos.

Calibración de equipos.

Demostración de la trazabilidad de los resultados

Detección de errores al aplicar métodos normalizados.

Control de calidad analítico

TRAZABILIDAD


131/200

Instrumento

de medición

Patrón de

Trabajo

PatronPrimario

INCERTIDUMBRE

Calibración

(U=0)

U1 > U2 >>>Un

Patrón

Nacional

TRAZABILIDAD


132/200

Propiedad del resultado de una medición por la cual dicho

resultado puede relacionarse con una referencia mediante unacadena ininterrumpida y documentada de calibraciones; cada

una de las cuales contribuye a la incertidumbre de medición

(VIM 2.41)

Para demostrar trazabilidad

hay que hacercomparaciones

TRAZABILIDAD


133/200

De la Información y los resultados: Los informes de ensayo ycalibración deben estar sustentados en los registros y en la

información del laboratorio, de modo que se pueda, reconstruir los

resultados emitidos , considerando todos los factores que afectan la

incertidumbre y el resultado de la medición y ensayo.

De la medición y ensayo: Las mediciones de los equipos deben ser

trazables a patrones nacionales e internacionales

TRAZABILIDAD EN MEDICIONES QUÍMICAS


134/200

TRAZABILIDAD DE UN RESULTADO

TRAZABILIDAD

DE UN PATRÓN

TRAZABILIDAD

DE EQUIPOS

TRAZABILIDAD

METODOLÓGICA

TRAZABILIDAD

DE MUESTRA

Exactitud Representatividad

JERARQUIAS DE REFERENCIAS EN MEDICIONES QUÍMICAS


135/200

Métodos Primarios

Material de Referencia certificado

Ejercicios de Intercomparación

Métodos de Referencia

Muestras adicionadas

Verificación de la trazabilidad utilizando un Método

Primario o Definitivo


136/200

• Son métodos caracterizados por su alta calidad metrológica.

• Son los que se utilizan para realizar mediciones trazables al SI

• Son métodos suficientemente exactos para permitir por si mismos la

determinación de una propiedad para la certificación de un material de

referencia.• Ejemplo de métodos primarios:

– Métodos Gravimétricos.

– Titulación Coulombimétrica a corriente constante.

– Espectrometría de Masas.

– Espectroscopia de Resonancia Magnética Nuclear

Verificación de la trazabilidad utilizando un Material

de Referencia Certificado

http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_5/Metrologia%20I.ppt#65.%20Diapositiva%2065


137/200

Procedimiento Analítico

Muestra desconocida MRC

Resultado ± IncertidumbreX1.

.

.

Xn

X, s

_

XMRC,SMRC

ComparaciónEstadística

Verificación de la trazabilidad participando en un

Ejercicio de Intercomparación



138/200

DE APTITUD COLABORATIVOSDE

CERTIFICACIÓN

Objetivo

Demostrar

competencia

técnica

Validar métodos

analíticos

Asignar valor auno o varios

mensurandos deun MR

Laboratorios

participantesAbierto a

todosSeleccionados

Seleccionadoscon alto nivelmetrológico

Método

analítico

Abierto/

definidoDefinido Abierto/definido

Verificación de la trazabilidad utilizando un Método

de Referencia



139/200

Procedimiento Analítico

Muestra de Rutina

Muestra

representativa

Resultado ± Incertidumbre

Y1.

.

.

Yn

Y, s _

ComparaciónEstadística

Método de Referencia

X1.

.

.

Xn

X, s _

Verificación de la trazabilidad utilizando Muestras

fortificadas



140/200

MuestraMuestra

Repetición 1

Repetición 2

Repetición 3

Repetición 4

...

Repetición n

Repetición 1

Repetición 2

Repetición 3

Repetición 4

...

Repetición n

CX CT

CAD

100C

CC% x

AD

XTónRecuperaci

fortificada


141/200

TRAZABILIDAD EN DETERMINACIONES GRAVIMÉTRICAS

http://www.google.com.pe/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&docid=QDDILPsjTfI_zM&tbnid=WT_4OETii2dvgM:&ved=0CAUQjRw&url=http://evac9.blogspot.com/2013/02/practica-5-determinacion-de-la-riqueza.html&ei=f2JHU8r7BOPf0QHe4oDYCg&bvm=bv.64542518,d.dmQ&psig=AFQjCNFGpboDEinPoH1Tshy-1eSHh21QtA&ust=1397273590165402


142/200

MUESTRA Fe3+disoluciónOH-

Fe(OH)3

Fe2O3

CalibraciónD, Calcinación

Pesada

Mol, 12CmuestraMasa

100f OFeMasa%FeFe32

f Fe= factor gravimétrico para el hierro = 70,0159

1*

1

5,55*

1

2

32

32

32

O gFe

OmolFe

molFe

gFe

OmolFe

molesFe

Pesascertificadas

kg-patrón

Termocuplascalibradas

Kelvin (K)

TRAZABILIDAD EN DETERMINACIONES VOLUMÉTRICAS


143/200

Volumen

TitulantePesascertificadas

Kg-patrón Calibración

pesada

muestra

Titulante

Certificadofabricante

Estandarización

Trazabilidaddemostrada

B B A A N V N V

A

B B

A

V

V N N

Mol, 12C

Patrónprimario

TRAZABILIDAD EN EL ANÁLISIS INSTRUMENTAL

Kg patrónMuestra


144/200

Kg-patrón

Pesas

certificadas

calibración

pesada

PatrónCertificadofabricante

Trazabilidaddemostrada

bmC S X

m

bS C X

Instrumento

Preparación validación

Calibracióndirecta

Calibraciónanalítica

mol, 12C

Verificación de la trazabilidad en las Mediciones Químicas


145/200

La trazabilidad es un elemento fundamental para garantizar lacomparabilidad de los resultados analíticos.

La única manera de asegurar la trazabilidad en los resultados

químicos es comparar el procedimiento que nos proporciona

dichos resultados con una referencia.

Si demostramos que nuestro procedimiento, aplicado en las

condiciones de rutina de nuestro laboratorio, es trazable a la

referencia utilizada, habremos hecho todo lo posible para que

los resultados de las muestras desconocidas sean trazables

a dicha referencia.


146/200

ELEMENTOS DE UN PROGRAMA DE ASEGURAMIENTO

DE LA CALIDAD ANALÍTICA


147/200

1. MUESTRA

2. PERSONAL

3. MÉTODOS

4. INSTALACIONES Y CONDICIONES AMBIENTALES

5. EQUIPOS

6. REACTIVOS – PATRONES

7. AGUA PARA ANÁLISIS8. ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD DE LOS RESULTADOS




148/200

MUESTRA

Transporte y recepción

Sistema de identificación

Registro de anomalías o desvíos

Instalaciones apropiadas para el

almacenamiento, manipulación y

preparación de las muestras.

Disposición final




149/200

PERSONAL




150/200

MÉTODOS

Utilizar métodos normalizados y vigentes

También métodos no normalizados pero

validados.

Confirmación de métodos normalizados

(exactitud, límites de detección,

Incertidumbre, rango de trabajo, etc..)

Desviaciones documentadas y

justificadas técnicamente y autorizadas.

Tipos de Métodos Analíticos

A. Métodos Normalizados:


151/200

Son los mejores. Están desarrollados por organismos de

Normalización u otras organizaciones reconocidas nacional ointernacionalmente; que son aceptados por el sector técnico

involucrado. Organizaciones de prestigio como AOAC, APHA-

AWWA, ASTM, ISO, etc.

Los laboratorios no los deben validar, pero sí verificar quepueden aplicarlos correcta y adecuadamente.



152/200

Métodos Oficiales:

Son aquellos métodos propuestos en un determinado país,tomando como referencia a métodos previamente validados por

organizaciones internacionales de prestigio.

Los laboratorios no los deben validar, pero sí

verificar que pueden aplicarlos correcta y adecuadamente.

Ejemplo: NTP, NOM, NCh, EPA.



153/200

B. Métodos No Normalizados:Son métodos de ensayo desarrollados por el propio

laboratorio u otras partes no reconocidas.

Son ejemplo de métodos no normalizados; los publicados y

recopilados en revistas técnicas o textos, métodos de ensayo

de fabricantes de bienes: equipos, kits de ensayos,

instrumentos portátiles, así como aquellos métodos de

ensayo normalizados modificados; ampliados o aplicados para

alcances diferentes al originalmente establecido en la norma.


154/200




155/200

EQUIPOS

Los laboratorios deben contar con losequipos necesarios para la realizaciónde los ensayos.

Cumplir las especificaciones de los

métodos. Equipos identificados

Personal autorizado

Calibrados o verificados (Programas)

Mantenimiento (Programa/plan)

Mantener registros

Ciclo de vida de losequipos

Calificación de losequipos


156/200

Detección de la necesidadde un nuevo equipo

Calificación del Diseño(DQ)

Selección y

compra

Recepción y puesta

en servicio

Calificación de la

instalación (IQ)

Justificación de la necesidad ydefinición de las características

Utilización rutinaria

Calificación operacional (OQ)

Calificación funcionamiento(PQ)

CALIFICACIÓN DE DISEÑO (DQ)


157/200

Define las especificaciones operacionales y complementarias delequipo y detalla las decisiones en la selección del proveedor

Las especificaciones operacionales o funcionales deberán definir las

características técnicas claves de desempeño del equipo:

Rango de medición

Resolución

Sensibilidad

Tolerancia

incertidumbre de medición.



158/200

Las especificaciones complementarias:

Costo

Documentación suministrada con el equipo (Manuales y

procedimientos de operación , instrucciones de verificación, etc.)

Capacitación y cursos proporcionado por el proveedor

Condiciones ambientales de funcionamiento

Dimensiones

Confianza en el servicio técnico y la disponibilidad de los repuestos

y consumibles.

Periodo de garantía


http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_5/Aseguramiento%20de%20la%20Calidad.pptx#72.%20Presentaci%C3%B3n%20de%20PowerPoint


159/200

Ejemplo de Calificación

de Diseño para un HPLC

CALIFICACIÓN DE INSTALACIÓN (IQ)



160/200

Establece que el equipo es recibido de acuerdo a como se diseñó yespecificó; que esta adecuadamente instalado en ele ambiente que

se selección y que es apropiado para la operación equipo.

Ejemplo de Calificación de Instalación para un HPLC

CALIFICACIÓN DE OPERACIÓN (OQ)



161/200

Es el proceso donde se demuestra que el equipo funcionará de

acuerdo a las especificaciones operacionales en el ambiente

seleccionado

Ejemplo de Calificación de Operación para un HPLC



162/200

REACTIVOS Y PATRONES




163/200


Deben existir controles y registros delingreso de los reactivos y patrones

Deben existir certificado de calidad delfabricante y conservar estadocumentación.

Se debe registrar la fecha de recepción,apertura del envase, caducidad delmaterial, condiciones de almacenamiento.

La preparación de soluciones de reactivosy patrones en el laboratorio, deba estar acargo de personal designado ydebidamente entrenado.




164/200

Cada solución reactiva preparada en el

laboratorio debe estar identificada con una

etiqueta que indique lo siguiente:

Nombre de la solución

Identificación específica (lote de la solución)

Tipo de solución

Concentración de la solución

Condiciones de almacenamiento

Fecha de preparación

Fecha de vencimiento

Nombre o iníciales de la persona que la preparó




http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_5/Certificado%20de%20analisis.pdf


165/200

MATERIALES DE VIDRIO

Se debe registrar la recepción y control

del material de vidrio

Identificar los que requieran calibración yelaborar un Programa de Calibración

Planificar la verificación del material de

vidrio.

Limpieza del material de vidrio

Á




166/200

AGUA PARA ANÁLISIS

Evaluar el tipo de agua para análisis a

utilizar: agua destilada, bidestilada,

desionizada, ultrapura

Se debe realizar un control de calidad del

agua para análisis y registrar.

Conservación del agua para análisis en

recipientes de vidrio borosilicatado;también en los de plástico.




167/200

ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD DE LOS RESULTADOS –

ISO/IEC 17025




168/200


ISO/IEC 17025




169/200


ISO/IEC 17025

Las actividades de aseguramiento de la calidad de un laboratorio

CICLO DEL ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD ANALÍTICA


170/200

as act dades de asegu a e to de a ca dad de u abo ato o

analítico se pueden dar en tres momentos:

1. Fase Pre analítica: Antes de ejecutar el método de ensayo

1. Fase Analítica: Durante la ejecución del método de ensayo

2. Fase Post analítica: Procesos de revisión periódica (una vez

concluido la ejecución del método de ensayo)

CICLO DEL ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD ANALÍTICA


171/200


172/200

ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD ANALÍTICA DE LOS

RESULTADOS


173/200

El laboratorio debe asegurar la calidad de los resultados de unamanera planificada y revisada y debe considerar el uso de

esquemas internos de control de calidad, la participación en

esquemas de comparación entre laboratorio (control externo)


RESULTADOS

El general se plantean las siguientes etapas:

http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_5/Programa%20de%20Aseguramiento%20de%20la%20calidad.pdf


174/200

El general se plantean las siguientes etapas:

1. Establecimiento del Programa de Aseguramiento de la Calidad Analítica

2. Verificación de la competencia técnica del personal

3. Verificación del cumplimiento del Programa de Mantenimiento,

Calibración y verificación de equipos.

4. Verificación del control de las condiciones ambientales

5. Verificación periódica de parámetros de desempeño.

Control de la precisión

Control de la veracidad

Límite de detección del Método

Límite de Cuantificación del Método


RESULTADOS


175/200

6. Verificación de que el método esta bajo control estadístico (Gráficode control)

7. Participación en Pruebas de Interlaboratorio.

8. Acciones correctivas / correcciones

Programa de Aseguramiento de la Calidad Analítica de los Resultados


176/200

El laboratorio debe contar con un Programa de Aseguramiento delos Resultados para los métodos que aplica, en el que puede

indicar:

• Determinación analítica a controlar

• Método de ensayo

• Elementos de control de calidad establecido por el laboratorio /

indicado por el método

• Criterios de aceptación.

• Criterios establecidos en cuanto a la frecuencia


177/200

Niveles de Control de Calidad Analítica

Nivel Objetivo Responsable Frecuencia


178/200

Controles de1er Nivel

Asegurar que todos los

aspectos del análisis están bajocontrol y que los resultados sonestables

Analista Mayor

Controles de2do Nivel

Garantizar la reproducibilidad entrediferentes analista o diferentesequipos.

Asegurar la competencia de analistasque se incorporan al laboratorioPueden usarse como criterios para laautorización de ensayo del analista ypara hacer evaluaciones deseguimiento

DirecciónTécnica

Responsable dela calidad

Menor

Controles de3er Nivel

Garantizar la comparabilidaddel laboratorio

Dirección dellaboratorio

Responsable dela calidad

Esporádico

Parámetros de Desempeño a verificar

VERACIDAD


179/200

• El grado de aproximación entre el valor

medio obtenido de una larga serie de

resultados del ensayo y un valor

aceptado como referencia.(NTP-ISO 5725-1 – 3.7)

• La veracidad se expresa

cuantitativamente en términos de sesgo

μ-XSesgo __

1 Analizando Muestras de Control

¿Cómo se evalúa la veracidad?


180/200

1. Analizando Muestras de Control

• Se debe disponer de una cantidad suficiente de material para

poder ser utilizado durante el tiempo previsto

• Deben ser materiales homogéneos para poderlos dividir en

fracciones equivalentes, que son las que, a lo largo deltiempo, se insertarán entre las muestras.

• Poseer una estabilidad garantizada durante el periodo en que

esté previsto su uso

1 Analizando Muestras de Control



181/200

1. Analizando Muestras de Control

Materiales de

Referencia

Certificados o no

MUESTRAS DE

CONTROL

Muestras

adicionadas

Patrones

Muestrassintéticas

Materiales de

Referencia

Internos



182/200

2. Analizando Muestras Ciegas

• Se trata de muestras con un contenido conocido a

concentración del analito, que son procesadas

rutinariamente por el personal de laboratorio

• Suelen distinguirse entre las muestras ciegasy las

doblemente ciegas

2,25

mg/L

2,31

mg/L

Parámetros de Desempeño a verificar

PRECISIÓN


183/200

• Es el grado de concordancia existente

entre los resultados independientes

de un ensayo, obtenidos en

condiciones estipuladas.

(NTP-ISO 5725-1 - 3.12)

La expresión cuantitativa de la

precisión depende en forma crítica de

las condiciones estipuladas.

mg/L mg/L

2,17mg/L

2,20mg/L


184/200

¿Cómo se evalúa la Precisión?


185/200

Muestras

duplicado

Duplicado de

muestras

adicionadas

REPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD

NIVELES DE ENSAYO

Laboratorio 1

DISEÑO DEL EXPERIMENTO:


186/200

Lote 1

Lote 2

Lote 3

Lote 4

Lote q

.

..

Laboratorio 1

Laboratorio 2

Laboratorio 3

Laboratorio 4

Laboratorio p

..

.

“n” replicas

por cada nivel

Muestra 1

Muestra 2

Muestra 3

Muestra 4

Muestra q

Los “p” laboratorios llamados “i” (i:1,2,3,4,..,p) “q” niveles llamados “j” (j:1,2,3, 4,…,q)

Gráfico

de Control por Variable


187/200

m

X........XXX

m21

m

R........RRR

m21

m

S........SSS

m21

Gráfico

de Control por Variable

1. Gráfico de Control de Precisión “R”


188/200

4XDRLCS

RLC

1)DR3

2RLAS 4 (

2d

R S ˆ

n

S ) x( u

3XDRLCI

1)DR3

2RLAI 4 (

Limites

LCS:LIMITE DE CONTROL O ACCION SUPERIORLAS:LIMITE DE ADVERTENCIA O ALERTA SUPERIOR

LC:LINEA CENTRALLAI:LIMITE DE ADVERTENCIA O ALERTA INFERIORLC

Curso Aseguramiento de Calidad de Los Resultados Abril-mayo 2014

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