CUESTIONARIO

1. Completar el siguiente cuadro

PRUEBA

BIOQUIMICA

FUNDAMENTO COMPOSICION TECNICA INTERPETACION RESULTADOS

CITRATO Medio utilizado para la diferenciación de enterobacterias, en base a la capacidad de usar citrato como única fuente de carbono y energía.

Siembra:

A partir de un cultivo puro de 18-24 horas, sembrar en superficie un inóculo ligero, usando un asa sin arrastrar el agar. 

Incubación:

A 35-37 ºC, durante 24-48 horas, en aerobiosis.Algunos microorganismos pueden requerir hasta 4 días de incubación.

.Positivo: crecimiento y color azul en el pico, alcalinidad..Negativo: el medio permanece de color verde debido a que no hay desarrollo bacteriano y no hay cambio de color.

SIM/

MOVILIDAD

Medio semisólido destinado a verificar la movilidad, producción de indol y de sulfuro de hidrógeno en un mismo tubo. Útil para diferenciar miembros de la familia Enterobacteriace-ae.

Siembra:

A partir de un cultivo de 18-24 horas en medio sólido, sembrar por punción profunda con aguja de inoculación recta. Se debe inocular el centro del tubo, la punción debe abarcar 2 tercios de profundidad desde la superficie. Es importante siembra en línea recta.Incubación:

.24 horas

.35-37 °C, en aerobiosis. Después agregar 3-5 gotas de reactivo de Kovac´s o de Erlich.

.Cepas móviles: Producen turbidez del medio que se extiende .Cepas inmóviles: el crecimiento se observa solamente en la línea de siembra. .Cepas SH2 positivas: ennegrecimiento a lo largo de la línea de siembra o en todo el medio. .Cepas SH2 negativas: permanece sin cambio de color..Cepas indol positivas: desarrollo de color rojo luego de agregar el reactivo de Kovac´s o de Erlich. .Cepas indol negativas: sin cambio de color.

LIA Medio de cultivo utilizado para diferenciar microorganismos, especialmente Salmonella spp., basado en la decarboxilación / desaminación de la lisina y en la producción de ácido sulfhídrico.

SiembraPor punción profunda con aguja de inoculación.

IncubaciónEn aerobiosis, durante 24 horas a 35-37 °C.

1- Decarboxilación de la lisina:-Prueba Positiva: Pico violeta/fondo violeta.-Prueba Negativa: Pico violeta/fondo amarillo.2-Desaminación de la lisina:Pico rojizo/fondo amarillo. Esto sucede con cepas del género Proteus, Providencia y alguna cepas de Morganella spp.3-Producción de ácido sulfhídrico:-Prueba positiva: Ennegrecimiento del medio (especialmente en el límite del pico y fondo)

TSI El Triple Sugar Iron Agar es un medio de diferenciación para organismos entéricos Gram negativos en función de su capacidad de fermentar la Dextrosa, Lactosa y Sacarosa, y de la producción de Sulfuro de Hidrógeno.

El color del medio es rojo anaranjado. El tiempo de incubación no debe sobrepasar las 24 horas, siendo las lecturas optimizadas entre 15-17 horas. La producción de Sulfuro de Hierro puede llegar a ser tan intensa que enmascare el color amarillo del fondo del tubo cuando este se produce. Los tubos deben incubarse con los tapones aflojados para favorecer la aerobiosis.

UREA Utilizado para la identificación de moo, en base a la actividad ureásica. Util para diferenciar Proteus spp. de otros miembros de la familia Enterobacteriaceae.

SiembraSembrar un inóculo denso a partir de un cultivo puro de 24 horas. IncubaciónA 35-37 ºC, en aerobiosis. Observar las reacciones a las 8, 12,24 y 48 horas de incubación.Para aquellos microorganismos que hidrolizan lentamente la urea, incubar hasta 72 horas.