CRONOBACTERIUM SAKAZAKII_2

5/11/2018 CRONOBACTERIUM SAKAZAKII_2 - slidepdf.com

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CRONOBACTERIUM SAKAZAKII

Generalidades.

Barras rectas de 0.6-1-0 X 1.2-3.0 µm, conforme a la definición general de la familia Enterobacteriaceae. Son móvilesflagelos (generalmente 4-6). Gram negativas. Anaerobios facultativos. El crecimiento se produce fácilmente en meordinarios. La glucosa es fermentada con producción de ácido y gas (generalmente CO2: H2 = 2:1). El gas no es produca partir de la glucosa en 44.5°C. La mayoría de las cepas dan un resultado positivo en la reacción de Voges-Proskaue

negativo en la prueba de rojo de metilo. Se produce una reacción alcalina en el citrato de Simmons y el caldomalonato. El nitrato es reducido a nitrito. H2S no se produce a partir de tiosulfato. Tetrationato no se reduce. Aceitemaíz y tributirina no son hidrolizados. Gelatina, el ADN.L-arabinosa, D-celobiosa, D.fructuosa, D-galactosa, D-galactorunato, gentobiose, D-gluconato, D-glucosamina, D-glucD-glucurunato, L-malato, D-manosa, D-tetralosa y D-xilosa son utilizads por casi todas las cepas como única fuentecarbono y energía. L-arabitol, etanolamina, itaconato, 3-fenilpropionato, L-sorbosa, D-tartrato, triptamina, y el xilitose utilizan. La temperatura óptima de crecimiento es 30°C. La mayoría de las cepas clínicas crecer a 37°C; algunas ceambientales dan erráticas reacciones bioquímicas a 37°C. Se encuentra ampliamente distribuido en la naturaleza, comen el hombre y en los animales.

Historia.

Los primeros casos atribuidos a este organismo se produjeron en 1958 en Inglaterra (Urmenyi y Franklin, 1961). Deentonces, hasta julio de 2008, alrededor de 120 casos documentados de infección por E. sakazakii, y al menosmuertes se han identificado en todas partes del mundo en informes presentados por organizaciones de salud públicaE. sakazakii que solía ser anteriormente conocido como "amarillo pigmentado Enterobacter cloacae" (debido a quecolonias presentaban dicha tonalidad). Hasta 1980 E. sakazakii se definió por primera vez cuando se presentó como nueva especie sobre la base de las diferencias en la hibridación ADN-ADN, las reacciones bioquímicas, ysusceptibilidad a los antibióticos. La bacteria fue nombrada sakazakii en honor al japoneses microbiólogo Riichi SakazDespués de que la especie Enterobacter sakazakii (E. sakazakii ) fue designada por primera vez en 1980, se identicomo uno de los dieciséis especies distintas en el género Enterobacter, dentro de la familia Enterobacteriac

Desde el principio, muchos biogrupos diferentes fueron definidos como E. sakazakii , con la existencia de estos genot

divergentes y biogrupos lo que sugiere que E. sakazakii puede, de hecho, representan múltiples especies.consecuencia, en 2007, un grupo de investigación aclara la relación taxonómica entre las diferentes cepas dsakazakii, mediante el uso de sofisticadas nuevas formas de ver y analizar las bacterias. Iverson et al fueron por lo tacapaz de distinguir muchas especies diferentes. Su trabajo resultó en la propuesta de una clasificación alternativa dsakazakii en un nuevo género llamado Cronobacter.

Las nuevas técnicas utilizadas por el grupo de investigación proporcionan una prueba clara de los avances sustancilogrados en biología molecular, e incluyó f-AFLP, ribotipificación automatizados, de larga duración en la secuenciacde genes de ARNr 16s e hibridación ADN-ADN. F-AFLP (longitud de fragmentos amplificados a polimorfifluorescente) es un medio para bacterias genotipo, mediante la selección de pre-adaptación de fragmentos de ADamplificación a concentraciones fácilmente detectables y de buen tamaño con precisión. Automatizado ribotipificac

es un método de determinación del genotipo que puede ser utilizado para generar huellas genéticas de las cebacterianas. De larga duración en la secuenciación de genes de ARNr 16s ofrece un medio para comparar una pestable del código genético (el gen 16s ARNr) entre diferentes bacterias. La técnica de hibridación ADN-ADN proporclas comparaciones genéticas entre el genoma total de ambas especies.E. sakazakii ha sido reclasificado en seis especies diferentes en el nuevo género Cronobacter dentro de la famEnterobacteriaceae. Las nuevas especies son actualmente Cronobacter sakazakii , C. turicensis; C. malonaticus

1 Voges-Proskauer: prueba que permite determinar la formación de acetil metil carbinol, el que es un producto intermediario dfermentación que conduce a la formación de 2,3 butanodiol y que caracteriza a ciertas especies de las Enterobacteriaceae, por lo indicará que la glucosa es fermentada por la vía butanodiólica.



muytjensii y dublinensis C .; la sexta especie se identifica simplemente como genomospecies I, ya que actualmeincluye dos cepas representativas.El nombre se deriva de Cronobacter apropiada de la mitología griega debido a que E. sakazakii constituye un pelmicrobiológico en la cadena de alimentación infantil, la mortalidad histórica de alta en los recién nacidosconsecuencia, fue nombrado en honor al dios mitológico “Cronos”

2.

Géneros o especies de interés médico.

Incluyen 5 especies y subespecies:

Cronobacter sakazakii Cronobacter malonaticus Cronobacter muytjensii Cronobacter turicensis Cronobacter dublinensis C. dublinensis subesp. dublinensis C. dublinensis subesp. lausannensis C. dublinensis subesp. lactaridi

De las presentadas anteriormente, Cronobacter sakazakii es la que tiene mayor interés médico ya que está relacion

con una variedad de enfermedades severas que causan infección generalizada (septicemia, meningitis, cerebritis, eprincipalmente en los recién nacidos e inmunodeprimidos. En neonatos la infección ocurre en bebes de hasta 28 díasprematuros o en pequeños con pocas defensas inmunológicas la situación es crítica.

Identificación y/o diferenciación. En muestras clínicas el microorganismo se puede aislar de:

LCR

aspirado traqueal

heces

orina

sangre heridas

Para su aislamiento se utilizan los siguientes agares:

Agar MacConkey

Agar EMB

Agar desoxicolato

Agar VRBG (rojo violeta, bilis, glucosa)

A partir de muestras clínicas normalmente estéril hay pocos problemas con el aislamiento de C. sakazakii. Sin embael aislamiento de una muestra de la fórmula infantil requiere un cierto grado de suerte ya que el organismo lo probable es que señalar, distribuido de manera desigual en todo el lote y el número probablemente sea bastante ben la región de menos de 1UFC por g.Pre-enriquecimiento se utiliza para reanimar a las células estresadas y esto es seguido por un enriquecimiento selecel método de la FDA utiliza el enriquecimiento de enterobacteriáceas (EE) de caldo que luego se sembró en agar y VRcolonias sospechosas se subcultivan en agar TSA en amarillo colonias pigmentadas deben ser confirmado por la prude oxidasa y un panel de identificación bioquímica. Otros métodos utilizan el caldo modificado laurilsulfato

2Cronos: hijo de Urano (el Cielo) y Gea (la Tierra), siendo el más joven de los 12 Titanes, se convirtió en el rey de los titanes, y tom

de su esposa Rhea quien le dió un número de hijos, incluyendo Hestia, Deméter, Hera, Hades y Poseidón. Cronos, sin embargo, hasido advertido por sus padres que iba a ser derrocado por su propio hijo. En consecuencia, se tragó todos los niños.



vancomicina para la etapa de enriquecimiento selectivo y esto se puede hacer a una temperatura elevada 44

Después del enriquecimiento, ahora hay nuevos agares cromogénicos disponibles que reducen la carga de trabajolaboratorio, dar un tiempo más rápido de resultados y son generalmente más fiables. Éstos utilizan el hecho de qualfa-glucosidasa es producida por C. sakazakii, y no por la mayoría de otras enterobacteriáceas. Las colonias típicamuestran de coloración distinta, pero la confirmación bioquímica se requiere todavía.La concentración de células bacterianas puede ayudar con la crianza de los números disponibles de la célula. Binmunomagnéticas capturar las células diana en la muestra, que luego pueden ser transferidos a cualquiera de

medios cromogénicos o para un resultado rápido se utiliza el método molecular. Los métodos moleculares, que se utdespués de los pasos de enriquecimiento, incluyen los ensayos de PCR o el gen de la sonda tanto dar resultados rápidos que no necesitan una confirmación posterior.

Características Cronobacterium sakazakii

Motilidad (36°) +

Pigmento amarillo +

Urea hidrolizada -

Producción de indol d

Rojo de metilo -

Hidrólisis de gelatina a 22 º C -

Lisina descarboxilasa -

Arginina dihidrolasa +

Ornitina decarboxilasa +

Fenilalanina desaminasa d

Glucosa deshidrogenasa +

Gluconato deshidrogenasa -

Crecimiento a 41° +

Hidrólisis de esculina +

Acetato +

Lactosa +

Sacarosa +

Putrescina +

Fenilacetato -

Histamina -

Dulcitol d

Citrato +

Benzoato -

d: positivo o negativo en 1-4 días



Enfermedades.Se han notificado tasas de mortalidad debida a la infección por Cronobacter sakazakii de hasta 50%

Meningitis: es una inflamación de las membranas que cubren el cerebro y la medula espinal.

Causas: Infecciones virales que generalmente mejoran sintratamiento. Las infecciones meningíticas bacterianas son

extremadamente graves y pueden producir la muerte o dañocerebral incluso con tratamiento.

Síntomas:

Recien nacidos:

Nauseas

Vomito

Somnolencia

Lactantes

Pueden parecer lentos o inactivos Vomito

Estar irritables o alimentado de forma deficiente

Mayores de 2 años

Febrícula

Dolor de cabeza

Rigidez de cuello

A cualquier edad el paciente presenta convulsiones

Enterocolitis necrotizante: afecta a recién nacidos, en especial a prematuros y se presenta como un síndrogastrointestinal y sistémico.

Sintomas:

Distensión e hipersensibilidad abdominal

Heces hemorrágicas

Intolerancia a la alimentación

Apnea

Letargia (somnolencia profunda)

La vía final es la cascada inflamatoria que se desencadena en recién nacido con determinados factores de riesgo y llevara a una necrosis de la pared intestinal.

Patogenia:Necrosis de la mucosa y de las capas profundas del intestino, sobre todo en el íleon terminal, así como colon e intestdelgado proximal aunque en menor frecuencia Sepsis Cerebritis

Secuelas neurológicas a largo plazo, debido a la presencia de alfa-lactamasas y cefalosporinasas enC. sakazakii



Mecanismos de Patogenicidad

Producción de Entoroxinas Aeroactinas : Apoptosis de células adyacentes Hemaglutininas : Adhesion

0 Se encuentra principalmente en Leches en polvo para lactantes y niños.

3< UFC/100 g Dosis infectiva

Patógeno oportunista Grupo de riesgo: lactantes inmunodeprimidos y los recién nacidos (≤28 días).

Incidencia baja pero mala prognosis

Tasa de mortalidad entre 35 % y 80%.

Virulencia

Lipopolisacarido tipo A (endotoxina) , que forma parte de la membrana externa , mecanismo que le permadaptarse a sobrevir en productos desecados.

Tolerancia a los bajas concentraciones de vapor de agua libre ( aw ), lo que permite ser mas resistente enface estacionaria al estress osmótico y a la desecación, que otras bacterias que forman parte de la misma fam(Escherichia coli y Salmonella).

Sintomatología General en presencia del patógeno:

Irritabilidad

Ictericia Febrícula

Mecanismos de resistencia.

Hacia Antimicrobianos de la familia de los beta-lactamicos Formación de betalactamasa ( mecanismo de inducción frente al mismo)



Medios de cultivo.

MEDIO DFI: Medio cromogénico Cont glucopiranósido α-glucosidasa. Druggan-Forsythe-Iversen

MEDIO OK: medio fluorogénico fluorógeno -α-glucosidasa

Medio Selectivo, diferencial. Oh-Kang

MEDIO LBDC: Leuschner-Baird- Donald-Cox, fluorógeno -α-glucosidasa Medio diferencial No selectivo

MEDIO ESPM (Enterobacter sakazakii plating medium): Es un medio especifico para Cronobacter sakazakii. Dos sustratos cromogénicos Restaino-Frampton. También se conoce como medio RF



Aportaciones.

En 2005 Enterobacter sakazakii fue hallada en un lote de lalecheEnfamil AR, importada de México, lo provoco su retiro del mercado y la prohibicion de su consumo

En 2008 2 niños hospitalizadosen Mexico por E. sakazakii, el masculino murió y la mujer perman

hospitalizada, ambos niños habían sido alimentados con leche en polvo y otros alimentos. Tenían diferen

cepas de la bacteria.

Se recomienda la administración de fórmulas líquidas estériles para niños prematuros y neonatos que

puedan recibir lactancia materna.

Preparar sólo la cantidad necesaria.

Evitar darle leche de formula al recién nacido o durante los primeros 28 días.

Bibliografía.

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2. Carol Iversen, 1, 2 Angelika Lehner, 1 Niall Mullane, 3 John Marugg, 2 Séamus Fanning, 3 Roger Stephan, 1 * aHan Joosten. 2007. Identification of “ Cronobacter ” spp. (Enterobacter sakazakii) ( Enterobacter sakazakii).Pubmed central. Journal of Clinical Microbiology. Suitable in:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2168468/

3. George M. Garrity, Don J. Brenner, Noel R. Krieg and James T. Staley.1997.Brokc: BERGEY’S MANUAL OF

Systematic Bacteriology. 2nd. Edition. The Proteobacteria Ed. Michigan State University East Lansing, USA.p. 48824-4320

4. Food Safety News. 2009. The name of Cronobacter Sakazakii. In: Opinion & contributed articles. Breaking newfor everyone´s consumption. Suitable in: http://www.foodsafetynews.com/2009/09/the-naming-of-cronobacter-sakazakii/

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2168468/

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