CONTROL DE CALIDAD EN PRUEBAS CUALITATIVAS (Urianálisis …

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CONTROL DE CALIDAD EN PRUEBAS CUALITATIVAS (Urianálisis y Serología) Yurani Lopera Morales Especialista Control de Calidad

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CONTROL DE CALIDAD EN PRUEBAS CUALITATIVAS (Urianálisis y Serología)

Yurani Lopera MoralesEspecialista Control de Calidad

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Control de Calidad en Métodos Cualitativos• Definiciones

• Estadística No Paramétrica

• Control de Calidad InternoSistema analítico, materiales de control, BPL

• Control de Calidad Urianálisis

• Control de Calidad Serología

Temario

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Objetivo principal

Conocer aspectos importantes de los métodos cualitativos para elegir correctamente la estadística aplicable y obtener correctas

conclusiones.

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Definición

Método Cualitativo

Método Semicuantitativo

Presencia

Ausencia

Reactivo

No Reactivo

(Grados)

Datos no paramétricos

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Datos no paramétricos

Datos cualitativos ordinales: Se pueden ordenar losvalores obtenidos.Ej: Tira reactiva, sedimento urinario, crecimientomicrobiano, etc.

Estadística descriptiva para datos no paramétricos:Mediana, moda, percentiles y porcentaje de acuerdo.

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Control de Calidad Interno

Materiales de Control

Sustancias con propiedades específicas establecidas lascuales permiten conocer la variabilidad de lametodología

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Control de Calidad Interno

Tipos

Primera opinión o in kit

Segunda opinión

Tercera opinión

Precisión

Exactitud

Valores de corte EIA (Analitos Tipo B)

Serología

Materiales de Control

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Control de Calidad Interno

¿Cuál es su objetivo?

Conocer la variabilidad del sistema analítico.

Verificar diariamente si el sistema analítico se encuentra dentro de la

variabilidad esperada.

Alerta al analista sobre problemas en el sistema analítico, que pueden

invalidar la utilidad clínica de los resultados de los pacientes.

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Control de Calidad Interno (Sistema analítico)

Componentes:

Analizadores (consumibles)

Reactivos, Calibradores

Equipos e Instrumentos adicionales

Factores Ambientales

Proceso estandarizado:Preparación y manejo del control, calibración y muestras.

Proceso Documental constante

Personal:Capacitado

Comprometido

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Control de Calidad Interno

Características

Matriz humana (conmutable) Estabilizantes y Conservadores

Contener la mayor cantidad de analitos de un área de laboratorio

Concentraciones cercanas a niveles de decisión médica

Estabilidad antes y después de abrir cada vial

Caducidad prolongada

Para uso en varios instrumentos

Programa de Comparación Interlaboratorios (PCI)

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Áreas de laboratorio

Microbiología (Bacteriología, Parasitología,Micología)

Urianálisis

Serología (virología)

Inmunohematología

Inmunofluorescencia

Diagnóstico molecular

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Control de Calidad

Punto 5 – “Requisitos Técnicos”

Personal (Responsabilidades, capacitaciones, evaluaciones,vestimenta, conducta)

Instalaciones y condiciones ambientales (inmobiliario,climatización, espacio físico, mantenimiento)

Equipo y reactivos (Carpetas, inventarios, mantenimientospreventivos y correctivos)

NMX-EC-15189 (Buenas Prácticas del Laboratorio)

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Control de Calidad en Urianálisis

Glucosa

0

30

100

3001000

Tira reactiva Control

500 mg/dL

La CLSI recomienda que lavariabilidad no vaya más allá deuna categoría alrededor del valoresperado

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Control de Calidad en Urianálisis Glucosa

Control 2 - 500 mg/dLControl 1 - 0 mg/dL

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Control de Calidad en Urianálisis

GlucosaControl 2 - 500 mg/dLControl 1 - 0 mg/dL

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Control de Calidad en Urianálisis Glucosa (PCI)

Grupo Par Control 2 - 500 mg/dLControl 1 - 0 mg/dL

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Control de Calidad en Urianálisis

Sedimento (GR)Control 2 - 350 eri/uL

Control 1 – Neg <10 eri/uL

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Control de Calidad en Urianálisis

Sedimento (GR)Control 2 - 300 eri/uL

Control 1 – Neg <10 eri/uL

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Control de Calidad en Urianálisis

Sedimento (PCI)Grupo Par Control 2 - 300 eri/uL (50hpf)

Control 1 – Neg <10 eri/uL (2hpf)

10 10

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Control de Calidad Externo Urianálisis

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Control de Calidad Externo Urianálisis

≥80%

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Control de Calidad Externo Urianálisis

30%

20%

70%

80%≥80%

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Control de Calidad Externo Urianálisis

≥80%

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Control de Calidad Externo Urianálisis

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Control de Calidad Externo Urianálisis

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Control de Calidad Externo Urianálisis

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Serología Infecciosa: Control de calidad (Fase analítica). Evaluación del desempeño analítico.

Verificación de los procedimientos de exámenes serológicos.

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Objetivo principal

Detectar eficientemente muestras con enfermedadesinfecciosas y endémicas

Control de calidad en Serología (Fase analítica)

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Control de calidad en Serología

Pre-analítica Analítica Post-analítica

Preparación del donador

Toma de muestra (Muestra incorrecta, volumen,

identificación)

Almacenamiento

Transporte

Condiciones óptimas del “Sistema Analítico”

Control de CalidadInterno

Control de Calidad Externo

Emisión del resultado (Tiempo, errores de captura, asesoría)

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Definiciones (Tipos de resultados)

TAMIZAJE - ESCRUTINIO - CRIVADO -

SCREENING - DESPISTAJE - PRESUNTIVA

INTERPRETACIÓN:

Reactivo

No reactivo

Zona Gris ó Dudoso

Semicuantitativo

Pruebas presuntivas para la detección de anticuerpos o antígenosde agentes infecciosos transmisibles.

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Definiciones (Tipos de resultados)

CONFIRMATORIAS Ó

SUPLEMENTARIAS

INTERPRETACIÓN:

Positivo

Negativo

Indeterminado

Cualitativo

Pruebas de laboratorio adicionales que apoyan los resultados delas pruebas de tamizaje. No siempre las confirma

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Definiciones

ALGORITMO VIH InDRE

(OMS/NOM)

Suero/Plasma

Prueba presuntiva 1(ELISA, Aglutinación, Dot ELISA)

No reactiva Reactiva

Reportar comoNegativo Prueba presuntiva 2

(ELISA, Aglutinación, Dot ELISA)No reactiva

Reactiva

Prueba Confirmatoria(WB, IFI, RIPA)

Repetir por duplicado

Negativa Indeterminada Positiva

Hacer seguimiento cada 3 meseshasta definir estado serológico

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Definiciones

Tamizaje

“Todo sospechoso es culpable hasta que se pruebe lo contrario”

Prepondera la SENSIBILIDAD sobre la especificidad.

No utiliza pruebas suplementarias o confirmatorias de maneraobligatoria.

Es guiado por uso de algoritmos hasta su aprobación, para uso odescarte.

SENSIBILIDAD: Capacidad de una prueba de laboratorio para detectar verdaderos reactivoso verdaderos positivos.

Excluye falsos negativos

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Definiciones

Diagnóstico

“Todo sospechoso es inocente hasta que se pruebe lo contrario”

Prepondera la ESPECIFICIDAD sobre la sensibilidad.

Utiliza una prueba suplementaria o confirmatoria.

Es guiado por uso de algoritmos hasta su identificación.

ESPECIFICIDAD: Capacidad de una prueba de laboratorio para identificar todos losnegativos o no reactivos correctamente.

Excluye falsos positivos

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DefinicionesValor de corte – “Cut off” - Index

Cifra que permite diferenciar los resultados reactivos de los no reactivos de unaprueba o procedimiento.

Establecido por el fabricante

Va cambiando por factores ambientales, lavados, degradación, desgaste

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Definiciones“Zona Gris” ó Zona Dudosa (10%)

Sanos

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Definiciones (Falsos negativos)

Sanos

Falsos Negativos

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Definiciones (Falsos positivos)

Falsos Positivos

Enfermos

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Definiciones (Index en donadores sanos)

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Definiciones

Sensibilidad Clínica

Capacidad del reactivo en reconocer mutantes, variantes,genotipos

Ej; HIV 1 y 2, HCV 7 genotipos y más de 52 subtipos (México1, 2 y 3), AgsHB (más de 20 mutantes)

Anticuerpos de diferentes clases IgG, IgM e IgA

Combinar en la medida de lo posible el uso de Ag y Ab parareducir el periodo de ventana

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Definiciones

Sensibilidad Analítica

Se refiere a la concentración mínima, de Anticuerpo oAntígeno, que el reactivo es capaz de detectar

También conocida como límite de detección

Se da en unidades; pg/mL (Antígenos) y UI/mL(Anticuerpos)

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Definiciones

Especificidad

Está asociada fuertemente al material biológico del reactivo

Anticuerpos; Monoclonal o policlonal

• Epítope dirigido (mutantes AgsHB)

• Diferentes Ab monoclonales

Antígenos; lisados, péptidos sintéticos, Agrecombinantes, procesos de purificación

Tipo (HIV 1 y 2)

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Ejemplos

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Ejemplos

REGIONES

MUTACIONES

HBs 1

Y 100 S

L 109 P

S 113 T

T 114 S

T 118 A, T 118 V

HBs 2

P 120 S, P 120 T

T 123 N

HBs 3

C 124 R

T 125 M

T 126 S

P 127 T, P 127 A

Q 129 R

G 130 N

N 131 T

K 133 I, M 133 T

F 134 N

HBs 4

P 142 S

T 143 L, T 143 S,

S 143 L

D 144 A, D 144 E

G 145 R, G 145 K

Mutaciones del AgHBs

ESTAS

MUTACIONES

SON LAS MÁS

REPRESENTATIVAS

REPORTADAS

POR LA

BIBLIOGRAFÍA

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Ejemplos

FASE SÓLIDA CON 3 Ab MONOCLONALES

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Ejemplos

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Ejemplos

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Definiciones

Notas

La Sensibilidad y Especificidad es reactivo dependiente(Sensibilidad clínica y analítica)

Pruebas de tamizaje; mayor sensibilidad (100%) menorespecificidad

Pruebas suplementarias; mayor especificidad (100%)

Es muy recomendable evaluar el valor de corte en poblaciónmestiza-mexicana

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Control de calidad interno

Materiales de control

Característica Segunda Opinión Tercera Opinión

Matriz similar a los pacientes

Si Si

Manipulado y estandarizado

Usuario adición de conservadores y estabilizantes

Proveedor

Débil positivo Dilución necesaria Sin diluciones

Caducidad prolongada Menos de tres meses Hasta dos años

Multianalito No *Si

Uso de ultracongelador Necesario No

PCI No Si

Confiabilidad Menor Mayor

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Control de calidad interno (frecuencia)

ELISA - microplaca

Se sugiere procesar controles al principio y fin de las muestras

Si se puede a la mitad de la corrida aumenta la probabilidad dedetectar errores

Preferentemente no estén a la misma altura

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Control de calidad interno (frecuencia)

Sistemas continuos

Se sugiere procesar controles al principio y fin de las muestras, porturno (si existen)

Dependiendo del número de test a procesar diarios se sugiere procesarcada 50 o 100 test

= Dato material de control dentro de límites permitidos

= Muestra de Paciente resultado correcto

24 hrs

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Control de calidad interno (frecuencia)

Sistemas continuos

24 hrs

= Dato material de control fuera de límites permitidos

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Control de calidad interno (frecuencia)

= Dato material de control fuera de límites permitidos

= Dato material de control dentro de límites permitidos

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Control de calidad interno

Controles débiles positivos

Lo marca la NOM-253

Ayudan a monitorear la sensibilidad del método encondiciones de rutina

Entre más cerca este del valor de corte generalmente lavariabilidad aumenta

NOM-253-SSA1-2012; Un CDP no deberá ser mayor a tresveces el valor de corte

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Control de calidad interno

Controles débiles positivos

En los laboratorios de América Latina cambia un poco

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Control de calidad interno (Estadística)

Desempeño analítico

200192188 204 208 212196

100

50

Frecuencia

x = Concentración

Distribución Gaussiana

y = Frecuencia

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Control de calidad interno (Estadística)

Es un fenómeno que afecta a la materia de forma universal. Encontrol de calidad, los eventos de medición arrojan resultadosdiferentes como consecuencia de la variación de sus componentes ylas sustancias a medir

Variabilidad

Desempeño Analítico

200192188 204 208 212196

100

50

x = Concentración

y = Frecuencia

Conjunto Homogéneo

de Datos

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Control de calidad interno (Estadística)

Conjunto Homogéneo de Datos (CHD)

Igual lote de reactivo

Igual lote de calibrador

Sistema analítico sin cambios importantes (Mttoscorrectivos o preventivos mayores) “Condiciones Estables”

Proceso estandarizado del manejo material de control

Asignación de decimales correctos

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Control de calidad interno (Estadística)

Análisis de desempeño

Distribución Normal o Gaussiana

Media

Desviación Estándar

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Control de Calidad Interno (Estadística)

El promedio aritmético de un conjunto de datos puntuales

Media

Brinda un estimado de la tendencia central de distribución que debe

esperase cuando el ensayo trabaja bajo condiciones estables

1.- 5.02

2.- 5.15

3.- 5.91

4.- 5.49

5.- 5.64

6.- 5.75

7.- 5.91

X = 5.55

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Control de Calidad Interno (Estadística)

Cuantifica el grado de dispersión de los datos puntuales en relación con

la media.

Se utiliza para establecer el intervalo que determina la aceptación del

resultado del control.

Desviación Estándar (DE)

+/- 1 DE

+/- 2 DE

+/- 3 DE

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Control de Calidad Interno (Estadística)

Expresa la DE en porcentaje y es una medida de variabilidad de los

resultados que permite comparar diferentes concentraciones, equipos,

metodologías).

Coeficiente de Variación (CV)

X = 60

DE = 1.5

X = 140

DE = 3.5

CV = 2.5 CV = 2.5

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Control de calidad interno (Estadística)

Asignación correcta de valores

Valor provisto por el fabricante del material decontrol en el inserto.

Cálculo o estimación basada en puntos recientes(20 datos durante 4 semanas)

La media y desviación estándar asignados deben representar el desempeño actual del método en el

laboratorio

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Control de calidad interno (Gráfica LJ)

X = 3.71DE = 0.64

CV = 17.4

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Control de calidad interno (Interpretación)

HCV

X = 3.71DE = 0.64

CV = 17.4

Inserto de Reactivo

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Control de calidad interno (interpretación)

HCV

CV=4.5

Page 67: CONTROL DE CALIDAD EN PRUEBAS CUALITATIVAS (Urianálisis …

Control de calidad interno (Interpretación)HCVCV = 6.4

CV = 17.4

2.74

Page 68: CONTROL DE CALIDAD EN PRUEBAS CUALITATIVAS (Urianálisis …

Control de calidad interno (Interpretación)

HIV

HCV

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Control de Calidad Interno (Interpretación)

¿Cuánta variabilidad podría ser permitida para un CHD?

Page 70: CONTROL DE CALIDAD EN PRUEBAS CUALITATIVAS (Urianálisis …

Control de Calidad Interno (Interpretación)

¿Cuánta variabilidad podría ser permitida para un CHD?

X = 1.5DE = 0.3

CV = 20

ZG (10%)

2.5% de pacientes FN

Page 71: CONTROL DE CALIDAD EN PRUEBAS CUALITATIVAS (Urianálisis …

Control de Calidad Interno (Interpretación)

¿Cuánta variabilidad podría ser permitida para un CHD?

X = 1.5DE = 0.23

CV = 15

ZG (10%)

1.25% de pacientes FN

Page 72: CONTROL DE CALIDAD EN PRUEBAS CUALITATIVAS (Urianálisis …

Control de Calidad Interno (Interpretación)

¿Cuánta variabilidad podría ser permitida para un CHD?

X = 1.5DE = 0.15

CV = 10

ZG (10%)

< 1.0% de pacientes FN

Page 73: CONTROL DE CALIDAD EN PRUEBAS CUALITATIVAS (Urianálisis …

Control de Calidad Interno

Cambios de lote

Page 74: CONTROL DE CALIDAD EN PRUEBAS CUALITATIVAS (Urianálisis …

Programa de Comparación Interlaboratorio

Indicadores de Calidad

Datos del Lab

Media

DE

CV

# puntos

Gpos Consenso

Media

DE

CV

# puntos

# labs

Valores que determinan el

desempeño de un sistema analítico

IDE

CVR

Page 75: CONTROL DE CALIDAD EN PRUEBAS CUALITATIVAS (Urianálisis …

Programa de Comparación Interlaboratorio

Veracidad

Expresa al error sistemático en términos de DE de la media del grupo de

consenso

Índice de Desviación Estándar (IDE)

IDE = DE del Gpo.

Media del Lab – Media del Gpo.

Intervalo Aceptable

-2 a +2

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Programa de Comparación Interlaboratorio

Precisión

Es un valor calculado que compara el CV del laboratorio de una prueba

específica con el CV del grupo de consenso.

Intervalo Aceptable

0 a 2

Ratio del Coeficiente de Variación (CVR)

CVR =CV del Gpo

CV del Laboratorio

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Programa de Comparación Interlaboratorio

Verificación de Parámetros Estadísticos

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Control de Calidad Externo SerologíaC

ual

itat

ivo

Page 79: CONTROL DE CALIDAD EN PRUEBAS CUALITATIVAS (Urianálisis …

Control de Calidad Externo Serología

Cuantitativo

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Control de Calidad Externo Serología

Cuantitativo

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GRACIAS!!!www.qsc.com.mx

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