PRCTICA 3

SEPARACIN DE ASPIRINA, ACETOFENITIDINA Y CAFENA POR CROMATOGRAFA DE CAPA FINA

Universidad de Granada

Facultad de Farmacia

Departamento de Qumica Fsica

Introduccin

A menudo, la aspirina, acetofenitidina y cafena se usan combinados en las preparaciones analgsicas y antipirticas.

La deteccin e identificacin en tales preparaciones puede hacerse por cromatografa de capa fina.

Material Recipiente para desarrollo. Portaobjetos. Gel de slice para cromatografa de capa fina. Disolvente eluyente: mezcla de metanol absoluto, cido

actico glacial, ter dietlico y benceno en la proporcin volumtrica 1:18:60:120.

Disoluciones de aspirina, acetofenitidina y cafena en cloroformo con concentraciones de 5-10 mg/ml.

Reactivo revelador: permanganato potsico 0,1N en cido sulfrico 0,05N.

Disolucin mezcla de composicin desconocida.

Recipientes para el desarrollo

Cubetas para cromatografa

Parte experimental

Preparacin de las placas

Limpiar dos portaobjetos (25x75 mm) con disolucin de mezcla crmica, o con disolucin jabonosa, enjuagar minuciosamente con agua destilada y secar

Preparar una pasta formada por 15 g de gel de slice G y 37 ml de agua, agitando bien con una varilla.

Coger por sus extremos dos portaobjetos, juntos por sus caras ms extensas, y sumergirlos en la pasta separndolos a continuacin. Debe quedar una capa fina y homognea sobre cada portaobjetos.

Dejar secar al aire

Una vez seco el gel al aire, colocar los portaobjetos en una estufa a 100C durante una hora

Indicador de temperatura

abrir la puerta

Colocar los portaobjetos sobre la bandeja

Preparacin Micropipeta

Abrir el gas para encender el mechero

Abrir la puerta

Girar las llaves de la derecha

cerrado abierto

Girar la llave a la derecha

cerradoabierto

Encender el mechero:

Girar el tornillo del mechero para dejar salir el gas

Acercar la llama al mechero

Calentar el capilar de vidrio y estirar

Aplicacin de la muestra

Aplicar en una de las placas la muestra de composicin desconocida y una sustancia pura,

y en la otra las dos disoluciones restantes de las sustancias puras,

Aplicar con una micropipeta una gotita de muestra a unos 12 mm del extremo de la placa, repitiendo pequeas aplicaciones de la disolucin en un punto y dejando que cada incremento se seque antes de la nueva aplicacin. La gota de muestra no debe tener ms de 3 mm de dimetro.

Desarrollo cromatogrfico

Se vierte el suficiente lquido eluyente en el recipiente de desarrollo cromatogrfico para que entre en contacto con el extremo inferior del portaobjetos, pero sin llegar a tocar las manchas de la muestra.

Tapar y dejar unos minutos para crear una atmsfera saturada de fase movil

Colocar los portaobjetos en la cubeta y tapar

Cuando el frente del disolvente haya avanzado unos 50 mm, se saca de la cubeta y se rasga cuidadosamente la superficie del portaobjetos para indicar la posicin del frente del disolvente. A continuacin se deja secar al aire durante unos minutos para evaporar el disolvente orgnico.

Frente de la fase movil

Lugar de colocacin de las muestras

Revelado del cromatograma

Para ello colocar el portaobjetos seco en un papel de filtro.

Pulverizar ese portaobjetos con la disolucin de permanganato potsico mediante el frasco pulverizador

Se calienta el portaobjetos en una estufa durante unos minutos.

Las muestras aparecen como manchas amarillo-verdosas en un fondo violeta.

La mancha de la cafena es muy dbil y algunas veces se distingue ms fcilmente observndola por la parte posterior, es decir, a travs del vidrio.

Clculos

Determinar el factor de retencin (Rf) para las tres sustancias.

Distancia de la sustancia al origenRf = --------------------------------------------------

Distancia del eluyente al origen

Dado que, en cromatografa de capa fina, los valores de Rf son reproducibles para unas condiciones experimentales fijas, se utilizan los valores de Rf para localizar la posicin de cada componente en la placa donde se ha separado la mezcla desconocida.

Clculos del factor de retencin ( Rf ) para cada una de las sustancias separadas

Frente del disolvente

Nueva posicin del compuesto

3.9 cm

5,0 cm

Lugar de aplicacin de la muestra

78,00,59,3 ==Rf