COLORACIÓN DE FLAGELOS

La Tinción de Leifson, es una tinción para lograr observar flagelos de bacterias. Es usada en laboratorios, pero no de rutina.

Los pasos que sigue son el de usar pararosanilina sirve como tinción principal, y ácido tánico es agregado a la solución como mordiente.1

Los componentes de la tinción son: Fucsina básica en Alcohol etilico al 95%, en 1.27%; ácido tánico en agua destilada, en 3%; Cloruro de sodio en agua destilada, 1.5%2

COLORACIÓN DECAPSULAS

Los métodos más usados para poner de manifiesto las cápsulas bacterianas son las coloraciones negativas o sus modificaciones. Un método de tinción de la cápsula es el que trata las bacterias con una solución caliente de cristal violeta seguido por un lavado con solución de sulfato de cobre, con el fin de remover el exceso de colorante, ya que el lavado con agua disolvería la cápsula. El sulfato de cobre también imparte color al fondo.

A la observación microscópica, la célula y el fondo aparecen teñidos en color azul oscuro y la cápsula de color azul pálido.

COLORACIÓN DE ESPORAS

Algunos géneros bacterianos, entre los que destacan Clostridium y Bacillus, producen en su interior formas de resistencia denominadas esporas, siendo estas estructuras bacterianas que

se producen cuando las condiciones ambientales son desfavorables (agotamiento de los nutrientes, temperaturas extremas, radiaciones, compuestos tóxicos, etc.) formándose una espora por cada forma vegetativa. Tales esporas son capaces de resistir situaciones muy desfavorables de ahí su denominación de resistencia. Las esporas se tiñen muy difícilmente requeriendo determinados colorantes muy concentrados. Al finalizar el proceso de esporogénesis, la célula vegetativa se lisa y libera la espora al exterior. Cuando el ambiente es favorable, la espora germina generando una nueva forma vegetativa. La capacidad de germinar perdura durante años. Algunas de las bacterias productoras de endosporas son patógenas para el hombre, por lo que su estudio y observación son de enorme interés.

En observaciones microscópicas de preparaciones de bacterias sin teñir, las esporas se observan como cuerpos refringentes intracelulares y si las células bacterianas están teñidas con los métodos habituales, se aprecian como zonas incoloras en su interior.

La tinción específica de esporas requiere dos colorantes:1.- Verde malaquita: capaz de teñir las esporas en caliente.2.- Safranina: colorante de contraste que tiñe las formas vegetativas.Las endosporas, tras la primera tinción, no perderán el colorante en el lavado con agua, y sí lo harán las formas vegetativas, que quedarán teñidas con el segundo

Habitualmente se utiliza el carbolfucsina o el verde de malaquita. Cuando teñimos la espora con verde de malaquita, utilizamos safranina como colorante de contraste; y cuando la espora se tiñe con carbolfucsina, la célula vegetativa se tiñe con azul de metileno.

Nos permiten observar su morfologia

Nos permiten visualizar otras caracteristicas de caracter estructural cmo son la presencia de

esporas, flagelos, cilios, capsulas, etc.

Coloraciones de gránulos metacromáticos

Los gránulos de volutina en el interior del citoplasma bacteriano, constituyen una fuente de adenosina trifosfato (ATP) y tienen la característica de ser gránulos metacromáticos, o sea, que aparecen teñidos de diferente color al resto de la célula. Se tiñen intensamente con los colorantes de anilina.