Clase Mollicutes: Mycoplasmas y

Ureaplasmas

Profa. Zoraida M. Nava Lotuffo.Cátedra de Microbiología e Inmunología.Departmento de Patología Veterinaria.

I. ANTECEDENTES I. ANTECEDENTES Primera especie micoplásmica- Primera especie micoplásmica-Pleuroneumonia contagiosa bovina (1898)-Nocard y Pleuroneumonia contagiosa bovina (1898)-Nocard y Roux. Microorganismos parecidos a la pleuroneumonía Roux. Microorganismos parecidos a la pleuroneumonía (PPLO). (PPLO).

II. DEFINICIÓNII. DEFINICIÓN Los mycoplasmas son las células Los mycoplasmas son las células bacterianas procariotas más pequeñas, pertenecientes bacterianas procariotas más pequeñas, pertenecientes a la clase Mollicutes, capaces de autoreplicarse. Del a la clase Mollicutes, capaces de autoreplicarse. Del género Mycoplasma existen 109 especies reconocidas y género Mycoplasma existen 109 especies reconocidas y del género Ureaplasma se han descrito solo 6.del género Ureaplasma se han descrito solo 6.

Mollicutes: Mollis: blando kutis: pielMollicutes: Mollis: blando kutis: piel

III. CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES, FISIOLÓGICAS Y III. CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES, FISIOLÓGICAS Y MORFOLÓGICASMORFOLÓGICAS

a. Carecen de pared celular, son pleomóficos y a. Carecen de pared celular, son pleomóficos y plásticos y miden 0,3 a plásticos y miden 0,3 a 0,8 0,8 m de diámetro. (Formas celulares cocoides, m de diámetro. (Formas celulares cocoides, espirales. espirales. filamentosas y anillos). filamentosas y anillos).

b. El tamaño del genoma del mycoplasma es de 5 a 10 b. El tamaño del genoma del mycoplasma es de 5 a 10 x 10x 1088 daltons daltons (bacterias= 2.5 x 10 (bacterias= 2.5 x 1099 d). Capacidad biosintética d). Capacidad biosintética reducida. Adición al reducida. Adición al medio de sustancias: vitaminas, aa, lípidos y medio de sustancias: vitaminas, aa, lípidos y precursores de ácidos precursores de ácidos nucleícos. nucleícos.

c. Están englobados por con membrana plasmática c. Están englobados por con membrana plasmática trilaminar con esteroles trilaminar con esteroles en su composición. (Fosfolípidos, glicolípidos, en su composición. (Fosfolípidos, glicolípidos, proteínas y glicoproteínas).proteínas y glicoproteínas).

d. Ineficacia de los B-lactámicos.d. Ineficacia de los B-lactámicos.

e. Carecen de las enzimas para la síntesis de purinas y e. Carecen de las enzimas para la síntesis de purinas y pirimidinas.pirimidinas.

f. Los mycoplasmas se clasifican como gramnegativos f. Los mycoplasmas se clasifican como gramnegativos pero se tiñen mal con esta tinción y la tinción de Giemsa. pero se tiñen mal con esta tinción y la tinción de Giemsa. La tinción de Dienes es muy útil para visualizar las La tinción de Dienes es muy útil para visualizar las colonias (Azul de metileno y azur II).colonias (Azul de metileno y azur II).

g. Son inmóviles excepto Mycoplasma pneumoniae con g. Son inmóviles excepto Mycoplasma pneumoniae con movilidad por deslizamiento sobre superficies cubiertas movilidad por deslizamiento sobre superficies cubiertas por líquido.por líquido.

Fuente: Vadillo et al. 2001. Fuente: Vadillo et al. 2001.

IV. CARACTERÍSTICAS IV. CARACTERÍSTICAS CULTURALESCULTURALES

La mayoría son anaerobios facultativos La mayoría son anaerobios facultativos

(Mycoplasma pneumoniae es aerobio estricto). Aunque crecen mejor en (Mycoplasma pneumoniae es aerobio estricto). Aunque crecen mejor en medios aerobios.medios aerobios.

Crecen en medios artificiales sin células pero los requerimientos son Crecen en medios artificiales sin células pero los requerimientos son exigentesexigentes

1. Esteroles (colesterol) y factores de crecimiento aportados 1. Esteroles (colesterol) y factores de crecimiento aportados por el suero y el extracto de levadura, respectivamente. Se incuban por el suero y el extracto de levadura, respectivamente. Se incuban aeróbicamente a 37°C y algunos pueden necesitar C0aeróbicamente a 37°C y algunos pueden necesitar C022..

2. Son incubados de 2 a 10 días hasta que las colonias son 2. Son incubados de 2 a 10 días hasta que las colonias son aparentes al microscopio estereoscopico. En medios líquidos se aparentes al microscopio estereoscopico. En medios líquidos se observa la morfología usando contraste de fases o campo oscuro.observa la morfología usando contraste de fases o campo oscuro.

3. Las colonias son planas, traslúcidas, crecen dentro del 3. Las colonias son planas, traslúcidas, crecen dentro del medio y presentan el aspecto de un huevo frito (porción central de la medio y presentan el aspecto de un huevo frito (porción central de la colonia embebida en el agar y la periferia sobre la superficie del agar.colonia embebida en el agar y la periferia sobre la superficie del agar.

4. Estudio de colonias por Dienes . Las colonias se tiñen 4. Estudio de colonias por Dienes . Las colonias se tiñen de azul oscuro central y azul claro en la periferia. Los de azul oscuro central y azul claro en la periferia. Los organismos no viables no se tiñen o color rosado o violeta.organismos no viables no se tiñen o color rosado o violeta.

5. Por lo general los medios están compuestos por infusión 5. Por lo general los medios están compuestos por infusión de carne, peptona, NaCl. suero de caballo y 10% de extracto de carne, peptona, NaCl. suero de caballo y 10% de extracto de levadura (Ej: Caldo o agar PPLO). Se le adicionan de levadura (Ej: Caldo o agar PPLO). Se le adicionan inhibidores bacterianos para gram +: penicilina y para inhibidores bacterianos para gram +: penicilina y para Gram -: acetato de talio. Deben tener un pH que oscile Gram -: acetato de talio. Deben tener un pH que oscile entre 6.8 y 7.8 el cual varía con la especie.entre 6.8 y 7.8 el cual varía con la especie.

6. Los mycoplasmas T o Ureaplasmas presentan colonias 6. Los mycoplasmas T o Ureaplasmas presentan colonias más pequeñas: Tiny.más pequeñas: Tiny.

V. CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICASV. CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS

a. Los mycoplasmas son oxidasa y catalasa negativos.a. Los mycoplasmas son oxidasa y catalasa negativos. b. Presentan metabolismo respiratorio o fermentativo y la mayoría b. Presentan metabolismo respiratorio o fermentativo y la mayoría de las especies utiliza arginina o glucosa como fuente principal de de las especies utiliza arginina o glucosa como fuente principal de energía, pero rara vez ambas.energía, pero rara vez ambas. c. Los ureaplasmas secretan ureasa y por ende degradan la urea que c. Los ureaplasmas secretan ureasa y por ende degradan la urea que pueda estar en el medio.pueda estar en el medio.

VI.VI. HABITATHABITAT

a. Son parásitos de las membranas mucosas del TGI, TGU y TRS.a. Son parásitos de las membranas mucosas del TGI, TGU y TRS. b, Pueden localizarse en las articulaciones.b, Pueden localizarse en las articulaciones.

VII. RESISTENCIAVII. RESISTENCIA

Son susceptibles a la acción de los detergentes y Son susceptibles a la acción de los detergentes y desinfectantes comúnes y frente al calor.desinfectantes comúnes y frente al calor.

Son sensibles a los antibióticos, excepto los que Son sensibles a los antibióticos, excepto los que actúan sobre la PC.actúan sobre la PC.

Sobrevida fuera del huésped es limitada.Sobrevida fuera del huésped es limitada.

IX. FACTORES DE VIRULENCIAIX. FACTORES DE VIRULENCIA

1. 1. Adhesinas y sustancias relacionadasAdhesinas y sustancias relacionadas

a. a. Adhesión a epitelio mediada por proteínas o Adhesión a epitelio mediada por proteínas o conjugados proteicos.conjugados proteicos. b. b. Algunas especies no las requieren para unirse.Algunas especies no las requieren para unirse.

Ej: a. M. dispar y M. hyopneumoniae requieren superficies aniónicas. b. M gallisepticum y M. pneumoniae: proteína en forma de punta que les permite adherirse (170 y 155 kda, respectivamente).

2. Se han estudiado los receptores de la célula 2. Se han estudiado los receptores de la célula huésped, conformados por glicoconjugados.huésped, conformados por glicoconjugados.

3. Toxicidad3. Toxicidad a. Mecanismos para causar enfermedad: todavía sin clarificar. a. Mecanismos para causar enfermedad: todavía sin clarificar.

Producen cierto número de productos extracelulares que inducen Producen cierto número de productos extracelulares que inducen enfermedadenfermedad

a. M. neurolyticum: neurotoxina proteica de 200 kDa neuropatía y muerte.

b. M. gallysepticun: efectos neurotóxicos asociados con células viables.

c. Mycoplasma mycoides: galactano con función endotóxica como en Gram -,

producen fiebre, cuagulopatía y trombosis (CID). d. Acumulación local de metabolitos, como enzimas, peroxido de

hidrógeno, radicales superóxido y amoniaco. e. M. hypneumoniae es citotóxico para fibroblastos pulmonares. f. Lipoglicanos (de Mycoplasmas y Acholeplasma) disminuyen la

resistencia pulmonar, producen edema y trombosis pulmonar. g. Ureaplasmas no dañan al colonizar pero producen filtración de

calmodulina de la célula. Se desconoce el papel de la ureasa. h. M. hyopneumoniae y pneumoniae producen ciliostasis y cambios

citopáticos. i. Las superficies colonizadas producen enzimas que garantizan

supervivencia.

… continua factores de virulencia

X. MECANISMOS DE TRANSMISIÓNX. MECANISMOS DE TRANSMISIÓN

a. La inhalación es la mas común. Puede ser a. La inhalación es la mas común. Puede ser exógena o endógena. exógena o endógena. b. Contacto directo.b. Contacto directo.

XI. DIAGNÓSTICO:XI. DIAGNÓSTICO:

Sospecha clínica.Sospecha clínica. Recolección de la muestraRecolección de la muestra Considerar: 1. Momento de máxima producción.Considerar: 1. Momento de máxima producción. 2. Material fresco.2. Material fresco. 3. Mínima contaminación.3. Mínima contaminación.

Muestras: Tejidos, leche, exudados.Muestras: Tejidos, leche, exudados. Previo a: Aplicación de antibióticos y a la acción de Previo a: Aplicación de antibióticos y a la acción de

Ac’s.Ac’s.

Transporte de la muestra:Transporte de la muestra: Tiempo mínimo.Tiempo mínimo. Utilizar frío.Utilizar frío. No usar medios de transporte comunes.No usar medios de transporte comunes. Se puede sembrar directamente. Se puede sembrar directamente.

Serodiagnóstico y detección de Ag:Serodiagnóstico y detección de Ag: 1. RIA, ELISA, IFA, Aglutinación, FC. 1. RIA, ELISA, IFA, Aglutinación, FC. 2. Inhibición de crecimiento con sueros homólogos e 2. Inhibición de crecimiento con sueros homólogos e Inhibición metabólica.Inhibición metabólica. 3. PCR. 3. PCR. 4. Sondas de DNA. 4. Sondas de DNA.

XII. TRATAMIENTOXII. TRATAMIENTO

1. Utilización de tilosina, tetraciclina, eritromicina, 1. Utilización de tilosina, tetraciclina, eritromicina, gentamicina o kanamicina, como antibióticos específicos.gentamicina o kanamicina, como antibióticos específicos.

2. No existe metodología para pruebas de 2. No existe metodología para pruebas de susceptibilidad antibacteriana.susceptibilidad antibacteriana.

XIII. CONTROL XIII. CONTROL

Prevención con vacunas (investigarlo).Prevención con vacunas (investigarlo).