Cientifica Vol. 8 N° 2

UNIVERSIDAD CIENTÍFICA DEL SUR

DIRECTORIOIng. José Carlos Dextre Chacón

Presidente del Directorio

RECTORDr. Agustín Iza Stoll

AUTORIDADES

Dr. José Amiel PérezVicerrector de Investigación

MBA. Jaime Tamashiro TamashiroGerente General (e) Director Central de Administración y Finanzas

MA. Tulio Pita ChávarriGerente Postgrado

Dr. Agustín Iza StollDecano de la Facultad de Medicina Humana

Ing. Jorge Ponce UrquizaDecano de la Facultad de Ingeniería Económica y de Negocios

Dr. Rodolfo Valdivia MaibachDecano de la Facultad de Estomatología

Dra. Luzmila Troncoso CorsoDecana de la Facultad de Nutrición y Dietética

Dr. Manuel Rosemberg BarrónDecano de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia

Ing. José Carlos Dextre ChacónDecano de la Facultad de Ingeniería de Sistemas Empresariales

Dra. Sonia Valle RubioDecana de la Facultad de Biología Marina y Econegocios

Mg. Jazmín Dávila Lizárraga Decana de la Facultad de Administración de Turismo Sostenible y Hotelería

Ing. Juan Guerrero BarrantesDecano de la Facultad de Ingeniería y Gestión Ambiental

Dra. Josefina Takahashi SatoDecana de la Facultad de Negocios Agro-Forestales

Dra. Laurietz Seda RamírezDecana de la Facultad de Artes Escénicas y Literatura

Ing. Zandra Rivera ChávezDirectora de la Facultad de Ingeniería de Sistemas Empresariales

Mg. Larissa Bálsamo FasceDirectora de la Carrera de Psicología

MBA. Óscar Muro Doig Director de la Carrera de Administración de Negocios Internacionales

Mg. Jenny Canales PeñaDirectora de la Carrera de Comunicación y Publicidad

Abg. Mariano Castro Sánchez-MorenoDirector de la Carrera de Derecho

Dr. Arq. Ignacio Pacheco DíazDirector de la Carrera de Arquitectura y Urbanismo Ambiental

MBA. Óscar Muro Doig Director de la Carrera de Marketing y Administración

Lic. Érika ÁlvarezSecretaria General

Lic. Gustavo Luján Zumaeta Director de Propuesta Educativa

Dr. Emilio Guija PomaDirector del Instituto de Investigación

Sr. Percy Encinas CarranzaDirector del Centro Cultural y del Fondo Editorial

Ing. Ricardo de la Piedra AlegríaDirector Comercial de Post Grado y Extensión

MBA. Duilio Zolfi FedericiDirector Comercial de Pre Grado

CIENTÍFICACIENTÍFICA Vol 8 N° 2, mayo-agosto 2011

Asesora de diseño: Erika KohatsuAsistente de prensa: Rodrigo SalazarDiseño y diagramación: Carlos Amiel

Revista arbitrada

CIENTIFÍCA, revista de ciencias de la Universidad Científica del Sur, publica tres números al año. La revista está dirigida a investigadores, científicos, docentes y estudiantes universitarios.

La Universidad Científica del Sur no se solidariza necesariamente con las opiniones expresadas en los artículos publicados en esta edición de CIENTÍFICA. Se autoriza la reproducción de los textos siempre que se cite la fuente.

[email protected] Fondo Editorial. Universidad Científica del SurCarretera Antigua Panamericana Sur km 19 - Villa El Salvador Tel. 610 6400 anexo 528Tiraje: 600 ejemplares

Hecho el depósito legal en la Biblioteca Nacional del PerúN° 2008-15522 / ISSN: 1997-100X

DirectorDr. José Amiel PérezUniversidad Científica del SurVicerrector de Investigació[email protected]

Comité EditorialDr. Pedro Mendoza AranaUniversidad Nacional Mayor de San MarcosFacultad de Medicina [email protected]

MSc. Javier Enciso GutíerrezUniversidad Científica del SurVicerrectorado de Investigació[email protected]

Dr. Felipe Antonio San Martín HowardUniversidad Nacional Mayor de San MarcosPresidente del Consejo deGestión de la Investigació[email protected]

Dra. Josefina Takahashi Universidad Científica del Sur Facultad de Negocios [email protected]

Dr. Óscar Valiente CastilloUniversidad San Antonio Abad del CuzcoDecano de la facultad de [email protected]

104Verónica Orozco Chávez, Manuel Rosemberg Barrón, Alexei Santiani Acosta, Humberto Rodríguez Landeo

98

CIENTÍFICA

CONTENIDORevista Científica Vol 8 N°2 mayo - agosto 2011

COMITÉ CIENTÍFICO

EdITOrIal

arTÍCUlOS OrIGINalES• Obtención de extractOs de plantas que estimulan la prOliferación de una línea

humana de células madre mesenquimales

• efectO del aloe vera en la cicatrización de lesiOnes gingivales

• evaluación de tres dilutOres para la refrigeración de semen de caballO peruanO de pasO y sus efectOs sObre la mOtilidad espermática e integridad funciOnal de la membrana

arTÍCUlOS dE rEvISIóN

• evaluación de la capacidad antimicrObiana del clOrurO de cetilpiridiniO (ccp) sObre la micrOflOra existente en lOs cepillOs dentales en usO en preescOlares cOn dentición decidua cOmpleta

Nathaly Enciso Benavides, José Amiel Pérez, Emilio Guija Poma, Alejandro Fukusaki Yoshizawa, Óscar Reátegui Arévalo, Javier Enciso Gutiérrez

David Prosopio, Jorge Torres, Erick Valdivia, Elmer Salinas P., Margot de los Ríos

• virus hanta. un antiguO virus emergente

Patricio Berríos Etchegaray, Javier Enciso Gutiérrez

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8

Obtaining Of plant extracts that stimulates the prOliferatiOn a human line Of mesenchymal stem cells

effect Of aloe-vera in healing gingival lesiOns

evaluatiOn Of antimicrObial activity Of cetylpyridinium chlOride (cpc) On the existing micrOflOra tOOthbrushes in use in preschOOl children with cOmplete primary dentitiOn

Simabukuro VF, Albites AU, Carmen Villarroel, Xavier Contreras, Ramírez YW, Tang SP, Aguilar GD, Álvarez-Vidigal E

hantavirus. a fOrmer emerging virus

evaluatiOn Of thre extenders fOr the semem refrigeratiOn prOcess Of peruvian pasO hOrses, and his effects On the mOtility sperm and functiOnal membrane integrity

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122

89

151Dr. Fernando Cabieses

Luis Wong Espejo

José Eduardo Rosales Trabuco 127

ISSN 1997-700X

CarTaS al EdITOr• cOnsistencia interna del inventariO de resOlución de prOblemas sOciales

internal cOnsistency Of the sOcial prOblem sOlving inventOry-revised

Alexandra Delboy Zenteno, Carolina Black Tam, César Merino Soto

TESIS• factOres asOciadOs a las cOmplicaciOnes pOsOperatOrias en el serviciO de

cirugía OncOlógica

Sala CaBIESES• “trepanaciOnes”, extractO de la Obra la salud y los dioses del

dr. fernandO cabieses (añO 2007)

NOTaS

INSTrUCCIONES para lOS aUTOrES

• reflexiOnes en tOrnO a la ciencia

156

152

reflectiOns abOut the science

FE dE ErraTaS 150

134

• fragilidad física, deteriOrO cOgnitivO y factOres asOciadOs en adultOs mayOres del centrO geriátricO naval del callaO, perú

144

Dr. Emilio Guija PomaUniversidad Científica del SurDirector del Instituto de Investigación

Dr. Ricardo Caballero Merino Hospiten Rambla - España Jefe de Servicios de Obstetricia y Ginecología

Dr. James Graham Universidad de Illinois en Chicago – EE.UU. Departamento de Farmacognosis. Facultad de Farmacia

Ph.D. Carlos Moslares GarcíaUniversidad Ramón Llull - Barcelona, EspañaVice Decano Facultad de Economía IQS

Dra. Amparo ZavaletaUniversidad Nacional Mayor de San MarcosFacultad de Farmacia y Bioquímica

Dr. Manuel León Nuñez VergaraUniversidad Científica del SurFacultad de Medicina Humana

Dr. Ricardo Caballero MerinoHospiten Rambla - EspañaJefe de Servicios de Obstetricia y Ginecología

Psic. César Merino Soto Universidad Científica del Sur Facultad de Psicología

Dr. Pedro San Martín Howard Hospital Nacional Dos de Mayo Jefe del Departamento de Pediatría

Ing. Óscar Paiba Universidad Científica del Sur Facultad de Ingeniería de Sistemas Empresariales

Dra. Nancy Lozano Universidad Nacional Mayor de San Marcos Facultad de Farmacia y Bioquímica

Ing. Juan Guerrero Barrantes Universidad Científica del Sur Facultad de Ingeniería y Gestión Ambiental

Ing. Doménico Guida Universidad de Salerno - Italia Departamento de Ingeniería Mecánica

Ing. José Dávila Universidad Científica del Sur Facultad de Ingeniería de Sistemas Empresariales

Mg. Jenny Canales PeñaUniversidad Científica del SurDirectora de la Carrera de Comunicación y Publicidad

COMITÉ CIENTÍFICO

CIENTÍFICA SE ENCUENTRA EN ELSISTEMA REGIONAL DE INFORMACIÓN

EDITORIALAPORTES AL CONOCIMIENTO Y APLICACIÓN DE LAS CÉLULAS

MADRE PLURIPOTENTESNormalmente, las primeras células nacidas de la fertilización del óvulo por el espermatozoide, células de embrión temprano, son capaces de convertirse en cualquier tipo de célula adulta, célula diferenciada que ha adquirido un determinado linaje y forma un tejido específico. Por esta capacidad se las denomina células pluripotentes, pueden adoptar las características de cualquier tipo de células del cuerpo humano, siguiendo un programa genético preestablecido y perfectamente definido en un proceso que comienza en la fertilización y, a través de distintos pasos, termina en una célula adulta, diferenciada y especifíca.Yamanaka y colaboradores, el año 2006, publicaron en Cell un procedimiento para obtener células madre pluripotentes inducidas (iPSCs) a partir de células adultas, utilizando cuatro genes: Oct4, Sox2, Kef4 y C-Myc. Observaron que un porcentaje importante de ratones inyectados con iPSCs había desarrollado cáncer, como consecuencia de la actividad residual no silenciada de los retrovirus vectores ‒verdaderas “naves transportadoras” de genes‒ utilizados para introducirlos en la molécula de ADN. Para superar este inconveniente se desarrollaron técnicas que utilizan adenovirus en vez de retrovirus, con lo que se prescinde de genes que tienden a estimular el desarrollo de cáncer. También disminuyeron el número de genes inicialmente empleados con este fin. El mismo Yamanaka, en el 2008, publicó en Science una técnica que permite obtener iPSCs sin vectores virales.Quedaron siempre dudas respecto de la identidad de las células pluripotentes inducidas, de su calidad y su capacidad para producir todo tipo de células del organismo, tal como lo exige la definición del término.En ocasiones, algunos genes del ADN de las células originales pueden no haber sido activados y transferir solo parcialmente sus diversas características; en consecuencia, estas no califican para adjudicárseles su identidad primigenia de células madre, y puede incluso alterarse su correcta derivación en células diferenciadas.Se investiga para establecer de manera inequívoca pruebas de su pluripotencia empleando marcadores, técnicas in vitro para obtener gran variedad de células de diferentes Iinajes, producir teratomas o los tres tipos de células fundamentales (ectodermo, mesodermo y endodermo), y comprobar su capacidad de incorporación al crecimiento embrionario en animales de experimentación. Todas son pruebas que cumplen

88 Científica 8 (2), 2011

las células embrionarias y deben hacerlo también las células madre pluripotentes.En el Perú se vienen realizando ensayos clínicos con células madre autólogas, para evitar el rechazo, las cuales, felizmente y por las técnicas breves utilizadas, no ofrecen la posibidad de modificación genética como podría ocurrir con las células pluripotentes inducidas; pero probablemente tampoco se las identifica como células madre y, por tanto, no pueden cuantificarse. Es imprescindible realizar esta tarea determinando la dosis terapéutica. De no hacerlo, estaríamos obviando la etapa experimental que es la que confiere a esta nueva tecnología ‒que con justa razón se ha denominado “la promesa terapéutica”‒ un mayor valor científico, más seguridad y precisión.En la Universidad Científica del Sur estamos desarrollando trabajos experimentales para contribuir a la aplicación correcta de estos métodos y, precisamente, en el artículo “Extractos de plantas que estimulan la proliferación de una línea humana de células madre mesenquimales”, Nathaly Enciso y colaboradores, continuando con publicaciones anteriores, tratan el tema de la identificación de células madre con miras a una cuantificación que permita administrar la cantidad apropiada de estas células en cada intervención médica. Para ello es necesario innovar técnicas actuales y proveer de otras, rigurosas y de aplicación práctica, simples y rápidas. También en este trabajo se busca delinear procedimientos de incremento celular para aquellos casos en los que se encuentre un número muy reducido de células madre pluripotentes, ya que estas podrían multiplicarse convenientemente en cantidad, tiempo y calidad, sin modificación de su genoma, y así garantizar el resultado favorable esperado.

Dr. José Amiel Pérez Director

88 Científica 8 (2), 2011 89Científica 8 (2), 2011

Obtención de extractos de plantas que estimulan la proliferación de una línea humana de células madre mesenquimales

arTÍCUlOS OrIGINalES

OBTENCIÓN DE EXTRACTOS DE PLANTAS QUE ESTIMULAN LA PROLIFERACIÓN DE UNA LÍNEA HUMANA DE CÉLULAS MADRE

MESENQUIMALES OBTAINING OF PLANT EXTRACTS THAT STIMULATES THE PROLIFERATION A HUMAN LINE OF

MESENCHYMAL STEM CELLS

Nathaly Enciso Benavides1, José Amiel Pérez1, Emilio Guija Poma1, Alejandro Fukusaki Yoshizawa2, Óscar Reátegui Arévalo2, Javier Enciso Gutiérrez1

1 universidad científica del sur. labOratOriO de cultivO celular. 2 universidad científica del sur. labOratOriO de biOquímica y química de prOductOs naturales.

rESUMEN

El tejido adiposo es la fuente más rica y accesible de células madre mesenquimales con alta capacidad para regenerar diversos tejidos lesionados y tratar enfermedades inmunitarias, previa expansión de poblaciones celulares. Esta expansión de células madre in vitro es influenciada por diferentes factores, que intervienen sobre la formación de la colonia, como las citoquinas, factores de crecimiento, aminoácidos y otras moléculas esenciales para la vida de las células madre. El suero fetal bovino (SFB) es muy usado para estimular el crecimiento celular; sin embargo, por su origen animal, no puede ser usado con este propósito en células madre de origen animal y humano. Sería de mucha utilidad para este fin, obtener moléculas o sustancias inocuas que cumplan el mismo estímulo que el SFB, pero que no sean de origen animal. En este trabajo de investigación se planteó como objetivo determinar, mediante bioensayos, si los extractos metanólicos de Equisetum arvense, Bixa orellana y Buddleja incana tienen efecto estimulador en la proliferación in vitro de células madre humanas STEMPRO® Human Adipose-Derived Stem Cell (ADSC), adquirido de INVITROGEN Inc. EE.UU. y comparar ese efecto con la mezcla de SFB + extracto metanólico de las plantas estudiadas. Se obtuvieron extractos

de E. arvense (5,61%), B. orellana (13,5%) y B. incana (7,5%), que en pruebas bioquímicas evidenciaron una capacidad antioxidante de 5,6 (E. arvense), 28,11 (B. orellana) y 16,25 mmoles/100 g/m.s. (B. incana); el contenido de flavonoides fue de 3 200 (E. arvense), 1 616 (B. orellana) y 773 mg (B. incana) de catequina/100 g de m.s.; mientras que el contenido de polifenoles fue de 407 (E. arvense), 2 241 (B. orellana) y 1 595 mg (B.incana) de ácido gálico/100 g de m.s. En los ensayos las células recibieron solamente medio de cultivo DMEM-High Glucosa con glutamina. Las dosis de los extractos fueron 40, 80, 160, 320, 640 y 1 280 µg/ml; como control se usó el solvente metanol y el SFB. Las células se sembraron por triplicado, para cada dosis. El efecto sobre la proliferación celular se evaluó a las 24, 48 y 72 horas, mediante la técnica XTT, y se midió la densidad óptica en un lector de ELISA a 560 nm, expresándose los resultados en porcentaje como Tasa de Estimulación Celular (TEC). Estos resultados evidenciaron que el extracto de E. arvense, a las 48 horas y a dosis de 1280 µg/ml, tiene el mayor valor TEC sin SFB (173%) y con SFB (366%), seguido por B. orellana sin SFB (106%) y con SFB (329%), finalmente por B. incana sin SFB (80%) y con SFB (170%). El valor máximo TEC utilizando solo SFB fue del 83% a



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las 72 horas. Se concluye que los extractos metanólicos de E. arvense y B. orellana producen una TEC mayor que la de B. incana con o sin el SFB, por lo que pueden ser buenos candidatos para ser usados como estimuladores de la expansión poblacional de células madre humanas.

Palabras clave: células madre humanas, proliferación celular, extractos metanólicos de plantas.

aBSTraCT

Adipose tissue is the available and richest source of mesenchymal stem cells, with high capacity to regenerate various injured tissues and treatment of immune diseases previous expansion of cell populations. This expansion of stem cells in vitro is influenced by different factors affecting the formation of the colony, such as, cytokines, growth factors, amino acids and other molecules essential for stem cells proliferation and differentiation. Fetal bovine serum (FBS) is used to stimulate cell growth, but being from animals, cannot be used for animal and human stem cells proliferation. Molecules or harmless substances of non animal origin, with similar stimulatory effect that FBS can be very useful for this purpose. The aim of this research work was to determine, through bioassays, if the methanolic extract of Equisetum arvense, Buddleja incana and Bixa orellana have stimulatory effect on in vitro human stem cells proliferation and compare this effect with the combination of FBS + methanolic extract. For this purpose, a human stem cell line originating from adipose tissue (Stemprocell®, Invitrogen, USA) was purchased and, cultured in vitro using culture medium DMEM supplied by the same laboratory until the start of the trials. After the extraction process the extracts of E. arvense (5.61%) of B. orellana (13.5%) and B. incana (7.5%), biochemical tests showed that antioxidant capacity expressed in mmoles/100 g of ms were of 5.6 (E. arvense) and 11.28 (B. orellana) and 16.25 (B. incana), the flavonoid content expressed as catequina/100 g

m.s. was 3200 (E. arvense), 1616 (B. orellana) and 773 (B. incana), while the polyphenol content expressed as acid galic/100 g de m.s was 407 (E. arvense), 2241 (B. orellana) and 1595 (B.incana). For trials stem cells received culture medium DMEM-High Glucose with glutamine. Stem cell were seeded in triplicate at following extract doses 40, 80, 160, 320, 640 and 1280 mg / ml, same as the solvent control and FBS. The effect on cell proliferation was assessed at 24, 48 and 72 hours by XTT technique, measuring the optical density in an ELISA reader at 560 nm, expressed in percentage and rate of cellular stimulation (TEC). The results showed that E. arvense methanolic extract has the highest TEC, either without FBS (173%) and with FBS (366%) at 48 hours, with a dose of 1 280 mg / ml, followed by B. orellana without FBS (106%) and with FBS (329%) and finally B. incana without FBS (80%) and with FBS (170%). We conclude that methanolic extracts of E. arvense and B. orellana TEC have more proliferation effect on stem cells than the FBS alone. Therefore, could be good candidates for their use as stimulants of the population expansion of human stem cells.

Keywords: human stem cells, cell proliferation, plant extracts.

INTrOdUCCIóN

Las células madre mesenquimales (MSCs) descubiertas por Friedenstein y colaboradores (1) son una población de células madre/progenitoras con capacidad pluripotente para diferenciarse en linajes mesodérmicos y no mesodérmicos que incluyen osteocitos, adipocitos, condrocitos, miocitos, cardiomiocitos, fibroblastos, miofibroblastos, células epiteliales y neuronas. Residen primariamente en la médula ósea, pero también existen en tejido adiposo, sangre periférica, sangre de cordón umbilical, placenta, útero, hígado y tejidos fetales (2). El tejido adiposo es la fuente más rica y accesible de células madre mesenquimales con alta capacidad para regenerar piel lesionada (3), tendón (4), cartílago,



hueso, con efectos inmunomoduladores en enfermedades inmunitarias (5) y potencial de diferenciación miogénica (6).

Una vez obtenidas las células madre de tejidos adultos (mesenquimales), deben cultivarse en medios especiales, ser expandidas para luego someterse a inducción de diferenciación en células de diferentes tejidos o para realizar trasplantes celulares. Esta expansión de poblaciones de células madre in vitro, es influenciada por diferentes factores que intervienen sobre la formación de la colonia, como son: tiempo de duplicación de la población, ciclo celular, expresión de marcadores (7) y estabilidad genómica (8) y por moléculas como citoquinas, factores de crecimiento, aminoácidos y otras, esenciales para la vida de las células madre (9,10,11,12).

Por otro lado, la expansión de poblaciones de células madre mesenquimales in vitro no debe modificar la expresión de factores de transcripción involucrados en la autorenovación y multipotencia (13,14), por lo que se buscan factores estimulantes de la proliferación celular in vitro sin potenciales efectos mutagénicos ni inductores de diferenciación en las células madre. El objetivo de este trabajo es preparar extractos metanólicos de las plantas Equisetum arvense, Bixa orellana y Buddleja incana que estimulen la proliferación de una línea de células madre humanas obtenida de tejido adiposo.

MaTErIal Y MÉTOdOS

prEparaCIóN dEl ExTraCTO METaNólICO

Se trabajó con hojas de Equisetum arvense y Bixa orellana compradas en un mercado de Lima y de Buddleja incana colectada en el poblado de San Luis de Llincag, Huánuco, ubicado a 3,600 m.s.n.m. Las hojas de las plantas previamente se lavaron con agua destilada y colocaron en una estufa con corriente de aire a 40 ºC hasta obtener peso constante, luego se

pulverizaron utilizando una licuadora y se separaron en porciones de 100 g del polvo seco de Equisetum arvense y Bixa orellana y 20 g de B. incana, que fueron tratadas con 350 ml y 200 ml de alcohol metílico respectivamente, dejándolas en reposo durante 24 horas. Transcurrido este tiempo se procedió a filtrar utilizando papel filtro Whatman Nº 2. Al producto residual se le adicionó 250 ml de alcohol metílico y se repitió el proceso de la misma manera que en la etapa anterior por 3 veces para E. arvense y B. orellana y 4 veces para B. incana.

Para realizar las determinaciones analíticas bioquímicas se pesó 50,0 mg del extracto metanólico de E. arvense, 50,6 mg de B. orellana y 26 mg de B. incana que se disolvieron en 10 ml de alcohol metílico.

dETErMINaCIONES BIOqUÍMICaS

Capacidad antioxidante

La capacidad antioxidante de los extractos metanólicos de las plantas motivo del presente estudio se determinó utilizando la técnica propuesta por Benzie y Strain (15). En forma breve, esta se realizó midiendo 1,0 ml del reactivo 2,4,6-tri-piridil-triazina, 0,020 ml del extracto metanólico de la planta y 0,9 ml de agua destilada. Paralelamente se preparó el blanco respectivo, solvente sin muestra, y todos los tubos se colocaron en baño maría a 37 ºC durante 15 minutos a cuyo término se determinó la densidad óptica a 593 nm en un espectrofotómetro Spectronic modelo Genesys 6. Todas las determinaciones se realizaron por triplicado. Se elaboró una curva patrón, utilizando diversas concentraciones de sulfato ferroso para realizar los cálculos.

Polifenoles totales

El contenido de polifenoles en los extractos metanólicos de las plantas medicinales se determinó utilizando el método de Singleton (16), para cuyo propósito a 0,020 ml de las muestras, se adicionó 1,0 ml del reactivo de Folin



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Ciocalteu 1:1 con agua destilada y, finalmente, 1,5 ml de una solución de carbonato de sodio al 7,5%. Los tubos se colocaron en baño maría a 45 ºC durante 15 minutos, a cuyo término se leyeron en el espectrofotómetro a 765 nm. Paralelamente, se preparó el blanco respectivo sin muestra. Para realizar los cálculos se preparó una curva patrón utilizando diferentes concentraciones de ácido gálico.

Flavonoides

La determinación de flavonoides se realizó utilizando la técnica propuesta por Jia (17), para lo cual se midieron 0,200 ml del extracto metanólico, se adicionó 1,30 ml de agua destilada y añadió 0,075 ml de una solución de nitrito de sodio al 5%, se dejó en reposo durante 5 minutos, a cuyo término se añadió 0,15 ml de una solución de cloruro de aluminio al 10%. Después de 6 minutos en reposo se adicionaron 0,5 ml de NaOH 1 N y 0,275 ml de agua destilada. La densidad óptica de la muestra y el blanco respectivo se midió a 510 nm. Para realizar los cálculos se utilizó una curva patrón preparada con concentraciones variables de catequina.

EvalUaCIóN dE la prOlIFEraCIóN CElUlar

Cultivo de células madre humanas

Se compró una línea de células madre humanas originaria de tejido adiposo STEMPRO® Human Adipose-Derived Stem Cell (ADSC), adquirido de INVITROGEN, Inc. EE.UU. con la que se realizaron todos los ensayos. En el laboratorio se dividieron en 10 alícuotas de 100 µL, conteniendo 100 000 células por alícuota, y se mantuvieron en congelación a -80 °C hasta el día del ensayo. Los ensayos in vitro se realizaron en condiciones de asepsia en microplacas de cultivo de 96 pocitos con un volumen final de 0,2 ml. El efecto sobre la proliferación celular del extracto a ensayar se evaluó a diferentes tiempos de cultivo (24, 48 y 72 horas), diferentes dosis y en ausencia (control) de los extractos

a fin de determinar la cinética de acción del producto. La metodología seguirá los protocolos descritos previamente (18,19).

Tasa de estimulación celular (TEC)

Se realizó mediante la técnica XTT (20) que se basa en la capacidad de las células metabólicamente activas para reducir las sales de tetrazolium a compuestos de formazán. La lectura se realizó en un lector de ELISA a 560 nm. El modelo biológico en el cual se realizó el experimento fueron cultivos de líneas de células madre mesenquimales originarias de médula ósea humana. Se cultivaron 5 x 103 células en dos microplacas de 96 pocitos, en medio de cultivo celular Dulbecco High Glucosa (DMEM-HG), una placa sin y otra placa con SFB al 10%, mantenidos en incubador a 37 ºC, con 5% de CO2 y 95% de humedad que fueron tratadas con diferentes dosis de los extractos, para conocer el efecto de los extractos metanólicos sobre la proliferación de estas células. Como controles se tuvo: células cultivadas (C.C) en medio DMEM con SFB al 10% (Control positivo), y células en DMEM con solvente METANOL (Prueba en blanco).

rESUlTadOS Y dISCUSIóN

Los extractos filtrados se juntaron y evaporaron utilizando un rotavapor a 40 ºC, con lo que se obtuvieron 5,61 g de extracto metanólico seco (5,61%) de E. arvense, 13,5 g de B. orellana (13,5%) y 1,5 g de B. incana (7,5%).

Las pruebas bioquímicas de los extractos estudiados utilizando como solvente el metanol, permitieron determinar que E. arvense tenía la más alta cantidad de flavonoides y la menor cantidad de polifenoles y, a la vez, una menor capacidad antioxidante; mientras que Bixa orellana tenía la mayor cantidad de polifenoles y mayor capacidad antioxidante, en tanto que B. incana tuvo regular cantidad de polifenoles, baja cantidad de flavonoides y moderada capacidad antioxidante (Tabla 1).



El efecto estimulante de la proliferación de células madre humanas cultivadas sin SFB, pero sí con el extracto, fue medido mediante técnica XTT y expresado como Tasa de Estimulación Celular (TEC). Se encontró que E. arvense fue el extracto que produjo la mayor TEC 173,89% a dosis de 1 280

incubación; a las 24 horas produjo un 56,7%, a las 24 horas 70,76% y a las 72 horas, un 83,52% (Tabla 2).

El efecto estimulante de la proliferación de células madre in vitro demostrado en este trabajo empleando extractos vegetales, es innovatorio y de

figura 1. células madre humanas Originarias de tejidO adipOsO. muestran diferente mOrfOlOgía en las primeras hOras de cultivO.

tabla 1. cOntenidO de pOlifenOles, flavOnOides y capacidad antiOxidante del extractO metanólicO de plantas medicinales.

Nombre de la planta Polifenoles (mg de ácido gálico/100 de m. s.)

Flavonoides (mg de catequina /100 g de m.s.)

FRAP (mmoles/100 g m.s.) Capacidad an-tioxidante

Equisetum arvense 407.30 3 200.53 5.60Bixa orellana 2 241.00 1 616.96 28.11Buddleja incana 1 595.18 773.89 16.25

µg/ml y a las 48 horas (Figura 2), seguido por B. orellana 106,92% a las 48 horas (Figura 3), mientras que B. incana (Figura 4) tuvo menor TEC (80,81%) que el control SFB (83,52%) (Tabla 2). Por otro lado, en las células cultivadas con extracto de E. arvense a dosis de 1 280 µg/ml y SFB se produjo la mas alta TEC 367,34%, superior a la experiencia sin SFB. El extracto metanólico de Bixa orellana produjo una TEC de 337,82% a dosis de 1 280 µg/ml, mientras que B. incana produjo una TEC de 226,04%, a dosis de 1 280 µg/ml (Figuras 5, 6 y 7).

La tasa de estimulación de la proliferación de células madre humanas producida por los extractos metanólico de E. arvense, B. orellana y B. incana, en este trabajo, estaría relacionada con el contenido de flavonoides, mas no con la capacidad antioxidante ni el contenido de polifenoles totales, puesto que en E. arvense son significativamente menores.

El SFB al 10% produjo una TEC máxima dependiente del tiempo de

importancia para trabajos de expansión de poblaciones de células madre con fines de terapia regenerativa; pero también es importante por la factibilidad de su utilización in vivo, debiendo evaluarse experiencias como estimulantes de células progenitoras, como se ha demostrado con el extracto de Uncaria tormentosa sobre células de cordón umbilical (21); mientras que un extracto, el polifenol epigallectin y la catequina del té verde han demostrado efectos de promoción de la osteogénesis e inhibición de



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la adipogénesis, en células madre de médula ósea (22), similares a los efectos del flavonoide poncirin de la fruta Poncirus trifoliata (23).

FINaNCIaMIENTO

Este trabajo fue financiado por el CONCYTEC mediante contrato No. 017-2010-CONCYTEC-OAJ

tabla 2. tasa de estimulación celular expresada en pOrcentaje del suerO fetal bOvinO sObre células madre humanas según tiempO.

Tipo de células Tasa de estimulación celular (TEC) %24 horas 48 horas 72 horas

Suero fetal bovino Humanas 56,70 70,76 83,52

aGradECIMIENTOS

Al CONCYTEC por el apoyo brindado para lograr los objetivos de este proyecto. A Fredy Fabián estudiante de la Universidad Hermilio Valdizán de Huánuco, quien recolectó la planta Buddleja incana.

figura 2. tasa de estimulación celular del extractO metanólicO de e. arvense sObre células madre humanas según dOsis y tiempO, cultivadas sin sfb.

figura 3. tasa de estimulación celular del extractO metanólicO de B. orellana sObre células madre humanas según dOsis y tiempO, cultivadas sin sfb.



figura 4. tasa de estimulación celular del extractO metanólicO de B. incana sObre células madre humanas según dOsis y tiempO, cultivadas sin sfb.

figura 5. tasa de estimulación celular del extractO metanólicO de e. arvense sObre células madre humanas cultivadas cOn sfb.

figura 6. tasa de estimulación celular del extractO metanólicO de B. orellana sObre células madre humanas cultivadas cOn sfb.



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figura 7. tasa de estimulación celular del extractO metanólicO de B. incana sObre células madre humanas cultivadas cOn sfb.

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recepción: 27/05/2011 aceptación: 22/07/2011

javier encisO

cOrrespOndencia: [email protected]


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LES David Prosopio, Jorge Torres, Erick Valdivia, Elmer Salinas P., Margot De los Ríos

rESUMEN

La enfermedad periodontal, en todas sus formas, es una de las afecciones que más afecta al ser humano. Por ello, dentro del tratamiento para esta patología se consideran terapias no quirúrgicas y terapias quirúrgicas que implican incisión de los tejidos blandos, los cuales, luego del procedimiento en sí, se reparan mediante el proceso de cicatrización. El objetivo de este trabajo fue comparar la cicatrización en incisiones a nivel gingival en cobayos con la aplicación de Aloe vera y sin este, en el periodo de una semana.

Palabras clave: Aloe vera, cobayos, cicatrización

aBSTraCT

Periodontal disease is in all its forms one of the most senious affections that affect humans. Therefore within the treatment for this disease is considered: not surgically therapy and surgical therapy, which involves soft tissue incision, that after the procedure itself is carried out the tissue repair through the healing process. The aim of this study was to compare the healing of gingival incisions in guinea pigs at the application of Aloe vera and without the aloe in the period of one week.

Keywords: Aloe vera, guinea pig, healing

David Prosopio1, Jorge Torres1, Erick Valdivia1, Elmer Salinas P.1, Margot de los Ríos1

EFECTO DEL ALOE VERA EN LA CICATRIZACIÓN DE LESIONES GINGIVALES

EFFECT OF Aloe-verA IN HEALING GINGIVAL LESIONS

1universidad científica del sur. facultad de estOmatOlOgía

INTrOdUCCIóN

La capacidad de respuesta a una agresión de un tejido es determinada por una serie de eventos que, de manera progresiva, se activan para restablecer las condiciones de integridad que este haya tenido antes de ser afectado. Previamente a considerar los procesos de reparación tisular, es importante tener presente que la cicatrización es el resultado de la regeneración de los tejidos y del cierre de una herida; no se trata de un fenómeno aislado y su evolución está condicionada por una serie de factores bioquímicos a nivel de la solución de continuidad que representa la lesión, por unos cambios en las estructuras tisulares y por una serie de procesos que determinan la formación de la cicatriz. Este proceso puede ser dividido en tres etapas básicas: de inflamación, fibroblástica y de remodelación. Dentro de este complicado proceso en la cavidad bucal, juega un papel importante la función de diversas células como el fibroblasto gingival, el queratinocito y el colágeno (1). En situaciones de heridas abiertas y quemaduras (2), es importante la rápida reparación de las lesiones, las cuales podrían mejorar a través de la aplicación de sustancias que favorezcan su crecimiento. La aplicación simultánea de Aloe vera sería una opción eficaz para lograr este objetivo en heridas abiertas (3).

El Aloe vera es una planta de la familia Xanthorrhoeaceae, de hojas gruesas,


Efecto del aloe vera en la cicatrización de lesiones gingivales

lanceoladas, espinosas y carnosas. Tiene efectos antimicrobianos debido a las sustancias que contiene, como la aloetina, que neutraliza el efecto de las toxinas microbianas, y la saponina, que actúa como antiséptico. Además, tiene componentes antiinflamatorios como la emolina, la emodina y la barbaloina, que generan ácido salicílico, y los fitosteroles, que también tienen efectos antiinflamatorios. Podemos mencionar, asimismo, efectos cicatrizantes por su contenido de fosfato de manosa, carricina (2), que refuerza el sistema inmune, y hormonas vegetales, que ayudan a la reparación de tejidos y el crecimiento celular.

Desde hace mucho tiempo se viene utilizando el Aloe vera en la medicina tradicional debido a su efecto cicatrizante. Además, estudios en ratas han demostrado que un polisacárido extraído del Aloe vera estimula factores de crecimiento y proliferación tisular como el factor de crecimiento queratinocítico (KGF-1), el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) y la producción de colágeno tipo I (1).

El Aloe vera presenta una amplia variedad de especies, calculada en hasta 360 variedades (2), de las cuales la más utilizada en la medicina tradicional es Aloe barbadensis (1,2), por sus beneficios cicatrizantes y antiinflamatorios, además de otros beneficios, como se sugiere en estudios realizados. La administración oral de Aloe vera podría ser un complemento útil para reducir la glucosa en la sangre de pacientes diabéticos, así como reducir los niveles de lípidos en sangre de pacientes con hiperlipidemia, con resultados prometedores de su actividad oral y tópica (2).

OBJETIvO

Determinar el efecto antiinflamatorio y cicatrizante de Aloe vera (sábila) sobre lesiones gingivales en animales de laboratorio (cobayos).

JUSTIFICaCIóN dEl ESTUdIO

La justificación se basa en hallazgos clínicos en los que se aplicó la sábila a diferentes niveles y se obtuvo efectos positivos en los procesos antiinflamatorios y reparadores de los tejidos como piel, mucosa gástrica entre otros. Asimismo, existen estudios que han demostrado su eficacia en enfermedades sistémicas y en heridas abiertas. Estos resultados son prometedores y llevan a continuar investigando para descubrir otros beneficios de la planta.

Determinar el efecto de la sábila sobre las lesiones gingivales podría ser de mucho aporte para el periodoncista y odontólogo de práctica general, ya que sus componentes podrían utilizarse en apósitos posquirúrgicos o sobre lesiones ya establecidas, con lo que ayudarían a disminuir los procesos inflamatorios y mejorarían la actividad reparadora de las células de la gíngiva.

MaTErIalES Y MÉTOdOS

Estudio doble ciego en 14 animales de laboratorios (cobayos). Se utilizaron savia de Aloe vera, bisturí, gasa estéril, recipientes de vidrio con formol al 10% y microscopio Leica.

Figura 1. cOrte de 3 a 4 mm en la encía adherida.

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rESUlTadOS

OBSERVaCIONES CLÍNICaS

El primer día no se observaron diferencias significativas; ambos grupos mostraron la herida con inflamación circundante. El día 2, el grupo experimental presentó mejores características reparadoras y menor inflamación en relación con el grupo control.

Al cuarto día, las características clínicas son evidentes al presentarse un mejor avance en el grupo experimental (con aplicación de Aloe vera). Al octavo día, las cicatrices del grupo experimental tienen menor volumen en relación con las del grupo control 1, y en comparación con el tercer grupo (grupo control 2) las características de la encía han reparado de manera eficaz. Luego se sacrificó a los especímenes para el estudio histológico de la zona analizada.

HISTOLOGÍa

En el grupo experimental (con aplicación de Aloe vera) se observó un mayor número de células epiteliales, moderada queratinización, cantidad moderada de vasos sanguíneos, fibroblastos organizados y poco o nada infiltrado inflamatorio (figuras 4, 5, 8 y 9).

Se separó a los especímenes en tres grupos: dos de 6 individuos y uno de 2 individuos (grupo control). El Aloe vera se preparó haciendo un corte en la base de la penca y se puso en agua para que sus componentes químicos que podrían ser irritantes, como el Cu, P, Mg, I, fluyan hacia afuera de la hoja y poder así trabajar con los componentes antiinflamatorios y cicatrizantes (figura 3).

Al primer grupo de 6 individuos (grupo experimental) se le realizó un corte de 3 a 4 mm en la encía adherida a nivel del incisivo central derecho, y se les aplicó inmediatamente el Aloe vera preparado previamente. A estos especímenes se les aplicó el Aloe vera 2 veces cada 24 horas durante 4 días (figuras 1 y 2).

Al segundo grupo de 6 unidades también se le realizó un corte con las mismas características que al primer grupo, pero no se les aplicó el Aloe vera; este fue el primer grupo control. Al tercer grupo, de 2 individuos, no se le realizó ninguna incisión ni aplicación de Aloe vera (segundo grupo control).

Figura 4. micrOfOtOgrafía a 10x, cOlOración he, cOn tratamientO de aloe vera.

Figura 3. recOlección del gel de aloe vera.

Figura 2. aplicación del aloe vera luegO del cOrte.



Figura 5. micrOfOtOgrafía a 40x, cOlOración he, cOn tratamientO de aloe vera. se Observan vasOs sanguíneOs, fibrOblastOs OrganizadOs y cOlágenO,

nO se Observa infiltradO inflamatOriO.

Figura. 7. micrOfOtOgrafía a 40x, cOlOración he de encía, sin tratamientO cOn aloe vera. se

Observan múltiples vasOs sanguíneOs, fibrOblastOs desOrganizadOs infiltradO inflamatOriO.

Figura 6. mmicrOfOtOgrafía a 10x, cOlOración he, sin tratamientO de aloe vera.

Figura 8. análisis cOmparativO de las características histOlógicas cOn y sin la aplicación de aloe vera.

tabla 1. infOrme de lectura histOlógica.

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dISCUSIóN

Los efectos antiinflamatorios y reparadores del Aloe vera actúan de manera positiva sobre los tejidos gingivales, al mejorar la respuesta celular y tisular frente a una agresión. Se debería continuar analizando y hacer el estudio en un grupo experimental más grande detallando las características clínicas e histológicas de las lesiones. En estudios anteriores se muestran similares resultados, como en el realizado por Suwimon Jettanacheawchankit y col.,

n nn n

tabla 2. resultadOs

tabla 3. resultadOs cualitativOs y cuantitativOs

donde se observa la estimulación de los factores de crecimiento para fibroblastos y células epiteliales con la aplicación de gel de Aloe vera, lo que mejora la cicatrización de heridas abiertas.

CONClUSIóN

El gel de Aloe vera tiene efectos antiinflamatorios, cicatrizantes y reparadores sobre las lesiones gingivales en animales de laboratorio.



rEFErENCIaS BIBlIOGrÁFICaS

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david prOsOpiO


104 Científica 8 (2), 2011

rESUMEN

La utilización de la inseminación artificial en el mejoramiento genético del caballo peruano de paso es cada vez más frecuente. Existen diversas técnicas de inseminación en equinos, las cuales utilizan semen fresco, refrigerado o congelado. Para realizar un adecuado manejo del semen, es necesario diluir los espermatozoides en medios que provean las condiciones adecuadas para su supervivencia. Existen diversos dilutores comerciales o caseros formulados en base a leche descremada; sin embargo, son pocos los estudios que indiquen el efecto de dichos dilutores en la conservación del semen equino. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de diferentes dilutores desarrollados para semen equino refrigerado en la funcionalidad de espermatozoides de caballo peruano de paso. Se refrigeraron siete muestras de semen equino, provenientes de dos potros. Cada muestra fue dividida en tres partes y diluida con los dilutores E-Z Mixin - ARS (EZ), EquiPRO - Minitüb (EP) y leche descremada (LD). Las muestras fueron almacenadas a 5 °C y la evaluación se realizó a las 0, 24 y 48 horas. Se evaluaron la motilidad progresiva y la integridad funcional de membrana espermática, mediante el test hiposmótico (HOST). Los resultados de la evaluación de motilidad espermática a las 24 y

48 horas luego de la refrigeración, indican que el dilutor EP (43 y 12%) brinda mejores resultados (P ≤ 0,05) en comparación con los dilutores EZ (32 y 7%) y LD (23 y 2%). Los porcentajes de espermatozoides con adecuada integridad de membrana fueron similares entre los tres tipos de dilutores. Estos resultados nos permiten concluir que el dilutor más adecuado para conservar espermatozoides refrigerados de semen de caballo peruano de paso sería el EquiPRO - Minitüb. Por otro lado, la utilización de leche descremada no brindaría ventajas respecto de los dilutores comerciales para la refrigeración de semen equino.

Palabras clave: caballo peruano de paso, biotecnología, dilutor, refrigeración, semen

SUMMarYThe use of artificial insemination in the breeding of the Peruvian Paso Horse is becoming increasingly common. There are several equine insemination techniques using fresh semen, chilled or frozen. For proper handling of semen, sperm must be diluted in media provide the right conditions for their survival. There are several commercial or homemade diluter formulated based on skim milk, however few studies showing the effect of these diluter in the preservation of

EVALUACIÓN DE TRES DILUTORES PARA LA REFRIGERACIÓN DE SEMEN DE CABALLO PERUANO DE PASO Y SUS EFECTOS SOBRE LA MOTILIDAD ESPERMÁTICA E INTEGRIDAD FUNCIONAL DE LA

MEMBRANAEVALUATION OF THRE EXTENDERS FOR THE SEMEM REFRIGERATION PROCESS OF PERUVIAN PASO HORSES, AND HIS EFFECTS ON THE MOTILITY SPERM AND FUNCTIONAL MEMBRANE INTEGRITY

Verónica Orozco Chávez1, Manuel Rosemberg Barrón2, Alexei Santiani Acosta2, Humberto Rodríguez Landeo2

1universidad científica del sur. facultad medicina veterinaria y zOOtecnia. unidad de zOOtécnica y tecnOlógica. lima2universidad científica del sur. facultad medicina veterinaria y zOOtecnia. lima


Evaluación de tres dilutores para la refrigeración de semen de caballo peruano de paso y sus efectos sobre la motilidad espermática e integridad funcional de la membrana

stallion semen. The aim of this study was to evaluate the effect of different sperm diluter developed for equine sperm functionality Peruvian Paso Horse under refrigeration processes. 7 samples were refrigerated for stallion semen, from 2 foals. Each sample was divided into 3 parts and diluted with EZ-Mixin diluter-ARS (EZ)-Minitüb Equipro (EP) and skim milk (LD). The samples were stored at 5 ° C and the evaluation was performed at 0, 24 and 48 hours. Progressive motility was evaluated and the sperm membrane functional integrity by the hypo-osmotic test (HOST). The results of the evaluation of sperm motility at 24 and 48 hours after cooling, indicating that the EP diluter (43 and 12%) provides better results (P ≤ 0.05) compared with the diluter EZ (32 and 7%) and LD (23 and 2%). The percentages of spermatozoa with membrane integrity proper were similar among the 3 types of diluter. These results demonstrate that the most appropriate diluter to keep chilled semen sperm Peruvian Paso Horse-Minitüb would Equipro. The use of skim milk would provide no advantages over commercial diluter for cooling stallion semen.Keywords: Peruvian Paso Horse, biotechnology, diluter, cooling, semen

INTrOdUCCIóNLos dilutores son medios apropiados capaces de mantener la viabilidad espermática del semen fresco, refrigerado o congelado, a corto o largo plazo. Se caracterizan por disminuir la contaminación bacteriana, mantener la viabilidad espermática (1) y obtener mayor volumen del semen (2), con lo que aumentan la tasa reproductiva del macho al inseminar artificialmente a un mayor número de yeguas. Existen dilutores comerciales como el E-Z Mixin (CST) - Animal Reproduction Systems, Equipro - Minitüb y caseros como la leche fresca descremada UHT Gloria Súper Light (ultra pasteurizada, 0% grasas). El EZ Mixin (CST) - ARS (EZ) está formulado en base a leche descremada en polvo y glucosa (3). Generalmente, es empleado para conservar el semen

equino refrigerado (5 °C) (4), ya que a temperatura ambiente desciende la motilidad espermática (5). También contiene sólidos no grasos y sulfato de amikacina. No se especifican más compuestos en su fórmula. El Equipro - Minitüb (EP) está formulado en base a caseinatos específicos, proteínas de suero de leche y un amplio rango de azúcares. No contiene antibióticos ni leche descremada (6). No se especifican más compuestos en su fórmula. Pagl y col. (2006) (7) indican que dilutores (como el EquiPRO - Minitub) formulados en base a estos compuestos son superiores a la leche descremada (3). Pese a esto, los dilutores usados generalmente están formulados en base a leche descremada y yema de huevo, y ofrecen variados resultados en relación a la motilidad espermática (8, 9).

Son pocas las investigaciones dirigidas a la evaluación de diferentes dilutores de semen de caballo peruano de paso para su conservación. Por ejemplo, Donayre (1987) (10) y Ruiz (2001) (11) no encontraron diferencias significativas entre dilutores empleados en semen equino, y obtuvieron pobres resultados (27.50% de motilidad a las 19,5 horas de refrigeración). Por tal motivo, es de suma importancia seguir evaluando los dilutores existentes en el mercado, a fin de poder optimizar las técnicas de preservación de semen de caballo peruano de paso.

MaTErIalES Y MÉTOdOS1.1 Período de estudio

El trabajo se realizó durante el mes de septiembre del 2009. Tuvo una duración de cuatro semanas, y se destinaron dos días de la semana (martes y jueves en horas de la mañana) para realizar las colecciones seminales de los potros seleccionados.

1.2 Lugar de estudio

Esta etapa se realizó en un criadero ubicado en el km 40 de la Antigua Panamericana Sur. Luego de haber colectado a los potros, las muestras de semen fueron transportadas

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LES Verónica Orozco Chávez, Manuel Rosemberg Barrón, Alexei Santiani Acosta, Humberto Rodríguez Landeo

al laboratorio CIRE. (Centro de Investigación y Reproducción Equina), ubicado en Mamacona (Lurín), para realizar los respectivos análisis.

1.3 Potros

Se seleccionaron dos potros de la raza caballo peruano de paso (CPP), los cuales tenían 8 años (potro 1) y 10 años (potro 2) de edad, con 280 y 290 kg de peso, respectivamente.

1.4 Colección de semen

Para realizar las colecciones seminales, se seleccionaron potros según su comportamiento y aceptación de la vagina artificial, tal como se muestra a continuación:

ventocraneal (figura 2). Con la vagina artificial armada y lista para su uso, se aproximaba el potro a la yegua. El potro se estimulaba y, una vez que el pene estaba totalmente protruido, se le alejaba de la yegua para poderle lavar y secar el pene. Esto permitió eliminar esmegma u otros detritus presentes en la superficie peneana. Finalmente, se volvía a acercar al potro a la yegua, y una vez que el pene estaba totalmente protruido y erecto, se dejaba que monte a la yegua y el pene era desviado hacia la vagina artificial (figura 3). Al término de la eyaculación, se llevaba el semen al laboratorio.

1.5 Manejo, dilución y refrigeración de semen

Las muestras de semen obtenidas fueron filtradas para separar la

Para realizar las colecciones seminales, se utilizó una vagina artificial tipo Missouri (figura 1). Dado que se utilizaba una sola vagina artificial para los dos potros, previamente a su armado, se procedía a colocarle y retirarle (antes y después de cada colección) un guante de palpación en el interior (entre las fundas de látex). Se llenaba la vagina artificial con agua a una temperatura inicial, que oscilaba entre 48 °C y 49 °C, hasta obtener una temperatura final de 41 °C-42 °C. En el extremo de la vagina artificial se colocó un whire pack (bolsa de colección), el cual fue protegido por una membrana oscura y aseguradas ambas con un cinta. Finalmente, se lubricó la vagina artificial en la porción distal con gel no espermicida.

Momentos antes de la colección, se identificaba una yegua en celo a fin de que el potro se estimulara con mayor rapidez. A la yegua se le colocaba una traba a nivel de la cuartilla de uno de los miembros posteriores y se le vendaba y amarraba la cola en dirección

fracción gel del eyaculado. Para ello, se vertió el eyaculado obtenido en otra bolsa colectora que contenía el filtro de nailon (malla con poros de 37 μm), que permitía el pasaje de la porción menos

densa del eyaculado. La primera evaluación seminal se realizó con el semen fresco inmediatamente después de la colección. Solo las muestras con motilidad > 50% fueron consideradas aptas para el presente estudio. Las muestras seleccionadas fueron diluidas 1:1 con el dilutor respectivo, a fin de transportar las muestras refrigeradas (caja de tecnopor con packs de hielo) al laboratorio (duración del viaje: 20 min). Los grupos formados fueron:

1) Grupo EZ-24: 5 ml de semen + 5 ml de dilutor EZ para ser evaluado a las 24 horas;2) Grupo EP-24: 5 ml de semen + 5 ml de dilutor EP para ser evaluado a las 24 horas;3) Grupo LD-24: 5 ml de semen + 5 ml de dilutor LD para ser evaluado a las 24 horas;4) Grupo EZ-48: 5 ml de semen + 5 ml de dilutor EZ para ser evaluado a las 48 horas;5) Grupo EP-48: 5 ml de semen + 5 ml de dilutor EP para ser evaluado a las 48 horas;6) Grupo LD-48: 5 ml de semen + 5 ml de dilutor LD para ser evaluado a las 48 horas.



Una vez en el laboratorio, se procedió a evaluar la motilidad, concentración e integridad funcional de membrana. Tras determinar la concentración espermática, se realizó la segunda dilución en cada uno de los grupos, hasta llegar a 25 – 50 x 106 espermatozoides/ml correspondiente a la dosis espermática para inseminación artificial en equinos con semen refrigerado (12). Para refrigerar las muestras seminales diluidas, se empleó el Equitainer®, el cual es un contenedor que permite el enfriamiento inicial lento (a 0,3 °C/min) hasta llegar a una temperatura final de 4 °C a 6 °C durante 48 horas (13).

1.6 Dilutores

Los dilutores utilizados fueron: 1) EZ (E-Z Mixin - Animal Reproduction System), formulado en base a leche descremada en polvo, glucosa, sólidos no grasos y sulfato de amikacina; 2) EP (Equipro - Minitüb), formulado en base a caseinatos específicos, proteínas de suero de leche, amplio rango de azúcares, sin antibióticos ni leche descremada; y 3) LD (Leche descremada Gloria), leche fresca UHT, descremada, súper light, 0% grasas, con vitaminas A, C, D y E. El efecto de dilutores sobre la motilidad espermática y la integridad funcional de membrana fue evaluado a las 0, 24 y 48 horas de refrigeración.

1.7 Evaluación del semen

1.7.1 Motilidad espermática

Se utilizó el método subjetivo para determinar el porcentaje de espermatozoides motiles. Con una pipeta pasteur, se tomó una pequeña muestra de semen y se la colocó en una lámina portaobjetos temperada en una platina a una temperatura aprox. de 37 °C. Sobre esta muestra se colocó una lámina cubreobjetos (también temperada) y se observó al microscopio a 100X. Los resultados fueron expresados en porcentaje de espermatozoides motiles con respecto al total de espermatozoides observados en diversos campos.

1.7.2 Integridad funcional de membrana

Para evaluar la integridad funcional de membrana se realizó el test hiposmótico (HOST). Se preparó un medio de sacarosa diluido en agua bidestilada (18 g/l) (14). En un tubo Eppendorf, se colocaron 1 ml de la solución preparada y 100 μl de semen, para ser incubados en una estufa durante 30 minutos a 37 °C. Posteriormente, se contaron en promedio 100 espermatozoides, los cuales fueron clasificados como HOS+ (membrana citoplasmática funcional, con la cola espermática hinchada y/o doblada) o HOS- (membrana citoplasmática dañada, con la cola espermática recta) (figura 4). Los resultados se expresan en porcentaje de espermatozoides HOS+, es decir, con la membrana espermática funcional.

Tabla 1. Porcentaje de motilidad espermática posrefrigeración con diferentes dilutores a las 0, 24 y 48 horas

Horas

Muestras seminales

Sin dilutorCon dilutor

E-Z Mixin - ARS (CST) EquiPRO - Minitüb Leche descremada Gloria

X ± DS X ± DS X ± DS X ± DS0 74.29 ± 1.82 - - -

24 - 32.71 ± 20.29 (ab) 43.29 ± 20.84 (a) 23.36 ± 19.00 (b)48 - 7.93 ± 6.78 (ab) 12.50 ± 12.05 (a) 2.71 ± 3.20 (b)

** En las comparaciones horizontales, letras diferentes implican diferencias significativas (P ≤ 0,05).

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rESUlTadOS Y dISCUSIóNEl objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto de tres tipos de dilutores sobre la calidad seminal, luego de ser sometidas las muestras a un proceso de refrigeración por 48 horas. Los parámetros evaluados fueron la motilidad espermática y la integridad funcional de la membrana celular, medida mediante el test hiposmótico.

Inicialmente, tras colectar el semen de los potros seleccionados, se evaluó la calidad del semen momentos antes de realizar las primeras diluciones. Los principales parámetros evaluados fueron la motilidad espermática, la concentración espermática y el volumen seminal libre de gel, en los cuales se obtuvieron valores de 72%, 130 x 106 espermatozoides/ml y 56 ml, respectivamente. Estas características son similares a las descritas anteriormente para muestras seminales de caballo peruano de paso obtenidas por Donayre (1987) (10), Borgesa (2004) (15), Vásquez (2005) (16) y Ruiz (2001) (11).

Todas las muestras de motilidad espermática obtenidas en el presente estudio, al inicio, tuvieron un porcentaje adecuado de alrededor del 75%. Se observó una notoria disminución de motilidad a las 24 y 48 horas.

En la evaluación a las 24 horas, la motilidad del grupo EP fue significativamente mayor (P < 0.01) en comparación con el grupo LD. Esta misma tendencia se observó a las 48 horas. El grupo EZ fue similar (P > 0.05) al grupo EP y LD, tanto a las 24 como a las 48 horas. Esta semejanza entre los dilutores EP y EZ, a partir de las 24 horas de refrigeración, pudo ser consecuencia de la similitud de los compuestos con los cuales han sido formulados. El EZ está formulado en base a leche descremada en polvo y glucosa (3), sólidos no grasos y sulfato de amikacina. El dilutor EP, por su parte, está formulado en base a caseinatos específicos, proteínas de bajo peso molecular y un amplio rango de azúcares. No contiene antibióticos ni leche descremada (6). El dilutor LD, en cambio, solo contenía leche

descremada (0% grasas) y vitaminas A, C, D y E; no se le añadió ningún otro compuesto extra. Los resultados obtenidos coinciden con los de Pagl y col. (2006) (7), quienes observaron que el dilutor EP fue superior a dilutores formulados en base a leche descremada en los procesos de refrigeración de semen de caballos (3), como consecuencia de sus compuestos. Cabe destacar que las proteínas presentes en la leche otorgan protección a los espermatozoides frente a las bajas temperaturas (17, 18). Por tal motivo, es un compuesto común en la formulación de dilutores de semen. Pese a esto, la disminución de la motilidad espermática a partir de las 24 horas de refrigeración pudo ser consecuencia de la ausencia de otros compuestos tales como antibióticos, glucosa, bicarbonato de sodio u otros, los cuales permitirían cumplir la función de un dilutor eficiente (3, 19, 20, 21) al crear un medio capaz de conservar la motilidad progresiva, así como de ofrecer mejores índices de concepción frente a la leche descremada sin otro compuesto (22).

Existen diversos estudios en los que se indica la eficiencia del dilutor EZ. Frand y col. (1987) (23) almacenaron una muestra de semen diluido con el dilutor E-Z Mixin a 20 °C por 24 horas, y obtuvieron una motilidad del 19%. Pickett y Amann (1987) (24) evaluaron dos tratamientos de semen diluido con E-Z Mixin a 20 °C, los cuales fueron almacenados durante 34 y 48 horas, y obtuvieron una motilidad del 23% y el 15%, respectivamente. En ambos estudios, los autores señalaron que las diferencias obtenidas entre experimentos pueden deberse a la edad de los animales y/o a la inherente variación que puede haber en las metodologías experimentales. En relación con los resultados obtenidos en el presente estudio, a las 24 horas, fue mayor la motilidad espermática obtenida por Frand y col (1987) (23); sin embargo, existe una ligera disminución a las 48 horas de refrigeración si se compara con los resultados obtenidos por Pickett y Amann (1987) (24). Esto pudo ser consecuencia de la temperatura de refrigeración, ya que



el rango de temperatura óptima para mantener la motilidad espermática (25, 26, 27) y fertilidad (19, 28) del semen equino refrigerado varía entre 4 y 6 °C.

Province y col. (1985) (29), en un estudio, indicaron que la temperatura de 15-20 °C es superior a los 5 °C para mantener la motilidad y viabilidad espermática del semen equino; sin embargo, esta evaluación se realizó solo entre 4 y 12 horas de refrigeración. Estudios franceses indican que, para mantener una buena motilidad espermática, el semen debe ser refrigerado a 15 °C en vez de 10 °C o 4 °C cuando el dilutor no contiene leche (30). También indicaron que la motilidad espermática se conserva mejor a 4 °C en vez de a 15 °C cuando el dilutor está formulado en base a leche. Se debe considerar que la fertilidad del semen refrigerado a 20 °C por más de 24 horas puede ser favorable para algunos sementales (31, 27); pero para otros sementales puede verse afectado negativamente a partir de las 12 horas de almacenamiento. Asimismo, se ha reportado que el almacenamiento a 5 °C, es más viable en comparación con los 20 °C para semen que será almacenado por períodos mayores a 12-24 horas (28). En los tres grupos de dilutores evaluados, la disminución de la motilidad espermática a partir de las 24 horas de refrigeración pudo haber sido consecuencia de la presencia y cantidad del plasma seminal, la generación de radicales libres a partir de espermatozoides dañados, muertos o defectuosos, entre otras causas.

El plasma seminal contiene ciertos sustratos capaces de activar el

movimiento espermático e iniciar el proceso de maduración espermática (32), lo que desfavorece su conservación vital (33). Pickett y col. (1975) (34) señalan que existe un compuesto en el plasma seminal con efecto detrimente sobre los espermatozoides, el cual podría causar la disminución de la motilidad, y la muerte espermática durante su conservación.

La composición del plasma seminal varía considerablemente entre potros; por tal motivo, los efectos del plasma seminal en combinación con diferentes dilutores no serán iguales para todos los potros. Por ejemplo, una elevada concentración de cloruro de sodio puede ser responsable de la variación y de la tolerancia del semen de los potros, tras provocar un cambio en la presión osmótica en los procesos de refrigeración y/o criopreservación (congelación) (35).

Diversos autores señalan la importancia de mantener un determinado porcentaje del plasma seminal en el momento de conservar el semen. Tal es el caso de Palmer (1984) (19) y de Braun y col. (1994) (36), quienes indicaron que la presencia del 0% al 10% de plasma seminal en el semen permite alcanzar resultados superiores a los alcanzados del 20% al 50%. En cambio, Jasko y col. (1992) (37) señalaron que la eliminación total del plasma seminal provoca una disminución de la motilidad después de dos horas de refrigeración, por lo que recomendaron mantener entre un 5% y un 20% del plasma seminal. Otros indicaron que niveles superiores al 20%, durante

tabla 3. evaluación de la integridad funciOnal de la membrana plasmática pOsrefrigeración (%)

HORASCon dilutor (HOS+)

E-Z Mixin - ARS (CST) - EZ EquiPRO - Minitüb - EP Leche descremada - LDX ± DS X ± DS X ± DS

0 65.71 ± 4.12 66.64 ± 3.67 70.00 ± 6.8424 41.29 ± 10.66 45.07 ± 13.39 37.14 ± 9.1648 28.21 ± 7.55 30.71 ± 11.27 24.21 ± 7.76

** En las comparaciones horizontales, letras diferentes implican diferencias significativas (P ≤ 0,05).

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un prolongado periodo, causan una notable disminución de la motilidad espermática (38, 37, 39). Mina y Morel (1999) (40) señalan que la remoción del plasma seminal y su reemplazo con un dilutor apropiado podría proporcionar a los espermatozoides los requerimientos necesarios para prolongar su supervivencia durante el almacenamiento. Respecto a esto, trabajos realizados por Palmer (1984) (19) hallaron tasas de supervivencia espermática del 27,3%, 44,2%, 50,8% y 55,9%, para semen diluido que incluía un 50%, 20%, 10% y 0% de plasma seminal, respectivamente.

En el trabajo realizado, en las muestras refrigeradas se mantuvo el 100% del plasma seminal, con lo que se obtuvo, a las 24 horas, promedios del 32,71%, 43,29% y 23,36%; y a las 48 horas, promedios del 7,93%, 12,50% y 2,71% para los dilutores EZ, EP y LD, respectivamente.

En el equino, el uso de semen refrigerado es limitado debido a la baja capacidad de fecundación. Francl y col. (1987) (31) señalaron que el semen almacenado por 24 horas es capaz de mantener una fertilidad similar al semen fresco; sin embargo, cuando es refrigerado a 5 °C por 48 horas, la motilidad espermática (37) y los rangos de fertilidad generalmente se ven disminuidos (41). Esto se debió a la presencia de espermatozoides muertos, dañados por un rápido proceso de enfriamiento o morfológicamente anormales, los cuales generaron una mayor cantidad de especies reactivas de oxígeno (ROS, por sus siglas en inglés) que los espermatozoides morfológicamente normales (42), lo que causó diversos daños.

El otro parámetro evaluado fue la integridad de membrana mediante la prueba hiposmótica. Este test es un buen indicador de la eficiencia de los dilutores, pues se espera obtener buenos índices de fertilidad al inseminar artificialmente yeguas. Existen dilutores que causan la

disminución de la fertilidad (43, 44, 45), probablemente por los daños producidos a nivel de la membrana plasmática de los espermatozoides (46). Tras realizar el test hiposmótico (HOS), los espermatozoides que posean una membrana plasmática funcional serán aquellos que tengan la cola engrosada y enrollada (HOS+). Estos espermatozoides aún mantienen la capacidad de incorporar agua para equilibrar el medio en el que están presentes, sin que suceda una lisis celular.

Los resultados obtenidos del HOST indican que no hubo diferencia significativa (P < 0,05) entre dilutores a las 0, 24 y 48 horas de refrigeración espermática.

Asimismo, se observó que, conforme aumentan las horas de refrigeración, disminuye el porcentaje de HOS obtenido. Esto puede ser consecuencia del enfriamiento, ya que los espermatozoides están expuestos a los efectos negativos del choque térmico (47), lo que ocasiona daños en la membrana plasmática y en su capacidad fecundante. Los resultados obtenidos son superiores a los de Ruiz (2001) (11), quien obtuvo promedios del 30,36% a las 0 horas y del 16,15% a las 20 horas, al emplear un dilutor denominado “Next Generation”, el cual tiene como compuesto principal la leche descremada.

Los espermatozoides siempre están expuestos al efecto negativo del choque térmico; por ello, se considera un factor desencadenante la velocidad con la que se desciende hasta la temperatura deseada. Existe choque térmico cuando son enfriados de 37 °C a 8 °C a una velocidad mayor a 0,38 °C/min (48). Los signos de choque térmico en los espermatozoides son una rápida disminución de la motilidad, movimientos retrógrados y/o circulares, reducción del metabolismo, daños a nivel acrosomal y en membrana plasmática, siendo estos últimos lesiones irreversibles (24, 26). La



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severidad del efecto del choque térmico depende del grado de enfriamiento, intervalo entre temperaturas y variación de la misma, por lo que pueden ser reducidos controlando el enfriamiento en las temperaturas críticas (entre 19 °C y 8 °C) (26) y por medio de la adición de lípidos (yema de huevo) o proteínas (leche) en el dilutor.

El contenedor empleado para refrigerar las muestras a partir de las 0 horas fue el Equitainer® (Minitüb) (figura 4), el cual es el contenedor más apto para este proceso ya que realiza un enfriamiento lento (0.3°C/min) hasta llegar a una temperatura final de 4 °C a 6 °C desde 36 horas (49, 25, 50, 51) hasta 48 horas (13). Se ha demostrado que este rango de temperatura para el proceso de refrigeración es óptimo para mantener la motilidad (26, 25, 27) y fertilidad espermática (19, 28, 52) del semen equino.

Si bien en el trabajo se empleó el Equitainer®, se debe considerar que el efecto de un rápido enfriamiento del semen también depende de la composición del dilutor empleado (53).FINaNCIaMIENTO

Este trabajo se realizó con el financiamiento del Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONCYTEC), según expediente Nº 256-2008-CONCYTEC-OAJ.

aGradECIMIENTONuestro más profundo agradecimiento al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONCYTEC) y a los directivos de la Universidad Científica del Sur, sin cuyo apoyo no hubiera sido posible ejecutar y culminar el presente estudio.

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verónica OrOzcO cOrrespOndencia: [email protected]


rESUMENObjetivo: Determinar la capacidad antimicrobiana del cloruro de cetilpiridinio (CCP) sobre los cepillos dentales después del uso diario de preescolares con dentición decidua completa.

Materiales y métodos: Es un estudio de ciego, cruzado. La muestra estuvo constituida por 67 niños con edades que oscilaban entre 2 y 5 años, pertenecientes a un centro educativo preescolar localizado en la ciudad de Huaral (Lima), que fueron divididos en dos grupos: Grupo 1 y Grupo 2. El estudio fue realizado en dos fases, en cada una de ellas se intercaló la aplicación de la solución seleccionada para la descontaminación del cepillo dental para ambos grupos; Sustancia B: enguaje bucal para niños, que contiene cloruro de cetilpiridinio (CCP) con flúor; y Sustancia A: agua destilada (contr.ol). Posteriormente, los cepillos fueron rotulados para el análisis microbiológico respectivo. Los datos obtenidos fueron analizados mediante la prueba de Friedman.

Resultados: Los cepillos dentales a los que se les aplicó en forma de spray el enjuague bucal para su descontaminación, presentaron un menor porcentaje de colonización bacteriana de S. mutans (28,6%),

EVALUACIÓN DE LA CAPACIDAD ANTIMICROBIANA DEL CLORURO DE CETILPIRIDINIO (CCP) SOBRE LA MICROFLORA EXISTENTE EN LOS CEPILLOS DENTALES EN USO EN PREESCOLARES CON

DENTICIÓN DECIDUA COMPLETA

mientras que con el agua destilada (control) existió un alto porcentaje (93,6%).

Conclusiones: Los cepillos dentales presentan un grado de contaminación bacteriana posterior a su uso. El cloruro de cetilpiridinio (CCP) al 0,05%, presente en el enjuague bucal pediátrico, utilizado demostró disminuir la presencia de colonias de S. mutans presentes en los cepillos dentales.

Palabras clave: cepillos, desinfección, enjuague bucal

aBSTraCTThere are a few studies that analyze the use of desinfectant substances in toothbrushes to reduce the microbial contamination in children; nor on the effectiveness of the Cetilpiridinium Chloride (component commonly found in the mouthwashes) in the decontamination of these brushes. For that reason, the present study was made in order to determine the antimicrobial capacity of the Cetilpiridinium Chloride (CCP) on the dental brushes after the daily use in an infantile population.

The sample was constituted by 67 students with a rank of age between 2 and 5 years, belonging to a located preschool in Huaral’s city, Department of Lima, which on the basis of the

Simabukuro VF1, Albites AU1, Carmen Villarroel1, Xavier Contreras1, Ramírez YW1, Tang SP1, Aguilar GD2, Álvarez-Vidigal E2

EVALUATION OF ANTIMICROBIAL ACTIVITY OF CETYLPYRIDINIUM CHLORIDE (CPC) ON THE EXISTING MICROFLORA TOOTHBRUSHES IN USE IN PRESCHOOL CHILDREN wITH COMPLETE

PRIMARY DENTITION

1universidad científica del sur. facultad de estOmatOlOgía. estudiante

2universidad científica del sur. facultad de estOmatOlOgía. dOcente

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LES Simabukuro VF, Albites AU, Carmen Villarroel VC, Xavier Contreras CX, Ramírez YW, Tang SP, Aguilar GD,

Álvarez-Vidigal E

inclusion criteria and exclusion was selected, soon to be divided in two groups. Two phases were made putting in for each one of them the solution selected for the disinfection of the dental brush (CPP or distilled Water).

The results were translated through scales, finding a higher number of Streptoccocus mutans in scale 3 and none in 0. There was observed a higher percentage of cases with high bacterina formation when using distilled Water (90,3% and 96,9%) that in the cases when cetylpyridinium chloride was used (0% for both cases)

It was found the presence of S. mutans in the bristles of toothbrushes. Was compare the bacterial contamination of the toothbrushes sprinkled with distilled water versus CCP, being significant differences in the diminution of the bacterial growth by the action of the mouthwash.

Keywords: toohbrush, desinfecction, mouthwashes

INTrOdUCCIóNActualmente, la odontología enfatiza cada vez más su atención en la aplicación de medidas preventivas y control de enfermedades que afectan la cavidad bucal. Considerando que la caries dental y la enfermedad periodontal son ocasionadas por microorganismos, la remoción mecánica del biofilm dental mediante el cepillado dental, auxiliado por el uso del hilo dental, representa el medio más eficaz, accesible y difundido para el mantenimiento de la salud oral (13,1,3).

Los cepillos dentales son los instrumentos más utilizados en la higiene oral y han demostrado ser eficaces en la remoción del biofilm dental. Sin embargo, pueden llegar a contaminarse de microorganismos que provienen de la cavidad oral (6,10,15). Este hecho fue observado por Cobb en 1920, quien reportó que el cepillo dental puede ser el causante de infecciones recurrentes (7,2). Glass y Lare (12) observaron la correlación entre cepillos contaminados y la presencia

de enfermedades. Posteriormente, Glass y Shapiro (13) concluyeron que, en relación con la naturaleza de la enfermedad, los pacientes podrían eliminar los síntomas existentes mediante el cambio del cepillo.

Además del problema de reinfección con microorganismos, los cepillos contaminados pueden actuar como reservorios bacterianos provenientes del lugar donde son almacenados. Malmberg et ál (26) reportaron el amplio crecimiento bacteriano en cepillos utilizados por niños en una guardería. Cabe mencionar que también se ha reportado el hallazgo de coliformes en cepillos dentales, los que probablemente puedan provenir de los baños (5,6).

Por este motivo, algunos investigadores se han interesado en evaluar el nivel de contaminación microbiana de los cepillos dentales, considerando fundamentalmente la desinfección de los mismos para prevenir el riesgo de reinfección o infección, y para el mantenimiento de una buena salud bucal y general (17).

En 1920, la aplicación de alcohol fue el primer procedimiento recomendado para descontaminar cepillos dentales (12,13). Posteriormente, se han reportado otros métodos que incluyen el uso de solución saturada de cloruro de sodio y lugol, gluconato de clorhexidina, hipoclorito de sodio, cloruro de cetilpiridinio, uso de horno de microondas e irradiación de luz ultravioleta, los cuales han demostrando niveles de eficacia variables (18,19,22).Los procedimientos para mantener la limpieza y descontaminación de los cepillos dentales han sido discutidos frecuentemente. Kozai et al reportaron que los S. mutans, así como otros microorganismos patógenos, pueden ser transferidos fácilmente cuando un cepillo de dientes es utilizado, lo que aumenta el riesgo de caries dental y de enfermedades infecciosas (4,20,21). Glass et al (12) refieren que las bacterias aerobias y anaerobias que se fijan en las cerdas de los cepillos se mantienen con vida gracias a la humedad y a su uso constante (26,27).


Evaluación de la capacidad antimicrobiana del cloruro de cetilpiridinio (ccp) sobre la microflora existente en los cepillos dentales en uso en preescolares con dentición decidua completa

Una buena higiene oral es importante y recomendable desde el momento de la erupción del primer diente, y si bien al cepillarse se remueve el biofilm dental, no se asegura la remoción de los microorganismos en la boca y, por ende, en el cepillo (6,7). Las investigaciones recientes demuestran que la inmersión de los cepillos en una sustancia desinfectante como complemento, pueden ser altamente efectivo en la prevención de infección o reinfección por otros microorganismos patógenos del ambiente (4,8,28).

El cloruro de cetilpiridinio es el ingrediente más común encontrado en los enjuagues bucales, generalmente en una concentración del 0,05%, y ha sido demostrada su efectividad en la eliminación de un espectro amplio de bacterias.

Existe escasa literatura referente a la contaminación de los cepillos dentales pediátricos y sobre materiales y métodos para su desinfección, con la finalidad de prevenir infecciones cruzadas y reinoculación de microorganismos. Por ello, son necesarias más investigaciones en búsqueda de métodos prácticos, eficaces y, sobre todo, de bajo costo para la descontaminación de los cepillos dentales, particularmente en niños en edad preescolar, ya que son un grupo etáreo con un alto riesgo de desarrollar caries dental.

El objetivo de este estudio fue evaluar el cloruro de cetilpiridinio (CCP) al 0,05% existente en un enjuague bucal como sustancia antimicrobiana empleada para la descontaminación de los cepillos dentales pediátricos.

MaTErIalES Y METOdOSEl presente estudio fue aprobado por el Comité de Ética de la Facultad de Estomatología de la Universidad Científica del Sur. Es un estudio ciego, cruzado, para el cual fueron seleccionados 67 niños con dentición decidua completa, con edades que oscilan entre 2 y 5 años de edad, pertenecientes a un centro educativo preescolar localizado en la provincia de Huaral, en Lima. Se excluyó del estudio a aquellos niños que se

encontraban bajo terapia antibiótica hasta tres meses antes de iniciar el estudio, a los que presentaban alguna alteración dentaria, los que usaban enjuagues bucales o los que tenían algún aparato protésico u ortodóntico. Se dividió a la población en dos grupos seleccionados aleatoriamente, a los cuales se les denomino Grupo 1 (34 niños) y Grupo 2 (33 niños). Los cepillos fueron rotulados según nombre y codificación de la sustancia que se les iba a aplicar. Para el análisis de la capacidad antimicrobiana del cloruro de cetilpiridinio (CCP) se lo utilizó en un enjuague bucal para niños (Sustancia B) y para el grupo control se utilizó agua destilada (Sustancia A).

El estudio fue conducido en dos fases, para lo cual se entregaron semanalmente cepillos nuevos a cada participante, los que serían almacenados en un cepillero.

Primera fase

Las docentes realizaron el cepillado dental a cada niño una vez al día después del refrigerio, durante cinco días. Se enjuagó los cepillos con agua a chorro proveniente de la tornera y, posteriormente, a los del Grupo 1 se les aplicó el espray con la Sustancia A, mientras que al Grupo 2 se le aplicó el espray con la Sustancia B. Cada cepillo fue sostenido en una posición vertical y la solución fue rociada una vez por cada una de las caras de la cabeza del cepillo (izquierda, derecha, adelante, atrás, arriba, y abajo), a una distancia de 5 cm (aprox. 0.06 ml de solución por cepillo), y finalmente fue secado y almacenado en los cepilleros.

Al finalizar los cinco días, se recolectaron los cepillos, los cuales fueron empaquetados en bolsas estériles para luego ser transportados para el análisis microbiológico. Se realizó un periodo de descanso (wash out) de siete días y luego se inició la segunda fase del estudio.

Segunda fase

Se realizó la misma secuencia de higiene que en la primera fase, pero se invirtió la aplicación del espray: al

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Grupo 1 se le aplicó el espray con la Sustancia B, y al Grupo 2, el espray con la Sustancia A.

Al finalizar los 5 días, se recolectaron los cepillos, los cuales fueron empaquetados en bolsas estériles, para luego ser transportados para el respectivo análisis microbiológico. Las muestras fueron analizadas en el Laboratorio de Microbiología y Odontopediatría de la Facultad de Odontología de Piracicaba (FOP), de la Universidad Estadual de Campinas, en Sao Paulo, Brasil.

análisis microbiológico

Los cepillos dentales fueron sometidos a cuatro horas de secado y, posteriormente, se sumergió la totalidad de sus cerdas de forma individual y vertical dentro de tubos de ensayo de 25 x1 50 mm que contenían 10,0 ml del medio de cultivo CaSa B (agar de sucrosa-bacitracina). Los tubos fueron cerrados con algodón por 3 a 4 días a 37 ºC. Después del periodo de incubación, los cepillos fueron sometidos a agitación manual en el propio medio de cultivo y retirados cuidadosamente para evitar que las cerdas contactaran con las paredes del tubo.

Posteriormente, las cerdas fueron analizadas con un microscopio estereoscópico (Nikon - Japón), sobre luz reflejada, y se efectuó el conteo de colonias de S. mutans adheridos a las cerdas. El número de colonias fue expresado teniendo en cuenta los siguientes parámetros:

0 (ausencia de biofilm)

1 a 100 (cuando fue posible efectuar el conteo exacto del número de unidades formadoras de colonias existentes)

+100 (cuando las colonias no se mezclaban, lo que posibilitó el conteo a valores superiores a 100 colonias)

Incontable (cuando existió un desarrollo bacteriano intenso, lo que imposibilitó el conteo)

Aquellos cepillos con ausencia de formación de colonias (conteo igual a 0) fueron mantenidos en el medio de

cultivo a 37 ºC y observados hasta por 20 días, para el análisis de una posible turbidez del medio (indicador del desarrollo de otros microorganismos). Frente a la no turbidez del medio después de 20 días, los cepillos fueron clasificados como 0, es decir, libres de microorganismos.

análisis estadístico

Para el análisis estadístico, con relación a la presencia o ausencia de colonias de S. mutans sobre las cerdas de los cepillos dentales, los números de colonias fueron convertidos en scores:

Score 0: ausencia de colonias de S. mutans sobre la superficie de las cerdas.

Score 1: 1 a 50 colonias de S. mutans

Score 2: 51 a 100 colonias de S. mutans

Score 3: más de 100 colonias de S. mutans

Se elaboró una base de datos en una hoja de cálculo de Microsoft Excel XP, la cual fue trasladada al paquete estadístico SPSS versión 15.0 para el análisis estadístico. Los resultados fueron analizados con la prueba no paramétrica de Friedman’s, con un nivel de significancia al 5%.

rESUlTadOS

De los 86 niños evaluados, fueron seleccionados para el estudio 67. Durante el transporte de los cepillos al laboratorio se perdieron cuatro muestras: tres del Grupo 1 y una del Grupo 2, las que fueron excluidas del estudio.

Todos los cepillos obtenidos de los grupos 1 y 2 a los que se les aplicó la Sustancia A estuvieron contaminados con S. mutans, mientras que en los cepillos a los que se les aplicó la Sustancia B la contaminación disminuyó considerablemente. Cabe resaltar que, en ambos grupos (1 y 2), ningún cepillo rociado con Sustancia B presentó un conteo mayor a 100 colonias de S. mutans (score 3) (tabla 1).



La prueba de Friedman’s demostró la existencia de una diferencia significativa en ambos análisis realizados. Para las sustancias A y B se obtuvo una diferencia de p > 0,05, lo que demostró la capacidad antimicrobiana del cloruro de cetilpiridinio (CCP) presente en el enjuagatorio bucal pediátrico con Flúor y aplicado sobre las cerdas de los cepillos dentales posteriormente a su uso.

dISCUSIóN

Diversos estudios han demostrado que los cepillos dentales son colonizados por la microbiota oral (8,19-22), que actúa como reservorio para reintroducir los microorganismos, especialmente los S. mutans (4, 7, 23-26).

Donna et ál (22) manifiestan que el uso de dentífricos en la higiene oral no es totalmente efectivo en la disminución de diferentes grupos bacterianos que pueden causar enfermedades periodontales. Afirma que es indispensable utilizar alguna sustancia antiséptica sobre los cepillos dentales luego de su uso, a fin de evitar que sean posibles vehículos de transporte para la propagación de bacterias patógenas en la cavidad bucal.

Goldsmith et al (13) demostraron que los diferentes tipos de cerdas favorecen o disminuyen la adherencia de los S. mutans, y concluyeron que los cepillos con cerdas de diferentes niveles de tamaño y cabezas ovaladas logran una menor presencia de S. mutans. Según Wetzel et al (26), el método de inserción

de cerdas en los cepillos de manera individual y compacta también reduce efectivamente la contaminación.

Se sabe que los cepillos dentales se contaminan con diversos microorganismos después de ser utilizados y que la aplicación de una sustancia antiséptica disminuye drásticamente la fijación de las bacterias a las cerdas (24). Nelson-Filho et ál (19) lo demuestran al utilizar tres soluciones antisépticas diferentes sobre cepillos dentales como una manera rápida y efectiva para la desinfección. Encontraron una mayor disminución de colonias bacterianas tras el empleo de la clorhexidina, que demostró una total reducción de la colonización bacteriana en comparación con otras soluciones.

En el presente estudio, se evaluó la capacidad antimicrobiana del cloruro de cetilpiridinio (CCP) al 0,05% (presente en un enjuagatorio bucal pediátrico) sobre los cepillos dentales utilizados diariamente por preescolares, y se halló una gran cantidad de S. mutans (93,6%) en la totalidad de cepillos a los cuales no se les aplicó esta sustancia (CCP), lo que concuerda con los resultados reportados por diversos investigadores (4, 7, 23-26).

La técnica para la recolección de datos en este estudio fue muy similar a la realizada por Sato et al (20) y presenta como única diferencia el uso de pasta dental en el cepillado; asimismo, sus muestras fueron procesadas después de 4 horas del último uso del cepillo.

tabla 1. númerO y pOrcentaje de casOs pOr scOre atribuidOs de acuerdO al númerO de cOlOnias de s. mutans fOrmadas después del cepilladO y aplicación de las sustancias a y b

SCOREGRUPO 1 GRUPO 2

SUSTANCIA A(AGUA DESTILADA)

SUSTANCIA B(CCP)

SUSTANCIA A(AGUA DESTILADA)

SUSTANCIA B(CCP)

0 0 (0%) 7 (22,6%) 0 (0%) 11 (34,3%)1 1 (3,2%) 20 (64,5%) 1 (3,1%) 18 (56,3%)2 2 (6,5%) 4 (12,9%) 0 (0%) 3 (9,4%)3 28 (90,3%) 0 (0%) 31 (96,9%) 0 (0%)

TOTAL 31 (100%) 31 (100%) 32 (100%) 32 (100%)

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A pesar de ello, se obtuvieron resultados similares en lo que respecta a descontaminación del cepillo dental, lo que muestra al cloruro de cetilpiridino al 0,05% (presente en el enjuague bucal pediátrico) como un mejor antiséptico.La desinfección de los cepillos dentales con sustancias antisépticas luego de su uso mostró resultados positivos (24). El producto de cloruro de cetilpiridinio con flúor como sustancia descontaminante demostró una eficacia del 89% (N=63) para un crecimiento menor de 50 colonias (scores 0 y 1).

Cabe resaltar que no se encontraron muchos reportes de estudios previos en los cuales se evaluara la capacidad antimicrobiana del cloruro de cetilpiridinio y su efectividad en la descontaminación y desinfección de cepillos dentales. Este principio innovador puede ser de gran importancia y utilidad para los estándares de higiene de los cepillos dentales en la vida cotidiana.

La facilidad de la desinfección de cepillos dentales con el uso de sustancias comunes como los enjuagues bucales puede permitir implementar esta práctica como una conducta habitual, al igual que el cepillado diario. Disminuir la colonización bacteriana en las cerdas de cepillos dentales después de su uso podría ayudar a disminuir la contaminación bacteriana de la cavidad oral y, por ende, el riesgo para la presencia de caries dental.

CONClUSIONES

Existe contaminación bacteriana en los cepillos dentales, al comprobar la presencia de S. mutans. La aplicación mediante espray de un enjuague bucal que contenga cloruro de cetilpiridinio (CCP) al 0,05% con flúor sobre las cerdas de los cepillos después de ser utilizados, disminuye la presencia de colonias de microorganismos.



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fabiOla simabukurO valcarcel cOrrespOndencia: [email protected]

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rESUMEN

La hantavirosis es una zooantroponosis que causa enfermedad subclínica en ratones y es producida por un virus ARN de la familia Bunyaviridae, que existe desde hace millones de años en Asia y América. Se han descrito más de 30 especies, y los biotipos más importantes son HFRS, HPS y HOV. Existen asociaciones dominantes entre diferentes serotipos del virus Hanta, roedores portadores y enfermedad en el ser humano. En Chile, las especies de roedores portadores son las siguientes: Oligoryzomys longicaudatus, que sería el principal portador, Akodon olivaceus o laucha olivácea y Abrothrix longipillis o lauchón de pelo largo. Otros que ocasionalmente han dado positivos son el Akodon longipilis o ratón pelilargo, y el Phillotis Darwin o ratón orejudo. En Perú, el roedor portador sería el Oligoryzomys microtis. En América, la presentación del virus Hanta está documentada en Canadá, Estados Unidos, Brasil, Panamá, Paraguay, Bolivia, Uruguay, Argentina, Chile y Perú. En este artículo se enfatiza la enfermedad por Hantavirus en Chile; se describen la patogenia, el control y la prevención; y se define un caso sospechoso de infección por Hantavirus.

Palabras clave: hantavirus, casos en Latinoamérica

VIRUS HANTA. UN ANTIGUO VIRUS EMERGENTE

1 Universidad Pedro de Valdivia. Santiago de Chile. Profesor de Enfermedades Infecciosas. [email protected] Universidad Científica del Sur. Facultad de Medicina Humana. Profesor investigador del Laboratorio de Cultivo Celular. Lima, Perú.

Patricio Berríos Etchegaray1, Javier Enciso Gutiérrez2

aBSTraCT

The hantavirus is causing zooantroponosis subclinical disease in mice is caused by an RNA virus family Bunyaviridae, which has existed for millions of years in Asia and America, described 30 species, being the most important biotopes: HFRS, HPS and HOV. There are associations between different serotypes dominant Hanta virus, disease-carrying rodents and humans. In Chile rodent species are carriers: Oligoryzomys longicaudatus what would be the main carrier, Akodon olivaceus or olive and Abrothrix laucha lauchón longipillis or long hair. Others have occasionally tested positive: longipilis or mouse Akodon longhaired and Darwin or mouse-eared Phillotis. In Peru, the rodent would Olixgoryzomys microtis carrier. In America, the presentation of the Hanta virus has been documented in Canada, USA, Brazil, Panama, Paraguay, Bolivia, Uruguay, Argentina, Chile and Peru. This article emphasizes the hantavirus disease in Chile and describes the pathogenesis, prevention and control, and defines a suspected case of hantavirus infection.

Keywords: hantavirus in Latin america

aNTECEdENTES GENEralES

El Hanta es un virus cuyo genoma es ARN (Ribovirus) y pertenece a la familia Bunyaviridae (1) (Hussein et al., 2011).

arTÍCUlOS dE rEvISIóN

HANTAVIRUS. A FORMER EMERGING VIRUS


Virus Hanta. un antiguo virus emergente

Este virus ha existido, posiblemente, desde hace millones de años en Asia y América, y se acepta que existen más de 30 especies, serotipos o genotipos. Se he determinado una estrecha asociación entre especie del virus y especie hospedera. La distribución geográfica de los tipos virales se produce de acuerdo a la distribución del hospedero. Son esféricos y tienen un diámetro de entre 80 y 120 nanómetros. Los virus Hanta son estables a pH entre 7,0 y 9,0. Se inactivan fácilmente a pH 5,0. Son termoestables a temperaturas entre 4 ºC y 20 ºC, pero son termosensibles a los 37 ºC. Se inactivan rápidamente por la luz solar y por la acción de desinfectantes químicos como cloro al 10% y alcohol etílico al 70% (2).Los principales biotipos del virus Hanta son los siguientes3:

• HFRS (Fiebre Hemorrágica con Síndrome Renal): virus Hantaan, Seoul, Puumala y virus Dobrava.

• HPS (Síndrome Cardiopulmonar): virus Andes, virus Sin Nombre o Laguna Negra, virus Mamore, virus Black Creek Canal, virus Bayou, virus Choclovirus / Calabazo Juquitiba.

• HOV (Hanta Orphan Virus): virus Girard Point y Prospect Hill.

Solo desde el siglo pasado se ha podido relacionar con enfermedades, las que se presentan con cuadros clínicos diferentes y de severidad variable. Cabe señalar que los virus HPS tienen una letalidad de alrededor del 40%, mucho mayor que la de los HFRS (0,1% virus Puumala, y entre 5 y 15% virus Hantaan). El centro para el control de enfermedades de USA (CDC) ha clasificado a este virus como patógeno A (1).

La hantavirosis, desde un punto de vista epidemiológico, se considera como una zooantroponosis (4). Se describen tres presentaciones:

1) Rural: como fiebre hemorrágica en el Lejano Oriente y en Europa en forma benigna.

2) Urbana: transmitida por ratas domésticas. En

Corea, China y Japón. Generalmente benigna.

3) En laboratorio: Bélgica, Corea, Gran Bretaña, Francia, y Japón, con fallecimiento en 126 casos. Los virus Hanta causan una infección subclínica e inaparente en ratones de laboratorio, pero que puede infectar al personal de bioterios y a los investigadores asociados.

Existen asociaciones dominantes entre diferentes serotipos de virus Hanta, roedores portadores y enfermedad en el ser humano, de manera que un determinado biotipo de virus afecta preferencialmente a una especie de ratón y causa un síndrome en una determinada geografía. Como ejemplos de lo anterior tenemos:

a) Virus Hantaan, portado por el ratón de campo (Apodemus agrarius), causa fiebre hemorrágica y nefropatía en Corea y China; virus Seoul, portado por el ratón urbano (Rattus norvegicus), causa nefropatía en Asia y Europa; y virus Puumala, del ratón campañol rosado (Clethrionomys glareolus), que produce nefropatía en Europa.

b) Virus Andes: localizado principalmente en el ratón de cola larga (Oligoryzomys longicaudatus), produce síndrome pulmonar, en Sudamérica es el reservorio primario en Chile (Medina et al., 2009); virus Sin Nombre, portado por el ratón venado (Peromyscus maniculatus), causa síndrome pulmonar en California.

c) Virus Prospect Hill, del ratón campañol de vegas (Microtus pennsylvanicus), que aparentemente no causa enfermedad alguna en el hombre, en EE.UU.

Tres especies de roedores portan el virus Hanta en Chile (5): 1) Oligoryzomys longicaudatus, ratón colilarga o de los espinos, que sería el principal portador; 2) Akodon olivaceus o laucha olivácea; y 3) Abrothrix longipillis o lauchón de pelo largo. Otros que ocasionalmente han dado positivos son el Akodon longipilis o ratón pelilargo, y el Phillotis Darwin o ratón orejudo. El ratón que se ha infectado vive con el virus, pero no se enferma. Solo entre el 1% y el 6% de los roedores colilargos portan el hantavirus.

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N Patricio Berríos Etchegaray, Javier Enciso Gutiérrez

En el Perú se ha aislado el virus en Oligoryzomys microtis (6) (Powers et al., 1999).

la ENFErMEdad

La infección es generalmente de carácter endotelial y el receptor es Beta-3 integrina, que regula la permeabilidad vascular y la activación plaquetaria. Los seres humanos se infectan preferentemente en lugares cerrados, poco ventilados y con poca iluminación, con presencia reciente de ratones, al respirar pequeñas gotas o polvo contaminado con saliva, orina o excremento de ratón infectado (aerosoles)(7).

Los virus Hanta poseen una envoltura externa de lípidos con receptores para que el virus pueda infectar, pero esta envoltura es poco resistente a condiciones del ambiente: luz, desecación, detergentes, cloro. En lugares abiertos, el virus puede sobrevivir entre 1 y 2 horas, mientras que en lugares cerrados puede hacerlo durante 24 horas (1).

La transmisión ocurre luego de que el virus se multiplica en forma silente entre 7 y 40 días. Tras este periodo de incubación, aproximadamente un 50% de las personas infectadas desarrolla síntomas graves y los otros contactos pasan desapercibidos. Los principales síntomas son decaimiento intenso, fiebre alta, dolor de cabeza, dolores musculares y de espalda. En ocasiones se presentan dolor de estómago, náuseas, vómitos, diarrea, conjuntivitis y tos seca (7).

El tratamiento de soporte consiste en el traslado precoz a UCI, el manejo hidroeléctrolítico (evitando sobrehidratar), oxígeno, ventilación mecánica, uso de drogas vasoactivas y ECMO, si está disponible.

El antiviral ribavirina no ha demostrado un efecto beneficioso. La aplicación de metilprednisolona, por su parte, modera el curso de la enfermedad, reduce más rápidamente los síntomas y disminuye la insuficiencia renal, pero no presenta efectos sobre la mortalidad.

La prevención consiste básicamente en tomar medidas educativas con el objetivo

de disminuir los factores de riesgo. Existe una vacuna preparada con virus Hantaan completo e inactivado, disponible en Asia desde 1990. Se aplican dos dosis separadas por un mes y un refuerzo. Una vacuna DNA Segmento M completo (virus Hantaan) está en evaluación.

SITUaCIóN dEl vIrUS HaNTa EN aMÉrICa

La presentación del virus Hanta está documentada en Canadá, Estados Unidos, Brasil, Panamá, Paraguay, Bolivia, Uruguay, Argentina y Chile, países en los que se ha detectado el síndrome cardiopulmonar, siendo Argentina y Chile los que más casos han presentado. En Argentina, los primeros casos se presentaron en noviembre de 1994, en el bolsón de Río Negro, con 49 muertos en un total de 200 casos (7).

En Chile, el primer enfermo con sintomatología respiratoria por virus Hanta se presentó en Segundo Corral (X Región), en 1995. El virus produjo tres fallecidos en un total de siete enfermos. Otros casos iniciales ocurrieron en Castro y Coyhaique, en 1996, y en Concepción y Valdivia, en 1997. El porcentaje de letalidad fue de un 37,5%. La seroprevalencia global en Chile es aproximadamente del 1%. La XI Región presenta el mayor riesgo, con una tasa de 9,1 x cada 100 000 habitantes. Se considera que la incidencia es más bien baja (8).

Los últimos casos de hantavirosis que se han presentado en América del Sur corresponden a Chaco, en Paraguay, con nueve casos. En el 2008 se presentaron 30 casos; en el 2009, 3 casos; en el 2010, 1 caso, y en el 2011, 9 casos. En Perú, en la región de Iquitos, se ha detectado el virus Hanta HTN-007 en el 21.4% de roedores (Oligoryzom ys microtis) estudiados mediante la técnica de inmunofluorescencia (IFTA) contra el antígeno del virus Sin Nombre. Todos los sueros de R. rattus resultaron negativos. El virus aislado exhibió un alto grado de homología genética con el virus Río Mamoré, originalmente descrito en la misma especie de roedores en Bolivia. La comparación de las secuencias de los segmentos S y M reveló un 87 y un 85% de identidad, respectivamente. El virus aislado pareció ser una variante


Virus Hanta. un antiguo virus emergente

del Río Mamoré y representó la primera evidencia de hantavirus en el Perú (6).

Sin embargo, un reciente estudio bayesiano de las secuencias del gen GPC y de la proteína N indicó que este virus HTN-007, filogenéticamente, está más estrechamente relacionado al virus Hanta LANV cepa 510B que a otros virus del mismo género (9). Mientras que, en esta misma región, recientemente (julio de 2011), falleció una guía turística afectada por el virus Hanta, siendo este el primer caso de muerte por este virus en el país (10).

CONTrOl Y prEvENCIóN

Si se considera que el riesgo epidemiológico se relaciona con el contacto con roedores infectados, especialmente con la actividad de campesinos que limpian pajares y madrigueras, residentes o visitantes de áreas en las que los roedores han aumentado en número y densidad, las principales medidas sanitarias que se implementen solo serán eficientes si se acompañan con programas de educación tendientes a crear hábitos de limpieza y conciencia ecológica (3).

El riesgo de contraer el virus Hanta es mayor en todas aquellas personas que contactan frecuentemente con roedores, especialmente en áreas muy infestadas, como por ejemplo desratizadores, aplicadores de pesticidas o aquellos que trabajan en subterráneos o entretechos. La posibilidad de contagio es mayor cuando aumenta la población de roedores que diseminan fácilmente el virus en el terreno, y producen el contagio en el hombre al inhalar polvo o consumir agua o alimentos contaminados (8).

Una de las principales medidas de control es la eliminación de roedores de los recintos habitados. En los sectores rurales, se deben establecer medidas de protección contra roedores en bodegas de almacenamiento de granos, forrajes y alimentos para consumo humano o de animales; este control sanitario se realiza estableciendo una franja limpia de malezas o siembras agrícolas de unos 35 metros y eliminando todo elemento que sirva de refugio o madriguera a los roedores, tal como basura, muebles viejos o neumáticos usados. Una desratización

total, además de difícil de lograr, a la larga traería como consecuencia el aumento de ratones, al disminuir los predadores como lechuzas y otros.

En la práctica diaria, se recomienda mantener los alimentos y agua en envases que eviten el contacto con roedores, así como mantener la basura en recipientes tapados, utilizar trampas para ratones en el hogar, aplicar raticidas, usar guantes de goma al limpiar áreas infestadas o al eliminar ratones muertos. Las habitaciones cerradas durante algún tiempo deben ser abiertas para su aireación al menos unos tres días antes de usarlas. La eliminación de basura o desperdicios debe hacerse en bolsas plásticas dobles. Como desinfectante puede utilizarse una solución de cloro al 10% (dos cucharadas soperas en cinco litros de agua) para rociar ratones muertos y materiales de nidos.

Las medidas generales consisten en desratizar escuelas y sectores poblacionales de riesgo, junto a la eliminación de basurales clandestinos. Todo esto debe ir, además, acompañado de campañas educativas en los medios de comunicación.

CaSO SOSpECHOSO dE vIrUS HaNTa

Definición de Caso Sospechoso: Circular 4F/ 45 del 31 de diciembre del 2001 (Ministerio de Salud de Chile): corresponde a aquellos individuos que presentan un cuadro clínico caracterizado por fiebre (temperatura superior a 38,3 °C) con mialgias, cefalea, acompañado o no de síntomas gastrointestinales; que presentan una radiografía de tórax con infiltrado intersticial unilateral o bilateral, o un hemograma con trombocitopenia, recuento de blancos con desviación a la izquierda, inmunoblastos > 10% (linfocitos atípicos) o hemoconcentración, y que, además, tengan el antecedente de situaciones de riesgo o exposición a roedores silvestres en las seis semanas previas al inicio de los síntomas. También aquellas personas que presentan un cuadro de distress respiratorio (SDRA) sin causa que lo explique, o que hayan tenido un cuadro respiratorio inexplicable, con resultado de muerte y autopsia que demuestra edema pulmonar (3).

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N Patricio Berríos Etchegaray, Javier Enciso Gutiérrez


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10. http://feelsynapsis.com/pg/blog/read/114304/primer-caso-de-muerte-por-hantavirus-en-per

Año Casos Mortalidad %

1993 5 - - 1995-96 4 2 50 19970 30 18 60 1998 35 20 57 1999 26 11 42 2000 28 12 43 2001 81 30 37 2002 65 19 29 2003 60 18 30 2004 56 18 32 2005 67 21 31 2006 39 17 44 2007 44 15 34 2008 41 8 20 2009 35 10 29 2010 61 22 36 2011 38 14 37

tabla 1. casOs de virus hanta en chile, pOr añOs

recibidO: 19/07/2011aceptadO: 03/08/2011

javier encisO



rESUMEN

En este artículo bosquejaremos los hitos más importantes de la reflexión filosófica en torno a la ciencia, desde el siglo IV a. C. hasta el siglo XVIII d. C. Las posturas de Aristóteles, Galileo Galilei, Francis Bacon, René Descartes y David Hume serán analizadas en lo que respecta a la problemática de la concepción de la ciencia. En este recorrido nos detendremos en los presupuestos esenciales de la concepción antigua de la ciencia, teniendo como eje a Aristóteles; los presupuestos de la concepción moderna de la ciencia, teniendo como eje principal a Galileo Galilei; y el problema de la inducción planteado por el filósofo empirista David Hume. Esta primera entrega proporcionará una introducción importante para la reflexión en torno a las teorías epistemológicas contemporáneas, que serán analizadas en una segunda entrega.

Palabras clave: epistemología, Aristóteles, Galileo Galilei, David Hume

aBSTraCT

This article outlines the most important milestones of philosophical reflection about science, from the 4th century BC to the 18th century AD. The positions of Aristotle, Galileo Galilei, Francis Bacon, Rene Descartes and David Hume will be analyzed in relation to the problem of the conception of science. On this route, we will make a stop at the premise of the ancient conception of science with the axis of Aristotle; the premises of the modern conception of science with the main axis of Galileo

REFLEXIONES EN TORNO A LA CIENCIAREFLECTIONS ABOUT THE SCIENCE

José Eduardo Rosales Trabuco1

Galilei; and the problem of induction proposed by the empiricist philosopher David Hume. This first installment will provide an important introduction for reflection on contemporary epistemological theories, which will be discussed in a sequel.

Keywords: Epistemology, Aristotle, Galileo Galilei, David Hume

INTrOdUCCIóN

El desarrollo de reflexiones en el campo de la filosofía de la ciencia ha ido en aumento desde las primeras décadas del siglo pasado. En la actualidad, la investigación en este ámbito involucra a gran cantidad de filósofos. Este paulatino crecimiento se debe al avance o mutación significativa de las ciencias en los últimos siglos que conllevó a la formulación de diversos planteamientos que intentaron e intentan asir lo sustancial de la actividad científica. Ahora bien, la reflexión en torno a la ciencia no es exclusiva del siglo XX, sino que recorre toda la historia de la filosofía. En ese sentido, creemos importante, para ubicar las reflexiones contemporáneas, hacer un recuento de los hitos principales de la reflexión filosófica sobre la ciencia a lo largo de la historia.

La ciencia antigua

La palabra ‘epistemología’ proviene del griego antiguo episteme, que se traduce comúnmente como ‘saber’ o ‘conocer’. En su sistema filosófico, Platón diferenciaba claramente el conocimiento (episteme) de la opinión o creencia (doxa). Cuando los antiguos griegos hablaban de conocimiento se referían al conocimiento racional,

1Universidad Científica del Sur

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N José Eduardo Rosales Trabuco

pues consideraban que era el único que podía ser verdadero; esto mostraba su desdén por lo práctico. La ciencia o saber para los griegos estaba desconectada de la técnica: la técnica está vinculada a los oficios (a la experiencia acumulada); en cambio, la ciencia, consideraban ellos, pertenece al ámbito de las razones, es asunto de razonamiento, algo abstracto y teórico. Por ello, la ciencia antigua no estaba vinculada a la práctica de la experimentación, esto explica también el hecho de que sus mayores aportes tuvieran lugar en las matemáticas. Esta ciencia clásica opera con sistemas en base a axiomas. Así, en el ámbito de la Física podemos mencionar a Arquímedes; en la Aritmética, a Pitágoras; en la Lógica, a Aristóteles; y en la Geometría, a Euclides.

Aristóteles es un hito en esta concepción antigua de la ciencia. Nos interesa centrarnos en sus consideraciones en torno a la ciencia física (2). Según Aristóteles, los entes son de distinta índole dadas sus causas o principios. El análisis aristotélico, en el campo de lo físico, se centra en los entes que son por naturaleza. La definición aristotélica de naturaleza se hace en términos de movimiento: la physis es el principio de movimiento que tienen en sí mismos estos entes por naturaleza entendidos como sustancias. Como paso previo para explicar los usos del término physis debemos describir los planteamientos aristotélicos en relación con la ciencia y el cosmos, que involucran nociones como las de principio y causa, importantes para entender el alcance de la investigación de Aristóteles. Además, una comprensión adecuada del planteamiento aristotélico implica entender el teleologismo inherente a su teoría.

Es frecuente encontrar diversos intentos de desmerecer la obra aristotélica en este campo. Estas interpretaciones, que ven en Aristóteles un pensamiento contra científico (anticientífico) o, en el mejor de los casos, un ejemplo de rémora para el avance científico, dejan de lado una

comprensión desde el propio horizonte del pensamiento aristotélico, desde su “marco de referencia” u “horizonte de expectativas” al presuponer que una teoría es rescatable si y solo si anticipa respuestas plausibles a interrogantes contemporáneas.

El objetivo de Aristóteles en el ámbito de la physis es el estudio de los principios de los entes naturales. Este estudio constituye una ciencia, dado que implica el conocimiento de los principios de las cosas. Nuestro acercamiento a los planteamientos sobre la physis debe partir por delimitar el objetivo que se propone Aristóteles en toda investigación. Las actividades intelectuales están dirigidas en diversas direcciones y son entendidas como virtudes intelectuales, así tenemos: el arte, la ciencia, la prudencia, la sabiduría y el intelecto. La ciencia como actividad intelectual se dirige a lo necesario, es decir, a lo que no puede ser de otra manera. Lo necesario se vincula con lo eterno, vale decir, con lo ingénito e indestructible; por ello señala Aristóteles: “cuando uno está convencido de algo y le son conocidos los principios, sabe científicamente” (5). En relación con lo anterior podemos leer en la obra aristotélica: “Creemos que sabemos una cosa sin más, pero no del modo sofístico, accidental, cuando creemos conocer la causa por la que la cosa es, que es la causa de aquella cosa y que no cabe que sea de otra manera” (6). Ahora podemos comprender el carácter de necesidad que exige Aristóteles para el conocimiento científico y que lo lleva a señalar de entrada en la Física (1) que la ciencia es el conocimiento de los principios de las cosas.

Respecto de la ciencia aristotélica cabe hacer una aclaración. Algunos autores, al tratar temas de historia de la ciencia, han considerado que la ciencia aristotélica es de carácter puramente empirista. Sin embargo, no debemos perder de vista que la ciencia aristotélica indaga por lo necesario y lo eterno; por ello, es principalmente esencialista y deductiva.

En conclusión, el indagar científico aristotélico no se fundamentó


Reflexiones en torno a la ciencia

únicamente en la observación, sino en un tipo de intelección. Este alejamiento de la observación se debe al carácter intelectualista de la doctrina aristotélica, incapaz de conectar lo teórico con la experiencia sensible (7).

El intelectualismo y el esencialismo se aprecian, en mayor medida, al señalar los presupuestos de la investigación que nos permitirán conocer la manera como Aristóteles abordó una clase de entes (los “entes naturales”) teniendo en cuenta que poseen una esencia que los diferencia (recordemos los estratos de género y especie) y que se puede asir intelectualmente y comunicar por medio del lenguaje (en un enunciado).

Con el sistema formulado por Aristóteles, asistimos a la primera tentativa de conseguir una teoría unificada de la naturaleza y el cosmos, una tentativa recurrente a lo largo de la historia de la ciencia. Aunque en el caso de Aristóteles no podemos trazar una distinción o demarcación estricta entre lo filosófico y lo científico. La teoría aristotélica afirma un cosmos único y finito, donde materia y espacio son inseparables y donde se niega el vacío. En un universo finito, cerrado, esférico, estratificado y ontológicamente diferenciado (ordenado y jerarquizado), Aristóteles coloca la Tierra inmóvil en el centro; luego, superpone nueve esferas transparentes y concéntricas a las que están respectivamente unidos los planetas. Todo lo que se encuentra en el interior de la superficie en la que se halla la Luna (la región sublunar) está sometida a los “defectos” asociados al cambio. Por el contrario, más allá de la Luna (en la región supralunar) solo se encuentra lo inalterable y el no-devenir, lo constituido únicamente por un quinto elemento: el éter. En otras palabras: “abajo” yace lo temporal y arriba lo “eterno”. La región sublunar está totalmente ocupada por los cuatro elementos: tierra, agua, aire y fuego. Si se asumen las leyes aristotélicas del movimiento y la ausencia de empujes o atracciones exteriores, dichos elementos se ordenarían (perfectamente) en una serie de caparazones concéntricos. De aquí

surge la noción de lugar natural: la tierra, el elemento más pesado, se encontraría naturalmente en la esfera que constituyese el centro geométrico del universo y que, como se puede deducir, corresponde al centro de la Tierra; el agua, elemento menos pesado que la tierra, constituiría una envoltura esférica alrededor de la región central ocupada por la tierra; el fuego, el más ligero de los elementos, se elevaría naturalmente (espontáneamente) para constituir su propia esfera justo debajo de la Luna; y, por último, el aire completaría la estructura formando una esfera que llenaría el espacio existente entre el agua y el fuego. Una vez alcanzadas dichas posiciones, los elementos permanecerían (en una situación solo hipotética y perfecta) en reposo manteniendo su pureza.

El cosmos aristotélico no está regido por el azar y la coincidencia; por el contrario, es un mundo ordenado y jerarquizado en el que los entes se desarrollan hacia fines determinados por sus propias naturalezas. Este cosmos implica un orden lógico afín al pensamiento, una estructura inteligible de la realidad. El orden queda esbozado del siguiente modo: “Nada hay desordenado en la naturaleza y en lo que sucede según la naturaleza, pues la naturaleza es causa de todo lo ordenado” (1). De allí que el principio guía de la concepción aristotélica de la physis fuese de carácter teleológico: todo cuanto ocurre (en tanto ordenado lógicamente) está encaminado a cierto telos (finalidad).

Aristóteles construyó toda una teoría dinámica sobre el supuesto de una naturaleza inteligente que funciona con un designio deliberado, con lo que refuta a aquellos filósofos que consideraban a los fenómenos naturales como producto de leyes mecánicas (los atomistas, por ejemplo).

La ciencia moderna

La concepción aristotélica perduró por muchos siglos y durante toda la Edad Media. El cambio hacia la ciencia moderna se da paulatinamente a partir del Renacimiento. La ciencia moderna

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busca la confirmación de sus hipótesis en la experimentación, es decir, el análisis controlado de los procesos naturales a través de los experimentos. Además, la ciencia moderna utiliza el lenguaje matemático para expresar cuantitativamente las leyes y teorías. Esto permite interpretar el saber como un medio para dominar la naturaleza y ponerla al servicio del hombre.

Un personaje importante en esta ciencia moderna es Galileo Galilei (1564-1642). A él debemos la creación de la nueva metodología científica hipotética y deductiva. (9) Entre los presupuestos del método destacan la pérdida de valor de la autoridad de los antiguos; la concepción de la simplicidad de la naturaleza (o principio de economía según el cual no debe multiplicarse sin necesidad las cosas, sino que debemos servirnos de los medios; y la existencia en la naturaleza de un orden natural y necesario, formulado en términos matemáticos. En suma, la naturaleza posee una estructura inteligible de orden matemático que puede ser descubierta por la razón (10). Como apreciamos, a partir de Galileo Galilei la ciencia abandona definitivamente la consideración de las esencias para concentrarse en la descripción y comprensión de los fenómenos.

Galileo Galilei no prescinde de la experiencia, sino que su método consiste en una coordinación de experiencias sensibles y demostraciones (matemáticas) necesarias. La experiencia es el punto de partida, pero no la experiencia vulgar, sino la experiencia analizada por la razón, reducida a elementos fundamentales e interpretada matemáticamente. Del mismo modo, los experimentos son realizados bajo la dirección de la razón; además, se emplean aparatos de medición.

Al respecto, es preciso recordar que los antiguos griegos tenían una maravillosa comprensión de la estática, pero no tenían una buena concepción de las leyes que gobiernan los cuerpos que se mueven. Lo que les faltaba era una buena teoría de

la dinámica, esto es, una teoría del modo en que la naturaleza controla el cambio de posición de los cuerpos de un instante al siguiente. Parte de las razones para la falta de una buena teoría dinámica era la ausencia de un medio suficientemente preciso para medir el tiempo, es decir, de un reloj razonablemente bueno. Por ello, la observación de Galileo Galileo, en 1583, de que un péndulo podía ser una forma confiable de medir el tiempo tuvo para el desarrollo de la ciencia moderna una enorme importancia (11).

El nuevo método científico de Galilei puede ser divido en tres etapas. En primer lugar, la resolución o reducción, en la que se analiza el fenómeno a estudiar y se lo reduce a sus propiedades esenciales, es decir, se opera una especie de abstracción en el fenómeno dado. En segundo lugar, la composición, cuando se construye una “suposición hipotética” de carácter matemático que enlaza los elementos a los que ha sido reducido el fenómeno para, a continuación, deducir matemáticamente las consecuencias de esta hipótesis. Por último, la resolución, en la cual se pone a prueba la hipótesis realizando experimentos que comprueben la veracidad de las consecuencias deducidas de tal hipótesis. Lo que se comprueba experimentalmente no es la hipótesis, sino sus consecuencias; para esto se construyen experimentos ad hoc.

La postura de Galileo Galilei se encuentra equidistante entre el empirismo inductivo de Francis Bacon (1561-1626) y el racionalismo deductivo de René Descartes (1596-1650). Estas son las dos tendencias que marcan las reflexiones gnoseológicas en la Edad Moderna. Para Francis Bacon, la ciencia debe tener un objetivo práctico: transformar la naturaleza en beneficio del hombre, lo cual supone conocerla bien. Por tanto, el método que propone tiene una finalidad práctica y teórica. No obstante, Bacon ignoró la ciencia de su época y creó un método inductivo que nadie llegó a utilizar. Su mérito consiste en haber luchado por la aplicación de la ciencia en el desarrollo de la técnica y el bienestar



de la Humanidad.

El proyecto fundamental de Bacon fue, como señaló en su Novum Organum (12), aquel nuevo método propuesto para reemplazar el método deductivo aristotélico. Su fin era establecer y extender el dominio de la raza humana sobre el universo, lo cual depende tanto de las artes como de las ciencias, si se tiene en cuenta que no podemos dominar la naturaleza sino obedeciéndola.

René Descartes es el máximo representante del racionalismo. Según la postura racionalista, el conocimiento solo se funda en la razón y esta es la única manera válida de conocer. Descartes planteó cuatro reglas para su método. En primer lugar, la regla de evidencia implica nunca acoger nada como verdadero si antes no se conoce que lo es con evidencia; esto evidente, claro, distinto e indudable se logra mediante el acto intelectual de la intuición. La intuición se autofundamenta y autojustifica, pues es un concepto de la mente pura y atenta, que nace de la sola luz de la razón.

En segundo lugar, la regla de análisis implica dividir todo problema que se someta a estudio en tantas partes como sea posible y necesario para resolverlo mejor. Se trata de una fase preparatoria esencial, puesto que para la evidencia es necesaria la simplicidad que se logra mediante la descomposición de lo complejo. En tercer lugar, la regla de síntesis implica conducir en orden los pensamientos, comenzando por los objetos más simples y fáciles de conocer, para ascender poco a poco hasta el conocimiento de los más complejos, en la suposición de que hay un orden. Se busca a través de la síntesis recomponer los elementos que ya no se pueden descomponer; así se reconstruye un orden, creando una cadena de razonamientos.

Por último, la regla de enumeración y revisión implica efectuar en todas partes enumeraciones tan complejas y revisiones tan generales que se esté

seguro de no haber omitido nada. Se trata de impedir toda precipitación: la enumeración controla el análisis y la revisión, la síntesis (13).

El problema de la inducción

Tanto la postura racionalista como la empirista tuvieron sendos desarrollos en la Europa continental y la insular, respectivamente. Entre los más importantes empiristas podemos mencionar a David Hume. En relación a este último, nos detendremos en el problema de la inducción, puesto que constituirá un tema de amplia reflexión para los epistemólogos del siglo XX.

A lo largo de la historia de la ciencia se ha aceptado la existencia de dos procesos del pensar. Estos procesos fueron analizados, por ejemplo, por Aristóteles (6). A menudo se distinguen dos problemas en lo referente a la inducción: uno psicológico, que interroga por el porqué de la creencia en las inferencias inductivas; y otro, el problema lógico, que perseguiría una justificación lógica de aquella creencia en la inducción.

Al problema de la inducción también se le conoce como problema de Hume. Si bien el análisis de este filósofo empirista estuvo enfocado básicamente al problema de la causalidad, las conclusiones obtenidas por él en este campo se pueden generalizar a la inducción en general. Para entender su pensamiento sobre la causalidad se ha de considerar que, según Hume, lo que percibimos son nuestros propios estados mentales, y estos son de dos clases, a saber, las impresiones (fenómenos psíquicos actuales) y las ideas (fenómenos psíquicos reproducidos). Tenemos impresiones que son producidas por la experiencia sensorial, pero tenemos muchas más ideas; ahora bien, la distinción entre estas no es posible mediante la referencia a entes externos. La última y verdadera realidad son las impresiones (14).

La idea de causalidad se remonta a la filosofía aristotélica y su teoría de las cuatro causas: material, formal,

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final y eficiente. Es esta última, la causa eficiente, la que cobra mayor importancia en la ciencia moderna. De esta causa es de la que trata el principio de causalidad, el cual afirma que todo lo que sucede presupone algo como su causa, a la cual sigue como su efecto. La conexión entre causa y efecto está representada regularmente de modo que causas iguales en todo tiempo y en todo lugar deben provocar efectos iguales (15). La creencia en la validez de este principio será rebatida por Hume: cuando decimos que tal causa produce tal efecto, se pregunta, ¿qué impresión corresponde a ese producir el efecto de la causa? La respuesta que él mismo propone es la siguiente: ninguna impresión corresponde a esa idea, la idea de causalidad es otra ficción como lo es también la idea de “yo”, la de “existencia” y la de “substancia”, propias de la filosofía antigua y medieval (14).

La causalidad nos permitiría, teniendo como referentes a los hechos, ir más allá de los datos proporcionados por la memoria y los sentidos, al establecer una relación causa-efecto. El conocimiento de dicha relación no se alcanza por procedimientos a priori (antes de la experiencia), pues si todo efecto es diferente de su causa no podría ser descubierto el efecto en su causa. Entonces, al parecer, el conocimiento de dicha relación debe surgir de la experiencia. Ahora bien, para que se origine en la experiencia, deberíamos encontrar la impresión correspondiente. Si relacionamos el problema inductivo con el de la causalidad, podemos apreciar que de nuestra experiencia sensible no se sigue ninguna conexión necesaria, así se halla observado dicha relación millones de veces. Como señaló Hume: “La proposición el sol no saldrá mañana no es menos inteligible y no implica más contradicción que la proposición el sol saldrá mañana. Vano sería, por tanto, nuestro intento de demostrar su falsedad, pues, si fuera falsa, implicaría una contradicción” (14). De lo anterior se concluye que lo contrario de un hecho, de un fenómeno, siempre es posible y ninguna de nuestras predicciones acerca de la realidad puede ir acompañada de plena

o absoluta certeza.

Al recapitular lo expresado por Hume, podemos establecer que, desde su perspectiva, todos nuestros razonamientos acerca de los hechos se establecen bajo una relación de causa y efecto. Además, que el fundamento de nuestros razonamientos y conclusiones acerca de esta relación tendría que ser la experiencia. Pero, en última instancia, las conclusiones de la experiencia no se fundan en la razón. Nuestros razonamientos en torno de la experiencia se basan en la similitud de los objetos naturales, y el fundamento para este razonamiento no reside ni la experiencia ni en la razón. Por tanto, el principio que es la gran guía de la vida humana es el hábito o costumbre.

Este es el denominado escepticismo sobre la inducción planteado por Hume: nunca tendremos seguridad en nuestras expectativas sobre el futuro, incluidas las leyes de la ciencia. Hume brinda una salida práctica, pues si dejamos a un lado la crítica filosófica, nuestra naturaleza, la costumbre o el hábito, acude en nuestro auxilio, haciéndonos creer en la uniformidad del mundo (16).

De esta manera, Hume soluciona el problema psicológico de la inducción, pero el problema lógico de la inducción, vale decir, las razones, las justificaciones para la creencia en la inducción, caen en la irracionalidad del hábito o costumbre.

CONSIdEraCIONES FINalES

Se podría decir que pensamos inductivamente tanto como lo hacemos de forma deductiva, dado que estos dos procedimientos serían la base de lo que denominamos razón. La inducción nos permite sobrevivir, ubicarnos en el espacio y el tiempo, y poder predecir acontecimientos futuros, actuar por analogía en situaciones semejantes o parecidas. Pero debemos considerar que el proceder inductivo es falible. La ciencia, el producto más elaborado y útil de nuestra razón, se caracteriza, en parte, por utilizar el método deductivo, sobre todo en las ciencias formales, y,




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además, por la utilización del método inductivo en las ciencias fácticas o empíricas (17).

La tarea principal de la ciencia es explicar los acontecimientos, y la manera más propia para este fin es encontrar las regularidades que gobiernan el mundo. Dejando de lado averiguar la existencia o inexistencia de dichas regularidades, podemos afirmar que empleamos inferencias que van de lo observado a lo no observado. El problema de la inducción tendría

una solución si no consideramos la experiencia como la única base que propicia el conocimiento, pues, al estar supeditados a ella, las soluciones son contingentes y no necesarias. Esta vía es la que exploraron Immanuel Kant y, más adelante, en el siglo XX, Karl Popper. Lo que sí va quedando claro es que la más adecuada expresión del conocimiento científico es aquella que lo concibe como una aproximación falible hacia la verdad.

recepción: 28/06/2011aceptación: 18/07/2011

jOsé eduardO rOsales trabucO


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ANÁLISIS DE CONSISTENCIA INTERNA DEL INVENTARIO DE RESOLUCIÓN DE PROBLEMAS SOCIALES

INTERNAL CONSISTENCY OF THE SOCIAL PROBLEM SOLVING INVENTORY

Alexandra Delboy Zenteno1, Carolina Black Tam2, César Merino Soto3

rESUMEN

El estudio mide el grado de consistencia interna del Inventario de Resolución de Problemas Sociales-Revisado (IRPS-R), construido según el modelo teórico cognitivo de D’Zurilla y Nezu. Es aplicado a personas mayores de 13 años para detectar y medir la forma individual de enfrentar y resolver los problemas que se presentan en la vida diaria y que causan preocupación y exigen una respuesta que inicialmente se desconoce. Este proceso tiene como objetivo final la adaptación del individuo al entorno, por lo cual es importante contar con una herramienta sólida de evaluación de las capacidades y deficiencias del sujeto en la tarea. El inventario consta de 52 ítems divididos en 5 subescalas: Orientación positiva al problema (OPP), Orientación negativa al problema (ONP), Resolución racional al problema (RRP), Estilo descuidado impulsivo (EDI) y Estilo evitativo (EE).

Se evaluó a un total de 372 estudiantes de primer ciclo (n=57,3% mujeres) de 12 facultades, organizadas en 3 grupos, según el campo de estudio, de una universidad privada de Lima Metropolitana. Se utilizó el alfa de Cronbach para medir la confiabilidad puntual y por intervalo de la muestra total y de las subescalas según las

variables sexo y grupo de facultad, además de obtener la significancia estadística con técnicas basadas en la distribución de Chi cuadrado. Se obtuvieron resultados satisfactorios en la consistencia interna total (α=0,872) y en la muestra segmentada por sexo y grupos de facultad, sin hallar diferencias significativas al comparar los grupos. Al medir y cotejar por escalas, se encontraron diferencias en los niveles de alfa, siendo aún aceptables y no significativas. Se concluye que el IRPS-R tiene buenas propiedades psicométricas al ser aplicado en la totalidad de sus ítems, pues posee un alto grado de confiabilidad, el cual no se altera por las variables demográficas.

Palabras clave: confiabilidad, consistencia interna, universitarios, inventario de resolución de problemas sociales-revisado, solución de problemas sociales, psicometría

aBSTraCT

This study measures the reliability of the Social Problem Solving Inventory-Revised (SPSI-R), constructed according to the theoretical model of D’Zurilla and Nezu. This inventory is applied to people over 13 years, in order to detect and measure the individual way to confront and solve

1Estudiante de Psicología en la Universidad Científica del Sur. Email: [email protected] de de Psicología en la Universidad Científica del Sur. Email: [email protected] en la Facultad de Psicología de la la Universidad Científica del Sur. Email: [email protected].

C a r Ta S al EdITOr


Análisis de consistencia interna del inventario de resolución de problemas sociales

daily problems that cause concern and require a response. The aim of this process is the individual’s adaptation to the environment, so it is important to have a solid tool to evaluate the strengths and weaknesses of the subject in the task. It consists of 52 items divided into 5 subscales: Positive Problem Orientation (PPO), Negative Problem Orientation (NPO), Rational Problem Solving (RPS), Impulsivity/Carelessness Style (ICS) and Avoidance Style (ES). It was administrated at 372 first-semester students (n=57,26% women) from 12 schools, organized into 3 groups according to field of study, in a private university in Lima. It was applied the Cronbach’s alpha to calculate the Coefficient of Reliability and the total interval of the sample. In order to estimate the Statistical Significance it was used coefficients based on Chi2 distribution. The results were found satisfactory in terms of reliability from the inventory (α = 0,872), in the sample segmented by gender and school; finding no significant differences between groups. By measuring scales, were found differences in levels of alpha, while still acceptable and not significant. In conclusion, the SPSI-R has good psychometric properties when all the subscales are applied, because it has a high degree of reliability, which is not affected by demographic variables.

Keywords: reliability, university, Social Problem Solving Inventory-Revised, social problem solving, psychometrics

La eficacia en el proceso de la toma de decisiones al afrontar un problema es fundamental para el curso de la vida diaria. Resulta de gran importancia ser conscientes de la forma individual de resolver problemas, ya que, dependiendo de la orientación y resultados de este, reconocemos sensaciones de bienestar o malestar, la percepción de autoeficacia e, incluso, la disposición ante dificultades futuras.

El modelo teórico planteado por Nezu y D’Zurilla (1982) define un problema como un evento específico encontrado

en la vida diaria que causa preocupación y exige una respuesta, la cual no se conoce al inicio. Y una solución como el modo de afrontamiento específico o un patrón de respuesta dentro del proceso de resolución de un problema. Una solución efectiva es definida por el logro de las metas a las que apuntaba dicha resolución, mientras se maximizan las consecuencias positivas, las cuales implican efectos a nivel interpersonal e interpersonal a corto y largo plazo.

El modelo plantea que la resolución de problemas sociales, entendido como el proceso que ocurre en el ambiente o mundo real por el cual las personas identifican o descubren soluciones adaptativas o efectivas en su vida diaria. Esta definición es concebida como una actividad consciente, que se realice con esfuerzo y tenga un propósito. Además, es necesario que se tenga: a) Orientación al problema, que incluye motivación general y percepción subjetiva de este; y b) Destrezas específicas en el proceso de resolución propiamente dicho como definición del problema, generación de soluciones alternativas, toma de decisiones y verificación de la solución luego de ponerla en práctica.

Las dimensiones de la orientación, referidas a la disposición de la persona ante el problema, se distinguen en dos aspectos motivacionales del sujeto: Orientación positiva al problema (OPP), que constituye una disposición cognitiva que conduce a la tendencia general de concebir los problemas como un desafío soluble que involucra tiempo, esfuerzo y persistencia, además de creer que se posee la suficiente capacidad para resolverlo con éxito; y Orientación negativa al problema (ONP), que es la tendencia cognitivo-emocional que lleva a percibir los problemas como una amenaza sin solución, a dudar de las habilidades propias para superarlo y a generar sentimientos de molestia y frustración.

Por otro lado, las destrezas o estilos de solución de problemas son de tres tipos. El primero es la Resolución racional al

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TOR Alexandra Delboy Zenteno, Carolina Black Tam, César Merino Soto

problema (RRP), un estilo adaptativo que implica la aplicación deliberada y sistemática de las habilidades, lo que acerca más al éxito al individuo. Contiene cuatro subcomponentes: Formulación y definición del problema (FDP), Generación de soluciones alternativas (GSA), Toma de decisiones (TD) e Implementación y verificación de soluciones (IVS). Otro estilo es el Descuidado/impulsivo (EDI), que plantea un aspecto disfuncional en la solución de problemas y consiste en realizar intentos apresurados por resolverlos, pero de forma asistemática, sin una planificación adecuada y generalmente incompletos. Finalmente, el Estilo evitativo (EE) se caracteriza por posponer o evitar resolver el problema, pues desarrolla una actitud pasiva, a la espera de que se resuelvan solos, o vuelca la responsabilidad en los demás, lo que refuerza la dependencia. (D’Zurilla, Nezu & Maydeu-Olivares, 1999).

El Inventario de Resolución de Problemas Sociales-Revisado (IRPS-R) es un instrumento de autorreporte diseñado para determinar en qué medida las personas poseen mencionados estilos de afrontamiento. Según sus autores, es el único inventario que evalúa la resolución de problemas sociales mediante un modelo teórico y que está validado empíricamente. Las investigaciones posteriores señalan que los criterios evaluados se relacionan significativamente con el locus de control interno, estrés psicológico, frecuencia de problemas personales, severidad de síntomas psicológicos y las calificaciones académicas en estudiantes universitarios (D’Zurilla & Nezu, 1990; D’Zurilla & Sheedy, 1991).

Otras investigaciones señalan que la variable Inestabilidad emocional se asociaría con las dimensiones disfuncionales de la resolución de problemas (ONP, EDI y EE) y con las creencias de indefensión acerca del cambio (Calvete & Cardeñoso, 2000). Estos datos coinciden con estudios previos en los que se había encontrado correlaciones significativas entre diversos indicadores de irracionalidad

y neuroticismo (Barbenza et al., 1989; Koopsman et al., 1994).

Hay estudios que confirman resultados satisfactorios de confiabilidad de este instrumento. En cuanto a las propiedades psicométricas, se encontró que, en investigaciones anteriores, el instrumento obtuvo una confiabilidad α = 0,78 en población anglosajona y α = 0,68 en una población española; ambas muestras conformadas por estudiantes universitarios. En la misma línea, se halló también que las subdimensiones tienen un nivel satisfactorio de confiabilidad, a excepción de la sub-escala OPP que obtuvo un α de nivel moderado en una muestra de habla hispana (Maydeu-Olivares, Rodríguez-Fornells, Gómez-Benito & D’Zurilla, 1999). Investigaciones respaldan niveles adecuados de consistencia en una muestra de adolescentes sin patologías y adolescentes impacientes, y demuestran que existen diferencias significativas en la resolución de problemas entre ambos grupos (Sadowski, Moore, & Kelley; 1994).

Para aproximarnos a la confiabilidad de una escala se debe conocer la consistencia interna y los factores que integran la misma en una población determinada de personas. Esta propiedad es una medida de la reproducibilidad y precisión de un resultado (puntaje de un test psicológico), y no es una cualidad intrínseca del instrumento, sino que depende del patrón de respuestas propio de quienes responden y, en consecuencia, varía de acuerdo con el grupo objeto de estudio (Oviedo & Campo-Arias, 2005). En otras palabras, es la diferencia entre el “valor verdadero” (teórico) y una conducta o acción observada realmente, lo que constituiría el Error de Medición (EM), según la precisión del instrumento.

El objetivo del presente estudio es evaluar la consistencia interna del in-strumento IRPS-R, obteniendo la confi-abilidad con el coeficiente alpha (Cron-bach, 1951) y observando su posible variación de acuerdo a determinadas variables demográficas.



MÉTOdO

Participantes. La muestra estuvo conformada por 372 estudiantes universitarios (n = 53,3% mujeres) de primer ciclo, procedentes de una universidad privada de Lima Metropolitana, cuyas edades fluctuaban entre 15 y 25 años. Los participantes pertenecían a 12 especialidades distintas, las cuales fueron organizadas en 3 grupos según campo de estudio: ciencias de la salud (grupo 1), carreras relacionadas a negocios (grupo 2) y ciencias sociales (grupo 3).

Instrumento. Se utilizó el Inventario de Resolución de Problemas Sociales-Revisado o IRPS-R (Social Problem-Solving Inventory-R: SPSI-R, D’Zurilla, Nezu & Maydeu-Olivares; 1997), en la versión traducida y adaptada al español. Creado bajo el modelo teórico de Nezu y D’Zurilla (1982), se trata de una prueba psicométrica no cognitiva de ejecución típica y potencia, de formato lápiz y papel. Puede ser utilizado tanto en el ámbito clínico como para propósitos de investigación. Es interpretado de manera normativa, y puede ser administrado de forma individual o grupal, a modo de autorreporte. Consta de 52 afirmaciones (ítems) organizadas en 5 escalas: Orientación positiva al problema (OPP), Orientación negativa al problema (ONP), Estilo descuidado-impulsivo (EDI), Estilo evitativo (EE) y Resolución racional al problema (RRP), que cuenta a su vez con 4 subescalas: Formulación y definición del problema (FDP), Generación de soluciones alternativas (GSA), Toma de decisiones (TD) e Implementación y verificación de soluciones (IVS).

Las conductas a evaluar están presentadas en proposiciones que se responden según una escala ordinal de cinco niveles, y cada afirmación se califica acuerdo a la frecuencia con que ocurre el comportamiento descrito, siendo el puntaje mínimo 1 para la menor frecuencia y 5 para la máxima. Pueden obtenerse puntajes totales como por escalas a través de

una suma simple del puntaje de los ítems correspondientes. Los primeros resultados de la adaptación del IRPS-R en el Perú poseen un alto nivel de validez y confiabilidad (Delboy, Black, Pacheco-Gamboa, Dávila; Araujo & Merino; 2009).

Procedimiento. Se aplicó el inventario de forma voluntaria y colectiva en el horario regular de clases, en las aulas de la universidad a la que pertenecían los participantes. La aplicación duró aproximadamente tres meses. Se solicitó la participación voluntaria y se mantuvieron las condiciones de aplicación estandarizada. El análisis de los datos se hizo con el paquete estadístico para ciencias sociales SPSS versión 18.0 y con los programas ScoreRel CI (Barnette, 2005) y Alphatest (Lautenschlager & Meade, 2008; Merino & Lautenschlager, 2003), los cuales operan sobre el coeficiente α (Cronbach, 1951). El primero se usó para obtener los intervalos de confianza; el segundo, para aplicar un enfoque de prueba de hipótesis para las diferencias entre-grupos e intra-grupos en los coeficientes. Ambos procedimientos usan la teoría asintótica de muestreo del coeficiente α (Feldt, 1965, 1969), y las pruebas estadísticas para las diferencias usan la distribución x2.

rESUlTadOS

Excepto el puntaje OPP, el resto de los puntajes exhibió confiabilidades mayores o iguales a 0,70 (Tabla 2). Los puntajes de OPP mostraron menor consistencia que los demás, incluso comparados con aquellos que tuvieron el mismo número de ítems (los puntajes componentes de la escala RPP, en que cada uno tenía también cinco ítems). En la Tabla 2 también se observó un patrón reconocible en los coeficientes de confiabilidad obtenidos: los estilos de solución de problemas que forman parte de las estrategias constructivas para resolver los problemas (RPP) mostraron las confiabilidades más elevadas (entre 0,75 y 0,92), comparados con los estilos

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disfuncionales (puntajes EDI y EE). Los intervalos de confianza indican la precisión de estos cálculos. Excepto los puntajes OPP, EDI y EE, el resto de las subescalas muestran que sus confiabilidades pueden considerarse que han superado el criterio mínimo (>= 0,70), lo que hace que puedan ser interpretados confiablemente.

Al comparar los coeficientes de consistencia entre varones y mujeres (Tabla 3), y luego de aplicar la corrección Bonferroni al valor nominal de significancia estadística (0,05/10 = 0,005), se halló que ninguna de las diferencias fue estadísticamente significativa. Hay tendencia a que los coeficientes de mujeres en la muestra sean ligeramente mayores que los de la muestra masculina, pero estas diferencias pueden considerarse insignificantes para propósitos prácticos. Los resultados de la comparación entre facultades (Tabla 4) también exhiben diferencias que se consideran pequeñas y estadísticamente no significativas.

dISCUSIóN

El presente estudio analizó la consistencia interna de los puntajes de una medida de habilidades de solución de problemas sociales. En general, los resultados pueden ser considerados satisfactorios, pero ligeramente bajos en comparación con los estudios originales americanos (D’Zurrilla et al., 1999) y españoles (Maydeu-Olivares et al., 1999). Se observaron otros resultados específicos en los participantes; por ejemplo, el número de ítems y las correlaciones entre los ítems de la escala RRP influenciaron para muestrar el más alto nivel de consistencia. Sus cuatro componentes están cerca 0,80 y, considerando el número de ítems en cada una (cinco ítems), sus magnitudes son satisfactorias. Por otro lado, el puntaje OPP es el que muestra la más baja consistencia, lo que es congruente con lo reportado en otras investigaciones en adultos y adolescentes.

El nivel de consistencia interna alcanzado por algunas de las escalas

es muy satisfactorio y permite que pueda ser utilizado en el contexto de la práctica clínica, debido que indican poca varianza aleatoria sobre los puntajes (Charter & Feldt, 2001). Por ejemplo, el puntaje RPP podría ser recomendado para describir la aplicación de estrategias racionales y sistemáticas en los sujetos, y para ayudar a tomar decisiones sobre la vía de tratamiento más apropiada. En la esfera clínica, educativa o empresarial, o en general, en situaciones en las que el psicólogo toma acciones sobre la persona evaluada con serias consecuencias sociales e individuales, la posibilidad de error es inquietante (Nunnally & Bernstein, 1995).

Los resultados obtenidos sobre la consistencia interna nos llevan a concluir que esta cualidad métrica puede mantenerse constante en grupos de estudiantes universitarios, y que ni las diferencias de género o estudios específicos pueden producir diferencias más allá del error de muestreo. La similaridad de los coeficientes indica que se pueden derivar otros estadísticos útiles para la muestra general; estos estadísticos pueden ser el error estándar de medición de un puntaje o de las diferencias (Charter, 1996; Nunnally & Bernstein, 1995).

La estimación del coeficiente a supone que se cumple el supuesto de equivalencia tau entre los ítems de cada escala del SPSI-R, pero este supuesto no fue corroborado empíricamente en nuestros datos; un examen minucioso de esto puede validar el uso del coeficiente a en la muestra del presente estudio.

Debe considerarse que los coeficientes de consistencia interna hallados son comparativamente menores que los estudios originales (americanos y españoles), pero no se comprobó formalmente esta afirmación ni se tiene una explicación para ello. Esto es una pregunta abierta que podrá resolverse en las siguientes metas psicométricas de la adaptación del SPSI-R en contexto peruano.



n %

Sexo

Masculino 159 42,7

Femenino 213 57,3

Facultad

Administración de Negocios Internacionales 40 10,8

Administración de Turismo Sostenible 12 3,2

Arquitectura y Urbanismo ambiental 14 3,8

Biología Marina y Econegocios 27 7,3

Comunicación y Publicidad 22 5,9

Derecho 9 2,4

Estomatología 21 5,6

Ingeniería de Negocios Agroforestales 13 3,5

Ingeniería de Sistemas Empresariales 25 6,7

Marketing y Administración 28 7,5

Medicina Humana 148 39,8

Psicología 13 3,5

Lugar de Nacimiento

Lima 295 79,3

Provincias 66 17,7

Extranjero 11 3

Estado Civil

Soltero 370 99,4

Casado 1 0,3

Conviviente 1 0,3

Estructura familiar

Vive con ambos padres 228 61,3

Vive solo con la madre 87 23,4

Vive solo con el padre 13 3,5

Vive con otros 44 11,8

TOTAL 372 100

tabla 1. descripción de la muestra.

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tabla 2. cOnsistencia interna e intervalOs de cOnfianza del tOtal de ítems del instrumentO y de las escalas (alpha de crOnbach)

Número de ítems

Estimación puntual

Intervalos de confianza 95%

Total 52 0,872 [0,852, 0,889]

Orientación positiva al problema (OPP) 5 0,679 [0,624, 0,762]

Orientación negativa al problema (ONP) 10 0,759 [0,720, 0,793]

Resolución racional de problemas (RRP) 20 0,924 [0,912, 0,934]

Formulación y definición de problemas (FDP) 5 0,751 [0,708, 0,788]

Generación de soluciones alternativas (GSA) 5 0,804 [0,770, 0,833]

Toma de decisiones (TD) 5 0,759 [0,718, 0,795]

Implementación de soluciones y verificación (ISV) 5 0,782 [0,744, 0,815]

Estilo descuidado impulsivo (EDI) 10 0,707 [0,660, 0,749]

Estilo evitativo (EE) 7 0,738 [0,695, 0,776]

tabla 3. cOnsistencia interna pOr sexO y diferencias estadísticas del tOtal de ítems del instrumentO y de las escalas (alpha de crOnbach)

Número de ítems Mujeres Hombres Significancia

estadística

Total 52 0,883 0,851 2, 57p=0,11

Orientación positiva al problema (OPP) 5 0,700 0,640 1,030

p=0,31Orientación negativa al problema (ONP) 10 0,869 0,827 2,88

p=0,08Resolución racional de problemas (RRP) 20 0,932 0,911 2,99

p=0,08Formulación y definición de problemas (FDP) 5 0,765 0,729 0,62

p=0,43Generación de soluciones alternativas (GSA) 5 0,813 0,792 0,33

p=0,56

Toma de decisiones (TD) 5 0,791 0,708 0,53p=0,06

Implementación de soluciones y verificación (ISV) 5 0,822 0,729 5,41

p=0,02

Estilo descuidado impulsivo (EDI) 10 0,817 0,807 0,10p=0,75

Estilo evitativo (EE) 7 0,749 0,717 0,49p=0,48



tabla 4. cOnsistencia interna pOr grupOs de facultades y diferencias estadísticas del tOtal de ítems del instrumentO y de las escalas (alpha de crOnbach)

Número de ítems

Facultades grupo1

Facultades grupo 2

Facultades grupo 3

Significancia estadística

Puntaje Total 52 0,892 0,818 0,850 3,03p=0,21

Orientación positiva al problema (OPP)

5 0,689 0,610 0,723 1,12p=0,48

Orientación negativa al problema (ONP)

10 0,859 0,841 0,857 0,37p=0,83

Resolución racional de problemas (RRP)

20 0,927 0,919 0,926 0,30p=0,85

Formulación y definición de problemas (FDP)

5 0,755 0,732 0,765 1,59p=0,45

Generación de soluciones alternativas (GSA)

5 0,831 0,774 0,795 6,89p=0,03

Toma de decisiones (TD) 5 0,747 0,712 0,777 0,22

p=0,89

Implementación de soluciones y verificación (ISV)

5 0,795 0,772 0,772 0,314p=0,85

Estilo descuidado impulsivo (EDI)

10 0,843 0,773 0,823 3,01p=0,22

Estilo evitativo (EE) 7 0,755 0,706 0,767 1,15

p=0,56

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rEFErENCIaS

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recepción: 14/07/2011aceptación: 05/08/2011

cesar merinO sOtO cOrrespOndencia: [email protected]

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rESUMEN

Propósito: El propósito del estudio consiste en conocer qué características de los pacientes quirúrgicos oncológicos están relacionadas con el aumento de complicaciones posoperatorias.

Materiales y métodos: consiste en un estudio retrospectivo que se basa en la recolección de datos de historias clínicas de 68 pacientes del servicio de cirugía oncológica del Hospital Alberto Sabogal Sologuren (HASS), en el año 2010.

Resultados: De los 68 pacientes, 12 presentaron complicaciones, con predominio de la fístula enterocutánea; se incluyeron 43 hombres y 15 mujeres, con una edad promedio de 63 años y un IMC promedio de 22,5; las comorbilidades más frecuentes fueron hipertensión arterial, diabetes mellitus y anemia; la estancia hospitalaria promedio fue de 13 días; el tiempo operatorio promedio, de 4 horas; 34 pacientes (50%) recibieron alimentación artificial; en 36 pacientes (52%) la vía oral se inició en la primera semana; 58 pacientes (85%) recibieron profilaxis antibiótica y 55 pacientes (80%) fueron intervenidos de manera programada.

Conclusión: La presencia de comorbilidades, principalmente hipertensión arterial, diabetes mellitus y anemia, la estancia hospitalaria prolongada (más de 2 semanas) y el tiempo operatorio prolongado (más de 6 horas) son

FACTORES ASOCIADOS A LAS COMPLICACIONES POSOPERATORIAS EN EL SERVICIO DE CIRUGÍA ONCOLÓGICA

Luis Wong Espejo1

factores que aumentan la incidencia de complicaciones posoperatorias; mientras que el inicio precoz de la vía oral y la administración de profilaxis antibiótica son factores protectores y reducen la estancia hospitalaria.

Palabras claves: factores de riesgo; complicaciones posoperatorias; cirugía oncológica

INTrOdUCCIóN

La cirugía oncológica es un campo de la cirugía en el cual el impacto que puede llevar a la decisión de operar o no a un paciente puede resultar dramática, así como también lo puede ser el resultado de una operación debido al compromiso que un paciente pueda tener por el cáncer que presenta.

La cirugía oncológica no solo abarca el ámbito de la sala de operaciones, también es importante determinar cuándo el paciente requiere de otros tratamientos coadyuvantes o incluso si no tiene indicación de cirugía. Es justamente este aspecto, no quirúrgico, el que está en auge en los últimos tiempos y es el que diferencia a un cirujano oncólogo comprometido con su paciente de los demás (1, 2).

Es por ello que la cirugía oncológica conlleva fuertes emociones, temores y esperanzas a los pacientes y sus familiares, lo que la convierte en una alta responsabilidad para el cirujano y todo el equipo de salud a su alrededor (3, 4).

T E S I S

1Universidad Científica del Sur. Facultad de Medicina.


Factores asociados a las complicaciones posoperatorias en el servicio de cirugía oncológica

La responsabilidad del cirujano no se limita al intraoperatorio, sino al preoperatorio y, más aún, al posoperatorio. Por ello, una vez operado el paciente oncológico, es importante controlar el resultado de la cirugía y evitar complicaciones o disminuir en lo posible los efectos de estos sobre la evolución del paciente (5).

Es de vital importancia que el cirujano tenga conocimiento de las características de su paciente, de la patología a tratar y de las implicancias del estado preoperatorio, intraoperatorio y posoperatorio, ya que son estas características las que van a diferenciar la evolución y la respuesta de cada paciente, y pueden llegar a definir el resultado final (6).

Las complicaciones posoperatorias que se pueden presentar en un paciente oncológico con en ocasiones dramáticas, ya que se trata de pacientes que presentan alteraciones de alguno o varios sistemas y órganos, y que están afectos a que comorbilidades que los pueden desestabilizar y causar un retraso en su tratamiento oncológico, disminuir su tiempo de vida o incluso ser fatales (7, 8, 9).

Para estudiar mejor los factores que podrían influir sobre la incidencia de complicaciones posoperatorias, se las dividirá en: factores del paciente, factores quirúrgicos y factores de la terapéutica.

METOdOlOGÍa

El presente estudio es un estudio analítico transversal, los datos requeridos se han obtenido de las historias clínicas del archivo central del Hospital Alberto Sabogal Sologuren (HASS), e incluyen a aquellos pacientes registrados por el servicio de cirugía oncológico en el periodo enero 2010 a diciembre 2010.

Solo se incluyeron pacientes con diagnóstico de patología oncológica seleccionada según el cuadro del servicio de Cirugía Oncológica HASS del año 2010. Se excluyó a

los pacientes que no pertenecían al servicio, que habían fallecido o que habían solicitado el alta voluntaria.

Los datos extraídos fueron transcritos en una ficha donde se contemplaban los datos de filiación, las características de la cirugía, las características del tratamiento recibido, así como las complicaciones posoperatorias presentadas.

Se empleó la prueba estadística test de Fisher con tablas 2 x 2 para las variables cualitativas, ya que la mayoría de tablas contenían datos inferiores a 5. El análisis de las variables se realizó mediante odds ratio, siendo estadísticamente significativo p < 0,05. Se emplearon los programas Excel Microsoft XP QI Macros 2010 y PASW Statics 18.

rESUlTadOS

De los 68 pacientes, 12 presentaron complicaciones, que fueron las siguientes: fístula enterocutánea (7), absceso residual (2), fístula estercorácea (1), dehiscencia de anastomosis (1) y hemorragia digestiva baja (1).

Los diagnósticos oncológicos fueron cáncer gástrico (30), cáncer de colon (16), cáncer de sigmoides (7), cáncer de recto (4), cáncer de vías biliares (3), cáncer de ciego (3), cáncer de vesícula (2), hepatocarcinoma (1), linfoma duodenal (1) y cáncer de cabeza de páncreas (1).

Se incluyó a 43 hombres y 15 mujeres, con una edad promedio de 63 años (27 a 90 años) y un IMC promedio de 22,5 (16 a 31,5). Las comorbilidades más frecuentes fueron hipertensión arterial, diabetes mellitus y anemia. Se observó una estancia hospitalaria promedio de 13 días (3 a 38 días) y un tiempo operatorio promedio de 4 horas (1 a 7 ½ horas).

Solo 34 pacientes (50%) recibieron alimentación artificial; en 36 pacientes (52%) la vía oral se inició en la primera semana; 58 pacientes (85%) recibieron

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tesi

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profilaxis antibiótica y 55 pacientes (80%) fueron intervenidos de manera programada.

Se encontró una relación estadísticamente significativa entre la presencia de estos factores y la incidencia de complicaciones posoperatorias: comorbilidades como anemia, hipertensión arterial y diabetes mellitus (P: 0,01); un tiempo operatorio mayor de 6 horas (P:0,009) y una estancia hospitalaria prolongada (P:0,0008).

El inicio temprano de la vía oral, dentro de la primera semana (P:0,02), y el uso de antibióticos de manera profiláctica (P:0,04) también presentan una relación estadísticamente significativa con respecto a una disminución de las complicaciones posoperatorias.

No se encontró relación directa entre las complicaciones posoperatorias y el género, la edad, el IMC, la indicación quirúrgica ni la alimentación suplementaria.

Tabla 1. FacTores del pacienTe

Factores del paciente

Complicaciones PSÍ NOGÉNERO

Masculino 9 34 0,3500Femenino 3 22 0,3500

EDaD< 55 años 3 15 0,7800> 55 años 10 41 0,7800

IMC< 18,5 3 8 0,3600> 18,5 9 48 0,3600> 25 3 13 0,8900

COMORBILIDaDESHipertensión 8 21 0,0100

Diabetes mellitus 4 10 0,0100

anemia 4 10 0,0100

Tabla 2. FacTores quirúrgicos

Factores quirúrgicos

Complicaciones PSÍ NO

TIEMPO OPERaTORIO< 6 horas 9 54 0,0090> 6 horas 3 2 0,0090

INDICaCIÓN QUIRÚRGICaEmergencia 2 11 0,8100Programada 10 45 0,8100

Tabla 3. FacTores de la TerapéuTica Factores

de la terapéutica

Complicaciones P

SÍ NOINICIO DE La VÍa ORaL

< 7días 8 51 0,0200> 7 días 4 5 0,0200aLIMENTaCIÓN SUPLEMENTaRIa

Nutrición parenteral 6 21 0,0700Nutrición enteral 2 10 0,4500

Nutrición mixta 1 1 0,0700

Sin nutrición artificial

3 31 0,0700

PROFILaXIS aNTIBIÓTICaProfilaxis antibiótica 8 50 0,0400

Monodrogo 1 17 0,2200Multidrogo 7 33 0,2200

ESTaNCIa HOSPITaLaRIa< 14 días 3 42 0,0008> 14 días 9 14 0,0008

dISCUSIóN

Con respecto a las complicaciones presentadas, se puede reafirmar la prevalencia de la fístula enterocutánea como el tipo de fístula más frecuente (10).

Se puede apreciar que la mayoría de los pacientes presentan edades por encima de los 55 años, siendo el promedio de 63 años. Esto concuerda con el aumento de la incidencia de cáncer en la población a medida que envejece (11).

En el tema de las comorbilidades, se ha podido demostrar que existe una relación evidente entre la presencia de estas y las complicaciones posoperatorias. Esto se puede explicar debido a que se ha visto que en los pacientes mayores de 70 años, ante el estrés quirúrgico, los picos hormonales son hasta un 50% menores y hay una disminución de receptores en los órganos blanco, lo que lleva a un aumento de las complicaciones cardiopulmonares (6).


Factores asociados a las complicaciones posoperatorias en el servicio de cirugía oncológica

El tiempo operatorio prolongado, en este estudio, de más de 6 horas, también se ha comprobado como factor predisponente para la presencia de complicaciones posoperatorias,; mas aún, en otros estudios realizados en Suiza, se determina que el tiempo operatorio mayor de 2 horas es un factor de riesgo para la presencia de dehiscencia de anastomosis en caso de cirugía colorectal (7).

En este estudio se ha verificado que la incidencia de complicaciones posoperatorias presentó un aumento a partir del séptimo día de inicio de la dieta por vía oral, esto se puede confirmar por el hecho de que el inicio precoz de la vía oral se relaciona con la disminución de la incidencia de dehiscencia de anastomosis y de estancia hospitalaria (7).

Con respecto al empleo de profilaxis antibiótica, se ha podido apreciar que esto disminuye la incidencia de complicaciones posoperatorias. Con respecto al empleo de uno o más medicamentos, no se encontraron diferencias; esto se confirma con estudios realizados en Tailandia, en los que se estudió el empleo de profilaxis antibiótica en cirugía colorectal (12).

La estancia hospitalaria también ha mostrado ser un factor relacionado directamente con la presencia de complicaciones posoperatorias; esto se aprecia cuando se compara la estancia hospitalaria menor a 2 semanas con la estancia mayor a 2 semanas, ya que se puede notar una relación de 6 a 1.

De todos los factores estudiados, es la estancia hospitalaria la que demuestra ser la que mayor impacto tiene sobre

la incidencia de complicaciones posoperatorias.

Es importante recalcar que la estancia hospitalaria depende de muchos factores, como la tolerancia oral, el compromiso sistémico del paciente, la severidad del cuadro, la presencia de otras complicaciones posoperatorias (atelectasias, infecciones intrahospitalarias, infección del sitio operatorio, etc,), entre otros; y que justamente por estos motivos se prolongue la estancia hospitalaria y aumente el riesgo de presentarse complicaciones posoperatorias que prolonguen a su vez la estancia, lo que inicia un ciclo de complicaciones y agrava el estado general del paciente (13, 14).

Para finalizar, se deben realizar estudios de mayor amplitud para poder reafirmar las tendencias y esclarecer la relación entre los siguientes factores: edad, género, IMC, hábitos nocivos, nutrición suplementaria y presentación de complicaciones posoperatorias en cirugía oncológica.

El diagnóstico oncológico tiende a ser una noticia bastante temida y de la que muchas veces se esperan resultados nefastos; sin embargo, la morbimortalidad de una patología oncológica quirúrgica no se limita a la neoplasia, sino que hay muchos factores asociados que pueden disminuir drásticamente la sobrevivencia del paciente; es ahí donde radica la importancia de saber reconocerlos y evitarlos en la medida que sea posible, o en todo caso estar atentos a aquellos pacientes que los presentan, para manejarlos y limitar los daños que puedan ocasionar.

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tesi

s Luis Wong Espejo


1. Martínez H. Estado actual de la cirugía oncológica en el Instituto Nacional de Oncología y Radiobiología. Revista Cubana de Oncología 1995. Disponible en: http://bvs.sld.cu/revistas/onc/vol11_1_95/onc13195.htm

2. Garay M, García M, Viciano V et al. Morbilidad de la radioterapia postoperatoria en el cáncer de recto. Revista Española de Enfermedades Digestivas 2004 96 (11):. 765-72

3. Moorey S. The Psychological Impact of Cancer. In: Tiffany R, Webb P, eds. Oncology for Nurses and Health Care Professionals 1988: Vol. 2 Care and Support. 2nd ed. UK: Chapman & Hall. Disponible en: http://www2.alasbimnjournal.cl/alasbimn/CDA/imprime/0,1208,PRT%253D400,00.html

4. Rodríguez B, Ortiz A, Palao A. Atención psiquiátrica y psicológica al paciente oncológico en las etapas finales de la vida. Servicio de Psiquiatría del Hospital Universitario La Paz. Facultad de Medicina. Universidad Autónoma de Madrid.Psicooncología 2004; 1 (2-3): 263-82. Disponible en: http://revistas.ucm.es/psi/16967240/articulos/PSIC0404120263A.PDF

5. Tamboury F, Mons E. Manejo del paciente oncológico en situación terminal. Hospital Clínico Universitario Virgen de la Victoria. Disponible en: http://www.medynet.com/usuarios/jraguilar/Manual%20de%20urgencias%20y%20Emergencias/terminal.pdf

6. Masaharu N, Yoshifumi H, Koshiro H et al. Risk Factors in Relation to Postoperative Complications in Patients Undergoing Esophagectomy or Gastrectomy for Cancer. Disponible en: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1493370/pdf/annsurg00192-0042.pdf

7. Kirchhoff P, Clavien P, Hahnloser D. Complications in Colorectal surgery: risk factors and preventive strategies. Patient Safety In Surgery Journal 2010; 4 (5). Disponible en: http://www.pssjournal.com/content/4/1/5

8. Richard M, Dent O, Sinclair G et al. Background and perioperative risk factors for prolonged hospital stay after resection of colorectal cancer. ANZ Journal of Surgery 2004; 74 (1-2): 4-9. Disponible en: http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1046/j.1445-1433.2003.02887.x/full

9. Pessaux P, Msika S, Atalla D et al. Risk Factors for Postoperative Infectious Complications in Noncolorectal Abdominal Surgery. Archive of Surgery 2003; 138. Disponible en: http://archsurg.ama-assn.org/cgi/reprint/138/3/314

10. Vallés M, Lahaba N, Castillo O et al. Fístulas enterocutáneas de intestino delgado. Manejo terapéutico. Hospital Universitario Celia Sánchez Mandile,. Cuba. Disponible en: http://www.cirugest.com/htm/revisiones/cir14-10/14-10-01.pdf


11. Bórquez P, Romero C. El paciente oncológico geriátrico. Revista Chilena de Cirugía 2007; 59 (6): 467-71. Disponible en: http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0718-40262007000600015

12. Varut L, Atthaphorn T, Thawatchai A et al. Mono- or Poly- Antimicrobial Prophylaxis in Colorectal Surgery. The Thai Journal of Surgery 2008. Disponible en: http://www.surgeons.or.th/ejournal/files/Vol29_No3_77.pdf

13. Valentí V, Hernández L, Martínez F, Gil A et al. Análisis de morbilidad postoperatoria en pacientes con adenocarcinoma gástrico tratados según protocolo de quimiorradioterapia preoperatoria y cirugía. Cirugía Española 2009; 86 (6): 351-7. Disponible en: www.elsevier.es/cirugia

14. Rosario M, Barreto J, Santana S. Influencia del estado nutricional del paciente con cáncer de páncreas sobre la conducta quirúrgica y la evolución postoperatoria. Grupo de Apoyo Nutricional. Hospital Clínico Quirúrgico Hermanos Ameijeiras. Revista Cubana de Alimentos y Nutrición 2007 17 (2). Disponible en: http://www.revicubalimentanut.sld.cu/Vol_17_2/Art5_155_173.pdf


luis WOng espejO


150 Científica 8 (2), 2011

En el artículo “Fragilidad física, deterioro cognitivo y factores asociados en adultos mayores del Centro Geriátrico Naval del Callao, Perú”, de María Luisa Tello García, publicado en Científica Vol. 8 – Nº 1, enero - abril 2011, página 69, se ha deslizado una errata. La versión correcta del anexo, tabla 1 figura debajo.

FE dE ErraTaS

VIII.ANEXOS

Tabla 1: Análisis descriptivo y univariado de posibles factores asociados con fragilidad física según clasificación usada

Factor Clasificación N Prevalencia * Fragilidad física

p** Sexo Hombre 185 59,5% 0,003 Edad 60-70 89 28,6%

<0,001 70-80 127 40,8% >80 95 30,5%

Grado de instrucción Primaria 5 1,6%

0,556 Secundaria 31 10,0% Superior 272 87,5% Post Grado 3 1,0%

Vive solo Si 260 83,6% 0,86 Estado civil Soltero 12 3,9%

0,241 Casado 231 74,3% Viudo 52 16,7% Divorciado/Separado 16 5,1%

Años de retiro 1 a 10 90 28,9% 0,982 11 a 20 68 21,9%

21 > 153 49,2% Autoevaluación de salud Excelente 38 12,2%

0,785 Muy buena 58 18,6% Buena 108 34,7% Regular 88 28,3% Mal 19 6,1%

Grado militar subalterno 159 51,1% 0,003 oficial 24 7,7%

civil 128 41,2% Numero de caídas en ultimo año

Ninguna 137 44,1% 0,438 1 a 2 145 46,6%

3> 29 9,3% N de hospitalizaciones en el último año

Ninguna 140 45,0% 0,11 2 a 2 140 45,0%

3> 31 10,0% Peso <50 23 7,4%

0,886 51-70 173 55,6% 71-90 69 22,2% >90 46 14,8%

Talla <1.5 79 25,4%

0,941 1.51-1.60 78 25,1% 1.61-1.65 82 26,4% 1.65> 72 23,2%

Test de Barthel

Dependiente total 4 1,3%

0,002 Dependiente grave 0 0,0% Dependiente moderado 3 1,0% Dependiente leve 29 9,3% Independiente 275 88,4%

DETERIORO COGNITIVO

Test del reloj No errores 210 67,5%

<0,001 Errores menores 88 28,3% Errores mayores 13 4,2%

Test de Pfeiffer Deterioro cognitivo 31 10,0% <0,001

*Prevalencia basada en un total de 311 individuos **Valor p usando prueba Chi2 para detección de fragilidad física según test de “Up and Go”


Sala CaBIESES

“TREPaNaCIONES”, EXTRaCTO DE La OBRa LA SALud y LoS dioSES DEL DR. FERNaNDO CaBIESES (añO 2007)

En sus laboriosos esfuerzos por encontrar estos factores desconocidos, Weiss, quien dedicó toda una vida al estudio de la Osteología Cultural, ha tratado de relacionar la distribución de la trepanación en el Antiguo Perú con las diferentes técnicas utilizadas por los curanderos nativos, y ha clasificado las diversas formas de apertura en el hueso craneano en relación a los lechos arqueológicos donde fueron encontrados estos cráneos. En este sentido seguiremos su clasificación agregando algunas deducciones de nuestra cosecha con objeto de explicar la multiplicidad de formas de trepanación.

Tomemos, por ejemplo, la trepanación cuadrilátera. Este tipo es considerado forma típica de la trepanación peruana porque es la que mostraba el famoso cráneo descubierto inicialmente por Squier. Por mucho tiempo se llamaba a ese tipo «la trepanación peruana», pero también se le ha encontrado en otras culturas y nosotros hemos llamado la atención sobre su ocurrencia en el pueblo Israelita de 700 años a. C. En el Perú se le encuentra en la Sierra Central, y Weiss la relaciona con esa región geográfica. La apertura ósea se realiza mediante la intersección de cuatro incisiones rectilíneas.

Tenemos después la trepanación poligonal. Esta es una variación de la anterior, que se obtiene al aumentar el número de incisiones rectilíneas que se cruzan en ángulos más obtusos, dando como resultado polígono irregular de número variable de lados. Originalmente fue descrita por Tello, quien pensó que se trataba de una forma transicional entre la trepanación cuadrilátera y la redonda, ya que esta última podía resultar de la multiplicación indefinida del número de lados del polígono.

La trepanación en «corona de ebanista» se caracteriza por la presencia de numerosos

agujeros pequeños y redondos que se alinean para circunscribir un área circular u oval. Ha sido especialmente descrita por Lorena, Tello, Weiss, Escomel y otros. Lucas Championniere, un antropólogo francés que se ocupó de las técnicas utilizadas por los trepanadores primitivos, utilizó este método para hacer demostraciones en cráneos secos, sin haber antes visto los ejemplos peruanos. Constituye un caso interesante de convergencia cultural cuando se le compara con los métodos modernos de trepanación.

En la trepanación oval o circular, la apertura, que tiene tamaño variable, se ha hecho generalmente mediante el raspado del hueso. Queda así formado un borde con bisel a expensas de la superficie externa. Algunas trepanaciones de este tipo muestran una artesanía muy elaborada que inspiró a Lorena para darles el nombre de «Trepanaciones refinadas». Quizás las más demostrativas de este tipo de trepanación se ven en los cráneos de Paracas.

Finalmente, existen una serie de incisiones óseas variadas, que generalmente se limitan a la tabla externa del hueso y que son aisladas o en grupos irregulares que no muestran ningún plan definido, lo que pudiera sugerir una intención frustrada de realizar una apertura completa del cráneo. Las hay de todos los tipos. Algunos autores han considerado estas trepanaciones como trepanaciones incompletas, que no fueron continuadas debido a que el paciente murió durante la operación. Sin embargo, aunque hay muchos casos en donde la operación es evidentemente incompleta, algunos autores, entre ellos Weiss, sugieren que muchos casos de incisiones superficiales pueden haber constituido, en sí mismas, operaciones completas cuyo objeto era realizar descongestión o drenaje de lesiones superficiales del hueso.

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NOTaS

La Facultad de Ingeniería de Sistemas Empresariales de la Universidad Científica del Sur (FISE) se encuentra en plena Maratón de Certificación Microsoft Technology Associate (MTA), una nueva credencial de nivel elemental que valida el conocimiento básico en tecnologías de la información y permite a los estudiantes dar el primer paso hacia la construcción de una exitosa carrera profesional.

La FISE, en convenio con Microsoft y Edutec, se convierte en entidad certificadora de la prestigiosa Certiport y ofrece a los estudiantes obtener una certificación internacional desde muy temprano, lo que potenciará sus capacidades académico-profesionales y les permitirá una rápida inserción laboral.

El programa de certificación MTA incluye 7 certificaciones diferentes en los ámbitos de Administración de Redes, Seguridad y Servidores, Desarrollo de Software y Administración de Base de Datos. Estas son:

• Fundamentos de Administración de Windows Server• Fundamentos de Seguridad• Fundamentos de Redes• Fundamentos de Desarrollo de Software• Fundamentos de Desarrollo en Windows• Fundamentos de Desarrollo de Web• Fundamentos de Administración de Base de Datos

La II Feria Ecológica de la Universidad Científica del Sur, organizada por la Facultad de Ingeniería y Gestión Ambiental en el Campus Villa III, contó con la entusiasta participación de los organizadores y asistentes en las diversas actividades como gymkanas, EcoStores y exposiciones, además de la expectativa general por la premiación a la facultad ganadora del II Concurso de Reciclaje Interfacultades.

La premiación y clausura del concurso de este año contó con la participación de Timon Skoddow, Gerente del Proyecto BID; Jenny Torres, Coordinadora de Alianzas Empresariales de la ONG Ciudad Saludable; y los Tigres de Villa el Salvador, un grupo de recicladores formalizados, quienes entregaron el trofeo del primer puesto del concurso a la decana de la Facultad de Administración de Turismo Sostenible, y el del segundo lugar correspondió a la Facultad de Ingeniería y Gestión Ambiental.

La feria albergó a más de 500 visitantes que participaron de las actividades programadas como los juegos de pelea de hisopos, tómbola o nudo de guerra. Por otro lado, tuvieron mucha acogida las exposiciones de los stands de facultades como la de Arquitectura y Urbanismo Ambiental, Comunicación y Publicidad e Ingeniería de Sistemas Empresariales y los de las 17 empresas u organizaciones invitadas al evento como Ciudad Saludable, Petramas, HP, Natura, MINEM, MINAM y Cambie, quienes de este modo afianzaron su compromiso ecológico.

II FERIa ECOLÓGICa POR EL DÍa MUNDIaL DEL aMBIENTE

CERTIFICaCIÓN MICROSOFT TECHNOLOGy aSSOCIaTE (MTa) EN La CIENTÍFICa

Con el objetivo de crear un marco de colaboración entre la Universidad Científica del Sur y la Red de Servicios de Salud de Villa María del Triunfo, se firmó un convenio que permitirá formar a los profesionales de la Facultad de Medicina egresados de la Científica, con especial énfasis en solucionar los problemas prioritarios de salud de la población.

Además, se permitirá que la capacitación de profesionales este alineada con las políticas y planes de desarrollo del sector salud, así como regular el desarrollo de las acciones de docencia, servicios e investigación que se realizan en el pregrado. Por otro lado, el rector de la Científica, Dr. Agustín Iza-Stoll, mencionó que “el convenio incentivará y promoverá la investigación en salud, considerando los campos educacional, epidemiológico, clínico y social, incrementando la cobertura de actividades preventivas promocionales a través del desarrollo de planes estratégicos de comunicación educativa en salud”.

Finalmente, la Científica contribuirá en este convenio con personal docente asistencial, equipos e instrumentos para el desarrollo de las actividades docentes que se programen anualmente y de manera coordinada con el equipo a cargo de la ejecución del convenio.

UNIVERSIDaD CIENTÍFICa DEL SUR FIRMÓ CONVENIO DE COOPERaCIÓN CON RED DE SERVICIOS DE SaLUD DE VMT

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La Universidad Científica del Sur, a través de su Facultad de Ingeniería de Negocios Agro-Forestales y el Ministerio del Ambiente, organizadores por tercer año consecutivo del Premio a la Ecoeficiencia Empresarial 2011, anunciaron a los ganadores de este reconocido premio.

El Premio a la Ecoeficiencia Empresarial 2011 evalúa a las micro, pequeñas (MYPES), medianas y grandes empresas del país, así como a los jóvenes emprendedores, para demostrar sus mejores prácticas de gestión ambiental sostenible.

En esta edición, el Premio fue otorgado a las empresas:

• Tecnológica de Alimentos – TASA. Por la implementación exitosa de la ecoeficiencia en el proceso integral de toda su actividad empresarial.

• Nederland Perú S.A.C. Por la implementación exitosa de la ecoeficiencia en el proceso integral de toda su actividad empresarial.

• Cementos Lima S.A.A. Por la implementación exitosa de las medidas de ecoeficiencia en el uso o tratamiento del agua en el proceso, en los servicios auxiliares y administrativos empresariales.

• Telefónica Móviles. Por la implementación exitosa de las medidas de ecoeficiencia energética (Proyecto Energías Alternativas) aplicadas al rubro principal y a los servicios auxiliares empresariales.

• Bosques Amazónicos S.A.C. Por la implementación exitosa de las medidas de ecoeficiencia en el manejo y aprovechamiento sostenible de los recursos naturales renovables: Reforestación Campo Verde/ Bonos de carbono.

• Relima Ambiental S.A.C. Por la implementación exitosa de las medidas de ecoeficiencia en el manejo de residuos sólidos en los servicios auxiliares y administrativos al interior de la empresa.

• Vulco Perú S.A. Por la implementación exitosa de las medidas de ecoeficiencia en el manejo de residuos sólidos en los servicios auxiliares y administrativos al interior de la empresa.

• Nunalab S.A.C. Por la implementación exitosa de las medidas de ecoeficiencia en el manejo de residuos sólidos (reciclado de merma de telas de algodón) en la actividad empresarial.

Un aspecto importante del Premio a la Ecoeficiencia Empresarial 2011 es el de premiar a jóvenes emprendedores y en este caso los ganadores de la categoría fueron estudiantes de la Universidad Nacional Federico Villareal, por la creación del Proyecto Ecoeficiencia en el Manejo de Residuos Sólidos: “ECO-CAR desagüe y fragmentación de los vehículos fuera de uso”.

El premio tiene la finalidad de reconocer la iniciativa de las empresas por tomar medidas ecoeficientes, orientadas a producir más con menos y de esta manera contaminar menos al ambiente, ser equitativos socialmente y, al mismo tiempo, crecer sosteniblemente.

Este año, el Premio a la Ecoeficiencia Empresarial 2011, en su proceso de convocatoria y difusión, contó con el apoyo de la Cooperación Internacional de Alemania – GTZ y del Centro de Ecoeficiencia y Responsabilidad Social – CER.

El jurado calificador estuvo conformado por especialistas de instituciones como el Ministerio del Ambiente, el Ministerio de Comercio Exterior y Turismo, el Ministerio de la Producción, el Ministerio de Agricultura, la Universidad Científica del Sur, el Colegio de Ingenieros del Perú, la Confederación Nacional de Instituciones Empresariales y la Cámara de Comercio de Lima.

PREMIO a La ECOEFICIENCIa EMPRESaRIaL 2011

El martes 12 de julio, nuestra universidad recibió la visita de una importante delegación de la embajada de Estados Unidos, encabezada por Della R. Hareland, agregada cultural adjunta; Illa Quintanilla, directora de las Becas Fulbright; y Vanessa Wagner, experta en temas culturales. Ellas fueron recibidas por el Dr. José Amiel, vicerrector de Investigación; Emilio Guija, director del Instituto de Investigación; Óscar Muro, decano de la Facultad de Negocios Internacionales; Melina Domínguez, profesora de la misma facultad; y Rubén Quiroz Ávila, jefe de la Oficina de Relaciones Internacionales.

Luego de un breve paseo por nuestras instalaciones y laboratorios, la delegación se reunió para trazar las líneas generales de cooperación institucional y los enlaces posibles con universidades e instituciones norteamericanas. Un fructífero intercambio de ideas dio como resultado una agenda interesante de trabajo bajo intereses comunes, además de sugerir hojas de ruta académicas asociadas a la mejora de la educación universitaria en nuestro país.

FUNCIONaRIOS aCaDÉMICOS DE La EMBajaDa DE ESTaDOS UNIDOS VISITaN La CIENTÍFICa

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Mediante Resolución Ministerial Nº 0439-2011, el pasado 22 de agosto, el Ministerio de Educación encargó las funciones de la Presidencia del Consejo Nacional de Ciencia, Tecnología e Innovación Tecnológica - CONCYTEC al Dr. Jorge del Carpio Salinas.

El nuevo titular encargado del CONCYTEC es ingeniero electrónico egresado de la Universidad Nacional de Ingeniería, con estudios de maestría y doctorado en la Facultad Politécnica de Mons-Bélgica, en Ciencias Aplicadas, así como estudios postdoctorado en el grupo Didascalia de la Universidad de Amberes, en Bélgica.

Actualmente es profesor en la Universidad Nacional de Ingeniería, la Universidad San Martín de Porres y coordinador en la Facultad de Ciencias e Ingeniería de la Universidad de Ciencias y Humanidades.

El Dr. Del Carpio también ha desempeñado los cargos de investigador científico superior del Instituto Geofísico del Perú (IGP), director de investigación y desarrollo del Instituto Nacional de Investigación y Capacitación en Telecomunicaciones (INICTEL), director fundador del Centro de Investigación y Desarrollo de la Facultad de Electricidad y Electrónica de la Universidad Nacional de Ingeniería, y consultor de proyectos de comunicaciones en el Ministerio de Transportes y Comunicaciones (MTC).

Por otro lado, su trayectoria profesional no estuvo ajena al CONCYTEC, pues el Dr. Del Carpio fue miembro del Directorio, secretario general y, hasta la fecha, director de Sistemas de Información y Comunicación de CTeI de la misma institución.

ENCaRGaN PRESIDENCIa DEL CONCyTEC aL DR. jORGE DEL CaRPIO SaLINaS

El evento fue organizado por la Facultad de Administración de Negocios Internacionales y la Oficina de Relaciones Internacionales.

El 25 de julio del presente año, se realizó en nuestra Universidad la Jornada de Arte Aplicado a la Psicología, que reunió experiencias de reconocidos profesionales extranjeros y locales en torno al uso del arte como herramienta terapéutica, especialmente para poblaciones juveniles con conductas delictivas y adictivas, y con trastornos de la alimentación.

El Dr. Harvey Milkman, psicólogo, profesor de Psicología en el Metropolitan State College en Denver, tuvo a cargo dos conferencias tituladas “Caminos hacia el autodescubrimiento y el cambio: el trabajo con adolescentes en riesgo. Reestructuración cognitiva y alternativas artísticas a las drogas, la delincuencia y la angustia emocional” y “Tratamiento de la conducta criminal y abuso de sustancias en adultos”. El trabajo que realiza se desarrolla a través a través de la utilización de historias narrativas, profusamente ilustradas, de los jóvenes que luchan con múltiples elementos de riesgo. Algunas de las actividades utilizadas fueron juegos de roles, obras de teatro de acción y discusiones en grupos pequeños; estas acciones proporcionan la base para la práctica de una gama de habilidades de pensamiento y de acción destinada a promover una vida segura y responsable.

La psicóloga Elisabeth Osés, máster en Arteterapia. (ISPA, Barcelona), tuvo a cargo el tema de abordaje de los llamados “trastornos de alimentación” a través de la arteterapia, que utiliza diferentes formas de expresión artística como la pintura, la cerámica o la danza para profundizar en las experiencias de adolescentes con problemas de anorexia y bulimia.

Finalmente, se contó la participación del psicólogo Willam Guevara, quien tuvo a cargo el tema “Estrategias de afrontamiento al estrés en drogadependientes en comunidades terapéuticas”. Guevara es responsable de la fase de reinserción social en la comunidad terapéutica Escuela de Vida, conferencista internacional y autor de varios artículos sobre drogodependencia y codependencia.

jORNaDa DE aRTE aPLICaDO a La PSICOLOGÍa

El XXX CONGRESO LATINOAMERICANO DE QUÍMICA CLAQ-2012 se realizará en Cancún durante el otoño del 2012, y será organizado por la Sociedad Química de México, A.C. y la Federación Latinoamericana de Asociaciones Químicas, con el fin de estimular la relación entre centros de educación, impulsar la enseñanza de la Química, ampliar las estrategias de vinculación con empresas, así como optimizar la relación entre ciencia, tecnología y sociedad para mejorar la calidad de vida del hombre y su medio ambiente.

Informes: Sociedad Química de México, A.C. www.sqm.org.mx; [email protected]

XXX CONGRESO LaTINOaMERICaNO DE QUÍMICa CLaQ-2012

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COMENTaRIOS DE LIBROS

ENFERMEDaDES VIRaLES DE LOS aNIMaLES DOMÉSTICOS. SITUaCIÓN EN CHILE. 2011. aUTOR: PaTRICIO BERRÍOS ETCHEGaRay, VIRÓLOGO VETERINaRIO, PROFESOR DE La UNIVERSIDaD DE CHILE

Es un texto que empieza resaltando hitos históricos de la virología precisando el nombre de los investigadores que participaron en los mismos, seguido por un adecuado enfoque didáctico de conceptos básicos de la virología en que resalta una excelente dosificación textual que facilita comprender la terminología básica de la virología, tanto a nivel de la biología viral como de la patogénesis de las enfermedades virales. La parte de las enfermedades virales tiene una introducción a la infectología que podría ser un poco más desarrollada; mientras que acertadamente aborda las enfermedades virales por especies animales, aún cuando podría incluirse las enfermedades virales en aves domésticas, resultando de mucha utilidad aplicativa para el médico veterinario clínico, es muy concisa, y creemos que es la más completa y rica información que sobre enfermedades virales de animales domésticos en Chile disponemos. Sin duda que es un excelente texto de consulta, no solo para veterinarios chilenos, sino de toda América, por dos razones: la primera es por la notable trayectoria científica del autor, y segundo, por

la trasmisión de las experiencias y éxitos alcanzados por este país sureño en el control y erradicación de algunas enfermedades virales, que en otros países son aún problemas que aspiran y necesitan resolver.

CULTIVO DE CÉLULaS aNIMaLES y HUMaNaSAplicaciones en Medicina Regenerativa. Autor: Pablo Gil-Loyzaga. Catedrático de Neurobiología de la Audición. Ex.Director del Centro de Cultivos Celulares. Facultad de Medicina. Universidad Complutense de Madrid. España. 2011. Es un excelente libro que reúne a 29 notables investigadores del campo de los cultivos celulares con una orientación aplicativa hacia la Medicina Regenerativa. Destacan en la primera parte del libro los principios básicos y las técnicas modernas para realizar cultivos celulares de animales y humanos como son toma de muestras, morfología celular, cultivos celulares tridimensionales y criopreservación. En la segunda parte son muy útiles para el lector-investigador las técnicas y experiencias de los autores en el cultivo de células de diferente origen tisular incluyendo el cultivo de células tumorales y de líneas celulares. La tercera parte del texto se ocupa del aislamiento y cultivo de células madre y la aplicación de estas en medicina regenerativa, enfatizando su aplicación al trasplante de células madre pancreáticas,

del miocardio, oculares, de piel y del receptor auditivo. Este es un excelente texto-guía para iniciar, avanzar y/o plantear trabajos de investigación, muy útil para los investigadores hispanoparlantes de esta área biomédica, en razón de la amplitud y profundidad con que abordan los autores cada uno de los capítulos.

INFOrMaCIóN para lOS aUTOrES

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La revista Científica, editada por la Universidad Científica del Sur, tiene como objetivo promover el avance de la ciencia y la tecnología en las diversas áreas del conocimiento, ciencias formales, naturales y tecnología. Está orientada a investigadores científicos, docentes, estudiantes universitarios y, en general, a todos aquellos que crean y aplican el conocimiento científico.

Científica publica trabajos originales e inéditos de carácter científico y tecnológico en el campo de las ciencias. Acepta, preferentemente, trabajos que expresen resultados valiosos, producto de la investigación científica básica o aplicada; así como los de divulgación que, por su importancia y claridad de exposición, constituyan material valioso para fines docentes. Pueden incluirse trabajos presentados a congresos científicos, pero no publicados por sus organizadores u otros.

También se aceptarán artículos de revisión de hasta aproximadamente 12 páginas, cartas al editor con una extensión no mayor de 10 páginas, así como notas informativas relacionadas con el quehacer en el área de la investigación.

Los artículos propuestos para su publicación en la revista serán remitidos adjuntando el currículum vitae resumido del autor, con teléfonos, correo electrónico y dirección postal. El Comité Editor asignará el texto propuesto a uno o dos árbitros externos o internos para su evaluación. Estos árbitros remitirán su opinión dentro de los 30 días calendario siguientes. De haber controversia, el Comité Editor tendrá facultad dirimente, en un plazo de 15 días más.

Los trabajos y otros artículos a publicar serán remitidos con carta a nuestro Director, firmada por todos los autores y coautores en original y copia, y además deberá entregarse el texto del artículo, incluidas tablas y figuras, en disquete, disco compacto, USB o remitidas por correo electrónico, de acuerdo con las siguientes características:

1. El texto completo debe estar escrito en formato Microsoft Word; tamaño de página A4; márgenes izquierdo, derecho y superior de 3 cm, inferior de 2 cm, espacio 1,5; fuente Times New Roman; estilo de fuente regular y tamaño 12. Se imprimirá de manera vertical. Para todo el texto, excepto el título, deberá usarse la opción “justificar”. El título deberá centrarse.

2. Los idiomas de publicación son dos: español e inglés.

3. Los nombres de los autores, con numeración colocada como superíndice, van después del título. Por esta numeración, al pie de página se indicará la institución, facultad o departamento al que pertenecen los autores. Uno de los autores agregará su dirección postal o correo electrónico.

4. El título del artículo se consignará en español, primero, y luego en inglés. Además, se presentarán dos resúmenes, uno en español y otro en inglés (abstract) con extensión entre 100 y 250 palabras. Después de cada resumen se deberán incluir entre tres y seis palabras clave (en español e inglés).

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Información para los Autores

5. Para los artículos originales se recomienda que el texto desarrolle las siguientes secciones: I. INTRODUCCIÓN, II. MATERIALES Y MÉTODOS, III. RESULTADOS, IV. DISCUSIÓN, V. AGRADECIMIENTOS y VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.

6. Las tablas y figuras deben ser originales. No deben denominarse cuadros o gráficos y, en caso de tomarse de otra fuente se indicará claramente el libro o artículo en el que se han publicado inicialmente; además, se acreditará haber recibido autorización expresa para su publicación. Deben tener numeración secuencial arábiga seguida de punto (en negritas). A continuación, se coloca la leyenda que explique su significado. La leyenda de una tabla se coloca en la parte superior, a diferencia de las figuras, en las que se la ubica en la parte inferior. Tablas y figuras deberán insertarse apropiadamente en el texto mismo. No en un anexo.

7. Las referencias bibliográficas se harán según la Convención de Vancouver por orden de aparición, con un máximo de 20 referencias. Los libros, según la secuencia: autores, título, número de edición, editorial, lugar de edición, fecha, volumen y páginas. Cuando los libros son compilados por un editor y contienen capítulos escritos por diversos autores se harán por: autor(es), título, editor, Nº de edición y volumen, si los hubiera; nombre del libro, lugar de edición, fecha y páginas. Las menciones a revistas se harán por autor(es), título del artículo, nombre de la revista, año de la publicación, volumen y, opcionalmente,

Nº de la revista; y, finalmente, páginas del artículo en referencia. Las tesis se citarán por autor, título de la tesis, grado o título profesional al que se opta, universidad, lugar y páginas. Las páginas web se citan como se ha indicado para revistas en general, pero deberán incluir necesariamente la organización responsable de la página web, la dirección electrónica subrayada y, entre paréntesis, la fecha más reciente de acceso. Se incluye un ejemplo para el caso de referencias en revistas: Friedenstein AJ, Piatetzky S, Petrakova KV. Osteogenesis in transplants of bone marrow cells. J Embryol Exp Morphol. 1966; 16: 381-90. Deberán cumplirse estrictamente el orden, así como los signos de puntuación que se muestran en el ejemplo.

Se pueden incluir comentarios a pie de página, pero no bibliografía. Esta última se ubicará al final, en la sección Referencias.

Los autores deben indicar claramente el correo que aparecerá en la revista y al que deberán dirigirse los lectores para comentarios, consultas y observaciones.

Los artículos, de acuerdo con lo antes indicado, serán remitidos por correo electrónico o entregados personalmente en USB, CD o disquete.

Los autores de los trabajos publicados son los únicos responsables de la autenticidad del artículo y de las opiniones expresadas en los mismos.

CIENTÍFICARevista CIENTÍFICA Vol 8 N° 2, mayo-agosto 2011

[email protected] Fondo Editorial. Universidad Científica del Sur

Carretera Antigua Panamericana Sur km 19 - Villa El Salvador

Tel.: +511 610 6400 anexo 528Tiraje: 600 ejemplares

Cientifica Vol. 8 N° 2

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