CICLO FORMATIVO DE GRADO MEDIO TÉCNICO EN …

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1 Farmacia a Distancia OPERACIONES BÁSICAS DE LABORATORIO CICLO FORMATIVO DE GRADO MEDIO TÉCNICO EN FARMACIA. MÓDULO: OPERACIONES BÁSICAS DE LABORATORIO. Autoras: Elena Santana Marrero. Francisca Rodríguez Dguez.

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Farmacia a Distancia OPERACIONES BÁSICAS DE LABORATORIO

C I C L O F O R M AT I V O D E G R A D O M E D I O

T É C N I C O E N FA R M A C I A .

M Ó D U L O :

O P E R A C I O N E S B Á S I C A S D E

L A B O R AT O R I O .

Autoras: Elena Santana Marrero. Francisca Rodríguez Dguez.

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Farmacia a Distancia OPERACIONES BÁSICAS DE LABORATORIO

Autoras: Elena Santana Marrero. Francisca Rodríguez Dguez.

U N I D A D D E T R A B A J O N º 1

M AT E R I A L E S

H A B I T U A L E S E N E L

L A B O R AT O R I O

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Farmacia a Distancia OPERACIONES BÁSICAS DE LABORATORIO

U . T. 1 M AT E R I A L E S H A B I T U A L E S E N E L

L A B O R AT O R I O

INDICE

1. Material básico de uso en el laboratorio.

1.1. Material de vidrio y/o de plástico.

1.2. Material eléctrico.

1.3. Material accesorio.

1.4. Material óptico: microscopio.

1.4.1. Partes de un microscopio óptico.

1.4.2. Propiedades ópticas del microscopio.

1.4.3. Material para la visualización microscópica.

2. Servicios auxiliares del laboratorio.

2.1. Instalación de frío en el laboratorio.

2.1.1. Frigoríficos.

2.1.2. Congeladores y ultra congeladores.

2.1.3. Baños fríos.

2.1.4. Refrigerantes.

2.2. Sistemas de calefacción.

2.2.1. Estufa de cultivo.

2.2.2. Estufa de desecación.

2.2.3. Mufla.

2.2.4. Baños termostáticos.

2.2.5. Bloques calefactores-agitadores.

2.2.6. Botellas e instalación de gases.

3. Depuración del agua en el laboratorio.

3.1. Aplicaciones del agua en el laboratorio.

3.2. Composición del agua.

3.3. Tipos de agua en el laboratorio.

3.4. Procedimientos de depuración del agua en el laboratorio.

4. Trabajo a vacío en el laboratorio.

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U . T. 1 M AT E R I A L E S H A B I T U A L E S E N E L

L A B O R AT O R I O

Reconocer el material de laboratorio.

Conocer las funciones y el uso de cada material.

Saber elegir el material adecuado en cada práctica.

Manejar con soltura el material.

Realizar el mantenimiento de los aparatos.

EN ESTA UNIDAD APRENDEREMOS A:

ESTUDIAREMOS TELEMATICAMENTE:

La clasificación del material.

La descripción del material de laboratorio.

Funciones y utilidad del material de laboratorio.

Manejo del material de laboratorio.

Mantenimiento de aparatos y precauciones en su manejo.

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Página 5 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES EN

EL LABORATORIO

1. MATERIAL BÁSICO DE USO EN EL

LABORATORIO

En el laboratorio, para poder desarrollar con corrección las distintas

técnicas, nos ayudamos de una gran variedad de material y por lo tanto hay

que conocer la utilidad y manejo del mismo. El material de laboratorio

según su naturaleza se puede clasificar en:

Material de vidrio y/o de plástico.

Material eléctrico.

Material accesorio.

Material óptico.

1.1. Material de vidrio y/o plástico.

El material más utilizado en el laboratorio es el borosilicato de sodio y

aluminio, que se caracteriza por tener una gran resistencia térmica, no

obstante, puede ser atacado por el fuego y soluciones concentradas de

álcalis.

El vidrio de aluminio silicatado tiene mayor resistencia que el anterior, pero

menor resistencia térmica.

En la actualidad se usa mucho el material desechable, teniendo en cuenta

que este material es atacado por

disolventes orgánicos y ácidos fuertes.

PIPETAS.- Son tubos cilíndricos con

estrechamiento en la punta, pudiendo

estar graduadas o no. Se utilizan para

suministrar pequeñas cantidades de

líquidos, inferiores a 20 ml y exactos.

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Página 6 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES

EN EL LABORATORIO

Existen dos tipos fundamentales de pipetas, las volumétricas y las

graduadas. Las graduadas presentan una graduación en mililitros,

décimas de mililitros e incluso centésimas de mililitro. Las

volumétricas a diferencia de las graduadas suministran un

volumen fijo de líquido y en su parte central llevan un

ensanchamiento. Una línea marcada en la parte superior indica

hasta dónde se debe llenar para obtener el volumen que se desea

dispensar. Un caso especial dentro de las volumétricas son las

pipetas de doble enrase, en las que el volumen que quiere

dispensarse queda contenido entre dos marcas que hay en el vidrio.

Existen otros tipos de pipetas muy utilizadas en el laboratorio

clínico como son las pipetas de Pasteur que no poseen

graduación y se utilizan para trasvasar pequeños volúmenes, y las

pipetas de dilución como la de Thoma utilizadas para recuento de

células en líquido biológicos. Éstas constan de un tubo capilar

graduado que se continúa en su extremo superior con una

dilatación en forma de ampolla. La aspiración se realiza mediante

un tubo de goma que posee una boquilla en uno de sus extremos.

Existen diversos tipos de pipetas dependiendo de la utilidad de las mis-

mas:

• Simples o graduadas

• Volumétricas o aforadas.

• Pasteur

• Pipetas cuentaglóbulos (Thoma)

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Página 7 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES EN

EL LABORATORIO

PIPETAS AUTOMÁTICAS.- También llamadas micropipetas. Son

pipetas de pistón, con punta de plástico desechable. Tienen en la parte

superior un émbolo para llenado y vaciado; algunas tienen una

posición para expulsar la punta. Las hay de volumen fijo y variable.

Éstas se utilizan para dispensar de forma exacta pequeños volúmenes,

generalmente inferiores a 1 ml. Su capacidad viene expresada en

microlitros, siendo las de 1000 microlitros, las de mayor capacidad.

Su volumen puede ser fijo o

variable.

CAPILARES.- Son tubos cilíndricos de 70-75 mm de longitud y de

1,5 mm de diámetro. Su llenado se efectúa por simple contacto con la

superficie del líquido. Se utilizan en Hematología, sobre todo.

BURETAS.- Son pipetas con calibración de volumen que tienen una

llave en su extremo inferior para controlar el caudal de salida. Se

colocan en vertical con ayuda de un soporte metálico. Se utilizan para

valoraciones volumétricas.

Las técnicas de manejo de pipetas y

micropipetas se verán en el labora-

torio.

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Página 8 U.T.1 MATERIALES HABITUALES

EN EL LABORATORIO

PROBETAS.- Son tubos cilíndricos

calibrados, con una base para su

apoyo. La mayoría de ellas tienen

un pico que facilita el vertido en

otros recipientes. Se utilizan para

mediciones de volúmenes mayores

de 20 ml. Los volúmenes

habituales son: 25, 50, 100, 250,

500 y 1000 ml.

TUBOS.- Son recipientes cilíndricos que sirven para contener las

muestras a utilizar. Los hay de 3 tipos:

Tubos de ensayo: son aquéllos de más de 7 mm de diámetro.

Tubos de hemólisis: tienen 7 mm de diámetro y longitud de

5 a 10 cm.

Tubos de centrífuga: se caracterizan por ser más resistentes

que los anteriores, con fondo esférico o cónico. Se utilizan

para centrifugar muestras.

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Página 9 U.T.1 MATERIALES HABITUALES

EN EL LABORATORIO

VASOS DE PRECIPITADO.- Son

recipientes cilíndricos, de mayor diámetro

que los tubos, con calibración volumétrica

aproximada, utilizada para contener

soluciones y reactivos. Los volúmenes más

corrientes utilizados son de 25, 50, 100 ,250

y 500 ml.

MATRACES.- Los hay de 2 tipos:

Erlenmeyer: recipientes de forma cónica

con boca cilíndrica que contienen una

escala volumétrica orientativa. Se utilizan

para contener soluciones: 50, 100, 250,

500 y 1000 ml.

Aforados: recipientes de forma ovalada y

fondo plano con una boca acabada en un

largo y estrecho tubo cilíndrico (cuello)

donde se encuentra el anillo de enrase. El

extremo del cuello se encuentra cerrado

por un tapón hermético de plástico o de

vidrio esmerilado.

Están fabricados con vidrio de muy buena

calidad, neutro, resistente a la

temperatura. Las capacidades más

habituales son 10, 25, 50, 100, 250, 500 y

1000 ml. Se utilizan para hacer

mediciones volumétricas exactas.

Poco a poco te irás familiari-

zando con el material en las

prácticas.

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Página 10 U.T.1 MATERIALES HABITUALES EN

EL LABORATORIO

VARILLAS AGITADORAS.- Son

varillas de vidrio macizo que se

utilizan para agitar o remover.

Nunca deben ser huecas.

PORTAOBJETO.- Placa rectangular de vidrio donde se coloca la

muestra a examinar al microscopio.

Se emplea en la preparación de

extensiones.

CUBREOBJETO.- Placa

cuadrangular de vidrio, de menor

espesor que la anterior, sirve para

proteger la muestra colocada en el

portaobjetos y para mejorar su

visualización al microscopio.

Los matraces aforados han de llenarse hasta la

señal, quedando el menisco producido por el lí-

quido tangente a la parte superior de la marca

indicadora.

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Página 11 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES

EN EL LABORATORIO

EMBUDOS.- Son conos huecos de cristal cuya parte estrecha

acaba en un cilindro de pequeño diámetro. Se utilizan para filtrar

soluciones con filtros de pliegues y para trasvasar líquidos.

CRISTALIZADORES.- Son a

modo de cubetas de distintas

formas, que se utilizan para

recoger los residuos de las

tinciones.

BARRAS PARALELAS.- Son dos

barras paralelas unidas en sus

extremos. Se utilizan como soporte

de portaobjetos.

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Página 12 U.T.1 MATERIALES HABITUALES

EN EL LABORATORIO

AMPOLLAS DE DECANTACIÓN.- Recipientes de forma oval,

que tienen en su parte superior una abertura con tapón y en la parte

inferior acaban en un tubo cerrado por una llave de paso. Se

utilizan en extracciones líquido- líquido, aceite-agua.

PLACAS DE PETRI.- Tienen gran utilización en Microbiología.

Son cajas cilíndricas bastante planas, que normalmente se utilizan

para poner los medios de cultivo sólidos y poder realizar en éstos

las siembras. Normalmente son de plástico y de un solo uso.

CAMPANAS DURHAM.- Tubos muy pequeños utilizados en

medios de cultivo líquidos para observar producción de gas por el

microorganismo en estudio.

VIDRIO DE RELOJ.- Son

vidrios gruesos redondeados y

curvados, que se utilizan

normalmente para pesar sobre

ellos productos sólidos.

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Página 13 U.T.1 MATERIALES HABITUALES EN

EL LABORATORIO

DESECADORES.- Son recipientes de vidrio con bordes esmerilados con

tapa también esmerilada, que cierran herméticamente. En su interior se

encuentra una rejilla con orificios que

soportan las sustancias que se quieren

desecar.

Bajo esta rejilla se colocan las

sustancias que absorben humedad. Se

utilizan para enfriar las muestras

procedentes de la estufa o el horno de

mufla, que posteriormente vayan a

pesarse.

1.2. Material eléctrico.

CENTRÍFUGA.- Aparato que consta de un dispositivo giratorio, donde

se colocan los tubos. Se utiliza para separar los elementos que forman un

mismo compuesto. Su velocidad y tiempo de giro son regulables, las hay

refrigeradas. Dependiendo de su velocidad podemos distinguir entre

centrífugas de velocidad normal (hasta 6.000 r.p.m. y una FCR de 7300

g), microcentrífugas (10 000-15 000 r.p.m. y una FCR hasta 14 000 g) y

ultracentrífugas (por encima de 90 000 r.p.m. y más de 100 000 g); estas

últimas se utilizan sobre todo en laboratorios de investigación.

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Página 14 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES

EN EL LABORATORIO

BAÑOS MARÍA.- Recipientes destinados a contener agua, con

un sistema calefactor termostatizado. Puede tratarse de un sistema

compacto (generalmente metálico con cobertura interior de

aluminio) o de cubeta metálica o de metacrilato con posibilidad de

adaptar un sistema calefactor (tipo fuera-borda). Las

características que debemos conocer son: a qué temperatura

trabaja (por ejemplo: 30-60°, 30-110°), la precisión de medida

(está en función del termostato, por ejemplo, +/- 1°), si tiene o no

agitación (permite una distribución más uniforme del calor) y si

admite o no tapa (importante en los baños en los que se trabaja a

alta temperatura).

Si bien los baños llevan termómetros incorporados, es

recomendable, en trabajos delicados, introducir también un

termómetro con calibración homologada o al menos comprobar

periódicamente la veracidad de la lectura del termómetro que

incorpora. Se utilizan para incubar muestras a temperatura

constante.

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Página 15 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES

EN EL LABORATORIO

ESTUFAS POUPINEL.- Las estufas

son aparatos que permiten mantener

en su interior una determinada

temperatura durante largo tiempo.

Proporcionan calor seco y se utilizan

para secar y esterilizar el material.

También se denomina estufa u horno

Pasteur. Reguladas hasta 200-300 º C.

REFRIGERADORES Y

CONGELADORES.- Se utilizan

fundamentalmente para la

conservación de muestras, controles y

reactivos. Por lo general, en los

laboratorios existen de dos tipos de

congeladores: -20 °C y -70 °C. En

determinados laboratorios pueden

encontrarse depósitos de nitrógeno

líquido (temperatura -195°C).

AGITADORES.- Son dispositivos mecánicos de agitación

continúa. Se utilizan para mezclar y

homogeneizar soluciones mediante

agitación. Los hay de varios tipos:

Vortex: somete la muestra a una

agitación más o menos rápida. Sirven

para mezclar soluciones contenidas en

tubos o pequeños recipientes.

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Página 16 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES EN

EL LABORATORIO

Agitadores magnéticos: mezclan las muestras mediante el movimiento

que producen en la misma un sistema de imanes. Pueden llevar

incorporado un sistema calefactor, ya que la homogeneización de

algunas soluciones, es más fácil a temperaturas elevadas. Las

muestras estarán contenidas en matraces o vasos de precipitado.

Agitadores rotativos de bandeja: suelen ser de baja velocidad y con

una amplitud de oscilación media-alta. Se trata de superficies planas

de medio o gran tamaño donde se depositan portas o placas para su

agitación en reacciones de aglutinación. Producen el mismo efecto que

la agitación manual, pero con mayor reproductibilidad y la posibilidad

de procesar más muestras.

Agitadores rotativos de tubos: semejantes a los anteriores, pero

formados por rodillos paralelos que giran al unísono. Se utilizan, por

ejemplo, para homogeneizar las muestras de sangre total previas al

recuento o para mezclar un liofilizado recién reconstituido sin que se

forme espuma.

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Página 17 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES EN

EL LABORATORIO

AUTOCLAVE.- Se utiliza para esterilizar

mediante calor húmedo. Puede ser de sobremesa,

empotrado, o de pie. Las características que han

de valorarse son la temperatura y la presión que

pueden alcanzar.

ESTUFA DE

CULTIVO.- Recinto con temperatura interior

constante y regulable. Regulada normalmente

hasta 60-80 º C. La temperatura normal de

cultivo es de 37 ºC. Se utiliza para incubar

cultivos biológicos y permite controlar

perfectamente la temperatura y, en algunas de

ellas, la humedad.

Cuenta con un termómetro, aparte del regulador termostato, que nos da

directamente la temperatura interior.

MECHERO ELÉCTRICO.-

También puede ser de gas o

alcohol.

FOTÓMETRO Y ESPECTROFOTÓMETRO.- Instrumentos

utilizados para determinar cuantitativamente algunas sustancias

basándose en su espectro de absorción.

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Página 18 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES EN

EL LABORATORIO

PH-METROS.- Son sistemas

electrónicos de medición de pH .Se

utilizan habitualmente para medir

con gran precisión el pH de una

disolución química u otra sustancia,

como pueden ser muestras. Tienen

indicador de pH, de mV, y suelen

registrar también la temperatura.

DESTILADOR.- Aparato destinado a

obtener agua destilada a partir de la red de

agua.

PLACA CALEFACTORA.- Consiste

en una superficie metálica colocada

sobre una resistencia. Algunas llevan un

regulador de temperatura, lo que

permite mantener una sustancia a una

temperatura constante durante un cierto

tiempo.

1.3. Material accesorio.

GRADILLAS.- Son soportes para tubos.

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Página 19 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES

EN EL LABORATORIO

ESCURRETUBOS.- Se utilizan para el

secado de tubos tras su limpieza.

PREPIPETAS.- Dispositivos que se

acoplan a la parte superior de las

pipetas y mediante diversos sistemas

realizan la aspiración de la muestra.

PINZAS DE MADERA.- Se utilizan como

aislantes para el manejo y calentamiento de

tubos de ensayo y portaobjetos.

MORTEROS.- Dispositivos que

constan de un cuenco y un brazo o

mango: se utilizan para homogeneizar y

pulverizar.

BALANZAS.- Dispositivos destinados a la medida de la masa de

sustancias. Las hay de diversos tipos según los parámetros de

carga máxima, precisión, exactitud y sensibilidad.

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Página 20 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES

EN EL LABORATORIO

Clasificación de las balanzas:

Granatarios: con carga máxima de entre 100 y 250 g y una

sensibilidad que oscila entre 10 mg y 5 mg.

De Precisión: con una carga

máxima entre 25 y 50 gramos y con

sensibilidad de 0.001 mg. Debido a

su alta sensibilidad están protegidas

por una urna de cristal.

Analíticas: Son balanzas de

alta precisión y sensibilidad. Son

monoplato y también están

protegidas en un recipiente cerrado.

Las pesas están colgadas de ganchos

que se apoyan en varillas

suspendidas de la cruz de la balanza

y se manejan mediante mandos.

Poseen una carga máxima de unos

200g y una sensibilidad igual o

superior a 0.0001g.

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Página 21 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES

EN EL LABORATORIO

Electrónicas : Son balanzas de un solo

plato, tienen bastante precisión en la

medida. Pesan generalmente hasta 200

gramos con una sensibilidad variable

según los modelos. Las de menor

sensibilidad pesan dg y las de mayor

hasta mg.

DISPENSADORES.- Son sistemas que

proporcionan repetidamente un volumen

seleccionado. Se utilizan principalmente

para la adición de reactivos a la muestra. Se

acoplan a los recipientes que contienen los

reactivos.

FRASCO LAVADOR.- Recipiente de

plástico para agua destilada, lleva un

dispositivo en forma de sifón para presión

manual.

ESPÁTULAS.- Instrumentos metálicos utilizados para el trasvase

de sustancias sólidas.

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Página 22 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES

EN EL LABORATORIO

TRÍPODE.- Soporte metálico para el

calentamiento de recipientes a la llama.

CÁPSULAS DE PORCELANA.-

Son pequeños recipientes de fondo

plano y son de porcelana. Se

utilizan para contener pequeñas

cantidades de productos, o bien en

las fases de evaporación.

REJILLA CON CERÁMICA.-

Entramado de alambre con un

aislamiento central de cerámica que

evita el contacto directo de la llama.

1.4. Material óptico.

MICROSCOPIO.-

Es un instrumento óptico destinado a la observación de objetos

extremadamente pequeños. Consta de un sistema de iluminación

para poder visualizar el objeto y de un sistema de lentes para

aumentar la imagen. En función de la fuente de iluminación

utilizada podemos distinguir dos tipos:

• Ópticos: utilizan la luz para iluminar el objeto.

• Electrónicos: en vez de luz emiten sobre el objeto un haz de

electrones y en vez de lentes usan campos magnéticos.

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Página 23 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES EN

EL LABORATORIO

En el Laboratorio de Análisis Clínico es ampliamente utilizado el

microscopio óptico para la observación de células, microorganismos,

cristales, reacciones inmunológicas, etc. Se basa en la propiedad que

tienen las lentes convergentes de producir en determinadas condiciones

imágenes reales.

1.4.1. Partes de un microscopio óptico:

Elementos de sustentación:

Son aquellos que hacen de soporte a los elementos ópticos y a la fuente de

iluminación:

Base o pie: sirve de base y da estabilidad al microscopio. En su

interior está localizada la fuente de iluminación.

Brazo: une el pie con el tubo. Es la parte por donde se debe coger

para moverlo.

Tubo: sostiene en sus extremos los oculares y los objetivos y los

mantiene a la distancia justa para que la imagen se vea correctamente

(generalmente 160mm).

Portaoculares: en el extremo superior del tubo, posee un sistema

mecánico de ajuste de la distancia interpupilar y un sistema de giro

para observar desde otra posición.

Revólver porta objetivos: gira alrededor del eje del tubo. Permite

colocar en posición de trabajo los objetivos correspondientes.

Platina porta preparaciones: placa horizontal que sale del brazo

sirve para sostener las preparaciones, está perforada en su centro

para dar paso a los rayos luminosos. Posee una pinza para sujetar el

portaobjetos y un carro provisto de unos tornillos para

desplazamiento antero-posterior y lateral de la preparación, que

queda registrado en dos escalas móviles (Nonius), lo que permite

establecer la posición exacta de cualquier zona de la preparación.

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Página 24 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES

EN EL LABORATORIO

Elementos ópticos y relacionados:

Objetivos: son tubos que contienen en

su interior un sistema de lentes de

diferentes aumentos. Generan una

imagen real, invertida y aumentada del

objeto. Hay dos tipos de objetivos, los

secos que se utilizan directamente

(entre el objeto y la lente sólo hay aire) y los de inmersión

que necesitan interponer un líquido (aceite de inmersión)

entre la lente y la preparación. Los de mayor aumento tienen

un sistema de amortiguación que impide su rotura al chocar

con la preparación. Tienen dibujado un anillo coloreado que

indica el aumento, además de indicarlo con un nº seguido de

un signo x. Los más frecuentes son: los de 4x, 10x, 40x

(objetivos secos) y el de 100x (objetivo de inmersión).

Además figura la apertura numérica, que cuando es mayor de

1, indica que precisa el uso de aceite de

inmersión al igual que el anillo negro que

aparece en extremo distal de los objetivos

de 100x.Los objetivos de menor aumento

se emplean para tener visión general de la

preparación y para observar elementos de

gran tamaño. El de inmersión se suele

usar en preparaciones teñidas para estudio

morfológico celular.

Oculares: colocados en la parte superior del tubo, son lentes

que captan la imagen proporcionada por los objetivos y la

amplían. Son dos (cada uno consta de dos lentes) que están

unidos por mecanismos que

permiten ajustar la distancia

interpupilar. El aumento se

indica como el de los objetivos,

los más usados son los de 10x,

que aumentan 10 veces la

imagen proporcionada por los

objetivos. Uno de los oculares

lleva un anillo de ajuste para

poder enfocar la imagen de forma nítida para los dos ojos.

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Página 25 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES

EN EL LABORATORIO

Condensador: sistema de lentes (generalmente dos) que

concentra la luz, procedente de la fuente de iluminación,

sobre la preparación. Está situado entre fuente luminosa y

platina. Posee un tornillo para elevarlo y aumentar la

iluminación o bajarlo y reducir la iluminación, y otro para

centrarlo con respecto al objetivo. El más usado es el de Abbe

que lleva incorporado el diafragma.

Diafragma: es un dispositivo que regula la anchura del haz

de luz que llega al objeto. Posee una palanca para abrirlo o

cerrarlo, cuanto más se cierra, más mejora el contraste y más

empeora la resolución. Los condensadores generalmente lo

llevan incorporado.

Tornillo macrométrico o de avance rápido: mueve la platina

hacia arriba y hacia abajo, acercando o separando

rápidamente la preparación al objetivo.

Tornillo micrométrico o de ajuste fino: permite enfocar con

precisión ya que mueve muy lentamente la platina hacia

arriba y hacia abajo.

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Página 26 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES EN EL

LABORATORIO

Fuente de iluminación

Lámpara de luz visible: suele ser halógena con un espejo que dirige

la luz hacia el condensador.

Mando de encendido / apagado.

Regulador de intensidad luminosa: a veces está incorporado al

interruptor.

Filtro: son cristales de color que se colocan encima de la lámpara

para facilitar la visualización de las preparaciones. El más usado es el

de color azul que transforma la luz amarilla en blanca en el

microscopio de campo claro, que es el más utilizado.

1.4.2. Propiedades ópticas del microscopio:

En el microscopio hay que tener en cuenta dos propiedades: aumento total

y poder de resolución.

La primera de ellas, el aumento total, es función del objetivo y del ocular,

según la capacidad de amplificación de ambas lentes. Si el aumento del

objetivo es de diez y el del ocular lo mismo, el del microscopio será igual

a cien, es decir, la imagen del objeto observado será cien veces mayor.

El poder de resolución es la capacidad de hacer visibles los más finos

detalles de un objeto. Al llegar al límite del poder de resolución la imagen

comienza a verse borrosa. El poder de resolución depende de la estructura

del objetivo.

1.4.3. Material para la visualización microscópica.

Portaobjetos o porta: lámina de vidrio que sirve de soporte de la muestra.

Cubreobjetos o cubre: lámina fina de vidrio que cubre la muestra.

Aceite de inmersión: imprescindible para observar con el objetivo de

inmersión.

Para observar los objetos al microscopio

hay que prepararlos fijándolos y tiñéndo-

los o colocándolos entre porta y cubreob-

jetos.

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Página 27 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES EN

EL LABORATORIO

2. SERVICIOS AUXILIARES DEL

LABORATORIO.

El laboratorio dispone normalmente de una serie de instalaciones o

servicios generales de gas, agua, aire comprimido, vacío, electricidad,

etc. de los cuales el responsable del laboratorio debe tener constancia que

cumplen las normativas de carácter estatal, autonómico o local que les

afecten, que se hallen en buen estado y estén sometidas a un

mantenimiento adecuado que garantice tanto el cumplimiento de la

reglamentación comentada, como un riesgo nulo o escaso de provocar

daños al personal que las utiliza.

2.1. Instalación de frío en el laboratorio.

2.1.1. Frigoríficos.

Deben emplearse frigoríficos de seguridad aumentada cuando se guarden

en su interior sustancias que puedan presentar peligro de inflamación o

explosión cuando el frigorífico esté, además, situado en un área con

atmósfera inflamable. Aunque en general, pueden utilizarse frigoríficos

domésticos para guardar productos inertes.

Los frigoríficos presentan riesgos de incendio y explosión/deflagración,

cuando se guardan en su interior productos que pueden desprender

vapores inflamables si los frascos que los contienen no están bien

cerrados (ocurre a menudo) o tiene lugar un fallo de corriente que pueda

producir un recalentamiento de algún producto o propiciar la explosión

de algún recipiente. .

Para la prevención de estos riesgos:

Emplear frigoríficos de seguridad aumentada que no dispongan de

instalación eléctrica interior y, preferiblemente, los especialmente

preparados para guardar productos inflamables que estén

homologados.

No guardar recipientes abiertos o mal tapados en el frigorífico.

Utilizar recipientes capaces de resistir la sobrepresión interna en

caso de recalentamiento accidental.

Controlar periódicamente la temperatura interior del frigorífico para

garantizar que la temperatura es la correcta.

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Página 28 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES EN

EL LABORATORIO

2.1.2. Congeladores y ultra congeladores.

Los congeladores suelen tener su temperatura interior entre -18ºC y

-20ºC, mientras que los ultra congeladores pueden llegar a -70ºC.

En todos los casos, es importante etiquetar correctamente los

productos que se guardan para evitar errores y poder comprobar la

fecha de elaboración o de caducidad.

2.1.3. Baños fríos.

Normalmente, los contactos puntuales y poco intensos con el líquido

refrigerante no producen daños ya que la evaporación es instantánea, pero

un contacto prolongado es peligroso. Los principales riesgos que

presentan son:

Quemaduras por frío

Desprendimiento de vapores.

Son normas generales para la prevención de estos riesgos:

No introducir las manos sin guantes protectores en el baño frío.

Introducir los recipientes en el baño frío lentamente con el fin de

evitar una ebullición brusca del líquido refrigerante.

Recuerda

Cuando se congela un líquido aumenta de

tamaño, de modo que nunca se debe lle-

nar el frasco contenedor al máximo, ya

que puede romperse.

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Página 29 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES EN

EL LABORATORIO

2.1.4. Refrigerantes.

Los refrigerantes funcionan normalmente con circulación de agua corriente

a través de conexiones mediante tubos flexibles, aunque en algunos casos se

emplea un circuito cerrado, con enfriamiento del agua en un baño

refrigerado.

Los riesgos más habituales en el uso de refrigerantes son: rotura interna con

entrada de agua en el medio de reacción que puede provocar incendio,

explosión o emisión de productos tóxicos, fuga de vapores por corte en el

suministro de agua e inundación en el caso de desconexión del tubo.

Disponer de un sistema de seguridad que interrumpa el aporte de calor en

caso de que se corte el suministro de agua, asegurarse de que los tubos están

bien sujetos, y renovarlos periódicamente, son medidas eficaces para la

prevención de los riesgos mencionados.

2.2. Sistemas de calefacción. En muchas operaciones del laboratorio es necesario aumentar la temperatura

de los productos que se utilizan; para realizar estas operaciones utilizaremos

estufas, baños termostáticos y baños calefactores.

2.2.1. Estufas de cultivo: la estufa de cultivo se utiliza en microbiología

para calentar sustancias, de forma que se facilite el crecimiento de

determinados microorganismos. Las temperaturas pueden variar entre 22 y

44,5 aunque a veces se pueden necesitar en determinadas aplicaciones hasta

60ºC.

Las estufas de cultivo generalmente son eléctricas pero algunas pueden

conectarse a bombonas de CO2, ya que hay microorganismos que necesitan

una concentración determinada de este gas. En el interior de las estufas de

cultivo hay estantes de rejilla o láminas perforadas de forma que el calor

pueda diseminarse uniformemente en toda la cámara. La puerta anterior

suele ser de vidrio, par poder observar el interior sin pérdida de temperatura.

Para obtener un óptimo rendimiento es necesario tener en cuenta:

Dejar un mínimo de 25 mm entre las placas de Petri o las gradillas y las

paredes de la estufa y no depositarlas nunca directamente sobre el

suelo de la cámara interior de la estufa.

Las placas de Petri no deben apilarse en torres de más de seis

unidades.

Cuanto más material se introduce en la estufa, más tiempo tardará

ésta en alcanzar la temperatura de trabajo.

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EL LABORATORIO

2.2.2. Estufas de desecación: se utilizan para eliminar la

humedad de las distintas sustancias. Generalmente trabajan a

105 o 110ºC, pero algunos productos pueden requerir hasta

300ºC.Estas estufas también se utilizan en laboratorio de

microbiología para esterilizar material termorresistente.

Una modalidad es la estufa de vacío, que

tiene conectado un sistema de vacío que permite eliminar

la humedad de la sustancia con una temperatura inferior a

los 60ºC.

2.2.3. Mufla: la mufla es una estufa capaz de calentar su

interior desde 200ºC hasta 1400ºC. Sus resistencias calientan muy deprisa

por el material refractario que tiene. Se utiliza para calcinar sustancias.

2.2.4. Baños termostáticos. Son dispositivos de calentamiento basados en

la interposición de un elemento entre la fuente de calor y el objeto que se

calienta.

Baño María: es el baño termostático más habitual. Su principal aplicación

es mantener determinadas disoluciones a temperatura adecuada y

constante, de forma que se facilite la reacción adecuada: reacciones

enzimáticas, en microbiología, para deshacer agares o para preparar

medios de cultivo, para incubar tubos inoculados con microorganismos.

CONSEJOS DE SEGURIDAD.

El riesgo más común del uso de las estufas es la quemadura; pero

también pueden sobrecalentarse e incendiarse o causar into-

xicaciones por emisión de vapores.

Habrás de tomar medidas para eliminar esos riesgos:

Cuida de no tocar las superficies calientes.

Utiliza guantes de seguridad y pinzas.

Vigila que la estufa no sobrepase la temperatura de trabajo.

Asegúrate de llevar a cabo un mantenimiento adecuado de las

estufas.

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Página 31 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES EN

EL LABORATORIO

Baño de arena: en los baños de arena, ésta cubre

una plataforma que está conectada a la corriente

eléctrica, que es la que le proporciona el calor

necesario.

Otro tipo son los baños de aceite, en los cuales el

elemento intermedio es un aceite especial. Estos dos

tipos se utilizan cuando se necesita calentar a

temperaturas superiores a 100ºC, por ejemplo para

concentrar disoluciones.

2.2.5. BLOQUES CALEFACTORES-AGITADORES.

Son bloques con orificios donde pueden

introducirse tubos resistentes al calor,

además de calentar, estos bloques agitan

el contenido de los recipientes con el fin

de facilitar la disolución de la muestra,

lograr la evaporación suave de un líquido,

incubar cultivos microbianos, etc.

CONSEJOS DE SEGURIDAD.

La utilización de baños termostáticos conlleva el riesgo de quema-

duras, de rotura del recipiente por calor y del desprendimiento de vapores

o humos. Para minimizar estos riesgos sigue las normas siguientes:

No llenes demasiado el envase que vayas a sumergir en el baño ca-

liente.

El recipiente con la muestra no debe flotar, fíjalo con unas pinzas.

Los recipientes que vayas a sumergir deben ser de vidrio resistente al

calor.

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Página 32 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES EN EL

LABORATORIO

2.2.6. Botellas e instalación de gases.

En el laboratorio se suelen utilizar gases a presión suministrados a través

de una instalación fija o directamente de la botella (bombona). En ambos

casos hay que observar determinadas precauciones y disponer de un

protocolo de utilización. Las posibles situaciones de fugas e incendios

deben estar contempladas en el plan de emergencia del laboratorio. La

utilización de botellas, aún disponiendo de instalación de gas fija, es

relativamente corriente.

3. DEPURACIÓN DE AGUA EN EL

LABORATORIO.

El agua es uno de los productos de mayor uso en

cualquier laboratorio, independientemente del tamaño y

tipo de laboratorio. El agua es una sustancia cuya

molécula está formada por hidrógeno y oxígeno, es una

molécula polar, es decir, que tiene carga positiva a un

lado y carga negativa, al otro. La carga positiva se debe a

los átomos de hidrógeno y la carga negativa a los átomos

de oxígeno.

CONSEJOS DE SEGURIDAD.

Para minimizar los riesgos de estos baños conviene que sigas las nor-

mas siguientes:

No agites o calientes líquidos cuyo punto de ebullición esté por

debajo de la temperatura establecida.

No calientes líquidos en recipientes cerrados herméticamente.

No utilices recipientes de plástico para combinar agitación y ca-

lentamiento.

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LABORATORIO

3.1. Aplicaciones del agua en el laboratorio.

Actúa como disolvente de numerosas sustancias; las sustancias que se

disuelven en agua se llaman hidrosolubles o hidromiscibles, como ejemplo

tenemos: cloruro sódico, sacarosa, azul de metileno, etc.

Se emplea en la preparación de reactivos utilizados en el laboratorio.

Además se utiliza para elaborar las soluciones ácidas y alcalinas empleadas

en volumetrías, reconstitución de liofilizados etc.

El agua, además, se usa como control en muchos aparatos de laboratorio

antes de iniciar el trabajo.

Igualmente, se utiliza para realizar la limpieza de material de laboratorio.

3.2. Composición del agua.

Todas las sustancias deben ser eliminadas del agua Entre los productos que

están presentes en el agua se incluyen:

Sales inorgánicas: van disueltas en el agua en forma de carbonatos,

sulfatos, cloruros de sodio, calcio, hierro, etc. y son los que

proporcionan la dureza al agua.

Microorganismos: bacterias, hongos, virus pueden provocar

enfermedades importantes ( diarreas, cólera).

Compuestos orgánicos: proceden de residuos agrícolas, industriales,

generados por la actividad del hombre.

Materiales en suspensión: lodo, restos de tuberías, que dan turbidez al

agua.

3.3. Tipos de agua usada en el laboratorio.

Con el fin de que sea apta para el consumo y así obtener agua potable. El

agua destinada al laboratorio se clasifica en tres tipos:

Agua tipo 1: es la de mayor pureza; se emplea en laboratorios que

realizan técnicas de alta sensibilidad como las empleadas en biología

molecular y en cromatografía de alta definición.

Agua tipo 2: tiene menor pureza que la anterior y se usa para preparar

reactivos empleados en técnicas muy sensibles.

Agua tipo 3: es la de menor pureza, y se utiliza para realizar análisis

que no requieran de alta pureza, para lavar el material, para preparar

reactivos. Es el agua utilizada por los laboratorios generales.

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EL LABORATORIO

3.4. Procedimientos de depuración del agua.

Entre los procedimientos de depuración se elegirán los apropiados para el

laboratorio, en función de la calidad que se quiera obtener y del volumen

de agua que se necesite cada día.

Los métodos más habituales son la destilación, la desionización y ósmosis

inversa.

La destilación. La destilación es un proceso físico de depuración del

agua que consiste en la evaporación primero y la condensación

después. Mediante este proceso los contaminantes disueltos se quedan

en el tanque de ebullición del agua de partida, dejando el agua libre

de bacterias. El gran inconveniente de la destilación es que gasta

mucha energía, lo que hace que sea un procedimiento demasiado caro

cuando se necesitan grandes volúmenes de agua. El destilador: en

general es un recipiente de vidrio con una resistencia eléctrica en su

interior. El agua de partida entra por un extremo y es calentada a

ebullición; el vapor de agua resultante pasa a un circuito refrigerante

donde se enfría y se condensa de nuevo; el agua obtenida circula

hasta un recipiente, donde se recoge. En el recipiente de ebullición

van depositándose residuos que hay que limpiar periódicamente

( calcio, magnesio, bicarbonato,...).

La ósmosis inversa. La ósmosis inversa es un proceso físico de

filtrado del agua, que elimina bacterias, iones y moléculas de mayor

tamaño. El agua es forzada por presión a cruzar una membrana

semipermeable con poros de diámetro mucho menor que una bacteria,

por ello la membrana retiene las bacterias presentes en el agua de

partida. Resulta un procedimiento relativamente barato lo que lo

convierte en el método de elección para purificar el agua a gran

escala. Como las membranas se van colmatando, periódicamente se

deben limpiar para asegurar el máximo rendimiento.

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Página 35 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES EN

EL LABORATORIO

La desionización. La desionización es un

procedimiento que reduce la concentración de

iones en el agua a menos del 1% de los

iniciales, mediante intercambio iónico:

proceso en el cual los iones impuros

presentes en el agua son reemplazados por

iones liberados por resinas de intercambio

iónico. Las resinas deben ser regeneradas

periódicamente para restaurarlas a su forma

iónica original. Hay dos tipos de resinas de

intercambio iónico:

Resinas de intercambio de cationes: emiten protones

( H +) que intercambian por iones positivos impuros

presentes en el agua ( iones metálicos).

Resinas de intercambio de aniones: emiten grupos

hidroxilo ( OH -) que se intercambian por iones

negativos impuros presentes en el agua ( ácidos y

sales). El proceso de ionización combina la acción de

ambos tipos de resinas, y los iones liberados por las resinas se combinan

formando agua. Es un

método fácil de instalar,

que proporciona mayor

volumen de agua pura

que la destilación. La des

ionización no elimina

partículas, ni materia

orgánica; la regeneración

de las resinas es cara.

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Página 36 U.T. 1 MATERIALES HABITUALES

EN EL LABORATORIO

4. TRABAJO A VACÍO EN EL

LABORATORIO.

En el laboratorio el vacío lo podemos obtener con el motor de

vacío o con la trompa de vacío.

Trompa de vacío. Se denomina

también trompa de agua. Se utiliza

cuando necesitamos obtener vacíos;

su fundamento es el paso rápido del

agua, a través de un estrechamiento,

entre dos tubos que hay en el interior.

El efecto VENTURI, provoca una

succión. Se suele utilizar acoplada al

kitasato y butchner.