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BIOLOGÍA CELULAR Ciclo Escolar 07-08B TEORÍA CELULAR Matias Schleiden (1838) y Theodore Schwann (1839) LA CÉLULA ES LA UNIDAD FUNDAMENTAL DE TODOS LOS ORGANISMOS. En 1855 Rudolph Virchow: 1) Cada organismo vivo está formado por una o más células. 2) Los organismos vivos más pequeños son células únicas y las células son las unidades fundamentales de los seres vivos. 3) Todas las células provienen de células preexistentes. Modificado de http://www1.us.es/pautadatos/publico/personal/pdi/2837/3601/Tema%202%20C%e9lula.ppt%20-
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BIOLOGÍA CELULARCiclo Escolar 07-08B
TEORÍA CELULAR
Matias Schleiden (1838) y Theodore Schwann (1839)
LA CÉLULA ES LA UNIDAD FUNDAMENTAL DE TODOS LOS ORGANISMOS.
En 1855 Rudolph Virchow:
1) Cada organismo vivo está formado por una o más células.
2) Los organismos vivos más pequeños son células únicas y las células son las unidades fundamentales de los seres vivos.
3) Todas las células provienen de células preexistentes.
Modificado de http://www1.us.es/pautadatos/publico/personal/pdi/2837/3601/Tema%202%20C%e9lula.ppt%20-
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• ROBERT HOOKE(1665)Con sus observaciones postuló el nombre célula
para referirse a los compartimentos que encontró en un pedazo de corcho, al observar al microscopio
• ANTON VAN LEEUWENHOEK (1673)Realizó observaciones de microorganismos de
charcas, eritrocitos humanos, espermatozoides.
• THEODOR SCHWANN (1839)Postuló el primer concepto sobre la teoría
celular . Las células son las parte elementales tanto de plantas como de animales.
• RUDOLF VIRCHOW (1850)Escribió: "Cada animal es la suma de sus
unidades vitales, cada una de las cuales contiene todas las características de la vida. Todas las células provienen de otras células".
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http://www.tcb.cl/1535/articles-61145_celula5.jpeg
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http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/libros/celular/mic9.jpg
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1. Selección de la muestra
2. Fijación de la muestra
3. Inclusión de la muestra
4. Corte de la muestra
5. Tinción de los cortes
6. Montaje de los cortes
7. Examen de los cortes con el M.O.
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS BÁSICAS
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La fijación hace que precipiten las proteínas tisulares
Fijadores usados
- formaldehído al 5%
– ácido pícrico
– alcohol,...
Objetivo
– preservar los tejidos de forma similar a su estado “in vivo”
– aumentar la dureza de la muestra para facilitar su posterior corte
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– deshidratarla muestra con alcoholes de gradación creciente
(50% - 70% - 90% - 100%)
– pasar la muestra por un disolvente(benzol...)
– introducir la muestra en parafina líquida hasta que la muestra
quede completamente embebida en parafina
– hacer un bloque de parafina sólida que contenga la
Muestra
Cortes de 5-10 ìm de grosor
–Los cortes de la muestra se
extienden en un portaobjetos de
Objetivo
Endurecer la muestra homogéneamente para poder obtener cortes
finos de ella
Método de inclusión en parafina
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http://www.dbio.uevora.pt/jaraujo/biocel/imagens/bioceltec18.jpg
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– corte deshidratado y montado en un portaobjetos
–desparafinizarlos cortex con xilol
–rehidratarlos cortes con alcoholes de gradación
decreciente (100%.....50%.... agua)
– tinción de los cortes con un COLORANTE O MEZCLA
DE COLORANTES
–aclarar el exceso de colorante (agua)
–deshidratarlos cortes
–montarlos cortes (resina + cubreobjetos de cristal)
– corte teñido dispuesto para ser estudiado con el M.O.
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–Hematoxilina-eosina
–Azan
–van Gieson
–Tinciones argénticas
–Tinciones histoquímicas
– PAS
•tinciones de lípidos
•histoquímica enzimática
•inmunocitoquímica
Tinciones
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Microscopios
Para trabajar con microorganismos que son invisibles en el microscópio de campo claro, debido a que no se tiñen con facilidad. Se usa frecuentemente para Treponema pallidum.
Usa un condesador especial con un disco opaco que bloquea la luz. El especímen aparece iluminado con fondo oscuro.
Microscópio de campo oscuro
Para observar especímenes teñidos y contar microorganismos (no virus).
Usa luz visible como fuente de iluminación, no puede resolver estructuras pequeñas de alrededor de o.2 micras.
Microscópio de campo claro
Usos principalesImagen CaracteristicasTipo de microscopio
Tortora G. J., B. R. Funke, C. L. Case. (2001). Microbiology. An introduction.. Benjamin Cummings. 7thedition.
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Para proveer imágenes de tercera dimensión.
Similar al contraste de fase, usa diferentes indices refractivos para producir imágenes. Usa dos vigas de luz separadas por un prisma, el especímen se observa coloreado. No requiere de tinción.
Contrate interferencia diferencial (DIC)
Permite una onbservación detallada de estructuras internas de especímenes vivos.
Usa un condensardor especial conteniendo un diafragma en forma de disco y una placa de disfracción en el objetivo. La luz directa reflejada o difraccionada forma la imagen. No requiere de tinción
Microscopio de contraste de fase.
Usos principalesImagen CaracteristicasTipo de microscopio
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Para obtener imágenes de segunda o tercera dimensión de células para aplicación medica.
Usa luz láser para iluminar un palno de el especímen a un tiempo.
Confocal
Para técicas de fluorescencia para una rápida detección e identificación de microorganismos en un tejído o especímen clínico.
Usa como fuente de iluminación luz ultravioleta dando color fluorescente(rojo,verde,amarillo, azul) al especímen y emite luz
Fluorescencia
Usos principalesImagen CaracteristicasTipo de microscopio
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Para estudiar caracteristicas superficiales de células y virus. 1000-10,000 X.
Usa una viga de electrón en lugar de luz. Pueden observarse estructuras más pequeñas que 0.2 micras. Las imágenes tienen apariencia de tercera dimensión.
Escaneo
Para observar virus o ultraestructuras internas en secciones delgadas de células. 10,000-100,000 X.
Usa una viga de electrón en lugar de luz. Pueden observarse estructuras más pequeñas que 0.2 micras. Las imágenes tienen apariencia de segunda dimensión.
Transmisión
Usos principalesImagen CaracterísticasTipo de microscopioElectrónico
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Provee imágenes de moléculas biológicas detalladas cercanas al átomo y procesos moléculares.
Usa una sonda de metal y diamante, recorren lentamente la superficie del especímen. Produce imágenes de tercera dimensión. No requiere preparación especial.
Fuerza atómica
Provee muchos detalles internos de moléculas celulares.
Usa una sonda delgas de metal que escanea al especímen y produce una imagen revelando baches y depresiones de atómos en la superficie del especímen. Su poder de resolución es más grande que un microscópio electrónico. No requiere preparación especial.
Escaneo de efecto túnel
Usos principalesImagen CaracteristicasTipo de microscopioEscanedo por sonda
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¿Por qué necesitamos de herramientas histológicas para el estudio de las células?
¿En qué se diferencia una tinción simple de una diferencial?
¿De qué depende la selección de los microscópios para realizar un estudio?
¿Para qué y por qué es necesario utilizar un microtómo?
