CARACTERSTICAS MACROSCPICAS Y MICROSCPICAS EN UN HONGO EL EXAMEN MACROSCPICO: Antes de hacer un estudio macroscpico, habremos de conocer bien las diferentes partes de una seta y su nomenclatura (podemos verlas en cualquier manual). En el estudio de una seta usaremos una ficha, para anotar los diferentes caracteres observados y hacer una descripcin macroscpica, que posteriormente archivaremos para poderla consultar en cualquier momento, pues una vez desecada, se perdern la mayora de los caracteres macroscpicos. Una seta suele estar constituida por un sombrero y por un pie, en los casos ms tpicos. Estos elementos pueden tener diversas formas, coloraciones y ornamentaciones, y su estudio es imprescindible para la correcta determinacin de una seta. Tipos de setas: Las setas pueden tener formas muy diversas, desde la ms comn a modo de paraguas, con lminas, poros, aguijones y pliegues, hasta otras formas muy distintas y que muchos aficionados no asocian con las setas. Estas pueden presentarse como cazoletas, con o sin pie, es el caso de las Pezizas, con formas ms o menos esfricas, como los cuescos de lobo y las famosas trufas, constituyendo varios grupos, como Lycoperdon, Calvatias, Sclerodermas, Tuber , en forma de estrella, como los Geastrum, de silla de montar, es el caso de las Helvellas, y un largo etc. Que hara muy extensa esta lista. El sombrero: El estudio macroscpico de una seta, una vez examinada su forma, puede empezar por el sombrero. De este elemento anotaremos su medida, su forma en los diferentes estadios de crecimiento, y su margen. Seguidamente, estudiaremos la cutcula y comprobaremos sus caractersticas (si es separable o no, si es seca, mate, brillante, sedosa, viscosa, glutinosa, higrfana, etc.) y si presenta alguna ornamentacin. Tambin anotaremos su color y si este cambia al ser tocado. El himenio: Seguidamente estudiaremos el himenio y sus elementos (lminas, poros, agujas, pliegues , comprobaremos su consistencia y densidad, su forma, la disposicin respecto al pie, su color en los diferentes estadios de maduracin, y las posibles variaciones que puedan presentar. El pie: Es un elemento muy importante, que nos dar una informacin muy valiosa para la identificacin de la seta. Anotaremos sus medidas, su forma, la insercin respecto al sombrero, si lleva algn resto de velo (cortina, anillo, volva), la decoracin, la consistencia, el color La carne: Igualmente bsico para llegar a identificar una seta, es el estudio de la carne y de todos sus caracteres organolpticos (textura, color, olor y sabor). Muchos de estos caracteres, ya los habremos visto en el primer estudio de campo. Tambin comprobaremos la reaccin de la carne en contacto con diversos reactivos qumicos. Si reacciona y cambia de color tendremos una reaccin positiva, si no cambia de color tendremos una reaccin negativa. Los reactivos macroqumicos: En el estudio de las setas a menudo se utilizan una serie de reactivos que, puestos en contacto con la carne u otras partes, provocan un cambio de color, muy til para la determinacin de algunas especies. Los ms utilizados son el amonaco (puro o poco diluido), la sosa (NaOH) o la potasa (KOH) al 10%, el sulfato de hierro (SO4Fe) al 10%, el fenol al 3%, la tintura de guayaco, el formol, la tintura de yodo, etc.

EL EXAMEN MICROSCPICO: Los miclogos, para estudiar las setas, necesitan utilizar el microscopio, ya que no es suficiente con el estudio de los caracteres que se ven a simple vista o bajo la lupa; han de estudiarse ciertas estructuras a nivel celular, como es el caso de las esporas, que pueden presentar diversidad de formas y tamaos. Este aspecto no debe de asustar al aficionado, pues hay multitud de especies que podremos identificar sin necesidad de su observacin al microscopio, pero no menos cierto es que para el estudio de ciertos gneros se hace imprescindible una detenida observacin microscpica. Estas estructuras a observar se encuentran en todo el cuerpo de la seta, fundamentalmente en el himenio, que se completa con un estudio de la cutcula y del pie. Estos organismos adquirieron la categora de reino y su estudio permiti conocer diversas patologas asociadas a los hongos, determinadas sustancias excretadas por diferentes gneros de organismos fngicos y el desarrollo de variados antibiticos a partir de ellos. Los hongos, organismos que pertenecen al reino de los protistas superiores, son microorganismos eucariticos. Carecen de clorofila, son aerobios obligados o facultativos. Son hetertrofos, es decir que requieren de compuestos orgnicos preformados como fuente de carbono. Habitan en medios con alta concentracin de protones, ph 6,5 a 3,5. La mayora de los hongos son saprofitos, slo algunas especies son patgenas para el hombre y los animales. Los hongos pueden cultivarse en el laboratorio. Comparndolos con las bacterias, sus requerimientos nutricionales son ms simples. Un medio de cultivo para hongos requiere:

Fuente de carbono: pueden ser hidratos de carbono como glucosa, que adens acta como fuente de energa. Fuente de nitrgeno: pueden utilizar compuestos inorgnicos de nitrgeno como cloruro de amonio, sulfato de amonio, nitrato de potasio o compuestos orgnicos simples como urea. Oligoelementos: Zn, Fe Ca. Ph ptimo de crecimiento:oscila entre 4,5 a 5,5. este Ph confiere al medio un carcter seletivo sobre todo cuando se quiere cultivar hongos y stos se hallan acompaados de bacterias. Temperatura: creen entre 37 y 38 C, algunos desarrollan a temperatura ambiente. medio de cultivo que de habitualmente se usa los es el Agar Sabouraud. hongos

El

Morfologa

Existen dos tipos de hongos: las levaduras y los mohos. Las levaduras son hongos unicelulares, que se reproducen por gemacin. Las levaduras son generalmente, clulas mayores que las bacterias, aunque este parmetro puede variar dependiendo de la bacteria y la levadura. Su tamao es muy variable, este se encuentra entre 1 y 5 micras de ancho y 5 a 30 de largo. Son ovoides, en general, an cuando no se descarta la posibilidad de hallarlas esfricas. Los mohos son hongos pluricelulares. Estos crecen formando un filamento llamado hifa, que puede alcanzar varios cm. de largo. Las hifas pueden ser tabicadas o continuas. Las tabicadas se dividen en una cadena de clulas mediante la formacin de paredes transversas o tabiques. Las

continuas carecen de dichos tabiques. Las hifas crecen por elongacin de la punta pice. Durante el crecimiento las hifas se entrelazan densamente constituyendo el micelio. Existe un micelio tabicado y uno continuo. Los tabiques presentan orificios que permiten el libre movimiento de citoplasma y sus ncleos. El organismo completo (micelio) es una estructura cenoctica, esto significa que es una masa citoplasmtica continua multinucleada. Hay dos tipos de micelio, de acuerdo a su funcin:

Micelio vegetativo: formado por hifas que penetran en el medio de cultivo o difunden en la superficie absorbiendo nutrientes. Micelio areo: formado por hifas que se proyectan por encima de la superficie del medio hacia el aire y que presenta la estructura reproductora del hongo, que son las esporas, es el micelio de reproduccin.

Ciertos hongos, entre ellos varios patgenos para el hombre, presentan dimorfismo, es decir que pueden crecer como levaduras o como mohos, de acuerdo a las condiciones ambientales.

Reproduccin Los hongos pueden llevar a cabo dos mecanismos de reproduccin: asexual y sexual.

Reproduccin asexual: incluye la gemacin, la fragmentacin y la formacin de esporas asexuales.

La gemacin es el mecanismo de reproduccin de las levaduras y algunos hongos acuticos. Aparece en la clula madre un brote o protuberancia a la cual pasa un ncleo. Ambas clulas que dan separadas por un tabique, y el brote es separado por ruptura. La espora pequea que se genera se llama blastospora. Estas esporas se presentan en el gnero Candida spp. La fragmentacin consiste en que las hifas se segmentan dando clulas rectangulares de paredes gruesas, la espora que se genera se llama artrospora, caracterstica del gneroCoccidioides spp,

donde las artrosporas producen pequeos apndices que favorecen la dispersin. Las esporas asexuales pueden ser clamidosporas, conidiosporas o conidios y esporangiosporas, son caractersticas para cada especie. Por ejemplo el gnero Penicillum spp presenta conidiosporas.

Reproduccin sexual: se lleva a cabo cuando faltan nutrientes en el medio o cuando las condiciones de crecimiento se vuelven adversas, en cambio si en el medio existen nutrientes y las condiciones son ptimas el hongo lleva a cabo la reproduccin asexual. La reproduccin sexual supone la unin de dos ncleos, proceso por el cual se forman las esporas sexuales, de las que existen tres tipos: zigosporas, ascosporas y basidiosporas.

Las esporas de los hongos son en general mas sensibles a los agentes fsicos y qumicos que las esporas bacterianas, y entre las esporas de los hongos, las sexuales son ms resistentes que las asexuales. Existen hongos que slo llevan a cabo la reproduccin asexual, son los hongos imperfectos ofungi imperfecti.

TINCION HEMATOXILINA-EOSINA.La tincin hematoxilina-eosina corresponde a la mezcla de hematoxilina y eosina. La tincin hematoxilina y eosina es uno de los mtodos mas populares de tincin utilizado en histologa y medicina diagnostica. El mtodo supone la aplicacin de la tincin de hematoxilina, que por ser catinica o bsica, tie estructuras cidas (basfilas) en tonos Azul yPrpura,como por ejemplo los ncleos celulares; y el uso de eosina que tie componentes bsicos (acidfilos) en tonos de color rosa, gracias a su naturaleza aninica o cida, como el citoplasma.

TECNICA. Sumergir los preparados histolgicos en xilol para eliminar los excesos de parafina. El xilol es un alcohol algo txico, pero existen reactivos (como el Hemo-D) que ejercen la misma funcin aclarante de parafina sin la toxicidad del xilol. Luego pasan por una serie de alcoholes en concentracin decreciente para rehidratar la muestra (100. 95 y 70). Se lava en agua para eliminar exceso de alcohol Se sumerge en hematoxilina por 10 minutos, luego se lava en agua para eliminar excesos y se pasa rpidamente por alcohol cido. Se lava nuevamente Se sumerge 30 segundos en eosina. Se pasa por otra serie de alcoholes,esta vez en orden creciente(70, 95 y 100) para deshidratar la muestra y que se pueda realizar el montaje con un pegamento no soluble en agua. Finalmente se deja remojar 10 minutos en xilol, antes de realizar el montaje final.

RESULTADOS. Ncleo celular: Azul Citoplasma: Rosa Musculatura: Rojo , rosa o fucsia Glbulos rojos: Rojo, anaranjado Fibrina: Rosa

Tincin Grocott1-Desparafinado. Estufa durante 30 min. a 60. Sumergimos en xilol durante 10 o 15 min. 2- Hidratacin. Alcohol absoluto-5min. Alcohol 96-5min. Alcohol 70-5min. 3- Lavar en H2O destilada 4- Solucin de cido crmico al 4% - 1 hora 5- Lavar en agua corriente 5 min. 6 Bisulfito sdico al 1% - 1 min. 7- Lavar agua corriente 5 min. 10- Lavar con agua destilada 6 pases.

11- Cloruro de oro al 0.2 % - 2-5 min. 12 Lavar con agua destilada 5 min. 13- Tiosulfato sdico al 2% - 2-5 min. 14- Lavar con agua corriente 15- Solucin verde luz al 1% - 30-40 seg. 16-Deshidratar. Alcohol de 96. Alcohol absoluto. Xilol. 17- Montaje.

8- Lavar con agua destilada 3-4 pases 9- Solucin argntica de trabajo: En estufa 60--------------------------------- 1 hora En microondas (descongelacin) -------- 1-2 min.

METODOLOGA 1.- Preparacin de reactivos y medio de cultivo: a) Solucin glicerinada al 5 % (5 ml de glicerina en 100 ml de agua) b) Agar Sabouraud: Preparar medio siguiendo las indicaciones del reactivo. 2.- Preparar 6 cajas petri (por equipo) de la siguiente forma: Colocar una varilla de vidrio en forma de U dentro de la caja encima de esta un portaobjetos y 2 cubreobjetos, cerrar la caja. 3.- Colocar las cajas petri preparadas de acuerdo al punto anterior en un cilindro para esterilizar cajas petri. 4.- Colocar las pipetas en un cilindro para esterilizar (por equipo).

5.- Esterilizar el medio de cultivo, agua glicerinada, bistur y pinzas envueltas en papel de estraza y los cilindros con cajas petri y pipetas en el autoclave a 15 lb/plg 2, durante 15 minutos. 6.- En condiciones aspticas vaciar el agar a 2 cajas petri (por equipo) calcular aproximadamente 25 ml por caja. Preparacin del microcultivo 1.- Bajo condiciones estriles y con ayuda de un bistur cortar cuadros pequeos de agar aproximadamente de 1 cm X 1 cm. 2.- Utilizando las pinzas de diseccin colocar en cada una de las cajas petri un cuadro de agar sobre el portaobjetos. 3.- Con el asa estril inocular por picadura en cada uno de los 4 lados del cuadro de agar hongos (muestra y aquellos proporcionados por el profesor). Colocar con la ayuda de las pinzas de diseccin estriles el cubreobjetos encima del agar. 4.- Adicionar agua glicerinada estril a cada una de las cajas petri hasta cubrir dos terceras partes de la varilla de vidrio. Tapar las cajas. 5.- Incubar las cajas a 30C durante una semana. Verificar que las cajas conserven un nivel adecuado de agua glicerinada. Observacin de los hongos 1.-Observar con el microscopio de diseccin los hongos desarrollados despus de 7 das de incubacin. 2.-En un portaobjetos colocar una gota de lugol y cubrirla con el cubreobjetos que proviene del microcultivo, observar al microscopio ptico. 3.- Observar al microscopio el portaobjetos del microcultivo, retirar el cuadro de agar, agregar una gota de solucin de lugol y cubrir con un cubreobjetos limpio

METODO 1.- En zona asptica, con el bistur estril corte el agar-sabouraud en cuadros de aproximadamente 1cm3 2.- Colocar en el centro de uno de los portaobjetos contenidos en la caja de petri un cuadrito de agar- sabouraud(o un cuadrito en cada uno de los extremos de 1 porta) 3.-Con el asa micologica (o con el asa bacteriolgica recta) , inocular cada uno de los lados del cuadrito ( o de loscuadritos ) 4.-Con ayuda de unas pinzas flameadas, coloque sobre esta preparacin el segundo portaobjetos estril 5.-Para mantener la humedad, agregar aproximadamente 10 ml de agua glicerinada, teniendo cuidado de saturar el algodn de papel, evitando la inundacin para que el liquido no toque el cultivo 6.- Incube durante 7 das 7.- En condiciones de asepsia, saque los portaobjetos de la caja 8.- Observar el desarrollo del hongo que se presenta alrededor de los cuadros de agar 9.-Separe cuidadosamente los portaobjetos 10.-Retirar el agar, tratando de no daar el desarrollo del hongo el que debe quedar adherido el portaobjetos 11.- Colocar los cuadros de agar sobre la caja y llevarlos a esterilizar 12.- Fijar las preparaciones, agregando 5 a 6 gotas de metanol, eliminar inmediatamente el exceso y dejar secar el aire 13.-Cubra la preparacin con un pedazo de papel filtro y saturarlo con eritrosina 14.- Calentar la preparacin, durante 10 minutos teniendo cuidado de no dejar secar la preparacin, debiendoadicionar colorante cada ves que sea necesario 15.- Decolore con etanol durante 10 segundos 16.- Colocar la preparacin en una caja de koplin que contiene acetona una mezcla de xilol-acetona y dejar actuar 10 minutos 17.- Transferir la preparacin a una segunda caja de koplin, la que contiene una mezcla de xilol-acetona y dejar actuar 10 minutos 18.- Repetir el procedimiento empleando xilol y dejar actuar 10 minutos 19.- Dejar secar a temperatura amiente 20.- Coloque una gota de blsamo de Canad en el centro de cada u n a d e l a s p r e p a r a c i o n e s y t a p a r c o n cubreobjetos

21.- Dejar secar a temperatura ambiente durante 24 horas y rotular, esta preparacin puede mantenerseindefinidamente 22.- Observar con los objetivos de 10x y 40x, consultar la gua de observacin y hacer esquemas y la descripcincorrespondiente. OBTENCION DE COLONIAS Y OBSERVACION MICROSCOPICA METODO 1.- En condiciones de asepsia tomar una muestra de cultivo de saccharomyces y suspenderla en un tubo quecontiene agua estril y agitar 2.- Con la suspensin de levaduras obtenida sombrar por estra una de las cajas que contiene sabouraud y unacaja que contiene el medio de felpa y papa dextrosa 3.- Repetir el procedimiento con los mohos 4.- Repita con los otros hongos filamentosos 5.- Con el asa en ngulo recto, tomar una muestra de la suspensin de esporas e inocular por picadura el centrode las placas que contiene sabouraud y czapek 6.- Invierta las cajas e incubar a 28c durante 5 a 7 das 7.- Observar las caractersticas de las colonias de los diferentes hongos desarrollados, consultar la gua deobservacin y describir los resultados 8.- A partir de los cultivos de levaduras, preparar frotes fijos y teirlos con azul de metileno 9.- En un portaobjetos, coloque una gota de lactofenol azul de algodn 10.- Colocar el ultimo tercio de asa micologica en un pedacito de diurex de 1.5 cm. de largo, enrollndololigeramente 11.- En condiciones de asepsia destapar la caja que contiene el cultivo de una fraccin de la colonia 12.- Depositar la muestra en el portaobjetos con el colorante, e x t e n d e r e l d i u r e x y c o l o c a r e n c i m a d e u n cubreobjetos

El diagnstico micolgico se apoya en tres procedimientos bsicos: 1. El diagnstico clnico y etiolgico 2. La epidemiologa 3. El examen micolgico directo y cultivo. La conjuncin de dichos procedimientos permite detectar la totalidad de las micosis profundas y superficiales, sean estas oportunistas o no. MICOSIS SUPERFICIALES Se entiende por micosis superficiales a las afecciones ocasionadas por la accin parasitaria de los hongos sobre las estructuras crneas de la piel y sus faneras (pelos y uas). Junto con estas micosis son tratadas algunas infecciones bacterianas como Tricomicosis axilar y Eritrasma ya que son semejantes a las micosis en su aspecto clnico y debe hacerse diagnstico diferencial. CLASIFICACION DE LAS MICOSIS SUPERFICIALES A) Queratomicosis o Infecciones cutneas: 1- Dermatofitosis (tineas): Tinea Tinea Tinea Tinea Tinea Tinea capitis (Tia) corporis (Empeine) cruris (Eritema marginado de Hebra) pedis (Pie de atleta) unguium (Onicomicosis) barbae (Psicosis parastica)

2- Dermatomicosis: - Pitiriasis versicolor - Tinea negra - Candidiasis B) Piedras: - Piedra blanca - Piedra negra Las micosis superficiales de mayor incidencia en nuestro pas son las dermatofitosis, las infecciones por levaduras y la Pitiriasis versicolor. RECOLECCIN DE MUESTRAS Las muestras para examen micolgico deben ser representativas, abundantes, libres de sustancias que inhiban o alteren la viabilidad de los hongos. Cuando el mdico lo permita, se suspende toda medicacin antifngica interna y/o externa durante un lapso no inferior a 72 horas antes de efectuar la toma de muestra. De igual modo se

suspende el uso de pomadas, talcos, tinturas u otras sustancias que enmascaren, inhiban o alteren la viabilidad de los hongos. Se recomienda a los pacientes realizar lavados con agua y sal en la zona afectada dos veces por da durante los dos das previos a la toma de la muestra y concurrir con medias si la lesin es en pies. Si el material no se toma directamente en el laboratorio, las escamas de piel y uas y los fragmentos de pelo se recogen en una caja de petri descartable estril o entre dos portaobjetos desengrasados, limpios y estriles: se sellan los bordes con cinta adhesiva transparente para evitar la prdida del material, se envuelven en un papel y se rotulan con los datos del paciente y las caractersticas macroscpicas de la lesin. Es preferible que el transporte al laboratorio sea inmediato, pero no es imprescindible ya que los hongos que producen micosis superficiales pueden ser aislados de las muestras luego de varios das. INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS El informe micolgico consta de un examen directo y cultivo. El directo en caso de ser positivo, da la posibilidad de cambiar rpidamente las conductas teraputicas. Este resultado se informa 24 horas despus de la toma de muestra, se hayan observado o no estructuras fngicas. El cultivo nos permite conocer el gnero del hongo involucrado, lo cual nos brinda una informacin epidemiolgica muy importante. El resultado final se informa luego de 4 semanas. Las Piedras y la Tinea negra no son patologas habituales en nuestro pas. La Pitiriasis versicolor es una micosis cuyo diagnstico se realiza bsicamente por examen directo, ya que este tiene carcter diagnstico. Desde el punto de vista del laboratorio es importante establecer si el hongo aislado es un dermatofito o no, y en el ltimo caso, si est causando la infeccin o est actuando como contaminante de la muestra. Para establecer si la lesin es causada por un dermatofito es necesario ver en el examen directo los filamentos ramificados hialinos, artrosporados o no, caractersticos y/o aislarlo en el cultivo. Si el aislamiento en el cultivo es un hongo filamentoso saprofito no dermatofito, ser informado como tal slo si ha sido aislado en cultivo puro en todos los tubos inoculados y en el examen directo se han observado elementos micticos correspondientes. En estos casos es necesario adems, reiterar la toma de muestra hasta obtener exmenes directos y cultivos positivos del mismo hongo en tres muestras seriadas. Si hay desarrollo de uno o ms hongos filamentosos saprofitos y no se cumplen las condiciones recin mencionadas, se informa como cultivo contaminado, y se requiere una nueva muestra, ya que se podra estar enmascarando un verdadero patgeno.

En el caso de las levaduras es necesario para realizar el diagnstico, adems de que exista correlacin entre el examen directo de la muestra y el aislamiento en el cultivo, que el cuadro clnico sea compatible con una infeccin por estos hongos y que no se hallan aislado dermatofitos de la misma muestra en cuatro semanas de cultivo. En el caso de los pacientes inmunocomprometidos se deben informar todos los hongos aislados aunque no se hayan visto en el examen directo.

INTRODUCCION A pesar de la frecuencia en la que se presentan las infecciones micticas en las uas, pensamos que en Atencin Primaria existen dudas en el da a da sobre el manejo de este tipo de patologa. Se producen errores diagnsticos, que conducen a tratamientos errneos, por no tener en cuenta la importancia del cultivo y la tcnica de toma de muestras. ETIOPATOGENIA Entendemos por onicomicosis la infeccin fngica de la ua. Representa el 50% de todas las patologas de la ua. La prevalencia en Espaa es del 2,8% y va en aumento. Est producida bsicamente tres tipos de hongos:

HONGOS DERMATOFITOS LEVADURAS HONGOS NO DERMATOFITOS OPORTUNISTAS

HONGOS DERMATOFITOS: Son los patgenos ms frecuentes de las uas de los pies, aparecen en el 75% de las uas de los pies, y en el 20% de las uas de las manos Los agentes causales ms frecuentes son: Trichophyton rubrum (85% casos) Trychophyton mentagrophytes (12%) Epidermophyton floccosum (3%) LEVADURAS Predominan en mujeres adultas, afecta con mayor frecuencia a las manos (60%) Los agentes causales ms frecuentes son: Cndida albicans (70%) Cndida tropicalis

Cndida parapsilosis Las infecciones ms habituales son: Candidiasis ungueal proximal Candidiasis ungueal distal (a diferencia de los dermatofitos, afectan a la concavidad de la ua) HONGOS NO DERMATOFITOS OPORTUNISTAS Constituye un grupo heterogneo, compuesto por contaminantes, saprofitos y oportunistas. Representan del 5-15% de onicomicosis (en aumento). Predomina en pacientes mayores de 60 aos. Agentes causales: Scopulariopsis brevicaulis Aspergilus niger Scytalidium dimidiatum Scytalidium Haylinum DIAGNSTICO Su tratamiento no se debera comenzar basndonos slo en la clnica. Aunque las caractersticas clnicas nos hagan pensar en onicomicosis, el diagnstico diferencial revela que muchas distrofias ungueales se producen por otras causas patolgicas. El coste del diagnstico es actualmente muy inferior al de realizar un tratamiento innecesario o inapropiado. Tambin resulta interesante conocer la especie de hongo que causa la infeccin ya que el tratamiento se podr orientar mejor en cada caso. Toma de muestras La toma de muestra para cultivo debe realizarse antes de comenzar el tratamiento antifngico. Si el paciente ya ha sido tratado deberemos esperar un tiempo despus de la supresin del tratamiento antes de la recogida de muestras: 15 das si se han utilizado cremas antifngicas, 1 mes para las lacas y de 1-3 meses para los antifngicos sistmicos (1 mes para la griseofulvina y 3 para la terbinafina). Para recoger la muestra utilizaremos cualquier instrumento adecuado como tijeras, alicates o bistur

La muestra ser abundante, llegando si podemos hasta la zona sana, si fuera posible, y recogiendo trozos de ua y detritus de la parte inferior de la lmina ungueal. Debido a que muchas onicomicosis se inician en el lecho, ms que en la propia ua, los restos subungueales pueden proporcionar buenos resultados en el diagnstico. Los hongos no dermatofitos se pueden encontrar como agentes etiolgicos o como contaminantes en las onicomicosis. Se sugiere que cuando se encuentre en el primer cultivo un no dermatofito, el paciente debera volver a examinarse en una visita posterior y tomar tres muestras de la ua afectada. El diagnostico se confirmara si el cultivo para no dermatofitos fuera positivo en las tres muestras. En la onicomicosis blanca superficial debemos rascar la superficie de la ua. Si hay supuracin, como en algunas onixis candidisicas de las uas de la mano, recogeramos la muestra con una torunda. En los pies es necesario explorar los espacios interdigitales y realizar una toma de muestra de los mismos (es especialmente rentable la toma de muestra del 4 espacio interdigital, incluso en ausencia de lesiones. Una vez recogidas las muestras, las introduciremos en un bote estril sin ningn tipo de medio de cultivo (podemos incluir tambin la punta del escobilln con el que se haya recogido la muestra). El diagnstico depender de varios factores, como la buena recogida de muestra, la experiencia del microbilogo, la dificultad para distinguir entre los patgenos, los hongos saprofitos y los contaminantes. Tcnicas diagnsticas

Microscopa directa

La observacin con hidrxido de potasio al 20% (KOH) en preparacin de dimetil sulfxido (DMSO) es una prueba de seleccin til para descartar la presencia de hongos. Complicada en Atencin Primaria. Cultivo Utilizaremos el cultivo para identificar las especies de los microorganismos. Como hemos indicado antes los No dermatofitos pueden ser contaminantes de la muestra y en caso de ser la causa, podran ser resistentes al tratamiento convencional utilizado para el resto de los dermatofitos. . La muestra debe mantenerse a temperatura ambiente con el tapn colocado. Otras pruebas

La Inmunohistoqumica y citometra de flujo doble son otros 2 tipos posibles de tcnicas El examen histolgico de la ua es una alternativa muy til al cultivo o KOH.

PUNTOS CLAVE:

Las onicomicosis representan actualmente el 50% de toda la patologa de la ua y van en aumento. El diagnostico clnico no es suficiente, se requiere confirmacin microbiolgica para confirmar el diagnstico. Los hongos No Dermatofitos Oportunistas: Scopulariopsis brevicaulis, Aspergilus Nger, Scytalidium dimidiatum, Scytalidium Haylinum) requieren de confirmacin con tres muestras, porque podrian ser saprfitos. La tcnica de toma de muestras es importante para que el cultivo sea fiable. Hay que esperar antes de tomar la muestra si el paciente h sido tratado. La tcnica de mayor sensibilidad es la biopsia de ua y tincin PAS. La tcnica ms aplicable en Atencin Primaria y con mayor rentabilidad es el cultivo.Informacin para pacientes sobre la Tias o Dermatofitosis

Qu es la tia? La tia o dermatofitosis es una infeccin superficial por hongos, de la piel, los cabellos y las uas. Hay tres gneros de dermatofitos (hongos microscpicos de la piel): Microsporum, Epidermophyton y Trichophyton, cada uno de ellos con varias especies. Existe una resistencia natural de la piel, pelo y uas a la infeccin por dermatofitos. Las manifestaciones clnicas, as como su contagiosidad, van a depender, tanto del propio l hongo (los hongos de los animales suelen producir una reaccin inflamatoria intensa en el husped y son ms contagiosos, mientras que los hongos que habitualmente estn en los suelos son menos virulentos), como de factores dependientes del paciente. As, se conocen algunos factores que facilitan la aparicin de las infecciones por hongos:

La infancia. Las enfermedades inmunolgicas. La Diabetes. Las enfermedades de la piel, como la Ictiosis o la Queratodermia palmoplantar. La atopia. Los tratamientos con corticoides. La baja temperatura corporal. El clima tropical o semitropical. Los traumatismos. La oclusin, la maceracin, o la sudoracin de la zona. La exposicin laboral a hongos (veterinarios, cuidadores de animales).

Por qu se produce? La infeccin por hongos de la piel, pelos y uas, se transmite por el contacto directo, al tocar a una persona que la tiene. Algunos tipos de hongos viven en las superficies hmedas (suelos de los baos, piscinas o gimnasios) en los que es muy fcil contraer un hongo. Tambin se puede infectar por contagio desde un animal, en especial de las mascotas que conviven con un mayor contacto con

las personas. Los perros y gatos, al igual que los animales de granjas, pueden infectarse con hongos. Cules son los sntomas? 1.- Tias del cuero cabelludo:

Sin inflamacin de la piel: Pueden aparecer en varias placas, de pequeo tamao en las que coexisten pelos sanos y parasitados por el hongo (rotos a nivel de la piel o muy poco por encima de ella y con el folculo infectado similar a un punto negro) o con pocas placas o una sola, de mayor tamao, en la que todos los pelos estn afectados y se rompen a pocos milmetros de emerger en la piel. Suelen ir acompaadas de intenso picor. Son ms frecuentes en la edad escolar y a veces curan de forma espontnea al llegar a la pubertad. Producen alopecia (calvas) reversible. Con inflamacin de la piel: se inician como una inflamacin de los folculos pilosos. En pocos das se forma una placa, generalmente nica y dolorosa, elevada, de color rojo vivo y dura que se cubre de pstulas en los folculos con abundante supuracin por los orificios foliculares. La propia reaccin inflamatoria elimina el pelo que se desprende fcilmente con la traccin. Puede curar dejando calvas ms o menos evidentes. Este tipo de tia puede observarse en la cabeza, en la barba y en otras zonas pilosas. Favus: excepcional hoy da en Espaa, se caracteriza por inflamacin y secrecin en los foliculos pilosos que se desecan y solidifican para formar costras de color amarillo. Cura dejando calvas en las zonas infectadas.

Figura 1: Placa de alopecia en regin occipital Figura 2: Placa de alopecia en cuero cabelludo por una tia de cuero cabelludo. por una tia de carcter inflamatorio. 2.- Tia del cuerpo (Tinea corporis) o tia de la piel lampia (sin cabello): Se localiza en la piel del tronco, de brazos y piernas o en zonas lampias de la cara. Se transmiten directamente por contacto con la piel de otra persona infectada o a travs de ropas y utensilios, o extendindose desde otras lesiones en la piel de la misma persona.

La Tia superficial (tambin llamada herpes circinado) se presenta en forma de medallones circulares u ovales de borde con escamas o vesculas, e inflamado, y el centro enrojecido y con escamas. Tambin en forma anular con el borde rojo y el centro con piel normal (con uno o varios anillos). Otras veces, como una zona con vesculas que tiende a curar por el centro. Tia profunda: Con inflamacin de los folculos piloso. Suelen presentarse en piernas de mujeres despus de la depilacin. A veces aparece como una placa con los folculos inflamados.

Figura 3: Tia del cuerpo o de la piel lampia. 3.- Tia inguinal o eczema marginado de Hebra: Es la parasitacin por hongos en las ingles, perin y regin perianal, que llega a invadir la zona interna de los muslos. La infeccin se transmite por compartir toallas, prendas interiores, ropas de cama..., predisponiendo a ello los climas hmedos, la maceracin de la zona, la diabetes o la obesidad. Se presenta como placas de bordes enrojecidos y con vesculas, tipo eczema, y un centro ms oscuro, con escamas y poco inflamado.

Figura 4: Tia inguinal o eccema marginado de Hebra. 4.- Tia de la barba: Es exclusiva de los varones y puede ser ms o meno superficial, o con pstulas e inflamacin de los folculos formando placas con foliculitis y supuracin, como en las tias del cuero cabelludo.

Figura 5: Tia de la barba. 5.- Tia de los pies: Es la forma de dermatofitosis ms frecuente. Se la conoce como pie de atleta. Se localiza en los pliegues interdigitales y en las plantas de los pies. Es ms fcil de adquirir por los adultos jvenes deportistas, principalmente en verano, que utilizan calzado oclusivo y, a menudo, andan descalzos por vestuarios pblicos. Es infrecuente en la infancia y la vejez. Existen varias formas clnicas:

Forma crnica, con descamacin de los pliegues interdigitales y, a menudo, con fisuras en el fondo del pliegue. El cuarto espacio interdigital es el afectado con mayor intensidad y frecuencia. Con frecuencia, las lesiones se infectan por bacterias complicando la evolucin. Forma crnica hiperqueratsica, caracterizada por un discreto enrojecimiento e hiperqueratosis (engrosamiento y endurecimiento de la piel) que afecta a la planta, los bordes laterales y los talones y que, a veces, se extiende al dorso de los pies, adoptando una forma en mocasn. Forma vesiculoampollosa, que en general se produce en un solo pie en el arco plantar y en los pulpejos de los dedos, y se caracterizada por ser un brote de vesculas agrupadas sobre una base inflamatoria y que, a menudo, se infectan.

Figura 6: Tia del pie o pie de atleta.

Figura 7: Tia en mocasn, con extensin hacia el lateral y dorso del pie.

6. Tia de las manos: Es similar a la tia de los pies pero localizado en los pliegues, palmas o dorso de las manos. En general, es unilateral y, a menudo, se debe al contagio por rascarse las lesiones de una tia del pie. 7. Tia incgnito o tia ignota: As se denomina a la enfermedad, cuando se ha tratado inadecuadamente con cremas de corticoides o preparados tpicos polivalentes, que lo nico que consiguen, es aliviar el prurito y modificar el

aspecto morfolgico caracterstico de la enfermedad, dificultando con ello el diagnstico. Da lugar a lesiones cutneas extensas y persistentes, con menos signos inflamatorios. Aparece con particular frecuencia en la cara. 8. Tia de las uas u onicomicosis: Se observan fundamentalmente en el adulto y con frecuencia se asocia a tias crnicas de las manos o de los pies. Son infecciones crnicas y de difcil tratamiento. Existen diversas formas:

La subungueal distal, con inflamacin de la zona que rodea la ua, comenzando en la zona del borde de la ua en la que aparecen manchas amarillas o blanquecinas que van aumentando a la par que se engruesa la ua. La subungueal prximal, que se inicia en la zona de nacimiento de la ua, es menos frecuente y suele presentarse en personas con problemas inmunitarios. La onicomicosis blanca superficial, que afecta a la capa ms superficial de la ua que se vuelve blanquecina.

Figura 8: Leuconiquia distal en la primera y tercera ua del pie.