Calpastatina
-
Upload
christina-reales-canate -
Category
Documents
-
view
217 -
download
0
Transcript of Calpastatina
-
7/26/2019 Calpastatina
1/14
Calpastatina (CAST), un inhibidor endgeno de las calpanas, juega un papelimportante en la tenderizacin post-mortem de
carne. os objeti!os de este estudio "ueron in!estigar polimor#smos denucletido $nico (S%&) en el gen '&A'T bo!ina * de asociacin
con la canal * calidad de la carne. +n total de bo!inos procedentes derebaos comerciales se pusieron a prueba en este estudio inclu*endo purointroducido
razas, / poblaciones cruzadas, * 0 razas autctonas puras chinos. CincoS%&s se identi#caron en la posicin 121 (A 3 4), 567 (4 3 A), 0755
(C 3 T), 071 (4 3 A) * 526 (C 3 T) en el gen CAST (4en8an9 %: de accesoA;21/ue contienen el haplotipo A 3 4 (Apara S%&121 * 4 para S%&567) tendan a tener menor "uerza decizallamiento
>ue los >ue contienen el 4 3 A haplotipo, *, sobre todo, los animaleshomocigotos para el A 3 4 haplotipo tenan aproBimadamente 9g menor
"uerza de corte >ue los homocigotos para el A 3 de haplotipos (p ?7,7).stos resultados sugieren >ue ambos marcadores pueden ser e#caces parala
seleccin asistida por marcadores de rasgos de calidad de la carne enrebaos comerciales chinos, especialmente S%&567 >ue se puede utilizarpara nati!a china
ganado. (&alabras cla!eD Calpastatina 4ene, canal * la carne de calidad'asgos, ganado de carne, S%&s)
-
7/26/2019 Calpastatina
2/14
E%T'+CCEF%
Calpastatina (CAST), inicialmente identi#cado en el es>ueleto
muscular por 8usch et al. (16), es el inhibidor endgeno
de las calpanas (4oll et al., 770), >ue puede eliminar la Gdisc
de las mio#brillas del m$sculo es>uel=tico en la presencia de
Ca H * desempear un papel importante en la post-mortem
tenderizacin de carne (4oll, 16/I. 'ichard et al, 112).
&or lo tanto, las "unciones calpastatina como un regulador de la !elocidad *
grado de tenderizacin post mortem (Joohmaraie, 11/I
Joohmaraie et al., 112). l gen '&A'T bo!ina, asignada
a 8TA 6 (8ishop et al., 110), tiene una relacin con una
KT para la "uerza de corte * ha sido propuesto como un posicional
* el gen candidato "uncional para este KT (Choi et al.,
77
-
7/26/2019 Calpastatina
3/14
estos polimor#smos gen=ticos en el gen del elenco. por
ejemplosD +o4-CAST se aplic en el E4%ETQ
Tender4% panel de prueba (Perial td., Atlanta, 4A) *
S%&121 se aplic en la prueba de 4eneSTA' Ternura
panel (Soluciones gen=ticos &t*. td., Albion, Australia).
Sin embargo, no se in"orm de estudios similares sobre estos marcadores
en rebaos comerciales chinos.
os objeti!os del presente estudio "ueron in!estigar
S%&s en el gen '&A'T bo!ina * e!aluar la asociacin
entre los S%&s * la terneza de la carne * otros importantes
canal * la carne caracteres de calidad en comerciales chinos
rebaos.
PAT'EAS Q PRTS
Animales * gestin
&ara el estudio de asociaciones entre los marcadores de genes *
rasgos de ganado de carne, un total de no!illos alimentadoscomercialmente
cu*a edad al comienzo del eBperimento !ari de 7 a
02 meses "ueron seleccionados al azar de tres corrales de engorde de carne
(achang, San*uan * 8aolongshan). stos animales
constaba de ocho razas bo!inasD Angus (% 00), ere"ord
(% 5), imousin U uBi (% 5), Charolias U ;uzhou (%
0), Simmental U Ninnan (% /5), Simmental U Pongolia (%
-
7/26/2019 Calpastatina
4/14
Simmental. Charolais * imousin toros "ueron progenie de
animales de raza pura introducidas de ;rancia, * Simmental
toros "ueron progenie de pura raza ;lec9!ieh introdujeron
de Alemania. no!illos ere"ord * Angus estaban progenie
el ganado de raza pura del introducidos de Australia e Englaterra,
respecti!amente. uBi, Ninnan * Kinchuan eran puros chinos
razas autctonas.
as dietas de los tres corrales de engorde de carne tenan di"erentes
componentes, pero se componen principalmente de grano de maz 27V,
5-7V de la torta de semillas de algodn, granos de destilera 7-V,V
sal!ado de trigo adems de !itaminas * suplementos minerales /-2V. +%
Se dej perodo de adaptacin antes de la prueba de 7 d para el
animales para adaptarse a las dietas * el medio ambiente. os animales deensa*o
"ueron criados en corrales de engorde de 7 d incluido el ajuste
perodo de 7 d. n el corral de engorde, casilleros de alimentacin "ueronalojados en
un cobertizo con el largo (norte * sur) laterales cerrados * la
lados cortos (este * oeste) abierta para "ormar una gran pluma en
el >ue los animales podan mo!erse libremente. +n r=gimen de alimentacinde tres
!eces al da "ue seguida durante el perodo del eBperimento. Slo
antes de la hora de la comida, cada animal se mantu!o en el
puesto de alimentacin marcado con el mismo n$mero * puesto en libertada
los corrales despu=s de la alimentacin. se recogi el consumo de alimentoresidual,
se pesaron * se registr diariamente.
in"ormacin "enotpica
-
7/26/2019 Calpastatina
5/14
Se midieron la canal * calidad de la carne rasgos
de acuerdo con el criterio de 48 3 T 605-115 de corte
stndar de la dulce * re"rigerada en China ('ep$blica &opular China
%orma ditorial). Pasacre peso corporal (S8@)
se midi justo antes de masacre despu=s de un periodo de / h de
rpido. a zona de las costillas ('A, cm
) Se midi en la
* la inter"az 0a costilla. a "uerza de corte @arner-8ratzler
(@8S;) se midi al cabo de 6 das post-mortem. Cuerpo
peso (C@) se midi justo despu=s de masacre. tro
caractersticas de la canal (rendimiento de la canal (&), el grado demarmoleo
(P8S) * mediciones de espesor de la grasa de espalda (8;T) eran
lle!ado a cabo a los / das post-mortem. as muestras de carne de
medir @8S; "ueron tomados de la inter"az entre
el * 0 costilla. a e!aluacin de P8S en China es un uea, modesta, moderada * abundante. os detalles son
se muestra en la Tabla .
identi#cacin * genotipado S%&
as muestras de A% "ueron eBtrados de muestras de sangre por
eBtraccin con "enol 3 cloro. Con base en el 0 O+T' de la
'&A'T secuencia gen=tica bo!ina (4en8an9
A;21/
-
7/26/2019 Calpastatina
6/14
!olumen 7-l >ue contiene 27 ng de A% plantilla, D77
cada cebador, d%T& 7,2 mP, ,2 mP de PgCl * 7,2 + de
Ta> A% polimerasa (Ta9ara, alian, China). a &C'
protocolo "ue de 1/ W C durante 2 min, seguido de /7 ciclos de 1/ W C
durante 07 s,
-
7/26/2019 Calpastatina
7/14
-
7/26/2019 Calpastatina
8/14
Kinchuan poblacin, * las "recuencias de los alelos A >ue se encuentra en
razas introducidas, hbrido, razas autctonas * chinos
el conjunto de las poblaciones "ueron 7,
-
7/26/2019 Calpastatina
9/14
* AA "ue de , 9g, ,2 9g * 7,70 9g, respecti!amente. &or
S%& 4567A, el !alor @8S; de los animales con
genotipo AA (/,5 Z 7,2 9g) "ue signi#cati!amente ma*or >ue
el !alor @8S; de a>uellos con el genotipo 44 (0,1/ Z 7,0 9g)
o 4A (/,7 Z 7,5 9g) (p ?7,7). a di"erencia SP
entre el genotipo AA * 4A * entre AA * 44
"ue de 7,6 9g * 7,56 9g, respecti!amente. a di"erencia SP
entre el genotipo 44 * A4 a slo 7,< 9g era.
Teniendo en cuenta los antecedentes gen=ticos uni"orme a tra!=s de la
animales, los resultados podran ser ineBactos. &or lo tanto, adems
asociacin entre los dos marcadores * "ue @8S;
analizado en tres grupos con di"erentes antecedentes gen=ticos
por separado, como se muestra en la Tabla /. os resultados mostraron >ue
A1214 marcador se asoci signi#cati!amente con @8S; en
el grupo E8 (razas introducidas) (p ?7,72) * C8 (cruz
razas) grupo (p ?7,72), pero no tu!o correlacin signi#cati!a
con @8S; en el grupo %8 (razas autctonas). e lo contrario,
4567A el marcador tu!o un e"ecto signi#cati!o sobre @8S; en
razas autctonas (p ?7,72), con una di"erencia de ,2< 9g en @8S;
entre el genotipo AA * 44 genotipo.
os datos de genotipo marcador de dos presentados en la Tabla 2
se utilizaron para determinar las "recuencias de haplotipos de dosmarcadores
sin ambig[edad para los 67 no!illos >ue eran homocigotos
para al menos uno de los dos marcadores. &or ejemplo, si una
el genotipo del animal en los dos marcadores "ue 44 * A4, a continuacin,
se debe lle!ar a un 4 3 4 haplotipo * un 4 3 A haplotipo.
Sin embargo, los / terneros restantes eran el doble
heterocigticos (4A genotipo para S%&121 * S%&567),
-
7/26/2019 Calpastatina
10/14
* no poda ser asignado de#niti!amente por>ue los haplotipos
>ue podran resultar de una combinacin de 4 3 A * 4 3 A
haplotipos o 4 3 4 * haplotipos A 3 A. la comparacin de la
SP de @8S;, no "ue di"cil de encontrar >ue la carne de
animales >ue contienen A 3 4 haplotipo tendan a tener menor
"uerza de corte de carne >ue contiene 4 3 A haplotipo, *,
especialmente, los animales homocigotos para AA S%&121 *
44 homocigotos para S%&567 (es decir, homocigotos para A 3 4
haplotipo) tena "uerza de corte de aproBimadamente 9g in"erior a
44 homocigotos para S%&121 * AA homocigotos para
S%&567 (es decir, homocigotos para el 4 3 A haplotipoI p ?7,7).
&ara homocigotos 4 3 4 haplotipo * A 3 A animales de haplotipos,
la "uerza de corte "ue intermedia.
ESC+SEF%
os polimor#smos del gen '&A'T han sido
reportado en razas "orneas, como ere"ord (Man
enennaam et al., 776), Angus (4ene%T /), 8rahman
(Casas et al., 77ue a"ecta a la calidad de la carne *encontr 2
polimor#smos en un "ragmento de A% 062 pb por secuenciacin.
Tres de ellos "ueron identi#cados en primer lugar, por 4. a A, C
a T * C a T sustitucin en las posiciones 071, 0755 *
-
7/26/2019 Calpastatina
11/14
526 (de acuerdo con la secuencia de 4en8an9 A; 21/u, @8S; es la "uerza re>uerida para cizallar una
Carne cocida al cabo de 6 das post mortem, * la @8S;
os !alores son negati!os entre correlacionado con la ternura
!alores (una, 77
-
7/26/2019 Calpastatina
12/14
genotipo 4A * AA en S%&121 (7,70 9g) * la di"erencia
entre 4A * 44 en S%&567 (7,< 9g)
signi#cati!amente menor >ue otros. stos resultados indicaron >ue
el alelo A de S%&121 * el alelo 4 de S%&567 tienen
los e"ectos de dominancia ms de sus genes alelos.
Sin embargo, este documento tambi=n indica >ue los animales
heredando el genotipo 44 en la posicin 121 tendan a tener
menor peso corporal masacre, peso de la canal, !estidor
porcentaje, el grado de marmoleo, el espesor de la grasa dorsal, * ms alto
zona de las costillas >ue los animales >ue heredan el genotipo 4A o AA.
el mismo modo, carne de no!illos con el genotipo AA en la posicin
567 tendan a tener menor peso corporal masacre, la canal
peso, una copia de espesor de grasa * una ma*or zona de las costillas *!estidor
porcentaje >ue la carne de no!illos con la A4 * 44
genotipo.
os resultados de los anlisis de asociacin entre el
marcadores * @8S; en di"erentes grupos gen=ticos conceden
con los resultados anteriores, * sugiri >ue tena S%&121
e"ecto signi#cati!o en @8S; en grupos E8 * C8, mientras
S%&567 tena asociacin ms signi#cati!a en los grupos %8.
Adems, hubo una tendencia e!idente para los animales de E8
grupo (0,
-
7/26/2019 Calpastatina
13/14
anlisis e"ecto genotpico mostr >ue los animales >ue contiene
el A 3 4 haplotipo tendan a tener menor "uerza de corte de
los >ue contienen el 4 3 A haplotipo. Adems, los animales
homocigotos para A 3 4 haplotipo tenan "uerza de cizallamiento
aproBimadamente 9g ms bajos >ue los homocigotos para el
4 3 A haplotipo. n general, este dio una indicacin "a!orable >ue
el haplotipo A 3 4 podra reducir la capacidad de CAST para
inhibir C%&% * aumentar la sua!idad de la carne.
ternura de la carne, uno de los "actores ms importantes
>ue conduce a la satis"accin del consumidor, depende principalmente de la
proceso de enternecimiento de la carne post mortem (Joohmaraie,
11/) * '&A'T puede regular mediante la inhibicin de la proteolisis Y-
* la acti!idad de la calpana-m (&ringle et al., 116). n este trabajo,
S%&121 * S%&567 en el gen '&A'T se genotipo
por &C'-';&, las enzimas de restriccin correspondientes "ueron
deE * TspE, respecti!amente. l m=todo era "cil
operar * de bajo costo en comparacin con el espectrgra"o de masas. n
&ara "acilitar los eBperimentos, un par de cebadores era
diseado para ampli#car un producto de 062 pb &C', >ue
contena los dos sitios de restriccin. As slo una &C' era
necesaria * el producto podra ser utilizada para determinar el genotipo delos dos
marcadores. l 0O+T' ha ganado la atencin debido a su
importancia en la determinacin de la eBpresin g=nica por
in\uir en la estabilidad del A'%m * la e#ciencia de traduccin
(ughes, 77
-
7/26/2019 Calpastatina
14/14
+T' del gen '&A'T bo!ina, mostr un e"ecto detectable
en la ternura, * ninguno de los dos marcadores ensa*ados mostraron
cual>uier e"ecto sobre el peso corporal masacre, zona de las costillas, lacanal
peso, rendimiento de la canal, el grado de marmoleo * grasa de la espalda
espesor. specialmente, S%&567 podra ser ms e#caz >ue
S%&121 en el "uturo, la seleccin asistida por marcadores en chino
poblaciones de ganado nati!as. &or lo tanto, estos resultados proporcionan
e!idencia de >ue el gen '&A'T tiene e"ectos potenciales sobre la carne
ternura * ampla las posibilidades de uso gen=tico
marcadores en CAST para mejorar la terneza de la carne en chino
rebaos comerciales, ganado amarillo especialmente nati!as * 3 o
ascendencia cruce. Ser necesario seguir trabajando para estudiar
estos S%&s en una poblacin ms amplia e in!estigar
asociacin de los polimor#smos de genes '&A'T con la carne
sensibilidad en los rebaos de ganado comerciales chinos.