Brucelosis Bovina
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BRUCELOSIS: EPIDEMIOLOGÍA, SALUD PÚBLICA NUEVAS TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS ALFREDO J. SÁNCHEZ-VILLALOBOS Profesor titular- FCV LUZ [email protected] 0416 2682253 MARZO, 2009 MAESTRÍA: MEDICINA PREVENTIVA CONTROL DE ENFERMEDADES
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BRUCELOSIS:EPIDEMIOLOGÍA, SALUD PÚBLICA
NUEVAS TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS
ALFREDO J. SÁNCHEZ-VILLALOBOSProfesor titular- FCV LUZ
[email protected] 2682253
MARZO, 2009
MAESTRÍA: MEDICINA PREVENTIVACONTROL DE ENFERMEDADES
¿PORQUÉ VAMOS ADISCUTIR
SOBREUNA
ENFERMEDADPREHISTÓRICA?
BRUCE DESCRIBE LAENFERMEDAD EN EL HUMANOEN 1884, EN MALTA.
ZAMMIT AISLÓ B. melitensis DELECHE DE CABRAS ABORTADASEN 1897.
BANG AISLÓ B. abortus DE UNAVACA ESE MISMO AÑO.
WRIGHT Y SMITH PROPONEN ELTEST DE SEROAGLUTINACIÓN(1897).
BUCK EN 1930, REPORTÓRESULTADOS MUYPROMISORIOS CON UNAVACUNA DENOMINADABACTERIUM ABORTUS STRAIN19.
GOAT MILKING STREET MALTASE, 1810
UN PRODUCTOR ÉLITE DEL MUNICIPIO MIRANDA PLANTEA SUINCONFORMDAD RESPECTO A LOS RESULTADOS DE UNA PRUEBADIAGNÓSTICA PARA BRUCELOSIS QUE SEÑALA 4,12% DEPOSITIVIDAD EN SU REBAÑO. INFIERE QUE UN NUEVO ANÁLISISSÓLO IDENTIFICA 4 VACAS POSITIVAS Y NO 35 COMO SE LEIMPUTAN.
LOS ANTECEDENTES REFIEREN POSITIVIDAD DEL 1% ANUAL A LAPRUEBA OFICIAL E ÍNDICES REPRODUCTIVOS ACEPTABLES. LASPÉRDIDAS POR ABORTO NO SUPERAN EL 5% ANUAL.
ESPECIE HOSPEDADORES
abortus (8)
suis (5)
melitensis (3)
canis (1)
ovis (1)
neotomae (1)
maris (2)
BOVINOS
PORCINOS
CAPRINOS / OVINOS
CANINOS
OVINOS
Rata del desierto
Mamíferos marinos
CABALLOS, BÚFALOS,AN. SILVESTRES
?
SIGNOS CLÍNICOS
ABORTOS
INFERTILIDAD
CRÍAS DÉBILES
RETENCIÓN DE M. FETALES
LESIONES ARTICULARES
ORQUITIS EPIDIDIMITIS
GRAN IMPACTO PRODUCTIVO Y ECONÓMICO
PÉRDIDAS PORBRUCELOSIS
DISMINUCIÓN EN LA PRODUCCIÓN DE
LECHE
REPERCUSIÓNSOBRE LA SALUD
PÚBLICA
INCREMENTO DE GASTOS PARA EL CONTROL DE LA
ENFERMEDAD
DISMINUCIÓN EN ELNÚMERO DE
NACIMIENTOS
DISMINUCIÓN EN ELINVENTARIO DE
VIENTRESPÉRDIDA DE LOS
MERCADOSINTERNACIONALES
PÉRDIDAS POR EL VALOR GENÉTICO
66 MILLONES € / AÑO
DISMINUCIÓN EN LA PRODUCCIÓN DE
CARNE
RESERVORIO SALVAJE
LIEBRE, RATA, JABALÍ
RESERVORIO DOMESTICO
VACA, CABRA, CERDA, OVEJA,BUFALA
LECHE Y DERIVADOS INGESTIÓN
HOMBRE
VÍA DIGESTIVAVERDURAS, AGUA
VÍA INHALATORIAPOLVO, AEROSOLES
CONTACTO DIRECTODE PIEL Y MUCOSAS CON SECRECIONES
DE ABORTOS U OTRAS
CONTACTO INDIRECTOCONTAMINACIÓN DEL AMBIENTE
INMUNIDADNUTRICIÓN
SREIg M
Ig G
LINFOCITOS T : CITOQUINAS : MACRÓFAGOS
TRANSFUSIÓNMÉDULA
CONSUMO ALIMENTOSMANEJO ANIMALES
MANEJO LABORATORIO
ABSORCIÓN INTESTINAL
FIEBRE
ESCALOFRIOS
DIAFORESIS
CEFALEAS
HIPOREXIA
MIALGIAS
ASTRALGIAS
OSTEOARTICULARES
NEUROBRUCELOSIS
GENITOURINARIAS
HEMATOLÓGICAS
CARDIOVASCULARES
DIRECTOS:
A- AISLAMIENTOS: CULTIVOS BACTERIOLÓGICOSCULTIVOS CELULARES
B- DETECCIÓN DE ANTÍGENOS: INMUNOHISTOQUÍMICAINMUNOFLUORESCENCIAELISA DE CAPTURAOTROS
C- DETECCIÓN DE MATERIAL GENÓMICO: PCR
MÉTODOS DIAGNÓSTICOS
INDIRECTOS:
DETECCIÓN DE ANTICUERPOS ESPECÍFICOS
PRUEBAS USADAS COMO TAMIZ
ANTÍGENO BUFERADO EN PLACA
ROSA DE BENGALA (CARDTEST)
RAP AUTOMATIZADA
PRUEBA RÁPIDA EN PLACA
PRUEBAS CONFIRMATORIAS
LENTA EN TUBO
2 MERCAPTO ETANOL
FIJACIÓN DE COMPLEMENTO
ENZIMOINMUNOENSAYO (ELISA)
FLUORESCENCIA POLARIZADA
FUENTE: OIE, 2006
?@
@
REGLAMENTO PARA EL CONTROL Y ERRADICACIÓN DE BRUCELOSIS (SEPTIEMBRE 2003)
EL DIAGNÓSTICO OFICIAL SE BASA EN LA DEMOSTRACIÓN DEANTICUERPOS MEDIANTE LA PRUEBA DE CARD TEST (ROSA DEBENGALA) Y POSTERIOR CONFIRMACIÓN MEDIANTE OTROS ANÁLISIS.
DEBEN INCLUIRSE TODAS LAS HEMBRAS MAYORES DE 20 MESES DEEDAD Y MACHOS REPRODUCTORES DESDE LOS SEIS MESES.
EL DIAGNÓSTICO DEBERÁ EJECUTARSE EN UNA UNIDAD DE TIEMPO
BRUCELOSIS
CAR
DTE
ST
ELISA-C / FPA ENFERMO SANO
+
-
1 1
7 387
8 388
2
394
396
Sn = 12,5%
Es = 99,7%
VP+ = 50,0%
VP- = 98,2%
PREV. Ap = 0,51% PREV. Ve = 2,02%
J DE YOUDEN = 0,12
BRUCELOSIS
FLUORESCENCIA POLARIZADA
MUESTRA NEGATIVA
LUZ POLARIZADA LUZ DESPOLARIZADA
INMUNOCOMPLEJOANTICUERPO BRUCELLACONJUGADO OPS
FLUORESCENCIA POLARIZADAFUNDAMENTO
MUESTRA POSITIVA
LUZ POLARIZADADESPOLARIZACIÓN
INCOMPLETA
INMUNOCOMPLEJOANTICUERPO BRUCELLACONJUGADO OPS
FLUORESCENCIA POLARIZADAFUNDAMENTO
EL DIAGNÓSTICO PROVIENE DE INTERPRETACIÓN DE LOS DATOS DEL LABORATORIO Y DEL ANÁLISIS
EPIDEMIOLÓGICO DE LOS ASPECTOS QUE ENVUELVEN LA PROBLEMÁTICA.
EN ESTA ENFERMEDAD ES DE VITAL IMPORTANCIA EL CONOCIMIENTOEPIDEMIOLÓGICO DE LA MISMA POR PARTE DEL MÉDICO VETERINARIOASESOR Y DEL LABORATORIO QUE PROCESA LAS MUESTRAS. ELVETERINARIO ASESOR DEBE CONOCER LOS PUNTOS CRÍTICOS DE LACADENA EPIDEMIOLÓGICA PARA PLANTEAR UNA ESTRATEGIA DESDEDONDE ATACAR PARA PODER INTERRUMPIR EL CONTAGIO DE LOS ANIMALESEN LAS FUENTES DE INFECCIÓN.ES OBLIGATORIO E IMPERIOSO QUE AMBOS ENTIENDAN Y CONOZCAN LAUTILIDAD Y LIMITACIONES DE CADA ENSAYO (CT, BPA, PLT, 2 ME, ELISA IFPA, ELISA DE COMPETENCIA,) A LOS EFECTOS DE INDICAR LA PRUEBA QUECORRESPONDA DE ACUERDO A LA SITUACIÓN EPIDEMIOLÓGICA PLANTEADAO LA URGENCIA EN LA OBTENCIÓN DE LOS RESULTADOS.
FLUORESCENCIA POLARIZADAPROCEDIMIENTO
MUESTRA O BLANCO MUESTRA + CONJUGADO
LUZ POLARIZADALUZ PARCIALMENTE
POLARIZADALUZ POLARIZADALUZ DESPOLARIZADA
INMUNOCOMPLEJOANTICUERPO BRUCELLACONJUGADO OPS
LECTURA 1 LECTURA 2
LABORATORIO DE MORFOFISIOLOGÍA PVUCOMPONENTES DEL KIT PARA FPA
SENTRY 100: EQUIPO PORTÁTIL PARA FPA
BRUCELOSIS
FLUORESCENCIA POLARIZADA
BRUCELOSIS
F P A ELISA-C
VALIDACIÓN Y PUESTA EN PRÁCTICA
POSITIVOS
NEGATIVOS
F P A ELISA-C
J DE YOUDEN = 0,986
COMPARACIÓN FDA - ELISA-C
V E N T A J A S C O M P A R A T I V A SF P A vs. ELISA-C
RÁPIDOLa prueba puede completarse en 5 minutos yproduce resultados cuali cuantitativos. Norequiere pasos de lavados o tiemposprolongados de incubación.
FÁCIL Y EFICAZLa prueba puede ser realizada a campo o enel laboratorio y requiere de pocos reactivos einsumos.
PRECISOLa sensibilidad y especificidad sonequivalentes o superiores a ELISAcompetitivo y Fijación de Complemento. Eltest permite distinguir entre animalesvacunados y enfermos.
CONFIABLELa técnica está recomendada por la OIE(Organización Mundial de Sanidad Animal)desde el año 2004. En el 2008, esincorporada como prueba de referencia en eldiagnóstico de brucelosis.
**EXCELENTE RELACIÓN COSTO BENEFICIO**
ES IMPORTANTE AVANZAR EN LA IMPLEMENTACIÓN DE ENSAYOS DE LECTURA EN EQUIPOS: ELISA, FPA.
EXISTEN VARIAS RAZONES:1- ESTANDARIZACIÓN DE RESULTADOS.
2- UTILIZACIÓN CONTINUA DE CONTROLES POSITIVOS Y NEGATIVOS 3- REGISTRO ESCRITO Y ELECTRÓNICOS DE LOS ENSAYOS.
4- EMISIÓN DE REPORTE EPIDEMIOLÓGICOS EN FORMA RÁPIDA.5- DISMINUCIÓN DE LA CANTIDAD DE PUNTOS CRÍTICOS.
6- DISMINUCIÓN DE REACTIVOS Y SOLUCIONES. 7- DISMINUCIÓN DE ERRORES (PIPETEADAS).
8- ESTABLECIMIENTO DE UMBRALES DIAGNÓSTICOS PROPIOS.
HACIA DÓNDE DEBEMOS IR:
C O N C L U S I O N E S
LA BRUCELOSIS REPRESENTA AÚN UNA GRAN LIMITANTE ALDESARROLLO DE NUESTRA GANADERÍA.
FLUORESCENCIA POLARIZADA POSEE UNA CAPACIDAD DIAGNÓSTICASIMILAR O SUPERIOR A ELISA-c CON LA VENTAJA DE SER MÁS RÁPIDA,FÁCIL, CONFIABLE Y DE MEJOR RELACIÓN COSTO BENEFICIO.
ES NECESARIO REALIZAR UN LLAMADO A LA REVISIÓN YACTUALIZACIÓN DEL PROGRAMA OFICIAL DE CONTROL YERRADICACIÓN DE BRUCELOSIS EN NUESTRO PAÍS.
LA UTILIZACIÓN DEL MÉTODO FP ES UNA EXCELENTE ELECCIÓN, YADISPONIBLE EN VENEZUELA. SE DEBE TRABAJAR EN ADAPTARLAPARA UTILIZARLA COMO PRUEBA DE BARRIDO Y DE ESTA FORMAOPTIMIZAR LA DETECCIÓN DE ANTICUERPOS ESPECÍFICOS PARABRUCELA.
