*Bronquiolitis obliterante y neumonia inducida por una infección

experimental por Adenovirus en perros jóvenes*

*

¿Cómo se llevó a cabo el experimento?

20 Perros Beagle específicos libres de patógenos (SPF) de 12 semanas de edad Evaluación clínica

En una evaluación clínica, métodos serológicos microbiológicos y Virales de rutina Libres de:

* Bordetella bronchiseptica* Virus de la Parainfluenza* Virus del Moquillo Canino* Parvovirus canino

*Perros infectados*

Inoculados Vía intratraqueal Adenovirus Canino Tipo 2 (CAV-2) diluido en una Sol. Salina Amortiguadora de Fosfatos 6 ml

DESPUES DE LA INOCULACIÓN:* 1 Perro c/ día Al 1° y 2° día Necropsia* 2 Perros c/ día Al 3°, 4°, 5°, 8° y 15° día Necropsia* 3 Perros Al día 26 Necropsia

*Perros Control*

Inyectados Vía intratraqueal Con una Sol. Salina Amortiguadora de Fosfatos 6 ml

DESPUES DE LA INOCULACIÓN:* 2 Perros Al 3° día Necropsia* 3 Perros Al día 26 Necropsia

Perros Control:Los perros control fueron clínicamente

normales y no tuvieron lesiones graves en la necropsia. 

Perros Infectados:Los perros infectados tuvieron leve tos seca a

los 2, 3 y 4 días después de la inoculación Y moderadamente la temperatura rectal elevada

(hasta 40° C) a los 4-6 días. Un perro murió a los 15 días después de la

inoculación, y sus lóbulos pulmonares craneal y medio estaban difusamente neumónicos. 

Un número moderado de Pseudomonas aeruginosa se aisló del pulmón. 

Ninguna bacteria fue aislada de los pulmones de los otros perros. 

*Microscopia electrónica*

Viriones intranucleares en:*Cels. Epiteliales bronquiolares no ciliadas*Bronquiolos terminales y respiratorios*Cels. Mucosas en Bronquio y Tráquea

Bronquiolo respiratorio de un perro: Adenovirus presentes en el núcleo de la célula epitelial bronquiolar no ciliada (1 día después de la inoculación)

*Microscopia electrónica*

Antígeno viral en el núcleo y citoplasma de:*Cels. Epiteliales glandulares submucosas de la Tráquea y del Bronquio

Glándula submucosa de los bronquios de un perro (3 días después de la inoculación): Antígeno viral en núcleo y citoplasma de la célula.

*Microscopia electrónica*

La liberación viral pérdida de la envoltura nuclear y dispersión de viriones reunidos en el citoplasma.

Célula epitelial bronquiolar no ciliada en el bronquiolo terminal de un perro (A los 2 días después de la infección): Cambios citopatológicos.

Otros cambios citopatológicos:*Inflamación del Retículo endoplásmico y de la envoltura nuclear.*Inflamación de los compartimentos internos mitocondriales.*Ruptura del plasmalema.

*Microscopia electrónica*

Alteraciones en los Bronquios y Bronquiolos pequeños:*Hiperplasia del epitelio.*Epitelio hipercelular (multicapas)* Inclusiones virales intranucleares

Epitelio Bronquiolar Terminal de un perro (A 2 días después de la inoculación: Tejido Hipercelular con múltiples capas, células epiteliales no ciliadas hipertrofiadas. Un Neutrófilo en la parte superior, Agregados intranucleares de Adenovirus.

Macrófagos y Neutrófilos en:*Tejido conectivo Peribronquial y Peribronquiolar*Entre las cels. Epiteliales*En la luz de la Vía aérea

*Microscopia electrónica*

Paredes bronquiales y bronquiolares:* Engrosadas* Edematosas

Bronquiolos respiratorio y terminal, y parénquima alveolar (A los 3 días de la inoculación): El lumen bronquiolar contiene exudado de células inflamatorias, Las paredes bronquiolares están engrosadas e infiltradas por células inflamatorias.

Agregados celulares de: *Neutrófilos*Macrófagos*Linfocitos

Reacciones inflamatorias en:*Bronquios*Bronquiolos*Parénquima alveolar peribronquiolar

Los virus se observaron en vacuolas fagocíticas en los macrófagos alveolares

Neutrófilos en espacios alveolares. Macrófagos y neutrófilos estaban presentes dentro de los septos interalveolares. 

A los 5 días después de la inoculación:El epitelio terminal de revestimiento y los bronquiolos

respiratorios estaban completamente erosionados.El lumen bronquiolar contenía restos celulares

necróticos, fibrina, y macrófagos y neutrófilos. 

*Microscopia electrónica*

En zonas donde el epitelio se mantuvo:*Pérdida de cilios*Incorporación de cuerpos basales y axonemas en citoplasma.

Célula ciliada de un bronquiolo terminal (5 días después de la inoculación): Cuerpos basales y axonemas incorporados en el citoplasma. El núcleo contiene prominentes nucléolos. La Célula no tiene cilios proyectados en su superficie.

Agregados celulares en glándulas bronquiales y alrededor de los bronquiolos: *Neutrófilos*Macrófagos*Linfocitos*Células epiteliales necróticas

*Microscopia electrónica*

En zonas de neumonia:*Mayor num. de cels. Epiteliales tipo 2*Alveolos forrados por cels. Epiteliales tipo 2.

Parénquima alveolar de un perro (A los 8 días de la inoculación): Los septos alveolares están revestidos por células epiteliales cuboidales tipo 2. Una célula contiene una prominente inclusión viral

*Microscopia electrónica*

Pólipos compuestos de:*Colágeno*Fibroblastos*Células inflamatorias*Cubiertos por cels. Epiteliales cúbicas

Bronquiolo respiratorio de un perro (A los 15 días de la inoculación): Pólipo de tejido conectivo que contiene células mononucleares inflamatorias que sobresalen en el lumen bronquiolar.

*Microscopia electrónica*

Parcial o completa estenosis de muchos bronquiolos terminales por:* Fibroblastos*Pequeños números de Linfocitos y Macrófagos*Colágeno

Bronquiolo terminal de un perro (A los 26 días de la inoculación): El lumen bronquiolar está parcialmente obstruido por tejido conectivo. En la parte superior el perímetro alveolar.

*Microscopia electrónica*

Estas áreas de obliteración bronquiolar o estenosis, y fibrosis parenquimal estuvieron presentes con mayor frecuencia en las zonas ventrales del pulmón y se encontró en los 3 perros que habían sido infectados. 

Bronquiolo terminal de un perro (A los 26 días de la inoculación): El lumen bronquiolar está casi completamente remplazado por tejido conectivo. Las flechas delinean el perimetro que tenía.

*CONCLUSIONES*

Bronquitis y Bronquiolitis NecrotizanteNecrosis de la glándulas bronquialesNeumonia instersticial

Manifestaciones patológicas:

Secuelas crónicas de la reacción inflamatoria:

Bronquiolitis ObliteranteEstrechamiento de los bronquiolosFibrosis multifocal del parénquima alveolar

Bronquitis y Bronquiolitis necrotizante e hiperplásicaEfectos citotóxicos inducidos

por el virus

La replicación de los Adenovirus en las células epiteliales se asocio a:

La pérdida de la superficie de los cilios en células ciliadasIncorporación de cuerpos basales y axonemas en el

citoplasma de las células ciliadas.Necrosis y erosión epitelial Obstrucción de los lúmenes

bronquiolares por fibrina, restos necróticos y células inflamatorias Bronquiolitis obliterante (Estenosis)

Neumonía instersticial

La replicación de los Adenovirus en las células Epiteliales Alveolares tipo 2: