BIOQUÍMICA II - 2014

IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS

*Idrobo María Alicia*Narváez Luisa *Ramón Erika *Carrión Tito * Coral Jimena

*Profesionales en Formación, Ciencias de la Salud, Titulación de Bioquímica y Farmacia, Universidad Técnica Particular de Loja, San Cayetano Alto s/n C.P. 11 01 608; Loja, Ecuador

RESUMEN

La práctica tuvo como objetivo conocer y desarrollar las principales reacciones de algunos lípidos dando a conocer sus propiedades más importantes como la solubilidad de los ácidos grasos con diferentes sustancias por medio de la preparación de distintas soluciones en tubos de ensayos. Primeramente se combina cada una de las mezclas entre aceite, mantequilla, manteca con los diferentes reactivos como NaOH, Sudan III, Yodo, Éter y Agua dependiendo de la técnica. En cada proceso se obtuvo diferentes resultados como en la técnica de Saponificación se obtuvo como principal producto la sal de dicho ácido/ base, en la técnica de Tinción se observó la presencia lípidos principalmente de triglicéridos, en la técnica de Insaturación la decoloración del agua de yodo por la acción del lípido se observó la presencia de al menos un doble enlace y que ocurre por la facilidad de unión de los halógenos a dobles enlaces y en la técnica de Solubilidad la formación de dos capas en el caso de la primera muestra radica en la insolubilidad de lípidos en compuestos polares (agua), no obstante la formación de una sola capa en la segunda muestra nos revela la solubilidad de los lípidos en compuestos apolares (éter).

Palabras clave: lípidos, Saponificación, Tinción, Solubilidad, Insaturación.

INTRODUCCIÓN:

Los lípidos son constituyentes importantes de la alimentación, no solo por su elevado valor energético, sino también por las vitaminas liposolubles y los ácidos grasos esenciales contenidos en la grasa de los alimentos naturales. En el cuerpo, las grasas sirven como una fuente eficiente de energía directa, y potencialmente, cuando están almacenadas en el tejido adiposo. Sirven como aislante térmico en los tejidos subcutáneos y alrededor de ciertos órganos, y los lípidos no polares actúan como aislantes eléctricos que permiten la propagación rápida de las ondas

despolarizantes a lo largo de los miembros mielinizados. El contenido de lípidos en el tejido nervioso es particularmente alto. Lípidos y proteínas combinados son constituyentes celulares importantes que se encuentran en la membrana celular y en las mitocondrias y sirven también como medios para transportar lípidos en la sangre.El conocimiento de la bioquímica de los lípidos es importante en la comprensión de muchas áreas biomédicas de interés, por ejemplo, la obesidad, arteriosclerosis y el papel de varios ácidos grasos

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poliinsaturados en la nutrición y la salud.(1)

SAPONIFICACIÓN

Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose en los dos elementos que las integran: glicerina y ácidos grasos. Éstos se combinan con los iones sodio o potasio del hidróxido para dar jabones, que son en consecuencia las sales sódicas o potásicas de los ácidos grasos. En los seres vivos, la hidrólisis de los triglicéridos se realiza mediante la acción de enzimas específicos (lipasas) que dan lugar a la formación de ácidos grasos y glicerina.(2)

TINCIÓN

Los lípidos se colorean selectivamente de rojo -anaranjado con el colorante Sudán III. La técnica del Sudán III es un método utilizado fundamentalmente para demostrar la presencia mediante tinción de triglicéridos, aunque también tiñe otros lípidos Pertenece al grupo de colorantes indiferentes, que son aquellos que no tienen afinidad por estructuras ácidas o básicas. Son insolubles en el agua y tiñen aquellas sustancias que tienen un poder de disolución superior al del líquido empleado para preparar la solución colorante.(3)

SOLUBILIDAD

Los lípidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequeñísimas gotas formando una emulsión de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sitúa sobre el agua. Por el contrario, las grasas son solubles en

disolventes orgánicos, como el éter, cloroformo, acetona, benceno, etc.(2)

PRUEBAS DE INSATURACIÓN

Los ácidos grasos presentes en grasas animales están comúnmente saturados, mientras que aquellos que están presentes en los vegetales contienen uno o más dobles enlaces.Los halógenos pueden unirse fácilmente a los dobles enlaces. La decoloración de una solución de bromo o yodo por un lípido indica la presencia de dobles enlaces.(1)

MATERIALES Y METODOS

MUESTRA- Aceite Vegetal - Mantequilla

MATERIALES- Tubos de

ensayo - Baño María- Pipeta de 5ml

y 10ml- Pinza de

Madera- Bisturí - Gradilla

REACTIVOS- Agua

destilada - Éter- Solución de

NHO al 20%- Solución de

Sudán III- Tinta Roja - Agua de Yodo

METODOLOGÍA

SAPONIFICACIONEn un tubo de ensayo colocamos 2ml de muestra y 2ml de solución de NHO (Hidróxido Sódico) al 20%, y agitamos fuertemente, luego colocamos nuestro tubo de ensayo a baño maría durante 20-30 minutos. Transcurrido este tiempo, se observan en el tubo de ensayo 2-3 fases.TINCIONEn una gradilla colocamos 2 tubos de ensayo, se agrega 2ml de muestra en cada uno de los tubos respectivamente, luego añadimos

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4-5 gotas de solución de Sudán III en uno de los tubos, y en el otro tubo añadimos 4-5 gotas de tinta roja, agitamos ambos tubos y los dejamos reposar.INSATURACIONEn un tubo de ensayo colocamos un poco de muestra, añadimos lentamente agua de Yodo, y agitamos luego de cada adición. Observamos la reacción que ocurre en el tubo de ensayo.

SOLUBILIDAD Tomamos dos tubos de ensayo y le colocamos 2ml de muestra en cada uno de ellos, luego a uno de los tubos le añadimos 2ml de agua, y al otro tubo le añadimos 2ml de Éter, agitamos energéticamente ambos tubos y los dejamos reposar.