Biofuel m2 Lacc2
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ESTUDIO CIN TICO DE LAREACCI NCATALIZADA POR LA
CELOBIASA (BIOFUEL)
Mesa 2
LACC2
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INDICE:1. Construccin de la curva de calibrado.2. Determinacin de la velocidad de reaccin en presencia y ausencia de enzima.3. Determinacin del efecto de la temperatura en la velocidad de reaccin.4. Determinacin del efecto del pH en la velocidad de reaccin.5. Determinacin del efecto de la concentracin de enzima en la velocidad de
reaccin.6. Determinacin del efecto de la concentracin de sustrato en la velocidad de
reaccin.
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1. Construccin de la curva de calibrado Curva de calibrado
y = 0,0218x - 0,0591
R = 0,9929
0
0,5
1
1,5
2
2,5
0 20 40 60 80 100 120
ABSO
RBANCIA
[P-NITROFENOL] (N!L"
CURVA DE CALIBRADO
PATRON [p-nitrofenol]
(nmol/ml)
Absorbania (!"# nm)
S1 # #$###
S2 "%$& #$%%'S3 %& #$!!
S4 #$"%S5 "## %$"*#
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2. Determinacin de la velocidad de reaccin en presencia yausencia de enzima
RE+,TADO+C,.ETA TIEPO (min) A.+OR.ANCIA
(!"#nm)
INICIO # #$###E1 " #$%%*
E2 % #$!E3 ! #$'
E4 0 "$!0E5 * "$""FIN * #$#'#
0
10
20
#0
40
50
60
$0
80
90
100
0 1 2 # 4 5 6 $ 8 9
[P-NITROFENOL](N!L"
TIEPO (IN"
[P-NITROFENOL]/TIEMPO
11
11,5
12
12,5
1#
1#,5
0 1 2 # 4 5 6 $ 8 9
%ELOCI&A&(N!LIN
"
TIEPO (IN"
VELOCIDAD/TIEMPO
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Conentraiones:[E"]1 (#2%%*3#2#&")/#2#%"*1"'2" nm/m
[E%]1 (#2!3#2#&")/#2#%"*1%!2& nm/m[E']1 (#2'3#2#&")/#2#%"*1!*2%0 nm/m[E!]1 ("2!03#2#&")/#2#%"*1#2!% nm/m
[E&]1 ("2""3#2#&")/#2#%"*1#2' nm/m
4eloi5a5es:4E"1 "'2"/"1"'2"nm/m min
4E%1 %!2&/%1"%2'#nm/m min4E'1 !*2%0/!1"%2#nm/m min
4E!1 #2!%/01""2!nm/m min
4E&1 #2'/*1""2'#nm/m min
CONC,+IONE+
A la 6ista 5e los res7lta5os obteni5os en la e8perienia reali9a5a2 se apreia 7narelain lara ; si
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3. Determinacin del efecto de la temperatura en la velocidad dereaccin
RE+,TADO+TEPERAT,RA (BC) A.+OR.ANCIA (!"#nm)
0 "$"!"
22 "$%'#37 %$%%'
0
20
40
60
80
100
120
0 5 10 15 20 25 #0 #5 40
[P-NITROFENOL](N!L"
TEPERAT'RA (C"
[P-NITROFENOL ]/T
20
25
#0
#5
40
45
50
55
0 5 10 15 20 25 #0 #5 40
%ELOCI&A&(N!LIN
"
TEPERAT'RA (C"
VELOCIDAD/TEMPERATURA
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Conentraiones:[#BC]1 ("2"!"3#2#&")/#2#%"*1&&2#& nm/m
[%%BC]1 ("2%'#3#2#&")/#2#%"*1&2"' nm/m['BC]1 (%2%%'3#2#&")/#2#%"*1"#!20* nm/m
4eloi5a5es:
4#B1 &&2#&/%1%2&'nm/m min
4%%B1 &2"'/%1%2&nm/m min4'B1 "#!20*/%1&%2'!nm/m min
CONC,+IONE+En este aso2 se 67el6e a apreiar la impliain 5ireta ; si
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4. Determinacin del efecto del pH en la velocidad de reaccin RE+,TADO+
pH ABSORBANCIA
(410)*"
5 1,142
6,# 0,941
8,6 0,019
0
10
20
#0
40
50
60
5 5,5 6 6,5 $ $,5 8 8,5 9
[P-NITROFENOL](N!IN"
P+
[P-NITROFENOL]/PH
0
5
10
15
20
25
#0
5 5,5 6 6,5 $ $,5 8 8,5 9
%ELOCI&A&(N!LIN"
P+
VELOCIDAD/PH
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Conentraiones:
p&1 ("2"!%3#2#&")/#2#%"*1&&2"# nm/mp02'1 (#2!"3#2#&")/#2#%"*1!&2** nm/m
p*201(#2#"3#2#&")/#2#%"*1'2&* nm/m
4eloi5a5es:
4&1 &&2"#/%1%2&&nm/m min
402'1 !&2**/%1%%2!nm/m min4*201 '2&*/%1"2nm/m min
CONC,+IONE+Otro 5e los fatores @7e afetan a la ati6i5a5 en9imtia es el p$a; 7n ran
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!
5. Determinacin del efecto de la concentracin de enzima en lavelocidad de reaccin
RE+,TADO+
TIEPO (min) C,.ETA A.+OR.ANCIA
(!"#nm)
1 " #$%"#
2 % #$!&8 ' #$"0
1 " #$"*'2 % #$!'#8 ' #$""
0
5
10
15
20
25
#0
#5
40
45
50
0 2 4 6 8 10
[P-NITROFENOL](N
!L"
TIEPO (IN"
[P-NITROFENOL]/TIEMPO
. [/)*] 3 [/)*]
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1"
Conentraiones:
["]1 (#2%"#3#2#&")/#2#%"*1"%2'! nm/m[%]1 (#2!&3#2#&")/#2#%"*1%'2 nm/m[']1 (#2"03#2#&")/#2#%"*1!!2' nm/m
["]1 (#2"*'3#2#&")/#2#%"*1""2"" nm/m[%]1 (#2!'#3#2#&")/#2#%"*1%%2!! nm/m
[']1 (#2""3#2#&")/#2#%"*1!!2 nm/m
4eloi5a5es:
4"1 "%2'!/"1"%2'! nm/m min
4%1 %'2/%1""2* nm/m min
4'1 !!2'/*1&2& nm/m min4"1 ""2""/"1""2"" nm/m min
4%1 %%2!!/%1""2%% nm/m min
4'1 !!2/*1&2&0 nm/m min
CONC,+IONE+En esta e8perienia2 lo @7e se preten5e es 6erifiar el efeto 5e la onentrain
5el atali9a5or sobre la 6eloi5a5 5e reain$,n a7mento en la onentrain 5e en9ima no interfiere en la 6eloi5a5 5e
reain @7e 6emos omo esta 5ismin7;e on el paso 5el tiempo al i
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Conentraiones:["]1 (#2%#&3#2#&")/#2#%"*1"%2"" nm/m
[%]1 (#2!0*3#2#&")/#2#%"*1%!2"* nm/m[']1 ("2&"3#2 #&")/#2#%"*1&20 nm/m["]1 (#2#&!3#2 #&")/#2#%"*1&2" nm/m
[%]1 (#2"'03#2 #&")/#2#%"*1*2& nm/m
[']1 (#2'!"3#2#&")/#2#%"*1"*2'& nm/m
4eloi5a5es:
4"1 "%2""/"1"%2"" nm/m min
4%1 %!2"*/%1"%2# nm/m min
4'1 &20/*12!0 nm/m min
4"1 &2"/"1&2" nm/m min4%1 *2&/%1!2!* nm/m min
4'1 "*2'&/*1%2% nm/m min
CONC,+IONE+A ma;or onentrain 5e s7strato2 a 7na onentrain fia 5e en9ima se
obtiene 7n ma;or ren5imiento$ Al ir a7mentan5o este ren5imiento la 6eloi5a55e reain 6a 5ismin7;en5o$
