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UNIVERSIDAD DE MAGALLANES FACULTAD DE INGENIERヘA DPTO. DE QUヘMICA Biodiesel a partir de microalgas antárticas: Estudio parámetros de crecimiento de éstas. “Trabajo de titulación presentado en conformidad a los requisitos para obtener el título de Ingeniero Civil en Química”. Profesor Guía: Sr. Pedro Cid Agüero PAMELA ALEJANDRA CARDENAS OJEDA - Marzo 2010-

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UNIVERSIDAD DE MAGALLANESFACULTAD DE INGENIERÍA

DPTO. DE QUÍMICA

Biodiesel a partir de microalgas antárticas:Estudio parámetros de crecimiento de éstas.

“Trabajo de titulación presentado enconformidad a los requisitos paraobtener el título de Ingeniero Civil enQuímica”.

Profesor Guía: Sr. Pedro Cid Agüero

PAMELA ALEJANDRA CARDENAS OJEDA- Marzo 2010-

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AGRADECIMIENTOS

En primer lugar agradezco a mi mama, hermanas y familiares, por el apoyo

brindado en todo momento y durante esta etapa, sin ustedes este logro no habría sido

posible.

A Dios, quien fue el guía para seguir adelante en los momentos de flaqueza y

duda, quien siempre ha estado entregándome su apoyo a través de las personas que

están a mi alrededor.

A mis amigos, sin ustedes este logro no seria nada, gracias por todos los

momentos de distracción y por pasar juntos la mayor parte del tiempo, por llegar a ser

mas que unos simples compañeros, por ser ahora parte de mi vida y corazón.

No puedo dejar de agradecer a quienes creyeron en mi, como parte de este

proyecto; don Pedro Cid y don Juan Carlos Moreno; espero no defraudarlos y haber

cumplido con sus expectativas Muchísimas gracias por el tiempo dedicado.

Mis agradecimientos a la dotación de Base Bernardo O’Higgins 2009 del Ejército

de Chile, por su disposición y colaboración durante toda la campaña Antártica.

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RESUMEN

Dentro de las problemáticas medio ambientales, la más importante hoy

en día es el calentamiento global; que es consecuencia del efecto invernadero,

causado por las emisiones a la atmósfera, principalmente por las emisiones de

CO2 y otros gases invernaderos. Junto a esta problemática, existe un segundo

problema ocasionado por la crisis económica; que trae como consecuencia el

aumento en el precio de los combustibles y agotamiento del petróleo. Ambos

factores favorecen la busqueda de nuevas y mejores alternativas energéticas.

Así nacen los biocombustibles principalmente usados en Europa, cuya

producción y uso van en aumento.

Este trabajo tiene por objetivo determinar las proyecciones futuras de la

utilización de esta nueva energía, específicamente del biodiesel; y conocer cuál

es la situación actual del uso de este. Un segundo objetivo fue estudiar y

analizar los parámetros importantes que afectan el crecimiento de microalgas

provenientes de la Antártica, con el fin de evaluar la factibilidad de obtener

biodiesel a partir de ellas.

Para el análisis de las microalgas de origen antártico, se estudiaron tres

factores: temperatura, luminosidad y soporte. El procedimiento llevado a cabo,

se basó principalmente en la toma de datos de crecimiento a través de la

medición de pesos, y variando uno de estos parámetros y manteniendo los

otros dos fijos.

Los datos tomados, son llevados a correlaciones de forma de analizar

mejor el comportamiento de las microalgas frente a los cambios físicos, y con

ello se llega a la conclusión, que esta especie tiende a un equilibrio y que este

ambiente, puede ser perturbado de acuerdo al valor de los parámetros a los

cuales sean expuestas. Otra de las conclusiones interesantes de considerar, es

que las condiciones a las que se encuentren no representan un problema para

su desarrollo, solo se ve afectada la cantidad en que lo hacen, por supuesto en

un rango establecido.

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ÍNDICE

Pág.CAPÍTULO I

1.1.1 Presentación 11.1.2 Objetivos 3

CAPÍTULO II

2.1 Introducción 52.2 Cómo y por qué nacen los biocombustibles 6

2.2.1 Cambio climático 72.2.2 Causas principales del cambio climático 72.2.3 El efecto invernadero 8

2.3 Definición de biocombustibles 122.3.1 Definición de biodiesel 12

2.4 Necesidad de biocombustibles 122.4.1 Producción de biodiesel en el mundo 152.4.2 Producción de biodiesel en Chile y proyección de

abastecimiento con energías renovables 172.5 Materias primas ideales para la producción de biodiesel 172.6 Comparación de propiedades de diesel y biodiesel 212.7 Ventajas del biodiesel a partir de microalgas 222.8 Costos 222.9 Usos alternativos 232.10 Empleo y seguridad 242.11 Efecto de la utilización de biocombustibles 242.12 Resumen diferencia entre energía convencional y

energía renovable 252.13 Consideraciones para el uso de biocombustibles 262.14 Legislación chilena respecto a biocombustibles 262.15 Biocombustibles a partir de microalgas en Chile 272.16 Situación de estudio en Chile 27

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CAPÍTULO III

3.1 Introducción 303.2 Razones de utilización de microalgas como

materia prima 313.3 Condiciones de crecimiento de microalgas 32

3.3.1 Impacto de la eficiencia fotosintética en la producciónde biocombustibles a partir de microalgas 33

3.4 Mecanismos de producción de microalgas 333.4.1 Producción fotoautrófica 34

3.4.1.1 Sistema de producción con reactoresAbiertos 343.4.1.2 Sistema de producción con foto-bioreactores cerrados 35

3.5 Importancia de la selección de la cepa 363.6 Producción de biodiesel a partir de microalgas 37

3.6.1 Contenido de lípidos en microalgas 373.6.1.1 Biosíntesis de lípidos en microalgas 38

3.6.2 Captura de dióxido de carbono 383.6.3 Transesterificación en la producción de

Biodiesel 393.6.4 Tecnología de conversión de microalgas a

Biodiesel 403.7 Especie escogida como materia prima 41

3.7.1 Descripción de microalgas antárticas 413.7.2 Reconocimiento de microalgas estudiadas 43

3.8 Cinética de crecimiento 443.8.1 Descripción cinética de Monod 44

CAPÍTULO IV

4.1 Introducción 474.2 Descripción de parámetros medidos en terreno 48

4.2.1 Descripción de toma de muestras de microalgas 494.3 Procedimiento realizado en Laboratorio 49

4.3.1 Materiales 49

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4.3.2 Esterilización 494.3.3 Equipos 504.3.4 Reactivos 504.3.5 Medio de cultivo 50

4.4 Propiedades de soporte utilizado 514.5 Procedimiento experimental 514.6 Resultados obtenidos y análisis de resultados 52

4.6.1 Resultados factor: temperatura 524.6.2 Análisis resultados factor temperatura 574.6.3 Resultados factor: luminosidad 604.6.4 Análisis resultados factor luminosidad 624.6.5 Resultados factor: soporte 654.6.6 Análisis resultados factor soporte 68

CAPÍTULO V

5.1 Conclusiones 715.2 Recomendaciones 72

BIBLIOGRAFÍA 73

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ÍNDICE DE FIGURAS

Pag.Fig. 2.1a: Temperaturas en diferentes lugares del planeta 8Fig. 2.1b: Nivel medio del mar 8Fig. 2.1c: Cantidad de nieve en el hemisferio norte 8Fig. 2.2: Descripción del efecto invernadero 9Fig. 2.3: Emisiones a la atmósfera 10Fig. 2.4: Emisiones debidas a las diferentes actividades 11Fig. 2.5: Demanda mundial de combustibles 13Fig. 2.6: Proyección estimada de biocombustibles 14Fig. 2.7: Producción de biodiesel 16Fig. 2.8: Aumento de producción de biodiesel 16Fig. 2.9: Producción de emisiones de CO2 por uso de

biocombustibles 25Fig. 3.1: Sistema abierto con agitación 34Fig. 3.2: Foto bioreactor tubular 35Fig. 3.3: Reacción de transesterificación 39Fig. 3.4: Tecnologías de obtención de energías renovables 41Fig. 3.5: Foto microalgas en estudio 42Fig. 4.1: Resultados de crecimiento de microalgas a 4º C 53Fig. 4.2: Resultados de crecimiento de microalgas a 12º C 55Fig. 4.3: Resultados de crecimiento de microalgas a 20º C 56Fig. 4.4: Crecimiento de microalgas a 297 Lux 61Fig. 4.5: Crecimiento de microalgas a 317 ampolletas 62Fig. 4.6: Crecimiento de microalgas con piedras blancas 66Fig. 4.7: Crecimiento de microalgas con arena 67Fig. 4.8: Crecimiento de microalgas con agar agar 68

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ÍNDICE DE TABLAS

Pág.Tabla 2.1: Emisiones debidas a combustibles 10Tabla 2.2: Producción de biodiesel 15Tabla 2.3: Cantidad de aceite producido por especie 18Tabla 2.4: Rendimiento por hectárea por especie 18Tabla 2.5: Viscosidad de los distintos tipos de aceite 19Tabla 2.6: Calor de combustión de los distintos tipos de aceite 19Tabla 2.7: Comparación de rendimiento/ hectárea 20Tabla 2.8: Contenido de aceite por especie de microalga 20Tabla 2.9: Comparación de propiedades entre combustibles de

diferente origen 21Tabla 2.10: Comparación entre tipos de energía 25Tabla 3.1: Cantidad de lípidos de microalgas 34Tabla 3.2: Ventajas y desventajas de sist. de transesterificación 40Tabla 3.3: Contenidos de lípidos de diferentes especies 41Tabla 4.1: Temperatura promedio enero – febrero 48Tabla 4.2: Resultados de crecimiento a 4º C 53Tabla 4.3: Resultados de crecimiento a 12º C 54Tabla 4.4: Resultados de crecimiento a 20º C 56Tabla 4.5: Correlaciones de datos obtenidos a 20º C 57Tabla 4.6: Correlaciones de datos obtenidos a 12º C 58Tabla 4.7: Correlaciones de datos obtenidos a 4º C 58Tabla 4.8: Porcentaje de crecimiento a distintas temperaturas 59Tabla 4.9: Crecimiento de microalgas a 297 Lux 60Tabla 4.10: Crecimiento de microalgas a 317 Lux 61Tabla 4.11: Correlaciones para datos de luminosidad 61Tabla 4.12: Correlación de Monod para datos obtenidos a 297 Lux 53Tabla 4.13: Correlación de Monod para datos obtenidos a 317 Lux 53Tabla 4.14: Porcentajes de crecimiento a diferentes intensidades 54de luzTabla 4.15: Porcentajes de crecimiento a 3 niveles de 64

luminosidad diferentes

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Tabla 4.16: Crecimiento de microalgas con piedras blancas 65Tabla 4.17: Crecimiento de microalgas con arena 67Tabla 4.18: Crecimiento de microalgas con agar agar 67Tabla 4.19: Crecimiento máximo de microalgas con piedras

Blancas 68Tabla 4.20: Porcentaje de crecimiento al 10º día 68Tabla 4.21: Comparación de porcentajes de crecimiento 69

ÍNDICE DE ANEXOSPág.

Anexo 1: Propiedades de soportes usados 75

Anexo 2: Memoria de cálculo 76

Anexo 3: Fotos generales 79

Anexo 4: Legislación Chilena sobre biocombustibles 81

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CAPÍTULO I

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1.1 PRESENTACIÓN

El biodiésel, es en términos simples el aceite que se obtiene de aceites

vegetales. Hay otros biocombustibles no convencionales a partir de ricino,

jatropha, jojoba, biomasa forestal, papa y nabo forrajero. Su origen viene desde

la creación del motor diesel, el que su inventor (Rodolf Diesel) hizo funcionar,

con aceite vegetal proveniente de maní. Así, nacieron los combustibles de

primera generación, que pueden definirse como los aceites con origen vegetal.

El incremento en el interés por este tipo de combustible nace por la

evaluación del uso de aceites vegetales debido al cambio climático que ha

quedado en evidencia los últimos años, este fenómeno es debido al efecto

invernadero. Existen dos teorias contrapuestas que tratan de explicar este

fenómeno. La primera de ellas aduce una causa antropogénica, es decir, el

hombre contribuyendo en gran parte, por diferentes factores, como las

emisiones no controladas provenientes de industrias, la utilización de

combustibles de origen fósil, etc. Una segunda, que explica este fenómeno

como consecuencia de la actividad solar. [21]

De esta forma nace la necesidad de encontrar energías renovables y que

no generen emisiones que contribuyan a este fenómeno. Chile no ha quedado

exento de esta problemática, por lo que al igual que en la mayoría de los países

desarrollados, ya comienza a manejarse alternativas para producir combustibles

“limpios”.

En mayo del año 2006 se constituyó una mesa de trabajo para formular

una política pública para los biocombustibles líquidos etanol y biodiésel, y un

marco regulatorio para promover su desarrollo. [8]

Desde el año 2006 se ha estudiado una norma nacional de la calidad que

deben cumplir estos biocombustibles para ser comercializados en Chile. El

Gobierno fomentaría la utilización de estos biocombustibles en los vehículos al

eximirlos del impuesto específico que pagan las gasolinas y el diésel. Este

incentivo no requeriría de cambios legales, sino que sería en el sistema de

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impuestos internos, el que por vía administrativa calificaría el tratamiento

tributario de estas mezclas.

En el presente trabajo se hace un estudio del biodiesel tanto en lo que

respecta a su evolución (producción y consumo) a nivel nacional y mundial,

como a su origen a partir de otra materia no convencional, hasta hace pocos

años; las microalgas, que como se verá más adelante poseen excelente

propiedades para ser elegidas como materia prima favorita dentro de la

producción de este biocombustible. El motivo principal, es la velocidad con la

que se reproducen y la cantidad de aceite que puede obtenerse de ellas. En el

estudio de esta materia prima se pretende determinar los parámetros físicos

óptimos para el desarrollo de dichas microalgas que tienen un origen antártico.

Los parámetros estudiados son los de temperatura, luminosidad y soporte. Con

el análisis de estos, puede llegar a encontrarse la velocidad de crecimiento y la

cantidad en que se reproducen.

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1.2 OBJETIVOS GENERALES

Establecer la situación actual, del uso de biodiesel a partir de microalgas,

en Chile y el mundo; como una alternativa al uso de combustibles de

origen fósil.

Determinar el comportamiento de microalgas de origen Antártico,

variando parámetros físicos que influyen en la tasa de crecimiento de

estas.

1.2.1 OBJETIVOS ESPECIFICOS

Investigar, a cerca del incremento del uso de biocombustibles,

específicamente del biodiesel proveniente de microalgas, tanto en Chile

como en el resto del mundo.

Se logró determinar las ventajas del uso de biodiesel, obtenidos de

microalgas, originarias de lugares muy fríos.

Obtener información, a partir de búsquedas bibliográficas, a cerca del

comportamiento de microalgas que viven en la Antártica, o en lugares

con características similares a dicha zona.

Llevar a cabo un estudio experimental de la variación en la tasa de

crecimiento, variando los parámetros que resulten fundamentales para la

reproducción y desarrollo de microalgas de origen Antártico.

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CAPÍTULO IIESTADO DEL ARTE:

USO DE BIOCOMBUSTIBLES EN CHILE Y PRINCIPALES POTENCIASMUNDIALES

(Basado en referencias bibliográficas citadas en bibliografía)

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2.1 INTRODUCCIÓN

En el capitulo presente, se da a conocer la necesidad de implementar

nuevos combustibles, que produzcan la mínima cantidad de dióxido de carbono.

Aquí se explican claramente los motivos que generan el efecto invernadero, la

cantidad de emisiones producidas y quiénes son los principales responsables

de este problema.

La utilización de combustibles es indispensable, para suplir las

demandas energéticas en el mundo, por lo que es necesario conocer cifras, en

lo que respecta a demanda de estos, y la proyección que indica cómo va en

incremento esta demanda.

Por otra parte, es necesario conocer la producción de biocombustibles

existente en el mundo, para conocer la rentabilidad industrial que podría

alcanzar este nuevo mercado. Por esta razón, es necesario encontrar un

biocombustible, diferente que presenta una excelente calidad para ser utilizado

en cualquier tipo de máquinas y lugares. En este capítulo se dan estas razones

y se detallan materias primas y algunas características, además de

proyecciones tanto de consumo como de producción.

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2.2 CÓMO Y POR QUÉ NACEN LOS BIOCOMBUSTIBLES

El cambio climático es ya un hecho reconocido por todos. Los gobiernos

de los principales países industrializados han tomado conciencia y se han

comprometido a disminuir las emisiones de gases que contribuyan al efecto

invernadero en los próximos años. Una de las principales causas que produce

el calentamiento global del planeta, acentuando el efecto invernadero son las

emisiones de gases provenientes de combustibles fósiles (carbón, petróleo y

gas natural).

Si se considera, que se está en un constante uso de energía por ejemplo

para calentar las casas y oficinas se usan combustibles fósiles, se iluminan las

ciudades y la comunicación a distancia es posible con electricidad generada a

partir de combustibles fósiles, como es el caso de la energía bioeléctrica; la

construcción de edificios con materiales hechos con combustibles fósiles, se

almacenan los excedentes en contenedores plásticos y embalajes hechos de

combustibles fósiles, y la manufactura de ropa y aparatos domésticos es con la

ayuda de productos petroquímicos. Prácticamente todos los aspectos de la vida

moderna extraen su energía de los combustibles fósiles, derivan materialmente

de ellos, o reciben su influencia de algún otro modo, es sabido que los recursos

fósiles son finitos, su extinción puede ser más próxima de lo que se imagina y al

parecer no existe aun la suficiente conciencia de que esto puede ser así. Los

cálculos más optimistas hablan de un horizonte de entre 28 y 38 años para que

los recursos escaseen y los menos optimistas entre 8 y 18 años.

Existe una gran tendencia internacional hacia la producción de

combustibles más limpios por lo que la biotecnología busca la producción de

combustibles provenientes de materiales renovables, que puedan ser utilizados

como aditivos (en el corto y mediano plazo) de los combustibles provenientes

de fuentes fósiles. La búsqueda de nuevas fuentes de energía ha conducido a

la producción de etanol, biodiesel y metano, a partir de fuentes renovables

como son los desechos agrícolas. Además se investiga la posibilidad de

producir hidrogeno como combustible, utilizando algas verdes. Este esfuerzo no

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se refiere solamente al aspecto renovable y relativamente limpio de los recursos

agrícolas, sino principalmente a la búsqueda de independencia energética.

El uso de energías alternativas limpias se presenta como la posibilidad

de la democratización de la energía, eso significa del lado de los países pobres,

la oportunidad de mayores accesos a la economía y al bienestar, un mismo

acceso al empleo y a la energía, en general, lo que incluye una mayor

educación, higiene, seguridad personal y expectativa de vida.

2.2.1 CAMBIO CLIMÁTICO

El cambio climático global, es una modificación que le es atribuido directa

o indirectamente a las actividades humanas que alteran la composición global

atmosférica, agregada a la variabilidad climática natural observada en periodos

comparables de tiempo. Aún cuando este fenómeno se deba a un ciclo de la

tierra, lo importante es disminuir las emisiones que genera el hombre sobre el

planeta.

2.2.2 PRINCIPALES CAUSAS DEL CAMBIO CLIMÁTICO

La energía recibida por la Tierra desde el Sol, debe ser balanceada por la

radiación emitida desde la superficie terrestre. En la ausencia de atmósfera, la

temperatura superficial sería aproximadamente -18° C Esta es conocida como

la temperatura efectiva de radiación terrestre. De hecho la temperatura

superficial terrestre, es de aproximadamente 15° C. En el siguiente gráfico se

muestra el cambio que ha sufrido el planeta, frente a este fenómeno.

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Figura 2.1: a) Temperaturas en diferentes lugares del planeta; b) Nivel medio

del mar; c) Cantidad de nieve en el hemisferio Norte. Fuente: Spitzer, J. (2009).

From 1st to 2nd Generation Biofuels. En Biocombustibles a partir de algas.

Antofagasta, Chile: Universidad de Antofagasta.

2.2.3 EL EFECTO INVERNADERO

La razón de este efecto, es que la atmósfera es casi transparente a la

radiación de onda corta, pero absorbe la mayor parte de la radiación de onda

larga emitida por la superficie terrestre. Varios componentes atmosféricos, tales

como el vapor de agua, el dióxido de carbono, tienen frecuencias moleculares

vibratorias en el rango espectral de la radiación terrestre emitida. Los gases

emitidos absorben y reemiten la radiación de onda larga, devolviéndola a la

superficie terrestre, causando el aumento de temperatura, fenómeno

denominado efecto invernadero.

El vidrio de un invernadero similar a la atmósfera es transparente a la luz

solar y opaca a la radiación terrestre, pero confina el aire a su interior, evitando

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que se pueda escapar el aire caliente [1]. Por ello, en realidad, el proceso

involucrado es distinto y el nombre es bastante engañador, el interior de un

invernadero se mantiene tibio, pues el vidrio inhibe la pérdida de calor a través

de convección hacia el aire que lo rodea. Por ello, el fenómeno atmosférico se

basa en un proceso distinto al de un invernadero, pero el término se ha

popularizado tanto, que ya no hay forma de establecer un término más exacto.

La siguiente figura muestra una representación de este efecto

invernadero:

Figura 2.2: Descripción efecto invernadero. Fuente: Miller, 1991

Una de las problemáticas de la vida cotidiana, es el abuso en el uso de

los combustibles, en general. La quema de combustibles fósiles y la quema de

bosques, liberan dióxido de carbono. La acumulación de este gas, junto con

otros, atrapa la radiación solar cerca de la superficie terrestre, causando un

calentamiento global. Esto podría en los próximos 45 años [20], aumentar el

nivel del mar lo suficiente como para inundar ciudades costeras en zonas bajas.

También alteraría drásticamente la producción agrícola internacional y los

sistemas de intercambio

Uno de los resultados del efecto invernadero, es mantener una

concentración de vapor de agua en la baja troposfera mucho más alta que la

que sería posible en las bajas temperaturas que existirían si no existiese el

fenómeno. Se especula que en Venus, el volcanismo elevó las temperaturas

hasta el punto que no se pudieron formar los océanos, y el vapor resultante

produjo un Efecto Invernadero, exacerbado más aún por la liberación de dióxido

de carbono en rocas carbonatadas, terminando en temperaturas superficiales

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de más de 400° C [2], esto último indica que el efecto invernadero, estaría dado

no solo por una causa antropogénica.

A continuación se muestra la concentración en la atmósfera (ppm) de los

cinco gases responsables del 97% del efecto invernadero antropogénico:

Figura 2.3: Emisiones a la atmósfera. Fuente: Lapso 1976-2003

En la siguiente tabla se muestran los valores de las emisiones

entregadas por diferentes tipos de combustibles:

Tabla 2.1: Emisiones debidas a combustiblesEmisiones Acidificacion Part. (grs eq CO2/ Km) (grs eq SO2/Km) Suspendidas

Biodiesel 125 0,51 0,52 0,67 0,041Bioetanol 203 0,18 0,37 0,5 0,046

Biogas 132 0,18 0,39 0,61 0,055Comb. Diesel 196 0,7 0,4 0,48 0,032

Gasolina 242 0,87 0,37 0,43 0,034Gas natural 201 0,86 0,21 0,47 0,036

Ef, energetica Formacion de Ozono

Biocombustible

Tipo

Convencionales

Fuente: Lapso 1976-2003

Las emisiones tienen sus orígenes en las actividades forestales,

agrícolas, industriales, de transporte, etc.

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Otros 2,8%Suministro deenergia 25,9%

Edificacion 7,9%

Act. Industrial19,4%

Agricultura 13,5%

Transporte 13,1%

Act. Forestal 17,4%

Figura 2.4: Emisiones debido a las diferentes actividades. Fuente: Spitzer, J.

(2009). From 1st to 2nd Generation Befouls. En Biocombustibles a partir de

algas. Antofagasta, Chile: Universidad de Antofagasta

En el contexto mundial, Chile no es un emisor relevante. De acuerdo a

estadísticas internacionales (Agencia Internacional de Energía, IEA; World

Resources Institute, WRI), que consideran sólo las emisiones de CO2, así como

aquellas estadísticas que basan sus cálculos a partir de CO2 equivalente,

incluyendo las capturas de carbono asociadas al sector forestal y de cambio de

uso de la tierra, su aporte es aproximadamente el 0,2% del total mundial de

emisiones, habiéndose mantenido estable ese porcentaje en los últimos años.

Por otro lado, Chile aparece en la posición 90 respecto a las emisiones de CO2

per cápita en el mundo para el año 2004, con un valor de 3.9 ton CO2/habitante,

de acuerdo al "Informe sobre desarrollo humano 2007-2008: la lucha contra el

cambio climático", del Programa de Naciones Unidas para el Desarrollo (2007).

Así, las emisiones de gases de efecto invernadero están aumentando de

manera importante en el país, según lo indican los inventarios nacionales

elaborados por CONAMA, con ocasión de la Primera Comunicación Nacional

(1999), y luego en actualizaciones posteriores. [3]

Teniendo en consideración los motivos anteriores, es que aparece la

necesidad del uso los combustibles limpios o biocombustibles.

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2.3 DEFINICIÓN DE BIOCOMBUSTIBLES

Los biocombustibles líquidos son aceites y alcoholes obtenidos de

biomasa. Es posible la obtención de aceites a partir de más de 300 especies

vegetales, fundamentalmente extraídas a partir de semillas y frutos. El aceite se

obtiene normalmente por compresión y extracción Una operación adicional es la

transesterificación, la que permite obtener ésteres que se pueden emplear en

motores diesel. [4]

2.3.1 DEFINICIÓN DE BIODIESEL

El biodiesel al igual que los biocombustibles en general, es un

combustible renovable derivado de los aceites vegetales. Actualmente es

producido y utilizado en muchos países europeos y ha ido ganando un espacio

en el resto del mundo como energía alternativa debido a sus innumerables

ventajas. Con el consumo de biodiesel se reduce el nivel de emisiones de CO2 y

de sulfuros, el humo visible y los olores nocivos. Funciona con normalidad en

motores diesel sin modificar y puede ser empleado también mezclado con

diesel convencional consiguiendo así reducciones substanciales en las

emisiones, como su punto de inflamación es superior, la manipulación y el

almacenamiento son más seguros que en el caso del combustible diesel

convencional.

2.4 NECESIDAD DE COMBUSTIBLES

En el siguiente diagrama se presenta la necesidad actual y la demanda

de los diferentes tipos de combustibles existentes en el mundo:

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Demanda mundial de combustibles

Otros 2%Carbon 26%

Bioenergia10%

Gas Natural20%

Aceites 36%Nuclear 6%

Figura 2.5: Demanda mundial de combustibles. Fuente: Spitzer, J. (2009). From

1st to 2nd Generation Biofuels. En Biocombustibles a partir de algas.

Antofagasta, Chile: Universidad de Antofagasta.

Como puede apreciarse en el diagrama anterior, la cantidad demandada

de biocombustibles en el mundo, aun no alcanza un valor considerable, esto se

debe a dos factores principales; el primero de ellos y tal vez el más importante

es, la poca producción que existe hasta el momento de estos combustibles

“limpios”, producción que no alcanza a abastecer las necesidades del mercado

mundial; el segundo motivo es la poca conciencia que se ha formado hasta hoy

con respecto al cambio climático.

Se espera que la utilización de estos nuevos combustibles vaya en

aumento, a medida que se desarrollen mejores tecnologías para su producción.

El siguiente grafico muestra una proyección de consumo en los próximos 20

años.

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Figura 2.6: Proyección de consumo estimado de biocombustible en 20 años.

Fuente: Fuente: Spitzer, J. (2009). From 1st to 2nd Generation Biofuels. En

Biocombustibles a partir de algas. Antofagasta, Chile: Universidad de

Antofagasta.

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2.4.1 PRODUCCIÓN DE BIODIESEL EN EL MUNDO

En Europa se lleva alrededor de 20 años de experiencia. Alemania es

una de las naciones más avanzadas en esta materia a partir de raps o canola.

Es el principal productor mundial de biodiésel (63%) con 1.920 millones de litros

al año. Le siguen Francia con 557 millones y Estados Unidos con 290 millones

de litros. [5]

En la tabla 2.2 se muestra la producción de los años 2004 y 2005 de

biodiesel en diferentes potencias mundiales:

Tabla 2.2: Producción de biodiesel

2005 2004Alemania 1.669.000 1.035.000Francia 492.000 348.000

Italia 396.000 320.000Rep. Checa 133.000 60.000

Polonia 100.000 57.000Austria 85.000 -

Eslovaquia 78.000 15.000España 73.000 13.000

Dinamarca 71.000 70.000Inglaterra 51.000 9.000

Otros 36.000 6.400TOTAL 3.184.000 1.933.400

ProduccionPais

Fuente: http://www.webpicking.com/notas/biocombustibles

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En la figura 2.7 se muestra la producción antes detallada.

España 2,3%

Dinamarca 2,2%

Inglaterra 1,6%

Otros 1,1%Austria 2,7%

Eslovaquia 2,4%

Polonia 3,2%

Rep Checa 4,2%

Italia 12,4%

Francia 15,5%

Alemania 52%

Figura 2.7: Producción de biodiesel. Fuente:

http://www.bcn.cl/carpeta_temas/temas_portada.2007-01-26.2084740943

La producción de biodiesel ha ido aumentando durante los últimos años

de acuerdo a la grafica que aparece a continuación:

0500

1000150020002500300035004000

1990 1995 2000 2005 2010

Figura 2.8: Aumento de producción de biodiesel en millones de litros, hasta el

año 2010. Fuente:

http://media.photobucket.com/image/aumento%20en%20el%20uso%20de%20b

iocombustibles/withdmore/indice_precios_GRANOS.jpg

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17

2.4.2 PRODUCCIÓN DE BIODIESEL EN CHILE Y PROYECCIÓN DEABASTECIMIENTO CON ENERGIAS RENOVABLES

Chile hoy en día no produce biodiesel, pero cuenta con una buena parte

de su territorio dedicado a la agricultura, por lo que esta sería una actividad

comercial, que beneficiaria la economía del país. En otras palabras una ventaja

para el país es la geografía que presenta. Si se toma como referencia que una

hectárea de raps podría generar 900 litros y se requeriría del orden de 60 mil

hectáreas. En el corto plazo es una alternativa productiva absolutamente viable

para el centro-sur, especialmente la VI y VII Regiones.

Por otra parte, la demanda energética de Chile (referida a energía

eléctrica) va en aumento, el año 2007 esta demanda alcanzó los 40.000 GW/ h,

se estima que el año 2025 alcanzará unos 100.000-110.000 GW/ h. Haciendo

una proyección de la producción de energía renovable se estima que este tipo

de energía entregaría 40.000 GW/ h y una potencia de 7.100 MW. [6]

2.5 MATERIAS PRIMAS IDEALES PARA LA PRODUCCIÓN DEBIODIESEL

Las principales materias primas utilizadas en la elaboración de biodiesel

hoy en día, son especies como: girasol, raps, soya, palma y maíz. Cada especie

presenta características y propiedades específicas, que permiten la obtención

de un mejor aceite y de esta forma una mayor calidad del biodiesel elaborado.

Por otra parte es necesario considerar que cada especie proporciona una cierta

cantidad de biomasa, que no es equivalente al aceite útil para la elaboración del

biocombustible, por esto es sumamente importante realizar un estudio de cada

tipo, de manera de optimizar el crecimiento de microalgas y producción de

aceites.

Para tener una idea acerca de las cantidades de aceites obtenidos a

partir de cierto número de biomasa, se presenta la tabla:

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Tabla 2.3: Cantidades de aceite producida por especieCantidad de biomasa Aceite

Ton/h año Ton/h añoMaiz 3,2 0,8-1,2

Girasol 1,5-1,9 0,85-0,9Palma 20-25 4,4-5

Jatropa 5-15 1,6-3,5

Especie

Fuente: Guerrero, M. (2009) Producción de aceites a partir de microalgas. En

conferencia biocombusitibles a partir de algas. Antofagasta, Chile: Universidad

de Antofagasta.

Como puede apreciarse en la tabla anterior, la cantidad de aceite

obtenido es la mitad de la biomasa trabajada. Por lo que se hace necesario,

conocer y desarrollar una especie que tenga mayores ventajas con respecto a

estas, ya conocidas.

De forma más detallada a continuación se presenta la cantidad de aceite

(volumen) obtenido por hectárea cultivada, de acuerdo con la especie que se

está trabajando:

Tabla 2.4: Rendimiento por hectárea, por especie

RendimientoLtrs/ha

Maiz 172Soya 446

Canola 1.190Jatropa 1.892Coco 9.689Palma 5.950

Especie

Fuente: Christi, Y. Biodiesel from microalgae. (2009) En conferencia

biocombustibles a partir de algas. Antofagasta, Chile: Universidad de

Antofagasta

Como se ve en la tabla 2.4, el mayor rendimiento lo alcanza el aceite de

coco, pero no es el más usado debido a que las condiciones de cuidado que

presenta son complejas, como se trata de una planta tropical no puede

desarrollarse en cualquier lugar, necesita condiciones de humedad, luz, suelos

arenosos, etc.

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En las tablas 2.5 y 2.6.se muestra las propiedades de viscosidad y calor

de combustión, obtenidos de los aceites que tienen origen vegetal:

Tabla 2.5: Viscosidad de los distintos tipos de aceites

Clase de aceite Viscocidad (cP a 40º C)Aceite de Palma 38Aceite de canola 33Aceite de maiz 31Aceite de soya 26

Diesel 2,6Aceite de microalgas 36,6

Fuente: Guerrero, M. (2009) Producción de aceites a partir de microalgas. En

conferencia biocombusitibles a partir de algas. Antofagasta, Chile: Universidad

de Antofagasta

Tabla 2.6: Calor de combustión de los distintos tipos de aceites

Clase de aceite Calor de combustion (Kj/g)Aceite de Palma 38,3Aceite de canola 38,52Aceite de Oliva 38,76Aceite de soya 38,37

Diesel 43,6Aceite de microalgas 38,72

Fuente: Guerrero, M. (2009) Producción de aceites a partir de

microalgas. En conferencia biocombusitibles a partir de algas. Antofagasta,

Chile: Universidad de Antofagasta

Sin embargo existe una nueva materia prima, no convencional, que

puede reemplazar a estas especies, dada su rendimiento y velocidad de

crecimiento. Esta materia prima es o son microalgas y algas en general.

A continuaron se muestra la cantidad de aceite obtenido a partir de

diferentes especies, con el objetivo de comparar la cantidad que se obtiene con

microalgas:

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Tabla 2.7: Comparación de rendimiento por hectáreaEspecie kg de aceite / Ha

Maiz 145Algodón 273

Soja 375Avellana 405

Arroz 696Girasol 655Colza 1.000Oliva 1.019Coco 2.260Palma 5.000

Microalgas 30.000

Fuente: Rivas, M. (2009). Bioenergia en el desierto. En conferencia

biocombustibles a partir de algas. Antofagasta, Chile. Universidad de

Antofagasta

Hoy en día se esta investigando mucho mas a fondo esta materia prima,

buscándose los mejores parámetros de crecimiento De estos dependerá la

calidad del aceite obtenido.

A continuación se presenta el porcentaje de aceite obtenido para

diferentes tipos de microalgas estudiadas.

Tabla 2.8: Contenido de aceite por especie de microalgaEspecie de Contenido de aceiteMicroalga % (peso - seco)

Botryococcus Braunil 25-75Chlorella 28-32

Crypthecodinium cohnli 20Cylindrotheca 16-37

Dunaliella primolecta 23Isocrhysis 25-33

Monallanthus salina >20Nannochloris 20-35

Nannochloropsis 31-68Neochloris oleoabundans 35-54

Nitzschia 45-47Phaeodactylum tricornutum 20-30

Schizochytrium 50-77Tretraselmis suecica 15-23

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Fuente: Rivas, M. (2009). Bioenergia en el desierto. En conferencia

biocombustibles a partir de algas. Antofagasta, Chile. Universidad de

Antofagasta

Como puede verse en la tabla anterior, los porcentajes de aceite para

cada una de las especies estudiadas, son bastante altos, algunos los más bajos

alcanzan al 15%, sin embargo las de mejor rendimiento pueden alcanzar hasta

el 77%. Es importante tener presente que la mayoría de estas especies se

desarrollan en lugares, cuyas temperaturas son relativamente altas, en el caso

de Chile un lugar ideal para la producción de especies de este tipo es el norte

del país, debido a las características climáticas del lugar. Esta es una razón por

la cual los biocombustibles presentan una desventaja; su punto de

solidificación, como el origen de las microalgas se da a condiciones de

temperaturas elevadas, el biocombustible producido también presenta un alto

punto de congelamiento, lo que no permite su uso de forma adecuado en zonas

frías.

2.6 COMPARACIÓN DE PROPIEDADES DE DIESEL Y BIODIESEL

Las propiedades del combustible variara de acuerdo a su origen, es por

eso que se presenta a continuación un paralelo entre ambos productos, en lo

que respecta a sus propiedades químicas:

Tabla 2.9: Comparación de propiedades entre combustibles de diferente origen

Biocombustible Combustiblea partir de microalgas diesel

Densidad (kg/ltrs) 0,864 0,838Viscosidad (Pa/s) 5,2*10^-4 1,9-4,1*10^-4Flash point (º C) 115 75

Punto de solidificacion -12 -50-10Valor acido (mg KOH / Grs) 0,374 0,5

Valor de calor (Mj/kg) 41 40-45Razon (H/C) 1,18 1,81

Porpiedad

Fuente: Rivas, M. (2009). Bioenergia en el desierto. En conferencia

biocombustibles a partir de algas. Antofagasta, Chile. Universidad de

Antofagasta

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Esto ayuda a entender mejor porque esta materia prima es altamente

competitiva dentro del mercado de los biocombustibles, a continuación se

enumeran algunas de estas ventajas.

2.7 VENTAJAS DEL BIODIESEL A PARTIR DE MICROALGAS

No compiten ni en agua, ni en suelo

Se cultivan en regiones áridas

Tasa muy superior de crecimiento

Alta producción de aceites

Buena calidad de aceite

Su principal nutriente es el CO2

Alta eficiencia fotosintética

Cultivo independiente de la calidad de la tierra

Todas estas ventajas demuestran, que al conseguir un buen desarrollo

de microalgas, la industria del biodiesel a partir de esta materia prima, sería

muy rentable, desde el punto de vista económico, sin considerar el efecto que

puede llegar a presentar en el cambio climático.

2.8 COSTOS

Claramente el costo del biodiesel dependerá de la elección de la materia

prima, diversos estudios económicos han llegado a demostrar que su precio es

muy similar al del diesel comercial. Para ello se ha eximido a este tipo de

combustible del pago de impuesto directo de carburantes, que estipula cada

país. Considerar que a medida que su empleo se generalice, el precio de

adquisición se irá estabilizando en cotas más que razonables. En Estados

Unidos se ha estimado su precio entre 0.45 y 0.66 dólares/litro. [4]

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En lo que se refiere a costo de producción de los biocombustibles, este

es aproximadamente el doble del costo de la gasolina y el diesel, pero sería

posible abaratar el costo de producción cultivando grandes extensiones y

procesando las materias primas en empresas especializadas.

En Chile, según estimaciones, el precio a distribuidor del biodiesel sería

cercano a los $375 el litro. Pero, con los actuales impuestos y costos de materia

prima, el precio del biodiesel sería similar al del diesel con precios del petróleo

en torno a los US$ 72 por barril. Lo que no lo haría competitivo si el petróleo

baja.

2.9 USOS ALTERNATIVOS

También cabe destacar, que la producción de estos combustibles puede

originar nuevos productos y un crecimiento potencial de negocios, lo que

también genera un ingreso extra al negocio.

A) Subproductos Originados de la producción de biodiesel

Expeller / Pellet, que sirve para alimentos Balanceados.

Glicerol, con estos se obtiene la glicerina de alta pureza, que se utiliza en

farmacopea y cosmética.

B) Beneficios atribuibles a otras industrias

Agrícola: Siembra y recogida del grano.

Industrias aceiteras: Producción de aceite.

Industria química: Transesterificación.

Compañías Petroleras: Mezcla con Petróleo y distribución del nuevo

combustible.

La biomasa en general, susceptible de ser transformada en otros tipos de

energía mediante procesos de gasificación, biodigestión o procesos Fischer

Tropsch. También es de sobra conocido el uso de algas para la fabricación de

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medicamentos, sumado a la importancia que posee en el sector farmacéutico.

Por todo esto, desarrollar el concepto de biorefineria, donde se contemplen

todas las posibilidades comerciales en función del tipo de alga utilizada, será

crucial para el crecimiento del sector industrial.

El concepto de biorefinería integra los procesos de conversión de

biomasa y el equipamiento necesario para la producción de biocombustibles,

energía y productos químicos. El término es análogo al usado en las refinerías

de petróleo, en el que se producen una amplia variedad de combustibles y

productos derivados.

2.10 EMPLEO Y SEGURIDAD

En general no se necesitan modificaciones en los motores, ni en el

sistema de encendido, ni en los inyectores de combustible de un motor diesel

estándar. Tan sólo se necesita el cambio de algunos materiales de

revestimiento de piezas que estén en contacto directo con el combustible. El

rendimiento, desgaste y consumo del motor es similar al que provoca el diesel

comercial.

En cuanto a seguridad, este compuesto ofrece mejorías substanciales

respecto a sus competidores. Así tenemos elevado punto de fusión- dilatación,

no produce vapores explosivos. La tensión de vapor es menor a 5mm. Hg., lo

que permite una manipulación y almacenaje en condiciones más seguras por la

total ausencia de vapores. Tiene baja toxicidad en mamíferos en caso de

ingestión y es biodegradable.

2.11 EFECTOS EN LA UTILIZACIÓN DE BIOCOMBUSTIBLES

Los efectos que tendría la utilización de este tipo de combustible, en lo

que se refiere a disminución de emisiones de CO2 son sumamente importantes

para el cuidado del medio ambiente y la no contribución al efecto invernadero.

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En el siguiente diagrama se puede apreciar la reducción de emisiones de CO2

en las diferentes áreas, que emplean combustibles (estudiada a largo plazo).

Figura 2.9: Reducción de emisiones de CO2 por uso de biocombustibles.

Fuente: Ventura, P. (2009) European Commission research activities in the area

of biofuels and biobased materials. En conferencia biocombustibles a partir de

algas. Antofagasta, Chile: Universidad de Antofagasta.

2.12 RESUMEN DE DIFERENCIAS ENTRE ENERGIA CONVENCIONAL YENERGIA RENOVABLE

Tabla 2.10: Comparación entre tipos de energíaEnergia renovable Energia convencional

Las emisiones de dioxido de carbono Producen considerables emisiones de dioxidoal sumarse, tienden a cero, es decir, de carbonoson minimas.No generan residuos dificiles de Generan residuos que suponentratar durante largos periodos una

amenaza al medio ambienteSon inagotables Son agotablesSon autoctonas Existen en un numero

limitado de paisesEvitan la dependencia exterior Aumentan las importaciones

energeticasCrean muchos mas puestos de Crean muy pocos puestos detrabajo trabajoContribuyen al equilibrio interterritorial Se situan cerca de zonas muyporque suelen instalarse en zonas desarrolladasruralesPermiten a Chile desarrollar propias Utilizan en su gran mayoriatecnologias tecnologias importadas

0

10

20

30

40

50

60

70

1990 1995 2000 2005 2010 2015 2020 2025 2030 2035 2040 2045 2050

Ann

ual C

O 2 E

miss

ions

(Gt)

>75%reductionfrom BAUrequired tomeet target

Targetproposed forG8 agreement(50% oftoday's level)

>110%emissionincrease underBAU

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2.13 CONSIDERACIONES PARA EL USO DE BIOCOMBUSTIBLES

Este tipo de combustibles, presenta excelentes ventajas en cuanto a su

utilización, pero no debe descuidarse el siguiente aspecto: Aun cuando reduce

el desgaste del motor diesel, aumentando su vida útil, conviene revisar con

frecuencia los filtros de combustibles y cambiarlos cuando sea necesario. En

algunos casos y con el tiempo el uso del Petróleo deja un depósito en las

mangueras de alimentación, tanques y retornos, y el uso del biodiesel puede

disolver este sedimento, debiéndose cambiar más frecuentemente el filtro de

combustible (por usar Biodiesel), hasta que el sistema entero se haya limpiado

completamente de los depósitos causados por el Petróleo.

Otra de las importantes consideraciones, que debe tenerse presente, es

que la utilización del suelo para cultivo de vegetales, y posterior

comercialización para la producción de estos combustibles, afecta directamente

a la industria agrícola, dado que, los terrenos que antes eran usados para

producir cantidades de vegetales, con fines alimenticios, ahora serian usados

con fines industriales. Esto siempre y cuando el terreno usado para este fin, sea

en las regiones en donde hay actividad agrícola.

2.14 LEGISLACIÓN CHILENA CON RESPECTO A BIOCOMBUSTIBLES

Chile, que importa una gran cantidad de combustibles que consume,

depende de los envíos argentinos de gas natural, y para dejar atrás esa

situación está impulsando proyectos energéticos y promoviendo el uso de

energías alternativas. Los biocombustibles, como el etanol y el biodiésel, se

producen a partir de materias primas agrícolas o forestales y pueden ser

destinados a mezclas con gasolina y petróleo diésel, respectivamente.

“Ya sea a través del etanol generado a partir del trigo, maíz o remolacha,

o bien biodiésel producido a partir del raps (colza); estamos en condiciones de

aportar el 5% del consumo total de energía de nuestro país”. [8]

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El 2007 el gobierno envió al Congreso un proyecto de ley con el marco

regulatorio para biocombustibles. En el anexo 4 se enumeran las leyes

relacionadas con este tema y que se encuentran vigentes hoy en Chile.

2.15 BIOCOMBUSTIBLES A PARTIR DE MICROALGAS EN CHILE

Una de las mayores fuentes de biomasa en la Tierra son las algas, que

se componen de organismos acuáticos que capturan luz solar y el dióxido de

carbono para hacer la fotosíntesis y así producir su energía, además producen

aceites vegetales que eventualmente se pueden transformar en biodiesel. Entre

los beneficios de la producción de biodiesel a partir de algas o microalgas,

destaca el hecho que el rendimiento en producción de este biocombustible es

unas 300 veces superior al que se alcanza con soja y unas 25 veces al que se

consigue con palma. Además las algas tienen un periodo de crecimiento record

de solo unos pocos días lo que contrasta con los tiempos de crecimiento mucho

más largos de las plantas oleaginosas, usadas comúnmente para la producción

de biocombustible.

Chile tiene ventajas comparativas para la producción de biocombustibles

a partir de algas. En la zona norte, se presentan extensas tierras disponibles,

hoy sin valor productivo y gran cantidad de radiación solar necesaria para el

crecimiento de algas. Con estas condiciones el cultivo de algas no compite con

cultivos tradicionales y, por lo tanto, no produce efectos en la producción de

alimentos. Hoy en día se estudian sectores dentro del país para el desarrollo de

esta área, pero aun no existe producción de biocombustibles a partir de

microalgas, con fines comerciales.

2.16 SITUACION DE ESTUDIO EN CHILE

Algunos proyectos desarrollados hoy en día, son los siguientes:

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Proyecto piloto de la universidad de Tarapacá, que tiene por objetivo,

producir biocombustibles a partir de jatropha. Este proyecto de inicio el

año 2007.

ENAP se encuentra investigando la factibilidad de producir en el país,

combustibles de segunda generación, a través de dos entidades en las

que participa como socio: For Energy y Biocomsa. Este proyecto de inicio

el año 2009 y tiene como plazo, 5 años de estudio.

La empresa de generación eléctrica AES Gener S.A. (Gener) informó

que en conjunto con la empresa Clean Energy S.A. y con la asesoría de

la Unidad de Asistencia Técnica de la Escuela de Ingeniería Bioquímica

de la Facultad de Ingeniería de la Pontificia Universidad Católica de

Valparaíso, desarrollarán un proyecto de investigación aplicada cuyo

objetivo es lograr una tecnología económicamente sustentable a partir de

la captura de CO2 y NOx para la producción de biocombustibles

mediante el cultivo de microalgas. Este proyecto se impulsa el año 2009.

La Corporación de Fomento a la Producción de Chile (Corfo) entrego

fondos a tres consorcios para desarrollar proyectos de biocombustibles

de segunda generación con algas marinas. Se trata de las empresas

Desert Bioenergy, Alga Fuels y Bal Biofuels, las cuales a partir de este

año desarrollarán, con apoyo de universidades, proyectos en

biocombustibles que implican una inversión de 31,6 millones de dólares

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CAPITULO III: ASPECTOS TEÓRICOSMICROALGAS; FUENTE DE PRODUCCIÓN DE BIODIESEL

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30

3.1 INTRODUCCIÓN

En este capitulo, se presentan, las ventajas de la utilización de microalga

como materia prima, y en especial el motivo por el cual se está estudiando

diversas especies de microalgas para la obtención de biocombustibles. Cabe

destacar, que el uso de microalgas como materia prima, para energías

renovables, es un tema que parte en 1970, como consecuencia de la crisis de

petroleo, en ese entonces.

Las microalgas, pueden generar diferentes tipos de lipidos, esto depende

exclusivamente de los ácidos grasos que produzcan. Por lo tanto es importante

analizar los tipos y cantidades de ácidos grasos que pueda generar cada

especie y conocer como sintetizan los triglicéridos. Es por ellos que se explica a

grandes rasgos la producción y síntesis de estos.

Existen diferentes tecnologías para la obtención de aceites provenientes

de esta materia prima, de esto también dependerá el tipo de biocombustible que

pueda producirse, por lo que se presentan estos mecanismos; haciendo un

estudio mas amplio de la tecnología relacionada con biodiesel, que es la que

interesa en este trabajo. Explicándose el proceso de transesterificación a partir

de los ácidos grasos obtenidos desde la materia prima en cuestión.

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31

3.2 RAZONES DE UTILIZACIÓN DE MICROALGAS COMO MATERIAPRIMA

En general se puede afirmar que la producción de biomasa a partir de

microalgas es más cara que la obtenida mediante el cultivo de especies

tradicionales terrestres. La explotación de cultivos terrestres posee un rango de

producción que ha sido mejorado durante miles de años mediante su uso

alimenticio.

Las ventajas del uso de derivados de microalgas para la producción de

biodiesel son las siguientes:

Las microalgas son capaces de reproducirse durante todo el año, por lo

tanto, es posible obtener producciones durante todo este periodo.

Necesitan medios acuosos para su desarrollo, pero las cantidades que

necesitan son menores que las que se usarían para un cultivo terrestre.

Las microalgas tienen un rápido potencial de cultivo y muchas especies

tienen entre 25 – 50% de contenido de aceites, en peso seco.

En lo que respecta a la calidad del aire, las microalgas pueden capturar

CO2 (1 kg de biomasa de microalgas secas utiliza alrededor de 1.83 Kg

de CO2)

Los nutrientes para el cultivo de microalgas, pueden ser obtenido de

aguas residuales o aguas pre tratadas, provenientes de industrias agro –

alimenticias.

Estos cultivos no requieren de pesticidas, ni herbicidas.

A partir de ellas, pueden obtenerse co – productos, tales como proteínas,

y biomasa residual, después de la extracción de los aceites, los que

pueden usarse como fertilizantes o alimentos.

Las condiciones de cultivo pueden ser modeladas y variadas, para

obtener mejores producciones de aceites.

Las microalgas en una producción fotobiológica, pueden obtener bio-

hidrógeno.

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32

La combinación de biocombustibles, la fijación de CO2, la producción de

bio – hidrógeno y el bio tratamiento de aguas residuales, demuestran el

potencial de las microalgas.

3.3 CONDICIONES DE CRECIMIENTO DE MICROALGAS

Las microalgas son un grupo heterogéneo de microorganimos

unicelulares que poseen una variada gama de pigmentos fotosinteticos y que

habitan todos los ambientes acuáticos del planeta donde exista luz disponible.

Las microalgas son organismos autotróficos, por lo que para construir su

biomasa solo requieren una fuente de carbono inorgánico como el CO2 y

algunos nutrientes esenciales como nitrato, fosfato y en algunos casos silicato,

luz.

La producción comercial, de microalgas, tiene una gran ventaja, puesto

que utiliza un recurso natural como lo es el de la luz solar. Aun que, dicha

ventaja se ve afectada por los ciclos del día y la noche, y en las zonas

templadas y frias del planeta por la escasa disponibilidad de luz durante la

estacion invernal. En general, para la producción de algas el factor luminosidad,

representa una limitación. Por tanto, la luz artificial, permite una producción

continua. Para la elección de la luz artificial correcta, debe considerarse la

absorción espectral, de cada alga, esto dependerá del tipo de pigmente

fotosintético que posea cada una.

Para el cultivo de microalgas, se puede utilizar CO2 de tres orígenes

diferentes: CO2 proveniente de la atmósfera, CO2 por descarga de gases

provenientes de industrias, CO2 desde carbonatos solubles. Bajo condiciones

de cultivos naturales, las microalgas asimilan CO2 desde soluciones, muchas

microalgas pueden tolerar y utilizar altos niveles de dióxido de carbono,

generalmente alrededor de 150.000 ppmv.

Los medios de cultivo, incluyen otros nutrientes como nitrógeno, fósforo y

sílice.; incluso algunas especies pueden captar nitrógeno del aire en forma de

NO2, también existen especies que requieren este, en forma soluble. El fósforo

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33

también juega un rol importante en los cultivos, pero debe cuidarse que las

cantidades no sean excesivas, es mas estas deben ser pequeñas durante los

ciclos de cultivo, por lo tanto puede administrarse como fosfato, en presencia de

iones metálicos. La sílice ayuda a la productividad de los cultivos de cientos de

grupos de algas.

3.3.1 IMPACTO DE LA EFICIENCIA FOTOSINTÉTICA EN LA PRODUCCIÓNDE BIOCOMBUSTIBLES A PARTIR DE MICROALGAS

La eficiencia fotosintética es la fracción de energía luminosa que es fijada

como energía química durante cultivos fotoautróficos. Solamente es capturada

una parte de la energía luminosa, que llega a los cultivos (42.3%), ésta

corresponde a la longitud de onda, entre 400 y 700 nm. La energía captada es

usada en el ciclo de Calvin, junto a moléculas de agua y dióxido de carbono,

según la siguiente reacción:

22612622 66126 HOOHCFOTONESOHCO (3a)

Un máximo de 8 fotones de luz son necesarios para obtener un mol de

carbohidrato (CH2O) una molécula de oxígeno y una de hidrógeno. Estos 8

fotones poseen una energía de 218 Kj por mol.

3.4 MECANISMOS DE PRODUCCIÓN DE ALGAS

Existen tres tipos de mecanismos para la producción de algas en

general, estos son: Producción foto autotrófica, producción heterotrófica y

producción mesotrófica. A continuación se describe en forma general el primero

de estos, dado que la inmensa mayoria de las algas son exclusivamente

autotroficas esta es la razon por el cual se utiliza luz en su cultivo.

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3.4.1 PRODUCCIÓN FOTOAUTOTRÓFICA

Es el método más usado, debido a que entrega, mejores resultados

técnicos y es viable económicamente. Aquí se contemplan dos tipos que son los

reactores cerrados y abiertos.

3.4.1.1 SISTEMA DE PRODUCCIÓN CON REACTORES ABIERTOS

Este tipo es utilizado desde 1950, consisten en un loop ovalado cerrado

con canales de recirculación. Generalmente de 0.2 a 0.5 m de profundidad, con

sistemas de recirculación y mezclado para optimizar la producción de cultivos

de algas. Son construidos de concreto. Los nutrientes son ingresados por medio

de un sistema continuo de paletas, que previene la sedimentación. Los

requerimientos de dióxido de carbono, son satisfechos por medio del contacto

de la superficie con el aire. De ser necesarias mayores cantidades de éste, se

pueden agregar inyectores al sistema.

Figura 3.1: Sistema abierto con agitación. Fuente: Brantes, L. (2009) Microalgas

para biocombustibles. En conferencia biocombustibles a partir de algas.

Antofagasta, Chile: Universidad de Antofagasta

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3.4.1.2 SISTEMA DE FOTOBIOREACTORES CERRADOS

Este sistema incluye varios tipos de reactores como: tubulares, de placa

plana y columnas de fotobioreactores. Son adecuados para cepas sensibles, ya

que es posible controlar la contaminación que pudiera existir en ellas. Este tipo

de sistema es mucho más costoso que el sistema de reactor abierto. Los de tipo

tubular consisten en una matriz recta de tubos plásticos o de vidrio pueden ser

dispuestos en forma horizontal, vertical o inclinada. Algunos cultivos pueden ser

recirculados con algún sistema de bomba, la llegada de CO2 y O2, es a través

de aireación al medio. La agitación y mezcla es muy importante para el

intercambio de gas en los tubos. Los de placa plana son hechos de materiales

transparentes para captar la mayor cantidad de energía solar. Una capa fina del

cultivo pasa a través de la placa plana, la que permite la absorción de radiación

a pocos milímetros. Los fotobioreactores tubulares, presentan limitaciones dado

al largo que deben poseer los tubos, lo que limita la cantidad de oxígeno o

puede influir en la acumulación de dióxido de carbono.

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Figura 3.2: Fotobioreactor tubular. Fuente: Gómez, P. (2009) Estudios sobre el

potencial biotecnológico de microalgas nativas: En conferencia

biocombustibles a partir de algas. Antofagasta, Chile: Universidad de

Antofagasta.

Las ventajas que presenta este tipo de sistema por sobre los reactores

abiertos son: una mayor producción de algas en general, dado que existe un

mayor control en el cultivo. Los sistemas abiertos presentan fluctuaciones de

temperaturas, evaporaciones, deficiencia en las cantidades de CO2 y

limitaciones de luminosidad.

3.5 IMPORTANCIA EN LA SELECCIÓN DE LA CEPA

Cuando se elige una cepa, con el objetivo de obtener un biocombustible a

partir de ella, es importante tener presentes los siguientes aspectos:

Tener alta productividad de lípidos

Tener la capacidad de sobrevivencia en condiciones de estrés en

fotobioreactores

Tener la capacidad de competir con otro tipo de microorganismos, que

pudieran presentarse en sistemas abiertos.

Ser capaz de capturar altos niveles de CO2

Tener requerimientos limitados de nutrientes

Ser tolerante ante cambios eventuales de temperaturas, nutrientes, luz.

Proporcionar valiosos co – productos

Presentar rápidos ciclos de productividad

Hasta el momento no se han encontrado, microalgas que presenten todas

estas características en conjunto.

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3.6 PRODUCCIÓN DE BIODIESEL A PARTIR DE MICROALGAS

Antes se presentaron, los diferentes métodos para obtener diferentes

biocombustibles a partir de microalgas, en ésta parte se analizará la producción

de biodiesel más específicamente. Las microalgas, presentan altos potenciales

para la producción de biodiesel frente a los aceites obtenidos, desde otros

orígenes, como por ejemplo, las extensiones territoriales necesarias para su

cultivo, estas no son grandes cantidades como sería una plantación de otros

vegetales. Además, de presentar la gran ventaja, de cultivarse rápidamente.

3.6.1 CONTENIDOS DE LÍPIDOS EN MICROALGAS

La selección de un tipo de cepa, considera un punto muy importante, que

es la habilidad de las microalgas, para desarrollarse con condiciones

especificas medioambientales y moderadas de nutrientes. Además, del tipo y

cantidad de ácidos grasos que posea cada especie los que le darán la

característica al biodiesel obtenido. Las cadenas de ácidos grasos saturados o

insaturados, dependerán de la especie.

A continuación se muestra una tabla con contenidos de lípidos de

algunas especies:

Tabla 3.1: Contenido de lípidos de microalgas.

ESPECIE Contenido de lípidos (%)Chlorella 10-48Dunaliella 17,5-67Isocrysis 7,1-33

Nonnachloris 20-56Scesedesmus 19,6-21,1

Spirilina platensis 4-16,6Tetraselmis 12,6-14,7

Fuente: Mata, T. (2009) Microalgae for biodiesel production and other

applications: Renewable and Sustainable Energy Reviw, 14, 217 - 232.

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3.6.1.1 BIOSÍNTESIS DE LÍPIDOS EN MICROALGAS

Los tipos de lípidos presentes en microalgas, pueden ser divididos en

dos grupos; lípidos neutros y lípidos polares. Los triglicéridos son ácidos

neutros, y son los principales en la producción de biodiesel. La síntesis de

triglicéridos, presenta tres pasos: la formación de la co – enzima acetyl A (acetyl

– coA), la elongación y desaturación de cadenas de carbono en ácidos grasos,

y la biosíntesis de triglicéridos en microalgas. La primera de estas etapas,

consiste en la formación de acetyl - coA como una reacción fotosintética

incluyendo la reacción luminosa En lo que respecta a la elongación de cadenas

de ácidos grasos, ésta depende principalmente de la enzima formada

anteriormente (acetyl – coA) y los ácidos grasos sintetizados. La desaturación

de cadenas de carbonos de ácidos grasos ocurre desde el C18, y además toma

lugar la elongación de cadenas de carbono, produciendo largas cadenas de

ácidos grasos, los que son poco usuales en plantas comunes. La última etapa

comprende la formación de triglicéridos, en donde se almacena parte de la

energía, cabe destacar, que la formación de éstos, es gracias a enzimas

propias y resultantes del proceso de glicólisis.

3.6.2 CAPTURA DE CO2

Las microalgas, pueden capturar dióxido de carbono, de diferentes

orígenes: CO2 atmosférico, emisiones de CO2 provenientes de plantas

industriales, y CO2 proveniente de carbonatos solubles. El primero de estos

orígenes es el más simple, depende de la transferencia de masa entre el aire y

las microalgas durante la fotosíntesis. En este caso la concentración presente

en el aire es bastante baja, en comparación a las emisiones provenientes de las

industrias. Por otra parte, existen microalgas capaces de asimilar CO2 presente

en carbonatos solubles. Este dióxido de carbono es convertido por las

microalgas en energía química, con ayuda de la luz, en sustancias como

polisacáridos, proteínas, lípidos e hidrocarbonos.

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39

3.6.3 TRANSESTERIFICACION EN LA PRODUCCIÓN DE BIODIESEL

Las viscosidades de aceites vegetales y aceites de microalgas, son

bastantes altas, lo que impide que estos puedan ser usados directamente en

motores. El objetivo de la transesterificación es justamente ese, reducir esta

viscosidad, incrementando la fluidez. Para este proceso los compuestos

principales son los alcoholes, como: metanol, etanol, propanol, butanol, etc, el

mas usado es el metanol, debido a su bajo costo y propiedades físicas. La

utilización de estos alcoholes, permite la conversión de largas cadenas de

ácidos grasos a ésteres, pero la reacción de triglicéridos a metil – éster es muy

lenta, por lo que se hace necesaria la utilización de un catalizador.

Existen los catalizadores del tipo alcalino y del tipo ácido. Los alcalinos

tienen altos grados de conversión. Pero, los ácidos grasos podrían reaccionar

con éste, formando emulsiones. .Por lo que comúnmente se usan catalizadores

ácidos como por ejemplo el ácido sulfúrico.

La reacción de transesterificación es la siguiente:

Figura 3.3: Reacción de transesterificación

Se ha propuesto la obtención de biodiesel por transesterificación ácida

en razón de 56:1 M de metanol a aceite de microalgas, a 30º C de temperatura.

En la siguiente tabla se presentan algunas técnicas de

transesterificación, con algunas ventajas y desventajas:

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Tabla 3.2: Ventajas y desventajas de sistemas de

transesterificaciónTécnica Ventajas Desventajas

La reaccion puede ser Alta temperaturabien controlada de reaccion y proceso

complejoEl costo de produccion El proceso requierees bajo de mucha energiaEl metanol puede ser Se requiere de un sistemareutilizado de reciclo para metanolAlta conversion Existe presencia de aguas

residualesModerada condición Limitación de enzimas ende reacción la converión de cortas

cadenas de ácidos grasosSe requieren pequeñas Existen químicos quecantidades de metanol pueden dañar a las enzimasNo hay daño al medioambienteFácil de controlar Alta temperatura y presión

Técnicas de fluido Este método es fácil y Alto costo de producciónsupercrítico seguro

No causa daño ambiental Alta utilización de energía

Catálisis Química

Ctálisis enzimática

Fuente: Huang, G. (2009) Biodiesel production by microalgal biotechnology:

Renewable and Sustainable Energy Reviw, 87, 38- 46.

3.6.4 TECNOLOGÍAS DE CONVERSIÓN DE MICROALGAS ABIOCOMBUSTIBLES

Los procesos tecnológicos para la conversión de microalgas a

biocombustibles, pueden dividirse en dos categorías: de conversión

termoquímica y de conversión bioquímica. El siguiente esquema muestra los

diferentes tipos de mecanismos o tecnologías utilizadas:

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Figura 3.4: Tecnologías de obtención de energías renovables. Fuente:

Brennam, L. (2009). Biofuels from microalgae: Renewable and Sustainable

Energy Reviw, 14, 557 - 577.

En la siguiente tabla se muestran, los valores líquidos obtenidos desde

diferentes especies, a través de distintos procesos tecnológicos:

Tabla 3.3: Porduccion de lípidos totales en diferentes especies.Tecnología Especie Temperatura (ºC) Presion (Mpa) Contenido liq. (%)

Licuefacción Termoqumica Batryacoccus 300 3 64Licuefacción Termoqumica Dunaliella 300 3 42

Pirolisis Chlorella 450 0,101 57,8Pirolisis Microcyatis 300 0,101 24

Fuente: Brennam, L. (2009). Biofuels from microalgae: Renewable and

Sustainable Energy Reviw, 14, 557 - 577.

3.7 ESPECIE ESCOGIDA COMO MATERIA PRIMA

Existe un sin número de especies de microalgas, que pueden ser

escogidas para su cultivo y posterior producción de biodiesel. En general, la

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cualidad de la especie escogida tiene que ver principalmente con el desarrollo

de estas y la calidad del aceite obtenido, es decir, se busca una tasa de

crecimiento rápida y una biomasa capaz de proporcionar altas cantidades y

buena calidad de los aceites.

En lo que respecta a composición, las microalgas de las nieves o

antárticas poseen carotenoides secundarios, los que le dan un rol fotosensible a

las algas. Existen estudios que muestran, como estas microalgas son capaces

de adaptarse a diferentes temperaturas sin variar mayormente su estructura

[10], sin embargo, debe tenerse en consideración no aumentar ésta por sobre

los 15º C, para su subsistencia. Existen tipos como Chlorella y Navícula, que

podrían soportar temperaturas de hasta 30º C, lo que indica que estos

organismos son más sicotróficos que sicrofílicos.

Por otro lado, la composición del aceite extraído de la materia prima, en

este caso microalgas, es lo que le dará una buena calidad al biodiesel

producido, mejor será la calidad de éste si las cadenas de ácidos grasos son

mas cortas, con esta característica cuentan estas microalgas de las nieves;

Además, la cantidad de ácidos grasos aumenta, mientras las temperaturas

disminuyen. [10]

3.7.1 DESCRIPCIÓN DE MICROALGAS ANTÁRTICAS

Las microalgas, encontradas en la Antártica, presentan un aspecto como

el que se muestra de la foto:

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Figura 3.5: Foto microalgas en estudio. Fuente: propia

Los parches de color verde o rojo sobre la nieve, suelen estar

constituidos principalmente por especies de la División Chlorophyta. Las

Chlorophyta son un grupo muy diversos constituido por alrededor de 8.000

especies. Este grupo se caracteriza por tener clorofila a y clorofila b. Otro grupo

bastante estudiado es Chlorella.

3.7.2 RECONOCIMIENTO DE MICROALGAS ESTUDIADAS

El reconocimiento de los lugares donde se establecen estas microalgas

es muy sencillo, ello se debe a que se encuentran en zonas con superficie

nevada y desde la distancia se pueden ver como grandes manchas de distintos

colores; rojas, verdes e incluso hay lugares en que se pueden encontrar

amarillas. Generalmente se avistan en lugares donde la nieve ha comenzado a

derretirse, es por ello que, durante el tiempo de invierno son difíciles de

encontrar debido a su escasa visibilidad producto de la abundante nieve

invernal. Por otra parte al momento de recogerlas, se debe tener especial

precaución de escoger las microalgas que se encuentren lo más alejadas de

una posible influencia salina del mar. En la Antártica, al navegar pueden verse,

paredes de nieve verdes, éstas también son microalgas, pero no son de la

misma cepa que se ha estudiado en el presente trabajo, dado que reciben

influencia salina del mar. Por lo tanto, para extraer la especie que nos ocupa,

los lugares más apropiados son los que se encuentran ubicados lo más lejos

posible del mar y por sobre la superficie de nieve, siendo un lugar idóneo para

la extracción y recolección de estas microalgas, las inmediaciones de la base

militar Bernardo O’ Higgins, a aproximadamente unos 100 metros de distancia

de las instalaciones, específicamente en donde actualmente se encuentra

habilitada la pista de anevisaje.

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3.8 CINETICA DE CRECIMIENTO

La cinética con la que se relaciona el crecimiento de las microalgas

estudiadas, es la ecuación de Monod, dado que no se ha encontrado referencia

bibliográfica a cerca de crecimiento de microalgas de zonas frías, a diferentes

temperaturas y con diferentes grados de luminosidad. Por este motivo al

momento de hacer un análisis de resultados se hará una aproximación de los

resultados a esta ecuación.

3.9.1 DESCRIPCION CINÉTICA DE MONOD

Es importante conocer la cinética de crecimiento de los cultivos

microbianos porque es necesario poder predecir cómo va a evolucionar un

cultivo Las células aisladas cultivadas en un volumen finito de medio de cultivo

apropiado van utilizando los nutrientes que tienen disponibles con la mayor

eficiencia y rapidez que pueden, sintetizando sus propios componentes

celulares y dividiéndose en cuanto han podido duplicar su masa y su material

genético. El tiempo que tarda una célula en hacer todo lo anterior es lo que

conocemos como tiempo de generación y puede variar desde unos 20 minutos

en condiciones óptimas hasta varios meses en condiciones del suelo. Cada vez

que transcurre un tiempo de generación, el número de células se duplica,

siguiendo, por tanto, un incremento exponencial. [19]

Si se llama X0 al número de células inicial, y g al número de

generaciones transcurridas, el número de células final (X) será:

GXX 2*0 (3b)

Si se llama T al tiempo de generación y t al tiempo de cultivo

transcurrido, la ecuación anterior puede transformarse en la siguiente:

tTXX /0 2* [3c]

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Al momento de trabajar estas ecuaciones, resulta complicado al

momento de llevarlas a datos, por lo que se hace una rectificación,

obteniéndose la siguiente relación:

)2(1)()( 0 LNT

XLNXLN (3d)

Esto es: el logaritmo del número de células crece linealmente con el

tiempo a razón de una constante igual a ln2/T. Si el tiempo de generación T es

muy grande, el crecimiento tendrá poca pendiente (será lento) y si T es

pequeño el crecimiento será rápido.

Otra forma de representar la cinética es considerando el incremento en el

número de células (dX) en un intervalo corto de tiempo (dt). En este caso, la

ecuación que describe la cinética es la siguiente:

XdtdX (3e)

El incremento del número de células (dX) por unidad de tiempo (dt) es

proporcional al número de células presentes en el cultivo (X). A la constante de

proporcionalidad (µ) se le denomina tasa de crecimiento y puede considerarse

algo así como la probabilidad de que una célula se divida en un tiempo

determinado. [19]

Resolviendo esta derivada parcial, e integrando entre los tiempos 0 a t y

X0 a X (que es el crecimiento en el tiempo t) se obtiene la siguiente relación:

tx

x

dtdxx 00

1 (3f)

tXLNXLN )()( 0 (3g)

Luego reordenando y aplicando función exponencial se obtiene la

siguiente relación:

texx 0 (3h)

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CAPITULO IV:MÉTODO, RESULTADOS OBTENIDOS Y ANÁLISIS DE RESULTADOS

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4.1 INTRODUCCIÓN

En este capítulo, se presentan los datos medidos tanto en terreno como

en laboratorio, se hace una enumeración de los equipos utilizados y de las

pruebas efectuadas.

El estudio para la determinación de parámetros óptimos de crecimiento,

se realiza estudiando tres parámetros, que resultan fundamentales, para la

obtención de este objetivo; que son: temperatura, luminosidad y soporte. Estos

tres factores se estudian de forma independiente, variando uno de ellos y

manteniendo los otros dos constantes.

Aquí, se analizan los datos obtenidos, haciendo uso de herramientas

matemáticas; tales como correlaciones y reglas, para determinar puntos de

crecimientos máximos y tiempos en los que pueden encontrarse estos. Así

también se determinan los porcentajes de crecimiento obtenidos, con la

variaciones realizadas, de forma de poder concluir acerca de cuáles son los

valores de estos tres factores, que entregan una mayor cantidad de microalgas,

sin llevarlas al estrés ni a la inhibición, características propias de estas

especies.

Es necesario recordar, que el estudio de los parámetros de crecimiento

óptimo, se hace para conseguir buenas cantidades de microalgas, en un corto

plazo, para la posterior extracción de aceite y finalmente obtención de biodiesel.

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4.2 DESCRIPCIÓN DE PARÁMETROS MEDIDOS EN TERRRENO

En la Base Militar Antártica General Bernardo O’Higgins (coordenadas

63°19' S 57°54' W Península Antártica) se encontró, dos tipos de microalgas,

las de color verde y las de color rojo, ambas presentan condiciones de

subsistencia algo diferentes. Al hacer una comparación, entre unas y otras,

puede observarse que las primeras se hallaban a una temperatura de 0-1º C y a

una pequeña profundidad (1-2 cm.), a diferencia de las especies rojas, las que

se encontraban a 2º C y en la superficie de los hielos. Las temperaturas

registradas en el lugar los meses de enero y febrero, se muestran en la

siguiente tabla:

Tabla 4.1: Temperaturas promedio enero – febrero

Año Enero Febrero1990 1,0 1,31991 0,9 -0,71992 0,6 -0,61993 0,8 0,81994 0,9 0,21995 1,2 0,81996 1,1 1,41997 1,2 0,31998 1,4 0,61999 1,0 0,62000 0,9 0,72001 0,9 -0,52002 0,5 1,62003 1,6 3,42004 1,3 0,52005 1,2 0,82006 0,7 0,32007 0,6 0,1

Fuente: Propia

Otra diferencia, al momento de comparar ambas especies, en terreno,

es la diferencia de pH, las microalgas de color verde presentan un valor mayor

que el de las microalgas rojas, la diferencia entre ambos es de 0.6 unidades.

Siendo para las primeras de 7.88 y en el segundo caso de 7.28.

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Las microalgas estudiadas son las microalgas de color verde, que se

encuentran en terreno alejadas de la influencia marina, y sobre la nieve, debido

a que las cantidades recolectadas de estas fueron mucho mayores que en el

caso de las rojas, debido a la abundancia que había de estas.

4.2.1 DESCRIPCIÓN DE TOMA DE MUESTRAS DE MICROALGAS

Las microalgas estudiadas, han sido recolectadas en La Base militar

Antártica General Bernardo O’Higgins, cuyas coordenadas son: 63°19' S 57°54'

W, Península Antártica. El lugar específico de recolección de estas fue en

inmediaciones de la base militar a unos 100 m de las instalaciones de esta. Se

recolectaron diferentes muestras de alrededor de 20 ml de nieve con

microalgas, recogidas con una espátula. Dichas muestras fueron luego

refrigeradas para su posterior estudio.

4.3 PROCEDIMIENTO REALIZADO EN LABORATORIO

4.3.1 MATERIALES

20 Tubos de ensayo de 10 ml

Matraz de aforo de 1 ltrs

Pipetas de 10, 5 ml

1 Piseta

4.3.2 ESTERILIZACIÓN

Mechero Bunsem

Pinzas

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4.3.3 EQUIPOS

Balanza analítica

pH metro

Termómetro

Luxometro

Incubadora

2 Baños termostaticos

3 ampolletas de bajo consumo energético

4.3.4 REACTIVOS

Etanol

Hidróxido de sodio

Etilenglicol

4.3.5 MEDIO DE CULTIVIO

Nombre del compuesto Símbolo Cantidad (mg)

Nitrato de potasio KNO3 400

Fosfato de potasio K2HPO4 80

Sulfato de Magnesio MgSO4*7H2O 200

Cloruro de calcio CaCl2*2H2O 107

Acido Cítrico C6H8O7 100

Acido Bórico H2BO3 5.72

Cloruro de Manganeso MnCl2*4H2O 3.67

Sulfato de zinc ZnSO4*7H2O 0.44

Sulfato de cobre CuSO4*5H2O 0.16

Molibdato de Sodio Na2MoO4 0.084

*Citrato Férrico FeC6H8O7 20

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*Este compuesto fue sustituido por 10 mg/Ltrs de Cloruro de Fierro (FeCl2)

Dado que el compuesto no se encontraba disponible en laboratorio ni en el

mercado.

Enrasar esta solución hasta 1 Ltr.

Medir pH y ajustarlo a 7.5

Fuente: Dr. Joel Cuello, Universidad del Colorado

4.4 PROPIEDADES DE SOPORTES ESTUDIADOS

Ver anexo 1

4.5 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Se procedió a esterilizar los materiales, que serian ocupados, con un

mechero y alcohol.

Se distribuyo muestras de 1 ml de microalgas, en cada uno de los tubos

de ensayo, dispuestos para cada una de las pruebas.

Se utilizo para cada prueba, replicas, para obtener mayor seguridad en

los resultados obtenidos

Para el caso de las pruebas de temperatura y luminosidad, se agrego a

cada tubo de ensayo 3 ml de solución salina, descrita antes. Las

condiciones de luminosidad y temperaturas, se entregaron de acuerdo a

las necesidades de estudio del sistema.

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En el caso de la prueba de soporte, se utilizaron matraces Erlen mayer

de 100 ml, a los cuales se les agrego el material de interés de estudio;

arena, piedrecillas y agar agar.

Las pruebas fueron tomadas cada 3 o 4 días, midiendo pesos, a través

de una balanza analítica. Además se uso blancos para cada una de las

pruebas. El error con que trabaja esta balanza es de +/-0.0001 grs.

Después de cada una de las experiencias, se efectuó una limpieza de

cultivo, que consistía en sacar el líquido sobrenadante y agregar nueva

solución salina, en cada uno de los tubos de ensayo.

4.6 RESULTADOS OBTENIDOS Y ANALISIS DE RESULTADOS

4.6.1 RESULTADOS FACTOR: TEMPERATURA

Se adecuaron tres medios para la obtención de datos de estas. Las

temperaturas estudiadas fueron: 4º C, 12º C y 20º C. Para el estudio de este

factor, los parámetros de luminosidad y soporte se mantienen constantes, para

las tres temperaturas Estos son: de 250 Lux y sin soporte, es decir, el medio de

cultivo fue el medio salino preparado.

La experiencia se realizo repetidamente, para cuatro tubos en los casos

de temperatura, sin embargo el tubo Nº 12, que era el que correspondía a la

temperatura 4º C, sufrió un problema de manipulación, durante el proceso de

pesado, por lo que fue descartado en la evaluación de datos. La razón por la

cual, se realizaron estas pruebas, con cuatro repeticiones, es debido a que la

densidad de biomasa en la nieve no es definida, por lo que en algunos tubos las

cantidades de microalgas son mayores, que en otros, para un mismo volumen,

así con los resultados, se obtendrá el comportamiento de estas.

En la tabla 4.2 se presentan los resultados obtenidos a 4º C:

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53

Tabla 4.2: Resultados de crecimiento a 4º C

9 10 111 0,0045 0,0032 0,00442 0,0090 0,0063 0,00893 0,0134 0,0095 0,01334 0,0179 0,0127 0,01785 0,0213 0,0146 0,02096 0,0247 0,0165 0,02407 0,0275 0,0184 0,02678 0,0299 0,0195 0,02709 0,0325 0,0209 0,0278

TuboDía

Tubo 9

00,010,020,030,04

0 2 4 6 8 10Dias

(grs)

Figura 4.1 a: Crecimiento de microalgas tubo 9

Tubo 10

00,005

0,010,015

0,020,025

0 2 4 6 8 10Dias

(grs)

Figura 4.1 b: Crecimiento de microalgas tubo 10

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Tubo 11

00,0050,01

0,0150,02

0,0250,03

0 2 4 6 8 10Dias

(grs)

Figura 4.1 c: Crecimiento de microalgas tubo 11

La tabla 4.3 muestra los resultados de crecimiento (grs) de microalgas

obtenidos a 12º C

Tabla 4.3: Resultados de crecimiento a 12º C

5 6 7 81 0,0101 0,0115 0,0188 0,01802 0,0224 0,0261 0,0376 0,03603 0,0337 0,0392 0,0565 0,05404 0,0449 0,0523 0,0753 0,07205 0,0529 0,0580 0,0877 0,09116 0,0610 0,0637 0,1002 0,10057 0,0690 0,0693 0,1126 0,11038 0,0735 0,0750 0,1205 0,11989 0,0791 0,0785 0,1265 0,1248

Día Tubo

Tubo 5

00,020,040,060,08

0,1

0 2 4 6 8 10Dias

(grs)

Figura 4.2 a: Crecimiento de microalgas tubo 5

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Tubo 6

00,020,040,060,080,1

0 2 4 6 8 10Dias

(grs)

Figura 4.2 b: Crecimiento de microalgas tubo 6

Tubo 7

0

0,05

0,1

0,15

0 2 4 6 8 10Dias

(grs)

Figura 4.2 c: Crecimiento de microalgas tubo 7

Tubo 8

0

0,05

0,1

0,15

0 2 4 6 8 10Dias

(grs)

Figura 4.2 d: Crecimiento de microalgas tubo 8

La tabla 4.4 muestra los datos de crecimiento (grs) de microalgas por día,

a 20º C.

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56

Tabla 4.4: Resultados de crecimiento a 20º C

1 2 3 41 0,0327 0,0321 0,0125 0,03152 0,0653 0,0641 0,0250 0,06293 0,0980 0,0962 0,0376 0,09444 0,1307 0,1283 0,0501 0,12595 0,1469 0,1529 0,0542 0,15036 0,1630 0,1675 0,0582 0,17477 0,1695 0,1801 0,0623 0,18258 0,1755 0,1865 0,0663 0,19029 0,1825 0,1913 0,0704 0,1990

Día Tubo

Tubo 1

0

0,05

0,1

0,15

0,2

0 2 4 6 8 10Dias

(grs)

Figura 4.3 a: Crecimiento de microalgas tubo 1

Tubo 2

00,050,1

0,150,2

0,25

0 2 4 6 8 10Dias

(grs)

Figura 4.3 b: Crecimiento de microalgas tubo 2

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Tubo 3

0

0,02

0,04

0,06

0,08

0 2 4 6 8 10Dias

(grs)

Figura 4.3 c: Crecimiento de microalgas tubo 3

Tubo 4

00,050,1

0,150,2

0,25

0 2 4 6 8 10Dias

(grs)

Figura 4.3 d: Crecimiento de microalgas tubo 4

4.6.2 ANÁLISIS DE RESULTADOS FACTOR TEMPERATURA

Cuando se analizan los datos obtenidos, desde el punto de vista de

tendencias de curvas, se obtienen las correlaciones presentadas en la tabla

siguiente:

Tabla 4.5: Correlaciones de datos obtenidos a 20º C

Temperatura Función Parámetroy = 0,0731Ln(x)+0,0254 0,9857y = 0,0791ln(x)+0,0207 0,9816y = 0,0271Ln(x)+0,0099 0,9893y = 0,0825Ln(s)+0,072 0,977y = 0,0454 exp(0,186 x) 0,7779

y = 0,0436 exp(0,1977 x) 0,8013y = 0,0174 exp(0,1831 x) 0,7838y = 0,042 exp(0,2056 x) 0,819

20° C

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Tabla 4.6: Correlaciones de datos obtenidos a 12º C

Temperatura Función Parámetroy = 0,0326Ln(x)+0,0033 0,9697y = 0,0316Ln(x)+0,0077 0,9888y = 0,0518Ln(x)+0,0081 0,9719y = 0,052Ln(x)+0,0067 0,9687

y = 0,0137 exp(0,2255 x) 0,841y = 0,0167 exp(0,203 x) 0,7888

y = 0,0245 exp(0,2129 x) 0,8475y = 0,0233 exp(0,2186 x) 0,8469

12° C

Tabla 4.7: Correlaciones de datos obtenidos a 4º C

Temperatura Función Parámetroy = 0,0132Ln(x)+0,0014 0,9612y = 0,0084Ln(x)+0,0016 0,9766y = 0,0117Ln(x)+0,0024 0,9755y = 0,0057 exp(0,2218 x) 0,8653y = 0,0042 exp(0,208 x) 0,8396

y = 0,0059 exp(0,2057 x) 0,8211

4° C

En las cuales, “y” representa el crecimiento en gramos de microalgas y

“X” es el tiempo en que se obtuvo dicho crecimiento.

Aquí se hace una comparación entre las correlaciones obtenidas por

ecuaciones logarítmicas y por ecuaciones exponenciales; estas últimas buscan

encontrar alguna similitud con la ecuación de Monod. La que se presentó en la

sección 3.9.1.

Para dicha asimilación, se considero “y” como la cantidad de

microorganismos en un tiempo dado, es decir, lo que en la ecuación de Monod

esta representado por “X”, por otro lado el parámetro de la ecuación de Monod

representado por “t” corresponde a “x”, en los gráficos y relaciones obtenidas.

En primer lugar puede apreciarse de acuerdo a los parámetros de

correlación que, los datos no se ajustan a una buena curva exponencial del tipo

Monod para la temperatura de 4º C. Ajustándose mucho mejor a una curva del

tipo logarítmica. Además puede apreciarse en las gráficas 4.1, la tendencia de

crecimiento hacia un equilibrio.

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59

En lo que respecta al crecimiento de microalgas a 12º C, según los

parámetros de correlación, se observa que los datos pueden adaptarse mejor,

que las otras dos temperaturas a la ecuación de Monod, esto es basado en los

parámetros de correlación de la tabla 4.6.

Cuando la temperatura es de 20º C, puede observarse que los

coeficientes de correlación se ajustan, mejor a una curva con tendencia

logarítmica y se alejan mas, que en los otros casos a una tendencia

exponencial. Nuevamente, puede apreciarse en las figuras 4.3 que los datos de

crecimiento tienden a un equilibrio.

Los crecimientos encontrados en estas pruebas, son masas por lo tanto

no presentan relación con la cantidad de lípidos que poseen estas especies.

Este estudio va dirigido al crecimiento neto de las microalgas, además las

mediciones se hicieron con una balanza analítica y no con un equipo de

medición celular, debido a limitaciones instrumentales, por lo que no puede

darse un ajuste igual al de una curva de Monod, pero si en lo que tiene que ver

a la primera tendencia de crecimiento, puede hacerse una similitud, dado que

las mediciones resultan ser proporcionales, en esta etapa. [20]

Por otra parte, si se calculan los porcentajes de crecimiento a las

diferentes temperaturas, se obtienen los siguientes resultados:

Tabla 4.8: Porcentajes de crecimiento a diferentes temperaturas

Temperatura (ºC) Porcentaje de crecimiento (%)4 569,7

12 607,820 487,3

El porcentaje de mayor crecimiento es para la temperatura de 12º C,

calculados como promedio respecto a la materia inicial. El análisis de variación

de luminosidad se efectúa para el caso de esta temperatura; por otro lado ésta

es la que mejor ajusta sus datos a la ecuación de Monod y según

investigaciones anteriores [10], de aquí se obtienen los mejores resultados para

aceites, para la obtención de biodiesel.

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60

4.6.3 RESULTADOS FACTOR: LUMINOSIDAD

Dentro de los factores de estudio para conseguir las condiciones optimas

de crecimiento de microalgas antárticas, se encuentra el parámetro

luminosidad, como se sabe la luz es quien permita la fotosíntesis en las plantas,

de igual forma esto ocurre en las microalgas, por tanto es indispensable que

cuenten con la cantidad suficiente de luz para conseguir realizar este proceso.

Por esto, se exponen las diferentes muestras de microalgas a diferentes niveles

de luminosidad manteniendo constantes los otros dos parámetros de

temperatura (12º C) y soporte (sin soporte solo con medio de cultivo). A

continuación se presentan los datos obtenidos:

Tabla 4.9: Crecimiento (grs) de microalgas con 297 luxCrecimiento por dia 1 2 3 4 5 6 7

Dia 1 0,0596 0,0514 0,0413 0,0455 0,0436 0,0577 0,0606Dia 2 0,1192 0,1028 0,0825 0,0911 0,0872 0,1153 0,1211Dia 3 0,1788 0,1542 0,1238 0,1366 0,1308 0,1730 0,1817Dia 4 0,1841 0,1535 0,1631 0,1803 0,1721 0,1783 0,1866Dia 5 0,1895 0,1527 0,2024 0,2239 0,2134 0,1835 0,1915Dia 6 0,2167 0,1752 0,2211 0,2437 0,2341 0,2093 0,2184Dia 7 0,2438 0,1976 0,2399 0,2635 0,2549 0,2351 0,2453Dia 8 0,2575 0,1976 0,2662 0,2900 0,2838 0,2477 0,2586Dia 9 0,2712 0,1976 0,2925 0,3166 0,3128 0,2604 0,2719

Dia 10 0,2849 0,1976 0,3188 0,3431 0,3417 0,2730 0,2852

0

0,1

0,2

0,3

0,4

0 2 4 6 8 10 12Dias

(grs)

Tubo 1Tubo 2Tubo 3Tubo 4

Figura 4.4 a: Crecimiento de microalgas con 297 lux

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0

0,1

0,2

0,3

0,4

0 2 4 6 8 10 12Dias

(grs)

Tubo 5Tubo 6Tubo 7

Figura 4.4 b: Crecimiento de microalgas con 297 lux

Tabla 4.10: Crecimiento (grs) de microalgas con 317 luxCrecimiento por dia 1 2 3 4 5 6 7

Dia 1 0,0772 0 0,0783 0,0744 0,1958 0,1836 0,1688Dia 2 0,1545 0 0,1566 0,1489 0,3916 0,3671 0,3376Dia 3 0,1752 0,0181 0,1829 0,1709 0,4126 0,3846 0,3521Dia 4 0,1959 0,0362 0,2092 0,1928 0,4336 0,4021 0,3666Dia 5 0,2166 0,0544 0,2354 0,2148 0,4546 0,4197 0,3811Dia 6 0,2373 0,0725 0,2617 0,2367 0,4756 0,4372 0,3956Dia 7 0,258 0,0906 0,288 0,2587 0,4966 0,4547 0,4101Dia 8 0,3127 0,1415 0,3373 0,3135 0,549 0,5446 0,4995Dia 9 0,3674 0,1923 0,3865 0,3683 0,6015 0,6346 0,589

Dia 10 0,3855 0,207 0,4052 0,3872 0,6177 0,6682 0,621Dia 11 0,4036 0,2218 0,4238 0,4061 0,6338 0,7018 0,6531Dia 12 0,4217 0,2365 0,4425 0,425 0,65 0,7354 0,6851Dia 13 0,4686 0,2806 0,4886 0,4722 0,6939 0,7843 0,7344Dia 14 0,5156 0,3247 0,5346 0,5194 0,7379 0,8332 0,7837

00,10,20,30,40,50,60,70,80,9

0 5 10 15Dias

(grs)

Tubo 5Tubo 6Tubo 7

Figura 4.5 a: Crecimiento de microalgas con 317 lux

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62

0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0 5 10 15Dias

(grs)

Tubo 1Tubo 2Tubo 3Tubo 4

Figura 4.5 b: Crecimiento de microalgas con 317 lux

Es necesario explicar que, la cantidad de tubos expuestos a esta

experiencia es de 7, dado que las muestras iniciales fueron tomadas a partir de

las temperaturas anteriormente realizadas. Se tomo 1 ml de muestra de los

tubos 5 al 11 de la experiencia anterior (4.6.2). Los tubos 1 al 4 no fueron

considerados para esta parte, dado que, estos presentaron los menores

crecimientos y la concentración de microalgas en 1 ml de muestra seria menor.

4.6.4 ANÁLISIS RESULTADOS FACTOR LUMINOSIDAD

Al trazar líneas de tendencia para los datos obtenidos, se puede

encontrar que la correlación adecuada es polinómica de grado 4, sin embargo,

no existe un punto máximo de crecimiento hasta el ultimo de día en que se

tomo datos, pero lo que interesa en este punto es determinar el porcentaje de

crecimiento en este periodo en comparación con los demás niveles de

luminosidad.

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Tabla 4.11: Correlaciones para datos de luminosidadIntensidad (Lux) Tubo Correlacion R^2

1 0,9893

2 0,9726

3 0,9988

4 0,9988

5 0,9989

6 0,9892

7 0,9888

1 0,9868

2 0,9899

3 0,9912

4 0,9892

5 0,9695

6 0,9764

7 0,9749

317

297

0645.01562.0038.00043.00002.0 234 xxxxy

0574.01385.00347.0004.00002.0 234 xxxxy

0019.00347.00051.00012.000006.0 234 xxxxy

0038.00357.00067.00015.000008.0 234 xxxxy

0011.00381.00047.00011.000006.0 234 xxxxy

062.01505.00364.00042.00002.0 234 xxxxy

0662.01596.00389.00044.00002.0 234 xxxxy

038.00607.00078.00007.000002.0 234 xxxxy

0224.00292.00108.00009.000002.0 234 xxxxy

0385.005.00057.00004.000001.0 234 xxxxy

0368.00574.00068.00006.000002.0 234 xxxxy

0638.01975.00365.00031.000009.0 234 xxxxy

0545.01989.00419.00041.00001.0 234 xxxxy

0526.01819.0039.00039.00001.0 234 xxxxy

Por otro lado al ajustarlos a una curva de Monod se obtienen las

siguientes relaciones y parámetros de correlación:

Tabla 4.12: Correlación de Monod para datos obtenidos con 297 Lux

a b1 0,0869 0,1372 0,76812 0,0791 0,1141 0,66413 0,0573 0,1959 0,84764 0,0638 0,1933 0,83955 0,0602 0,1977 0,85246 0,0844 0,1361 0,76337 0,0887 0,1353 0,7618

TUBObxaey 2R

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Tabla 4.13: Correlación de Monod para datos obtenidos con 317 Lux

a b1 0,1095 0,1192 0,90792 0,0244 0,2407 0,91493 0,1155 0,1196 0,89294 0,1062 0,1227 0,90925 0,2928 0,0717 0,79096 0,2547 0,0909 0,87557 0,2307 0,0931 0,8823

TUBObxaey 2R

Al observarse los parámetros de correlación de las ecuaciones

obtenidas; se observa que mientras mayor es la luminosidad a la que se expone

a las microalgas, mas cercanos son los datos a la ecuación de Monod. De esta

forma los valores mostrados en la tabla 4.14 de “a” y “b” corresponden a la

cantidad de materia inicial y a la tasa de crecimiento, respectivamente, en cada

uno de los tubos expuestos a una luminosidad de 317 Lux. Así, la tasa de

crecimiento promedio es de 0.1226. Para el caso de luminosidad de 297 Lux, no

es conveniente determinar a través de esta aproximación, la tasa de

crecimiento, debido al parámetro de correlación obtenido. Por otra parte, al

comparar dicho resultado, con el obtenido con una luminosidad de 250 Lux, la

tasa de crecimiento es mucho mayor (0.4564) dado la poca cantidad de materia

inicial presente en cada uno de los tubos trabajados (del orden de 1*10^-3).

Además puede establecerse porcentajes de crecimiento a las diferentes

intensidades de luz, y a los 10 días de estudio, los que se señalan a

continuación:

Tabla 4.14: Porcentajes de crecimiento a diferentes intensidades de luzPorcentaje de 297 Lux 317 Lux

Crecimiento (%) 488 458

El mayor porcentaje de crecimiento, para las pruebas de luminosidad se

obtiene para la luminosidad de 297 lux, esto es al décimo día de estudio.

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65

Por otra parte al hacer una comparación con la luminosidad a la que se

expuso en la primera experiencia, que fue de 250 Lux se obtienen las siguientes

tasas de crecimiento en el día 9.

Tabla 4.15: Porcentaje de crecimiento a tres niveles de luminosidad diferente

Luminosidad (Lux) 250 297 317Porcentaje de crecimiento (%) 607,8 451,5 427,4

Esto se debería a dos factores, el primero una inhibición a una mayor

luminosidad por parte de las microalgas, lo que tardaría su crecimiento por

algunos días, o simplemente que al tratarse de microalgas antárticas, la

luminosidad requerida, no es demasiada para su desarrollo. Y su óptimo

crecimiento se obtendría con una cantidad moderada de luz.

4.6.5 RESULTADOS FACTOR: SOPORTE

Dentro de los factores de estudio se encuentra este tercer factor, que es

soporte. El lugar en el que se desarrollan originalmente las microalgas

estudiadas, es la nieve, por lo que resulta interesante saber cómo influye esta

en el desarrollo de las especies, y si en otro medio se desarrollan igual o incluso

mejor. Los soportes elegidos para este estudio fueron: arena, piedrecillas

blancas y agar agar.

Existen medios de cultivo del tipo sólido que sirven para dar consistencia

a los cultivos, en general. El estudio de este parámetro busca entregar esta

consistencia a las microalgas, y además entregar cierta porosidad de modo de

no impedir la llegada de luz y nutrientes a los microorganismos. La densidad de

cada colonia es muy alta (del orden de 107 células para una colonia de unos 5

mm). Esto se debe a que en el medio sólido, a diferencia del líquido, las

bacterias no pueden dispersarse, y durante mucho tiempo este medio sólido

permite un aporte continuo de nutrientes (por difusión desde el entorno de la

colonia, hacia ella). [82]

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66

La temperatura a la que se mantuvo el cultivo durante esta prueba fue de

12º C y luminosidad de 317 Lux, se tomaron estos valores de parámetros fijos,

debido a que en el caso de la temperatura, esta fue la que presento el mayor

porcentaje de crecimiento de microalgas; por otro lado se tomo un alto valor de

luminosidad, debido a que el medio, impediría la llegada de luz al cultivo. Los

resultados que se obtuvieron fueron los expuestos en la siguiente tabla:

Tabla 4.16: Crecimiento (grs) de microalgas con piedras blancas

Matraz 1 Matraz 2Dia 1 0,02825 0,0431Dia 2 0,0565 0,0862Dia 3 0,1272 0,16415Dia 4 0,1979 0,2421Dia 5 0,227875 0,331325Dia 6 0,25785 0,42055Dia 7 0,32115 0,51655Dia 8 0,38445 0,61255Dia 9 0,411675 0,655375Dia 10 0,4389 0,6982

Crecimiento por diaCon piedras blancas

0

0,2

0,4

0,6

0,8

0 2 4 6 8 10 12Dias

(Grs)

Figura 4.6: Crecimiento de microalgas con piedras blancas.

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67

Tabla 4.17: Crecimiento (grs) de microalgas con arena

Matraz 3 Matraz 4Dia 1 0,0344 0,01585Dia 2 0,0278 0,038Dia 3 0,03875 0,064Dia 4 0,0497 0,09Dia 5 0,07095 0,1112Dia 6 0,0922 0,1324Dia 7 0,1294 0,13745Dia 8 0,1666 0,1425Dia 9 0,1705 0,149

Dia 10 0,1756 0,1533

Crecimiento por dia Con arena

00,20,40,60,8

11,2

0 2 4 6 8 10 12Dias

(Grs)

Figura 4.7: Crecimiento de microalgas con arena.

Tabla 4.18: Crecimiento (grs) de microalgas con agar agar

Matraz 5 Matraz 6Dia 1 0,0872 0,09105Dia 2 0,1744 0,1821Dia 3 0,32975 0,34995Dia 4 0,4851 0,5178Dia 5 0,55845 0,5976Dia 6 0,6318 0,6774Dia 7 0,7506 0,8142Dia 8 0,8694 0,951Dia 9 0,9409 1,00625

Dia 10 1,0124 1,0615

Crecimiento por dia Con agar agar

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00,20,40,60,8

11,2

0 2 4 6 8 10 12Dias

(Grs)

Figura 4.8: Crecimiento de microalgas con agar agar.

4.6.6 ÁNALISIS RESULTADOS FACTOR SOPORTE

Las curvas de tendencia, indican que las correlaciones son para los tres

casos de orden 4, (anexo 2) a diferencia del caso anterior, pueden determinarse

máximos para los datos de los matraces 1 y 2. Pero, para los otros matraces,

no es posible determinar dichos valores, dado la tendencia que siguen las

curvas. Estos valores se presentan a continuación:

Tabla 4.19: Crecimiento máximo con piedras blancas

Matraz 1 Matraz 2Crecimiento maximo 0,419311921 0,7400532

Tiempo de crec. Maximo 10,87 10,65

Los porcentajes de crecimiento al décimo día son los siguientes:

Tabla 4.20: Porcentajes de crecimiento al 10º día

Matraz Porcentaje (%)1-2 1486,83-4 638,825-6 1063,4

El mayor crecimiento se registró, usando como soporte piedras blancas,

esto puede explicarse debido a que al ser de color blanco permiten un mayor

paso de la luz, además de brindar un soporte para desarrollarse. En los

matraces que contenían arena, podía apreciarse que las microalgas flotaban,

esto puede deberse a que la arena evitaría la llegada de oxigeno y nutrientes a

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ellas, además de impedir la llegada de luz. Por otro, lado el crecimiento con

agar – agar es bueno, pero no satisfactorio, como lo presenta el caso de

piedrecillas blancas.

Al hacer una comparación con el crecimiento sin soporte al cuarto día se

obtienen los siguientes datos:

Tabla 4.21: Comparación de porcentajes de crecimiento

Matraz Porcentaje (%)1-2 1486,83-4 638,825-6 1063,4

Sin soporte 458

Nuevamente el mayor porcentaje de crecimiento se presenta con el

medio de piedras blancas, al cuarto día de estudio.

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CAPÍTULO V:CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

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5.1 CONCLUSIONES

El uso de biocombustibles que proviene de microalgas, es hasta hoy

escaso. Sin embargo se están realizando un sin número de investigaciones,

para encontrar los parámetros óptimos de crecimiento en distintas microalgas, y

aumentar las cantidades de aceite requerido. Pero aun en Chile no existe

producción de biodiesel con este origen, en Europa, que es donde se produce

la mayor cantidad de biocombustibles, se están implementando grandes

piscinas y fotobioreactores, para la producción industrial, de este tipo de

combustible. Aun así la producción es todavía muy baja.

La zona en que se desarrollan las microalgas, es importante cuando se

desea estimar parámetros de crecimiento, lo que no significa que estas puedan

desarrollarse mejor a otras condiciones, ya que presentan la ventaja de

adaptarse a otras condiciones. En la Antártica las temperaturas a las que se

reproducen son alrededor de los 1.5º C, pero durante este estudio, se pudo

apreciar que poseen la capacidad de reproducirse a otras temperaturas, aun

que su crecimiento se vea inhibido o acelerado.

Los parámetros que favorecen el crecimiento de esta especie son 12º C

de temperatura, una intensidad de luz de 250 Lux y de manera ideal un soporte

que no impida la llegada de la luz, como por ejemplo piedras blancas, y que a la

vez entregue una estabilidad al esta especie. De esta forma se obtuvieron los

mayores porcentajes de crecimiento

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5.2 RECOMENDACIONES

Al momento de efectuar una prueba de temperaturas y luminosidad, lo

ideal es tener todos los materiales, para montar sistemas iguales, de modo que

no haya intervenciones de algún factor externo en el estudio.

Dentro de lo posible, cuando se prepare la solución salina, usada como

medio de cultivo, se recomienda hacer uso de los mismos reactivos indicados

en el punto 4.3.5 para que no exista posibilidad de formación de algún complejo

o reactivo, que pueda influir en el desarrollo de la experiencia.

Se recomienda, utilizar los equipos de medición, bien calibrados y al

momento de pesar por medio de una balanza analítica, cuidar que, el material

que será pesado, este a temperatura ambiente, de modo que la medición

tomada, sea lo más precisa posible.

Para la continuación de este estudio, el paso siguiente es la

determinación del tipo de aceite presente en estas microalgas, idealmente

encontrar las cantidades de lípidos y tipo de ácidos grasos presentes, en esta

especie Con estos datos llevar el aceite al proceso de obtención de biodiesel.

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73

BIBLIOGRAFÍA

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[4] Mario Alberto Siordia Grave (2005) Obtención de biodiesel a partir de aceites

vegetales; México

[5] Biocombustibles ¿una alternativa real?

http://www.bcn.cl/carpeta_temas/temas_portada.2007-01-26.2084740943

[6] Raúl O’ Ryan (2008) Diseño de un modelo de proyección de demanda

energética global, Chile.

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gicos/nota%20principal%20biodiesel%20espanol.htm

[8] Chile prepara ley de biocombustibles,

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and fatty acid profiles of six Antarctic microalgae, Australia.

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74

[11] Ley Chile,

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Renewable and Sustainable Energy Reviws, 87, 38- 46.

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Energy Reviws, 14, 557 - 577

[14] Mata, T. (2009) Microalgae for biodiesel production and other applications:

Renewable and Sustainable Energy Reviws, 14, 217 - 232.

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Williams Æ S. Nicol, (2008). Cumulative solar irradiance and potential large-

scale sea ice algae distribution off East Antarctica (30_E–150_E)

[16] Ana P. Carvalho & Cristina M. Monteiro & F. Xavier Malcata (2009)

Simultaneous effect of irradiance and temperature on biochemical composition

of the microalga Pavlova lutheri

[17] http://redescolar.ilce.edu.mx/redescolar/publicaciones/publi_rocas/arena.

htm

[18] http://agargel.com.br/agar-tec-es.html

[19] http://www.unavarra.es/genmic/micind-2-2.htm

[20] Aurelio Hernández Muñoz,( 1997.) "Microbiología", Editorial Paraninfo,

Madrid.

[21] Sami Solanki, director del Instituto Max Planck para la Investigación del

Sistema Solar, en Göttingen (Alemania)

[22] Causas del cambio climático;

http://agronomia.uchile.cl/webcursos/cmd/22005/cmunoz/vinculo2.htm

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ANEXO 1: PROPIEDADES DE SOPORTES ESTUDIADOS

PROPIEDADES DE LA ARENA

Tabla A: Propiedades de la arenaPROPIEDAD DESCRIPCION

Silicatos: El silicio y oxígeno, los dos elementos más abundantes en la cortezaterrestre, se combina con diversos elementos metálicos para producir silicatos; elgrupo mineral más extenso y mas variado. Por lo general, los silicatos son durostransparentes translúcidos y de densidad media. Se suelen agrupar por como sedisponen los átomos de silicios y oxigeno, cada uno de los primeros está rodeado

por cuatro de los segundos.Mica

FeldespatoMagnetita

CuarzoMica: 2,4

Feldespato: 6 y 6.5Magnetita:5.5 y 6.5

Cuarzo: 7

Grupo

Composición química

Dureza

Fuente:http://redescolar.ilce.edu.mx/redescolar/publicaciones/publi_rocas/arena

.htm

PROPIEDADES DE AGAR AGAR

Tabla B: Propiedades de agar - agarPROPIEDAD DESCRIPCION

Es un polisacárido encontrado en los espacios intracelulares yen las paredes celulares de las algas rojas, Agarophytas.el Agar contiene dos fracciones principales, un polímero

neutro, Agarosa, y un polísacárido sulfatado, AgaropectinaLa dureza, estara dada por la cantidad de agar agar agregado

en una solucion, esto dara la estabilidad a un sistema.

Composición química

Dureza

Fuente: http://agargel.com.br/agar-tec-es.html

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ANEXO 2: MEMORIA DE CÁLCULO

Tabla C: Correlaciones para distintos mediosMatraz Correlacion R^2

1 0,9926

2 0,9994

3 0,9984

4 0,9991

5 0,9957

6 0,9948

0391.00641.00049.00007.00004.0 234 xxxxy

0289.00232.00093.000006.000005.0 234 xxxxy

0521.00272.00099.0001.000005.0 234 xxxxy

0044.00043.00084.00012.000005.0 234 xxxxy

0633.01413.00035.000002.010*3 2347 xxxxy

0788.01654.00112.00014.000008.0 234 xxxxy

Calculo de máximos y mínimos

Criterio de la segunda derivada

Una vez encontrada la primera derivada Se calculan las raíces de las funciones.

Ejemplo

Correlación:

Primera derivada:

0641.00098.00021.00016.0 23 xxxy

Puntos críticosX = 10,87

Segunda derivada

0098.00042.00048.0 2 xxy

Al evaluar los puntos críticos en la segunda deriva se obtiene:

Y = -0,020861312

0391.00641.00049.00007.00004.0 234 xxxxy

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Según criterio de la segunda derivada, el valor -0,020861312 indica que existe

un máximo en el valor 0,41931192

Calculo de porcentaje de crecimiento:

Este se calcula a partir de la siguiente fórmula:

Crecimiento = (masa final – masa inicial)/masa inicial *100

Ejemplo:

Si la materia del primer día es 0.02825 y desea determinarse el porcentaje de

crecimiento al cuarto día, y la materia en este día es de 0.4389, se tiene:

Crecimiento = (0.4389/0.02825-1)*100 = 1453.6 %

Así el porcentaje de crecimiento al cuarto día es de 1453.6 %, para el matraz 1,

con piedrecillas blancas. Posteriormente se repitió el procedimiento para el

matraz 2, y con estos valores, se calculó un promedio de crecimiento.

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ANEXO 3: FOTOS GENERALES

Figura A: Microalgas encontradasen terreno

Figura C: Microalgas vista desdeun microscopio

Figura E: Baño termostático

Figura B: Microalgas congeladas

Figura D: Baño termostático

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Figura F: Tubos de ensayo conmuestra

Figura H: Tipo de Matraz utilizadopara estudio de soporte

Figura G: Tipo de ampolletautilizada

Figura I: Solución Salina

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1

ANEXO 4: LEGISLACIÓN CHILENA SOBRE BIOCOMBUSTIBLES

Fecha de publicación Descripción

19-MAY-2007 MINISTERIO DE HACIENDA; SERVICIO

DE IMPUESTOS INTERNOS; DIRECCION

NACIONAL

INSTRUYE SOBRE TRATAMIENTO

TRIBUTARIO DE LOS

BIOCOMBUSTIBLES DENOMINADOS

BIODIESEL Y BIOETANOL

02-FEB-2009 MINISTERIO DE ECONOMIA, FOMENTO

Y RECONSTRUCCION; SUBSECRETARIA

DE ECONOMIA, FOMENTO Y

ECONSTRUCCION; SUPERINTENDENCIA

DE ELECTRICIDAD Y COMBUSTIBLES

ESTABLECE PROCEDIMIENTOS PARA

LA INSCRIPCIÓN DE LAS PERSONAS

NATURALES Y JURÍDICAS QUE

REALICEN ACTIVIDADES DE

PRODUCCIÓN, IMPORTACIÓN,

TRANSPORTE, ALMACENAMIENTO,

DISTRIBUCIÓN, MEZCLA Y

COMERCIALIZACIÓN DE

BIOCOMBUSTIBLES Y SUS

INSTALACIONES

12-AGO-2008 MINISTERIO DE MINERIA

CREA COMISIÓN ASESORA

INTERMINISTERIAL EN MATERIA DE

BIOCOMBUSTIBLES EN CHILE

09-MAY-2008 MINISTERIO DE ECONOMIA, FOMENTO

Y RECONSTRUCCION; SUBSECRETARIA

DE ECONOMIA, FOMENTO Y

ECONSTRUCCION

APRUEBA DEFINICIONES Y

ESPECIFICACIONES DE CALIDAD PARA

LA PRODUCCIÓN, IMPORTACIÓN,

TRANSPORTE, ALMACENAMIENTO,

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2

DISTRIBUCIÓN Y COMERCIALIZACIÓN

DE BIOETANOL Y BIODIESEL

01-ABR-2008 MINISTERIO DE ECONOMIA; FOMENTO

Y RECONSTRUCCION; SUBSECRETARIA

DE ECONOMIA; FOMENTO Y

RECONSTRUCCION

INTRODUCE MODIFICACIONES A LA LEY

GENERAL DE SERVICIOS ELÉCTRICOS

RESPECTO DE LA GENERACIÓN DE

ENERGÍA ELÉCTRICA CON FUENTES DE

ENERGÍAS RENOVABLES NO

CONVENCIONALES