BACILOS GRAM POSITIVOSESPORULADOS:BacillusClostridium

NO ESPORULADOSListeriaErysipelothrix

CORINEFORMESCorynebacterium RhodococcusActynomicesNocardia

Bacilos Gram positivos formadores de esporasBacillus

Clostridium

Gnero BacillusBacilos Gram positivosAerobios, grandes agrupados en cadenas Presentan esporasMuy resistentes a condiciones adversasLa mayora son saprofitosSon productoras de antibiticos (polimixinas, bacitracina), vitaminas, alcoholes y enzimas

Especies Bacillus cereusBacillus anthracisBacillus subtilis

Bacillus anthracisInfeccin aguda en animales y seres humanos.Herbvoros: en contacto con tierra con esporas.Infecta al hombre en contacto con estos herbvoros infectados sus productos. Reservorio: el suelo. Persiste aos. Se necesita que las esporas estn en fase vegetativa para que infecten a los herbvoros.

Bacillus anthracisProduce carbunco:Cutneo (anthrax)RespiratorioGastrointestinalCaractersticas Bacilo grande recto 3 a 5um x 1 a 1,2 umGram +Formador de esporasExtremos rectangularesCatalasa +, inmvil.Cadenas largas en medios de cultivo.La espora es elipsoidal, centralNo deforma al soma bacteriano

Patogenia Bacillus anthracis

Patogenia Bacillus anthracis

Manifestaciones clnicas:95% son Cutneos. 5% Respiratorios.Carbnco cutneo:Rostro, cuello brazos, donde hubo abrasin menor de la piel con esporas del bacilo.Ppula que crece, se vesiculiza,con edema duro eritematoso sin godet. Fiebre. Se vuelve hemorrgica, luego necrtica y se cubre de escara negra Puede haber diseminacin sistmica.Indolora. Prurito. Cura en 2 semanas.El Tratamiento disminuye el edema y la bacteriemia.

Clnica:Carbunco respiratorio: Bifsico: malestar general, fiebre y opresin precordial leve.Roncus. 2-4 das, mejora.Luego distrs respiratorio brusco, hipoxia, disnea, fiebre hasta edema subcutneo de cuello y trax.Sepsis y meningitis.Mortalidad en esta fase: casi 100%.

ClnicaCarbunco gastrointestinal: Vmitos, anorexia, fiebre. Diarrea sanguinolenta, hematemesis,toxemia, shock, muerte. Evolucin:2-5 das.Diagnstico: Antecedente de fuente de exposicin al agente infeccioso.Toma de muestra: hisopado de lcera: directo y cultivo.Serologa: seroconversin.Tratamiento: penicilina G ev. Corticoides.NO SE TRANSMITE DE PERSONA A PERSONA

Determinantes de patogenicidadEspora, diseminacin del MOCpsula, Actividad antifagocitica y su produccin es regulada por un plsmidoExotoxina, depende de un plsmido, tipo A B.

Estructura Antignica

CARACTERSTICAS BIOQUMICASMovilidad - Catalasa +No hemoltico en Agar sangreAerobio estricto anaerobio facultativoCrecen con 5% de CO2 dando colonias mucosas, y en ausencia de ste dando colonias rugosasLos saprfitos son B hemolticosForma colonias grandes en forma de medusa o melena de lenEn caldo nutritivo forma copos blancos ( largas cadenas de bacilos)En medios con leche produce coagulacin por accin de una coagulasa

Diagnstico

Frotis teidos: de la lesin local o de la sangre de animales muertosMuestras: de pus y lquidos de la lesin localMuestra de alimentos contaminadosVmitos, heces, lavado gstricoCultivoEn placas de agar sangre: colonias grises no hemolticasMedio semislido, es inmvilTratamiento

En el hombre debe ser iniciado rpidamentePenicilinaTetraciclinasEritromicinaClindamicina

Epidemiologa y PrevencinCadveres de animales muertos (suelo)Hombre infecta por contactoMedidas sanitariasInmunizacin con vacunas del bacilo vivo atenuado.Uso de guantes y mascarillas

Diagnstico serolgicoPrueba de inmunofluorescencia directa: usando suero anticarbuncoso conjugado con la fluorescena.

Termoprecipitacin de Ascoli: Se utiliza particularmente para el reconocimiento de pieles sospechosas. Tcnica:1. macerado del material problema (Sol. Salina Fisiolgica 1:5)2. extraccin de antgeno mediante el calor (ebullicin 10)3. enfriar y filtrar4. depositar antgeno en tubo capilar y aadir suero anticarbuncoso5. Reaccin positiva: anillo opalescente blanco entre las dos fases (precipitinas especficas)

Bacillus cereusEnvenenamientoalimentarioEmticoIncubacin: 6 h DiarreicoIncubacin: 1 a 24 h EnterotoxinaIntoxicacin

Bacillus cereus

Bacilo G+ Formador de esporas termorresistentes responsable de intoxicaciones alimentarias hbitat natural el sueloContamina con frecuencia cereales, leche, budines, cremas pasteurizadas y especias, entre otros alimentos.

La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) estima que las enfermedadescausadas por alimentos contaminados constituyen uno de los problemassanitarios ms difundidos en la actualidad.

Los casos de intoxicaciones o enfermedades por alimentos mal preparados o contaminados por este microorganismo suelen ser frecuentes a pesar de que son perfectamente evitables; la primer descripcin de un brote de gastroenteritis data de principios de 1900 (2.)En nuestro pas casos de brotes de ETA denunciados y confirmados, poreste tipo de microorganismos han sido espordicos, 3 brotes en los ltimos 9 aos

B. cereus puede producir dos enterotoxinas:

Toxina diarreica Toxina emtica.

Los sntomas de la toxiinfeccin:

Diarrea, dolores abdominales y vmitos. Su perodo de incubacin vara de 4 a 16 horas luego de la ingesta del alimento contaminado

B. Cereus a la izquierda - Bacillus anthracis a la derecha en Agar sangre

LACTOBACILOS

Gnero ClostridiumEst formado por un grupo heterogneo de bacilos grampositivos, anaerobios, esporuladosEst ampliamente distribuido en el ambiente y en el tracto intestinal de muchas especies animales incluido el hombre, y puede causar infecciones de origen exgeno y de origen endgenoEspecies ms frecuentes: Clostridium botulinum, Clostridium difficile, Clostridium perfringens, Clostridium tetani.Algunos tienen capacidad de producir potentes exotoxinas que son las responsables de ocasionar graves cuadros txicos

Caractersticas microbiolgicas de los ClostridiumC. TetaniC. botulinumC. perfringesC. difficile

Tabla 2. Caractersticas morfolgicas de algunas especies del gnero Clostridiuma.

Tincin de GrambColonia

Clostridium baratiiBacilo grande. Esporas (ST), RV. No mvilNo hemolticaC. bifermentansBacilo grande. Esporas ovales (ST) a veces en cadenas. MvilGris, borde irregulares, hemlisis pequea. Lecitina (+)C. botulinumBacilo grande. Esporas (ST). MvilC. butyricumExtremos redondeados.Grandes esporas ovales (ST). MvilC. cadaverisEsporas ovales (T)C. clostridioformeGramnegativo. Alargado con extremos en forma de huso y apariencia de barril. Esporas RVPequeas, convexas, translcidas con la superficie moteada o de mosaicoC. difficileBacilo relativamente largo, delgado. Esporas ovales (T). MvilColonias translcidas ligeramente elevadas y con moteado cristalino. Olor a establo o estircol. En medio CCFA amarillentas. Fluorescencia anaranjada bajo luz ultravioleta.C. histolyticumPleomrfico. Esporas ovales (ST). MvilLisas y rugosas. AerotoleranteC. inocuumPequeo. Esporas (ST). No mvilBlanca, brillante. Fluorescencia anaranjada.C. novyiMediano. Esporas ovales (ST). MvilGris, translcida. Puede dar velo. Doble halo de hemlisis.C. perfringensAncho y corto. Apariencia de ladrillo. Esporas RV. No mvil Grande, opaca, tiende a extenderse, sin velo. Doble halo de hemlisis.C. ramosumFrecuentemente gramnegativo. Delgado y pleomrfico, en cadenas. Esporas redondas u ovales (T) y RV. No mvilFluorescencia rojaC. septicumLargos y delgados, pleomrfico y filamentoso. Puede formar cadenas. Esporas ovales (ST). MvilCabeza de medusa con bordes irregulares y rizoides. Produce velo que llega a cubrir la placaC. sporogenesFilamentoso en cultivos viejos. Esporas ovales (ST). MvilBorde rizoide. Adherencia firme al agar. Produce veloC. sordelliRectos. Esporas centrales o (ST) causan ligera hinchazn de los bacilos y frecuentemente libres. MvilVelo o extensinC. tertiumEsporas grandes ovales (T). MvilPequea, brillante. AerotoleranteC. tetaniDelgado. Esporas redondas (T). Apariencia de palillo de tambor. MvilGris, translcida. Borde irregular. Pequeo halo de hemlisis.

Clostridium tetaniProduce TtanosAparicin de contracturas muscularesCaractersticas

Bacilos fino grampositivo, esporulado, mvil, acapsulado y anaerobio estricto.Presentan flagelos peritricosEscasa actividad metablica (no son sacarolticos, ni proteolticos).No Invasiva.Sintetiza las toxinas: Tetanospasmina y Tetanolisina (hemolisina oxigeno lbil)Se encuentra en el ambiente.Las esporas son esfricas, terminales y deforman a soma bacteriano

EpidemiologaFuente de infeccin : Medio ambienteTrasmisin: Contaminacin de heridas por las esporasPoblacin de riesgo: No vacunada o vacunada incorrectamente.

Componentes Inmungenos

Componente AntignicoCaractersticasAntgeno somtico (0) nico. Se usa como diagnstico (inmunofluorescencia directa) Antgeno flagelar (H) Proteico y termolbil. Permite clasificar al microorganismo en 10 serotipos Antgeno esporalnico y termolbilNeurotoxinaIdntica para todas las cepas del germen. Responsable del cuadro clnicoHemolisinaOxigeno-lbil

Determinantes de patogenicidad

Proceso de liberacin de los neurotransmisores

Transporte de la Neurotoxina Tetnica hasta su sitio de accin en el Sistema Nervioso. La toxina tetnica se transporta a travs de los axones motores dentro de vesculas, e ingresa al sistema nervioso central por las races anteriores hasta alcanzar lasastas anteriores de la mdula espinal donde se acumula en los somas de las neuronas motoras. De all, se libera retrgradamente para actuar sobre lasinterneuronas inhibitorias espinales

Despus de liberada por la bacteria, la toxina viaja por va linftica o circulatoria hasta llegar a la unin neuromuscular

PatogeniadelTtanos

Manifestaciones clnicasPeriodo de Incubacin: 4 das varias semanasFormas Clnicas: Ttanos generalizadoTtanos localizadoTtanos Neonatal

Ttano GeneralizadoSntoma Inicial: contractura o espasmode los msculos que rodean la puertade entrada y trismus.Ttano LocalLa afectacin se limita a los msculosprximos a la puerta de entrada, por quela toxina se fija a las zonas medularesde los nervios que lo inervan.Puede evolucionara un ttano generalizado.Ttano NeonatalTras un periodo de 7 das aparece dificultado incapacidad de succin.Espasmos musculares, trismus e irritabilidady rechazo a la limentacin.

En pases subdesarrollados con poco acceso a la vacuna. De presentacin espordica. Va axonal mdula bloquea las neuronas inhibitorias (GABA) hiperactividad de las motoneuronas.

Ttanos generalizado: (el ms frecuente)1: Trismo (risa sardnica) 2: espasmos generalizadosEn casos graves: afectacin ventilattoria y disfuncin autnomaTtanos local y ceflicoTtanos neonatal:Cura asptica del cordn umbilicalEs generalizado y muy graveLa forma ms frecuente de presentacin mundial

Clostridium tetani

DiagnsticoDirecto de muestras: Material de zonas profundas de heridas, extrado con jeringa o hisopo y LCR:Bacilos finos gram + con una espora esfrica deformante terminalCultivo e identificacin: Slo 1/3 de cultivos +Siembra en agar sangre anaerobiosisMuestra se somete a un calentamiento a 80C (10 min), para eliminar flora acompaante, se siembra e incuba.Alfa hemlisis en agar sangreNo coagula leche tornasoladaMovilidad +Produce swarming en Agar sangre, se puede usar agar al 4% para aislar colonias

IdentificacinCrecimiento de colonias en velo e inhibicin por la adicin de suero equino antitetnico a la mitad de la placa de cultivo.Presencia de formas muy finas en cultivos jvenes y en palillo de tambor en las viejas.Ausencia de actividad proteoltica y sacarolticaNo fermenta azcaresProduccin de Indol en la mayora de cepas.Comprobacin de la produccin de toxina en prueba de proteccin en inoculacin animal

Clostridiumspp.: cultivo en Agar sangre en anaerobiosis. Se observan grandes colonias en expansin el primer da de cultivo. Las colonias pueden presentar un aspecto pleomrfico dando la impresin de un cultivo mixto. Debe hacerse un subcultivo de una simple colonia para comprobar el mismo pleomorfismo.

TratamientoMedidas de sostnMantener funciones vitales y mitigar los sntomas clnicos hasta la eliminacin de la toxina del sistema nerviosoNeutralizacin de la toxinaSe administra Ig especfica o suero equino antitetnico.Eliminacin de la fuente de produccin de la toxina.Desbridizacin y drenaje.Trat. Antibitico con penicilina G, tetraciclinas o macrlidos.

Clostridium botulinumProducen botulismoDebilidad muscular o parlisis flcida descendente y simtrica (por ingestin de alimentos con toxinas preformadas).CaractersticasBacilos gram +, esporulados, mviles, acapsulados, anaerobios estrictos y producen toxinasPueden ser proteolticas o no.Toxinas tienen 8 tipos inmunognicos (A H) Las esporas son ovales, subterminalesy distienden el soma bacteriano,con flagelos peritricos

EpidemiologaReservorio : Medio ambiente (telrico)Trasmisin: Ingestin y contaminacin de heridas por las esporasINTOXICACIONALIMENTARIABOTULISMO DE HERIDASBOTULISMO DEL LACTANTE

CLOSTRIDIUMCLOSTRIDUM BOTULINUMProduce neurotoxina inhibe la liberacin de acetil colina en placa motora y ganglios. No afecta SNC.

CLNICA:BOTULISMO ALIMENTARIO (toxina preformada):El ms frecuente. PI: 18-36h.Conservas caseras en mal estadoNuseas, vmitos Parlisis de pares craneales parlisis flccida descendenteSntomas anticolinrgicos: pupilas dilatadas, sequedad. leo paraltico.

Determinantes de patogenicidad

PATOGENIA DEL BOTULISMO

Accin patgenaIntoxicacin alimentariaIncubacin: 8 10 dProduce manifestacionesneurolgicas y de disfuncin autnomaBotulismo de heridasIncubacin: 4 14 dProduce manifestacionesneurolgicas y de disfuncin autnoma, sin sntomas gastrointestinales.Botulismo del lactanteIncubacin: 8 10 dProduce estreimientoy manifestacionesneurolgicas (dificultad en la alimentacin: succin, deglucin).Debilidad muscular e hipotona

DiagnsticoMuestras: alimento sospechoso, sangre, heces, material de origen digestivo, exudados de heridas y tejidos

Presencia de la Toxina:En sangre y hecesPrueba de neutralizacin en el ratn.PCRTcnica inmunoenzimaticaDemostracin de bacterias en heces, vmitos, exudados, sangreCultivoTratamiento trmico o con alcohol para enriquecer la muestraMedio no selectivo agar yema de huevo colonias nacaradas por accin de lipasas. En agar sangre produce B hemlisisTratamientoNeutralizar o eliminar la toxinaInduccin del vmito o lavado gstricoAntitoxina Trivalente (A, B, E)

Mantener las funciones del huspedFuncin respiratoriaDesbridacin y drenaje de la herida

Administracin de AntimicrobianosNo debe administrarse en casos de formas vegetativas en el intestino

Produce la gangrena gaseosa, celulitis, Tosxiinfecciones alimentarias, enteritis necrosante, diarreas enterotoxicasno relacionada con alimentos e infecciones inespecficas.Bacilo Gram+, capsulado, esporulado, inmbil y anaerobio poco estricto.Metablicamente activo: es sacaroltico y produce gas (H2 y CO2)Se divide en 5 tipos: A, B, C, D, E. (toxinas: alfa, beta, psilon, iota)En el hombre se da el tipo A (parte de la flora normal del suelo y del intestino de animales).Clostridium perfringesBacilo corto y ancho, no sueleaparecer esporulado

EpidemiologaLos pacientes con enfermedades vasculares subyacentes son ms propensosa manifestar gangrena gaseosa espontneamente, la cual es de progresinrpida y con frecuencia mortal.

Determinantes de patogenicidad12Toxinas HistotoxicasEnterotoxinaEnzimasSon exotoxinas proteicas,antignicas y solublesInfecciones humanas(tipo A, alfa es letaldermonecrticay hemoltica)Acta:

Fosfolipasa CyEsfingomielasaNeuraminidasaColagenasaHialuronidasaDesoxirribonucleasa

Tiene accin en el leon.Estimula la secrecin deagua y electrolitos.

Accin PatgenaGangrena gaseosaDestruccin muscularprogresiva y toxemiaIncubacin 1-4 dCelulitis necrotizantey fascitis difusasSe produce en tejidos blandosIntoxicacin alimentariaIncubacin 8 24 hDolor abdominal y diarrea acuosasin sangre o mocoSe mantiene 12 18 horasDesaparece espontneamente

DiagnsticoTincin GramHay ausencia de PMN (destruidos por la toxina alfa)Cultivo en agar sangre y agar yema de huevo en anaerobiosisActividad lecitinsica se inhibe aadiendo antisuero a la mitad de la placa (prueba Nagler)Tecnicas serolgicas para presencia de toxina en hecesProduce una doble hemlisis(una interna mas intensa tox. beta yuna externa menos intensa tox. alfa

TratamientoMedidas quirrgicasPractica de fasciotomias favorece la irrigacin muscularTratamiento antibiotico con Penicilina G, clindamicina o metronidazol, imipenem, meropenemOxigeno Hiperbrico (puro a 3 atm)

Clostridium difficileProduce Entercolitis seudomembranosaBacilo Gram+, esporulado, mvil, capsulado y anaerobioSintetiza dos toxinas: A (enterotoxina) y B( citotoxina)Se encuentra en heces de neonatos y lactantes (70%)Son susceptibles a la infeccin los ancianos y pacientes con administracin de antimicrobianos.Espora oval y subterminal

Accin patgenaProduce diarreas asociadaa antimicrobianosPor su espora produceuna colonizacin persistenteHay diarrea sanguinolentaretortijones, leucocitosis y fiebre

Rectosigmoidoscopia

Accin de la Toxina A en C. difficile

CorynebacteriumPropionibacteriumListeriaBacilos Gram positivos no formadores de esporas

Corynebacterium diphteriaeProduce la DifteriaCaractersticasBacilos Gram positivos, 05 1 um dimetro (pleomrficos)Son aerobiosCatalasa positivosTienen los biotipos: Gravis, Intermedius, MitisReservorio: hombre portador u enfermoPuede resistir la desecacin y la luz por 3 mesesSensibles al calor y desinfectantes habitualesPresentan dilataciones irregulares caractersticas e uno de sus polos

Patogenia de C. diphtheriaeDifteria respiratoriaLa puerta de entrada puede ser va mucosas (nasal, palatina, amigdalar o faringea)Tipos:FaringoamigdalarNasalLaringea y traqueobronquialConjuntival, vaginal y oido (excepcional)Secretanla toxina

Patogenia de C. diphtheriaeDifteria cutneaEn rea tropicalesA veces puede ser transmitido por picadura de algn insecto

Secretanla toxinaseudomembrana

Fragmento AFragmento BToxina DiftricaCarece de actividad independienteInhibe la elongacinde la cadenapolipeptidicaNADInactivaEF-2

Factores de virulenciaExotoxina (inhibe la sntesis proteica y ocasiona destruccin de clulas del husped)Se forma por la presencia de un bacteriofago lisognico tipo beta (tox+)Produce en la zona inflamada una pseudomembranaAntgeno OAntgeno K (antifagocitico)Corynebacterium diphteriae

Corynebacterium diphteriaeDiagnstico: Muestra de la zona inflamada hisopo o raspado

Medios de cultivoSuero coagulado (Loeffler), colonias pequeas granulares y grisceas.Placa Gelosa sangre + telurito, colonias son grises a negras.Pruebas de virulenciaDeteccin de la toxina por inmunodifusin (Placas de agar Test Elek)

Pruebas de virulencia(toxigenicidad)Prueba in vivo

Prueba in vitro

Prueba de cultivo de tejidos

TratamientoRpida supresin de bacterias productoras de toxinas por frmacosPenicilinaEritromicinaAdministracin temprana de la antitoxina diftrica (toxoide) o antisuero Prevencin: inmunizacin activa (toxoides lquido, toxoide para absorcin retardada)

PropioniobacteriumEs parte de la flora normal cutnea y conjuntivaSon bacilos Gram +, no esporuladosSon anaerobios

Acn vulgarisParticipan en la patogenia del acn (P. acnes) al producir lipasas, liberando ac. grasos de los lpidos cutneos.Los ac. Grasos pueden causar inflamacin tisular y contribuir al acn.Puede producir infeccin en vvulas cardiacas y de derivaciones artificiales de LCR.

Listeria monocytogenesProduce Listeriosis en humanosCocobacilos Gram positivosAnaerobio facultativoCatalasa positivoPresenta antgeno O y antgeno H (16 serovariedades)Es mvil, (flagelos peritricos)Se transmite con los alimentos

Ciclo de la Listeria monocytogenesEs un patgeno intracelularFactores de virulencia: presenta factores antifagocticos de superficie, adhesinas, hemolisina (toxina citoltica, catalasa y superoxido dismutasa, filamentos de actina y siderforo).

a) Penetrab) sobrevivec) Se multiplica

Listeria monocytogenesEs de alto riesgo en inmunodeprimidos (neonatos, ancianos, transplantados, diabticos), enfermos de SIDA.Viven en el suelo, agua, plantas, heces de animales y el hombre.Se trasmiten por contacto directo (piel conjuntiva ocular) con animales o materiales infectados: va placentaria y por el canal del parto, va digestiva con alimentos contaminados.Tratamiento: Ampicilina (penicilina + aminoglucsido), gentamicina (granulomatosis infantil sptica), cotrimoxasol (en alergicos)

Diagnstico:Listeria monocytogenesDiagnstico directo: Tincin GramDiagnstico indirecto:Muestras: sangre, lquido amnitico, secreciones de tracto genital, LCR, hecesMedio Selectivo: Agar Triptosa (colonia verde azul) o Agar sangre de carnero. (crece entre 0 -50 C, normal 30 37 C)Prueba bioqumica: es oxidasa negativa y catalasa positiva

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