PRACTICACONTROL DE CALIDAD EN SUEROS HEMOCLASIFICADORESOBJETIVO

El alumno identificar cual es el propsito de realizar a cabo un buen control de calidad de los reactivos antisueros hemoclasificadores en el banco de sangre.

Fundamento: Avidez Es la intensidad global de la interaccin entre 2 molculas, como el antgeno anticuerpo, la avidez depende de la afinidad y la valencia de las interacciones, porconsiguiente la avidez de la IgM por un antgeno multivalente puede ser muy superior a la avidez de una molcula de IgG dimrica por ese mismo antgeno.La especifidad se atribuye a los receptores para el antgeno de los linfocitos, que pueden unirse a una molcula, pero no a otra que presente tan slo mnimas diferencias estructurales respecto a la primera.( 1)GENERALIDADES:La calidad puede definirse como trmino subjetivo que se utiliza para sealar si unapersona, objeto o servicio es bueno o malo, el trmino calidad se hace objetivo, si se fijan las especificaciones que deben llevar un producto o servicio, para decir si tiene calidad. A su vez el control de calidad se divide en:1. Control de calidad interno:Procedimiento que utiliza los resultados de un solo laboratorio con el propsito de controlar la calidad.2. Control de calidad externo:Procedimiento que utiliza los resultados de varios laboratorios que analizan la misma muestra, con el propsito de controlar la calidad.( 2 )

CONTROL DE CALIDAD DE ANTISUEROS Y CLULAS DE FENOTIPO CONOCIDO:Dependiendo de la complejidad de las actividades que se realicen en los laboratorios dcada banco de sangre, as sern los antisueros y clulas de fenotipo conocido que se emplearn en cada jornada de trabajo, siendo las bsicas: los antisueros y clulas de fenotipo conocido Los reactivos son los elementos ms importantes para llevar a cabo las pruebas que se realizan en inmuno hematologia y stas sern tan exactas como lo sean los reactivos. Elcontrol de calidad para los sistemas ABO, Rho/Hr y para suero de coombs deben realizarse todos los das en cada jornada. Para estudios que no se realicen diariamente, se debe realizar los controles cada vez que esa prueba se lleve a cabo. As mismo los medios de reaccin en donde se empleen estos materiales, deben servigilados continuamente para asegurar la consistencia, sensibilidad y exactitud, lo que se logra con una vigilancia en control de calidad de los reactivos.NORMAS GENERALES:1. Recepcin de reactivos:2. Verificar la apariencia fsica del empaque, en el sello de garanta y la caducidad: presenta alteraciones durante el traslado y/o almacenamiento?3. Verificar caractersticas fsicas del reactivo: color, transparencia, presencia de hemlisis y volumen.4. El almacenamiento debe ser de acorde con las indicaciones del productor.5. Leer y almacenar los instructivos hasta terminar el lote.6.Control de calidad de los diferentes sueros y clulas reactivoAVIDEZ:Es una medida de la capacidad de unin y la velocidad con el cual el anticuerpose combina con su correspondiente antgeno.

Las pruebas de avidez se realizarn de rutina a los antisueros en uso diariamente antes de trabajar y a una muestra de antisuero de cada nuevo lote.

TIEMPO PROMEDIO DE AVIDEZ PARA LOS DIFERENTES SUEROS Y CLULAS REACTIVO

ESPECIFICIDAD:Es la reactividad selectiva de un anticuerpo con su correspondiente antgeno, evitando el que llegara a reaccionar con otras, por lo que cada antisuero se hace reaccionar con las diferentes clulas y se observara si hubo aglutinacin inespecfica. El grado de reaccin se califica como fuerte, dbil o negativo. Esta tcnica puede realizarse en placa o tubo empleando eritrocitos al 2-5% para determinar la especificidad del sistema ABO y Rho. Esta prueba se realizar diariamente a los antisueros de rutinas, antes de empezar atrabajar y a una muestra de cada nuevo lote que llegue.

ESPECIFICIDAD PARA LOS DIFERENTES SUEROS Y CLULAS REACTIVOTITULACION:Esta prueba mide la mxima dilucin del antisuero a la cual es capaz de reaccionar con sus respectivas clulas. El resultado se expresa como el recproco de la mxima dilucin que de una aglutinacin de 1+ ante un volumen constante de eritrocitos al 2% de clulas. A1, A2, B , R1r clulas sensibilizadas y no sensibilizadas Se recomienda correr la prueba conjuntamente con antisueros de referencia. Se anota la lectura por grado de aglutinacin de 1+ a 4+( 2)

VALORES REFERENCIA DE TITULACIN:

Material:10 tubos de ensaye de 13x 10030 tubos de ensaye 12 x 755 Pipetas pasteurAntisueros anti A, Anti-B, Anti-Rh Muestra biolgico: Eritrocitos A y B.Tcnica AVIDEZ1. Marcar una placa de vidrio con la letra A, B, AB, Rh2. Colocar una gota de eritrocitos al 10% en solucin salina isotnica del grupo A, B, AB que le corresponde y una gota de eritrocitos al 40% en albmina bovina al 22%para Rh.3. Colocar una gota de antisuero con los eritrocitos con un aplicador de madera, al mismo tiempo accionar el cronometro.4. Enseguida, dar una placa un movimiento rotatorio con las manos y estar atento en que aparece la aglutinacin, en ese momento detener el cronometro.5. Anotar el tiempo de avidez de cada antisuero visualizando los inicios de aglutinacin.TITULOAnti sueros ABO1. hacer una suspensin al 2% en solucin salina isotnica de clulas A, B, AB.2. Colocar en una gradilla una serie de 11 tubos de ensaye por cada reactivo a probar3. marcar los tubos como p, 2, 4, 8, 16, 32, 64, 128, 256, 512, 10244. agregar a cada uno de ellos, excepto el primero, 0.1 ml de diluyente de suero5.agregar 0.1 ml del antisuero a probar al tubo y al P unicamente.6.mezclar perfectamente el contenido del tubo 2 y transferir 0.1 ml de esa solucin al tubo siguiente, repetir este procedimiento hasta el ltimo tubo.7.desechar 0.1 ml del ltimo tubo8.agregar 0.1 ml de clulas conocidas a todos los tubos9.mezclar y centrifugar 25 segundos a 3500 rpm10.leer y anotar los resultadosAntisuero D1. Preparar una suspensin de eritrocitos Rh + al 2% con albmina bovina2. Preparar una serie de 8 tubos de 12x75 marcados como p, 2, 4, 8, 16, 32, 64 y 128respectivamente3. Agregar a cada uno de ellos, excepto al tubo p, 0.1 ml de albumina bovina4. Proceder como se indica desde el paso 5 de la tcnica para ABO5. Centrifugar 60 segundos a 3500 rpm6.Leer y anotar resultados. OBSERVACIONES Y RESULTADOS AVIDEZ

TITULOAntisueros ABOCaractersticas del reactivo ANombre de la casa comercial: bio-rad Fecha de caducidad. 28-febrero-2002LoteA

Caractersticas del reactivo B

Nombre de la casa comercial: biorad Lote: Fecha de caducidad: 28-febrero-2003

Antisuero D Rh

LoteNombre de la casa comercial: fecha de caducidad: 30-julio-2002

CONCLUSIONES:

En esta prctica verificamos el control de los sueros hemoclasisficadores como nos dimos cuenta algunos de los reactivos cuentan con un buen tipo de avidez y titulacin excepto el que presenta una fecha de caducidad muy diferente al del antisuero anti- rh que conto comn tipo de titulacin hasta, 1024 , tomando en cuenta que su titulo mnimo es 1: 64. El reactivo de suero anti- A presento un titulo hasta 1024, tomando en cuenta que su titulo mnimo es hasta 1: 256 . El caso de estos antisueros que pasan sus ttulos mnimos, nos podran causar falsos + en algn caso de urgencia a la hora de realizar un grupo sanguneo, por eso es importante revisar el etiquetado del reactivo , observando si no presente alguna alteracin, mantiene su estado de almacenamiento y conservacin recomendado.REFERENCIAS:1.Abbbas,, K. A, Inmunologa celular y molecular, cuarta edicin, 2002, Editorial Mc Graw Hill,paginas: 490,497.2.Castaeda , L , La calidad la hacemos todos, quinta reimpresin , 1978, ediciones poder,paginas: 83.Radillo, G.A, Medicina Transfusional, Editorial prado,1999, Mxico, pagina