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DETECCIÓN DE PORTADORES NASALES DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS RESISTENTE A METICILINA EN EL PERSONAL DEL LABORATORIO ABBA CLÍNICO MICROBIOLÓGICO E I NDUSTRIAL LTDA. - BARRANQUILLA 2013 Tatiana Cecilia Ayala Fernández Nadia Carolina Córdoba Mieles Resumen Staphylococcus aureus es un componente de la microbiota humana, colonizando en situaciones normales piel y mucosas, especialmente, fosas nasales, hábitat epidemiológicamente importante ya que desde allí puede diseminarse, provocando infecciones cutáneas leves hasta infecciones potencialmente mortales. De allí que sea la principal especie patógena de su género, causa común de infecciones diversas, tanto de origen comunitario como hospitalario. La resistencia microbiana del S.aureus a los antibióticos constituye hoy un problema de salud pública de alcance mundial que se ha vuelto resistente por el uso indebido de los antibióticos. El objetivo de este estudio fue detectar portadores nasales de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en el personal del Laboratorio ABBA Clínico Microbiológico e Industrial Ltda., en la ciudad de Barranquilla. Para ello se realizó un estudio de tipo descriptivo, prospectivo, con en una muestra de 50 personas, mediante la recolección de muestras de la mucosa nasal en el mes de junio de 2013. Para determinar la presencia de Staphylococcus aureus se utilizaron las pruebas microbiológicas tradicionales y para establecer el patrón de resistencia y sensibilidad a la meticilina se utilizó el método Kirby-Baüer en medio Müller-Hinton. Los resultados arrojaron que hubo presencia de S.aureus el 60% de los trabajadores, predominando en todos los profesionales de la bacteriología y en casi la totalidad de auxiliares de laboratorios. De los casos positivos, el 56.67% fueron resistentes (SAMR) y el 43.33% sensibles (SAMS). El factor de mayor significación para la resistencia a la meticilina fue la vulnerabilidad por la exposición simultánea del trabajador en dos ambientes de riesgo (t=0.868). Se concluyó que la frecuencia de colonización nasal por Staphylococcus aureus resistente a meticilina fue similar a otros estudios realizados a nivel mundial, nacional y local. Palabras claves: Staphylococcus aureus, resistencia a la meticilina; SAMR (fuente: DeCS) Abstract Staphylococcus aureus is a component of the microbiota human, colonizing in normal skin and mucous membranes, especially, nostrils, epidemiologically important habitat and from there can spread, causing minor skin infections to life- threatening infections. Hence, it is the main pathogenic species of its genus, common cause various infections, both community and hospital origin. Antimicrobial resistance of S. aureus to antibiotics is now a public health problem worldwide that has become resistant by the misuse of antibiotics. It was originally discovered in the UK in 1961 and is currently very widespread. The aim of this study was to detect nasal carriers of Staphylococcus aureus resistant to methicillin ABBA staff Clinical Microbiology Laboratory and Industrial Limited, in the city of Barranquilla. For this we conducted a descriptive study, prospective, in a sample of 50 peoples, by collecting samples of the nasal mucosa in the month of June 2013. To determine the presence of Staphylococcus aureus were used traditional microbiological tests to establish the pattern of resistance and susceptibility to methicillin was used Kirby -Bauer method in Mueller -Hinton medium. The results showed that the presence of S. aureus was 60% of workers, professionals dominate all of bacteriology and in almost all laboratory assistants. Of the positive cases, 56.67% were resistant (SAMR) and 43.33 % sensitive (SAMS). The most significant factor for methicillin resistance was the vulnerability by simultaneous exposure of workers in two areas of risk (t=0.868). It was concluded that the frequency of nasal colonization by Staphylococcus aureus resistant to methicillin was similar to other studies conducted worldwide, national and local Keywords: abandonment, breastfeeding, nursing students

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DETECCIÓN DE PORTADORES NASALES DE

STAPHYLOCOCCUS AUREUS RESISTENTE A METICILINA EN

EL PERSONAL DEL LABORATORIO ABBA CLÍNICO

MICROBIOLÓGICO E I NDUSTRIAL LTDA. - BARRANQUILLA

2013

Tatiana Cecilia Ayala Fernández

Nadia Carolina Córdoba Mieles

Resumen

Staphylococcus aureus es un componente de la

microbiota humana, colonizando en situaciones normales

piel y mucosas, especialmente, fosas nasales, hábitat

epidemiológicamente importante ya que desde allí puede

diseminarse, provocando infecciones cutáneas leves

hasta infecciones potencialmente mortales. De allí que

sea la principal especie patógena de su género, causa

común de infecciones diversas, tanto de origen

comunitario como hospitalario. La resistencia

microbiana del S.aureus a los antibióticos constituye hoy

un problema de salud pública de alcance mundial que se

ha vuelto resistente por el uso indebido de los

antibióticos. El objetivo de este estudio fue detectar

portadores nasales de Staphylococcus aureus resistente a

meticilina en el personal del Laboratorio ABBA Clínico

Microbiológico e Industrial Ltda., en la ciudad de

Barranquilla. Para ello se realizó un estudio de tipo

descriptivo, prospectivo, con en una muestra de 50

personas, mediante la recolección de muestras de la

mucosa nasal en el mes de junio de 2013. Para

determinar la presencia de Staphylococcus aureus se

utilizaron las pruebas microbiológicas tradicionales y

para establecer el patrón de resistencia y sensibilidad a

la meticilina se utilizó el método Kirby-Baüer en medio

Müller-Hinton. Los resultados arrojaron que hubo

presencia de S.aureus el 60% de los trabajadores,

predominando en todos los profesionales de la

bacteriología y en casi la totalidad de auxiliares de

laboratorios. De los casos positivos, el 56.67% fueron

resistentes (SAMR) y el 43.33% sensibles (SAMS). El

factor de mayor significación para la resistencia a la

meticilina fue la vulnerabilidad por la exposición

simultánea del trabajador en dos ambientes de riesgo

(t=0.868). Se concluyó que la frecuencia de

colonización nasal por Staphylococcus aureus resistente

a meticilina fue similar a otros estudios realizados a

nivel mundial, nacional y local.

Palabras claves: Staphylococcus aureus, resistencia a

la meticilina; SAMR (fuente: DeCS)

Abstract

Staphylococcus aureus is a component of the

microbiota human, colonizing in normal skin and

mucous membranes, especially, nostrils,

epidemiologically important habitat and from there

can spread, causing minor skin infections to life-

threatening infections. Hence, it is the main

pathogenic species of its genus, common cause

various infections, both community and hospital

origin. Antimicrobial resistance of S. aureus to

antibiotics is now a public health problem worldwide

that has become resistant by the misuse of antibiotics.

It was originally discovered in the UK in 1961 and is

currently very widespread. The aim of this study was

to detect nasal carriers of Staphylococcus aureus

resistant to methicillin ABBA staff Clinical

Microbiology Laboratory and Industrial Limited, in

the city of Barranquilla. For this we conducted a

descriptive study, prospective, in a sample of 50

peoples, by collecting samples of the nasal mucosa in

the month of June 2013. To determine the presence of

Staphylococcus aureus were used traditional

microbiological tests to establish the pattern of

resistance and susceptibility to methicillin was used

Kirby -Bauer method in Mueller -Hinton medium.

The results showed that the presence of S. aureus was

60% of workers, professionals dominate all of

bacteriology and in almost all laboratory assistants. Of

the positive cases, 56.67% were resistant (SAMR) and

43.33 % sensitive (SAMS). The most significant

factor for methicillin resistance was the vulnerability

by simultaneous exposure of workers in two areas of

risk (t=0.868). It was concluded that the frequency of

nasal colonization by Staphylococcus aureus resistant

to methicillin was similar to other studies conducted

worldwide, national and local

Keywords: abandonment, breastfeeding, nursing

students

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INTRODUCCIÓN

La resistencia microbiana del Staphylococcus

aureus a los antibióticos constituye hoy un

problema de salud pública de alcance

mundial. La resistencia a los antimicrobianos

es un fenómeno biológico exacerbado por el

uso indebido de los fármacos. El uso de un

medicamento antimicrobiano contra

determinada infección, sin importar la dosis,

por un período de tiempo, obliga a los

microorganismos a adaptarse o morir; los que

se pueden adaptar transmiten los genes de

resistencia contra los fármacos a

generaciones futuras de microorganismos.

Pero cuando los agentes antimicrobianos se

utilizan de forma indebida, ya sea por

períodos de tiempo demasiado breves, a una

dosis muy baja o sin la potencia adecuada, o

para la enfermedad que no corresponde, se

elevan las probabilidades de que los

microorganismos generen resistencia a los

mismos.

El Staphylococcus aureus resistente a

meticilina o SAMR es una cepa de la

bacteria Staphylococcus que se ha vuelto

resistente a varios antibióticos; primero a

la penicilina y luego a la meticilina. Fue

descubierto originalmente en el Reino

Unido en 1961 y actualmente está muy

propagado.

Un individuo que entra en contacto con una

cepa de SAMR puede resultar colonizado,

desarrollar una infección y/o convertirse en

portador. Se sugieren como factores de

riesgo que seleccionan y condicionan la

colonización por este tipo de cepas: las

hospitalizaciones prolongadas, las

intervenciones quirúrgicas, la permanencia en

unidades de cuidados intensivos, el uso

irracional de antibióticos y la proximidad

individuos colonizados o infectados por

SAMR. Esta bacteria está emergiendo en la

población general, -comunidad- en quienes

no tienen factores de riesgo establecido,

siendo los portadores nasales de este tipo de

cepas la fuente fundamental para su

dispersión ambiental.

Debido a que las vías más comunes para la

adquisición de infecciones por

Staphylococcus aureus resistente a

meticilina (SAMR) son la autoinfección de

portadores nasales y la transmisión a través

de las manos, luego de ser colonizadas

transitoriamente con Staphylococcus aureus

de su propio reservorio, el objetivo de esta

investigación fue detectar portadores nasales

de Staphylococcus aureus resistente a

meticilina en el personal del Laboratorio

ABBA Clínico Microbiológico e Industrial

Ltda., en la ciudad de Barranquilla, con el

propósito de seguir estrategias que eviten su

diseminación.

Para ello se realizó un estudio de tipo

descriptivo, prospectivo, en una población de

50 empleados que se encontraban trabajando

en dicho Laboratorio durante el mes de junio

de 2013.La línea de investigación que acogió

la presente investigación, es la propuesta por

el Programa de Microbiología de la

Universidad Popular del Cesar: Resistencia

Microbiana.

JUSTIFICACIÓN

Los antimicrobianos son un problema de

salud pública importante, que ha llegado a un

punto crítico en muchos hospitales de todo el

mundo. Las cepas de Staphylococcus aureus

resistente a meticilina (SAMR) son los

agentes patógenos más importantes como

causa de infecciones en hospitales (SAMR-

H) y comunidad (SAMR-C)

Las bacterias resistentes a los fármacos

antimicrobianos continúan desarrollándose y

diseminándose a lo largo y ancho del planeta.

Para conocer el avance de la resistencia, es

indispensable que los microbiólogos clínicos

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3

cuenten con los métodos para realizar

pruebas de sensibilidad antimicrobiana que

sean exactas, fiables, reproducibles y eficaces

en relación con su costo. No existe un método

único que pueda detectar todos los

mecanismos de resistencia. Por lo tanto, es

necesario usar diversos métodos, incluso

varias pruebas originales de detección, con el

fin de reconocer cepas bacterianas con

nuevos mecanismos de resistencia.

Es sabido que la trasmisión de la bacteria de

los pacientes al personal de salud y viceversa

es determinante en la génesis de infecciones

por cepas de S. aureus, ya que la

colonización nasal de trabajadores de la salud

y pacientes, normalmente precede a la

infección intrahospitalaria por esta bacteria.

El aumento de la prevalencia de SAMR en

todo el mundo, y la pérdida de posibles

alternativas terapéuticas, conduce a la

necesidad de detectar y controlar este tipo de

aislamientos. Por lo tanto, la búsqueda de

portadores se convierte en una alternativa

más para controlar las tasas de infección

evitando la propagación del microorganismo

en el contexto hospitalario y comunitario.

Dado que SAMR, como ya se ha

mencionado, puede transmitirse por dos

maneras distintas: una es al tener contacto

con otras personas ya infectadas y la otra es

al hacer contacto con superficies que han

llegado a contaminarse con la bacteria

SAMR, el personal asistencia que trabaja en

laboratorios clínicos se encuentra en riesgo

constante de contraerla, por lo cual esta

investigación es pertinente, ya que debe haber

programas de evaluación del desempeño para

garantizar que los métodos utilizados

actualmente permitan determinar la

sensibilidad del personal de los laboratorios

clínicos a microorganismos con mecanismos

críticos de resistencia antimicrobiana. (14)

También se considera que esta investigación

es oportuna, porque los trabajadores de estos

centros, por ser portadores, de forma

transitoria o permanente en la mucosa nasal,

son una población habitualmente sana que es

desconocedora en la mayoría de los casos de

su condición de portadora SAMR por lo que

desarrolla una vida normal sin ningún tipo de

control médico.

Así mismo es importante porque los

resultados arrojados por este estudio

suministraron información necesaria para el

conocimiento de la situación actual de la

portación nasal de SAMR en el personal del

Laboratorio ABBA Clínico Microbiológico e

Industrial Ltda., en la ciudad de

Barranquilla, lo cual permitirá el diseño de

estrategias de intervención epidemiológica

que busquen el control de la diseminación de

tal aislamiento.

Conocida la importancia del S. aureus como

agente causal de infecciones comunitarias y

hospitalarias, fue motivación suficiente para

que las investigadoras, como futuras

microbiólogas clínicas, se interesaran en

realizar el presente estudio, que tiene como

objetivo la detección de portadores nasal de

SAMR en el personal del Laboratorio ABBA

Clínico Microbiológico e Industrial Ltda., en

la ciudad de Barranquilla.

METODOLOGÍA

Se realizó un estudio de tipo descriptivo-

prospectivo, en el que se detectaron

portadores nasales de Staphylococcus aureus

resistente a meticilina en el personal del

Laboratorio ABBA Clínico Microbiológico e

Industrial Ltda., en la ciudad de Barranquilla.

La población estuvo constituida por 50

trabajadores de las diferentes áreas del

Laboratorio ABBA Clínico Microbiológico e

Industrial Ltda., en la ciudad de Barranquilla.

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La muestra estuvo conformada por 17

aislamientos positivos para Staphylococcus

aureus resistentes a la meticilina.

Las variables del estudio fueron de

naturaleza cualitativa y cuantitativa, con

niveles de medición ordinal, intervalo y de

razón, teniendo en cuenta los objetivos

específicos

RESULTADOS

Figura 1. Determinación de presencia de

Staphylococcus aureus en cultivos realizados

a los trabajadores del Laboratorio ABBA

Clínico Microbiológico e Industrial Ltda.

Barranquilla 2013

De una población conformada por 50

trabajadores de diferentes áreas de trabajo del

laboratorio objeto de estudio, las muestras

tomadas confirmaron que 30 personas,

equivalentes al 60% fueron portadores

nasales de Staphylococcus aureus.

Este resultado coincide con lo que señalan

otros autores que S. aureus, es un patógeno

complejo causante de infecciones en diversos

órganos y con un alto impacto

epidemiológico, principalmente a nivel

hospitalario y en ambientes con contacto

microbiológico.

Los trabajadores de estos ambientes son, por

lo tanto, fuente de trasmisión de S.aureus, ya

sea actuando como reservorio o por contacto

con un paciente o material contaminado por

la mayor exposición.

Figura 2. Identificación de SAMR en los

cultivos realizados a los trabajadores del

Laboratorio ABBA Clínico Microbiológico e

Industrial Ltda. Barranquilla 2013

De todos los S. aureus aislados se encontró

una resistencia a la meticilina (SAMR) del

56.67%, frente al 43.33% de sensibilidad

(SAMS) en la población estudiada.

De la literatura consultada, se observó una

amplia variación según esos autores en

cuanto al porcentaje de resistencia a la

meticilina de los Staphylococcus aureus

aislados en los portadores nasales en

trabajadores de la salud. Para algunos, las

tasas están por debajo del 50%, mientras que

para otros, supera este porcentaje,

Al relacionar la ocupación con la presencia

de SAMR¸ se observó que la profesión de

bacteriólogos parece ser un factor

determinante ya que el 100% de ellos fueron

SARM demostrando que estos profesionales,

Positivos (n=30) 60%

Negativos

(n=20) 40% Positivos

Negativos

SAMR (n=17) 56.67%

SAMS (n=13)

43.33%, Resistentes

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5

son las personas más expuestas por el mayor

tiempo de contacto en las áreas de laboratorio

con agentes patógenos como S.aureus.

Del total de trabajadores colonizados se

encontró que los auxiliares de laboratorio y

empleados administrativos resultaron con

mayor incidencia sensible a la meticilina

(SAMS), donde el 85% de los auxiliares de

laboratorio, el 33% de los trabajadores

administrativos las digitadoras; 67% de

trabajadores de oficios varios y 100% de

mensajero, fueron resultaron positivos. Es de

destacar que el personal administrativo que se

encontró colonizado es el que tiene más

contacto directo, aunque no frecuente, con el

área donde se encuentran bacteriólogos y

auxiliares de laboratorios, lo que permite

pensar que aunque la exposición sea

ocasional, puede considerarse un factor de

riesgo para contaminación.

Figura 3. Determinación del tipo de portación

de SARM en los trabajadores del Laboratorio

ABBA Clínico Microbiológico e Industrial

Ltda., en la ciudad de Barranquilla. Junio

2013

Se realizaron tres repeticiones, con intervalos

de diez días entre una y otra muestra, a fin de

determinar la permanencia o transitoriedad

en los trabajadores colonizados con S.aureus.

De los 17 trabajadores identificados con

SAMR, el 64.71% resultó permanente y el

35.29% transitorio.

Se consideraron permanentes aquellos

trabajadores que fueron portador nasal en la

primera, segunda y tercera toma; e

intermitente aquel que fue portador en dos de

las tres tomas: primera muestra positiva pero

no lo fue en la segunda y si en la tercera, o

viceversa.

Cuadro 1. Características biológicas de la

población SARM participante en el estudio

INDICADOR NO. %

Edad 18-24 años 1 5.88%

25-30 años 16 94.12%

31-35 años 0.00%

36-40 años 0.00%

41-45 años 0.00%

Más de 46

años

0.00%

Total 17 100.00%

Sexo Femenino 14 82.35%

Masculino 3 17.65%

Total 17 100.00%

El mayor porcentaje de trabajadores con

SAMR se encuentra entre 25-30 años de edad

con el 94.12% y el 82.35% son trabajadores

del sexo femenino.

En esta investigación, en cuanto a la edad y el

estado portador, se halló una relación

proporcional, es decir a mayor número de

personas en un rango de edad, mayor número

de portadores. Sin embargo, debe tenerse en

cuenta que el limitado número de

participantes en la muestra no permite una

significación con otros rangos de edad.

El sexo femenino parece estar mucho más

relacionado con la presencia de

Staphylococcus aureus en la población

asintomática, pero en este estudio el

indicador sexo no puede considerarse

significativo, por cuanto la proporción de la

Permanentes

(n=11) 64.71%,

Transitorios

(n=6) 35.29%, Permanentes

Intermitentes

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6

población femenina es desigual, y por ende

hubo mayor portación en mujeres.

Numerosas investigaciones han asociado la

colonización de S.aures con factores como:

edad, sexo, eficiencia de los mecanismos de

defensa del hospedero entre otros, pero

obviamente, la incidencia sobre las variables

de los portadores nasales de Staphylococcus

aureus varía de acuerdo a la población

estudiada.

Cuadro 2. Características clínicas de la

población SARM participante en el estudio

INDICADOR NO. %

Hospitalizaciones

recientes

Ninguna 16 94.12%

Si 1 5.88%

Total 17 100.00%

Antibioterapia

reciente

No 15 88.24%

Si 2 11.76%

Total 17 100.00%

Contacto

continuo

con personas

hospitalizadas

No 11 64.71%

Si 6 35.29%

Total 17 100.00%

Entre las personas potadoras de S. aureus un

5.88% tuvo internación previa durante el

último año, de las cuales ninguna fue por

procedimientos invasivos. En cuanto a la

utilización previa de antibióticos en los

últimos 6 meses fue del 11.76%.

El 35.29% ha tenido un contacto continuo

con personas hospitalizadas debido a que

también se desempeña en laboratorios de

diferentes hospitales.

Cuadro 3. Características laborales de la

población SARM participante en el estudio

INDICADOR NO. %

Tiempo de

trabajo

2 a 6 meses 2 11.76%

7 meses a 1

año

4 23.53%

1 a 2 años 5 29.41%

3 a 4 años 3 17.65%

4 a 5 años 2 11.76%

Más de 5

años

1 5.88%

Total 17 100.00%

Simultaneidad

de trabajo

Si 6 35.29%

No 11 64.71%

Total 17 100.00%

El 29.41% de los trabajadores tiene entre uno

y dos años trabajando en la empresa objeto de

estudio. El tiempo de trabajo puede

considerarse un predictor de portación de

SAMR.

El 35.29% de los bacteriólogos trabaja

simultáneamente en otra institución de salud,

y son aquellos que en igual número están en

contacto permanente con personas

hospitalizadas.

El 11.76% de los empleados del área de

laboratorio no siempre cumple las medidas de

seguridad que estable el Manual de Buenas

Prácticas de Laboratorio (BPL),

especialmente en lo contemplado con hábitos

personales, lo cual favorecería la transmisión

de S.aureus.

DISCUSIÓN

El hallazgo que más llama la atención en este

estudio es la marcada presencia de SAMR

encontrada en los profesionales de la

bacteriología, especialmente en aquellos que

tienen simultaneidad de trabajo. Estos

resultados no pueden ser comparados con

otro estudio ya que no se encontraron

investigaciones realizadas en personal de

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7

laboratorio sobre SAMR, por lo cual el

presente estudio es el primero en la región.

Los resultados de colonización por SAMR de

este estudio coinciden con las cifras

encontradas en otros estudios. (Acosta et al,

2012 y Carmenate, 2012). Sin embargo, en

estudios realizados a nivel local (López y

Rodríguez, 2012 y Atencio et al, 2009) en

trabajadores asistenciales y estudiantes de

enfermería en prácticas clínicas hospitalarias,

sus resultados se situaron muy por debajo de

las cifras obtenidas en nuestro estudio.

Se ha demostrado que el estado de portador,

tanto en los pacientes como en los

trabajadores del área de la salud, es el

principal factor de riesgo para la infección

por este microorganismo. De las formas de

relación de la colonización de S.aureus con el

hospedero pueden ser: portador intermitente y

portador persistente y su frecuencia en la

población normal se reparte entre 40% y

60% respectivamente. (Gaona et al, 2009)

Los resultados de persistencia e intermitencia

encontradas en este estudio coinciden

también con las cifras antes señalas.

La portación persistente podría aumentar el

riesgo de transmisión de los aislamientos

entre el personal, dado que la estancia

continua de la bacteria en el individuo

determina un riesgo permanente de infección,

mientras los portadores transitorios

constituirán un foco infeccioso en episodios

intermitentes. (Atencio et al, 2009).

Es importante recordar que S. aureus posee la

enzima coagulasa que al unirse, no de manera

enzimática, con el fibrinógeno provoca la

agregación de bacterias. Todo esto sucede a

nivel de mucosa nasal, favoreciendo la

instalación de acúmulos de bacterias en las

fosas nasales recubiertas de fibrina, lo que

indudablemente hace más potencialmente

patógenos a estos acúmulos bacterianos.

CONCLUSIONES

Se determinó que habían trabajadores del

laboratorio objeto de estudio colonizados por

Staphylococcus aureus.

De los trabajadores colonizados 17

resultaron resistente a meticilina (SAMR),

siendo significativa su presencia.

De los 17 trabajadores identificados con

SAMR, 11 trabajadores resultaron con

portación permanente, en este caso aquellos

que fueron portadores nasales en la primera,

segunda y tercera muestra.

Se concluyó que los bacteriólogos y

auxiliares se encontraron colonizados con

SAMR, ya que son personas con mayor

tiempo de exposición para dicho patógeno

demostrando así la acción de contacto versus

la ocupación.

AGRADECIMIENTOS

A las docentes Luisa Fernanda Peña y Nayeth

Bolaño Ardila del Programa de

Microbiología de la Universidad Popular del

Cesar, por sus orientaciones en las asesorías

metodológica y técnica de esta investigación,

producto de sus amplios conocimientos.

A los directivos y personal del Laboratorio

ABBA Clínico Microbiológico e Industrial

Ltda., en Barranquilla, por habernos

facilitado sus instalaciones y colaborado para

la toma de muestras, y cuyo apoyo fue vital

para la realización del presente estudio.

A Juan Alejandro Iturriago y Chely Saurith,

por su colaboración.

A todas las personas, que de una u otra

forma, siempre estuvieron cerca a nosotras,

alentándonos y motivándonos para culminar

esta meta.

Page 8: ARTICULO CIENTIFICO.pdf

8

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