Apontamentos de Biologia Celular e Molecular

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  • 8/19/2019 Apontamentos de Biologia Celular e Molecular

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    Exame Prático Biologia Celular e

    Molecular

    (20 minutos)

    1)  Ligar Microscópio Óptico;

    2)  Pôr a Lâmina;

    3) 

    Focar;

    4) 

    Vamos ter de desenhar uma lâmina;

    5)  Preparações a fresco, que podem sair:

    a)  CEBOLA COM ÁGUA OU LUGOL (×100);

    b) 

    BATATA COM ÁGUA OU LUGOL (×100);c) 

    BANANA COM LUGOL (×100);

    d)  TOMATE COM ÁGUA (×40 e ×100).

    6)  Preparações definitivas, que podem sair:

    a)  TÉCNICA DE GRAM;

    b) 

    TÉCNICA DE NEWMAN LAMPERT;

    c)  SANGUE;

    d)  MITOSE.

    7) 

    Agora escrever na folha:

    a)  Nome;

    b) 

    Título (Objectivo da observação);c)

     

    Desenho (Legenda e Ampliação Total);

    d)  Observações

    i)  Porque escolheu a ampliação usada;

    ii) 

    Nome das estruturas encontradas;

    iii)  Cor dessas mesmas estruturas (ex: núcleo, membranas, célula em si);

    iv)  Organização celular;

    v)  Se possível, Técnica de coloração;

    vi)  Explicar porque são evidenciadas em relação a outras;

    vii)  Classificação em eucariótica (célula animal ou vegetal) ou procariótica (bactérias);

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    CEBOLA COM ÁGUA OU LUGOL (×100)

    Título: Observação de células da epiderme do bolbo da cebola

    a) 

    Sem corante

    b)  Com soluto de Lugol

    http://www.sroque.org/images/stories/Actividades/Lab_Act_1/13.JPGhttp://www.sroque.org/images/stories/Actividades/Lab_Act_1/12.JPGhttp://www.sroque.org/images/stories/Actividades/Lab_Act_1/11.JPGhttp://www.sroque.org/images/stories/Actividades/Lab_Act_1/9.JPGhttp://www.sroque.org/images/stories/Actividades/Lab_Act_1/10.JPG

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    Discussão

    I.  Porque escolheu a ampliação usada: Ampliação usada ×100, porque com esta

    ampliação é possível, observar com detalhe todas a estruturas das células e ainda

    dá a percepção da organização das células da epiderme.

    II.  Nome e cor das estruturas encontradas: Parede Celular, Membrana Celular,

    Núcleo, Nucléolo, Citoplasma, Grande Vacúolo, Amiloplastos; as cores são tons de

    amarelo. 

    III.  Explicação da função das estruturas:

    (1) Parede celular: limita a célula e tem uma função estrutural e de suporte;

    (2) Membrana celular: estrutura semipermeável que possibilita as trocas

    com o meio;

    (3) Citoplasma: substância fluida, no qual estão imersos vários organitos

    celulares;

    (4) Núcleo: individualizado pela membrana nuclear onde se encontra o

    material genético (perto da membrana celular, devido à presença de um

    grande vacúolo);

    (5) Nucléolos: é um subcompartimento do núcleo e não é circundado por

    membrana (estes não foram identificados na aula, pois não se utilizou

    ampliações suficientemente elevadas);

    (6) Vacúolos: locais de armazenamento de iões e nutrientes (mais visíveis

    após a adição de Soluto de Lugol);

    (7) Amiloplastos: são vesículas de armazenamento de amido, uma

    substância de reserva das células vegetais.

    IV. 

    Organização celular: Células com forma geométrica bem definida, poliédricas ealongadas, que se dispõem continuamente sem espaços intercelulares,

    assemelhando-se a uma “parede de tijolo”. 

    V.  Classificação das células: Por estas mesmas características pode-se afirmar que são

    células vegetais e portanto eucarióticas. 

    VI.  Se possível, Técnica de coloração: Uso do soluto de Lugol

    VII.  Quais as estruturas evidenciadas em relação às outras: é possível evidenciar os

    amiloplastos, núcleo, e parede celular. 

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    BATATA COM ÁGUA OU LUGOL (×100)

    Título: Observação de células do parênquima amiláceo da batataa)  Sem corante

    b)  Com soluto de Lugol

    Amiloplastos da Batata

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    Discussão

    I.  Porque escolheu a ampliação usada: Ampliação usada ×100, porque com esta

    ampliação é possível, observar com detalhe todas a estruturas das células e ainda

    dá a percepção da organização das células do parênquima amiláceo da batata. 

    II.  Nome e cor das estruturas encontradas: Parede Celular (escura), Membrana

    Celular, Citoplasma (claro), Amiloplastos (escuros); 

    III.  Explicação da função das estruturas:

    (1) Parede celular: limita a célula e tem uma função estrutural e de suporte

    neste caso é bastante espessa;

    (2) Membrana celular: estrutura semipermeável que possibilita as trocas

    com o meio;

    (3) Citoplasma: substância fluida, no qual estão imersos vários organitos

    celulares;

    (4) Amiloplastos: são vesículas de armazenamento de amido, uma

    substância de reserva das células vegetais. A ×400 podemos ver o ponto

    em torno do qual se faz a deposição do amido, em camadas sucessivas

    (estrias) denominado de hilo (pode-se ver em água).

    IV.  Organização celular: Células com forma isodiamétricas, nenhuma das dimensões

    excede grandemente as outras, rodeadas por uma parede celular definida,

    podemos até considerá-las ovóides. 

    V.  Classificação das células: Por estas características pode-se afirmar que são células

    vegetais e portanto eucarióticas. 

    VI.  Se possível, Técnica de coloração: Uso do soluto de Lugol

    VII. 

    Quais as estruturas evidenciadas em relação às outras: é possível evidenciar osamiloplastos e a parede celular (bastante bem).

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    BANANA COM LUGOL (×100)

    Título: Observação de células do parênquima amiláceo da bananaa)  Sem corante

    Parênquima amiláceo da banana não coradas

    b)  Com corante

    As zonas coradas são grãos de amido armazenadosem amiloplastos

    Discussão

    I.  Porque escolheu a ampliação usada: Ampliação usada ×100, porque com esta

    ampliação é possível, observar com detalhe os amiloplastos e a forma das células

    no parênquima amiláceo da banana. 

    II.  Nome e cor das estruturas encontradas: Parede Celular (escura), Membrana

    Celular, Citoplasma (claro), Amiloplastos (escuros); 

    III.  Explicação da função das estruturas:

    (1) Parede celular: limita a célula e tem uma função estrutural e de suporte

    neste caso é bastante espessa;

    (2) Membrana celular: estrutura semipermeável que possibilita as trocas

    com o meio;

    (3) Citoplasma: substância fluida, no qual estão imersos vários organitos

    celulares;

    (4) Amiloplastos: são vesículas de armazenamento de amido, uma

    substância de reserva das células vegetais. A ×400 podemos ver o ponto

    em torno do qual se faz a deposição do amido, em camadas sucessivas

    (estrias) denominado de hilo (pode-se ver em água).

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    IV.  Organização celular: Células com forma pouco alongada, com espaços

    intercelulares e podemos considerá-las arredondadas ou com forma de gota. 

    V.  Classificação das células: Por estas características pode-se afirmar que são células

    vegetais e portanto eucarióticas. VI.  Se possível, Técnica de coloração: Uso do soluto de Lugol

    VII.  Quais as estruturas evidenciadas em relação às outras: é possível evidenciar os

    amiloplastos e a parede celular (bastante bem).

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    TOMATE COM ÁGUA (×40 e ×100). 

    Título: Observação de células do parênquima da polpa de tomate

    a) 

    Sem corante b) 

    Com corante

    Discussão

    I.  Porque escolheu a ampliação usada: Ampliação usada ×100, porque com esta

    ampliação é possível, observar os amiloplastos e a forma das células no

    parênquima amiláceo do tomate. 

    II.  Nome e cor das estruturas encontradas: Parede Celular, Membrana Celular,

    Núcleo, Citoplasma, Grande Vacúolo; as cores são tons de amarelo. 

    Parede celular

    Membrana Plasmática

    CitoplasmaCromoplastos

    Vacúolo

    Núcleo

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    III.  Explicação da função das estruturas:

    (1) Parede celular: limita a célula e tem uma função estrutural e de suporte;

    (2) Membrana celular: estrutura semipermeável que possibilita as trocas

    com o meio;(3) Citoplasma: substância fluida;

    (4) Núcleo: individualizado pela membrana nuclear onde se encontra o

    material genético (elemento mais escuro da célula, observa-se bem

    tanto a ×10 como a ×40);

    (5) Vacúolos: locais de armazenamento de iões e nutrientes, neste caso

    muito mais volumosos que o próprio núcleo da célula;

    (6) 

    Cromoplastos: possuem licopeno, conferem a cor vermelha a estas

    células (para a sua observação é preciso focar e desfocar com o

    micrométrico).

    IV.  Organização celular: Células com forma geométrica bem definida, forma circular,

    dispõem continuamente com espaços intercelulares. 

    V.  Classificação das células: Por estas mesmas características, podemos afirmar que

    são células vegetais e portanto eucarióticas. 

    VI. 

    Se possível, Técnica de coloração: Uso do soluto de Lugol

    VII.  Quais as estruturas evidenciadas em relação às outras: é possível evidenciar os

    cromoplastos e o núcleo. 

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    TÉCNICA DE GRAM

    Título: Observação de bactérias presentes no iogurte coradas pelaTécnica de Gram

    Discussão

    I. 

    Porque escolheu a ampliação usada: Ampliação usada ×1000, porque apenas com

    esta ampliação é possível, observar as bactérias no iogurte. 

    II.  Nome e cor das estruturas encontradas: organizações de bactérias 

    III.  Organização bacteriana:

    a)  Forma isolada 

    (1) Cocos: esféricos e ovóides;

    (2) Bacilos: cilíndrica ou bastonete;

    (3) Espirilos: helicoidal.

    b)  Colónias 

    (1) Diplococos: dois cocos;

    (2) Estreptococos: cadeias;

    (3) Estafilococos: agregados de cocos (cacho de uvas).

    IV.  Classificação das células: Por estas mesmas características, podemos afirmar que

    são bactérias e portanto procarióticas. 

    Estreptococos de bactérias de

    iogurte

    Bacilos de E. coli  

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    V.  Se possível, Técnica de coloração: Técnica de Gram 

    (1) G(+): camada espessa de peptidoglicanos, cor azul pelo corante violeta

    cristal.

    (2) 

    G(-): camada pouco espessa de peptidoglicanos e uma mais espessa deespécies com substâncias polares, cor-de-rosa pela fucsina, pois não

    retêm o violeta cristal. 

    VI.  Quais as estruturas evidenciadas em relação às outras: é possível evidenciar os

    tipos de membranas celulares, pela cor; azul G(+) – espessa em peptidoglicanos e

    rosa G(-) – pouco espessa em peptidoglicanos. 

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    TÉCNICA DE NEWMAN LAMPERT

    Título: Observação de bactérias presentes na saliva coradas com o

    corante de Newman-Lampert

    a)  Sem corante b)  Com corante Newman-Lampert

    http://www.sroque.org/images/stories/Actividades/Lab_Act_2/8_1.JPGhttp://www.sroque.org/images/stories/Actividades/Lab_Act_2/6_1.JPG

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    Discussão

    I.  Porque escolheu a ampliação usada: Ampliação usada ×1000, porque apenas com

    esta ampliação é possível, observar as bactérias nas células epiteliais da boca. 

    II. 

    Nome e cor das estruturas encontradas: organizações de bactérias; núcleo e

    membrana celular (das células epiteliais da boca). 

    III.  Organização bacteriana:

    a)  Forma isolada 

    (1) Cocos: esféricos e ovóides;

    (2) Bacilos: cilíndrica ou bastonete;

    (3) Espirilos: helicoidal.

    b)  Colónias 

    (1) Diplococos: dois cocos;

    (2) Estreptococos: cadeias;

    (3) Estafilococos: agregados de cocos (cacho de uvas).

    IV.  Classificação das células: Por estas mesmas características, podemos afirmar que

    há bactérias e portanto células procarióticas e células epiteliais portanto células

    animais eucarióticas. 

    V.  Se possível, Técnica de coloração: Técnica de Newman Lampert (Utilizamos uma

    coloração directa, onde o corante se fixa sem o auxílio de uma substância

    intermédia). 

    VI.  Quais as estruturas evidenciadas em relação às outras: núcleo bem definido a azul

    (célula epitelial) e bactérias com diversas organizações. 

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    SANGUE

    Título: Observação de esfregaços de sangue corados com a coloraçãode Hematoxilina-eosina

    Discussão

    I.  Porque escolheu a ampliação usada: Ampliação usada ×400, porque com esta

    ampliação, pode-se observar maior variedade de células sanguíneas. 

    II.  Nome e cor das estruturas encontradas: células sanguíneas (eritrócitos e

    plaquetas), e leucócitos 

    Plaquetas (entre eritrócitos)

    Linfócitos do Sangue

  • 8/19/2019 Apontamentos de Biologia Celular e Molecular

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    III.  Organização dos tipos de leucócitos:

    (1) Hialinos (não têm granulações citoplasmáticas):

    (a)  Linfócitos: ausência de granulação citoplasmática, núcleo redondo

    com cromatina condensada ocupando quase toda a célula;(b) Monócitos: ausência de granulação citoplasmática, núcleo com

    cromatina pouco condensada, ovóide, citoplasma abundante.

    (2) Granulócitos (possuem granulações citoplasmáticas):

    (a)  Neutrófilos: granulação cor-de-rosa, núcleo irregular, citoplasma

    abundante, polilobado (bolas juntas);

    (b) Acidófilos ou eosinófilos: citoplasma abundante com grande nº de

    granulações acidófilas, núcleo bilobado;

    (c)  Basófilos: granulações basófilas cor violeta escuro, núcleo irregular

    (difícil de encontrar).

    IV.  Classificação das células: Células sanguíneas. 

    V.  Se possível, Técnica de coloração: Sangue foi corado com:

    (1) Azul Metileno (cor azul), corante básico, liga-se as estruturas com

    carácter negativo;

    (2) 

    Eosina (cor-de-rosa), corante ácido, liga-se as estruturas com carácter

    positivo.

    VI.  Quais as estruturas evidenciadas em relação às outras: eritrócitos (são mais

    abundantes) 

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    MITOSE

    Título: Observação de figuras de mitose

    Mitoses na raíz da cebola

    FASES DA MITOSE

    Interfase (não faz parte da Mitose) 1.Profase

    2.Metafase 3.Anafase

    4.Telofase 

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    Discussão

    Pode então dizer-se que a Mitose é a fase fulcral do ciclo celular, pois como se

    podemos observar é com esta que as células de qualquer organismo eucariota

    conseguem proliferar.

    Neste procedimento experimental foi-nos possível observar as diferentes

    etapas da mitose. Esta observação foi possível devido à utilização de um método de

    coloração. Assim, utilizou-se a eosina por forma a corar o núcleo, ao mesmo tempo

    que o aquecimento permitiu a imobilização dos constituintes celulares através da

    retirada da água da célula.

    Na figura nº1, é-nos então possível a observação de uma célula em profase,

    pois esta apresenta uma grande condensação de cromossomas. Para além do que é

    possível observar ao microscópio óptico sabe-se que, nesta fase, os centríolos afastam-

    se em sentidos opostos formando o fuso acromático, dá-se a fragmentação da

    membrana nuclear e os nucléolos desaparecem.

    Na figura nº2, observa-se a célula em metafase, podem ver-se os cromossomas

    dispostos ao longo do plano equatorial formando a placa equatorial atingindo o seu

    pico máximo de condensação. Os pares de centríolos já se encontram nos pólos da

    célula, o fuso acromático apresenta-se completo  –  algumas das suas fibras ligam-se

    aos cromossomas, as fibrilas cromossómicas, enquanto que outras se estendem de

    pólo a pólo, as fibrilas continuas.

    Na figura nº3, observa-se a anafase, pode ver-se o início da migração polar dos

    cromossomas filhos constituídos cada um deles por apenas um cromatídeo. Este

    processo dá-se após a “quebra” dos centrómeros. No final desta fase os dois pólos da

    célula tem colecções completas e equivalentes de cromossomas e portanto de DNA.

    Na figura nº4, trata-se da telofase, é observável a descondensação e

    alongamento dos cromossomas de cada célula-filha. A membrana nuclear volta a

    formar-se em torno dos cromossomas. Os nucléolos voltam a aparecer, o fuso mitóticodissolve-se. A célula apresenta agora dois núcleos.

    Nesta fase, ocorre ainda a citocinese, que é o processo de divisão do

    citoplasma que leva à individualização das duas células filhas resultantes de todo o

    processo.

    Forma-se na zona plano equatorial um anel contráctil de filamentos proteicos.