Anteproyecto BIOACTIVE

INSTITUCIÓN EDUCATIVA COLEGIO LOYOLA PARA LA CIENCIA YLA INNOVACIÓNCreada por Resolución N° 00003 de Enero 5 de 2010.

DANE: 105001025984 NIT: 900339251-3

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Nov. 2012

FORMATO ANTEPROYECTO

1. INFORMACIÓN GENERAL:

Título del proyecto

Identificación del principio activo con propiedad antiespasmódica presente en la planta Pronto Alivio (Lippia

Alba) utilizando la técnica de destilaciòn por arrastre de vapor y la cromatografía de gases.

Área temática

Ejemplos Marque con una x

Biociencias

Zoología (animales), botánica (plantas), microbiología

(microorganismos como bacterias, virus, protozoos, etc.), genética,

biología molecular y celular, bioquímica, biotecnología, ecología,

conservación, ciencias agropecuarias y afines.

X

QuímicaQuímica orgánica, inorgánica,

analítica, fisicoquímica, química de los productos naturales y afines.

Ciencias Matemáticas y

Física

Estadística, modelación matemática, física, biofísica, óptica, acústica y

afines.Ciencias de la

Tierra y el Espacio

Astronomía, geología, minería, climatología, sismología y afines.

Ciencias Sociales y Humanas

Psicología, educación y pedagogía, sociología, antropología, arqueología,

paleontología, historia, economía, comunicación, periodismo, lingüística,

artes, literatura, música y afines.

Servicios Públicos y

Medio Ambiente

Agua, gas, energía (de combustibles fósiles y alternativas), saneamiento,

transporte (terrestre, aéreo y acuático), gestión ambiental, impacto ambiental,

contaminación, reciclaje y afines.

Ingenierías y Tecnologías

Ingeniería civil, electrónica, eléctrica, mecánica o de sistemas, desarrollo de software, TICs y telecomunicaciones, robótica, bioingeniería, ingeniería de materiales, nanotecnología y afines.

Tomado: formato utilizado en la Feria dela ciencia CT+I – Dcto Anteproyectos ITM


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Medicina y Salud

Promoción y prevención, atención, nutrición, salud pública, salud

ocupacional, deporte, epidemiología, enfermedades y afines

Selección de la modalidad del (de los) investigador(es):

Modalidad Marque con una XModalidad III. Educación básica secundaria

(6° - 9°)Modalidad IV. Media vocacional (incluye

media técnica) (10°-11°) X

DATOS PERSONALES DE LOS INVESTIGADORES

Nombre del coinvestigador Valentina Arboleda Montoya

Grado del coinvestigador 10°2

Dirección electrónica del coinvestigador

[email protected]

Teléfono (fijo y celular) del coinvestigador

570 1796 – 312 203 9908

Documento de identidad del coinvestigador

98072561716

Nombre del coinvestigador Liseth Alexandra Arrieta Piedrahíta



[email protected]


586 9520 – 318 750 5042


98042253375

Nombre del coinvestigador Daniela Zapata Pérez



[email protected]

Teléfono (fijo y celular) del 237 4444 – 301 484 5974


mailto:[email protected]




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coinvestigadorDocumento de identidad del

coinvestigador99032907373

Nombre del coinvestigador Lesli Patricia Ruiz Severiche



[email protected]


589 3106 – 321 820 2924


DOCENTE ACOMPAÑANTE

Nombre del docente William Pérez Campo

Área del docente Biología – Química

Dirección electrónica del docente

[email protected]

Teléfono (fijo y celular) del docente

ASESOR

Ángela Garrido ([email protected])

Jader Alexander Mesa Preciado (j [email protected] )

INSTITUCIÓN EDUCATIVA

Nombre de la instituciónInstitución Educativa Colegio Loyola para la Ciencia y la

Innovación

Municipio Medellín

Duración del proyecto (en 24







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meses)Indicar si este proyecto es

continuación de otro que haya participado en ferias anteriores.

Este proyecto NO es continuación de algún otro proyecto.

2. DESCRIPCIÓN DEL PROYECTO

INTRODUCCIÓN

El Pronto Alivio (Lippia Alba) es una planta tradicional de Colombia y de fácil cultivo gracias a que se adapta muy bien a cualquier medio; por esto se ha convertido en una planta de empleada especialmente por las personas de la tercera edad de pueblos y ciudades basados en los usos populares que han trascendido de generación en generación. Esta planta es un arbusto aromático que pertenece a la familia Verbenaceae, originaria de América tropical que entre sus numerosas propiedades terapéuticas pueden citarse su utilidad antiespasmódica, carminativa, digestiva, diurética, expectorante, laxante, sedante,somnífera, sudorífica, antimicrobiana, antioxidante, antiulcerosa y anticonvulsivante.

A pesar de estas múltiples propiedades y de ser una planta tradicional,abundante y de ser muy estudiada gracias a que través de la historia se han realizado diversas investigaciones y estudios sobre las plantas y sus principios activos como aceites esenciales, ácidos, entre otros. Por medio de estos estudios se han descubierto sus usos medicinales, alimenticios y cosméticos. Pero no se han concentrado en identificar el principio activo que tiene propiedad antiespasmódica y no se ha implementado el uso de los principios en la industria. Por esta razón se extraerá el aceite esencial y se identificara el principio activo que posee propiedad antiespasmódica para ser implementado en un aceite esencial con esta propiedad.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA.

En los últimos años las plantas medicinales han adquirido gran importancia en terapias alternativas o complementarias en varias regiones del mundo. Las plantas con acción medicinal o funcional tienen características comunes de poseer un elevado contenido en sustancias o principios activos con propiedades químicas bioquímicas u organolépticas muy específicas que permiten su utilización con fines terapéuticos (plantas medicinales), aromáticos (platas aromáticas o esenciales) y dietéticos o gastronómicos (plantas



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empleadas como condimentos) (Raúl Ávila Sosa, 2011).

El Pronto Alivio (Lippia alba) es un arbusto aromático que pertenece a la familia verbenácea, originaria de la región de América tropical. Esta presenta numerosas propiedades medicinales como la digestiva, expectorante, laxante, antibacteriano, antiespasmódica, entre otras. Gracias a la bibliografía encontrada se determino que el Pronto Alivio ha tenido variedad de investiagaciones, pero no se ha tenido las suficientes para determinar específicamente cual es el principio activo con propiedad antiespasmódica.

PREGUNTA DE INVESTIGACIÓN

¿Cuál es el principio activo presente en la planta Pronto Alivio (Lippia Alba) con propiedad antiespasmódica?

OBJETIVOS

Objetivo general

Identificar el principio activo con propiedad antiespasmódica presente en la planta Pronto Alivio (Lippia Alba) utilizando la técnica de destilación por arrastre de vapor, para su posible

uso en un aceite esencial antiespasmodico

Objetivos específicos

- Extraer el aceite esencial de la planta Pronto Alivio (Lippia Alba) arrancado en las horas de la mañana utilizando la técnicas de destilación por arrastre de vapor.

-- Extraer el aceite esencial de la planta Pronto Alivio (Lippia Alba) arrancado en las

horas de la tarde utilizando la técnicas de destilación por arrastre de vapor.- Extraer el aceite esencial de la planta Pronto Alivio (Lippia Alba) arrancado en las

horas de la noche utilizando la técnicas de destilación por arrastre de vapor.

- Caracterizar el aceite esencial del Pronto Alivio (Lippia Alba) utilizando el cromatografo de gases.

- Analizar los principios activos del Pronto Alivio (Lippia Alba)

- Elaborar un aceite esencial antiespasmódico



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JUSTIFICACIÓN

Día a día la ciencia hace avances para optimizar la vida del hombre con una orientación de conciencia limpia y biológica utilizando las múltiples propiedades de las plantas.A través de la historia estas han sido utilizadas por sus propiedades medicinales, nutritivas, aromáticas y sus usos asociados misticos a la magia y la religión.

Desde los años 50’ se ha incrementado el interés de la ciencia por estudiar los efectos en la salud que tienen los compuestos bioactivos presentes en las plantas para poder asegurar que existe màs información sobre sus propiedades. Diversos estudios han demostrado la gran eficacia y capacidad antioxidante derivando sus aplicaciones comerciales.

Un ejemplo es el Pronto Alivio (Lippia Alba) que es una especie de planta con flores de la familia Verbena, Verbenaceae , que es nativa del sur de Texas, en Estados Unidos, México, El Caribe, América Central y América del Sur; entre sus nombres más comunes están: Matgrass Bushy, Lippia Bushy, y HierbaNegra. Se le atribuyen propiedades antiespasmódicas, expectorantes, diaforéticas, estomáquicas ,digestivas (Krossman y Vicente, 1990; Martínez Crovetto, 1981; Soraru y Bandoni, 1978) y en su aceite se ha comprobado que posee una alta actividad antibacteriana (Pino Alea et al., 1995) . En Colombia se encuentra distribuida en casi todo el país, desde el nivel del mar hasta los 1.900 msnm. Se encuentra con mayor presencia en las regiones del Valle del Cauca, Amazonas, Bolívar, Guajira, Magdalena, Atlántico, Cundinamarca, Santander, Antioquia y Quindío gracias a que se adapta a diferentes climas, aunque es de esperar que sus principios activos y calidad de aceite esencial varíen. De modo general, las temperaturas más altas tienden a favorecer un mayor desarrollo vegetativo de la planta, esta no soporta en charcamientos y crece en suelos arcillosos, francos y arenosos. Bajo cultivo se desarrolla mejor en suelos franco o franco arenosos. Las temperaturas adecuadas están entre 15 y 25°C.(Jaramillo Diana, Giulliana Laura., 2012).

Es una planta que es de empleado tradicionalmente como sedante, digestivo, febrífugo, carminativo, espasmolítico, emenagogo, sudorífico, analgésico, cicatrizante y expectorante también para la diarrea, cólicos, gripe, tos, disentería, cólicos hepáticos, hemorragias y diversas afecciones estomacales (Pascual M.,col.,2001;Holetz F. y col.,2002;Zètola M.y col,. 2002; Stashenko E. y col., 2004; Luize P. y col., 2005; Oliveira D. y col., 2006) gracias a estar constituido por alcaloides, flavonoides, tanoides e irinoides y en el aceite esencial el d-limoneno y lippiona, piperitona. (Gupta M., 1995; Martins E. y col.,2000;Lorenzi H y col.,2002;Gazola R. y col.,2004;Andrighetti-Frohner C. y col., 2005)

Los aceites esenciales de L. alba exhiben una gran variedad quimica, lo que sugiere la existencia de un elevado número de quimiotipos (Hennebelle et al. 2008). Los



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monoterpenos como el limoneno, carvona, citral, β-cariofileno, tag¬etenone, mirceno, γ-terpineno, alcanfor, 1,8-cineol y estragol se encuentran con frecuencia en los aceites esenciales de esta planta (Hennebelle et al. 2006).

A pesar de estas múltiples propiedades y de ser una planta tradicional y abundante no se ha implementado el uso de los principios en la industria; por eso es extraeran los principios activos y se identificara el que posee propiedad antiespasmódica para ser implementado en un aceite esencial.

MARCO TEORICO

Pronto Alivio (Lippia Alba):Familia: VerbenáceaEs una planta nativa de América, originaria del bosque tropical y subtropical Americano. Su distribución es bastante amplia, desde México hasta América del sur.En Colombia se encuentra distribuida en casi todo el país, con mayor presencia en las regiones del Valle del Cauca, Bolívar, Amazonas, Guajira, Magdalena, Atlántico, Cundinamarca, Santander, Antioquia u Quindío. Se adapta a diferentes climas, aunque es de esperar que sus principios activos y calidad de aceite esencial varíen. De modo general, las temperaturas más altas tienden a favorecer un mayor desarrollo vegetativo de la planta.Regularmente las hojas y flores han sido utilizadas popularmente por sus actividades antiespasmódicas y sedativas, propiedades terapéuticas atribuidas a la composición de sus aceites esenciales, especialmente B-cariofileno y geranial. En las hojas se han detectado esteroides, taninos, flavonoides, saponinas, aminoácidos, alcaloides y aceite esencial, compuesto mayoritariamente por carvona, citral, geraniol, cymol, pineno, además flavonoides y ácidos fenólicos, entre otros.Sus Principios Activos: Aceite esencial (2%), linalol, menthol, isomenthol, Monoterpenonas: pulegona (55 al 90%), cis y trans-iso-pulegona, mentona, isomentona (5 al 20%), piperitona (0,1%), isopiperitona .Flavonoides diosmósido y hesperósido.Propiedades Terapéuticas: Es utilizado en casos de Trastornos digestivos, expectorante, baja el azúcar en la sangre. Es antimicrobiano y sedante del sistema nervioso. La infusión de las hojas y las flores se ha empleado como sedante gastrointestinal, sudorífico, expectorante y en el tratamiento de la diabetes. Las hojas también se usan para las hemorroides, para inducir el sueño, contra enfermedades venéreas, afecciones de la piel y mucosas, flujo vaginal, goma, artritis, dolores musculares y de muelas; las hojas tienen propiedades antisépticas, anti fúngicas y antibacteriales .

Espasmo muscularSe denomina así cualquier contracción muscular involuntaria, exagerada y persistente, que puede afectar a los músculos estriados (voluntarios) y las fibras musculares lisas (involuntarias) de los órganos internos.El espasmo muscular o calambre se trata de una contracción involuntaria de los músculos



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que puede hacer que estos se endurezcan o se abulten.Los espasmos producidos en un cuadro de fibromialgia cursan de la misma forma pero su recuperación es más lenta casi siempre suele dejar contractura en la zona afectada.MebeverinaLa mebeverina es un antiespasmódico musculotrópico con acción directa sobre el músculo liso. Actúa interfiriendo con el transporte de calcio a través de la membrana de las células musculares lisas. Dado que esta acción no está mediada por el sistema nervioso autónomo no se producen los clásicos efectos secundarios anticolinérgicos.TerpenosSe llama terpenos a los principales componentes de la resina de los aceites esenciales (como los aromas de las flores). Químicamente, forman una amplísima y muy diversa familia de sustancias naturales. Son producidos principalmente por una gran variedad de plantas, particularmente las coníferas, aunque algunos insectos también emiten terpenos, y hay terpenos que pueden obtenerse de forma sintética.Tradicionalmente se han considerado derivados del 2-metil-1,3-butadieno, más conocido como isopreno. Esto ha permitido clasificarlos y estudiarlos, pero en realidad los terpenos no derivan del isopreno ya que éste nunca se ha encontrado como producto natural. El verdadero precursor de los terpenos es el ácido mevalónico, el cual proviene del acetil coenzima A. En cualquier caso la división de la estructura de los terpenos en unidades de isopreno es útil y pragmática y se emplea con mucha frecuencia.Cuando los terpenos son modificados químicamente, ya sea por oxidación o por reorganización del esqueleto carbonado, los compuestos resultantes son referidos generalmente como terpenoides.Terpenos y terpenoides son los principales constituyentes de los aceites esenciales presentes en muchas familias de plantas, que son usados por el hombre como aditivos en la comida, para hacer las fragancias en perfumería, en aromaterapia y en medicina tradicional y alternativa.También se conocen terpenos y terpenoides sintéticos que han sido utilizados por el hombre para expandir la variedad de aromas usados en perfumería y saborizantes usados en los alimentos.Tipos de Terpenos:-Hemiterpenos: Consisten de una sencilla unidad de isopreno. El isopreno en si es considerado el único hemiterpeno, pero derivados que contienen oxigeno tales como el prenol y el acido isovalérico son hemiterpenoides.-Monoterpenos: Consisten en 2 unidades isopreno y tienen la fórmula molecular C10H16. El alcohol monoterpénico es también conocido como Geraniol, El prefijo Geranil indica dos unidades isopreno.-Sesquiterpenos: Consisten en tres unidades isopreno y tienen la fórmula molecular C15H24. El alcohol sesquiterpenico es también conocido como Farnesol, el prefijo farnesil indica tres unidades isopreno.-Diterpenos: Están compuestos por 4 unidades isopreno teniendo la fórmula molecular C20H32.Derivan del geranilgeranil pirofosfato. Ejemplos de diterpenos son el cembreno y el taxadieno. Los diterpenos forman base de importantes compuestos biologicos tales como el retinol, retinal, y el fitol.-Sesterterpenos: Son terpenos que tienen 25 carbonos y 5 unidades isopreno. Son raros



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en relación a otros tamaños.-Triterpenos: Consisten de 6 unidades y tienen la fórmula molecular C30H48. El triterpeno lineal escualeno es el mayor constituyente del Aceite de Hígado de Tiburón, es derivado de la union reductiva de dos moléculas de farnesilpirofosfato.El Escualeno es procesado Biosinteticamente para generar Ianosterol, el precursor estructural para todos los esteroides.-Tetraterpenos: Poseen ocho unidades isopreno y tienen la fórmula molecular C40H56. Biologicamente importantes los tetraterpenos incluyen al acíclico licopeno, el mociclico gamma-caroteno y al biciclico alfa- y beta-caroteno.Politerpenos: Consisten en largas cadenas de muchas unidades isopreno. El hule natural esta constituido de poli-isopreno en el cual el doble enlace es cis. Algunas plantas producen un tipo de poli-isopreno con doble enlace trans, conocido como gutapechona.

METODOLOGÍA



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PRESUPUESTO

Materiales Justificación Cantidad Valor total

Pronto Alivio (Lippia Alba)Es necesario, ya que con éste es

con lo que se harán las pruebas de laboratorio

27 kg $

TOTAL $ $

CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

ACTIVIDAD

JUNIO JULIO AGOSTO SEPTIEMPRE

OBSERVACIONESSemana Semana Semana Semana

1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5

Asesorías con el profesor William Pérez Campo

Asesorías SENA

Elaboración Anteproyecto

Revisión Bibliografía

Entrega Anteproyecto

Entrega ruta metodologica

Entrega informe ejecutivo

Visita al Aula Ambiental

Preliminares

Extracciòn

SE HIZO NO SE HIZO SE HARÁ



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BIBLIOGRAFÍA

Acta Ortopédica Mexicana 2003; 17(4): Jul.-Ago: 173-178 M. RUIZ ET AL. Rev. Soc. Esp. del Dolor, Vol. 14, N.º 1, Enero-Febrero 2007 Rev Cubana Farm v.30 n.1 Ciudad de la Habana ene.-abr. 1996

Scientia et Technica Año XIII, No 33, Mayo de 2007Rev Cubana Farm 1997;30(1)

Dr. Jorge A. Pino Alea. Instituto de Investigaciones para la Industria Alimenticia.

VeraI, Antonia Paola; Olivero, Jesús T.; Jaramillo , Beatriz E.; StashenkoI Elena.(2010). Efecto protector del aceite esencial de Lippia alba (Mill.) N.E. Brown sobre la toxicidad del mercurocromo en raíces de Allium cepa L.Ciudad de La Habana,Cuba.

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Celis Melo Clara Nathalia.(2007). Estudio comparativo de la composición y actividad biológica de los aceites esenciales extraidos de Lippia alba, Lippia origanoides y Phylia (Lippia) dulcis especies de la familia Verbenaceae. Universidad Industrial de Santander.Bucaramanga,Colombia.

Bueno-Sánchez Juan Gabriel, Martínez-Morales Jairo René, Stashenko Elena E., Ribón Wellman.(2009).Anti-tubercular activity of eleven aromatic and medicinal plants occurring in Colombia. Grupo de Micobacterias, Instituto Nacional de Salud, Centro Colombiano de Investigación en Tuberculosis-CCITB, Centro de Investigación en Biomoléculas, CIBIMOL, CENIVAM, Universidad Industrial de Santander. Colombia

Nogueira Marisa A; Diaz Gaspar DIAZ, Sakumo Luciana; Tagami Patrícia M.(2007). Antibacterial Activity of Lippia alba (Lemon Herb). Universidade Federal de Viçosa; Universidade Federal de Minas Gerais,Belo Horizonte; Universidade Estadual do Oeste do Paraná. Brasil.

Ricciardi,Gabriela A. L, Ricciardi, Armando I. A, Bandoni, Arnaldo L.(200). Fitoquímica de Verbenáceas (Lippias y Aloysias) del Nordeste Argentino.Facultad de Farmacia - Universidad de Buenos Aires.Buenos Aires, Argentina.

Ricciardi, Gabriela A. L, Veglia, Juan F, Ricciardi, Armando I. A, Bandoni, Arnaldo L.(s.f) Examen Comparado de la Composición de los Aceites Esenciales de Especies Autóctonas de Lippia alba (Mill.) N. E. Br. Facultad de Farmacia y Bioquímica - U.B.A.Argentina.

H. Hernández V., C. Bonilla C. y M. Sánchez O. Efecto de la fertilización nitrogenada en la producción de biomasa y calidad de aceite esencial en Lippia alba (Miller), Pronto alivio. Universidad Nacional sede Palmira. Colombia.

Duràn G. Diego Camilo,Monsalve Luz Adriana, Martinez Jairo Renè, Stashenko



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Elena E.(2007). ESTUDIO COMPARATIVO DE LA COMPOSICIÓN QUÍMICA DE ACEITES ESENCIALES DE Lippia alba PROVENIENTES DE DIFERENTES REGIONES DE COLOMBIA, Y EFECTO DEL TIEMPO DE DESTILACIÓN SOBRE LA COMPOSICIÓN DEL ACEITE. Universidad Industrial de Santander. Bucaramanga, Santander.

Vaillant Flores Daymara, Romeu Carballo Carlos, Ramos Ramos Elda, González García Marleny,Ramírez Ochoa Rebeca, González Pentón Johan. (2009). Efecto inhibitorio in vitro de cinco monoterpenos de aceites esenciales sobre un aislado de Rhizoctonia Solani en papa (Solanum tuberosum L.). Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal, Instituto Politécnico de Química Industrial Mártires de Girón. La Habana,Cuba.

Davicino Roberto, Mattar María Aída, Yolanda Casali Angelina, Correa Silvia Graciela, Pettenati Elisa Margarita, Micalizzi1 Blas.(2007). Actividad antifungica de extractos de plantas usadas en medicina popular en Argentina. Facultad de Ciencias Biológicas UNMSM. Argentina.

Stashenko, E.E., Jaramillo, B.E. & J. R. Martínez.(s.f). Comparación de la composición químicay de la actividad antioxidante in vitro de los metabolitos secundarios volátiles de plantas de la familia Verbenaceae. Universidad Industrial de Santander. Colombia.

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Montiel Jehidys,Mesa Arango Ana Cecilia, Duràn Camilo,Bueno Juan Camilo, Betancur Galvis Liliana, Stashenko Elena. (2007).EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTI-CANDIDA Y ANTI-ASPERGILLUS DE ACEITES ESENCIALES DE LIPPIA ALBA (MILLER) N.E BROWN QUIMIOTIPO CARVONALIMONENO Y SU ASOCIACIÓN CON SUS COMPONENTES MAYORITARIOS.Universidad de Antioquia,Universidad industrial de Santander. Colombia.

Vera Juan Ramòn,Pastrana Pedro Felipe,Fernàndez Katherin,Viña Amparo.(2007).ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA IN VITRO DE VOLÁTILES Y NO VOLÁTILES DE LIPPIA ALBA Y EXTRACTOS ORGÁNICOS Y ACUOSO DE JUSTICIA PECTORALIS CULTIVADAS EN DIFERENTES PISOS TERMICOS DEL DEPARTAMENTO DEL TOLIMA. Universidad del Tolima.Colombia.

Caracterización del mercado colombiano de plantas medicinales y aromáticas.(s.f).Ministerio de ambiente.Colombia.

Vademecum de plantas medicinales de Colombia. (s.f).Ministerio de salud y protección social,Universidad Nacional.Colombia.



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Pino Alea Jorge A; Ariel G. Ortega Luis, Arístides Rosado Pérez, Mayra Rodríguez Jorge, Baluja Ricardo .(s.f). Composición y propiedades antibacterianas del aceite esencial de Lippia alba (Mill.) n. e. Brown.

Sánchez Orozco, Manuel Salvador and Bonilla Correa, Carmen Rosa. and Guzmán Rivera, Sandra Patricia (2004) El Cultivo de Pronto Alivio Lippia alba (Miller.) N.E. Browm ex Britton & Wilson . Universidad Nacional sede Palmira. Colombia.

Garbarino Juan A;Salvatore Giusepppe, Pivanovo Marisa,Chamy Marìa Cristina,Nicoletti Marcelo, Ioannes Alfredo.(2002). VOLATILE COMPOUNDS OF LITHRAEA CAUSTICA (LITRE) DETERMINATED BY SOLID PHASE MICRO-EXTRACTION (SPME).

Ciudad y fecha de entregaMedellín – Agosto del 2014


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