Análisis de compuestos traza en muestras...

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Análisis de compuestos traza en muestras ambientales

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Análisis de compuestos traza en muestras ambientales

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Contaminación Ambiental

Presencia de compuestos químicos específicos,Presencia de compuestos químicos específicos, naturales o antropogénicos, que provocan efectos nocivos sobre la salud o los ecosistemasnocivos sobre la salud o los ecosistemas

QuímicosQuímicos Biológicos Sanitarios Sanitarios Legislativos, etc...

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Análisis AmbientalOrigen (Caracterización de fuentes)Transporte y distribuciónP d d d ió bióti / biótiProcesos de degradación biótica o/y abiótica (¿nuevos contaminantes tóxicos?)

Destino final (bioacumulación, etc)Destino final (bioacumulación, etc)Efectos Límites legales

Identificación y Análisis de compuestosquímicos en el medio ambiente 

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Límites exigidos por la normativaLímites exigidos por la normativaNo Título Compuestos orgánicos Límites (ug/L) 75/440/EEC Aguas superficiales Cyfluthrin 0.001 Hidrocarburos 50-1000

Permerthrin 0.01

ppb

Permerthrin 0.01 Plaguicidas 1-5.0

Fenoles 1-100

Hidrocarburos aromáticos policíclicos (PAHs) 0.2-1.0

80/778/EEC Agua para consumo humano Plaguicidas individuales 0.1 Plaguicidas totales 0.5

Benzo 3 4 pireno 0 01 Benzo-3,4-pireno 0.01 Tetracloruro de carbono 3.0 Tricloroetano 30.0 Tetracloroetano 10.0 Trihalometanos 100.0 Fenoles 0.5

PAH 0 2 PAHs 0.276/659/EEC Aguas con peces Cyfluthrin 0.001

Flucofuron 1.0

PCSDs i PAD 0.05

Permethrin 0.01

Sulcofuron 25.0

76/464/EEC Substancias peligrosas Lista 1 Tetracloruro de carbono 12.0 Cloroformo 12.0

DDT 0.01 Endrin 0.005 Aldrin 0.01 Dieldrin 0.01 Isodrin 0.005 Hexaclorobenceno 0.03 Hexaclorobutadieno 0.01 Lindano 0.11 Pentaclorofenol 2.0

1 2-dicloroetano 10 0 1,2-dicloroetano 10.0 Percloroetileno 10.0

Triclorobenceno 0.1

Tricloroetileno 10.0

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Determinación de compuestos orgánicos trazaDeterminación de compuestos orgánicos traza

Hidrocarburos alifáticos

Hidrocarburos aromáticos

Aldehidos Aldehidos

Alcoholes y fenoles

Anilinas y benzidinasy

VOCs (Disolventes clorados)

SOCs (PCBs, dioxinas)

Plaguicidas apolares y polares

Ftalatos i adipatos

Tensioactivos Tensioactivos

...y muchos más

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Análisis Ambiental

l i id d Matrices complejasSelectividad Matrices complejas

Compuestos con un gran intervalo de

Universalidadgran intervalo de propiedades fisico‐químicas

Sensibilidadquímicas.

Analitos a nivel de traza ( b t)(ppb, ppt)

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ál íf l dAnálisis específicos vs multiresiduos

• Determinación de un solo compuesto o grupo de

• Determinación del máximo número de contaminantescompuesto o grupo de 

compuestos en una matriz ambiental específica

número de contaminantes con propiedades físico‐químicas diferentesp q– Metabolitos

– Contaminación global

– ......EPA Priority PollutantsProtocols

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Análisis AmbientalToma de muestra

Tratamiento previo% Tiempo de análisis

P ifi ió

ExtracciónToma muestra

Tratam muestra7 %6 %

6-20 %Purificación(Clean-up)

Tratam. muestra

Análisis

Tratam. datos

68 %

Análisis InstrumentalGC

HPLC

Tratam. datos

HPLCGC-MS; HPLC-MS

Cuantificación

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Compartimentos medioambientales

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Análisis AmbientalToma de muestra

Tratamiento previo

Extracción

Purificación(Clean-up)

Análisis InstrumentalGC

HPLCHPLCGC-MS; HPLC-MS

Cuantificación

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Análisis Ambiental

Toma de muestra

Tratamiento previo

Toma de muestra

Eliminación agua

Sedimentos, suelos

ParticuladoEliminación agua

Agua

ParticuladoEliminación agua

Aire

Eliminación agua

Organismos

Eliminación material gruesoTamizado (>250 µm, 63 µm)

Eliminación agua Eliminación agua

Digestión ácida o alcalina

Homogeneizar

Homogeneizar

Homogeneizar

LiofilizaciónSecado en horno (35‐40 oC)

Eliminación agua

Secado en horno (35 40 C)Tratamiento con desecantesPre‐extracción con disolventes orgánicos miscibles en aguaorgánicos miscibles en agua

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Análisis Ambiental

Tratamiento previo

Toma de muestra Contaminantes orgánicos

i l ió di l á i

Extracción

Tratamiento previo Disolución con disolventes orgánicos(hexano, diclorometano, tolueno, acetona,…)

Matrices acuosas

Extracción con fluidos

Matrices sólidas

Líquido-Líquido Extracción sólido-líquidoExtracción en fase sólida

Extracción con fluidossupercríticos (SFE)

Extracción sólido-líquido

Ultrasonidos Sohxlet Extracción asistida por microondas(MAE)

Extracción con disolventes acelerada(ASE)

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Matrices acuosas. Extracción líquido‐líquido

Se extrae el total de componentes ( i l d di l )(particulado+disuelto)

Consumo de grandes cantidades de disolvente– Problema medioambiental

– Problema de blancos

– Paso de eliminación del disolvente pérdidas

Protocolos largosg

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Extracción en fase sólida (SPE)

Paso a través de un adsorbente de sílica modificada químicamente (cadenas hidrocarbonadas C8 y C18, polímeros, inmunoadsorbentes)

Se extraen solo los componentes disueltos (filtrar previamente)p ( p ) Muy versátil Rápida y sencilla (automatización) Relativamente barata Relativamente barata Bajo consumo de disolventes A considerar :

o Volumen de rupturao Capacidado Limpiezao Limpieza

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Adsorbentes en SPE

Identificar y cuantificar múltiples familias de contaminantes con un intervalo amplio de propiedadescontaminantes con un intervalo amplio de propiedades físico‐quimicas y estructuras químicas

Fases sólidas de alquilsilica o poliméricasFases sólidas de alquilsilica o poliméricas

Identificar y cuantificar un número limitado de compuestos de una misma clase químicacompuestos de una misma clase química

Molecularly imprinted polymers (MIPs)

Fases sólidas de immunoafinidadFases sólidas de immunoafinidad

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Ot té i d t ió d t iOtras técnicas de extracción de matrices líquidas

• Microextracción en fase sólida (SPME)– Uso de una fibra recubierta de un polímero adsorbente– Uso de una fibra recubierta de un polímero adsorbente que se pone en contacto con la muestra acuosa, posteriormente se puede introducir directamente en el sistema cromatográficosistema cromatográfico

• Extracción con barra agitadora adsorbente.– Semejante a la anterior pero el material adsorbenteSemejante a la anterior pero el material adsorbente recubre una barra agitadora donde se adsorben los compuestos de interés. Posteriormente se realiza la desorción directamente en el cromatógrafodesorción directamente en el cromatógrafo.

• Sistemas con membranas semipermeables (SPMDs)( )

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Métodos de extracción de matrices sólidas

Convencionales Novedosos

Extracción líquida Soxhlet Ultrasonidos SFE MAEASE

Disminuir la cantidad de disolventeExtracciones más rápidasMejorar la cuantificación (mayores recuperaciones, j ( y p ,

más reproducibilidad, límite de detección menores)AutomatizaciónSelectividad (menor importancia)

Manipulación de las propiedades físicas del agente extractante (P, T)( p ) g ( , )Aplicación de sorbentes selectivos

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Extracción en SoxhletExtracción en Soxhlet

R f i tRefrigerante

Muestra(Cartucho deCelulosa)

100-200 ml disolvente

1-200 gr

Calor

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Diagrama de fases

Intervalo de operación de P y T del agente extractante para las diferentes  SFEg ptécnicas de extracción sólido‐líquidoASE, accelerated solvent extractionMAE Microwave assisted extraction

PcSFE

MAE, Microwave assisted extractionSFE, supercritical fluid extractionPc, presión críticaTc temperatura crítica

Soxhlet

ASEMAE

Tc, temperatura críticaSonicación Tc

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Fluidos Supercríticos

•DIFUSIVIDAD ALTA•VISCOSIDAD BAJA•TENSIÓN SUPERFICIAL NULA

GAS

•TRANSFERENCIA DE MASA RAPIDA•BUENA PENETRACION EN MATERIALES POCO POROSOS•BUENA PENETRACION EN MATERIALES POCO POROSOS•BUENA SOLUBILIZACIÓN COMPUESTOS DE INTERES

•ALTO PODER SOLVATANTE LIQUIDO

D id d lt i bl f(P T) E t iDensidad alta y variable f(P,T) ExtraccionesSelectivas

CO (Tc 31 1 oC Pc 72 9 atm )CO2 (Tc= 31.1 oC, Pc= 72.9 atm.)Analitos polares Modificadores

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Técnicas de extracción de compuestos orgánicos en matrices sólidas

Soxhlet Sonicación SFE MAE ASE

Tiempo p Disolventes 

Costes Automatización

Automatización Dificultad de optimización

optimización

Robustez

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Análisis AmbientalToma de muestra

Tratamiento previo

Extracción

Purificación(Clean-up)

Análisis InstrumentalGC

HPLCHPLCGC-MS; HPLC-MS

Cuantificación

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Análisis Ambiental

Toma de muestra

Tratamiento previo

Toma de muestra

Interferencias más importantes:

Extracción• Lípidos• Azufre• Carotenoides

Purificación(Clean-up)

• Carotenoides• Pigmentos...

Cromatografia de adsorción en columna

Ataque ácido o básicoAtaque ácido o básico

Extracción en fase sólida (SPE)

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Clean up del extracto

Cromatografía de columna líquido‐sólido

apolarFase estacionaria polar

Fase móvilPolaridad creciente

– Adsorbentes más comunes:• Sílice (uso general)• Alúmina • Florisil (Clean‐up de plaguicidas organoclorados)• Poliestireno, poliacrilamida, p• Geles para GPC (Por ej.: Sephadex LH‐20, Bio‐Beads SX) (Clean‐up de muestras con alto contenido lipídico)

• Inmunoadsorbentes

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Eliminación de azufre

Reacción con mercurio

Sulfuro de mercurio

Reacción con cobre

Sulfuro de cobre

Reacción con sulfito de sodio en hidróxido de Reacción con sulfito de sodio en hidróxido de tetrabutilamonio

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Concentración del analito

Evaporación del disolvente a presión reducida (rotavapor)

K d D i h Kuderna‐Danish

Corriente de nitrógeno

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Análisis AmbientalAnálisis Ambiental

Tratamiento previo

Toma de muestra

Extracción

p

Purificación(Clean-up)

Análisis IntrumentalGC

HPLCGC-MS; HPLC-MS

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Sistemas de Cromatografía

Volatilidad

Cromatografíade gases (GC)

Cromatografía

de gases (GC)

g fLíquida (HPLC)

Polaridad(Solubilidad en agua)

Baja Alta

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Cromatografía de gases

1-2 µl RegistradorIntegradorGas portador

Inyector

IntegradorOrdenador

250-300 oC

yecto

Horno + DetectorHorno + columna

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C t fí dCromatografía de gases

Los analitos se evaporan a temperatura alta (250 300oC) y se hacenLos analitos se evaporan a temperatura alta (250‐300oC), y se hacen pasar  por una columna cromatográfica. Separación isoterma o por gradiente de temperatura.

Fase móvil gas inerte: He, H (gas portador, carrier) Columnas capilares de sílice fundida (0,25 mm d.i. x 25‐50 m; espesor 

de capa 0.25 µm) Normalmente con la fase líquida (WCOT)  Fases más utilizadas: silicones 

OV 1: Metilsilicones OV‐1: Metilsilicones OV‐17:metilfenilsilicones OV‐210: trifluoropropilsilicones

Detectores universales (FID) y selectivos: ECD, FPD, NPD.

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Fases estacionariasPolidimetilsiloxano

Polietilenglicol

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Cromatografía de gases. Detectores Detector Universal

Detector de ionización de llama (FID)o Universalo Destructivoo Estable y linealy

Detectores Selectivos Detector de captura de electrones.

o Para compuestos con grupos electronegativos (halogenados,..)o No destructivoo Rango lineal estrechog

Detector de nitrógeno‐fósforoo Para compuestos con N y Po Destructivoo Destructivoo Moderadamente lineal

Detector fotométrico de llama.C t S S (dif t filt )o Compuestos con S y Sn (diferentes filtros)

o Destructivoo No lineal

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Detector de Ionización de Flama (FID)Consiste en una llama deConsiste en una llama dehidrógeno‐aire por la que pasael efluente de la columna.El paso del efluente de laEl paso del efluente de lacolumna por esta llama ionizalas moléculas orgánicas.Los iones producidos se recogenLos iones producidos se recogenen un electrodo de polarizaciónnegativa y dan lugar a una señaleléctricaeléctrica.El FID es muy sensible y es eldetector más ampliamenteutilizado su desventaja es queutilizado, su desventaja es quedestruye la muestra.

Empleado para hidrocarburos, poco sensible a compuestos muy oxidados

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Detector de Nitrógeno Fósforo, NPD

Detector FID con una pastilla de metal alcalino (Rubidio oCesio)Cesio)

También conocido como detector de ionización de flamaTambién conocido como detector de ionización de flamaalcalino, detector de ionización (TID), detector termoiónicode flama (FTD) o detector específico termoiónico (TSD).

Al calentar el material alcalino en la zona de la llama sedetectan selectivamente y con gran sensibilidad loscompuestos orgánicos que contienen fósforo y nitrógeno.

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Detector de Captura de electrones (ECD)

Utiliza un emisor beta radioactivo

Detector de Captura de electrones (ECD)

Utiliza un emisor beta radioactivopara ionizar parte del gas portador ypara producir una corriente deelectrones entre un par deelectrones entre un par deelectrodos.Cuando las moléculas orgánicas quecontienen grupos funcionalescontienen grupos funcionaleselectronegativos, tales comohalógenos, fósforo y grupos nitro,pasan por el detector, capturanpasan por el detector, capturanalgunos de los electrones y reducen lacorriente medida entre los electrodos.Rango lineal limitado, sensible y noRango lineal limitado, sensible y nodestructivo

Empleado frecuentemente paracompuestos halogenados

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Características Detectores

Detector Límite de d ó

Rango lineal Comentarios Tratamientoldetección g soluto

FID 10‐12 106‐107 Detector l

Destructivouniversal

ECD 10‐14 102‐103 Detector Selectivo

No destructivoSelectivo

FPD 10‐13 102 Detector Selectivo S,P

Destructivo

NPD 10‐8‐10‐14 105‐107 Detector Selectivo N,P

Destructivo

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HPLC. Cromatografía líquida de alta resolución

• Generalmente en fase inversa: fase estacionaria de C8‐C18; fase móvil acuosa con acetonitrilo, metanol o etanol.

Ú– Útil para substancias:• alto peso molecular

• baja volatilidad

• lábiles, degradaciones térmicas

• polares   Si son muy polares: cromatografía de par iónico o en fase normal (aminopropil, fases ó il di l t á i )móviles con disolventes orgánicos)

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HPLC. Detectores

Detector de ultravioleta‐visibleDetector de ultravioleta visible

Detector de fluorescencia

Detector de batería de diodos (Diode‐array)

Baja selectividadBaja sensibilidad

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Espectrometría de MasasEspectrometría de Masas

Identificación inequívoca de sustancias en matrices complejas (CG CL )

Selectividad

complejas (CG,CL...)

Análisis de sustancias con propiedades fisico‐químicas 

l d dp p qdistintas (átomos a biopolímeros)

áli i i i

Universalidad

Análisis cuantitativos (límites de detección ppb, ppt) 

Sensibilidadpp )

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Espectrómetro de Masas

ió 6 8

Introducciónmuestra

Presión ~ 10-6-10-8 Torr

muestra

+ ++++

+

+ ++100 %

++++ M/Z

Fuente de iones (Ionización)

Analizador (Separación)

Detector de iones(Detección)

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Acoplamiento GC/LC‐MSSeparación

Acoplamiento GC/LC‐MS

100p

cromatográfica100

%

Ionización2 00 4 00 6 00 8 00 10 00 12 00 14 00 16 00 18 00rt0

%

t (min)2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00

100 218

Análisis espectral

% 162

220

% 162

8315484

12398

164

165177 216

222284223 256 288

masa/carga100 150 200 250 300

0223 256 288

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HAP. Análisis por CG‐EM (SIM)

TIC (SIM) +

+

Rango lineal :250 10 000 ng/ml (ppb) tR (min)Rango lineal :250-10.000 ng/ml (ppb)LDD (S/N =3) : 2,5 - 10,5 pg

R ( )

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Sistemas de Introducción

GASES CROMATOGRAFIA GASES CAPILARGASES CROMATOGRAFIA GASES CAPILAR

Conexión directa

LÍQUIDOS LC, EC Interfases especialesDLI

MEMBRANA PB

CF‐FAB

SÓLIDOS SONDA DIRECTATSPAPcI

ESP (ionspray)

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Interfases CL‐EM

INTRODUCEN MUESTRA

Haz de partículas (ParticleINTRODUCEN E IONIZAN

Introducción directa (DLI) Haz de partículas (Particle beam  PB)

Cinta móvil (moving belt)

Introducción directa (DLI)

Termospray (TSP)

Bombardeo con átomos( g ) Bombardeo con átomos rápidos a flujo continuo (CF‐FAB)

Ionización a presión atmosférica (API)

Electrospray (ESP) Ionspray Ionización química a Ionización química a

presión atmosférica(APcI)

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Sistemas de Introducción

ElectrosprayPeso Mol.

ElectrosprayIonspray

Particle APCI

CF-FAB

CG/EMParticleBeam

APCITermospray

Polaridad(Solubilidad en agua)

Baja Alta

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CL‐EM. Aplicaciones descritas en la literatura

250

300

MBL

150

200

cio

ne

s

MBL

TSP

PB

50

100

150

Pu

bli

ca

c PB

ESP

APcI

0

50

79-80 81-82 83-84 85-86 87-88 89-90 91-92 93-94 95-96 97-98

Nº APcI

79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98

Años

W.M.A. Niessen, en: D. Barceló (Ed.), Applications of LC-MS in Environmental Chemistry. J. Chromatography Lib. Vol 59, Elsevier Sc. Amsterdam, Holanda (1996).

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Métodos de ionización

Ionización por Impacto Electrónico (IE)I i ió Q í iIonización Química

Ionización Química Positiva Ionización Química Negativa Ionización Química Negativa Ionización Negativa por Captura de Electrones

Ionización/Desorción de CampoIonización/Desorción por PlasmaIonización por Bombardeo de Atomos Rápidos (FAB)Ionización MultifotónicaIonización Laser Asistida por Matriz (MALDI)I i ió Pl d A l i t I d ti (ICP)Ionización por Plasma de Acoplamiento Inductivo (ICP)

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Métodos de ionización en EM

Impacto de electrones (70 eV).o Mucha energía, muchas fragmentaciones

o Universal

Ionización química negativa y positivao Técnicas de ionización suaves, poca fragmentación (ión molecular)

o Selectivas, compuestos electronegativos o electropositivos

o Método de ionización en HPLC‐EM

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El cuadrupolo consiste de cuatro cilindros metálicos paralelosp pentre los que se forma un campo magnético, los iones con ciertarelación (m/z) pasan a través del cuadrupolo, el resto soneliminados El sistema trabaja en condiciones de alto vacío para eleliminados. El sistema trabaja en condiciones de alto vacío para eltransporte de los iones a través del analizador (10‐9 torr).

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Avances recientes en las técnicas deAvances recientes en las técnicas de separación y detección

Cromatografía de gasesDesarrollo de nuevas fases estacionarias (separaciones quirales), contaminantes enantiómeros con diferente t i id d (b t i l d t i )toxicidad (beta‐ciclodextrinas)

Cromatografía de gases rápida

fí d bidi i lCromatografía de gases bidimensional

Sistemas de inyección de grandes volúmenes (100‐200 l)ul)

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Cromatografía de gases bidimensional (GC x GC)Cromatografía de gases bidimensional (GC x GC)

Los componentes de una mezcla se separan mediante el uso de dos columnas cromatográficas de diferente selectividad.

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A i t l té i dAvances recientes en las técnicas de separación y detección

Cromatografía de líquidosDesarrollo de nuevas fases estacionarias.

Fases estacionarias con partículas de tamaño < 2um (sistemas d Ult P f Li id Ch t h UPLC )de Ultra Performance Liquid Chromatography –UPLC‐)

Incremento de aplicaciones de “microbore LC”(columnas de diámetro interno de 1 mm en(columnas de diámetro interno de 1 mm en comparación con las columnas convencionales de 2‐4 mm)Mayor eficacia de separación

Mayor sensibilidad

Menor consumo de disolventes

Costes de análisis más bajos

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Avances recientes en las técnicas de separación y detección

E t t í dEspectrometría de masas

Incremento del uso de la espectrometría de masas con analizador de tiempo de vuelo (Time‐f li h O S)of‐Flight, TOF‐MS).

Espectrometría de masas multidimensional (MS/MS MS )(MS/MS, MSn)

Espectrometría de masas de relación isotópica, b d 13C/12C 18O/16 15N/14Nsobre todo 13C/12C, 18O/16 y 15N/14N.

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TOF MSTOF‐MS Convencionales (cuadrupolo, magnético y trampa de iones): usan Convencionales (cuadrupolo, magnético y trampa de iones): usan 

un campo eléctrico o magnético para separar los iones con diferente m/z, velocidad de adquisición hasta 10 espectros/s

TOF mide el tiempo que un ión necesita para “viajar” a través de TOF mide el tiempo que un ión necesita para  viajar  a través de una región libre, los iones generados en la fuente se aceleran hacia el tubo de vuelo. Los tiempos de vuelo son del orden de los microsegundos, obteniéndose entre 100‐500 espectros/s.microsegundos, obteniéndose entre 100 500 espectros/s.Mayor resolución que los espectrómetros convencionales (cuadrupolos, trampa de iones < 1.000) aprox 5000, aunque menor que los espectrómetros magnéticos de alta resolución (>10.000)q p g

Proporciona el espectro de masas total de los compuestos al contrario de los magnéticos que trabajan en un rango de masas estrecho.

Velocidad de adquisición muy alta, mayor sensibilidad (técnica apropiada para GC x GC). 

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ANÁLISIS DE COMPUESTOS ORGÁNICOS VOLÁTILES (VOCs)

Técnicas

Headspace (espacio de cabeza)

Purge and Trap (Purga y Trampa)principales

g p g y p

Desorción con CS2

Microextracción en fase sólidaMicroextracción en fase sólida

Extracción térmica directa

Purga y Trampa

Purga del cartucho

Captación del aire

Primera desorción:desorción térmica de los cartuchos

Refocalización de los analitos en una trampa criogénica

Segunda desorción: desorción térmica de la trampa y transferencia -inyección de los analitos a la columna cromatográficacromatográfica

Separación, identificación y cuantificación de los analitos

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DESORCIÓN TÉRMICA

Primera desorción: desorción térmica de los compuestos retenidos en eladsorbente del cartucho a una T de 300ºC durante 5 minutos yrefocalizados hacia una trampa criogénica que contiene Tenax TA a T de-30ºC

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Segunda desorción: desorción térmica de los compuestos retenidosg pen el adsorbente de la trampa a una T de 300ºC y transferidos a lacolumna cromatográfica

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Análisis de COVs en aire.

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Análisis de VOCs en agua y matrices sólidas

• Headspace (espacio de cabeza).

– Estático

– Dinámico

Gas inerte Trampa CG

Espacio de cabezaGas inerte Trampa CG

Muestra

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Microextracción en fase sólida (SPME)

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Aplicaciones de SPME

350

400

250

300

350

150

200

0

50

100

01990-95 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002

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Análisis AmbientalToma de muestra

Tratamiento previo

Extracción

Purificación(Clean-up)

Análisis InstrumentalGC

HPLCHPLCGC-MS; HPLC-MS

Cuantificación

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Cuantificación

• Calibración con patrones externos e internos (identificación por tiempo de retención)(identificación por tiempo de retención)

• Blancos del procedimiento• Determinación de

– sensibilidad– límite de detección

i t l d li lid d

Validación del método

– intervalo de linealidad– precisión– exactitud– robustez – interferencias del método

C fi ió GC MS HPLC MS• Confirmación por GC‐MS o HPLC‐MS

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% Errores generados en el% Errores generados en elanálisis de la muestra

Calibrado

9%11%

6%7%

8%

CalibradoColumnasOperadorTratam. muestra

19%4%

6%6% Tratam. muestra

ContaminaciónInyeccionIntegración

30%

IntegraciónCromatografíaInstrumentación

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ErroresErrores Equivocaciones (error en la pesada mal etiquetado error de Equivocaciones (error en la pesada, mal etiquetado, error de 

transcripción, intercambio de muestras) Ocasionales Pueden afectar a una muestra o a todas Pueden afectar a una muestra o a todas De tipo cualitativo o/y cuantitativo Controlables a través de los programas de control de calidad. Pueden o no ser medibles Pueden o no ser medibles 

Errores sistemáticos De tipo cuantitativo N dibl No medibles

Errores “al azar” Controlables a través de los programas de las muestras de 

t l d lid dcontrol de calidad. A mayor número de muestras y replicados menor error.

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Control de calidad Falsos positivos : Objetivo

Comprobar: eficiencia de la extracción

Interferencias de la muestra o contaminación externaFalsos negativos: Se concluye que un

eficiencia de la extracción pérdidas en las etapas de clean up pureza de los blancos S ió áfi

contaminante no aparece cuando en realidad si está en cantidades detectables:

B j i Separación  cromatográfica

Procedimiento Añadir  un “surrogate”, compuesto similar a nuestro analito, pero no presente en 

Bajas recuperacionesInterferencias que enmascaran

la muestra. Como mínimo una muestra de la serie por duplicado Muestra certificada o repetida “Muestra ciega” Blancos Calibrado del aparato con 4 puntos mínimo y comprobación periódicap p y p p

Criterios de calidad: Recuperación entre 50‐130% Diferencia entre los dos duplicados <25% Diferencia entre los dos duplicados <25% Blanco no tendría que dar niveles detectables del analito límite de 

cuantificación.