Universidad Autónoma de Yucatán

Facultad de Ingeniería QuímicaMicrobiología industrial

Lic. en Química IndustrialNoveno semestre

M. en C. Diana Escalante Rendiz

Por:Br. Karerina Camara Segura

Br. Daniel Ojeda TuzBr. Mariela Lope Navarrete

Br. Karina Canché Pech

06/09/10

Aislamiento de algas

Métodos de muestreo y recolección•La mayoría de los métodos de colección de algas han sido creados por botánicos.

• Las muestras son aisladas de forma representativa en su hábitat.

•Es importante limitar el número de muestras por hábitat a solo dos o tres.

•Información básica de las muestras: fecha, ubicación, características de la muestra, temperatura, pH y el clima.

Métodos de muestreo y recolección

• Las muestras se dividen en cuatro grupos

•Las muestras se ordenan dentro de cada grupo de acuerdo a las características biofísicas(pH, salinidad).

•División, separación de muestra y exanimación microscópica determinan la técnica y medio de cultivo que han de ser utilizados.

•Los contenedores para la recolección de muestras pueden ser bolsas, tubos de polipropileno, botellas, espátulas, pinzas y “pipetas gigantes” estériles.

a) b) d)c)

Métodos de dilución basados en aislamiento

• Los métodos de dilución basados en el aislamiento de algas son adecuados para propósitos de revisión, debido a que:1. Son aplicables a todo tipo de muestra.2. Son relativamente simples.3. Son rápidos.4. Dan buenos resultados.

Métodos de dilución basados en aislamiento

• Para muestras de agua de 1 ml o una porción de 1g (suelos, sedimentos, etc.) se realiza lo siguiente:

Se elimina de la muestra

original

Se transfiere a un tubo con 9 ml de diluyente.

Si la muestra es sólida se añaden al tubo cuentas de vidrio (2 mm).

Se agita la mezcla hasta que la muestra este muy dispersa y diluida.

Métodos de dilución basados en Aislamiento (para aislar cianobacterias filamentosas)

• Ahora la muestra diluida se utiliza de la siguiente manera:20 ml de

líquido “A.A” en tubos de

ensayo individuales

Introducir a un baño de agua a 45°C

Añadir 1 ml de dilución de la muestra a cada tubo.

• Utilizar las tres últimas diluciones.•Trabajar con rápidez.•Garantizar la homogenidad de la muestra agitando o aplicando un vortex.

Vaciar en una caja de petri e incubar en presencia de luz.

Métodos de propagación en placa(para aislar cianobacterias filamentosas y unicelulares)

Retire 0.1 ml de la dilución

Métodos de aislamiento en racha(para aislar cianobacterias unicelulares y los miembros Chlorophyta)

Métodos de aislamiento en caldo(para aislar especies inhibidoras en sustratos sólidos)

Método de aislamiento filtrado/ estampado • Implica el filtrado de muestras a través de papel de filtro para concentrar microorganismos de una solución diluida en suspensión.

•Se filtra de 10 a 20 mI de muestra a través de papel Whatman no. 1, usando un embudo Büchner.

•El papel filtro es estampado en placas de agar, cuando éste se ha completado, el filtro se coloca boca arriba en el fondo de una caja de Petri, cubiertas con agar fundido (45ºC), y se incuban.

Otros métodos utilizados para aislar las algas • El micromanipulador; es utilizado

ya que pueden ser recogidos pequeños fragmentos unicelulares, multicelular y filamentosos, de forma individual y transferidos a un medio apropiado.• • Las desventajas de este

procedimiento son la fatiga ocular y la posibilidad de que falten especies.

• Otro método consiste en utilizar una micropipeta capilar fotosintética y es útil para aquellas algas con una respuesta fototácticas, como Euglena.

Siembra y purificación

• Las placas y los tubos deben ser examinados bajo el microscopio, si es necesario hay que rediluir o utilizar micromanipulador.

•Las colonias se recogen con una aguja de disección.

•El medio de mantenimiento debe reflejar el hábitat original de la alga para garantizar la viabilidad y estabilidad.