› ...camelidos › ... COEXISTENCIA DE VIRUS Y BACTERIAS EN NEUMONÍAS …sadas mediante la...

317

Rev Inv Vet Perú 2012; 23 (3): 317-335

1 Laboratorio de Microbiología y Parasitología Veterinaria, Facultad de Medicina Veterinaria, Uni-versidad Nacional Mayor de San Marcos. Av. Circunvalación 2800, San Borja, Lima, Perú

2 CONOPA – Instituto de Investigación y Desarrollo de Camélidos Sudamericanos, Jr. Centenario 195,Block C-201, Urb. Las Laderas de Melgarejo, La Molina Lima, 12, Peru

3 E-mail: [email protected]

COEXISTENCIA DE VIRUS Y BACTERIAS EN NEUMONÍAS AGUDASEN ALPACAS NEONATAS

VIRAL AND BACTERIAL COEXISTENCE IN ACUTE PNEUMONIA IN NEONATAL ALPACAS

Erick Cirilo C.1, Alberto Manchego S.1, Hermelinda Rivera H.1,Raúl Rosadio A.1,2,3

RESUMEN

A pesar que las neumonías agudas son una de las principales causas de muerteneonatal en alpacas, poco se conoce sobre agentes etiológicos responsables de estosprocesos. Muestras de neumonías fatales de 24 neonatos de 5 a 39 días de edad fueronanalizadas mediante estudios patológicos, virológicos (inmunofluorescencia directa) ybacteriológicos para identificar virus [parainfluenza 3 (PI-3), respiratorio sincitial bovino(BRSV)] y bacterias [Pasteurella multocida (PM), Mannheimia haemolytica (MH)],buscando posible asociación virus-bacteria en procesos neumónicos.Histopatológicamente, las lesiones se agruparon en tres tipos: 1) Severa y difusabronconeumonía fibrino-necrotizante supurativa (n=3); 2) Leve a moderada y difusabronconeumonía supurativa (n=10); y 3) Moderada a severa y difusa congestión y ede-ma pulmonar (n=11). En 22/24 de los casos se identificaron agentes virales y se aislaronbacterias. En 8/22 casos se identificaron/aislaron agentes únicos (5 virus y 3 bacterias),en 10 de 22 casos fueron positivos para infecciones duales [BRSV y bacteria (n=7), PI3 ybacteria (n=2) y ambas bacterias (n=1)] y en los cuatro restantes se identificaron trespatógenos simultáneamente [BRSV, PI3 y bacteria (n=3); y PI3 más las dos bacterias(n=1)]. La prueba de inmunofluorescencia detectó 19/22 positivos a antígenos virales. En13/19 de estos casos se identificó al BRSV y en 9/19 al virus PI-3 (ambos virus estuvieronpresentes en tres casos). En 16/22 casos se lograron aislar bacterias, 11 de los cualesfueron positivos a P. multocida y 7 positivos a M. haemolytica (en dos casos se aislaronambas bacterias). La presencia de patógenos múltiples fue observada en 14/22 de loscasos con clara predominancia de la asociación virus/bacteria (n=13). La coexistencia deBRSV-PM fue la más frecuente (n=6), seguida de BRVS-MH (n=4) y PI3-PM o MH (n=4).Los resultados sugieren posible interacción patogénica virus bacteria, similares a otrosrumiantes, en el desarrollo de neumonías agudas en alpacas.

Palabras clave: alpaca neonata, neumonía aguda, PI-3, BRSV, P. multocida, M. haemolytica

Sitio Argentino de Producción Animal

1 de 19

Rev Inv Vet Perú 2012; 23 (3): 317-335318

E. Cirilo et al.

ABSTRACT

The etiopathogenesis of acute pneumonia, the second most important cause ofmortality among Peruvian neonatal alpacas, is still poorly understood. The objective ofthis study was to characterize gross and histopathology lesions, as well as to identifyviruses [parainfluenza type 3 (PI-3) and bovine respiratory syncytial (BRS)] by directimmunofluorescence test, and isolate bacteria [Pasteurella multocida (PM) andMannheimia haemolytica (MH)] from 24 fatal acute pneumonia cases of 7-39 days-oldneonates. At necropsy the gross lesions corresponded to moderate purulent focalbronchopneumonia or severe necrotic purulent fibrinous (n=13), and moderate to severepulmonary congestion and edema (n=11). Histopathological analysis revealed: acute,severe, and diffuse necrotizing, fibrinous, suppurative bronchopneumonia (n=3), acutemild to moderate and focally diffuse suppurative bronchopneumonia (n=10), and acute,moderate to severe diffuse congestion and pulmonary edema (n=11). Among these 24cases, 22 yielded virus identification and/or bacterial isolation. Eight cases were positiveto one pathogen (5 for viruses and 3 for bacteria), 10/22 were positive for two pathogens[BRSV plus bacteria (n=7), PI-3 plus bacteria (n=2), and one for both bacteria)], and 4/22positive for 3 pathogens [BRSV, PI-3 plus bacteria (n=3), and PI-3 plus both bacteria(n=1)]. Among the affected lung tissue, virus was identified 19 times (13 positive forBRSV, 9 for PI-3, and 3/19 for both viruses) whereas bacteria was isolated 14 times [P.multocida (n=8), M. haemolytica (n=6), and both bacteria (n=2)]. The presence of multiplepathogens was observed in 14/22 positive cases with an observation of virus-bacteriaassociation in 13/14 of the cases. The coexistence of BRSV-PM was the most frequentlyobserved (6/13), followed by the simultaneous presence of BRSV-MH (4/13) and PI-3 PMor MH (4/13). The results appear to indicate that acute pneumonia in alpaca neonatesmay well result from virus and bacterial interactions in a similar way to pneumonic lesionsof other ruminants.

Key words: neonatal alpaca, acute pneumonia, PI-3 virus, BRSV, P. multocida, M.haemolytica

INTRODUCCIÓN

En el Perú, la crianza de camélidos sud-americanos constituye una importante fuen-te de ingresos económicos para las empre-sas asociativas, pequeños productores y co-munidades campesinas de la región andina(Ameghino y DeMartini, 1991). La producti-vidad de esta ganadería, sin embargo, no esla adecuada pues, endémicamente, se obser-va una elevada mortalidad de crías y bajanatalidad. Las enfermedades infecciosas,principalmente los procesos entéricos yneumónicos, constituyen las dos principalescausas de mortalidad neonatal durante lasprimeras semanas de vida (Ramírez, 1991;Melo, 1997; Victorio et al., 2003).

A pesar que las neumonías agudas sonla segunda causa de muerte en animalesneonatos, el conocimiento sobre los agentesdesencadenantes de estos procesos son muyexiguos. Escasamente, en el Perú, existendescripciones macro y microscópicas de le-siones neumónicas prevalentes y aislamien-tos frecuentes de Pasteurella spp (Ameghinoy Calle, 1989; Arratia, 1991; Mamani, 1992).Posteriores estudios serológicos realizados enanimales procedentes de comunidades cam-pesinas evidencian presencia de anticuerpospara agentes virales neumopatógenos bovi-nos, principalmente el virus de la parainfluenzatipo 3 (PI-3) y virus respiratorio sincitial bo-vino (BRSV) (Rivera et al., 1987; Manche-go et al., 1998; Victorio et al., 2003).


2 de 19

319Rev Inv Vet Perú 2012; 23 (3): 317-335

Neumonías agudas en alpacas neonatas

Con el objetivo de elucidar la posibleasociación virus bacteria en la presentaciónde neumonías agudas, se procedió a identifi-car y aislar agentes patógenos en 24 tejidosneumónicos de animales neonatos proceden-tes de estaciones experimentales, empresasasociativas y criadores individuales de la sie-rra del sur del Perú. Las muestras patológi-cas fueron analizadas macro y micros-cópicamente y usadas en la identificación deagentes virales mediante la prueba de lainmunofluorescencia (IF) directa para los vi-rus PI3 y BRSV, así como para aislamientomicrobiológico en medios de cultivo bajoambiente aeróbico en busca de bacteriaspotencialmente patogénicas, comoPasteurella multocida y Mannheimiahaemolytica.

MATERIALES Y MÉTODOS

Lugar de Estudio

El estudio de campo se realizó durantelas campañas de parición (enero-marzo de2004 y 2005) en el Centro de Investigación yProducción (CIP) La Raya UNA-Puno y enel Centro Experimental (CE) La RayaUNSAAC-Cusco. Ambos establecimientosse encuentran en el límite vial de los depar-tamentos de Puno y Cusco, dentro de un áreageográfica con altitudes desde 4128 hasta4362 msnm. Además, se tomaron muestrasen los sectores Antacalla y Huripiña, de laEmpresa de Propiedad Social (EPS) RuralAlianza, distrito de Nuñoa, provincia deMelgar, departamento de Puno.

Animales

Se estudió 24 crías muertas con diag-nóstico presuntivo de neumonía o padecien-do de alguna alteración patológica en el sis-tema respiratorio. De estas muestras, 13 fue-ron del CIP La Raya UNA-Puno, ocho delCE La Raya UNSAAC-Cuzco y tres de laEPS Rural Alianza-Puno. Estos animales te-nían una edad promedio 20 ± 9 días (5-39

días) y un peso promedio al nacimiento de 7± 1 kg. La mayoría de estos animales (n=21)fueron hallados muertos después de la ins-pección diaria en las puntas de parición. Conexcepción de dos crías, el resto (n=22) nohabía recibido antibioterapia alguna. Lascarcasas fueron conducidas a las salas denecropsia de los respectivos centros de crian-za, aunque a veces, la necropsia se realizó enla misma punta de parición. Generalmente,las necropsias se hicieron de inmediato, perosiempre dentro de las 12 horas de la muerte.

Estudio Patológico Macroscópico

El examen postmorten se concentróprincipalmente en el sistema pulmonar yganglios linfáticos regionales utilizando la téc-nica convencional de necropsia (Zanabria etal., 2000). La extensión y localización de laslesiones fueron plasmadas en un diagramapulmonar y la ficha de necropsia.

Las alteraciones macroscópicas fueronclasificadas de acuerdo a la severidad de laslesiones observadas a la necropsia. A pesarde que los pulmones de la alpaca carecen decisuras interlobulares (López, 1993), lo queimpide la descripción o división anatómicalobular tradicional de otras especies domesti-cas, para la descripción de las lesiones se uti-lizó los términos: lóbulo apical (craneal), ló-bulo intermedio (cardiaco), lóbulo caudal(diafragmático) y lóbulo accesorio (en el pul-món derecho). Estas descripciones utilizanconocimientos de la ramificación del árbolbronquial (López, 1995) y ventilación de lasprincipales ramas bronquiales descritas porViera et al. (1968).

Toma de Muestras

Las muestras de tejidos para el análisishistopatológico, de aproximadamente 1 cm3,fueron obtenidas después de abrir la cavidadtorácica y fueron conservadas en frascos conformol amortiguado al 15%. Similarmente,muestras de tejido pulmonar y ganglios re-gionales, tomados asépticamente, fueron de-positadas en crioviales y mantenidos en tan-


3 de 19

Rev Inv Vet Perú 2012; 23 (3): 317-335320

E. Cirilo et al.

que de nitrógeno líquido para posterior identi-ficación viral.

Se tomaron muestras de secreciónbronquial y exudado del parénquima pulmonarafectado mediante el uso de hisopos estéri-les. Las muestras se depositaron en tubos deensayo estériles conteniendo medio de trans-porte Stuart, y se remitieron en refrigeración,dentro de las 48 horas postrecolección, alLaboratorio de Bacteriología de la Facultadde Medicina Veterinaria, Universidad Nacio-nal Mayor de San Marcos, Lima.

Estudio Histopatológico

Las muestras de pulmón fueron proce-sadas mediante la técnica histológica conven-cional utilizando la inclusión en parafina ycoloración con hematoxilina-eosina (HE) paradescribir las lesiones microscópicas. La du-ración del proceso inflamatorio fue conside-rado como hiperaguda, aguda, subaguda ycrónica.

En la evaluación del grado de severidadde las lesiones y la duración del proceso in-flamatorio se utilizó la clasificación de Slausony Cooper (2002), considerando grados deseveridad leve (muy poca o ninguna destruc-ción tisular, ligera evidencia de implicanciavascular [hiperemia y edema] y escasa exu-dación); moderado (daño tisular y reacción ala injuria, expresada por la acumulación deleucocitos y eventos vasculares); y severo(daño tisular considerable con abundanteexudación).

Detección de Antígenos Virales

En la detección de antígenos virales (PI3y RSB) en las muestras se utilizó la pruebade inmunofluorescencia directa conanticuerpos policlonales específicos y conju-gados con isotiocianato de fluoresceína(VMRD Inc., EEUU) siguiendo las instruc-ciones del laboratorio fabricante y metodo-logía del laboratorio utilizada para lesionessimilares en muestras bovinas (Zanabria etal., 2000).

Aislamiento e Identificación Bacterio-lógica

Las muestras biológicas remitidas enmedio de transporte Stuart fueron sembra-das en Agar Sangre y McConkey e incuba-das en aerobiosis por 20 horas a 37 ºC. Parala identificación de Pasteurella multocida yMannheimia haemolytica se consideraronlas características culturales propias a la co-loración de Gram, crecimiento en agarMcConkey y reacciones bioquímicas (Cowan,1974).

RESULTADOS

La mayoría de los animales en estudiose encontraron muertos o moribundos en elcampo sin poderse obtener antecedentes clí-nicos por parte de los pastores encargadosdel cuidado de los rebaños de parición; sinembargo, en una cría, pocas horas antes demorir, se logró observar debilidad, postración,anorexia, disnea y estertores húmedos a laauscultación pero sin secreciones nasales,oculares ni tos. Este animal, a la necropsia,tenía una extensa neumonía fibrino-necrotizante.

Hallazgos Macroscópicos

Las lesiones más severas (n=13) fue-ron agrupadas como neumonías extensivasfibrinonecrotizantes (n=3) y bronconeumoníasbilaterales necróticas purulentas (n=10). Entodos estos casos, las lesiones fueron bilate-rales afectando principalmente regiones crá-neo-ventrales y en tres casos la pleura esta-ba adherida a las paredes costales. Los 11casos restantes mostraron cuadros de con-gestión y edema pulmonar.

Neumonías extensivas fibrinonecro-tizantes

Los tres pulmones afectados estuvieronaumentados de tamaño mostrando consoli-daciones rojizas en el parénquima cráneo/


4 de 19

321Rev Inv Vet Perú 2012; 23 (3): 317-335


ventral pulmonar, afectando lóbulos apicales,intermedio, accesorio y la región anterior delos lóbulos caudales (Fig. 1a). Las lesionesse extendieron en un caso hasta los lóbuloscaudales. Se observó abundante depósito dematerial filamentoso cremoso sobre la super-ficie pleural del parénquima consolidado (pleu-ritis fibrinosa) (Fig. 1a). En 2/3 casos estabacomprometido el pericardio (pericardititis) yhubo adherencias a la pleura que dificultaronla remoción pulmonar, mostrando abundanteexudado fibrino-sanguinolento en la cavidadtorácica (Fig. 2).

El parénquima consolidado, al corte,mostró firmeza y de color rojizo oscuro, flu-yendo abundante líquido sanguinolento y exu-dado purulento de los conductos respiratorios.Se observó formaciones blanco-grisáceasmultifocales levemente elevadas, demarca-das irregularmente, de 0.1-1.0 cm de diáme-tro, penetrando el tejido consolidado y de con-sistencia friable (necrosis focales) al corte.El resto del parénquima, no consolidado, sepresentó igualmente enrojecido con engrosa-miento focalizado de las cisuras interlobulares(Fig. 1b). Los ganglios bronquiales estuvie-ron fuertemente enrojecidos y aumentados detamaño, fluyendo al corte un líquido blanque-cino (edema).

Neumonías bilaterales purulentas

Se encontró hepatizaciones rojizas bila-terales, localizadas principalmente en lóbulosapicales e intermedios, comprometiendo, enalgunos casos, los lóbulos caudales (Fig. 3).Al corte, el parénquima afectado mostrabauna consistencia firme, aspecto uniforme yde coloración rojiza intensa, emanando mo-deradas cantidades de exudado muco-puru-lento que involucraban a los conductos respi-ratorios. El parénquima adyacente a las zo-nas consolidadas, en grados variables, esta-ba enrojecido y lleno de líquido sero-sangui-nolento. La mucosa traqueal y bronquial mo-deradamente enrojecida (congestión). En 2/10 casos, los lóbulos caudales presentaronburbujas elevadas sobre la superficie pleural(bulas enfisematosas) matizados con grados

de enrojecimiento y mostrando, al corte, ema-naciones de líquido sero-sanguinolento. Losganglios bronquiales estaban moderadamen-te aumentados de tamaño, enrojecidos y fluíalíquido transparente al corte.

Congestión y edema pulmonar

Los 11 casos de este grupo mostraronaumento prominente del tamaño de ambospulmones, con apariencia muy húmeda, bri-llante y crepitante al tacto. Al corte, las áreasafectadas presentaron un enrojecimiento di-fuso y exudaciones de copiosa cantidad delíquido sero-sanguinolento, y abundante líqui-do espumoso rosado (edema) en los lúmenestraqueales y bronquiales. En un caso, al sec-cionar el parénquima, se observó pequeñosfocos rojizos (posibles consolidaciones) loca-lizados en la región cráneo-ventral, mientrasque en otros casos se encontró bulasenfisematosas, principalmente en la superfi-cie dorsal de los lóbulos caudales. Los gangliosbronquiales se hallaron levemente aumenta-dos de tamaño y ligeramente enrojecidos.

Hallazgos Microscópicos

Las alteraciones histopatológicas corres-pondieron a las lesiones macroscópicas y seagruparon en tres tipos: a) severa y difusabronconeumonía fibrinonecrotizante agudasupurativa (3/24), b) leve a moderadabronconeumonía aguda supurativa (10/24), yc) moderada a severa, difusa congestión yedema pulmonar (11/24).

Severa y difusa bronconeumonía fibrino-necrotizante aguda supurativa

Las lesiones comprometían el parén-quima y la pleura. En las zonas más afecta-das se observó una severa y extensa pérdidade la arquitectura pulmonar con presencia denumerosas masas irregulares de tejido necro-sado con una coloración rosada en la zonacentral y violácea en la periferia (Fig. 4). Enotras áreas, se observó focos de necrosiscoagulativa, distorsión tisular y abundantedetritus celulares compactados de coloración


5 de 19

Rev Inv Vet Perú 2012; 23 (3): 317-335322

E. Cirilo et al.

basófila, así como nidos bacterianos, princi-palmente cocobacilares, y abundante célulasinflamatorias polimórficas en procesos denecrosis (Fig. 5a). Los espacios alveolaresdel parénquima adyacentes a focosnecrosados contenían abundante exudadoconformado por células neutrofílicas, fibrina

y macrófagos (Fig. 5b), mientras que en al-gunas zonas se visualizó extravasación deglóbulos rojos hacia los espacios alveolares.Los bronquios y bronquiolos en las zonas com-prometidas contenían exudado compuestoprincipalmente por leucocitos polimorfonu-cleares y detritus celulares, obliterando la luz

Figura 1. Pulmones de alpacas crías muertas con problemas respiratorios. A. Pulmón la-teral derecho positivo a PI-3 mostrando consolidación en lóbulo apical y fibrinaen lóbulo intermedio (flecha). B. Vista medial del mismo pulmón mostrando con-solidación apical y formaciones blanquecinas multifocales en lóbulo apical e in-termedio (flechas blancas) y engrosamiento de los septos interlobulares en ellóbulo diafragmático (flecha negras)

Figura 2. Cavidad torácica de animal positivo a M. haemolytica mostrando depósitos de fibrina,severas adherencias pleurales (flechas) y acumulación de líquido fibrino-sanguinolen-to (cabeza de flecha)


6 de 19

323Rev Inv Vet Perú 2012; 23 (3): 317-335


en algunos casos (Fig. 6a). Las célulasepiteliales bronquiolares evidenciaban dege-neración y aún pérdida ciliar, llegando en al-gunos casos a desnudamiento y exfoliacionescelulares focalizadas. En otras áreas, lapletorización de vasos sanguíneos mayoresera evidente y asociada a una severa con-gestión capilar en los septos interalveolares(Fig. 6a), que en algunos casos comprome-tían a arteriolas y vénulas con formación detrombos (Fig. 5b).

La pleura, en todos los casos, superfi-cialmente mostraba abundante depósito defibrina acompañado de engrosamiento deltejido conectivo subpleural e infiltrados porpolimorfonucleares, asociado con pletoriza-ción vascular y linfática, así como moderadaextravasación de glóbulos rojos (Fig. 6b). Al-gunas veces, la necrosis comprometía la re-gión subpleural con abundante materialfibrinoso y supurativo, acompañado de detri-tus, necrosis y desprendimiento del mesoteliopleural (Fig. 6b). En estas áreas, los septosinterlobulillares estuvieron engrosados por unamoderada infiltración neutrofílica,pletorización de vasos linfáticos y abundantefluido proteináceo eosinofílico (edema).

Los ganglios linfáticos bronquiales pre-sentaron una severa y difusa hemorragiacortical y severa depleción linfoide con pre-sencia de edema y necrosis en la zonamedular. Uno de estos tres casos fue positi-vo a M. haemolytica y PI-3, el segundo aM. haemolytica y P. multocida, y el terceropositivo al virus PI-3 sin aislamiento bacterial(Fig. 1). En este último caso, sin embargo, lacría había recibido tratamiento antibiótico yse encontró nidos bacterianos cocobacilaresque impiden descartar la participaciónbacteriana.

Leve a moderada y difusa bronconeu-monía aguda supurativa

Las lesiones en este segundo grupo va-riaron, de acuerdo a la implicancia de los even-

tos vasculares, magnitud del daño tisular yparticipación inflamatoria, desde leve a mo-derada. En los casos leves, se visualizó ligerainfiltración inflamatoria neutrofílica en espa-cios alveolares, escasa cantidad de fluidoeosinofílico en los alveolos (edema) y mode-rada pletorización de los capilares alveolares,arteriolas y vénulas (congestión). En algunoscasos, se visualizó degeneración del epitelioalveolar y desprendimiento epitelial enbronquiolos y bronquios, con escaso compo-nente inflamatorio neutrofílico en la luz y enla submucosa bronquial (Fig. 7a).

En los casos moderados, la pletorizaciónde los capilares alveolares y la salida de flui-do eosinofílico (edema) en los espaciosalveolares fueron más evidentes. Todos es-tos cambios fueron, usualmente, acompaña-dos de moderada infiltración neutrofílica y,en algunos casos, de detritus y célulasmononucleares (macrófagos y linfocitos) (Fig.7b). El epitelio alveolar y bronquiolar mostra-ron necrosis marcada, llegando aexfoliaciones celulares y focalizadodesnudamiento epitelial, mientras que en otras,moderada hiperplasia del epitelio bronquiolar(Fig. 8). En los espacios alveolares ybronquiolares se observó moderada infiltra-ción neutrofílica acompañado de exudadofibrinoso, detritus celular y, eventualmente,macrófagos con presencia, a veces, depigmentos de hemosiderina. La pleura y losseptos interlobulillares mostraron, en dos ca-sos, ligero engrosamiento del tejido conjuntivocon presencia de líquido eosinofílico (edema)y leve pletorización de los vasos sanguíneossubpleurales. En la mayoría de los casos, losganglios linfáticos bronquiales presentaronmoderada congestión difusa.

Congestión y edema pulmonar aguda mo-derada a severa y difusa

En este grupo predominaron los even-tos vasculares asociados a moderada a se-vera pletorización de vénulas, arteriolas ycapilares alveolares, mezclados con abundan-te edema en los espacios alveolares, com-prometiendo los espacios bronquiolares y te-


7 de 19

Rev Inv Vet Perú 2012; 23 (3): 317-335324

E. Cirilo et al.

jido conectivo subpleural. En algunos casos,la extravasación de eritrocitos penetraba laluz y paredes alveolares asociado a una se-vera congestión capilar, engrosando los septosalveolares (Fig. 9). El componente inflama-torio fue mínimo, con escasas célulaspolimorfonucleares neutrófilicas en el inters-ticio y alveolos. En los espacios alveolares seobservaron abundantes depósitos dehemosiderina y, en algunos casos, ruptura delas paredes alveolares por el excesivo ensan-chamiento de alvéolos enfisematosos (Fig.10). El epitelio bronquiolar y bronquial, mos-traba en forma focalizada, hiperplasias y exfo-liación con incremento de secreción mucoideen el lúmen bronquiolar.

Antígenos Virales y Aislamiento Bacte-riológicos

Detección viral

La mayoría de los casos (22/24) fueronpositivos a agentes patógenos. En ocho ca-sos se identificaron patógenos individuales(virus o bacteria), en 14 casos se detectaroninfecciones múltiples (duales y triples) conasociación virus y bacteria. Los dos casosnegativos, correspondieron a animales concambios macroscópicos y alteraciones mi-croscópicas de tipos congestivos yedematosos difusos.

La prueba de inmunofluorescencia di-recta identificó 19/22 casos positivos aantígenos virales, donde 13 correspondieronal virus BRS y 9 al virus PI-3. En 3/19 casosse observó la presencia de ambos virus. En 8de los 13 casos positivos a BRSV (Fig. 11a),las lesiones correspondieron a bronconeu-monía supurativa difusa aguda, y en los cincorestantes, a congestión y edema pulmonardifusa. Cuatro de los 9 casos positivos a PI-3(Fig. 11b) tenían cuadros de congestión yedema pulmonar, tres presentabanbronconeumonía supurativa difusa aguda ydos tenían bronconeumonía fibrino-necrotizante supurativa difusa aguda.

Aislamiento bacteriológico

En 16/22 casos se aislaron bacterias.Once fueron positivos a Pasteurellamultocida y siete fueron positivos aMannheimia haemolytica (en 2 casos seaislaron ambas bacterias). Además, en doscasos se aisló Echerichia coli (ambos mos-trando lesiones de moderada y difusabronconeumonía supurativa) y en uno se ais-ló levaduras. Dos de los cuatro aislamientosnegativos fueron de animales que recibieronantibioterapia.

De los 11 casos positivos a aislamientode P. multocida, seis crías presentaron con-gestión y edema pulmonar, cuatro presenta-ron bronconeumonía supurativa difusa aguday un caso fue de bronconeumonía necrotizantefibrino-supurativa difusa aguda.

De los siete casos positivos a M.haemolytica, tres mostraron bronconeumoníasupurativa difusa aguda, dos fueron diagnos-ticados como bronconeumonía fibrino-nectrotizante supurativa difusa aguda y losdos restantes con cuadros de congestión yedema pulmonar.

Asociación entre agentes patógenos y cam-bios histopatológicos

En 14/22 casos se detectaron infeccio-nes múltiples (virus y bacterias) con una ma-yor proporción (n=10) de infecciones dualesy en cuatro casos se tuvo la presencia detres agentes patógenos. En las infeccionesduales, la asociación BRSV-P. multocida fuela más frecuente (n= 4), seguida de BRSV-M. haemolytica (n=3), PI-3-P. multocida(n=2), y BRSV-PI-3 (n=1). En los casos deinfecciones triples, la asociación entre BRSV/ PI-3 y P. multocida fue observada dos ve-ces, mientras que la coexistencia de BRSV /P. multocida / M. haemolytica y PI-3 / P.multocida / M. haemolytica fueron obser-vaciones únicas (Cuadro 1). En los ocho ca-sos positivos restantes se observó la partici-


8 de 19

325Rev Inv Vet Perú 2012; 23 (3): 317-335


Figura 3. Pulmón derecho de cría de alpaca, positivo a BRSV y PI-3, mostrando ligeras conso-lidaciones multifocales en lóbulo apical y en vértice del lóbulo cardiaco (izquierda de lalínea entrecortada)

Figura 4. Parénquima pulmonar de cría de alpaca con severa pérdida de arquitectura pulmonar,con focos irregulares de necrosis coagulativas (estrellas) delimitada por áreas basófilascon infiltración leucocitaria (flechas), congestión, vasos pletorizados en tejido adya-cente y compromiso bronquial (cabeza de flecha) (HE 5X)


9 de 19

Rev Inv Vet Perú 2012; 23 (3): 317-335326

E. Cirilo et al.

Figura 5. Cortes histológicos de pulmones de crías de alpaca con severa y difusa bronconeumoníafibrinonecrotizante aguda supurativa. A. Detalle de foco necrótico coagulativo mos-trando siluetas de células parenquimales e inflamatorias en vías de necrosis (regiónsuperior izquierda), acumulación de detritus y nidos bacterianos (flechas) (HE 400X).B. Parénquima pulmonar con abundante exudado fibrinoso (flechas cortas), infiltra-ción neutrofílica (flechas largas) en los espacios alveolares, pletorización de vasossanguíneos y congestión capilar (HE 100X)

Figura 6. Cortes histológicos de pulmones de crías de alpaca con severa y difusa bronconeumoníafibrinonecrotizante aguda supurativa. A. Detalle de una severa congestión de los ca-pilares interalveolares, y presencia de fibrina mezclada con neutrófilos (cabezas deflecha), macrófagos (flechas) y detritus celulares en los espacios alveolares (HE 400X).B. Pulmón afectado con fibrina en superficie pleural (cabeza de flecha), moderadainfiltración leucocitaria, congestión, dilatación de vasos linfáticos (flechas) y septointerlobulillar engrosados (estrella) por edema e infiltración leucocitaria (HE 100X)


10 de 19

327Rev Inv Vet Perú 2012; 23 (3): 317-335


Figura 8. Cortes histológicos de pulmones de crías de alpaca con leve a moderada y difusabronconeumonía aguda supurativa. A. Parénquima pulmonar, positivo a BRSV, negati-vo a bacterias (previo tratamiento con antibiótico), mostrando infiltración principal-mente PMN neutrofílica en espacios alveolares, hiperplasia epitelial bronquiolar y abun-dante material eosinofílico mezclado con neutrófilos y detritus celulares en el lumen.(HE 400X). B. Parénquima pulmonar, positivo a BRSV y P. multocida, con severacongestión capilar y edema en espacios alveolares y abundante material proteináceo yescasos neutrófilos en lumen bronquiolar e hiperplasia epitelio bronquiolar (HE 400X).

Figura 7. Cortes histológicos de pulmones de crías de alpaca con leve a moderada y difusabronconeumonía aguda supurativa. A. Tejido pulmonar, positivo a RSV, negativo abacterias (previo tratamiento antibiótico), con desprendimiento epitelial bronquial yleve infiltración de neutrófilos en el lumen (cabezas de flechas) y submucosa (fle-chas). (HE 400X). B. Parénquima pulmonar, positivo a BRSV y P. multocida, eviden-ciando masiva infiltración de PMN neutrófilicos en espacios alveolares y bronquiales,severa congestión y necrosis coagulativa focal (flechas) (HE 100X)


11 de 19

Rev Inv Vet Perú 2012; 23 (3): 317-335328

E. Cirilo et al.

Figura 9. Cortes histológicos de pulmones de crías de alpaca con congestión y edema pulmonaraguda moderada a severa y difusa. A. Parénquima pulmonar, positivo a BRSV, PI-3y P. multocida, con severa congestión pasiva difusa, engrosamiento de septosinteralveolares por infiltración celular, hemorragia focalizada (HE 100X). B. Tejidopulmonar, positivo a BRSV, PI-3 y P. multocida, con hiperplasia y desprendimientodel epitelio bronquial acompañado de secreción proteináceo (flechas). Obsérvese enel parénquima adyacente el engrosamiento de septos interalveolares por insipienteinfiltración celular y severa congestión (HE 100X)

Figura 10. Cortes histológicos de pulmones de crías de alpaca con congestión y edema pulmonaraguda moderada a severa y difusa. A. Tejido pulmonar, positivo a P. multocida,positivo a BRSV, con severa dilatación de los alvéolos y destrucción de las paredesalveolares (enfisema) (HE 400X). B. Parénquima, con moderada infiltracióninflamatoria mononuclear en intersticio, hemorragia difusa y degeneración epitelialbronquiolar (HE 400X)


12 de 19

329Rev Inv Vet Perú 2012; 23 (3): 317-335


Figura 11. Resultados con la prueba de inmunofluorescencia directa. A. Tejido pulmonar mos-trando reacción positiva a PI-3. Nótese la fluorescencia intracitoplasmática (fle-chas). B. Muestra positiva a BRSV mostrando fluorescencia intracitoplasmática(flechas)

Cuadro 1. Asociación de lesiones histopatológicas y resultados microbiológicos

Tipo de lesión N.º de agentes Agentes patógenos Frecuencia

(n)

Bronconeumonía aguda fibrinonecrotizante supurativa severa y difusa (n=3)

3 PI-3, MH, PM 1 1 PI-3 1 1 MH 1

Bronconeumonía aguda, leve a moderada supurativa y difusa (n=10)

3 BRSV, PI-3, PM 1 2 BRSV, PM 3 2 BRSV, MH 2 2 BRSV, PI-3 1 1 BRSV 1 1 PI-3 1 1 MH 1

Congestión y edema pulmonar aguda, moderada a severa y difusa (n=11)

3 BRSV, PM, MH 1 3 BRSV, PI-3, PM 1 2 PI-3, PM 2 2 BRSV, PM 1 2 BRSV, MH 1 1 PI-3 1 1 PM 1 1 BRSV 1 0 -- 2

Total 24

BRSV: Virus respiratorio sincitial bovino PI-3: Virus Paranfluenza tipo 3 PM: Pasteurella multocida MH: Mannheimia haemolytica


13 de 19

Rev Inv Vet Perú 2012; 23 (3): 317-335330

E. Cirilo et al.

pación de un solo agente, con predominanciade PI-3 (n=3), seguido de BRSV (n=2), M.haemolytica (n=2) y P. multocida (n=1).

DISCUSIÓN

Las neumonías agudas, segunda causade muerte neonatal, ocasionan enormes pér-didas en la producción y productividad de lasalpacas en el Perú, y suelen presentarse aso-ciadas con factores estresantes medioam-bientales y a manejos del rebaño tales comoparición, destete, esquila, baños y dosifi-caciones antiparasitarias (Ameghino yDeMartini, 1991). En este esquema, las críasy los animales jóvenes sufren infecciones fa-tales por agentes patógenos neumotrópicos(Martín, 1996; Zanabria et al., 2000). Losresultados obtenidos en el presente estudioconfirman la posible asociación de agentesvirales (Virus respiratorio sincitial yParainfluenza tipo 3) y agentes bacterianos(P. multocida y M. haemolytica) en la pre-sentación de procesos neumónicos agudos.Estos agentes, al parecer, son capaces deproducir lesiones neumónicas en animalesneonatos expuestos a factores climáticosestresantes (época lluviosa), que se presen-tan durante la campaña de parición en el país.

Los resultados del examen macros-cópico de los 24 casos estudiados revelan queneonatos afectados por neumonías muestranuna serie de alteraciones patológicas, varian-do desde cambios severos descritos comoneumonía extensiva necrótica-purulenta aso-ciada con pleuritis fibrinosa (3/24) y neumo-nías bilaterales purulentas (10/24), hasta cua-dros congestivos y edematosos pulmonares(11/24). Las alteraciones más severas com-prometían ambos pulmones, principalmentea niveles cráneo-ventrales (severashepatizaciones), acompañado de pleuritisfibrino-hemorrágica (Fig. 1). Estos tipos delesiones han sido descritos como lesiones tí-picas de neumonías agudas en alpacas(Ameghino y DeMartini, 1991) y, al parecer,son lesiones que deben corresponder a lasdenominadas neumonías lobares o

bronconeumonías fibrinosas descritas enneonatos bovinos y ovinos, causadas por agen-tes bacterianos altamente patogénicos, o porinfecciones de etiología multifactorial(Dungworth, 1993; López, 1995; Piojan et al.,1999).

Los tres casos más severos en el estu-dio, descritos como neumonías extensivas, sonde alguna manera, lesiones similares a lasneumonías multilobulares de terneros y cor-deros (Dungworth, 1993). El término lobar,sin embargo, no es el más adecuado enalpacas, pues esta especie animal carece decisuras interlobulares, lo que impide dividir lospulmones en lóbulos como ocurre en el bovi-no y ovino (López, 1993). Esta peculiaridadanatómica, también explicaría la dificultad deobservar engrosamiento de los septosinterlobulares, como sucede usualmente enel bovino. El abundante depósito de fibrina,sin embargo, fue evidente en los dos anima-les que presentaron nítidas adherenciaspleurales (Fig. 2). La severidad de estas le-siones necesita un mayor tiempo evolutivo,pues fueron observadas en crías con edadesmayores (31 días) que los animales con neu-monías bilaterales purulentas (18 días) y con-gestión y edema pulmonar (20 días). Por otrolado, estas lesiones abarcaron ambos pulmo-nes, pero comprometiendo principalmente ellóbulo apical derecho, que podría deberse aque la tráquea de la alpaca, antes de dividirsey formar los dos bronquios principales, daorigen a una pequeña rama bronquial quepenetra en el lóbulo apical derecho (Viera etal., 1968).

Los cambios macroscópicos descritoscomo neumonía bilateral purulenta (10/24)difieren del anterior grupo por la escasa pre-sencia de focos necróticos en el parénquimapulmonar y la baja frecuencia de pleuritisfibrinosa (1/10). Las lesiones correspondena una moderada a intensa consolidación roji-za parenquimal, igualmente a nivel cráneo-ventral, con tendencia a ser extensiva y conexudado muco-purulento. Las lesiones con-cuerdan con las neumonías agudas reporta-das por Ameghino y DeMartini (1991) y las


14 de 19

331

descritas como neumonías hemorrágicas agu-das en crías menores de un mes de alpacas(R. Perales, datos no publicados). Estos ti-pos de neumonías, desprovistas de lesionesdistintivas y circunscritas de tipo “parches”,corresponderían a las reportadas comobronconeumonías supurativas en especiesbovinas (Dungworth, 1993; López, 1995).

La carencia de cisuras interlobulares deestos animales podría explicar la facilidad paraalcanzar una distribución difusa y en perio-dos muy tempranos de la infección pulmonar.La congestión y edema en la mayoría de los11 casos fue muy marcada, produciendo unintenso enrojecimiento, agrandamiento y bri-llantez tisular. Indudablemente, estos cambioscorresponderían a las primeras alteracionesdel daño pulmonar en todo proceso inflama-torio sobreagudo o agudo que se observa enestados iniciales de procesos neumónicos fa-tales en terneros y corderos (Kimberling etal., 1988; Martin, 1996).

Los cambios histopatológicos observa-dos reflejaron las alteraciones macroscópicas.Los casos diagnosticados como neumoníasextensivas (n=3) tuvieron cuadros microscó-picos mucho más severos, comprometiendoparénquima pulmonar, pleura adyacente yganglios linfáticos regionales. Microscó-picamente, los cambios correspondieron a unabronconeumonía aguda fibrino-necrotizantesupurativa y difusa. Estas lesiones, en térmi-nos generales, son muy similares a las des-critas como bronconeumonías fibrinosas ypleuroneumonía en animales domésticos don-de se observa el compromiso pleural dentrodel proceso inflamatorio (Dungworth, 1993;López, 1995). La naturaleza aguda de las le-siones se sustenta en la presencia de una se-vera congestión capilar y abundante exuda-do fibrinoso dentro de los espacios alveolares,septos interlobulillares y pleura (Figs. 5b y6a), así como la abundante infiltracióninflamatoria mixta de macrófagos yneutrófilos (Fig. 6a). Asimismo, la severidadde la lesión se refleja por la extensa y difusanecrosis coagulativa asociada a la consisten-te presencia de nidos bacterianos (Figs. 4 y

5a). Cambios, igualmente, muy similares a loscorrespondientes a neumonías agudas ysubagudas en otros tipos de animales(Dungworth, 1993; Ferreira de la Cuesta,2003).

Las lesiones histopatológicas descritascomo bronconeumonía supurativa difusa agu-da, encontradas en 10/24 de los casos, sonmuy similares a las bronconeumonías supura-tivas descritas en rumiantes (Dungworth,1993; López, 1995). Estos cambios suelencaracterizarse por tener cierta orientaciónbronquiolar, y tal vez expliquen el posible ini-cio infeccioso en la unión bronquiolo/alveolary extensión bronquial por depósitos de agen-tes patógenos en estas regiones vulnerables,ocasionando exudado inflamatorio y presen-cia de detritus celular que oblitera el lumende bronquios, bronquiolos y espacios alveo-lares. Estas alteraciones son comúnmenteobservadas en neumonías aspirativas(aerógenas) usualmente asociadas a agentesbacterianos (Martin, 1996). Las lesiones ob-servadas en este segundo grupo, variaron enintensidad del compromiso vascular, infiltra-ción celular y destrucción epitelial alveolar,bronquial y bronquiolar (Figs. 7a y 8a). Loscasos más dramáticos comprometían destruc-ción epitelial asociada a extensas zonasnecróticas acompañada, algunas veces, conzonas extensivas de desnudamiento celulardel epitelio bronquial y bronquiolar, y abun-dante exudado y detritus celularesintraluminales (Figs. 7b y 8b). Estas altera-ciones han sido atribuidas como consecuen-cia de replicaciones virales (Davies et al.,1981; Bryson et al., 1983; Domachowske yRosenberg, 1999).

En los 11/24 de los casos con lesionesmacroscópicas de congestión y edemapulmonar, la histopatología corroboró los cam-bios anatómicos. Las alteraciones histopatoló-gicas mostraron una extensiva pletorizaciónde vasos capilares alveolares y engrosamientode los septos interalveolares por infiltraciónde escasa reacción inflamatoria y depósitosde abundante material proteináceoeosinofílico (edema) en los espacios alveo-


15 de 19

332

lares (Fig. 9a). Las lesiones estuvieron acom-pañadas de necrosis y degeneración deepitelios bronquiales y bronquiolares, así comodiversos grados de hiperplasia celular (Fig.9b); incluso se pudo identificar una severaextravasación eritrocítica asociada a ruptu-ras de paredes alveolares (enfisema) (Fig.10a). Los cambios enfisematosos son común-mente observados en estadios de recumbenciay en estadios finales de infeccionespulmonares ocasionadas por la dificultad res-piratoria e inspiraciones forzadas y profun-das causales de ruptura de paredes alveolares,con la consecuente formación de enfisema yhemorragia (Fig. 10a).

La identificación y aislamiento simultá-neo de agentes neumopatógenos en el 63%de los casos positivos, indican que las lesio-nes pulmonares agudas en crías de alpacaserían consecuencia de infecciones múltiples,de manera muy similar a los rumiantes(Davies et al., 1981; Kimberling et al., 1988;Martin, 1996). En 22/24 casos estudiados selogró identificar o aislar agentes patógenos yen 14 de estos casos hubo asociación de vi-rus/bacteria con predominancia de infeccio-nes duales (n=10) seguido de presencia detriples agentes (n=4) (Cuadro 1). Las aso-ciaciones duales y triples del BRSV fueronfrecuentemente observadas en animales pa-deciendo bronconeumonía supurativa difusaaguda y congestión y edema pulmonar agu-do, respectivamente. La identificación del vi-rus PI3 fue detectada preferentemente eninfecciones únicas. El virus PI3 se presentómayormente en los casos con lesiones demayor severidad (bronconeumonía fibrino-necrotizante supurativa difusa).

Las lesiones macro y microscópicasobservadas en el presente estudio tienden areflejar los diferentes estadios patológicos detodo proceso inflamatorio. Las manifestacio-nes iniciales, al parecer, se concentran en loscasos diagnosticados como cuadros de con-gestión y edema pulmonar. En estos anima-les, la infección viral es más prevalente sugi-riendo al virus como posible factor inicial enlos procesos neumónicos. En nueve de las 10

crías, en este grupo, se identificaron agentesvirales bajo la forma de infecciones únicas(n=2), infecciones duales (n=4) y triples (n=2)(Cuadro 1). Las infecciones virales en estoscasos, podrían ser responsables de las lesio-nes necróticas observadas a nivel epitelial(bronquial, bronquiolar y/o alveolar) desen-cadenando, consecuentemente, congestión,extravasación sanguínea, hemorragias y for-mación de membranas hialinas (Bryson et al.,1979); lesiones consistentemente observadasen la mayoría de los animales afectados eneste grupo (Figs. 9A y 9B).

Las lesiones más complicadas sevisualizaron en animales padeciendo debronconeumonía supurativa. En estas crías,se detectó la presencia mayoritaria del virusBRS (8/10) como infecciones únicas (n=1),duales (n=6) y triples (n=1), sugiriendo a estevirus como el principal posible factorpatogénico predisponente. El virus BRS tie-ne capacidad lítica del aparato mucociliar y,consecuentemente, hiperplasia celular enbronquios y bronquiolos, favoreciendo la co-lonización bacteriana. La elevada presenciadel virus BRS en infecciones duales y triples(7/10), principalmente asociada con P.multocida (n=4), M. haemolytica (n=2) ovirus PI3 (n=2) (Cuadro 1), refuerza a estevirus como uno de los principales agentesproductores de neumonías en alpacas, y co-rrobora la elevada prevalencia de este virusen alpacas de crianza comunitarias del surdel Perú (Manchego et al., 1998; Victorio etal., 2003).

Por otro lado, llama la atención la pre-sencia del virus PI3 en 2/3 casos afectadoscon bronconeumonía fibrino-necrotizante(Cuadro 1) y en uno de estos casos asociadocon M. haemolytica y P. multocida. Estevirus, en corderos, es implicado como el prin-cipal factor predisponente para la severidadde las bronconeumonías asociadas principal-mente a M. haemolytica (Davies et al., 1986;Kimberling et al., 1988). En esta asociación,se conoce que el virus PI-3 produce cambiosdegenerativos y necrosis de las célulasepiteliales bronquiolares y alveolares e


16 de 19

333

hiperplasia del epitelio alveolar con forma-ción de sincitios multinucleares y las bacte-rias responsables de la exudación fibrinosa(Bryson et al., 1979; Davies et al., 1981;Yener et al., 2005). Con excepción de pre-sencia de sincitios, se observaron lesionesdegenerativas y necróticas a nivel del epite-lio alveolar y bronquiolar (Fig. 4) con severocompromiso pleural.

Es interesante señalar que los depósi-tos fibrinosos en rumiantes son generalmen-te a consecuencia de hiperinfecciones de M.haemolytica en animales expuestos a facto-res estresantes, incluyendo infecciones viralesprimarias (Davies et al., 1981, 1896; Trigo,1998; Ferreira de la Cuesta, 2003). La pre-sencia de M. haemolytica en dos de los trescasos más severos tiende a confirmar estaaseveración, sin poder descartar su partici-pación en el tercer caso, ya que había recibi-do antibioterapia y presentaba nidosbacterianos cocobacilares intralesionales (Fig.5a). El aislamiento de Pasteurella yMannheimia en lesiones neumónicas corro-boran los reportes iniciales de P. multocida(Ameghino y Calle, 1989), P. multocida y P.haemolytica (Mannheimia) (Arratia 1991)de muestras neumónicas de crías de alpacasen el altiplano peruano.

A pesar de que en el presente estudiono se elucidaron factores ambientales, el im-pacto ambiental es bastante evidente en lacrianza de alpacas andinas pues la crianza esde manera extensiva y las pariciones ocu-rren en los meses más húmedos del año(Ameghino y DeMartini, 1991). Las mues-tras del presente estudio fueron colectadasen la época de parición, donde generalmentese observan eventos climáticos extremos conlluvias copiosas, nevadas, y presencia de losdenominados “veranillos” (periodos cortos deausencia de lluvias y cambios bruscos de tem-peratura). Estos cambios medioambientalesson situaciones estresantes para el reciénnacido que deben impactar en el sistema dedefensa inmune, sobre todo del tracto respi-

ratorio, predisponiéndolos inicialmente a in-fecciones virales y posteriormente a bacte-rias.

En este esquema, las infeccionesvirales, actuarían como factores primariosdañando o destruyendo el aparato muco-ciliar,favoreciendo la colonización bacteriana parael establecimiento de procesos bronconeu-mónicos (Cutlip y Lehmmbuhl, 1982; Daviset al, 1986; Donachowske y Rosemberg,1999). Aquí, los virus PI-3 y BRS son los másprevalentes, y son conocidos agentes patoló-gicos causales de bronconeumonías y neu-monías lobares en rumiantes, y productorasde infecciones generalmente fatales cuandose asocian a infecciones por M. haemolyticay P. multocida (Zanabria et al., 2000; Yeneret al., 2005).

CONCLUSIONES

• Los resultados sugieren que las neumo-nías agudas en alpacas serían conse-cuencia, de manera similar a lo que ocu-rre en otros rumiantes, de múltiples agen-tes y, generalmente, por asociacionesentre virus (RSV, PI3) con Pasteurellamultocida y Mannheimia hemolytica.

• El estudio no descarta, sin embargo, laposible participación de otros posiblesagentes neumotrópicos en el establecimien-to y desarrollo de procesos similares.

LITERATURA CITADA

1. Ameghino E, Calle S. 1989. Aislamien-to de Pasteurella multocida de proce-sos neumónicos en crías de alpacas. En:Libro de Resúmenes XII Reunión Cien-tífica Anual del APPA. Lima, Perú:APPA. p 99.

2. Ameghino E, DeMartini J. 1991. Mor-talidad en crías de alpacas. Lima:RERUMEN. 128 p.


17 de 19

334

3. Arratia V. 1991. Agentes etiológicos delas neumonías en alpacas de la CAT San-ta Lucía N.º 179. Tesis de Médico Vete-rinario y Zootecnista. Puno: Univ Nacio-nal del Altiplano. 55 p.

4. Bryson DG, McFerran JB, Ball HJ,Neill SD. 1979. Observations onoutbreaks of respiratory disease incalves associated with Parainfluenzatype 3 virus and Respiratory Syncytialvirus infection. Vet Rec 104: 45-49.

5. Bryson DG, Mcnulty MS, Logan EF,Cush PF. 1983. Respiratory syncytialvirus pneumonia in young calves: clinicaland pathologic findings. Am J Vet Res44: 1648-1655.

6. Cowan ST. 1974. Cowan Steel's manualfor the identification of medical bacteria.UK: Cambridge University Press. 238 p.

7. Davies DH, Herceg M, Jones BAH,Thurley DC. 1981. The pathogenesisof sequential infection with Parainfluenzavirus type 3 and Pasteurellahaemolytica in sheep. Vet Microbiol 6:173-182.

8. Davies DH, Long DL, McCarthy AR,Herceg M. 1986. The effect ofparainfluenza virus type 3 on the phago-cytic cell response of the ovine lung toPasteurella haemolytica. Vet Microbiol11: 125-144.

9. Domachowske J, Rosenberg H. 1999.Respiratory syncytial virus infection:immune response, immunopathogenesis,and treatment. Clin Microbiol Rev 12:298-309.

10. Dungworth DL. 1993. The respiratorysystem. In: Jubb KVF, Kennedy PC,Palmer N (eds). Pathology of domesticanimals. USA: Academic Press. p 539-699.

11. Ferreira de la Cuesta G. 2003. Pato-logía veterinaria. Colombia: Ed Univer-sidad de Antioquia. 620 p.

12. Kimberling CV, Jenses R, Swift B. 1988.Diseases in sheep. 3rd ed. Philadelphia,USA: Lea & Febiger. 394 p.

13. López C. 1993. Estudio macro-micros-cópico del pulmón de la alpaca. Tesis deMédico Veterinario Zootecnista. Puno,Perú: Facultad de Medina Veterinaria yZootecnia, Univ Nacional del Altiplano.

14. López A. 1995. The respiratory system.In: Carlton W, McGavin M (eds).Thomson’s special veterinary pathology.2nd ed. Philadelphia, USA: Mosby YearBook Inc. p 116-174.

15. Mamani E. 1992. Correlación de lasalteraciones histológicas con los agen-tes etiopatológicos de las neumonías enalpacas (Lama pacos). Tesis de Médi-co Veterinario y Zootecnista. Puno, Perú:Univ Nacional del Altiplano. 51 p.

16. Manchego A, Rivera H, Rosadio R.1998. Seroprevalencia de agentesvirales en rebaño mixto de una comuni-dad andina peruana. Rev Inv Pec, IVITA9(2): 1-10.

17. Martin WB. 1996. Respiratoryinfections of sheep. Comp ImmunolMicrob 19: 171-179.

18. Melo M. 1997. Sistemas de control ymanejo sanitario de alpacas y llamas enla región del sur peruano. Puno, Perú.Facultad de Medina Veterinaria y Zoo-tecnia, Univ Nacional del Altiplano. 54 p.

19. Piojan P, Aguilar F, Morales F. 1999.Caracterización de los procesos neumó-nicos en becerros lecheros de la regiónde Tijuana, Baja California, México. VetMex 30: 149-155.

20. Ramírez A. 1991. Enfermedades infec-ciosas. En: Fernández-Baca S (ed).Avances y perspectivas del conocimien-to de los camélidos sudamericanos. San-tiago de Chile: FAO. p 263-324.

21. Rivera H, Madewell BR, Ameghino E.1987. Serologic survey of viralantibodies in the Peruvian alpaca (Lamapacos). Am J Vet Res 48: 189-191.

22. Slauson D, Cooper BJ. 2002.Mechanisms of disease. 3rd ed. St. Louis,Missouri, USA: Mosby Inc. 445 p.

23. Trigo F. 1998. Patogénesis y aspectosinmunológicos. 3° ed. México DF:McGraw-Hill Interamericana. 220 p.

24. Victorio W, Rivera H, Manchego A,Benito A, Quispe, R, Yaya K, OlazábalJ, Rosadio R. 2003. Evidenciasserológicas de virus neumotrópicos enalpacas de la provincia de Canchis, Cuz-co, Perú. En: Memorias III Congreso


18 de 19

335

Mundial sobre Camélidos. Potosí, Boli-via. II: 155-158.

25. Viera F, Sato A, Núñez Q. 1968. Lospulmones y la arborización bronquial dela alpaca. Rev Fac Med Vet, UNMSM22: 54-60.

26. Yener Z, Saglam YS, Timurkaan N,Ilhan F. 2005. Immunohistochemical

detection of parainfluenza type 3 Virusantigens in paraffin sections ofpneumonic caprine lungs. J Vet Med A52: 268-271.

27. Zanabria V, Rivera H, Rosadio R.2000. Etiología del síndrome neumónicoen vacunos de engorde en Lima. RevInv Vet, Perú 11(2): 67-85.


19 de 19

› ...camelidos › ... COEXISTENCIA DE VIRUS Y BACTERIAS EN NEUMONÍAS …sadas mediante la...

Documents

Transcript of › ...camelidos › ... COEXISTENCIA DE VIRUS Y BACTERIAS EN NEUMONÍAS …sadas mediante la...