2008 - Identificación y caracterización de filamentosas en biorreactores de EDAR del sector...
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Documentación presentada en: V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo.
Publicación: Memorias de la jornada ISBN: 978-84-613-0712-8 Lugar de celebración: Sevilla
Fecha: 30-31/10/2008
CONTROL MICROBIOLÓGICO OPERACIONAL EN ELTRATAMIENTO DE AGUAS DE LA INDUSTRIA FENOL-ACETONA Y SÍNTESIS DE AMINAS A. Zornoza1,2, E. Reina2, R. F. López3
1Grupo Aguas de Valencia. EDAR Quart Benager, 46014 Valencia, (E-mail: [email protected]). 2Asociación Científica Grupo Bioindicacion de Sevilla (GBS), EDAR La Ranilla. San José de Palmete s/n, Sevilla 41006. Apdo 7279 (E-mail: [email protected]). 3CEPSA
“Caracterización de bacterias filamentosas en biorreactores
de estaciones depuradoras de sector petroquímico”.
A. Zornoza1,2
Se han tomado 24 muestras de bioreactores en 4 estaciones depuradoras
de las distintas factorías de la empresa CEPSA: planta de Palos de la Frontera,
Guadarranque, refinería la Rábida y Gibraltar-San Roque. El análisis
microscópico convencional de las bacterias filamentosas se ha llevado a cabo
en base a los trabajos de Eikelboom (2000, 2006). Se han descrito 20 bacterias
filamentosas que responden a diferentes características morfológicas y
tinciones diferenciales. Para poder ser estudiadas por el equipo investigador
han sido nombradas con un código interno numérico precedido de unas siglas,
quedando de la forma: “CP-XX”.
A continuación se exponen las bacterias que han sido descritas hasta la
fecha dentro del presente estudio.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
1
CP-01 (Palos de la frontera)
400x 1000x Descripción
Bacteria filamentosa similar al tipo 0041/0675.
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Rectos y
ligeramente curvados. Extendiéndose desde el flóculo y libre en el
espacio interflocular. Filamento con un tono oscuro, lo cual dificulta la
observación de algunas características como son la morfología
celular y los septos celulares. En algunas ocasiones se aprecia un
ligero aumento del diámetro celular en el ápice del filamento, además
de “huecos” a lo largo del tricoma y extremos. También es común
encontrar filamentos con pequeños espacios en los septos celulares
dando la impresión de cadena de células.
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Rectangular.
• DIÁMETRO CELULAR: aprox. 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Presencia.
• GRAM: Negativo.
• NEISSER: Negativo. Débil reacción a gránulos neisser.
• PHA: Ausencia.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Ausencia.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Sin constricciones. Septos celulares
difícilmente visibles.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
2
CP-02 (Palos de la frontera)
400x 1000x
Descripción
Bacteria filamentosa similar a Micothrix parvicella.
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Torcidos,
curvados. Libre y extendiéndose desde el flóculo. Es frecuente la
presencia de filamentos cortos (aprox. 50 um) formando “manojos”.
También se observan filamentos muy finos y mas largos con
abundantes estrechamientos (similar al tipo 0211).
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: No se observa.
• DIÁMETRO CELULAR: < 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Ausencia.
• GRAM: Positivo.
• NEISSER: Negativo. Gránulos neisser (respuesta débil).
• PHA: Negativo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Ausencia.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: No se observan.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
3
CP-03 (Palos de la frontera)
400x 1000x
Descripción
Bacteria filamentosa similar a Nostocoida limícola y M.parvicella.
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Torcidos,
curvados, irregular. Libre y extendiéndose desde el flóculo.
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Ovales, esféricas. Aunque no siempre es
apreciable.
• DIÁMETRO CELULAR: aprox. 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Ausencia
• GRAM: Fuertemente positivo.
• NEISSER: Negativo. Gránulos neisser positivo.
• PHA: Negativo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Ausencia.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Son observables cuando se aprecia las
morfología de las células.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
4
CP-04 (Palos de la frontera)
1000x 1000x
Descripción
Bacteria filamentosa ramificada.
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Organismo
ramificado que se sitúa preferentemente dentro del flóculo.
Ramificaciones cortas en 90 º y en forma de “Y”.
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Se observan formas alargadas similares a
gruesos bacilos sin constricciones pronunciadas.
• DIÁMETRO CELULAR: > 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Ausencia.
• GRAM: Fuertemente positivo.
• NEISSER: Negativo.
• PHA: Negativo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Ausencia.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Observables.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
5
CP-05 (Palos de la frontera, Gibraltar, Rábida y Guadarranque)
1000x 400x
Descripción
Bacteria filamentosa similar a Haliscomenobacter hydrossis.
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Rectos y
extendiéndose desde el flóculo.
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Rectangular (difícilmente observable).
• DIÁMETRO CELULAR: < 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Ausencia
• GRAM: Negativo
• NEISSER: Negativo.
• PHA: Negativo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Ausencia.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Septos difícilmente observables sin
constricciones.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
6
CP-06 (Palos de la frontera)
100x 400x
Descripción
Bacteria filamentosa similar al IF-50 (Eikelboom, 2006).
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Torcidos,
curvados. Libre e intraflocular.
• LONGITUD: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Esférica.
• DIÁMETRO CELULAR: aprox. 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Ausencia.
• GRAM: Fuertemente positivo.
• NEISSER: Negativo. Gránulos neisser positivo.
• PHA: Negativo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: No se observa.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Septos y constricciones claramente
observables.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
7
CP-07 (Guadarranque)
400x 1000x Descripción
Bacteria filamentosa similar al IF-43 (Eikelboom, 2006).
• FORMA, ASPECTO Y SITUACIÓN DE LOS FILAMENTOS: Curvados,
torcidos. Libre en el espacio interflocular aunque también se puede
observar dentro del flóculo. Cadena de células claramente
separadas.
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Esférica, oval, discoidal.
• DIÁMETRO CELULAR: > 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Presencia.
• GRAM: Negativo.
• NEISSER: Negativo.
• PHA: Positivo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Ausencia.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Septos y constricciones claramente
observables.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
8
CP-08 (Guadarranque, Gibraltar, Rábida)
400x 1000x
Descripción
Bacteria filamentosa del tipo Nostocoida limicola III (posiblemente Isosphaera
sp.).
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Torcidos,
curvados. Libre y dentro del flóculo.
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Oval, esférica.
• DIÁMETRO CELULAR: > 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Presencia.
• GRAM: Negativo.
• NEISSER: Negativo.
• PHA: Negativo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Ausencia.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Septos y constricciones claramente
observables.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
9
CP-09 (Guadarranque)
400x 1000x
Descripción
Bacteria filamentosa similar al IF-4 (Eikelboom, 2006).
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Rectos, torcidos,
ligeramente curvados. Extendiéndose desde el flóculo. Es
característico ver bandas muy oscuras a lo largo de los septos.
• LONGITUD DEL TRICOMA: > 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Rectangular.
• DIÁMETRO CELULAR: > 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Presencia.
• GRAM: Negativo
• NEISSER: Ligera cubierta débil con gránulos centrales. Variable.
• PHA: Negativo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Se observa.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Sin constricciones. Septos claramente
observables.
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10
CP-10 (Guadarranque)
400x 1000x
Descripción
Bacteria filamentosa similar al tipo 0041/0675.
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Rectos, curvados.
Extendiéndose desde el flóculo. Es frecuente observar inclusiones a
lo largo del filamento de tonalidad mas clara.
• LONGITUD DEL TRICOMA: > 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Cuadrada (difícilmente observable).
• DIÁMETRO CELULAR: > 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Presencia.
• GRAM: Negativo.
• NEISSER: Negativo.
• PHA: Positivo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Presencia.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Sin constricciones. Septos difícilmente
observables.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
11
CP-11 (Gibraltar, Rábida)
400x 1000x
Descripción
Bacteria filamentosa similar morfológicamente al tipo IF-6 (Eikelboom, 2006).
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamentos rectos,
torcidos y ligeramente curvados. Se extienden normalmente desde el
flóculo aunque a veces se puede observar libre. Ocasionalmente se
observa extremos torcidos (similar a H.hydrossis) y huecos debido a
pérdida celular (similar al tipo 0041/0675).
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Rectangular, cuadrada.
• DIÁMETRO CELULAR: > 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Presencia.
• GRAM: Negativo.
• NEISSER: Negativo. Gránulos neisser positivo.
• PHA: Negativo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Algunas partes del filamento presenta
materia adherida, mostrándose con frecuencia de forma discontinua
en forma de “anillos”.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Sin constricciones. Se aprecian septos.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
12
CP-12 (Rábida)
400x 1000x Descripción
Bacteria filamentosa similar al tipo IF-65 y IF-12 (Eikelboom, 2006).
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamento recto y
curvado que se extiende desde el flóculo, aunque a veces se
presenta libre. Es frecuente observar filamentos en forma de
“manojos”. Los filamentos muestran un tono bastante claro.
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Rectangular.
• DIÁMETRO CELULAR: < 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Presencia.
• GRAM: Negativo. Se aprecian alternancia de partes más y menos
intensas.
• NEISSER: Negativo. Gránulos neisser positivo
• PHA: Negativo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Ausencia.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Sin constricciones. Se aprecian septos.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
13
CP-13 (Gibraltar)
400x 1000x
Descripción
Bacteria filamentosa similar al tipo IF-54 (Eikelboom, 2006).
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamentos rectos,
torcidos y ligeramente curvados. Se extienden principalmente desde
el flóculo, aunque también se puede encontrar libre. Es frecuente
observar filamentos en forma de “manojos”. A veces aparecen
puntos negros a lo largo del filamento y ocasionalmente el ápice del
mismo de mayor diámetro y redondeado.
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Cuadrada, rectangular.
• DIÁMETRO CELULAR: aprox.1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Presencia.
• GRAM: Negativo.
• NEISSER: Positivo (púrpura).
• PHA: Positivo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Ausencia.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Sin constricciones. Se aprecian septos.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
14
CP-14 (Gibraltar)
400x 1000x
Descripción
Bacteria filamentosa similar al tipo 1701.
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamentos rectos,
torcidos y ligeramente curvados. Se extienden principalmente desde
el flóculo. En ocasiones presenta falsas ramificaciones. Se observa
la vaina perfectamente cuando faltan células.
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Bacilar.
• DIÁMETRO CELULAR: aprox.1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Presencia.
• GRAM: Positivo
• NEISSER: Negativo. Gránulos neisser positivo.
• PHA: Negativo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Ausencia.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Se aprecian septos con constricciones
claramente visibles.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
15
CP-15 (Gibraltar)
400x 1000x
Descripción
Bacteria filamentosa similar a Monilibacter batavus (Eikelboom, 2006).
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamentos
torcidos, curvados y enrollados. Se encuentran principalmente dentro
del flóculo, aunque también se pueden ver libres en el espacio
interflocular. Es frecuente encontrar además de ramificaciones,
células agrupadas en tétradas, asi como ramificaciones formando
“lazos”.
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Oval, esférica.
• DIÁMETRO CELULAR: > 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Presencia.
• GRAM: Negativo.
• NEISSER: Negativo.
• PHA: Positivo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: No se observa.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Se aprecian septos con constricciones
claramente visibles.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
16
CP-16 (Gibraltar)
400x 1000x Descripción
Bacteria filamentosa similar al tipo 0041/0675.
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamento recto y
ligeramente curvado. Se extiende desde el flóculo. Los filamentos
muestran un tono oscuro, lo que dificulta en algunas ocasiones
algunas características.
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Rectangular (a veces es difícil ver).
• DIÁMETRO CELULAR: > 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Presencia.
• GRAM: Negativo
• NEISSER: Variable (color púrpura).
• PHA: Negativo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Presencia (incidental).
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Se aprecian septos (difícil de ver) sin
constricciones.
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17
CP-17 (Gibraltar)
400x 1000x
Descripción
Bacteria filamentosa similar al tipo Nostocoida limicola III.
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamento torcido,
curvado y enrollado (irregular). Se sitúa dentro así como
extendiéndose desde el flóculo.
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: discoidal
• DIÁMETRO CELULAR: > 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Presencia.
• GRAM: Negativo.
• NEISSER: Negativo.
• PHA: Negativo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Ausencia.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Se aprecian septos y constricciones.
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18
CP-18 (Gibraltar)
400x 1000x
Descripción
Bacteria filamentosa ramificada.
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamento
ramificado que se sitúa intraflocularmente así como extendiéndose
desde el flóculo. Ramificaciones aproximadamente en 45 º. Se
observan largos tricomas sin ramificación.
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: No se observa.
• DIÁMETRO CELULAR: > 1 µm.
• VAINA(reacción a cristal violeta) : Ausencia.
• GRAM: Fuertemente positivo
• NEISSER: Negativo. Gránulos neisser fuertemente positivo.
• PHA: Negativo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Ausencia.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: No se aprecian septos ni constricciones.
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19
CP-19 (Gibraltar)
400x 1000x
Descripción
Bacteria filamentosa similar al tipo 1851.
• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamento recto,
curvado que se extiende desde el flóculo.
• LONGITUD: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: Rectangular (difícilmente observable).
• DIÁMETRO CELULAR: < 1 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Presencia.
• GRAM: Negativa
• NEISSER: Negativa
• PHA: Negativo.
• CRECIMIENTO ADHERIDO: Presencia (incidental).
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Septos difícilmente observables sin
constricciones.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
20
CP-20 (Gibraltar)
1000x 1000x
Descripción
Bacteria filamentosa similar a M. parvicella pero mucho mas fina.
• FORMA, SITUACIÓN Y ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamento torcido,
curvado. Interior y extendiéndose desde el flóculo.
• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.
• MORFOLOGÍA CELULAR: No se observa.
• DIÁMETRO CELULAR: < 0,5 µm.
• VAINA (reacción a cristal violeta): Presencia.
• GRAM: Positivo.
• NEISSER: Negativo
• PHA: Negativo
• CRECIMIENTO ADHERIDO: No se observa.
• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: No se observa.
V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010
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