PRACTICAS DE PRACTICAS DE BIOQUÍMICA BIOQUÍMICA IiIi

DETERMINACIÓN DE DETERMINACIÓN DE

ÁCIDO ÚRICO EN ÁCIDO ÚRICO EN

SUERO Y ORINASUERO Y ORINA

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO

EN SUERO Y EN ORINAEN SUERO Y EN ORINA

Significación Clínica.-

El Ácido Úrico es el producto final del metabolismo de las

purinas, la formación del ácido úrico tiene lugar

mayoritariamente en el hígado y se elimina por la orina.

El aumento en los niveles séricos de ácido úrico se debe

al incremento de la síntesis (por ingesta de proteínas de

origen animal: carnes y vísceras) o por escasa

eliminación renal debido a un aumento de la

reabsorción o disminución de la excreción)

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO

EN SUERO Y EN ORINAEN SUERO Y EN ORINA

La hiperuricemia se asocia generalmente con la gota,

disminución de la función renal, deshidratación,

alteraciones mieloproliferativas y otras condiciones en

las que no se conoce bien la causa.

El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en

cuenta el resultado de un único ensayo, sino que debe

integrar los datos clínicos y de laboratorio

Objetivo: Cuantificar el Ácido Úrico en suero y en orina

Fundamento.-

El ácido úrico presente en la muestra origina un complejo

coloreado que se cuantifica por espectrofotometría, de

acuerdo a las siguientes reacciones:

Ácido úrico + O2 + H2O Alantoina + CO2 + H2O2

2 H2O2+ 4 – Aminoantipirina Quinonimina + 4 H2O

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO

EN SUERO Y EN ORINA

Uricasa

Peroxidasa

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO EN DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO EN

SUERO Y EN ORINASUERO Y EN ORINA

Marco Teórico

Investigar sobre los trastornos del ácido úrico y significación clínica de la determinación de ácido úrico en sangre y orina.

Materiales y Reactivos.-

Baño de agua a 37°C

Espectrofotómetro.

Tubos de ensayo

Gradilla

Pipetas automáticas y puntas descartables.

Material biológico: muestras de suero sanguíneo y orina.

Diluir la orina 1/10 con agua destilada antes del ensayo 500ul de orina en 5 ml de agua destilada.

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO EN DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO EN

SUERO Y EN ORINASUERO Y EN ORINA

Procedimiento.- 1. Utilizar cuatro tubos perfectamente limpios e

identificarlos como B (blanco), S(Estándar), Ms

(Muestra suero ) y Mo (Muestra orina )

2. Agregar a los tubos lo indicado en la tabla:

Tubo de Ensayo

B S M s M o

Agua destilada 25 uL - - -

Patrón Ac.

Úrico (S) - 25 uL - -

Muestra Suero - - 25 uL -

Muestra Orina - - - 25 uL

Reactivo 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO EN DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO EN

SUERO Y EN ORINASUERO Y EN ORINA

Procedimiento.- 3. Agitar bien e incubar los tubos durante 10 minutos a

temperatura ambiente (16-25ºC) o durante 5 minutos

a 37ºC.

4. Leer la absorbancia (A) del Patrón y de la Muestra a

520 nm frente al Blanco.

El color es estable durante al menos 30 minutos.

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO EN DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO EN

SUERO Y EN ORINASUERO Y EN ORINA

Cálculos.-

La concentración de ácido úrico en la muestra se calcula a partir de la siguiente fórmula general:

Ácido úrico en suero mg/dl =AbMs x f

Ácido úrico en orina g en 24 h = AbMo x f x 10 f = Concentración en Patrón * AbS

*Concentración de Ácido úrico en el Patrón: 6 mg/dl

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO DETERMINACIÓN DE ÁCIDO

ÚRICO EN SUERO Y EN ORINAÚRICO EN SUERO Y EN ORINA

Valores referenciales.-

Suero y plasma:

Hombres: 3,5 - 7,2 mg/dL

Mujeres: 2,6 - 6,0 mg/dL.

Orina:

250 - 750 mg/24 horas

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO EN DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO EN

SUERO Y EN ORINASUERO Y EN ORINA

Observaciones.-

Reporte todas las observaciones obtenidas durante la

práctica.

Incluya gráficos o fotografías de los aspectos que considere

relevante resaltar.

Conclusiones.-

Establezca las conclusiones a partir del objetivo planteado,

las observaciones y los resultados obtenidos durante la

práctica.

Bibliografía.-