1. ENCUADRE DEL SISTEMA DE PRÁCTICAS

MANUAL DE PRÁCTICAS DE BIOQUÍMICA APLICADA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS UJED MANUELA DE LA A. CARRERA GRACIA

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1. ENCUADRE DEL SISTEMA DE PRÁCTICAS

1.1 INTRODUCCIÓN

La bioquímica es una ciencia que estudia la química de la vida; es decir, pretende

describir la estructura, la organización y las funciones de la materia viva en

términos moleculares. Esta ciencia es una rama de la Química y de la Biología.

Puede dividirse en tres áreas principales: 1) la química estructural de los

componentes de la materia viva y la relación de la función biológica con la

estructura química; 2) el metabolismo, la totalidad de las reacciones químicas que

se producen en la materia viva; y 3) la química de los procesos y las sustancias

que almacenan y transmiten la información biológica. Esta última también es el área

de la genética molecular.

En sus inicios, la bioquímica estuvo ligada a la medicina. En el siglo XVII, las raíces

de la bioquímica descriptiva las encontramos en las investigaciones de Scheele y

las de la bioquímica dinámica en los trabajos de Lavoisier, éste aclaró la naturaleza

de la respiración animal y la relación de este fenómeno fisiológico con la producción

de calor corporal, dando inicio al metabolismo energético. Pasteur al estudiar la

fermentación sentó las bases de la química biológica moderna especialmente de la

enzimología. Los trabajos de Mayer y sus continuadores sentaron las bases de la

termodinámica esencial para comprender las relaciones energéticas en los

sistemas biológicos Emil Fisher utilizando las técnicas de la química orgánica,

estableció sus estructuras por degradación y síntesis posterior y con esto la

bioquímica se consolida definitivamente como disciplina científica. En 1903

Takamine y Aldrich obtuvieron la primera hormona en estado puro; la adrenalina,

entre 1905 y 1906 Pekelharing y Hopkins descubrieron la existencias de las

vitaminas como factores esenciales para la nutrición en pequeñas cantidades y

cuya carencia produce enfermedades específicas conocidas desde la antigüedad.

Hoy en día, los avances de la bioquímica son usados en cientos de áreas, desde la

genética hasta la biología molecular, de la agricultura a la medicina. Por ejemplo la

bioquímica de los ácidos nucléicos es el corazón de la genética; a su vez, el uso de

http://conceptodefinicion.de/ciencia/

http://conceptodefinicion.de/quimica/

http://conceptodefinicion.de/materia/

http://conceptodefinicion.de/biologia/

http://www.24horas.cl/tendencias/saludybienestar/cientifico-de-la-u-de-chile-sera-premiado-en-espana-por-hallazgos-sobre-el-cancer-1412418

http://conceptodefinicion.de/genetica/



Página 2

las directrices genéticas ha sido fundamental para dilucidar numerosas áreas de la

bioquímica. La fisiología, que es el estudio de la función corporal, se traslapa con la

bioquímica casi por completo. La inmunología emplea buena parte de las técnicas

bioquímicas y muchos de los planteamientos inmunológicos han encontrado amplio

uso entre los bioquímicos. La farmacología y la farmacia descansan en un

conocimiento sólido de la bioquímica y fisiología; como ejemplo, la mayor parte de

los medicamentos son metabolizados por reacciones catalizadas por enzimas. Los

venenos alteran las reacciones o procesos bioquímicos; este es el tema de la

toxicología. Todas las enfermedades son de naturaleza química; por tanto, en

forma creciente, la bioquímica se está utilizando en el estudio de aspectos básicos

de la patología, como inflamación, la lesión celular y cáncer. Muchos zoólogos y

botánicos emplean casi de manera exclusiva planteamientos bioquímicos. Sus

interrelaciones no sorprenden, dado que la vida como la conocemos depende de

las reacciones y procesos bioquímicos. De hecho, las antiguas barreras entre las

biociencias se han roto y cada vez más, la bioquímica se está convirtiendo en su

lenguaje común.



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1.2 UBICACIÓN DE LA ASIGNATURA DENTRO DEL MAPA

CURRICULAR

La materia de Bioquímica Aplicada está considerada en el sexto semestre del Plan

de Estudios de la Carrera de Químico Biotecnólogo correspondiendo al eje de

formación disciplinaria.

Contexto Social

de la Profesión

Lectura y

Redacción

Computación

Introducción al

Método

Experimental

Genética

General

Calculo

Diferencial

Física I

Química

Inorgánica

Química

Orgánica I

Química

Orgánica II

Química

Analítica

Biología Celular

Microbiología

General

Química

Orgánica III

Bioquímica

Bioseguridad

Toxicología

Parasitología

Molecular Vegetal

Op

tativ

as

de Á

rea

Ind

us

trial y

Am

bie

nta

l

Probabilidad y

Estadística

Diseño

Estadístico de

Experimentos

Bioinformática

Química

Analítica

Instrumental II

Biología

Molecular

Bioquímica

Aplicada

Bionegocios IBionegocios II

Ecología

Microbiana

Fisiología

Vegetal

Bioprocesos I

Ingeniería

Genética

Bromatología

Evaluación de

Proyectos

Legislación e

Impacto

Ambiental

Inmunología

Microbiología

de Alimentos

Química

Ambiental

Biotecnología

Vegetal I

Genómica

Gestión de la

Calidad Seminario de

Investigación

II

Op

tativ

as

de Á

rea B

iom

éd

ica

y

Fa

rma

cé

utic

a

Op

tativ

as

de

Áre

a V

eg

eta

l y

Alim

en

taria

Eje Disciplinario y Electivo I-disciplinario Eje Terminal y electiva II-optativas

Eje

s In

teg

rad

ore

s

Inn

ova

do

r y de

valo

res

Ejes teórico-epistemológicos

Diagrama de secuencia académica de Químico Biotecnólogo

Educación

Ambiental

Hab. Pensam.

Crítico y

Creativo

Química

Analítica

Instrumental I

Operaciones

Unitarias

Ob

liga

toria

s

Tópicos de

Desarrollo

Humano

Termodinánica

Tópicos Selectos

Farmacogenómica

Biotecnología

Médica

Biotecnología

Vegetal II

Biotecnología

Farmacéutica

Biprocesos II

Proteínas con

Aplicación

Industrial

BioformulacionesInocuidad

Alimentaria

Alimentos

TrasgénicosTópicos Selectos

Bioenergéticos

Ecomateriales Bioprocesos II

Tópicos Selectos IIBiorreactores

Birremediación

Anatomía y

Fisiología

Farmacología

Bacteriología

Parasitología y

Virología

Cultivo de Tejidos

Seminario de

Investigación I

Tópicos Selectos I

Diagnóstico

Molecular

Calculo Integral

Física II

Eje Básico

FORMACIÓN INTEGRAL SERVICIO SOCIAL

Proteínas con

Aplicación

Industrial

Figura. 1. Secuencia de niveles académicos del QFB



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2. PROPÓSITO DEL SISTEMA DE PRÁCTICAS

2.1. ENCUADRE DEL SISTEMA DE PRÁCTICAS DENTRO DE LA

PROFESIÓN

En el curso de Bioquímica aplicada, se pretende dejar bases sólidas sobre las

principales rutas metabólicas y su integración así como fomentar la discusión y

aplicación de los temas tratados esperando que los alumnos comprendan cómo

estos conocimientos son básicos, ya que esta materia lleva cadena e interrelación

con otras asignaturas y pueda los alumnos tener una mejor comprensión de ellas.

2.2 REDACCIÓN DE LAS COMPETENCIAS PROFESIONALES

Explicar el metabolismo de las biomoléculas en los organismos vivos para

identificar las vías metabólicas que se llevan a cabo en éstos.



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2.3 NIVELES DE DESEMPEÑO

_________________________________________________________________

Nivel 1. Se realizan funciones rutinarias de baja complejidad. Se reciben

instrucciones. Se requiere baja autonomía.

Nivel 2. Se realizan un conjunto significativo de actividades de trabajo, variadas y

aplicadas en diversos contextos. Algunas actividades son complejas y no

rutinarias. Presenta un bajo grado de responsabilidad y autonomía en las

decisiones. A menudo requiere colaboración con otros y trabajo en equipo.

Nivel 3. Se requiere un importante nivel de toma de decisiones. Tiene baja

responsabilidad de recursos materiales con los que opera su área. Así como,

control de recursos financieros para adquisición de insumos.

Nivel 4. Se desarrolla un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las

que se tiene que mostrar creatividad y recursos para conciliar intereses. Se debe

tener habilidad para motivar y dirigir grupos de trabajo.

Nivel 5. Se desarrollan un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las

que se tiene que mostrar un alto nivel de creatividad, así como buscar y lograr la

cooperación entre grupos e individuos que participan en la implantación de un

problema de magnitud institucional.

Las prácticas del Laboratorio de Bioquímica Aplicada tendrán un nivel de

desempeño del Conocer planteado en el NIVEL 2.

a. Los contextos son varios:

1. Aula: con los conocimientos aprendidos en su unidad de aprendizaje de

Bioquímica Aplicada.

2. Prácticas de laboratorio de Bioquímica Aplicada: aplicar los conocimientos

teóricos para la compresión de los procesos metabólicos.

3. Otros ambientes de aprendizaje: cuando desarrolle trabajos de

investigación que tendrá que realizar en cada práctica. La finalidad es

buscar el fundamento de cada una de las técnicas usadas en el laboratorio.



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4. Su grado de responsabilidad y autonomía será determinado por su

compromiso de aprender.

5. Se requiere trabajo en equipo para el desarrollo de cada práctica señalada.

6. Se requiere asesoría del maestro.

3. DESCRIPCIÓN DEL SISTEMA DE PRÁCTICAS

3.1 ESTRUCTURA Y PROGRAMA DEL SISTEMA DE PRÁCTICAS

Las prácticas en el Laboratorio de Bioquímica Aplicada se harán a través de

experimentos, que le permite integrar los conocimientos teóricos aprendidos en el

aula.

Se propone que el estudiante desarrolle habilidades en el desarrollo de la práctica

así como la comprensión de ciertos procesos metabólicos.

El programa de prácticas del Laboratorio de Bioquímica Aplicada tiene una duración

total de 32 horas; las prácticas serán secuenciales y coordinadas con la parte

teórica revisada en el aula.

CUADRO. 1 ESTRUCTURA Y PROGRAMA DEL SISTEMA DE PRÁCTICAS

Competencia o unidad de

Competencia a ser abordada Semana Prácticas Pre requisitos

Conoce e interpreta las leyes

de la termodinámica y los

sistemas abiertos

2ª semana

del curso

1ª práctica

Bioenergética y

generación de

calor

Realiza la determinación de

vitamina C en alimentos y

compara el contenido de esta

vitamina en los diferentes

3ª semana

del curso

2ª práctica

Determinación

de vitamina C

en alimentos



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alimentos ensayados. Haber leído el

procedimiento para

la práctica y realizar

un diagrama de

flujo.

Haber investigado

sobre las hojas de

seguridad de los

reactivos a emplear

Haber realizado los

cálculos

correspondientes

para preparar las

soluciones de

trabajo.

Comprende la acción de las

enzimas sobre los

polisacáridos.

4ª semana

del curso 3ª práctica

Degradación

enzimática de

polisacáridos

Conoce y aplicar

correctamente los

conocimientos de la

respiración celular.

5ª semana

del curso

4ª práctica

Productos de la

respiración

anaerobia

Realiza determinación de

triglicéridos en suero

sanguíneo.

6ª semana

del curso

5ª práctica

Determinación

de Triglicéridos.


colesterol en suero

sanguíneo.

7ª semana

del curso

6ª práctica

Determinación

de colesterol


urea en suero sanguíneo.

8ª semana

del curso

7ª práctica

Excreción del

nitrógeno

proteico

Diseña experimento

integrador de conocimientos

9ª semana

del curso

8ª práctica

Integración de

conocimientos



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4. PRÁCTICAS GENERALES DE SEGURIDAD.

REGLAMENTOS

4.1 REGLAMENTO APLICABLE A LA PRÁCTICA Y EL ÁMBITO

DONDE SE DESEMPEÑAN

El Laboratorio de Alimentos debe seguir reglas generales de seguridad basadas en

la Normas Oficiales Mexicanas (Cuadro 2) de las cuales, se han seleccionado

algunas que determinan el buen funcionamiento del mismo y estas son:

CUADRO 2. NORMAS OFICIALES MEXICANAS

ESPECIFICACIONES NORMAS OFICIALES

MEXICANAS

CONDICIONES DEL MEDIO AMBIENTE

--El laboratorio cuenta con las condiciones y niveles de

iluminación suficiente y adecuada para el tipo de

actividad que realiza.

NOM-025-STPS-1999

--Se cuenta con normas de Seguridad e Higiene que

permitan reducir el riesgo de accidentes en el área de

trabajo.

NOM-017-STP-2001

--En los contenedores se indica el tipo de desecho

para el cual están destinados y están señalizados

NOM-087-ECOL-1995

-- Se establecen las características, el procedimiento

de identificación, clasificación y los listados de los

residuos peligrosos.

NOM-052-SEMARNAT-

2005

SISTEMA CONTRA INCENDIOS

--Se instalarán equipos contra incendio de acuerdo al

grado de riesgo de incendio, a la clase de fuego que

se pueda presentar en el laboratorio y a la cantidad de

materiales en el almacén y proceso.

NOM-002-STPS-2000



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MEXICANAS

SISTEMA CONTRA INCENDIOS

--De las salidas normales y de emergencia, la

distancia a recorrer desde el punto más lejano del

interior de una edificación a un área de salida no debe

ser mayor de 40 m.

NOM-002-STPS-2000

--En caso que la distancia sea mayor a la señalada por

el punto anterior, el tiempo máximo en la que debe

evacuarse al personal a un lugar seguro es de 3

minutos. Lo anterior, deberá comprobarse en los

registros de simulacros de evacuación.

NOM-002-STPS-2000

--La puertas de salida normales, de las rutas de

evacuación y de las salidas de emergencia, deberán

estar libres de obstáculos, candados, picaportes o

cerraduras con seguros puestos, durante las horas

laborales

NOM-002-STPS-2000

--Las puertas de salida normales, de ruta de

evacuación y de salida de emergencia, deben ser de

materiales resistentes al fuego y capaces de impedir el

paso del humo entre área de trabajo.

NOM-002-STPS-2000

--Las instalaciones de sistemas fijos contra incendios,

se deben colocar en sitios visibles y de fácil acceso,

libres de obstáculos, protegidas de la intemperie y

señalar su ubicación.

NOM-002-STPS-2000

--Los extintores deben ser revisados al momento de su

instalación y, posteriormente, a intervalos no mayores

de un mes.

NOM-002-STPS-2000



Página 10


MEXICANAS

EQUIPOS DE PROTECCIÓN

--Se obtiene el conocimiento con capacitación del

personal, para el uso, limpieza, mantenimiento,

limitaciones y almacenamiento del equipo de

protección personal.

Reglamento Federal de

Higiene y Medio Ambien

te del Trabajo (RFHYMA).

Cap. 5º. Art. 135 al 141

INSTALACIONES ELÉCTRICAS

--Las instalaciones eléctricas deben tener protecciones

de seguridad y señalarse de acuerdo al voltaje y

corriente eléctrica de la carga instalada.

NOM-OO1-SEDE-1999,

ART. 1 – 34

--El bloqueo de energía para el control de riesgos,

estará en tableros, controles y equipos, a fin de des

energizar, desactivar y/o impedir la operación normal

de la maquinaria y equipo.

NOM-OO1-SEDE-1999,

ART. DEL 384

SEÑALES, AVISOS DE SEGURIDAD Y CÓDIGO DE COLORES

--Se utiliza el código de colores en el sistema de

tuberías conforme a lo que establece la norma

correspondiente.

NOM-026-STPS-1998

Apdo. 9 y 9.1

--Se ubican las señales de seguridad e higiene de tal

manera que pueden ser observadas e interpretadas

por los trabajadores a los que están destinados y se

evita que sean obstruidos.

NOM-026-STPS-1998

Apdo. 5 y 5.4

Se garantiza que la aplicación del color, señalización y

la identificación en la cubierta están sujetas a un

mantenimiento que asegure en todo momento su

visibilidad y legibilidad.

NOM-026-STPS-1998

Apdo. 5 y 5.3

PLANTA FÍSICA

--Se realizan verificaciones oculares periódicas a las

instalaciones y elementos estructurales.

NOM-001-STPS-1999.

Apdo. 11. RFHYMAH.

Título 2do. Cap. 1º.



Página 11


MEXICANAS

PLANTA FÍSICA

--Se conservan las áreas limpias y en orden,

permitiendo el desarrollo de las actividades para las

que fueron destinadas, asimismo, se les da

mantenimiento preventivo y correctivo.

NOM-025-STPS-1999,

apdo. 7

-Los resultados de dichas verificaciones son anotados

en un registro, siempre y cuando se detecten signos

de ruptura, agrietamiento, pandeo, fatiga de material,

deformación, hundimiento u otra condición similar, se

deben solicitar las reparaciones correspondientes.


Higiene y Medio

Ambiental del Trabajo.

Título 2do. Cap. 1º.

--Se establecen lugares limpios, adecuados y seguros

destinados al personal, para sanitarios, consumo de

alimentos y en su caso, regaderas y vestidores.


Higiene y Medio


Título 2do. Cap.1º y 7º.

--Se mantienen las áreas de trabajo libres de

obstáculos y el suelo limpio. Así como objetos no

deberán obstaculizar la iluminación y ventilación en las

zonas en que éstas se requieran.


Higiene y Medio


Cap. 8º y 12º.

--Las áreas de trabajo deben delimitarse mediante

franjas amarillas de al menos 5 cm. De ancho de tal

manera que se disponga de espacios seguros para la

realización de actividades.

NOM-001-STPS-1999

--Los techos del centro de trabajo, cuentan con un

sistema que evite el estancamiento de agua.

NOM-001-STPS-1999,

apdo.11

--Las paredes del centro de trabajo, se mantienen con

colores que no afecten la visión del trabajador.

NOM-026-STPS-1998

--Los pisos del centro de trabajo, se mantienen limpios

y cuentan con un sistema que evite los

estancamientos de líquidos.

NOM-026-STPS-1998



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MEXICANAS

ORDEN, LIMPIEZA Y SERVICIOS

--De los laboratorios/talleres, el equipo y las

instalaciones deben mantenerse limpias. La limpieza

debe hacerse por lo menos al término de cada turno.

NOM-001-STPS-1999,

fracc. 7.1 NOM-005-

STPS-1998 NOM-087-

ECOL-SSA1-2002

--Los servicios sanitarios destinados a los

trabajadores, deberán conservarse permanentemente

en condiciones de uso higiénicos.


Higiene y Medio


Cap. 12, Art. 108

--Deberán existir excusados y mingitorios con agua

corriente, separados los hombres de los de las

mujeres.

Reg. Federal de Higiene

y Medio Ambiental del

Trabajo. Cap. 12, Art. 103

CONDICIONES GENERALES

--Se cuenta con un manual de primeros auxilios en el

que se definen los medicamentos y materiales de

curación, que requiera el centro de trabajo, así como

los procedimientos para la atención de emergencias

médicas.

NOM-005-STPS-1998

--Se cuenta con un botiquín de primeros auxilios, en el

área, laboratorio ó taller, en la que se deban incluir los

materiales de curación que se requieran de

conformidad con el análisis de riesgos.

NOM-005-STPS-1998

--Se capacita al personal para prestar los primeros

auxilios, por lo menos una vez al año.

NOM-005-STPS-1998

--Se proporciona a todos los trabajadores,

capacitación y adiestramiento para la prevención y,

protección de incendios y combate de conato de

incendios.

NOM-002-STPS-2000,

CAP. 5.8



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MEXICANAS

CONDICIONES GENERALES

--Se realizan simulacros una vez al año. NOM-002-STPS-2000,

CAP. 5.9

--Se organizan y capacitan simulacros de evacuación

del personal y de atención de primeros auxilios.

NOM-002-STPS-2000,

CAP. 5.9

--Se efectúa y registra el reconocimiento, evaluación y

control de los niveles de iluminación del área de

trabajo.

NOM-025-STPS-1999,

CAP. 8, 9, 10

El laboratorio de Alimentos, también cuenta con un Reglamento Interno, que

pretende guiar su conducta dentro del mismo, las normas ahí señaladas son

actitudes que el alumno debe conocer, aprender y acatar para un mejor desempeño

y desarrollo de competencias.

4.2 REGLAMENTO INTERNO DEL LABORATORIO DE ALIMENTOS

El laboratorio de alimentos contará con un encargado de laboratorio para

cada turno, el cual debe estar presente durante la realización de las

prácticas.

Las instalaciones pueden ser usadas por alumnos, maestros, egresados y

otros solicitantes que así lo hagan saber.

Todos los usuarios del laboratorio están sujetos al reglamento básico del

laboratorio, así como lo que establece el reglamento interno de la Facultad

de Ciencias Químicas.

Es obligatorio para los usuarios el uso de bata blanca.

En la realización de prácticas de alto riesgo es obligatorio el uso de anteojos

y guantes de seguridad.

Esta prohibido fumar dentro del laboratorio.



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Esta prohibido el consumo de alimentos y bebidas dentro del laboratorio.

El usuario debe mantener una conducta adecuada a fin de evitar accidentes

y debe mantener la voz baja dentro del laboratorio.

Para solicitar material existente, deberá firmarse un vale por dicho material.

El mal funcionamiento de los equipos del laboratorio que no se detecten al

solicitarse, deben reportarse inmediatamente al encargado de laboratorio.

El material solicitado será entregado limpio y seco por el laboratorista,

debiéndose devolver por el usuario, al final de la práctica, en las mismas

condiciones.

No se permite sacar material o equipo del laboratorio sin autorización del

laboratorista.

En caso que el usuario requiera retener todo o parte del material solicitado,

el encargado de laboratorio retendrá el vale tachando el material devuelto y

se le entregará éste, solo hasta que se devuelva todo el material.

Si es necesario dejar material con reactivos dentro del laboratorio, este

deberá ser etiquetado adecuadamente para su identificación y deberá

notificarse al encargado de laboratorio.

El encargado de laboratorio no se hace responsable de material olvidado sin

etiquetar.

El usuario será responsable de los desperfectos que pudiesen presentarse

en los equipos debido al mal manejo de los mismos, debiendo cubrir el

importe de su reparación o la restitución del mismo antes de que termine el

semestre. En caso de que el usuario no cumpla con esta disposición:

Los alumnos no serán inscritos al siguiente semestre, hasta que liquiden

su adeudo.

Los alumnos de último semestre, no recibirán su carta de pasante y no

podrán efectuar ningún trámite en la Facultad hasta que no liquiden su

adeudo.

Los maestros recibirán un escrito de los adeudos y de no liquidarse se

descontará de su pago.



Página 15

Los ex–alumnos y otros usuarios externos deberán depositar en garantía

una cantidad que ampare el costo del material y equipo facilitados, la cual

serà rembolsada si no hay desperfectos o daños de lo contrario se

liquidarán sus adeudos al hacerse efectiva la garantía que ampara el

importe de los equipos.

El usuario será responsable de quebraduras y desperfectos del material,

cuando estos sean ocasionados por el mal manejo de los mismos, debiendo

restituirlos antes de que termine el semestre. En caso de que el usuario no

cumpla con esta disposición:

Los alumnos no serán inscritos al siguiente semestre, hasta que liquiden

su adeudo.

Los alumnos de último semestre, no recibirán su carta de pasante y no

podrán efectuar ningún trámite en la escuela hasta que no liquiden su

adeudo.

Los maestros recibirán un escrito de los adeudos y de no liquidarse se

descontará de su pago.

Los ex –alumnos y otros usuarios liquidarán sus adeudos al hacerse

efectiva la garantía que ampara el importe de los equipos.

Es obligatorio la presencia del catedrático en el laboratorio durante toda la

práctica, para orientar, asesorar y supervisar a los alumnos. En caso de que

por algún motivo el maestro se tenga que retirar, la práctica se tendrá que

suspender en forma inmediata a menos que el responsable de laboratorio a

criterio personal dé su consentimiento para continuar. Cuando suceda lo

anteriormente expuesto deberá hacerse la anotación correspondiente en la

bitácora.

Los maestros registraran la práctica en la bitácora.

Para solicitar la preparación, por el encargado de laboratorio, de reactivos

especiales, debe hacerse por escrito a él mismo y con una semana de

anticipación al menos.



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Para usar equipos del laboratorio debe contarse con la autorización del

maestro y/o encargado de laboratorio.

La solicitud de material o equipo no existente deberá hacerse por escrito al

coordinador de laboratorios.

Si se trabaja con material biológico infeccioso, al finalizar la práctica, este

deberá depositarse en los recipientes adecuados.

5. SISTEMA DE EVALUACIÓN DE LAS PRÁCTICAS

5.1. LINEAMIENTOS GENERALES PARA LA EVALUACIÓN

En éste apartado se refiere a la observación que el docente responsable hace a su

desempeño de la práctica. La evaluación de las prácticas será a través de los

siguientes parámetros:

Reporte Escrito: El cual deberá contener al menos:

Titulo y número de la práctica.

Introducción

Objetivo de la práctica.

Fundamentos de la práctica.

Materiales y Método

Resultado de la práctica.

Discusiones personales.

Conclusiones personales.

Desempeño dentro del laboratorio.

Asistencia a las prácticas.

5.2 MÉTODO DE ASIGNACIÓN DE CALIFICACIONES DE LAS

PRÁCTICAS



Página 17

La calificación y ponderación de las prácticas de Bioquímica Aplicada es la

siguiente:

ACTIVIDAD A CALIFICAR PONDERACIÓN

Actividades previas 0 – 10

Reporte Escrito. 30 – 50

Desempeño dentro del laboratorio. 30 - 35

Asistencia al laboratorio. 5 – 10



Página 18

UNIVERSIDAD JUÁREZ DEL ESTADO DE DURANGO

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

PRIMERA PRÁCTICA

BIOENERGÉTICA Y GENERACIÓN DE CALOR



Página 19

1. NÚMERO DE ALUMNOS POR UNIDAD DE

PRÁCTICA

Para un buen desarrollo de la actividad académica, considerando el espacio, el

número ideal es de 30-35 alumnos en equipos de 3 alumnos.

2. INTRODUCCIÓN DE LA PRIMERA PRÁCTICA

Todo organismo viviente al hacer algún tipo de movimiento consume energía, y en

el ser humano se ha demostrado un alto consumo de energía asociado con el

ejercicio, conocido como bioenergía. Esta bioenergía es en forma de ATP, el que es

consumido en el músculo estriado para provocar el deslizamiento de las bandas de

actina y miosina.

Al iniciar el ejercicio o actividad física, a nivel celular, aumenta la utilización de ATP

para el subsidio energético, lo que trae simultáneamente un aumento con la

producción de calor, que se traduce en aumento de la temperatura corporal.

El aumento de utilización de ATP lleva a un aumento en el consumo de oxígeno por

la célula, para producir más ATP dentro de la cadena respiratoria o cadena de

transporte de electrones, proceso conocido como respiración aeróbica y como

consecuencia hay un aumento en la producción de CO2.

3. PROPÓSITO ESPECÍFICO DE LA PRIMERA

PRÁCTICA

3.1 CRITERIOS DE DESEMPEÑO

1ª PRÁCTICA: BIOENERGÉTICA Y GENERACIÓN DE CALOR



Página 20

Que el estudiante observe las manifestaciones de transformación de la energía en

los seres vivos.

Que el estudiante evidencie el consumo de ATP y oxígeno, así como la producción

de CO2.

3.2 RESULTADO FINAL DE LA PRIMERA PRÁCTICA

El estudiante observará la manifestación de transformación de energía en el

organismo humano hará algunas mediciones y relacionará lo anterior con la

bioenergética y leyes de la termodinámica.

4. NORMAS DE SEGURIDAD ESPECÍFICAS DE LA

PRÁCTICA

Sin riesgo particular, seguir las normas de seguridad generales.

5. DESARROLLO DE LA PRIMERA PRÁCTICA

ACTIVIDADES TIEMPO

REQUERIDO

RESULTADO DE LA

ACTIVIDAD

A) Actividad guiada por el

docente responsable de la

práctica

10

min.

El docente realizará una

explicación de la metodología de

la práctica.

ACTIVIDADES TIEMPO

REQUERIDO

RESULTADO DE LA

ACTIVIDAD

B) Actividad realizada por

los equipos de estudiantes

45

Min

Cada equipo desarrollará el

procedimiento señalado en la

práctica

C) Aplicación de la práctica Final de la práctica Reporte de laboratorio para la



Página 21

en el desempeño

profesional

30 min siguiente sesión.

Investigación bibliográfica sobre:

Bioenergética

Leyes de la termodinámica

Sistemas

Transformación de la energía

A) PRÁCTICA DIRIGIDA POR EL DOCENTE RESPONSABLE DE LA

PRÁCTICA:

En ésta etapa el docente explicará la metodología de la práctica.

B) ACTIVIDAD REALIZADA POR EL ALUMNO EN GRUPOS DE

TRABAJO.

Al concluir la explicación guiada por el docente, se dividirá al grupo en equipos de

trabajo, máximo de 3 estudiantes. Los equipos se organizarán en mesas de trabajo

para iniciar la práctica.

El desarrollo de ésta parte de la práctica se realizará de la manera siguiente:

1ª PRÁCTICA. PROCEDIMIENTO

REQUERIMIENTOS:

Dos estudiantes por grupo quienes tienen que traer ropa deportiva y tenis.

Dos relojes con cronómetro

Dos termómetros orales

PROCEDIMIENTO:

1. Antes de iniciar la prueba, al estudiante que va ha hacer el ejercicio, se le debe

tomar la temperatura (oral y axilar), así como la frecuencia respiratoria, datos



Página 22

que deben estar en la tabla. El sujeto debe estar en reposo y no debe haber

hecho ningún tipo de trabajo o ejercicio en los 15 minutos previos a la práctica.

2. El estudiante debe hacer marcha estacionaria, subiendo las rodillas a la altura

de la cadera durante 10 minutos. Es importante mantener el ritmo durante la

prueba y no debe detenerse a menos que el sujeto esté realmente exhausto.

3. Inmediatamente después de los 10 minutos, debe tomarse la temperatura axilar

y oral así como la frecuencia respiratoria y cardíaca, anotando los resultados en

la casilla correspondiente a 0 minutos, repita las mediciones al haber pasado 5,

10 y 15 minutos después de finalizado el ejercicio.

4. Analice los resultados y discuta los mismos.

RESULTADOS

TABLA DE RESULTADOS

CARACTERISTICAS

CONDICIONES

TEMPERATURA

ORAL

TEMPERATURA

AXILAR

FRECUENCIA

RESPIRATORIA

FRECUENCIA

CARDIACA

Al inicio de de la prueba

Al final del

ejercicio

(minutos)

0

5

10

15

C) APLICACIÓN DE LOS CONOCIMIENTOS , HABILIDADES Y

ACTITUDES ADQUIRIDOS EN LA PRÁCTICA, EN EL DESEMPEÑO

PROFESIONAL Y REPORTE DE LABORATORIO PARA LA SIGUIENTE

SESIÓN.

Reporte de laboratorio para la próxima práctica:

Una actividad académica importante en el modelo educativo es que el alumno

desarrolle habilidades y actitudes para la investigación. La investigación

bibliográfica por ejemplo, le permite ampliar más el acervo de conocimientos



Página 23

adquiridos y no conformarse con lo aprendido en el aula, el encontrar una utilidad

práctica a los conocimientos adquiridos le facilitan el aprendizaje.

6. SISTEMA DE EVALUACIÓN DE LA PRIMERA

PRÁCTICA

6.1 LINEAMIENTOS GENERALES PARA LA EVALUACIÓN

La evaluación será a través de los siguientes parámetros:

Reporte Escrito: El cual deberá tener la estructura descrita en el apartado: 5.1.

Lineamientos Generales para la Evaluación (pag 17)



6.2 MÉTODO DE ASIGNACIÓN DE CALIFICACIONES DE LA

PRIMERA PRÁCTICA

La calificación y ponderación de ésta primera práctica es la siguiente:


Actividades previas 10

Reporte Escrito. 50

Desempeño dentro del laboratorio. 30

Asistencia al laboratorio 10

7. BIBLIOGRAFÍA:

Harper Bioquímica ilustrada, Robert K. Murray, Peter A. Mayes, Daryl K.

Granner y Victor. W. Rodwell; 28ª. ed, Ed. Mc Graw Hill ,2010.



Página 24

Fundamentos de Bioquímica, Voet D., Voet JG., Pratt CW. 2ª. ed. Editorial

Médica Panamericana. 2007

Bioquímica, A. L. Lehninger, 3ª edición, Editorial Omega, S. A. 2001

Bioquímica: La base molecular de la vida. Trudy McKee y James R. McKee.

4ª ed., Ed. McGraw-Hill Interamericana. 2009

8. PARA SABER MÁS

Explique cómo se aplican las leyes de la termodinámica a la presente

práctica.

Explique como el organismo humano intercambia energía para considerarlo

un sistema abierto.

9. GLOSARIO DE TÉRMINOS

Investigue sobre los siguientes términos: Bioenergética, leyes de la

termodinámica, compuestos de fosfato de alta energía (ATP),

sistema abierto sistema cerrado, entropía, entalpia, energía

libre.



Página 25



SEGUNDA PRÁCTICA

DETERMINACIÓN DE VITAMINA C EN ALIMENTOS



Página 26


PRÁCTICA

Para un buen desarrollo de la actividad académica considerando el espacio, el


2. INTRODUCCIÓN DE LA SEGUNDA PRÁCTICA

Desde los tiempos de Hipócrates (400 A de C), algunas enfermedades se

atribuían a deficiencias dietéticas, debido a que podían curarse mediante el

consumo de ciertos alimentos. Los factores que originaban estas deficiencias

fueron designados como factores alimenticios complementarios, vitaminas o

aminas vitales, por la creencia errónea de que tales sustancias eran todas de

una estructura química, parecidas a las aminas.

Las vitaminas son moléculas orgánicas complejas, indispensables para el

funcionamiento adecuado de los seres vivos, componentes esenciales de la dieta,

que intervienen a concentraciones mínimas sin tener funciones estructurales ni

energéticas; sin embargo, muchas actúan como coenzimas en reacciones

enzimáticas y otras tienen actividades específicas en el funcionamiento celular. En

general no son sintetizadas por los animales, en la naturaleza las vitaminas son

producidas por las bacterias y los vegetales.

Las vitaminas se clasifican en liposolubles que comprenden las vitaminas A, D, E,

y K; y en hidrosolubles que constituyen las del llamado complejo B y además el

ácido ascórbico.

El ácido ascórbico o vitamina C es un compuesto cuya estructura semeja a la de

un monosacárido de 6 carbonos, se encuentra abundantemente en las frutas y

vegetales, especialmente en las partes en crecimiento activo de las plantas, como

las hojas tiernas y las flores; ocurre en menor proporción en tejidos animales; en la

leche de vaca hay cerca de 20 mg por litro. Los vegetales más ricos en ácido



Página 27

ascórbico son los chícharos y los vegetales con hojas, las papas, los nabos, los

tomates y las frutas cítricas como las naranjas, el limón, la toronja, así como la col

cruda.

El contenido de vitamina C en las frutas y verduras varía dependiendo del grado de

madurez, es menor cuando están verdes, aumenta su cantidad cuando están en su

punto y luego vuelve a disminuir; por lo que la fruta madura ha perdido parte de su

contenido de vitamina C. Lo más recomendable es comer las frutas y verduras

frescas puesto que la acción del calor destruye a la vitamina C, también el contacto

con el aire la oxida y pierde su actividad, esto hay que recordarlo cuando se

prepara un jugo de fruta como el de naranja, de no tomárselo rápidamente habrá

perdido una gran cantidad de vitamina C. La otra forma de destrucción de la

vitamina C, es al tener contacto con alcohol etílico, por ejemplo con la cerveza o el

tequila.

El hombre no es capaz de sintetizar el ácido ascórbico, por lo tanto si no lo

adquiere por medio de la dieta presenta signos de su deficiencia, llegando a

desarrollarse el cuadro del escorbuto, el que se caracteriza por tumefacción de

las encías, movilidad de los dientes, hemorragias numerosas y pequeñas en piel

y mucosas y fragilidad ósea, al igual que trastornos en la cicatrización, debido a

que el ácido ascórbico es necesario para la síntesis de hidroxiprolina y la

producción de osteoblastos.

Cualquier cantidad de vitamina C que se ingiera ó se inyecte en concentraciones

por encima de las necesidades, será excretada cuantitativamente por la orina, por

lo que no se justifica el empleo indiscriminado de vitamínicos en la práctica clínica.

Los requerimientos diarios de vitamina C para el adulto son de 75 a 100 mg por

día aumentando durante el embarazo y la lactancia a 150 mg; en niños son de 20

a 60 mg dependiendo de la edad. La excreción urinaria del ácido ascórbico por 24

horas normalmente es de 100 a 400 g por kg de peso.



Página 28

3. PROPÓSITO ESPECÍFICO DE LA SEGUNDA

PRÁCTICA:


2ª PRÁCTICA: Determinación de la vitamina C en alimentos

EL ALUMNO SERÁ COMPETENTE PARA DETERMINAR VITAMINA C EN

ALIMENTOS:

Sea capaz de realizar la determinación de vitamina C al aplicar los fundamentos

teórico – prácticos en la preparación de las soluciones a utilizar y en el

procedimiento para la determinación de la vitamina C en zumos diferentes frutas.

Para lo cual tendrá que:

Antes de usar un reactivo o cualquier sustancia química asegurarse de

conocer la Ficha de Datos de Seguridad, así como las Reglas básicas para el

manejo adecuado de reactivos y soluciones.

Seleccionar el mejor grado de sustancia disponible para el trabajo analítico.

Realizar cálculos para determinar la concentración y el volumen de la solución

a preparar

Conservar el área de trabajo, los materiales y los equipos limpios

Usar el material de vidrio adecuado para cada solución y conocer su método

de limpieza

Establecer y aplicar todas las operaciones requeridas para obtener la solución

(secado, pulverizado, enfriamiento, disolución en frío o con calentamiento,

transvasado, aforo, almacenamiento en un envase adecuado y etiquetado)

Operar adecuadamente el equipo empleado

Realizar cuidadosamente el procedimiento de determinación de la vitamina C

en los zumos de frutas a utilizar.

Comprender las reacciones que se llevan a cabo para el fin de determinar

vitamina C.



Página 29

3.2 RESULTADO FINAL DE LA SEGUNDA PRÁCTICA

El alumno será capaz de realizar la determinación de vitamina C en alimentos y

comparar el contenido de esta vitamina en los diferentes alimentos ensayados.


PRÁCTICA

4.1 CUADRO 4. DETECCIÓN DE RIESGOS PARTICULARES DE LA

SEGUNDA PRÁCTICA

Sin riesgo particular, seguir las normas de seguridad generales

4.2. DISPOSICIÓN DE DESECHOS

Los desechos de sustancias ácidas o básicas deben neutralizarse antes de verter al

drenaje y se deben vaciar cuando el agua de la llave este corriendo.

5. DESARROLLO DE LA SEGUNDA PRÁCTICA

El desarrollo de la segunda práctica será manejado en 3 etapas:

ACTIVIDADES TIEMPO

REQUERIDO

RESULTADO DE LA

ACTIVIDAD



práctica

20

min.

El docente realizara una


la práctica.



60

min


proceso analítico para preparar

las soluciones a la concentración

requerida y realizar el



Página 30

procedimiento para determinar

vitamina C en los zumos de

diferentes frutas.

C) Aplicación de la práctica

en el desempeño

profesional

Final de la práctica

40 min

Reporte de laboratorio para la

siguiente sesión.

A) Primera etapa de la práctica: PRÁCTICA DIRIGIDA POR EL

DOCENTE RESPONSABLE DE LA PRÁCTICA:


B) Segunda etapa de la práctica: ACTIVIDAD REALIZADA POR EL

ALUMNO EN GRUPOS DE TRABAJO.


trabajo máximo de 3 estudiantes. Los equipos se organizan en mesas de trabajo

para iniciar la práctica, con su procedimiento disponible.



o Reactivos

Almidón

Reactivo de lugol

Jugos de naranja, limón, tomate, zanahoria y durazno

Tabletas de vitamina C 500 mg

o Materiales

Gradilla

Tubos de ensayo

Pipeta

Tapones de caucho



Página 31

PROCEDIMIENTO:

1. Disuelva 0.5 g de almidón en 10.0 mL de agua.

2. En un tubo de ensayo adicione 2.0 mL de la solución de almidón y 1.0 mL de

lugol. Adicione media tableta de vitamina C. Registre sus observaciones.

3. La decoloración de la mezcla es una indicación de la presencia de vitamina C;

tenga en cuenta este resultado como patrón de referencia.

4. Identifica cinco tubos de ensayo como A, B, C, D y E y coloca en cada uno de

ellos 1.0 mL de la solución de almidón y 1.0 mL de lugol. Añada unas gotas de

jugo de naranja al tubo A; unas gotas de jugo de limón al tubo B; 1.0 mL de jugo

de tomate al tubo C; 1.0 mL de jugo de zanahoria al tubo D; y 1.0 mL de jugo de

durazno al tubo E. Tape cada tubo con un tapón de caucho y agítelos. Registre

sus observaciones para cada tubo.

5. Analice los resultados y discuta los mismos.



Página 32

RESULTADOS

Identifique cual de los alimentos empleados contiene mayor cantidad de

vitamina C.

Consulte un método sencillo de laboratorio para identificar otras vitaminas

diferentes a la C.

C) Tercera etapa de la práctica: APLICACIÓN DE LOS CONOCIMIENTOS

, HABILIDADES Y ACTITUDES ADQUIRIDOS EN LA PRÁCTICA, EN EL

DESEMPEÑO PROFESIONAL Y REPORTE DE LABORATORIO PARA

LA SIGUIENTE SESIÓN.

Reporte de laboratorio para la próxima práctica de acuerdo al formato establecido:

6. SISTEMA DE EVALUACIÓN DE LA SEGUNDA

PRÁCTICA



Actividades previas: Cálculos realizados previamente y diagrama de flujo de la

práctica realizados en su bitácora de practicas.







Página 33


SEGUNDA PRÁCTICA

La calificación y ponderación de ésta segunda práctica es la siguiente:



Reporte Escrito. 35



7. BIBLIOGRAFÍA:








8. PARA SABER MÁS

Realizar una búsqueda bibliográfica o en internet sobre los temas de:

Vitaminas, antioxidantes y coenzimas.

Determinación de vitamina C:

El ácido ascórbico o vitamina C (C6H8O6) se puede determinar por medio

de una titulación yodométrica. La vitamina C es un agente reductor suave



Página 34

que reacciona rápidamente con el ión triyoduro, en esta práctica se genera

un exceso conocido de ion triyoduro (I3- ) por reacción de

yodato con yoduro, se deja reaccionar y luego el exceso de I3- se titula por

retroceso con una

solución de tiosulfato. El método se basa en las siguientes reacciones:

8I- + IO3- + 6H+____ 3I3- + 3H2O

C6H8O6 + I3- + H2O _______ C6H8O7 + 2H+ + 3I

Ácido

ascórbico ácido deshidroascórbico

I3- + 2(S2O3)-2 ______ 3I- + (S4O6)-2

Tiosulfato tetrationato


Investigue sobre los siguientes términos: Vitaminas hidrosolubles,

vitaminas liposolubles, hipervitaminosis, deficiencia de vitaminas

escorbuto.



Página 35



TERCERA PRÁCTICA

DEGRADACIÓN ENZIMÁTICA DE POLISACÁRIDOS



Página 36


PRÁCTICA



2. INTRODUCCIÓN DE LA TERCERA PRÁCTICA

Una de las funciones fundamentales del aparto digestivo es transformar los

alimentos ingeridos en estructuras sencillas capaces de ser absorbidas a nivel

intestinal. La digestión de carbohidratos ingeridos (como es el caso del almidón)

comienza en la boca a través de la ptialina. Esta enzima es una α-amilasa que

hidroliza enlaces α (1,4) internos, pero no los α(1,6) próximos a las ramificaciones.

Los productos de esta digestión en la boca son maltosa e isomaltosa y otros

polímeros que contienen de 3 a 9 moléculas de glucosa. Aunque el alimento

permanece en la boca un corto período de tiempo, la acción de la amilasa salival

continúa hasta que el pH ácido del contenido estomacal la inactiva, de manera que

hasta ese momento la enzima hidroliza de un 30 a un 40% de los almidones de la

dieta. A nivel intestinal actúa otra α-amilasa de origen pancreático y con una

actividad semejante a la salival, rindiendo productos de degradación similares.

Estos productos sufren finalmente la acción de otras carbohidrolasas (maltasa,

lactasa, isomaltasa) liberando los monosacáridos que posteriormente son

absorbidos. El almidón es el polisacárido de reserva más abundante en los

vegetales. Está formado por α-amilosa (lineal de unas 200 unidades de D-glucosa

unidas por enlaces α-(1,4) glucosídicos) y por amilopectina (lineal de glucosa con

enlaces α- (1,4) y con ramificaciones mediante enlaces α-(1,6)-glucosídicos). La α-

amilosa en agua presenta una ordenación espiral característica, con 6 ó 7 residuos

de glucosa por vuelta. En esta hélice los grupos hidroxilos quedan hacia fuera,

mientras que en el interior se disponen los grupos hidrofóbicos. En este interior es



Página 37

donde se incluye el yodo, formando un complejo de intenso color azul que permite

la identificación positiva de trazas de almidón. La amilasa salival actúa sobre el

almidón de los alimentos liberando azúcares reductores, estos azúcares en medio

alcalino, son capaces de reducir el ion Cu2+ de color azul a Cu+ de color rojo. Por

otro lado, en medio fuertemente básico, el ión Cu2+ formaría Cu(OH)2 insoluble, por

ello se añade tartrato sódico potásico que actúa como estabilizador al formar un

complejo con el Cu2+.

3. PROPÓSITO ESPECÍFICO DE LA TERCERA

PRÁCTICA


3ª PRÁCTICA: DEGRADACIÓN ENZIMÁTICA DE POLISACÁRIDOS

EL ALUMNO SERÁ COMPETENTE PARA REALIZAR UNA DEGRADACIÓN

ENZIMÁTICA DE POLISACÁRIDOS CUANDO:

Sea capaz de: comprender la acción de las enzimas sobre los polisacáridos y las

condiciones en que se llevan a cabo.

3.2 RESULTADO FINAL DE LA TERCERA PRÁCTICA

El alumno será capaz de comprender bajo qué condiciones experimentales se

realiza la degradación enzimática de los polisacáridos



Página 38


PRÁCTICA

4.1 CUADRO 5. DETECCIÓN DE RIESGOS PARTICULARES DE LA

TERCERA PRÁCTICA.

Tipo de peligro Como evitarlo Como proceder en caso

de accidente…

Contacto de la piel con

ácido clorhídrico

Manejo adecuado del

reactivo.

Usar bata manga larga

El acido diluido pueden

causar quemaduras leves.

Lavar con agua corriente

durante 15 min., quitarse la

ropa contaminada y

calzado.

Contacto de los ojos

con ácido clorhídrico

Manejo adecuado del

reactivo.

Usar lentes.

A baja concentración causa

irritación. Lave rápidamen

te con agua en un lavaojos,

unos 15 min., separando

los párpados. De

mantenerse el daño, acudir

a una asistencia médica.

Ingestión de ácido

clorhídrico

Manejo adecuado del

reactivo.

Usar pipetores

manuales o

automáticos.

El producto causa quema

duras y ulceraciones del

tracto gastrointestinal. No

provocar vomito. Lavar la

boca con agua. Dar de 240

a 300 mL de agua y leche.

Proporcionar atención

médica inmediatamente.

Contacto de hidróxido Manejo adecuado del Lavarse rápidamente con



Página 39

de sodio con los ojos reactivo.

Usar lentes.

abundante agua en un

lavaojos, entre 15 y 30

min., mínimo, separando

los párpados. De seguir el

daño, acudir al médico.

Tipo de peligro Como evitarlo Como proceder en caso de

accidente

Contacto de la piel

con hidróxido de

sodio

Manejo adecuado del

reactivo.

Usar bata manga larga

Lavar rápidamente con

abundante agua, por lo menos

de 15 a 20 minutos en una

ducha de emergencia. Quitar

la ropa contaminada. Si

persiste el daño, acudir al

médico.

Ingestión de

hidróxido de sodio

Manejo adecuado del

reactivo.

Usar pipetores

automáticos o

manuales

Este producto produce quema

duras y ulceraciones. Lavar la

boca con bastante agua. Dar a

beber 250 a 300 mL de Agua

para diluir. No inducir al

vómito. Acudir al medico

rápidamente.






Página 40

5. DESARROLLO DE LA TERCERA PRÁCTICA

El desarrollo de la tercera práctica será manejado en 3 etapas:

ACTIVIDADES TIEMPO

REQUERIDO

RESULTADO DE LA

ACTIVIDAD



práctica

15

min.



la práctica.



75

min


proceso para la degradación

enzimática de polisacáridos.


en el desempeño

profesional


30 min


siguiente sesión.

A) Primera etapa de la práctica: PRÁCTICA DIRIGIDA POR EL DOCENTE

RESPONSABLE DE LA PRÁCTICA:

En ésta etapa el docente explicará la metodología de la práctica y revisará el

procedimiento a desarrollar por los estudiantes.









Página 41

3° PRÁCTICA: PROCEDIMIENTO

MATERIAL:

1 Gradilla

6 tubos de ensayo

1 Termómetro

Papel indicador universal o pHmetro

1 Gotero

1 Vaso de precipitado

1 Mechero

1 Trípode

1 Malla de asbesto

REACTIVOS:

Saliva

Solución de almidón al 5%

Lugol

Solución de HCl al 5%

Solución de NaOH al 5%

Hielo

Agua caliente

PROCEDIMIENTO:

1. Coloque 3.0 mL de solución de almidón y 2 gotas de saliva en tres tubos de

ensayo previamente marcados A, B y C.

2. Determine el pH en cada tubo, utilizando un pHmetro o papel indicador

universal. Registre los resultados.

3. Agregue al tubo A 1.0 mL de ácido clorhídrico al 5%; al tubo B 1.0 mL de NaOH

al 5%; y al tubo C 1.0 mL de agua.



Página 42

4. Prepara un baño María con una temperatura de 37 ºC y coloque los tres tubos

de ensayo durante 10 minutos.

5. Retire los tubos de ensayo del baño maría y añada cinco gotas de lugol a cada

uno. Registre los cambios de color, olor, temperatura, etc.

6. En otros tres tubos de ensayo, previamente marcados como D, E y F, adicione

tres mL de almidón y dos gotas de saliva, a cada uno.

7. Durante diez minutos coloque el tubo D en hielo, el tubo E en el baño María a 37

ºC y el tubo F en agua hirviendo.

8. Retire los tubos de ensayo D, E y F de las anteriores condiciones y agregue

cinco gotas de lugol a cada uno.

RESULTADOS

Registre todos los cambios que observe.

Análisis

¿En qué situación se registró la mayor actividad enzimática y como la

evidencia?

C) Tercera etapa de la práctica: APLICACIÓN DE LOS CONOCIMIENTOS ,

HABILIDADES Y ACTITUDES ADQUIRIDOS EN LA PRÁCTICA, EN EL






Página 43

6. SISTEMA DE EVALUACIÓN DE LA TERCERA

PRÁCTICA



Actividades previas: Cálculos realizados previamente, preparación de

soluciones (Practica 2) y diagrama de flujo de la práctica realizados en su

bitácora de prácticas.






TERCERA PRÁCTICA




Reporte Escrito. 50



7. BIBLIOGRAFÍA:





Página 44






9. PARA SABER MÁS


titulación volumétrica, valoración de soluciones, modo de acción de una

sustancia indicadora.

Conteste las siguientes preguntas:


Investigue sobre los siguientes términos: Enzimas, Polisacáridos,

digestión, Hidrólisis y amilasa



Página 45



CUARTA PRÁCTICA

LOS PRODUCTOS DE LA RESPIRACIÓN ANAEROBIA



Página 46


PRÁCTICA



2. INTRODUCCIÓN DE LA CUARTA PRÁCTICA

Clásicamente se ha considerado que las levaduras son los microorganismos mas

vinculados al progreso y bienestar humano, por su participación en proceso de

fermentación. Se ha dicho que la levadura es la “planta” más antigua que ha sido

cultivada. Se sabe que la fabricación del pan y la cerveza ya se practicaban en

Tebas durante la IX dinastía 2000 años antes de Cristo. Tales procesos se han

venido desarrollando hasta nuestros días. La levadura Saccharomyces cerevisiae y

algunas especies próximas han sido microorganismos muy utilizados tanto en

microbiología industrial (pan, bebidas fermentadas, y, ocasionalmente glicerina y

grasa) como en todo el desarrollo de la bioquímica. Probablemente el primero que

vio una célula de levadura fue A. Vaan Leewenhoek, en 1680.

En el siglo XVIII Linneo se interesó en la fermentación alcohólica, pero hubo que

esperar hasta mediados del siglo XIX los primeros avances importantes en el

conocimiento de la fisiología y bioquímica de las levaduras. En 1897 los hermanos

Buchner obtuvieron el primer extracto de levadura con el que fermentaron glucosa.

Por este motivo esta fecha se considera como la del nacimiento de la bioquímica.

La fermentación fue descubierta por Pasteur, que la describió como la vie sans l´air

(la vida sin el aire) y el proceso químico de la fermentación alcohólica fue

establecido por Gay-Lussac a principios del siglo XIX. El término fermentación, en

su acepción estricta, se refiere a la obtención de energía en ausencia de oxígeno y

generalmente lleva agregado el nombre del producto final de la reacción.



Página 47

Las fermentaciones pueden ser: naturales, cuando las condiciones ambientales

permiten la interacción de los microorganismos y los sustratos orgánicos

susceptibles; o artificiales, cuando el hombre propicia condiciones adecuadas.

La fermentación alcohólica (denominada también como fermentación del etanol o

incluso fermentación etílica) es un proceso biológico de fermentación en plena

ausencia de aire (oxígeno) anaerobico, originado por la actividad de algunos

microorganismos que procesan los hidratos de carbono (por regla general

azúcares: como pueden ser por ejemplo la glucosa, la fructosa, la sacarosa, el

almidón, etc.) para obtener como productos finales: un alcohol en forma de etanol

(cuya fórmula química es: CH3-CH2-OH), dióxido de carbono (CO2) en forma de gas

y unas moléculas de ATP que consumen los propios microorganismos en su

metabolismo celular energético anaeróbico. El etanol resultante se emplea en la

elaboración de algunas bebidas alcohólicas, tales como el vino, la cerveza, la sidra,

etc. Aunque en la actualidad se empieza a sintetizar también etanol mediante la

fermentación a nivel industrial a gran escala para ser empleado como

biocombustible.

También se produce la fermentación en la mayoría de las células de los animales

(incluido el hombre), excepto en las neuronas que mueren rápidamente si no

pueden realizar la respiración celular; algunas células, como los eritrocitos, carecen

de mitocondrias y se ven obligadas a fermentar; el tejido muscular de los animales

realiza la fermentación láctica cuando el aporte de oxígeno a las células musculares

no es suficiente para el metabolismo aerobio y la contracción muscular. Desde el

punto de vista energético, las fermentaciones son muy poco rentables si se

comparan con la respiración aerobia, ya que a partir de una molécula de glucosa

sólo se obtienen 2 moléculas de ATP, mientras que en la respiración se producen

38. Esto se debe a que la oxidación del NADH producido en la glucolisis, en lugar

de penetrar en la cadena respiratoria, cede sus electrones a compuestos orgánicos

que se reducirán para poder reoxidar el NADH a NAD+. Ello significa que el aceptor

final de los electrones del NADH no es el oxígeno.

http://es.wikipedia.org/wiki/Catabolismo

http://es.wikipedia.org/wiki/Fermentaci%C3%B3n

http://es.wikipedia.org/wiki/Aire

http://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgeno

http://es.wikipedia.org/wiki/Hidrato_de_carbono

http://es.wikipedia.org/wiki/Glucosa

http://es.wikipedia.org/wiki/Fructosa

http://es.wikipedia.org/wiki/Sacarosa

http://es.wikipedia.org/wiki/Almid%C3%B3n

http://es.wikipedia.org/wiki/Etanol

http://es.wikipedia.org/wiki/Carbono




http://es.wikipedia.org/wiki/Hidroxilo

http://es.wikipedia.org/wiki/Di%C3%B3xido_de_carbono

http://es.wikipedia.org/wiki/Gas

http://es.wikipedia.org/wiki/Adenos%C3%ADn_trifosfato

http://es.wikipedia.org/wiki/Metabolismo

http://es.wikipedia.org/wiki/Bebida_alcoh%C3%B3lica

http://es.wikipedia.org/wiki/Vino

http://es.wikipedia.org/wiki/Cerveza

http://es.wikipedia.org/wiki/Sidra

http://es.wikipedia.org/wiki/Biocombustible



Página 48

La glucólisis es la primera etapa de la fermentación, lo mismo que en la respiración

celular, y al igual que ésta necesita de enzimas para su completo funcionamiento.

El balance final de la fermentación alcohólica es el siguiente:

Glucosa + 2 ADP + 2 Pi =====> 2 etanol + 2 CO2 + 2 ATP + 2 H2O

La molécula de glucosa (de 6 C) se escinde y rinde dos moléculas de etanol (de 2

C cada una) y dos moléculas de CO2. En las levaduras, el piruvato se descarboxila

para formar acetaldheído, que posteriormente se reduce por el NADH para formar

etanol.

3. PROPÓSITO ESPECÍFICO DE LA CUARTA

PRÁCTICA:


4ª PRÁCTICA: LOS PRODUCTOS DE LA RESPIRACIÓN ANAEROBIA

EL ALUMNO SERÁ COMPETENTE PARA MONTAR UN DISPOSITIVO PARA

REALIZAR UN EXPERIMENTO QUE GENERE PRODUCTOS DE RESPIRACIÓN

ANAEROBIA.

Sea capaz de conocer y aplicar correctamente los conocimientos de la respiración

celular. Tenga habilidad para obtener conteo de levaduras.



Página 49

3.2 RESULTADO FINAL DE LA CUARTA PRÁCTICA

El alumno será capaz de establecer un dispositivo en que se generen productos de

la respiración anaerobia mediante un cultivo de levaduras.


PRÁCTICA

4.1DETECCIÓN DE RIESGOS PARTICULARES DE LA CUARTA

PRÁCTICA.

Sin riesgo particular, seguir los lineamientos generales de seguridad del

laboratorio.




5. DESARROLLO DE LA CUARTA PRÁCTICA

El desarrollo de la cuarta práctica será manejado en 3 etapas.

ACTIVIDADES TIEMPO

REQUERIDO

RESULTADO DE LA

ACTIVIDAD



práctica

10 min.


explicación de la metodología

de la práctica.



Página 50



El dispositivo con el

cultivo de levaduras

requiere de 48 horas,

el alumno realizará

mediciones al tiempo

0, 24 y 48 hrs.

Cada equipo montará el

dispositivo indicado en el

procedimiento de la práctica y

pondrá en marcha el

experimento.

C) Aplicación de la

práctica en el desempeño

profesional


20 min


siguiente sesión.

A) Primera etapa de la práctica: PRÁCTICA DIRIGIDA POR EL

DOCENTE RESPONSABLE DE LA PRÁCTICA:








4ª PRÁCTICA: PROCEDIMIENTO

MATERIAL:

1 probeta de 100 ml 1 Soporte universal con pinzas

1 vaso de precipitado de 250 ml 1 Manguera

1 Tubo de ensaye con tapón monohoradado 1 gotero



Página 51

3 Tubos de vidrio 1 Globo pequeño

1 Matraz Erlemeyer con tapón bihoradado 1 litro de Jugo de cualquier fruta (uva, manzana, piña, caña, excepto cítricos)

EQUIPO:

1 balanza

1 microscopio

1 cámara de Neubauer

REACTIVOS:

1 paquete pequeño de Levadura fresca de panadería, puede ser levadura seca o en pastilla

20 gr. de hidróxido de calcio (Cal)

PROCEDIMIENTO Se procede a medir en la probeta, 100 ml del jugo de fruta, éste debe ser de

preferencia natural y se coloca en el matraz erlemeyer. Pesar 5 g, de levadura y

disolverla en 50 ml de agua tibia, mezclarla con el jugo del matraz.

En el vaso de precipitado se coloca la cal y se le pone agua destilada, hasta hacer

una solución saturada, (cuando se incorpora más cal esta se precipita, es decir ya

no se disuelve) se deja reposar y se utiliza esta agua para llenar el tubo de ensaye

en ¾ partes. Se procede a montar con el material un dispositivo como: el de la

figura.



Página 52

El matraz con la solución de fruta y levadura se tapa con el tapón bihoradado. En

una de las aberturas del tapón, se coloca un tubo de vidrio pequeño, que en el

extremo contenga el globo y en la otra abertura un tubo de vidrio que se conecta a

la manguera. La manguera va conectada a un tubo de vidrio que penetra por el

tapón monohoradado en el tubo de ensaye que contiene el agua de cal.

Una vez hecha la solución de levadura, toma una gota y colócala en un

portaobjetos de cámara de Neubauer pon el cubreobjetos. Coloca la preparación en

el microscopio y enfócala Encontraras una rejilla, selecciona un cuadro y cuenta

cuantas levaduras encuentras, realiza la operación en 10 cuadros al azar. Anota en

tu cuaderno en una tabla las cantidades encontradas. Deja tu dispositivo durante 24

h, y haz tus primeras observaciones. Realiza un nuevo conteo de levaduras. A las

48 h harás tus observaciones finales. Anota en tu cuaderno lo que está sucediendo,

y realiza el último conteo de levaduras. Gráfica las cantidades obtenidas.

RESULTADOS

Tabla de Datos para el conteo de levaduras

Conteo inicial (0 h) Conteo

No. de levaduras

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

Total

Graficar el número de levaduras de los conteos.

Los resultados obtenidos serán un aumento en el número de levaduras, el globo se

va a inflar y el tubo de cal se enturbiará por la presencia de carbonato de calcio. El

Tabla final de datos

Conteo

No. de

levaduras

globo sol. cal

1 (0 h)

2 (24 h)

3 (48 h)



Página 53

profesor debe discutir con los alumnos los resultados obtenidos y compararlos con

las predicciones de cada equipo para definir si la aceptan o rechazan.

C) Tercera etapa de la práctica: APLICACIÓN DE LOS CONOCIMIENTOS,


DESEMPEÑO PROFESIONAL Y REPORTE DE LABORATORIO PARA LA

SIGUIENTE SESIÓN.

La práctica culmina cuando se han resuelto todas las actividades de aplicación y

se ha respondido a cada una de las preguntas de la evaluación del aprendizaje

En esta etapa el alumno desarrolla la habilidad de argumentar los resultados

obtenidos.

Reporte de laboratorio para la próxima práctica de acuerdo al formato

establecido:

6. SISTEMA DE EVALUACIÓN DE LA CUARTA

PRÁCTICA











Página 54


CUARTA PRÁCTICA

La calificación y ponderación de ésta cuarta práctica es la siguiente:



Reporte Escrito. 50



7. BIBLIOGRAFÍA:








10. PARA SABER MÁS


Investiga con que industrias relacionarías este proceso.

Describe que aportan estas industrias a la Biotecnología.

¿Qué otros organismos se utilizan actualmente en Biotecnología?

Contesta las siguientes preguntas

1. - ¿Por qué se infló el globo?

2. - ¿Qué gas piensas que se acumuló en el globo?



Página 55

3. - ¿Cómo probarías que gas es?

4. -¿Qué le sucedió al jugo de frutas?

5. - ¿Cómo identificarías el líquido que se obtuvo?

6. - ¿Qué papel tiene la levadura en este proceso?

7. ¿Con qué función de los seres vivos relacionarías este proceso?

8. - ¿Qué sucedió con la cantidad de levaduras, aumentó disminuyó?

9. - ¿Por qué piensas que sucedió eso con la cantidad de levaduras?


Investiga los siguientes términos:

Levadura, oxidación, glucosa, ATP, anaerobia, aerobia, ácido láctico,

metabolismo, ciclo de Krebs, cadena respiratoria.



Página 56



QUINTA PRÁCTICA

DETERMINACION DE TRIGLICÉRIDOS EN SUERO



Página 57


PRÁCTICA



2. INTRODUCCIÓN DE LA QUINTA PRÁCTICA

3. PROPÓSITO ESPECÍFICO DE LA QUINTA

PRÁCTICA

Los triacilgliceroles (triglicéridos) son lípidos formados por la esterificación de tres

moléculas de ácidos grasos con una molécula de glicerol. Se encuentran presentes

en los aceites y las grasas que forman parte de las dietas comunes. En el tejido

adiposo, donde constituyen la principal forma de almacenamiento energético. Los

triacilgliceroles dietarios se dirigen por acción de la lipasa pancreática, generando

principalmente monoacilgliceroles y ácidos grasos, productos capaces de ser

absorbidos por el intestino.

En los enterocitos se reesterifican los monoacilgliceroles con los ácidos grasos, y

los triacilgliceroles resultantes se asocian con otros componentes para estructurar

las lipoproteínas conocidas como quilomicrones, los cuales son secretados hacia la

linfa, a través de la cual son llevados a la circulación general.

En los capilares sanguíneos de diversos tejidos, principalmente del adiposo y del

muscular, la lipoproteína lipasa (LP) hidroliza más del 80% de los triacilgliceroles

de los quilomicrones, la mayor parte de los ácidos grasos liberados penetran a las

células del tejido correspondiente, mientras que el glicerol es captado y

metabolizado por el hígado. Después de que actúa la LP sobre los quilimicrones,

estos quedan convertidos en lipoproteínas pequeñas de alto contenido relativo de



Página 58

colesterol, llamadas remanentes de quilimicrones cuyo destino es ser endocitadas

por los hepatocitos.

El hígado forma triacilgliceroles a partir de los carbohidratos dietarios cuando estos

se hayan en exceso. Debido a que el hígado no almacena normalmente grasa, sus

triacilgliceroles se asocian con otros componentes lipídicos y proteínicos para

estructurar por ejemplo, las lipoproteínas de muy baja densidad (LVDL), las cuales

secretan a la sangre.

De manera similar a lo que ocurre con los quilimicrones, la LP hidroliza la mayor

parte de los triacilgliceroles presentes en las LVDL, penetrando los ácidos grasos

liberados, a las células de tejido correspondiente. En la fase de ayuno las LVDL

llegan solamente a tejidos de utilización (p.ej. músculo) mientras que en la fase

postrandial llega preferentemente al tejido adiposo para su almacenamiento.

Por otra parte la elevación de la concentración plasmática de triacilgliceroles

constituye un factor de riesgo aterogénico la concentración normal es menor a 200

mg/dL, aunque se considera sospechosa de hipertriacilgliceridemia en 350 y 200

mg/dL. Aquellos países con dietas altas en grasas animales contienen elevada

prevalencia de aterosclerosis y sus complicaciones por el contrario, en países con

ingesta baja de grasas saturadas, como es el caso de Japón y algunos países

mediterráneos, la prevalencia de aterosclerosis es baja.

Se ha documentado que las campañas exitosas para disminuir la ingesta de grasa

animal en países con alta prevalencia de aterosclerosis y cardiopatía isquémica,

logran reducir la mortalidad por esta causa, lo cual tiene gran importancia clínica.

El hombre primitivo requería el almacenamiento de grasas en su cuerpo debido a lo

incierto de cuando podría tomar su próximo alimento, sin embargo, en la mayoría

de la sociedades actuales es innecesario el almacenamiento de grasas, dada la

disponibilidad de alimentos a cualquier hora del día y a que el esfuerzo físico cada

vez es menor.

En general, las grasas insaturadas son de origen vegetal y por lo tanto su ingesta

no se haya asociada por si misma a la ingesta de colesterol. Además, dicha grasa

proporciona ácidos grasos insaturados como el linoléico, el linolénico y el

araquidónico, conocidos como ácidos grasos esenciales, aunque en la realidad el



Página 59

único verdaderamente esencial es el linoéico ya que el organismo no lo puede

sintetizar, pero si se encuentra disponible, el organismo sintetiza a partir de él los

otros dos.


5ª PRÁCTICA: DETERMINACION DE TRIGLICÉRIDOS EN SUERO

EL ALUMNO SERÁ COMPETENTE PARA:

1. Determinar la concentración de triacilgliceroles por un método enzimático

colorimétrico

2. Enunciar la importancia clínica de la determinación los triacilgliceroles.

3. Describir los sistemas de absorción y transporte de triacilgliceroles

3.2 RESULTADO FINAL DE LA QUINTA PRÁCTICA

El estudiante determinará la concentración de triglicéridos en suero sanguíneo

y comprenderá las reacciones que se llevan a cabo en el procedimiento.

Además establecerá por comparación de los valores normales si las cifras de

triglicéridos son normales.


PRÁCTICA

4.1 DETECCIÓN DE RIESGOS PARTICULARES DE LA QUINTA

PRÁCTICA.




Página 60


Los desechos biológicos serán colocados en los depósitos que para tal fin se

encuentran en el laboratorio. Así mismo los objetos punzocortantes serán

confinados al depósito señalado en el laboratorio.

5. DESARROLLO DE LA QUINTA PRÁCTICA

El desarrollo de la quinta práctica será manejado en 3 etapas.

ACTIVIDADES TIEMPO

REQUERIDO

RESULTADO DE LA

ACTIVIDAD



práctica

10

min.



la práctica.



50

min


procedimiento para la

determinación de los triglicérdios

en suero.


en el desempeño

profesional


20 min


siguiente sesión.








Página 61



para iniciar la práctica con su muestra respectiva.



Material 3 Tubos de ensaye

1Gradilla

1 Pipeta de 1.0 ml

1 Micropipeta de 20 l

Reactivos Equipo Suero

Patrón de triglicéridos Espectrofotómetro

Reactivo de trabajo

PROCEDIMIENTO: Lleve a cabo el procedimiento como lo indica la siguiente tabla:

Solución Suero Patrón Reactivo de Trabajo

Blanco ------ ------- 1.0 ml

Patrón ------ 10 l 1.0 ml

Muestra 10 l ----- 1.0 ml

Mezclar e incubar a 37°C durante 5 min medir la absorbancia a 505 nm de la muestra y del patrón frente al blanco. El color es estable durante 60 min.

La hidrólisis de los triacilgliceroles produce ácidos grasos y glicerol por acción

de la lipasa. El glicerol formado reacciona con ATP, produciendo glicerolfosfato y ADP

por catálisis de la glicerolcinasa. El glicerol fosfato a su vez reacciona con oxígeno y



Página 62

da como productos dihidroxiacetona fosfato y peróxido de hidrógeno, en una reacción

catalizada por la glicerolfosfato oxidasa.

El peróxido de hidrógeno reacciona con 4-aminofenazona y 4-clorofenol,

generando quinoneimina (compuesto colorido), ácido clorhídrico y agua. La

concentración del compuesto colorido es proporcional a la concentración de

triacilgliceroles.

RESULTADOS

Lleve a cabo los cálculos siguientes para obtener la concentración de triacilgliceroles

en la muestra problema.

A muestra __________ X 200 = Trigliacilgliceroles mg/dL A patrón Valores normales:

Sospecha de hipertriacilgliceridemia: a partir de: 150 mg/dL

Hipertriacilgliceridemia: a partir de: 200 mg/dL

C) Tercera etapa de la práctica: APLICACIÓN DE LOS CONOCIMIENTOS ,







Página 63

6. SISTEMA DE EVALUACIÓN DE LA QUINTA

PRÁCTICA



Actividades previas: Preparación de soluciones (Practica 2) y diagrama de flujo

de la práctica en su bitácora de prácticas.



Desempeño dentro del laboratorio



QUINTA PRÁCTICA




Reporte Escrito. 50



7. BIBLIOGRAFÍA:







Página 64




8. PARA SABER MÁS

Realizar una búsqueda bibliográfica o en internet sobre los resultados

obtenidos en la práctica realizada.

Construya un esquema del metabolismo de los triglicéridos en el hígado.

Elabore una tabla que incluya diferentes grasas, aceites y mantecas en las

que se indiquen sus principales características.

Mencione y explique al menos dos fisiopatologías que involucren

alteraciones en el metabolismo de los triglicéridos.

¿De qué se componen las lipoproteínas? ¿Cuál es la función biológica y

clasificación?



Página 65



SEXTA PRÁCTICA

DETERMINACIÓN DE COLESTEROL EN SUERO



Página 66


PRÁCTICA



2. INTRODUCCIÓN DE LA SEXTA PRÁCTICA

El colesterol es un derivado del ciclopentanoperhidrofenantreno. Es una molécula

insoluble en agua que se encuentra en todos los tejidos corporales, especialmente en

cerebro, hígado, médula osea y piel. El colesterol se encuentra en todas las células

animales formando parte de las membranas y los distintos tipos de lipoproteínas:

además de las sales biliares, es precursor de vitamina D y de toda la familia de

hormonas esteroides.

HO

3

5

COLESTEROL

El colesterol se encuentra en el suero o en plasma en forma libre o esterificada con

ácidos grasos. A través del tiempo el interés clínico por los lípidos sanguíneos ha

oscilado entre el colesterol, las lipoproteínas y los triglicéridos, pero en estudios no

especializados la colesterolemia continua siendo el dato preferido por la sencillez de

su valoración y bajo costo. Para la determinación de colesterol total se utiliza una

serie de reacciones enzimáticas. El experimento que se va a efectuar, consiste en

determinar la colesterolemia en el humano por el método de Bloor, que utiliza la



Página 67

reacción de Lieberman Burchard para producir un color verde de intensidad

proporcional a la concentración del colesterol.

3. PROPÓSITO ESPECÍFICO DE LA SEXTA

PRÁCTICA:


6ª PRÁCTICA: DETERMINACIÓN DE COLESTEROL EN SUERO

EL ALUMNO SERÁ COMPETENTE PARA:

Determinar el contenido de colesterol total plasmático (método enzimático

colorimétrico).

Comprender las reacciones que se llevan a cabo para la determinación de colesterol.

3.2 RESULTADO FINAL DE LA SEXTA PRÁCTICA

El estudiante determinará la concentración de colesterol en suero sanguíneo y

comprenderá las reacciones que se llevan a cabo en el procedimiento.

Además establecerá por comparación de los valores normales si las cifras de

colesterol son normales.


PRÁCTICA

4.1 DETECCIÓN DE RIESGOS PARTICULARES DE LA

SEXTA PRÁCTICA




Página 68





5. DESARROLLO DE LA SEXTA PRÁCTICA

El desarrollo de la cuarta práctica será manejado en 3 etapas.

ACTIVIDADES TIEMPO

REQUERIDO

RESULTADO DE LA

ACTIVIDAD



práctica

10

min.



la práctica.

B) Parte experimental

realizada por los equipos

de estudiantes

50

min


proceso analítico para

determinar de colesterol en suero

sanguíneo.


en el desempeño

profesional


20 min


siguiente sesión.






Página 69








MATERIAL:

3 Tubos de ensaye

2 Vasos de precipitado

3 Pipetas graduadas de 1.0 ml

1 Pipeta graduada de 5 ml

MUESTRA

Suero sanguíneo

REACTIVOS

Ácido sulfúrico concentrado

Mezcla Ácido acético/anhídrido acético 1:1

Estándar de colesterol 250 mg/100ml

Agua destilada

EQUIPO:

Baño de hielo

Espectrofotómetro

PROCEDIMIENTO:

1. Marcar 3 tubos de ensaye con los números 1,2 y 3.



Página 70

2. Agregar a cada tubo 4.1 ml de la mezcla de ácido acético/anhídrido acético.

3. Colocar los tubos en un recipiente con hielo y agregar 0.8 ml de ácido sulfúrico

concentrado.

4. Agregar al tubo No.1, 0.1 ml de suero sanguíneo.

5. Agregar al tubo No.2, 0.1 ml de la solución estándar de colesterol, 250mg/100ml

6. Agregar al tubo No.3, 0.1 ml de agua destilada.

7. Agitar los tubos PERFECTAMENTE y dejarlos reposar durante 10 min. en la

oscuridad.

8. Leer en el espectrofotómetro a 640 nm usando el tubo No.3 como "blanco".

RESULTADOS

Lleve a cabo los cálculos siguientes para obtener la concentración de colesterol en la

muestra problema.

D.O. de la muestra X [estándar] = mg de colesterol D.O. de la sol. estándar 100 ml de sangre Valores normales:

Deseable: menos de 200 mg/dl

Límite alto: 200-239 mg/dl

Hipocolesterolemia: a partir de 240 mg/dl

C) . Tercera etapa de la práctica: APLICACIÓN DE LOS

CONOCIMIENTOS , HABILIDADES Y ACTITUDES ADQUIRIDOS EN LA

PRÁCTICA EN EL DESEMPEÑO PROFESIONAL Y REPORTE DE

LABORATORIO PARA LA SIGUIENTE SESIÓN.




Página 71

6. SISTEMA DE EVALUACIÓN DE LA SEXTA

PRÁCTICA









6.2 MÉTODO DE ASIGNACIÓN DE CALIFICACIONES DE LA SEXTA

PRÁCTICA

La calificación y ponderación de ésta sexta práctica es la siguiente:



Reporte Escrito. 50



7. BIBLIOGRAFÍA








Página 72



8. PARA SABER MÁS

Realizar una búsqueda bibliográfica o en internet sobre el contenido de

acidez de los vinagres comerciales

Responder las siguientes preguntas:

1. Dé el nombre de cinco alimentos ricos en colesterol.

2. ¿Cuáles son los valores normales de colesterol, HDL colesterol y LDL colesterol

en sangre?

3. ¿Cuál es la enfermedad está relacionada con niveles elevados de colesterol en

sangre?

4. Genere un esquema de la como sería la separación electroforética de las

lipoproteínas plasmáticas:

5. ¿Cuál es la importancia de una dieta rica en ácidos grasos de tipo 3 en el

tratamiento y prevención de la hipercolesterolemia? ¿En qué alimentos se

encuentran esos ácidos grasos?

6. ¿Porque el consumo de dietas ricas en fibra podrían disminuir la

colesterolemia?



Página 73



SÉPTIMA PRÁCTICA

EXCRECIÓN DEL NITRÓGENO PROTÉICO



Página 74


PRÁCTICA



2. INTRODUCCIÓN DE LA SÉPTIMA PRÁCTICA

Uno de los aspectos nutricionales más importantes, es la adecuada ingestión de

proteínas, ya que estos compuestos van a tomar parte en diferentes eventos

metabólicos del organismo.

En algunas ocasiones la cantidad del nitrógeno contenido en las proteínas ingeridas

es mayor que el excretado (balance nitrogenado positivo), esta situación se

presenta durante el crecimiento, embarazo, convalecencia, etc. Puede presentarse

el caso contrario en el que se excrete una mayor cantidad de nitrógeno que el

ingerido en las proteínas, como en el caso de padecimientos con deficiente

absorción intestinal, inanición, etc. (balance nitrogenado negativo).

El catabolismo de las proteínas es un proceso que ocurre en el organismo por el

desgaste normal de los tejidos. Los productos del catabolismo de las proteínas son

los aminoácidos libres, los cuales mediante el proceso conocido como

transdesaminación se transforman en los cetoácidos correspondientes, con la

liberación concomitante del nitrógeno aminoacídico en forma de ion amonio. El

amonio es una sustancia tóxica para el organismo, especialmente para el sistema

nervioso central, por lo que luego de liberarse en los diversos tejidos, llega al

hígado formando parte de diversas moléculas, fundamentalmente alanita y

glutamina. En este órgano se transforma en urea, producto de desecho

notoriamente menos tóxico que el amonio. Finalmente, la urea se elimina por la vía

renal.



Página 75

En condiciones normales, la concentración de urea en la sangre se halla

influenciada por la magnitud del aporte dietario de proteínas y por el estado de

hidratación general. En este último caso, la deshidratación se asocia con

hemoconcentración y consecuentemente se registra incremento de la

concentración de urea. El exceso de líquidos por el contrario, se asocia con

hemodilución y baja en la concentración de urea.

El término azoemia o azotemia se utiliza en ocasiones para referirse a la

presencia de nitrógeno de origen proteínico en la sangre.

3. PROPÓSITO ESPECÍFICO DE LA SÉPTIMA

PRÁCTICA


7ª PRÁCTICA: EXCRECIÓN DEL NITRÓGENO PROTÉICO

EL ALUMNO SERÁ COMPETENTE PARA DETERMINAR LA EXCRECIÓN DE

NITRÓGENO PROTEICO CUANDO:

Comprenda la relación entre el nitrógeno ingerido en las proteínas y el excretado

como urea y creatinina.

b. La mayor parte del nitrógeno proteico ingerido es excretado en la orina en forma

de urea, pudiendo alcanzar cifras hasta de 30 gr en 24 horas. El nitrógeno que

existe en las heces proviene de productos de descamación intestinal o de la flora

bacteriana y su cantidad de 1-2 gr diarios.

c. La creatinina es considerada como otra forma de excreción del nitrógeno proteico

que es producido en el metabolismo endógeno y se elimina por la orina.

d. Tanto la urea como la creatinina tienen un bajo umbral renal, es decir, son

sustancias que se eliminan muy fácilmente conservando una concentración mínima

en sangre. Cuando por aluna razón su producción aumenta no se mantienen en

torrente circulatorio sino que son eliminados por el riñón.



Página 76

Esta propiedad les confiere un interés especial en la clínica, ya que el aumento de

estos metabolitos en sangre es índice de deterioro de la función renal.

3.2 RESULTADO FINAL DE LA SÉPTIMA PRÁCTICA

El estudiante determinará la concentración de urea en suero sanguíneo y

creatinina en orina, comprenderá las reacciones que se llevan a cabo en el

procedimiento. Además establecerá por comparación de los valores normales si las

cifras de urea son normales.

4 NORMAS DE SEGURIDAD ESPECÍFICAS DE LA

PRÁCTICA

4.1 DETECCIÓN DE RIESGOS PARTICULARES DE LA

SÉPTIMA PRÁCTICA

Sin riesgo particular, seguir normas generales de seguridad





5. DESARROLLO DE LA SÉPTIMA PRÁCTICA

El desarrollo de la séptima práctica será manejado en 3 etapas.

ACTIVIDADES

TIEMPO

REQUERIDO

RESULTADO DE LA

ACTIVIDAD

A) Actividad guiada por el 10 El docente realizará una



Página 77


práctica

min.


la práctica.



de estudiantes

50

min


proceso analítico para

determinar la excreción de

nitrógeno proteico.


en el desempeño

profesional


20min


siguiente sesión.





ESTUDIANTE EN GRUPOS DE TRABAJO.






MATERIAL:

1 gradilla con 3 tubos

1 pipeta de 1 ml

1 micropipeta de 200L

EQUIPO:



Página 78

1 baño maría a 37°C

1 Espectrofotómetro

REACTIVOS Y/O MUESTRAS:

Suero o plasma

Orina

Picrato alcalino

Kit de trabajo para determinación de urea

PROCEDIMIENTO:

En cada grupo del laboratorio serán seleccionados dos estudiantes, uno de los

cuales ingerirá los alimentos ricos en proteínas, y el otro los alimentos pobres en

proteínas, durante un mínimo de 4 días anteriores a la práctica. El último día de la

dieta se procederá a recolectar la orina de 24 horas.

• Alimentos sugeridos:

Alto contenido en proteínas: Bajo contenido en proteínas:

Leche y derivados Pastas y tortillas

Carne de res y aves Frutas y verduras

Pescados y mariscos Cereales y atoles

Huevo y leguminosas (lentejas, soya) Alimentos “chatarra”

DETERMINACIÓN DE UREA.

Se realizará la determinación de urea en suero sanguíneo y de orina de los sujetos

de estudio y llevar a cabo el siguiente procedimiento, considerando la muestra

como el suero o la orina.

Longittud de onda: 340 nm Cubeta: 1 cm de espesor Temperatura: 37°C



Página 79

Medición: Frente a reactivo blanco

Pipetear en la cubeta:

Tubos Agua destilada Patrón Muestra Reactivo Blanco 10 µl ----- ----- 1000 µl Patrón ----- 10 µl ----- 1000 µl Muestra ----- ----- 10 µl 1000 µl

Mezclar, leer la absorbancia inicial al cabo de 30 segundos y empezar a cronometrar simultáneamente. Leer de nuevo al cabo de 1 minuto.

CALCULOS

Concentración de urea = A muestra X 13.3 mmol/l (80 mg/dL)

(mmol/l) A Patrón VALORES NORMALES Suero 1.7-8.3 mmol/l 10-50 mg/dL

3. DETERMINACIÓN DE CREATININA. La creatinina cuando reacciona con el picrato alcalino forma un complejo

coloreado cuya intensidad es directamente proporcional a su concentración.

• Utilice la dilución de orina (1:20).

• Prepare una serie de tubos de la siguiente manera:

TUBO (ml) Problema Estándar Blanco

Orina (1:20) 0.2 0.0 0.0

Estándar 0.0 0.2 0.0

Agua destilada 2.0 2.0 2.2

Picrato alcalino 1.0 1.0 1.0

• Deje reposar los tubos durante 15 minutos a temperatura ambiente.



Página 80

• Mida la absorbancia a 520 nm, ajustando a 0 con el tubo blanco.

RESULTADOS

Hacer los cálculos de las concentraciones de urea y creatinina, verificar si están en

los rangos normales.

C) . Tercera etapa de la práctica: APLICACIÓN DE LOS

CONOCIMIENTOS , HABILIDADES Y ACTITUDES ADQUIRIDOS EN LA

PRÁCTICA EN EL DESEMPEÑO PROFESIONAL Y REPORTE DE

LABORATORIO PARA LA SIGUIENTE SESIÓN.


6. SISTEMA DE EVALUACIÓN DE LA SÉPTIMA

PRÁCTICA











Página 81


SÉPTIMA PRÁCTICA

La calificación y ponderación de ésta séptima práctica es la siguiente:



Reporte Escrito. 50



7. BIBLIOGRAFÍA








8. PARA SABER MÁS

Realizar una búsqueda bibliográfica o en internet sobre los resultados

obtenidos en la práctica realizada.

Responder las siguientes preguntas:

1. ¿En qué situaciones los aminoácidos son utilizados como combustible para el

hígado y el músculo?

2. Represente con fórmulas químicas el Ciclo de la Urea.

3. Explicar el por qué a ciertos organismos se les llama ureotélicos, uricotelicos y



Página 82

amonotélicos, y ejemplifique cada uno de ellos

4. ¿Por qué la inanición eleva las concentraciones de las enzimas del ciclo de la

urea?

5. Escriba la ruta metabólica de síntesis de creatinina.



Página 83



OCTAVA PRÁCTICA

INTEGRACIÓN DE CONOCIMIENTOS



Página 84


PRÁCTICA

Para un buen desarrollo de la actividad académica se consideran equipos de 3

alumnos.

2. INTRODUCCIÓN DE LA OCTAVA PRÁCTICA

El diseño de experimentos que involucre a la bioquímica y la biotecnología en sus

diferentes áreas será el interés de esta práctica, es un reto para los alumnos, pues

ellos serán los encargados del diseñó, planeación y ejecución del experimento,

haciendo en todo momento la integración del conocimiento adquirido en el aula, no

solo de bioquímica sino del resto de sus asignaturas o bien mediante búsqueda de

información.

3. PROPÓSITO ESPECÍFICO DE LA OCTAVA

PRÁCTICA


8ª PRÁCTICA:

EL ALUMNO SERÁ COMPETENTE PARA INTEGRAR SUS CONOCIMIENTOS

DEL CURSO DE BIOQUÍMICA APLICADA CUANDO:

Mediante el conocimiento adquirido en el curso de Bioquímica Aplicada diseñe un

experimento en el que pueda generar productos de procesos metabólicos.



Página 85

3.2 RESULTADO FINAL DE LA OCTAVA PRÁCTICA

El estudiante será capaz de diseñar un experimento que genere un producto

mediante procesos metabólicos y explicarlo.

4 NORMAS DE SEGURIDAD ESPECÍFICAS DE LA

PRÁCTICA

4.1 DETECCIÓN DE RIESGOS PARTICULARES DE LA OCTAVA

PRÁCTICA

Sin riesgo particular, seguir las normas generales de seguridad.


Los desechos deben confinarse en recipientes para disponer de ellos

posteriormente.



Página 86

5. DESARROLLO DE LA OCTAVA PRÁCTICA

El desarrollo de la octava práctica será manejado en 3 etapas.

ACTIVIDADES

TIEMPO

REQUERIDO

RESULTADO DE LA

ACTIVIDAD



práctica

20

min.



la práctica.



de estudiantes

El tiempo será

establecido según el

protocolo diseñado

por los alumnos.

Puede llevar varios

días.


proceso establecido en el diseño

de su experimento

C) Aplicación de la

práctica en el desempeño

profesional


30 min


siguiente sesión.





ESTUDIANTE EN GRUPOS DE TRABAJO.

Al concluir la explicación guiada por el docente, se asignará el tema a desarrollar

por cada equipo y se les indicará el desarrollo de la práctica de acuerdo al siguiente

procedimiento:



Página 87

8ª PRÁCTICA: PROCEDIMIENTO

Los alumnos diseñarán un experimento para generar un producto en alguno de los

siguientes temas (que puede ser por sorteo o por asignación).

TEMA EQUIPO

1. BIOTECNOLOGÍA EN LOS

ALIMENTOS

2. BIOTECNOLOGÍA EN BEBIDAS

3. BIOTECNOLOGÍA COSMÉTICA

4. BIOTECNOLOGÍA DE

DETERGENTES

5. BIOTECNOLOGÍA AGRÍCOLA

6. BIOTECNOLOGÍA EN LA

MEDICINA

Estos son los puntos a desarrollar para sus temas

1. Qué composición química tiene la materia prima a utilizar para la obtención

de su producto

2. Qué microorganismo o microorganismos va a emplear, describa brevemente.

3. Cuáles son las condiciones óptimas bajo las cuales se va ha generar su

producto

4. Qué sucede si se alteran condiciones como temperatura, pH,

concentraciones de sustrato, etc.

5. Cuál es el sustrato inicial del microorganismo y qué tipo de biomolécula es

(carbohidrato, proteína o lípidos). Dependiendo del proceso puede o no

aplicar este punto.

6. Integre en un esquema general todas las vías metabólicas (desarrolladas)

que Usted considere va a transitar el microorganismo, para poder generar el

producto, indique si existirá algún tipo de control o regulación.



Página 88

7. Planteé un supuesto donde pueda manipular la actividad del microorganismo

con diversas condiciones, materias primas diferentes, o incluso alteraciones

genéticas, para generar un producto diferente de interés para la comunidad.

Para este punto considere que cuenta con todo lo necesario en el laboratorio

para poder lograrlo, es algo hipotético pero fundamente su supuesto.

8. Bibliografía consultada.

RESULTADOS

C) Tercera etapa de la práctica: APLICACIÓN DE LOS CONOCIMIENTOS

, HABILIDADES Y ACTITUDES ADQUIRIDOS EN LA PRÁCTICA EN EL




6. SISTEMA DE EVALUACIÓN DE LA OCTAVA

PRÁCTICA



Se hará un rol de exposiciones por equipo en las que se podrá usar

presentaciones de Power Point, todos los integrantes del equipo deberán

participar y se evaluará esta intervención de manera individual. Se hará especial

énfasis en la exposición de las rutas metabólicas involucradas en el proceso de

su experimento. Se les hará cuestionamiento de su trabajo. Además el trabajo

se entregará por escrito la extensión del mismo serán 6 cuartillas mínimo y 12

máximas, letra arial 11 a espacio y medio con margen normal. Si el esquema

del punto 6 se les complica hacerlo electrónico, lo pueden elaborar manuscrito.



Página 89


OCTAVA PRÁCTICA

La calificación y ponderación de ésta octava práctica es la siguiente:



Reporte Escrito. 40



7. BIBLIOGRAFÍA








8. PARA SABER MÁS

Realizar una búsqueda bibliográfica o en internet sobre la biotecnología en

las siguientes áreas. Alimentos, cosmética, detergentes, agrícola, medicina,

etc.

1. ENCUADRE DEL SISTEMA DE PRÁCTICAS

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