0 VIRUS RESPIRATORIO SINCITIAL BOVINO (VRSB)

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VIRUS RESPIRATORIO SINCITIAL BOVINO (VRSB)

Seroprevalencia y Factores de Riesgo Asociados a la Infección por el Virus

Respiratorio Sincitial Bovino (VRSB) en Tres Municipios del Departamento Cesar,

Colombia

Diego Alfonso Dueñez Ruiz

Universidad De Santander

Facultad De Ciencias Exactas, Naturales Y Agropecuarias

Medicina Veterinaria

Bucaramanga

2020

1


Seroprevalencia y Factores de Riesgo Asociados a la Infección por el Virus

Respiratorio Sincitial Bovino (VRSB) en Tres Municipios del Departamento Cesar,

Colombia

Diego Alfonso Dueñez Ruiz

Trabajo de Grado Presentado Como Requisito Para Optar al Título de:

Médico Veterinario

Director

Juan Carlos Pinilla,

PhD

Universidad De Santander

Facultad De Ciencias Exactas, Naturales Y Agropecuarias

Medicina Veterinaria

Bucaramanga

2020

2


UNIVERSIDAD DE SANTANDER - UDES

ACTA DE EVALUACIÓN PARA TRABAJO DE GRADO PROGRAMA

MEDICINA VETERINARIA

ACTA No. 035

En Bucaramanga, a los 03 días del mes de junio de 2020, se reunió el Comité de Proyectos de

Grado, con asistencia de los docentes que a continuación firman el acta de “Evaluación para trabajos

de grado”:

DIEGO ALFONSO DUEÑEZ RUIZ CODIGO: 13351067

TITULO DEL PROYECTO: “Seroprevalencia y factores de riesgo asociados a la infección por

el virus respiratorio sincitial bovino (VRSB), en tres municipios del departamento Cesar,

Colombia.”

CONCEPTO: Aprobado

CALIFICACIÓN TOTAL: TRES PUNTO SEIS (3.6)

OBSERVACIONES:

EN CONSTANCIA FIRMAN:

Dr. ALBEIRO PATIÑO HERRERA Dr. Dr. ANGEL A. FLOREZ MUÑOZ

Director Programa MV Jurado

Dr. Dr. JUAN CARLOS PINILLA L Dr. Dr. HECTOR JAVIER NARVAEZ

Director Trabajo de Grado Jurado

3


Agradecimientos

A mis padres Alfonso Dueñez Rojas e Isabelita Ruiz Barragán por el sacrificio

realizado durante toda mi vida y mi proceso universitario, por su apoyo y constante ayuda. A

la Universidad de Santander, facultad de Medicina Veterinaria, y a la plena docente, quienes

aportaron grandes conocimientos durante estos años de formación profesional. Al Dr. Juan

Carlos Pinilla, por su dirección, por su paciencia, experiencia y apoyo brindado en este gran

proceso de mi vida profesional y personal. Al Dr. Julio Cesar Tobón coordinador de proyectos

de VECOL por el suministro de bases de datos para la realización de este trabajo y por último

al Dr. Diego Ortiz quien es coautor del proyecto.

4


Contenido

RESUMEN 8

ABSTRACT 10

INTRODUCCIÓN 12

1.DESCRIPCION DEL TRABAJO DE INVESTIGACION 14

1.1.PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 14

1.2.JUSTIFICACIÓ 15

1.3.OBJETIVOS 15

1.3.1.Objetivo general 15

1.3.2.Objetivos específicos 15

2.MARCO REFERENCIAL 16

2.1.VIRUS RESPIRATORIO SINCITIAL BOVINO 16

2.2.CONTROL DEL VIRUS 17

2.3.PATOGENIA 17

3.MATERIALES Y MÉTODOS 21

3.1.REGIÓN GEOGRÁFICA DEL ESTUDIO 21

3.2.DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN 22

3.3.TIPO DE ESTUDIO 22

3.4.DISEÑO DEL MUESTREO 23

3.4.1.Toma y procesamiento de las muestras 29

5


3.4.2.Fórmula para el cálculo del tamaño muestral 24

3.4.3.Análisis de resultados 25

4. RESULTADOS 26

4.1.COMPARACIÓN ENTRE LOS VALORES DE SEROPOSITIVIDAD DE VRSB

26

4.2.COMPARACIÓN DE ACUERDO A LA EDAD 27

4.4.ANÁLISIS DE VARIABLES INDEPENDIENTES (FACTORES DE RIESGO)

REGRESIÓN LOGÍSTICA 27

4.5.DISCUSIÓN 29

4.6.CONSIDERACIONES ÉTICAS Y BIOÉTICAS 29

CONCLUSIONES 31

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 39

6


Lista de Tablas

TABLA 1. COMPARACIÓN ENTRE LOS VALORES DE SEROPOSITIVIDAD DE VRSB,

DE ACUERDO CON LOS MUNICIPIOS EXAMINADOS DEL DEPARTAMENTO DEL

CESAR, COLOMBIA. 33

TABLA 2. COMPARACIÓN ENTRE LOS VALORES DE SEROPOSITIVIDAD DE VRSB,

DE ACUERDO CON LA EDAD DE LOS ANIMALES. 34

TABLA 3. ANÁLISIS DE VARIABLES INDEPENDIENTES (FACTORES DE RIESGO)

MEDIANTE REGRESIÓN LOGÍSTICA. 35

7


Lista de Imágenes

IMAGEN 1. MAPA GEOPOLÍTICO DEL DEPARTAMENTO DEL CESAR. (IMÁGEN

TOMADA DE GOOGLE MAPAS) 21

IMAGEN 2. MAPA REPRESENTATIVO DE LOS MUNICIPIOS RIO DE ORO,

AGUACHICA Y LA GLORIA CON EL NÚMERO TOTAL DE FINCAS MUESTREADAS

EN CADA MUNICIPIO. (FUENTE PROPIA) 22

8


RESUMEN

Título. Seroprevalencia y factores de riesgo asociados a la infección por el virus

respiratorio sincitial bovino (VRSB) en tres municipios del departamento cesar, Colombia.

Autores. Diego Alfonso Dueñez Ruiz

Palabras claves. Seroprevalencia, VRSB, Paramixoviridae, Pneumovirus.

Descripción: Las enfermedades del tracto respiratorio bovino afectan

considerablemente a la ganadería bovina y es uno de los factores más significativos cuando de

pérdidas económicas se trata.

Objetivo: Determinar la seroprevalencia y los factores de riesgo del VRSB en bovinos

de los municipios Aguachica, Río de Oro y La Gloria, Cesar.

Metodología: Se escogieron como método de estudio animales etarios menores y

mayores de veinticuatro meses en un rango de edades entre los 4 meses y los 13 años de vida,

fueron escogidos entre 29 predios para un total de mil muestras. Las muestras tomadas fueron

de tipo sanguíneo de las venas coccígeas de animales con sintomatología, estas muestras

fueron enviadas a los laboratorios de microbiología de la universidad de Santander teniendo

en cuenta los protocolos de bioseguridad y refrigeración de biológicos; todas las muestras

fueron procesadas por medio de pruebas rápidas de ELISA.

Discusión: En el estudio se detectaron anticuerpos contra VRSB en 959 de los

animales examinados, para un porcentaje de 98.6% lo cual concuerda con varios autores que

califican el virus con alta seroprevalencia.

9


Resultado: El estudio arrojó que la ubicación geográfica, la edad de los animales y la

sintomatología no contienen significancia estadística ante la enfermedad, que presenta una

seroprevalencia (98.6%) y unos factores de riesgo muy altos en este departamento.

Conclusión: se concluyó en este estudio que el VRSB presenta una seroprevalencia

muy alta y unos factores de riesgo en este municipio asociados al factor clima y posiblemente

a la falta de estudios y conocimientos por parte del personal involucrado en el manejo de los

bovinos. Este proyecto fue diseñado y financiado en los términos de excelencia sanitaria de

VECOL.

10


ABSTRACT

Title. Seroprevalence and risk factors associated with bovine respiratory syncytial virus

(RSVB) infection in three municipalities of the Cesar department, Colombia.

Authors. Diego Alfonso Dueñez Ruiz

Keywords. Seroprevalence, RSVB, Paramyxoviridae, Pneumovirus.

Description. Diseases of the bovine respiratory tract considerably affect cattle farming

and it is one of the most significant factors when it comes to economic losses.

Objective. To determine the seroprevalence and risk factors of RSVB in cattle from the

municipalities Aguachica, Río de Oro and La Gloria, Cesar.

Methodology. Age animals younger and older than twenty-four months in a range of

ages between 4 months and 13 years of age were chosen as the study method, they were chosen

from 29 farms for a total of one thousand samples. The samples taken were from the blood type

of the coccygeal veins of animals with symptoms, these samples were sent to the microbiology

laboratories of the University of Santander taking into account the bio-security and refrigeration

protocols for biologicals; all samples were processed by means of rapid ELISA tests.

Discussion. In the study, antibodies against VRSB were detected in 959 of the animals

examined, for a percentage of 98.6%, which is in agreement with several authors who rate the

virus with high seroprevalence.

Result. The study showed that the geographical location, the age of the animals and the

symptoms do not contain statistical significance regarding the disease, which presents

seroprevalence (98.6%) and very high risk factors in this department.

11


Conclusion. it was concluded in this study that the VRSB presents a very high

seroprevalence and some risk factors in this municipality associated with the climate factor

and possibly the lack of studies and knowledge on the part of the personnel involved in the

management of cattle. This project was designed and financed under VECOL's terms of

sanitary excellence

12


Introducción

Las enfermedades del complejo respiratorio bovino (CRB) se encuentran entre las

principales patologías que generan pérdidas económicas en la ganadería bovina de todo el

mundo, además de los problemas que pueden ser ocasionados por presencia de principales

agentes infecciosos. Se estima que anualmente se generan pérdidas económicas que ascienden

a los 3 billones de dólares. (Armengol, R.) (2020).

Una de estas enfermedades importantes es producida por un Pneumovirus

perteneciente a la familia Paramixoviridae, del genero Pneumovirus llamado Virus

Respiratorio Sincitial Bovino (VRSB) debido a que ataca a las células sincitiales del sistema

respiratorio. (Valarcher, J.-F., & Taylor, G.) (2007)

Los municipios Aguachica, Rio de Oro y La Gloria están localizados en el

departamento Cesar, el cual a su vez está ubicado en el Noreste de Colombia, y es una región

agrícola y pesquera, siendo la ganadería uno de los componentes más importantes de la

economía local. De acuerdo con el Instituto Colombiano Agropecuario (ICA, 2017), el

departamento cuenta con una población de 1.357.512 cabezas de ganado, estando el 24%

ubicado en los municipios de Aguachica, Rio de Oro y La Gloria.

A pesar de la alta seropositividad, los brotes de BRSV ocurren con frecuencia, alcanzando su

punto máximo durante los meses de invierno en climas templados (Stott EJ, Thomas LH,

Collins). Se cree que el BRSV se transmite por rutas directas e indirectas, y posiblemente por

aerosol a distancias cortas (Hägglund S, Svensson C, Emanuelson U, Valarcher JF, Alenius

S.) pero todos los mecanismos de introducción y mantenimiento dentro de los rebaños no

están claros.El periodo de incubación del virus es de 2 a 4 días y los signos de la enfermedad

13


consisten en un aumento de la frecuencia respiratoria, tos, respiración superficial y dificultosa;

además de secreciones nasales y oculares.

Este virus es de distribución mundial, su índice de mortalidad es bajo, pero tiene un

índice de morbilidad muy alto y representa el 50% de las enfermedades respiratorias del

bovino.

Teniendo en cuenta que el control de la infección es una parte fundamental en el apoyo

para el crecimiento económico de este sector agrícola se cuestiona ¿Cuál es la seroprevalencia

del virus respiratorio sincitial bovino (VRSB) en ganado bovino de los municipios Aguachica,

Río de Oro y La Gloria, departamento del Cesar?

De tal manera que con los datos de esta investigación se pretenda conocer el estatus

del agente infeccioso en la región bajo este estudio, con el planteamiento de aportar

información que pueda darse en una propuesta encaminada en programas de control y

prevención de la enfermedad.

Siendo esta fundamental para el control de enfermedades y mitigaciones al impacto del

daño del producto bovino que afecta a la región ganadera.

Es importante resaltar que este estudio también se realizará con el propósito de apoyar

el aumento de la información que circula en el país sobre el tema y por esta razón, el presente

trabajo de investigación tiene como objetivo, determinar la seroprevalencia y factores de

riesgo asociados por la infección del VRSB en ganado bovino en tres municipios del

departamento del Cesar, Colombia.

14


1. Descripción del Trabajo de Investigación

1.1. Planteamiento del Problema

Las enfermedades del complejo respiratorio bovino (CRB) se presentan entre las

principales patologías que generan pérdidas económicas en la ganadería bovina, además de los

problemas que puedan ser ocasionados por la presencia de los principales agentes infecciosos.

El Virus Respiratorio Sincitial Bovino (VRSB) es un Pneumovirus perteneciente a la

familia Paramixoviridae, género Pneumovirus (Murphy et al., 1995). Desde la perspectiva de

la problemática en el campo internacional, podemos destacar que, en investigaciones

realizadas en México, como lo describe Solis-Calderon (2007) y Encalada-Mena et al. (2016)

señalaron que el 90,8% y 32,47% se estableció la seroprevalencia en bovinos del estado de

Yucatán y Campeche, respectivamente. Igualmente, en una investigación realizada por

Obando (2002) en la cual reportaron 56,8% de anticuerpos específicos contra VRSB en

rebaños venezolanos. Mientras que Saa et (2012) señalaron la presencia de un 91,3% en fincas

de doble propósito en Ecuador.

En relación con Colombia, en una investigación presentada por Gálvis (2016) se

determinó un 99% de seroprevalencia en bovinos en el territorio del Cesar, mientras que

Betancur (2011, 2017) resalto una presencia de 13% y 31% de seroprevalencia en vacas y

terneros, respectivamente, en fincas del municipio Montería, correspondientemente.

En Colombia existe poca información epidemiológica sobre la presencia del VRSB,

principalmente en la región nor-oriental del país, esto impide que se pueda cuantificar la

perspectiva de la problemática en cuanto al control de la enfermedad, lo que conlleva a

problemas económicos en la industria ganadera de la región.

15


1.2. Justificación

Las enfermedades infecciosas son una de las mayores causas que ocasionan pérdidas a

la industria ganadera a nivel a mundial, y Colombia no escapa a esta realidad. Generalmente,

el tema de las infecciones se aborda desde un punto de vista muy general, incluso,

contrastando los animales infectados con algunas de las variables implicadas como factores de

riesgo epidemiológico.

Sin embargo, el estudio epidemiológico del VRSB y la evaluación de riesgos son

tareas importantes en el área de la epidemiología veterinaria. Con este trabajo se obtendrá

información acerca de las asociaciones entre los factores de riesgo y la prevalencia del VRSB.

Por lo tanto, esta investigación epidemiológica arrojará información valiosa de manera

de establecer con exactitud programas de control y prevención del agente infeccioso estudiado

en función de su presencia, y tomando en consideración los factores y las variables que

intervienen en su ocurrencia.

1.3. Objetivos

1.3.1. Objetivo General

Determinar la seroprevalencia y los factores de riesgo del VRSB en bovinos de

los municipios Aguachica, Río de Oro y La Gloria, Cesar.

1.3.2. Objetivos específicos

Determinar la seroprevalencia de bovinos con el VRSB.

Evaluar los factores de riesgo del VRSB en bovinos en los municipios de

Aguachica, Rio de Oro y la Gloria. Cesar.

16


2. Marco Referencial

2.1. Virus Respiratorio Sincitial Bovino

Es considerada una enfermedad del tracto respiratorio de bovinos y ovinos, cuya

característica particular es de su común contagio de distribución mundial, es particularmente

más común en invierno y en climas templados, como lo afirman algunos estudios el VSRB

representa más del 50% de las enfermedades respiratorias en los bovinos, teniendo en cuenta

lo anterior, a pesar de su rápida expansión y común contagio el índice de mortalidad es bajo

aunque la morbilidad es muy alta, sobre todo cuando se trata de animales estabulados, Se debe

agregar que el periodo de incubación es muy corto, de 2 a 4 días, Como resultado el virus se

difunde con rapidez, a través de aerosoles o gotitas provenientes de las excreciones del tracto

respiratorio ( Valarcher & Taylor, 2007).

Los Virus Respiratorio Sincitial Bovino (VSRB) son virus ARN los cuales tienen

tendencia a ser virus asociados a la célula, se describen de esta forma debido a que las células

infectadas se forman cuerpos de inclusión citoplasmáticos eosinofílicos por consiguiente

Después de un brote de la enfermedad respiratoria en bovinos adultos y en becerros, se puede

aislar a partir de las secreciones nasales y oculares; el virus se encuentra en dos subgrupos: A

(con 7 cepas) y AB (con 5 cepas) (Gershwin L. J., 2008).

Con respecto a la descripción detallada anteriormente se entiende que este virus se

encuentra entre los virus formadores de sincitios, los cuales son Pneumovirus pleomórficos

clasificados dentro de la familia Paramyxoviridae, de describe a partir del tamaño de la

partícula viral completa aquella varía de 80 a 200 nm, así mismo son pleomórficas y tienen

proyecciones en su superficie; a causa de esto se destaca que estos virus no son capaces de

sobrevivir fuera de un huésped.

17


Con el propósito de establecer los objetivos previamente establecidos, el presente

trabajo es elaborado bajo el planteamiento metodológico del enfoque cualitativo; el cual se

describe como: La investigación cualitativa busca la comprensión e interpretación de la

realidad humana y social, con un interés práctico, es decir con el propósito de ubicar y orientar

la acción humana y su realidad subjetiva. Por esto en los estudios cualitativos se pretende

llegar a comprender la singularidad de las personas y las comunidades, dentro de su propio

marco de referencia y en su contexto histórico-cultura (Martínez, Rodríguez Jorge, 2011,

p.12).

2.2. Control del Virus

Como se pudo comprobar en la descripción anterior la propagación del virus es rápida

y fácil por lo que el aislamiento del animal es parte del proceso, dentro de esta recomendación

se encuentra además que las personas que tienen contacto con los animales enfermos se

limiten a este, puesto que el contacto entre animales sanos y enfermos, conllevaría a un

traslado involuntario del virus.

Parte del proceso de los seres vivos es la continua producción de defensas que les

permita contrarrestar enfermedades futuras, en este caso los animales infectados elaboran

anticuerpos humorales, aun así no significa que les aporte inmunidad, por lo tanto los

animales pueden en un futuro contraer la enfermedad nuevamente, ante esta problemática en

el mejor de los casos las vacunas son la mejor alternativa, De donde se infiere la importancia

de la prevención de otros virus respiratorios (Quiros Martinez, 2020).

2.3. Patogenia

Actualmente existen diferentes vacíos sobre la patogenia de esta enfermedad, La

bibliografía que existente sobre enfermedades causadas por neumovirus, revela que las peores

18


evoluciones clínicas son debidas a una reacción inmunitaria mediada por Th2; esta reacción es

similar a una hipersensibilidad de tipo I que implica la acción de IgE, eosinófilos y a veces

neutrófilos; por ejemplo en el caso de los terneros jóvenes, se considera que los neutrófilos

realizan un protagonismo patogénico fundamental, sin embargo no se tiene datos certeros de

por qué algunos animales padecen este tipo de reacción inflamatoria aguda en relación con

otros casos ( Valarcher & Taylor, 2007).

Por otro parte, dentro de estudios realizados para la evaluación del virus se ha hallado

la evidencias de que algunas cepas del virus provocan una mayor reacción inflamatoria que

otras, esta afirmación se ha podido determinar mediante la observación del ciclo viral, donde

el VRSB convierte una proteína viral de fusión (F) en pre-proteína, y esta se fracciona

durante el proceso de maduración, finalmente se ha registrado que un pequeño péptido de esta

pre-proteína desempeña un rol primordial para provocar la reacción inflamatoria.

Dicho lo anterior, este péptido es un equivalente a las taquiquininas del huésped, por lo

que se le denomina viroquinina, y es idóneo para atraer eosinófilos (células principales en la

reacción mediada por Th2) igualmente en contraer el músculo liso de los bronquios. En

consecuencia, daría una explicación sobre el enfisema agudo característico de las lesiones

pulmonares por VRSB (Gershwin L. J., 2008).

Al mismo tiempo, el título del hospedador en la patogenia del VRSB no es subsidiario.

En cuanto al nivel de campo, los brotes clínicos sobresalen este protagonismo, en razón que al

contrario de la mayoría de los patógenos el VRSB, suele afectar de manera especialmente

agresiva a los animales más sanos.

19


De tal manera que manifiesta el hecho de que la enfermedad no se apoya en las

debilidades clásicas, por el contrario, se desencadena por alguna característica específica del

huésped; por lo anterior, al respecto no se ha establecido información específica, aun así,

varios estudios en relación en enfermedades con reacciones mediadas por Th2 destacan la

relevancia de pre-infecciones con patógenos crónicos como parásitos y herpes virus

(Hägglund S, 2017).

Se subraya que la inmunomodulación necesaria para que estos patógenos permanezcan

de forma crónica, según las investigaciones realizadas determinan que pueden también reducir

la reacción adversa de los Th2; teniendo en cuenta lo anterior en un reciente estudio brasileño

(Hoppe, 2018) este describió mecanismos de administración que pueden tener un efecto

protector, como por ejemplo la lactancia natural.

Dentro de las consecuencias de esta enfermedad se describen las lesiones agudas las

cuales reflejan la acción del virus sobre el epitelio de los bronquiolos, pero el VRSB,

igualmente afecta de forma negativa el epitelio traqueal, así como el epitelio ciliar de la

tráquea, consecuentemente las células caliciformes forman la función mucociliar una de las

barreras innatas de defensa con mayor efectividad dentro del sistema respiratorio. En segunda

instancia en condiciones fisiológicas, la función descrita actúa como una defensa mecanizada,

esta previene la colonización del tracto respiratorio por bacterias como Pasteurella, como se

describe:

Se ha demostrado a nivel experimental que los terneros sanos eliminan un 90% de

la Pasterella multocida introducida en la tráquea en menos de 4 horas. De todas formas, otros

estudios señalan que el VRSB puede disminuir la eficiencia de la barrera muco ciliar hasta un

50%, lo que facilitaría la invasión de la microflora nasofaríngea patógena. Además, la mayor

20


influencia de neutrófilos durante las infecciones con VRSB pueden aumentar el efecto de la

leucotoxina de Mannheimia haemolytica, que es su mayor factor de virulencia. Gracias a este

efecto negativo sobre el epitelio de la tráquea, el VRSB facilita las infecciones pulmonares

bacterianas (Armengol, 2020).

De forma gradual en lo que respecta a las consecuencias a largo plazo de una infección

bacteriana son las derivadas del alto nivel de exudación y daño tisular, es decir en el caso de

las infecciones virales, las consecuencias suelen ser relevantes en la fase aguda, sin embargo,

si el animal se recupera no suele existir fase crónica.

Esto no ocurre con el VRSB, dentro de la investigación realizada por Klem T. B.,

(2016) evaluaron los efectos dentro de un periodo correspondiente a largo plazo de un brote de

VRSB en un centro de inseminación artificial debido a que poseían datos zootécnicos

detallados se pudo cuantificar dichas consecuencias, de tal forma que:

Al comparar los toros con síntomas con los asintomáticos, se observó un ratio

peso/edad menor (4-10%) durante los 8 meses que duró el estudio. Incluso el grupo

asintomático mostró ganancias diarias menores (111g/día) cuando se lo comparó con grupos

sanos de otros años, demostrando los efectos negativos de un brote de VRSB en la

productividad incluso en animales asintomáticos (Armengol, 2020).

En conclusión, se determina por medio de estas investigaciones que las alteraciones a

largo plazo son causadas por una bronquiolitis obliterante, lesión inespecífica de los

bronquiolos exuberante en infecciones por VRSB, se expone que esta consiste en la formación

de pequeños nódulos polipóides fibrosos que reducen la luz de los bronquiolos causando

mucha obstrucción y afectan a la eficiencia del intercambio de gases en los pulmones.

21


3. Materiales y Métodos

3.1. Región Geográfica del Estudio

El estudio se realizó en los municipios Aguachica (8°182 243 N 73°362 553 O), Rio

de Oro (8°172 303 N 73°232 143 O) y La Gloria (8°37’07’’N 73°48’09’’O), del departamento

del Cesar. La región presenta una temperatura media anual de 28 °C, una altitud de 800 msnm

y una precipitación media anual de 1835 mm, con dos periodos de lluvias bien definidos al

año (Gobernación del Cesar, 2017).

Figura 1.

Mapa Geopolítico del Departamento del Cesar.

Tomado de Google Mapas

22


Figura 2.

Mapa Representativo de los Municipios Rio de Oro, Aguachica y La Gloria con el Número

Total de Fincas Muestreadas en Cada Municipio.

3.2. Diseño de la Investigación

Dado que para responder el cuestionamiento y los objetivos anteriormente

mencionados se propone que la prevalencia se determinará dividiendo la cantidad de muestras

positivas entre el total de animales de la población muestreada.

3.3. Tipo de Estudio

Dado que el propósito de la investigación es Determinar la seroprevalencia del VRSB

en bovinos de los municipios de Aguachica, Río de Oro y La Gloria, Cesar; inicialmente la

investigación presenta un diseño no experimental que se aplicó de manera trasversal de tipo

descriptivo.

23


Esta tipología esta implementado dentro del trabajo en el entendido de establecer la

presencia de la seroprevalencia del VRSB en bovinos de los municipios Aguachica, Río de

Oro y La Gloria, Cesar; permitiendo establecer y demostrar una realidad y una problemática

presente dentro del sector ganadero.

Esta realidad, se enfoca desde el punto de vista de la presencia de la enfermedad

dentro del sector de los animales, delimitados en un territorio, lo que conlleva a exponer por la

captación de pruebas y evidencia la presencia del virus.

3.4. Diseño del Muestreo

Se realizó un diseño de muestreo aleatorio para la realización de la obtención de

muestras, durante los meses de octubre de 2016 hasta enero de 2017 (época seca) se realizó el

proceso de visitar veintinueve (29) fincas las cuales se encuentran ubicadas en las veredas

Márquez del municipio Rio de Oro, y veredas Patiño y las Piñas del municipio Aguachica.

Para determinar la cantidad de muestras a realizar, se estableció desde los registros de

vacunación del ICA (2017), tomando en cuenta la población censada de los tres municipios,

los cuales corresponden de 12.593 animales, para finalmente y empleando la fórmula para

poblaciones conocidas Thrusfield (2005), con un nivel de confianza esperado del 95% se

determinó por medio de este proceso el requerimiento de 1.000 muestras, necesarias para la

obtención de los resultados finales.

Continuando con lo expresado con anterioridad el número obtenido fue distribuido

proporcionalmente según la cantidad de animales de las fincas visitadas. Dentro de las

características especiales de los animales se podía determinar que los animales observados

dentro de la muestra pertenecían a tipos raciales de doble propósito, con edades comprendidas

24


entre 4 meses y 13 años de edad los cuales fueron divididos en dos grupos etarios de esta

forma; menores de 24 meses y mayores de 24 meses.

3.4.1. Toma y Procesamiento de las Muestras.

Para la realización de la toma de muestras, se procede por la toma de muestra de

sangre, aquellas se tomaron directamente de la vena coccígea del animal enfermo, los

instrumentos utilizados para la obtención de la muestra fueron agujas de calibre 14 y tubos de

tipo Vacutainer® sin anticoagulante. Siguiendo el procedimiento de toma de muestras, se

expresa que todas las muestras se rotularon y fueron enviadas en cavas con hielo al laboratorio

de investigación en Bacteriología de la Facultad de Ciencias de la Salud de la Universidad de

Santander, para su procesamiento.

El proceso realizado con las muestras en laboratorio se expone de la siguiente forma.

Todas las muestras recolectadas se centrifugaron a 7.000 rpm por 10 minutos para la

obtención de suero, los cuales fueron almacenados en viales de 1,5 mL a -20°C. Continuando

con el proceso, para el estudio serológico se emplearon kit comercial marca INGEZIM

(VRSB) para la técnica de ELISA (ensayo de inmunoabsorción enzimática). Todas las pruebas

se realizaron según las instrucciones del fabricante y se validaron mediante los respectivos

controles positivos y negativos por duplicado.

3.4.2. Fórmula Para el Cálculo del Tamaño Muestral.

𝑛 = zα2 (p)(q)

EMA2

n = Tamaño Muestral

Zα = 1,96

Nivel de confianza = 95%

P = 0,8 (80%)

error = 5%

25


Nota. Toda la información fue colectada en un proyecto de excelencia sanitaria de

VECOL y los resultados obtenidos son confidenciales.

3.4.3. Análisis de Resultados.

La prevalencia se determinó dividiendo la cantidad de animales positivos entre total de

animales de la población muestreada. Los resultados obtenidos se analizarán mediante

estadísticos descriptivos y test de Ji cuadrado (X2) para determinar asociaciones estadísticas.

También se calcularán los odds ratio (OR) para establecer los factores de riesgo implicados.

Para los cálculos se utilizó el programa estadístico SPSS versión 21.

26


4. Resultados

4.1. Comparación Entre los Valores de Seropositividad de VRSB

Según los resultados obtenidos de las pruebas realizadas en el departamento del Cesar,

se determinó que no hay significancia estadística para la relación municipio/seropositividad

teniendo en cuenta que la seroprevalencia en estos 3 municipios es alta.

Tabla 1.

Comparación Entre los Valores de Seropositividad de VRSB, de Acuerdo con los Municipios

Examinados del Departamento del Cesar, Colombia.

Municipio n Finca

s

SP (%) para

BRSV

Aguachica 6

43

19 635 (98,8)

La Gloria 6

8

2 68 (100)

Rio de Oro 2

89

8 283 (97,9)

Total 1

,000

29 986 (98,6)

Test de Chi cuadrado test (X2) 2.03

P 0.36

Nota: (P>0,05) sin significancia estadística.

27


4.2. Comparación de Acuerdo a la Edad

Según los resultados (tabla 2), se puede afirmar dado los datos estadísticos que no

existe relación entre la edad de los animales (< 24 meses y > 24 meses) y la seroprevalencia

del virus, demostrando así que la edad no es determinante para adquirir el mismo y que en el

caso de los jóvenes se muestra una seroprevalencia en los animales muestreados del 100% en

comparación a los adultos que es del 98%.

Tabla 2.

Comparación Entre los Valores de Seropositividad de VRSB, de Acuerdo con la Edad de los

Animales.

Edad n SP (%) para

BRSV

< 24 meses 23 23 (100)

> 24 meses 97

7

963 (98,6)

Total 1,0

00

986 (98,6)

Test de Ji cuadrado (X2) 0,3

P 0,5

Nota: (P>0,05) sin significancia estadística.

4.3. Análisis de Variables Independientes (Factores de Riesgo) Regresión Logística

Las variables independientes de la tabla 3 donde se muestra el total de municipios, el

sexo y la edad solo muestra en su análisis que el municipio de Rio de Oro; las muestras

28


tomadas a animales machos y el grupo etario que considera a los animales menores de 24

meses de edad son los únicos en mostrar resultados seropositivos con un porcentaje de 100%.

Tabla 3.

Análisis de Variables Independientes (Factores de Riesgo) Mediante Regresión Logística.

Factor de riesgo

Categoría

VRSB

% OR [IC95%] P

Municipios Aguachica 98.8 1 -

Río de Oro 100 0.6 [0.2-1.7] 0.3

La Gloria 97.9 0 [0] 0.9

Sexo Macho 1

00

1

0.1

Hembra 9

8.6

0[0]

Edad (meses) <24 100 1

0.1

>24 98.6 0[0]

Tamaño de

finca (animales)

50-200 98.1 1

0.2

Tamaño de

finca (animales)

201-500 99.1 0.4[0.1-1.4]

0.2

%= valor porcentual. OR= odds ratio. 1= valor de referencia

29


4.4. Discusión

En el estudio se detectaron anticuerpos contra VRSB en 959 de los animales

examinados, para un porcentaje de 98.6% dejando claro que hay una alta seroprevalencia en el

municipio del cesar. No se encontró una asociación estadística entre la seroprevalencia y los

municipios y se puede decir que en un ambiente óptimo de tipo templado/cálido hace posible

que el virus tenga una mejor propagación; tampoco se encontró una significancia estadística

entre la edad de los animales y el virus, entonces es conveniente afirmar que el virus ataca por

igual a animales jóvenes y adultos. Por último y con respecto a signos clínicos en otras

enfermedades el virus no en específico y se encontró en animales con diferente sintomatología

clínica. En comparación los resultados coinciden con lo señalado por Solís-Calderón (2007)

quienes reportaron 90,8% de seroprevalencia en el territorio de hatos de México.

En Colombia, los resultados obtenidos coinciden con lo señalado por García (2016)

quienes señalaron 99% de seropositividad al VRSB en animales de los municipios de

Aguachica y Rio de Oro, Cesar. Probablemente, factores de riesgo epidemiológico tales como

transporte y movilización de animales seropositivos dentro de la región, venta y compra de

animales infectados con el virus, y malas prácticas de manejo se encuentren involucrados en la

circulación y dinámica del virus, de manera tal que exista alta seroprevalencia en los animales

estudiados.

4.5. Consideraciones Éticas y Bioéticas

El trabajo fue aprobado en un proyecto de fortalecimiento institucional en el acta de

inicio FI12-19B por la Universidad de Santander. De acuerdo con los principios establecidos

en la norma nacional, en el Capítulo VI de la Ley 84 De 1989 “Por la cual se adopta el

Estatuto Nacional de Protección de los Animales y se crean unas contravenciones y se regula

30


lo referente a su procedimiento y competencia” y según el título V de la Resolución 8430 de

octubre 4 de 1993 “Por la cual se establecen las normas científicas, técnicas y administrativas

para la investigación en salud”. Este trabajo fue catalogado como investigación de riesgo

mínimo ante la salud pública y se utilizaron un número mínimo de animales para la obtención

de resultados científicamente válidos.

No fue necesario el uso de agentes químicos para la obtención de muestras ni tampoco

el uso de procesos quirúrgicos avanzados. Para el proyecto fue necesario el uso de material

estéril para la toma de muestras y para la protección de los investigadores fue necesario el uso

de equipo básico como tapabocas, guantes, gorros, y otros equipos para la obtención de

resultados y se establecieron las normas de bioseguridad a seguir en el laboratorio de

bacteriología de la universidad de Santander.

31


Conclusiones

1. Se concluye que los anticuerpos del virus respiratorio sincitial bovino

presentan una seroprevalencia alta, mayor del 97% en la región del departamento del Cesar

debido a condiciones medioambientales y formas de transmisión sencillas, favorables para la

reproducción del mismo.

2. Según los resultados de las pruebas hace constar que los factores de riesgo

estudiados (región geográfica, edad y sintomatología) no tienen relación directa con la

seropositividad del virus respiratorio sincitial bovino atacando bovinos sin discriminación

alguna, por lo tanto, se puede decir que el virus no es específico para estas variables.

32


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