Comercializadora de Lácteos y Derivados S.A. de C.V. PROCEDIMIENTO

Departamento:Aseguramiento de Calidad

Título:“Determinación de Lactosa”

Clave:TZ-ACC-022-FQ

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No. de Rev.Primera

Fecha de revisión:Mayo 2008

Fecha de elaboración:Enero 2005

1. FUNDAMENTO.

La lactosa es el principal carbohidrato de leche. La muestra primeramente se defeca con acetato de zinc y ferrocianuro de potasio para precipitar las proteínas. Se filtra y en el filtrado se determina la lactosa. La lactosa reduce el cobre de la solución de Fehling A, formándose un precipitado de Cu2O de color rojo ladrillo en un medio alcalino.

El tartrato de sodio y potasio actúa como secuestrante del cobre formando un complejo y evitando así su precipitación como Cu (OH)2.

2. ALCANCE.-

Leche fresca

3. MATERIALES Y EQUIPO.-

Balanza analítica Embudo para filtración rápida Matraces Erlenmeyer de 250 ml Pipeta volumétrica de 5 ml Pipeta graduada de 50 ml Matraces volumétricos de 100 ml Parrilla eléctrica de control graduable Papel filtro Whatman de 5 ml

4. REACTIVOS.-

Asbesto preparado (No. de articulo Merck 1560) Azul de metileno Tartrato de sodio y potasio (sal de Rochelle) Sulfato de cobre pentahidratado Hidróxido de sodio Agua destilada Acetato de zinc (C2H3O2)2 Zn 2.H2O

Ferrocianuro de potasio Ácido acético glacial Perlas de vidrio para regular la ebullición Solución de Fehling A (AC.08.PRE.13). Solución de Fehling B (AC.08.PRE.14). Solución de acetato de zinc (AC.08.PRE.15). Solución de ferrocianuro de potasio (AC.08.PRE.16). Solución de azul de metileno (0.2%) (AC.08.PRE.17)

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Aseguramiento de CalidadIng. Clara Hernández AmadorJefe Aseguramiento de Calidad

Ing. Diana Tovar G.Coordinador HACCP

5. PROCEDIMIENTO.-

5.1 Pesar con exactitud 20 g de leche

5.2 Disolver en un matraz volumétrico de 250 ml con 50 ml de agua destilada.

5.3 Defecar con alumi respectivamente de las soluciones de acetato de zinc ferrocianuro de potasio y aforar, dejar reposar 15 minutos, filtrar en papel filtro.

5.4 En caso de que la solución no quede completamente clara, repetir el procedimiento poniendo 2 ml de cada una de las soluciones defecantes en lugar de 1 ml

5.5 La solución filtrada colocarla en una bureta graduada de 50 ml

TITULACIÓN PRELIMINAR

1. Colocar en un matraz erlenmeyer 250 ml de la solución de Fehling A y 5 ml de Fehling B medidos con pipeta volumétrica, mezclar

2. Adicionar 15 ml de filtrado medidos con bureta y 2 perlas de ebullición.3. Calentar el matraz sobre una parrilla cuando el liquido ebulla, adicionar mas cantidad de

la solución de lactosa a intervalos de 10 a 15 segundos, manteniendo la ebullición hasta que el azul casi se decolore. (Nota 1)

4. Entonces adicionar de 2-5 gotas de la solución acuosa de azul de metileno y continuar titulando el líquido en ebullición hasta que el azul sea decolorado y el liquido presente un color rojo ladrillo.

TITULACIÓN EXACTA

1. Repetir la titulación 2 veces mas adicionando antes de calentar, de 1.0 a 0.5 ml menos que el total de la solución filtrada requerida para el efecto de reducción del cobre.

2. Ebullir por 2 minutos, adicionar de 3-5 gotas del indicador de azul de metileno y completar la titulacion dentro de un tiempo total de ebullición de 3 minutos.

3. El final de la titulacion será cuando todo el color azul sea decolorado y el líquido sea rojo ladrillo.

OBTENCION DEL FACTOR DE FEHLING PARA LA LACTOSA

1. Pesar por separado 250 mg de lactosa pura deshidratada (Nota 2), aforar a 250 ml en matraces Erlenmeyer de 250 ml.

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2. Adicionar 5 ml de la solución de Fehling A y 5 ml de la solución de Fehling B con pipeta volumétrica y titular con esta solución de lactosa empleando el indicador de azul de metileno. Siguiendo las mismas indicaciones que para la muestra.

F = V X D

Donde:

F = Factor de Fehling para lactosaV = ml Gastados para titular 10 ml de soluciones de FehlingD = Dilución en mg. Lactosa/ml

6. CALCULOS.-

% Lactosa = F * 100 V D

Donde:

F = Factor de Fehling para lactosa (mg/mL)V = Gasto del contenido de lactosa en la leche (mL)D = Dilución de la leche en mg/mL

NOTAS: No agitar en ningún momento durante la titulación.En caso de no tener lactosa anhidra, emplear hidratada y el factor quedaría:

F=V * D ____________312____________ Peso molecular lactosa hidratada

7. REFERENCIAS.-Elaboración de Métodos de Análisis y Calibración TZ- PCC –007

A.O.A.C.12th De. 1975Método 31.034

Broanw and ZebraSúgar AnalysisPages 753 a 755

Pearson DavidThe Chemical Analysis of Food J. & A. Churchill6ª Ed. 1970Págs. 130, 123, 422 y 453