Post on 01-Oct-2018
UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA
PERUANA
FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA
“AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN ESTRUCTURAL DE ALCALOIDES
A PARTIR DE HOJAS Y TALLOS DE Tabernaemontana siphilitica
“Lobo Sanango” UTILIZADO COMO ANTIMALÁRICO EN LA REGIÓN
LORETO”
TESIS
Para Optar el Título de:
INGENIERO QUÍMICO.
Presentado por los Bachilleres:
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina
Erick Vidal Taricuarima
Asesores:
Ing. Lastenia Ruiz Mesía Dra.
Ing. Wilfredo Ruiz Mesía Dr.
IQUITOS - PERU
2013
UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONÍA
PERUANA
FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA
Tesis para optar el título profesional de “INGENIERO QUIMICO” aprobado por
unanimidad con calificación de Buena, en Sustentación Publica por el Jurado
Calificador nombrado por la Facultad de Ingeniería Química conformado por:
………………………………….
Ing. Maritza Grández Ruíz. Dra.
Presidenta.
…..…………………….……………. ...…………………………………
Ing. Maritza Echevarría Ordóñez.M.sc. Ing. Juan M. Rojas Amasifén. Dr.
Miembro Miembro
………………………………
Ing. Lastenía Ruíz Mesía. Dra.
Asesora
…………………….………….
Ing. Wilfredo Ruíz Mesía. Dr.
Asesor
DEDICATORIA.
Porque:
Jamás nos dejó solos
En los momentos donde
Hubo aflicción, vimos que no nos
Olvidó, ¡gracias!, por darnos la
Vida y permitirnos conocer
Amigos sinceros y verdaderos.
A DIOS
Hivelli & Erick
A nuestros hijos: Joab, Tracy
y Caleb, que son nuestras
inspiraciones y fuerzas para seguir
luchando hasta lograr cumplir
nuestras metas.
A nuestros padres: Marlenia,
Reynaldo y Nilda por su amor y
apoyo incondicional, por estar
siempre a nuestro lado en todo
momento.
A LA FAMILIA
AGRADECIMIENTO.
Nuestro profundo agradecimiento a las instituciones y personas que hicieron posible
su desarrollo:
Al laboratorio de Investigación de Productos Naturales Antiparasitario de la
Amazonía (LIPNAA - UNAP) “Gabriel de la Fuente Martin”.
Al Proyecto“Búsqueda y obtención de compuestos con actividad antimalárica y
anthileishmanicida a partir de especies vegetales amazónicas.” por el apoyo
financiero para la ejecución de esta tesis.
De una manera muy especial nos referimos, A la Dra. Lastenia Ruiz Mesía, por
sembrar en nosotros el aprecio y el amor a esta ciencia, y por enseñarnos cualidades
para ser mejores profesionales en este mundo globalizado y competitivo. Gracias por
permitirnos formar parte de su equipo y por la oportunidad de hacer la tesis en
mención, nuestro agradecimiento es infinito que no basta con simples palabras, solo
nos queda decirle,..”No la defraudaremos”
Un profundo agradecimiento para el maestro y amigo; al Dr. Wilfredo Ruiz Mesia,
por todo su apoyo en la elaboración de esta tesis.
Un agradecimiento especial para nuestra amiga incondicional; la Ing. Leonor
Arévalo Encinas, por su importantísima e indispensable contribución a este trabajo,
por su vitalidad, simpatía, y su gran paciencia.
Al instituto de productos Naturales y Agrobiología de Canarias-España, en mención
del Dr. Matías Reina y Q.F. Liliana Ruiz por el apoyo en la espectroscopía de esta
tesis.
A todos los miembros del LIPNAA., Al Sr. Cesar Tuesta, Al Sr. Jaime del Águila, y a
la Sra. Rosita Vásquez.
Tesis financiada por el Proyecto:
“Búsqueda y obtención de compuestos con actividad
antimalárica y anthileishmanicida a partir de
especies vegetales amazónicas.” – UNAP.
INDICE GENERAL
RESÚMEN
INTRODUCCIÓN 01
CAPITULO I 1. Marco teórico
1.1. Especie en estudio 04
1.1.1. Aspectos Botánicos 04
1.1.2. Descripción Botánica 04
1.1.3. Nombres Comunes 05
1.1.4. Usos Comunes 05
1.1.5. Distribución del Género Tabernaemontana 05
1.2. Alcaloides
1.2.1. Definición 09
1.2.2. Clasificación de los Alcaloides 12
1.2.3. Alcaloides Indólicos 13
1.2.4. Distribución de los Alcaloides Indólicos 18
1.2.5. Biogénesis de los Alcaloides Indólicos 20
1.2.6. Farmacología 24
1.2.7. Propiedades físicas y Químicas 27
1.2.8. Extracción de Alcaloides 28
CAPITULO II
2. Materiales y Métodos
2.1. Material Botánico 30
2.2. Materiales de Laboratorio y otros 30
2.2.1. Materiales de vidrio 30
2.2.2. Adsorbentes 31
2.2.3. Solventes Orgánicos 31
2.2.4. Reactivos 31
2.3. Técnicas Instrumentales y Equipos 31
2.3.1. Resonancia Magnética Nuclear (RMN) 31
2.3.2. Espectrometría de Masas (EM) 32
2.3.3. Espectroscopia de Infrarrojo (IR) 32
2.4. Técnicas Cromatográficas 32
2.4.1. Cromatografía de Columnas (C.C.) 32
2.4.2. Cromatografía de Capa Fina (C.C.F.) 33
2.4.3. Cromatografía en Capa Fina Preparativa. (C.C.F.P.) 33
2.5. Procedimiento Experimental 33
2.5.1. Preparación de las Muestras 33
2.5.2. Extracción de Alcaloides de las Hojas y Tallos de la
Tabernaemontana Siphilitica 34
2.5.3. Fraccionamiento Cromatográfico del Extracto Alcaloidal ácido de
Las Hojas y Tallos de la Tabernaemontana siphilitica 36
2.5.3.1. Aislamiento y purificación de las fracciones alcaloidales Obtenidas
del extracto Alcaloidal acido de las hojas y tallos de
Tabernaemontana siphilitica 36
2.5.4. Fraccionamiento Cromatográfico del extracto Alcaloidal
Básico y residuo de hojas y tallos de Tabernaemontana
Siphilitica 38
2.5.4.1 Aislamiento y purificación de las Fracciones alcaloidales
Obtenidas del extracto Alcaloidal Básico y Residuo de las
hojas y tallos de Tabernaemontana siphilitica 39
2.5.5. Datos Físicos y Espectroscópicos de los Alcaloides aislados 40
2.5.5.1. Coronaridina 41
2.5.5.2. 19 S- Heyneanina 42
2.5.5.3. Coronaridina hidroxindolenina 43
2.5.5.4. 3-Oxocoronaridina 44
CAPITULO III
3. Discusiones y Resultados.
3.1. Resultados 47
3.2. Determinación Estructural de los Alcaloides Aislados 47
3.2.1. Alcaloide Coronaridina 47
3.2.2. Alcaloide 19 S- Heyneanina 50
3.2.3. Alcaloide Coronaridina Hidroxindolenina 53
3.2.4. Alcaloide 3- Oxocoronaridina 55
Conclusiones 59
Recomendaciones 60
Referencias Bibliográficas 61
Anexos 76
Certificado del Herbarium Amazonense 94
LISTA DE TABLAS, FIGURAS Y DIAGRAMAS.
1. Lista de Tablas.
Tabla N° 01. Distribución del género Tabernaemontana en el Perú 06
Tabla N° 02. Datos de RMN de 1H,
13C, HMQC, COSY, NOESY
de 19S- Heyneanina 52
Tabla N° 03. Datos de RMN de1H,
13C, HMQC, COSY, NOESY
de 3- OXO- Coronaridina 58
2. Lista de Figuras.
Figura N° 01. Estructura de Alcaloides Indolicos 14
Figura N° 02 Subtipo de Alcaloides Plumerano, Aspidospermatano,
Corinanteano e Ibogano 15
Figura N° 03 Alcaloides Oxoindólicos 18
Figura N° 04 Biogénesis de los Alcaloides Tipo Iboga y Aspidosperma 21
Figura N° 05 Biogénesis de los Alcaloides indol glucosídicos 21
Figura N° 06 Biogénesis de alcaloides tipo yohimbina,
Ajmalicina y Corinanteina 22
Figura N° 07 Biogénesis de los alcaloides tipo Iboga y Aspidosperma 23
Figura N° 08 Biogénesis de los alcaloides tipo Piridocarbazol 24
Figura N° 09 Estructura de la Ellipticina 26
Figura N° 10 Diferentes Esqueletos Alcaloidales 28
Figura N° 11 Fraccionamiento de masas de Coronaridina 48
Figura N° 12 Alcaloide Coronaridina Publicado 49
Figura N° 13 Alcaloide Coronaridina Aislado en el LIPNAA-UNAP 49
Figura N° 14 Alcaloide Heyneanina Publicado 51
Figura N° 15 Alcaloide Heyneanina Aislado en el LIPNAA-UNAP 51
Figura N° 16 NOESY del Alcaloide 19S-Heyneanina 53
Figura N° 17 Fraccionamiento de masa de Coronaridina
Hidroxindolenina 54
Figura N° 18 Alcaloide Coronaridina Hidroxindolenina Publicado 55
Figura N°19 Alcaloide Coronaridina Hidroxindolenina Aislado en el
LIPNAA-UNAP 55
Figura N° 20 Alcaloide 3- Oxo Coronaridina Publicado 57
Figura N° 21 Alcaloide 3- Oxo Coronaridina Aislado en el LIPNAA-
UNAP 57
Figura N° 22 NOESY del Alcaloide 3-Oxocoronaridina 58
Figura N° 23 Espectro de Masa del alcaloide Coronaridina 77
Figura N° 24 Espectro de IR del Alcaloide Coronaridina 77
Figura N° 25 Espectro de RMN de1H del alcaloide Coronaridina 78
Figura N° 26 Espectro de Masa del alcaloide 19S-HEYNEANINA 79
Figura N° 27 Espectro de IR del alcaloide 19S-HEYNEANINA 79
Figura N° 28 Espectro de RMN de H
+ de alcaloide 19S-HEYNEANINA 80
Figura N° 29 Espectro de RMN de13
C del alcaloides 19S-HEYNEANINA 80
Figura N° 30 COSY del alcaloide 19S-HEYNEANINA 81
Figura N° 31 NOESY del alcaloide 19S-HEYNEANINA 82
Figura N° 32 HSQC de13
C del alcaloides 19S-HEYNEANINA 83
Figura N° 33 Espectro de Masa del alcaloide Coronaridina
Hidroxindolenina 84
Figura N° 34 Espectro de IR del alcaloide Coronaridina
Hidroxindolenina 84
Figura N° 35 Espectro de RMN de1H del alcaloide Coronaridina
Hidroxindolenina 85
Figura N° 36 Espectro de RMN de13
C del alcaloide Coronaridina
Hidroxindolenina 85
Figura N° 37 COSY del alcaloide Coronaridina Hidroxindolenina 86
Figura N° 38 NOESY del alcaloide Coronaridina Hidroxindolenina 87
Figura N° 39 HSQC del alcaloide Coronaridina Hidroxindolenina 88
Figura N° 40 Espectro de Masa del alcaloide 3-Oxocoronaridina 89
Figura Nº 41 Espectro de RMN de1H del alcaloide 3-Oxocoronaridina 89
Figura Nº 42 Espectro de RMN de13
C del alcaloide 3-Oxocoronaridina 90
Figura Nº 43 COSY del alcaloide 3-Oxocoronaridina 91
Figura Nº 44 NOESY del alcaloide 3-Oxocoronaridina 92
Figura Nº 45 HSQC del alcaloide 3-Oxocoronaridina 93
3. Lista de Diagramas.
Diagrama N° 01. Extracción de Alcaloides de las hojas y tallos de la
Tabernaemontana siphilitica 35
Diagrama N° 02. Fraccionamiento, Aislamiento y Purificación de
las hojas y tallos de la Tabernaemontana siphilitica
del extracto Alcaloidal acido 45
Diagrama N° 03. Fraccionamiento, Aislamiento y Purificación de
las hojas y tallos de la Tabernaemontana siphilitica
del extracto Alcaloidal Básico y Residuo 46
RESÚMEN
El presente trabajo de investigación tiene por objetivo, aislar e identificar los
alcaloides de las hojas y tallos de la Tabernaemontana siphilitica (Apocinaceae),
especie vegetal que se utiliza tradicionalmente como antimalárico en la amazonia
peruana.
El estudio se realizó en las instalaciones del Laboratorio de Investigación de
Productos Naturales Antiparasitarios de la Amazonia" Gabriel de la Fuente Martín"
LIPNAA-UNAP, en lo referente a la extracción, fraccionamiento cromatográfico,
purificación y aislamiento de los alcaloides y en el Instituto de Agrobiología de
Canarias del Consejo Superior de Investigación Científico de Tenerife (España) se
realizaron, la toma de los espectros de RMN, espectrometría de masas de alta y
baja resolución, los experimentos, bidimensionales de coherencia cuántica homo y
heteronucleares, los cuales permitieron determinar las estructuras químicas de los
alcaloides aislados.
Las hojas y tallos de Tabernaemontana siphilitica, se secaron a la temperatura de
20oC obteniéndose (1.27 Kg) de planta seca y molida, a partir del cual se obtuvo el
extracto Etanólico (161.9g) por maceración con etanol por un periodo de 32 días. El
extracto Etanólico (161.9g) se disolvió en H2SO4 0,5 N, se extrajo con CH2Cl2
obteniéndose 2.72g de extracto alcaloidal ácido, el extracto acuoso se basificó a
pH=9 con NH4OH después de extraer con CH2Cl2 y evaporar se obtuvo (552.1 mg).
Y (376 mg) de residuo Alcaloidal. El extracto alcaloidal acido se volvió a extraer a
pH= 9 y se obtuvo (60.9 mg). Por cromatografía de capa fina se unieron los
extractos alcaloidales dando un peso de 989 mg. Utilizando técnicas cromatográficas
de columna, cromatografía de capa fina, cromatografía preparativa se aislaron cuatro
alcaloides. La estructura química se determino por la interpretación de sus datos
espectroscópicos (RMN 1H y
13C, COSY, NOESY y HSQC) y datos
espectrométricos y por comparación con los datos publicados en la bibliografía
química, los cuales fueron identificados como: CORONARIDINA, 19 S –
HEYNEANINA, CORONARIDINA HIDROXINDOLENINA, 3-OXO-
CORONARIDINA.
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 1 Erick Vidal Taricuarima
INTRODUCCIÓN
Las civilizaciones antiguas consideraron muchas plantas por sus propiedades
curativas. Este conocimiento se fue transmitiendo a lo largo de los siglos, sin que
se supiera por qué o cómo actuaban, pero sí era indiscutible que las plantas podían
curar diversas enfermedades y constituían la mayor fuente de medicamentos para
el hombre y los animales. Hoy se sabe que las propiedades medicinales de las
plantas son responsabilidad de algunos grupos de sustancias de diversa
composición química conocidas como metabolitos secundarios.
Las Plantas medicinales, son todas aquellas plantas que contienen, en alguno de
sus órganos, principios activos, los cuales, administrados en dosis suficientes,
producen efectos curativos en las enfermedades de los hombres y de los animales
en general. Se calcula en unas 260.000 las especies de plantas que se conocen en
la actualidad, de las que el 10% se pueden considerar medicinales. Las plantas
poseen una gran cantidad de metabolitos primarios y secundarios que les permiten
crecer, multiplicarse, defenderse y sobrevivir.
Los alcaloides, son las más numerosas de los metabolitos secundarios de gran
diversidad estructural de carácter básico; en su mayoría de origen vegetal, algunos
pocos de origen animal que suelen tener actividad biológica incluso a dosis muy
bajas; La familia Apocinaceae se encuentra distribuida en todo el mundo, pero
principalmente en las áreas tropicales, comprende 250 a 550 géneros que agrupa
3700 a 5100 especies, ricas en alcaloides indólicos y muchas de ellas reportadas
como antimalárico por las diferentes etnias amazónicas (Vásquez Martínez.
1997).
La familia Apocynaceae en el Perú consta de 37 géneros y 158 especies (Brako &
Zarucchi, 1993; Ulloa et al., 2004), pueden ser bejucos, lianas, árboles y
arbustos. En este trabajo se reconoce 14 endemismos de 10 géneros.
Los alcaloides, se encuentran en las semillas, raíces, cortezas y hojas; al estado
libre o como glucósidos, o formando sales con ácidos orgánicos. Ninguna otra
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 2 Erick Vidal Taricuarima
clase de productos naturales posee tal enorme variedad de estructuras. La familia
Apocynaceae, constituyen una de las familias de plantas con flor más importantes
por su diversidad, distribución y utilidad, la misma ha sido poca estudiada a nivel
regional. Estas especies se caracterizan por sintetizar alcaloides del tipo
Indólicos, oxindólicos. (A. Situación Perú, 2003).
Los alcaloides se caracterizan por la presencia de nitrógeno básico, teniendo
propiedades de formar sales solubles en el agua con ácidos orgánicos e
inorgánicos, mientras que sus bases libres son solubles en solventes orgánicas. Se
encuentran en todos los órganos de la planta: semilla, raíces, cortezas, hojas,
flores. (Asociación latinoamericana. 2008).
Los antimaláricos conocidos actualmente, son producto de la investigación
extranjera, en países donde la malaria fue superada y sus líneas de investigación
se dirigen a otros campos, por ello en el Perú en especial Loreto (Iquitos) la
UNAP, ha priorizado líneas de investigación en la Búsqueda y Obtención de
nuevos compuestos con actividad antimalárica a partir de especies vegetales
amazónicas, esta investigación permite validar las plantas que el poblador
amazónico utiliza tradicionalmente para el tratamiento de la malaria. La selva
amazónica alberga las 2/3 partes de la biodiversidad del mundo; reportándose
170 especies de uso antimalárico. (Maco M. et al; Ruiz L, et al.2007).
Tabernaemontana, es un género muy extenso, que pertenece a la familia de las
Apocináceas y consta aproximadamente de 100 especies distribuidas por todo el
trópico, así como en algunas regiones subtropicales, del mundo. Las especies se
utilizan en la medicina tradicional y para otros fines, las formas y los usos
medicinales son muy variados.
El género Tabernaemontana, presenta muchas aplicaciones biológicas la
bibliografía científica reporta que se han encontrado extractos de plantas y
compuestos puros con actividad citotóxica y antitumoral , actividad frente a
diferentes bacterias: Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Escherichia coli,
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 3 Erick Vidal Taricuarima
Staphylococcus aureus meticilino resistentes, Streptococcus faecalis, Salmonella
enteritidis, Shigella flexneri, Staphylococcus epidermidis, Acynetobacter lwoffii,
actividad antimalárica, leishmanicida entre otras actividades biológicas(Geran.
1972), (V.S. Prakash. 2002), (Ramanitrahasimbola. et al., 2001).
Esta investigación, tiene como objetivo, la identificación de los alcaloides a partir
del extracto etanólico de las hojas y tallos de la Tabernaemontana siphilitica. El
aislamiento y purificación de los alcaloides se realizó utilizando técnicas
cromatográficas de columna (C.C), Cromatográfica Preparativa(CP),
Cromatografía de capa Fina(CCF), cromatografía de exclusión molecular y la
elucidación estructural por medio de técnicas espectroscópicas, espectrométricas,
y por comparación de sus datos físicos con los reportados en la bibliografía
química.
CAPITULO I
1. MARCO TEÓRICO
1.1. ESPECIE EN ESTUDIO
La especie en estudio es Tabernaemontana siphilitica
(Apocinaceae) conocida en la región Amazónica como
“Lobo Sanango”. (Mejía y Rengifo)
1.1.1. ASPECTOS BOTÁNICOS.
Descripción de la especie:
Nombre Común : “Lobo Sanango”
Nombre Científico : Tabernaemontana siphilitica
Familia : Apocinaceae
Género : Tabernaemontana
Especie : Siphilitica
Reino : planta
División : Magnoliophyta
Clase : Magnoliopsida
Orden : Gentianales
Autor Epíteto Específico : (L. f.) Leeuwenb
Determinador : Leeuwenberg, J. M.
Fecha determinación : 1992
1.1.2. DESCRIPCIÓN BOTÁNICA
Árbol de hasta 8 metros de altura. Exudación de látex blanco abundante y
pegajoso. Hojas simples, opuestas, con margen entero, glabras, color verde
brillante. Flores agrupadas en inflorescencias terminales y axilares, con
corola verde y bordes blancos. Frutos folículos fusionados uno al frente
del otro, de color verde y amarillo al madurar, cada uno contiene una
semilla. Posee también potencial ornamental. Se distribuye por Colombia,
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 5 Erick Vidal Taricuarima
Guyana, Surinam, Guyana Francesa, Ecuador, Venezuela, Brasil y Perú.
Crece en Loreto, San Martín, Huánuco, Junín, Madre de Dios y Ucayali.
(Duke 2009).
1.1.3. NOMBRES COMUNES
En la Amazonía Peruana esta especie es conocida como lobo sanango,
capeshini, uchu sanango, (Rengifo y Mejía), en los países vecinos como
Colombia también es conocido como Borrachero negro, borrachero
arbustivo. (www.plantas toxicas).
1.1.4. USOS COMUNES
Tabernaemontana siphilitica, es una especie vegetal muy utilizada por el
poblador amazónico para el tratamiento como antiinflamatorio, febrífugo,
analgésico, emético, sedante, sudorífico y tranquilizante. (Duke 2009). La
revisión bibliográfica del género Tabernaemontana nos permitió verificar
que esta especie, no reporta estudios químicos ni farmacológicos, por lo
que es necesario aislar e identificar sus componentes químicos.(IICA,
1999).
1.1.5. DISTRIBUCIÓN DEL GÉNERO TABERNAEMONTANA.
El género Tabernaemontana lleva el nombre de Jacob Theodor. Müller,
Tabernaemontana que pertenece a la familia de las Apocynaceae
(Leeuwenberg, 1991), es un gran género que presenta una gran variedad
de especies, con estructuras químicas complejas e interesantes. Hay
alrededor de 100 especies de Tabernaemontana, ampliamente distribuido
en los trópicos, 18 en África, 15 en Madagascar, 21 en Asia tropical, y
cerca de 50 en el neotrópico. Este género es una fuente muy rica de una
serie de alcaloides indólicos con esqueletos de carbono interesantes y
novedosas actividades biológicas (Van Beek. 1984,1988). En todas partes,
las especies se utilizan en la medicina tradicional y para otros fines, las
formas y los usos medicinales son muy variados y la decocción sirve para
el lavado de heridas y para baños de vapor para el tratamiento de sífilis.
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 6 Erick Vidal Taricuarima
En el Perú se encontraron 15 especies del género Tabernaemontana, 14
de ellos se encuentran en el Departamento de Loreto. Los cuales se indican
en la Tabla 01.
TABLA N° 01. Distribución del género Tabernaemontana en el Perú.
DISTRIBUCIÓN EN EL PERÚ
ESPECIE UBICACIÓN
Tabernaemontana Columbiensis Dpto. Huánuco y San Martin
Tabernaemontana Cuspidata Dpto. Loreto y Ucayali
Tabernaemontana Cymosa Dpto. Loreto y San Martin
Tabernaemontana Flavicans Dpto. Huánuco, Loreto, Madre de
Dios y San Martin
Tabernaemontana heterophyla Dpto. Loreto, Madre de Dios y San
Martin.
Tabernaemontana hirtula var.maynensis Dpto. Loreto
Tabernaemontana Luciliae Dpto. Huánuco, Loreto y San
Martin
Tabernaemontana Macrocalix Dpto. Amazonas y Loreto
Tabernaemontana Markgrafiana Dpto. Amazonas, Loreto y Ucayali
Tabernaemontana Sananho Dpto. Amazonas, Ayacucho,
Huánuco, Junín, Loreto, Madre de
Dios, Pasco, San Martin y Ucayali.
Tabernaemontana Siphilitica Dpto. Amazonas, Huánuco, Loreto,
Madre de Dios y San Martin.
Tabernaemontana Stenolaba Dpto. Loreto, Madre de Dios
Tabernaemontana Tessmannii Dpto. Loreto y San Martin.
Tabernaemontana Undulata Dpto. Amazonas, Huánuco, Junín,
Loreto, Pasco, San Martin y
Ucayali.
Tabernaemontana Vanheurckii Dpto. Cuzco, Huánuco, Loreto,
Madre de Dios, San Martin y
Ucayali.
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 7 Erick Vidal Taricuarima
Del estudio de los diferentes géneros de Tabernaemontana Se detectó
actividad frente a diferentes enfermedades como por ejemplo:
De Tabernaemontana Catharinensis. (Pereira 1999. Burkart A. 1979)
detectó actividad frente a Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus,
Escherichia coli, Staphylococcus aureus meticilino resistentes,
Streptococcus faecalis, Salmonella enteritidis, Shigella flexneri,
Staphylococcus epidermidis, Acynetobacter lwoffii.
Tabernaemontana fuchsiaefolia, actualmente se utiliza en la medicina
tradicional para el tratamiento de la malaria en Sao Paulo y Paraná
(Zocoler et al. 2005). Atribuyó la actividad biológica a los alcaloides
bisindolico, (Frederick et al. 2000). Voacamine es activa in vivo (43% de
reducción de la parasitemia a 10 mg / kg por vía oral mediante la prueba
de supresión de Peters) y presenta de cierta especificidad en la fase
trofozoítos y esquizontes. (Ramanitrahasimbola. Et. 2001).
Los principales problemas de este género se refieren a la identificación
taxonómica. En varios casos, los grupos de investigación han trabajado en
la misma planta sin darse cuenta, porque los nombres utilizados en la
identificación del material posteriormente han sido reconocidos como
pertenecientes a la misma especie, por ejemplo, Tabernaemontana Crussa
con 5 sinónimos y Tabernaemontana coffeoides con muchos sinónimos y
numerosos taxones.
Los resultados químicos deben ser capaces de dar información acerca de
las rutas biosintético implicadas en la producción de alcaloides indólicos,
así como la quimiotaxonomía del género. También pueden ser de ayuda
en la búsqueda de nuevos compuestos medicinales interesante o en la
validación del uso de una planta o extracto frente a diferentes dolencias o
enfermedades. En contraste con la enorme cantidad de investigación
Fitoquímica, hay poca información farmacológica. Una mejor cooperación
entre los fitoquímicos y farmacólogos podría llevar a conclusiones nuevas
y útiles. La etnobotánica da muchos ejemplos de usos similares de
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 8 Erick Vidal Taricuarima
diferentes especies del mundo, y aunque algunos de los usos son
cuestionables, es difícil creer que todo lo informado carezca de valor
científico, se espera que los estudios químicos y etnobotánicas
contribuyan a la identificación taxonómica de las especies de este género.
También se espera que los datos etnobotánicas proporcionen nuevas pistas
y estimulen más investigación, porque muchas especies aún no se han
investigado química y farmacológicamente; a fin de descubrir nuevas
moléculas con actividades biológicas interesantes.
El género Tabernaemontana se caracteriza por sintetizar alcaloides
indólicos y bisindólicos, así tenemos que de Tabernaemontana Accedens.
se aislaron los alcaloides: Accedine, N1-Demethyl-16-epi-accedine, N1-
Methyl-16-epi-affinine, Accedinine Accedinisine, Voacamidine
Voacamine. (Achenbach. 1975). De Tabernaemontana affinis. Se aislaron
los alcaloides: Serpentine, Yohimbine, Affinisine, Affinine, Vobasine,
Coronaridine, Coronaridine pseudoindoxyl, Olivacine. (Chaves.1960, F.
Abreu 1976, J. Weisbach 1963). De Tabernaemontana Alba. Se aislaron los
alcaloides: Tabersonine, Coronaridine. (0. Collera 1962, F. Abreu 1976). De
Tabernaemontana albiflora, Se aislaron los alcaloides: Coronaridine, 18-
hydroxycoronaridine, (20R)-18,19-dihydroxy-pseudovincadifformine,
Ibophyllidine, 19-hydroxyibophyllidine (C. Kan, 1981). De Tabernaemontana
amblyocarpa. Se aislaron los alcaloides: Akuammidine, Vallesamine, (+)-
Tubotaiwine, Isovoacangine, Voacristine, Isovoacristine. (I. Pérez. 1980). De
Tabernaemontana amygdalifolia. Se aislaron los alcaloides: 12-
Demethoxycylindrocarpidine Homocylindrocarpidine, 5 Oxocylindrocarpidine,
O-Demethylpalosine (H.Achenbach 1967 y I981). De Tabernaemontana
arbórea. Se aislaron los alcaloides: Tabersonine, Voacangine, Isovoacangine,
Voacamine, 19-epi-Voacorine. (Chaverri. 1980, D. Kingston. 1978 y 1980). De
Tabernaemontana attenuata. Se aislaron los alcaloides: 16-epi-
pleiocarpamine, (+)-Tubotaiwine, Conopharyngine, Conopharyngine
hydroxyindolenine, (6R)-3,6-oxidocoronaridine, (-)-Heyneanine, 19-epi-
Heyneanine, Coronaridine hydroxyindolenine, 11-Hydroxycoronaridine,
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 9 Erick Vidal Taricuarima
10-Hydroxyheyneanine, Ibophyllidine. (A. Amico 1977). De
Tabernaemontana brachyantha. Se aislaron los alcaloides: Normacusine B,
Anhydrovobasindiol, Voacorine, Conopharyngine. (M.B. Patel. 1973). De
Tabernaemontana bufalina. Se aislaron los alcaloides: Dregamine, Silicine,
Aparicine Pandoline, 20-epi-pandoline Pseudotabersonine, Pandine. (M.J.
Hoizey. 1995; M. Zeches. 1975). De Tabernaemontana capuronii. Se
aislaron los alcaloides: Capuronine; Capuronidine; 14,15-
Anhycrocapuronidine; 14,15-Anhydro-1,2-dihydrocapuronidine; (20R)-
capuvosidine, Capubosine, Dehydroxycapuvosine, N4-Demethylcapuvosine (I.
Chardon. 1978). De Tabernaemontana Divaricata. Se aislaron los
alcaloides: Dregamine, Tabernaemontanine, Vobasine Voaphylline,
Lochnericine Tabersonine. (B. Talapatra. 1975, M. Elkeiy. 1966). De
Tabernaemontana Elegans. Se aislaron los alcaloides: Voacamine,
Tabernaemontanine, Conoduramine, Tabernaelegantine A, Tabernaelegantine B,
Tabernaelegantine C, Tabernaelegantine D, Tabernaelegantanine A,
Tabernaelegantanine B, Tabernaelegantanine C, Tabernaelegantanine D (M.
Gorman. 1960, B. Talapatra. 1975, B. Gabetta. 1975, E. Bombardelli. 1976).
De Tabernaemontana Macrocalix. Se aislaron los alcaloides: Tabersonine,
Coronaridine. (J. Bruneton. 1979). De Tabernaemontana Sananho. Se
aislaron los alcaloides: Coronaridine, 3-Hydroxycoronaridine, (-)-Heyneanine,
(-)-Ibogamine. (K. Raj, 1974).
1.2. ALCALOIDES.
1.2.1. Definición
Los alcaloides son sustancias orgánicas nitrogenadas con carácter básico y
mayoritariamente de origen Vegetal. Tienen una estructura generalmente
compleja y ejercen acciones fisiológicas diversas incluso a dosis muy
bajas. Son tóxicos y capaces de precipitar con ciertos reactivos
característicos. Hay, sin embargo, determinadas sustancias que se
consideran alcaloides y que no cumplen las características generales de los
alcaloides. (Kuklinski. 2000).
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 10 Erick Vidal Taricuarima
Muchas plantas contienen compuestos con un profundo impacto
fisiológico con dosis muy pequeñas. Los agentes activos de estas
sustancias vegetales han sido aislados y se han descubierto que son
sustancias con numerosas aplicaciones. (Ajarem et. al.1990).
Los alcaloides se caracterizan por tener sabor amargo, generalmente
presentan propiedades básicas debidas al Nitrógeno de su estructura. Son
compuestos orgánicos, se forman a partir de aminoácidos. En la mayoría
de los alcaloides, el Nitrógeno pertenece a un ciclo. Como bases libres; son
solubles en disolventes orgánicos (polares y apolares) e insolubles en agua
y solubles en mezclas hidroalcoholicas. Y en forma de sal son solubles en
agua y mezclas hidroalcoholicas, pero insolubles en disolventes orgánicos
apolares. Su solubilidad depende del pH. Los alcaloides oxigenados son
sólidos cristalizables, incoloros o blancos y con un punto de fusión
característico. Se obtienen mediante extracción con disolventes. Los
alcaloides no oxigenados son líquidos volátiles de olor característico se
obtienen por destilación con arrastre de vapor. (Kuklinski. 2000).
Hasta la fecha se conocen alrededor de 26900 alcaloides aislados de
plantas, hongos, organismos marinos y mamíferos, de los cuáles un total
de 21120 son derivados de plantas. Se han encontrado 186 familias
compuestas por 7231 especies pertenecientes a 1730 géneros (14.2%) que
contienen alcaloides, 35 en las que se han detectado alcaloides pero aún no
se han aislado, quedando aún 153 familias (aproximadamente 674 géneros
y 5835 especies) por estudiar. (Cordell, G. A.et al. 2001).
Algunas familias poseen una marcada tendencia a elaborar alcaloides: esto
ocurre tanto en las Monocotiledóneas (Amarilidácea, Liliácea) como en las
Dicotiledóneas (Anonácea, Apocynaceae, Fumariaceae, Laurácea,
Loganiácea, Magnoliácea, Menispermácea, Papaverácea, Ranunculácea,
Rubiácea, Rutácea, Solanácea, etc.). En estas familias algunos géneros
contienen alcaloides, mientras que otros se encuentran desprovistos de
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 11 Erick Vidal Taricuarima
ellos. En pocos casos existen alcaloides en todos los géneros
(Papaverácea). (Jean Bruneton et. al. 2001).
Los alcaloides se localizan en determinadas regiones de los vegetales, en
forma de ácidos orgánicos; unos en las hojas (coca, tabaco); otros en las
frutas y semillas (nuez vómica), en la corteza de los árboles (quina), en las
raíces (altea), etc.
Durante mucho tiempo, los alcaloides han sido considerados como
productos del metabolismo únicamente vegetal. Realmente también
existen estructuras alcaloídicas en los animales. A veces se trata de
productos formados a partir de alcaloides contenidos en los vegetales
incluidos en la dieta alimenticia del animal: es el caso de la castoramina,
que proviene de la metabolización de los alcaloides de los nenúfares que
consume el castor, o bien el de los alcaloides pirrolizidinicos que se
encuentran en algunas mariposas. Otras veces los alcaloides aislados
parecen ser productos del metabolismo animal: este es el caso especial de
los anfibios urodelos (salamandras) o de los anuros (sapos). (Jean
Bruneton, 2001).
Los alcaloides poseen masas moleculares que varían entre 100 y 900. Las
bases no oxigenadas son líquidas a temperatura ambiente (nicotina,
esparteína, coniína), las que contienen oxígeno en su fórmula, sólidos
cristalizables, raramente coloreados (berberina), capaces de desviar la luz
polarizada, las bases cristalizadas dan puntos de fusión netos, sin
descomposición por debajo de 200°C, en su forma libre, los alcaloides
(bases) son insolubles o muy poco solubles en agua, solubles en
disolventes orgánicos apolares (éter, cloroformo, hexano) o poco polares
(acetato de etilo) y solubles en disolventes orgánicos polares (alcoholes de
elevada graduación).
La basicidad de los alcaloides les permite formar sales con ácidos
minerales (clorhidratos, sulfatos, nitratos) u orgánicos (tartratos,
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 12 Erick Vidal Taricuarima
sulfamatos, maleatos). Las sales de alcaloides son generalmente solubles
en agua y en alcoholes diluidos, salvo raras excepciones, son insolubles en
disolventes orgánicos. Las sales cristalizadas se conservan bastante bien y
constituyen habitualmente la forma comercial de estas moléculas. (Jean
Bruneton. et al.2001).
1.2.2. CLASIFICACIÓN DE LOS ALCALOIDES.
Para clasificar un compuesto como alcaloide es preciso tomar sus
cualidades químicas y farmacológicas.
La clasificación de los alcaloides, se dio generalmente por la similitud con
estructuras moleculares más simples, otras veces son designados según su
origen, género o especie de plantas del cual fueron aislados por primera
vez.
Dada la amplitud del tema, nos limitaremos a presentar ejemplos de los
alcaloides más comunes en cada uno de los grupos siguiente. (GROS, E.
1995).
Alcaloides Pirrolidínicos
Alcaloides Piridínicos y Piperidínicos
Alcaloides Isoquinolínicos y Fenilletilamínicos
Alcaloides Morfínicos
Alcaloides Quinolínicos
Alcaloides Indólicos
Alcaloides Imidazólicos
Alcaloides Quinazolínicos
Alcaloides Quinilizidínicos
Alcaloides Pirrolizidinicos
Alcaloides de la Erythrina
Alcaloides de la Amaryllidacea
Alcaloides de Lycopodio
Alcaloides Esteroidales
Alcaloides Diterpénicos
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1.2.3 ALCALOIDES INDÓLICOS.
Abarcan una gran variedad y diversidad estructural que va desde simples
derivados de la triptamina, carbazoles, β-carbolinas, hasta esqueletos más
elaborados que involucran la condensación de triptamina común segundo
aminoácido, una molécula de isopreno, policétidos o terpeno.
De todos ellos, el grupo más importante y más extensamente estudiado son
los alcaloides indólicos monoterpénicos que derivan biogenéticamente de
un único precursor construido por condensación del aminoácido triptófano
con el monoterpenos ecologanina. (M.V. Kisakürec 1982). Kisakürec y
Hesse los clasifica en nueve grupos que derivan de los esqueletos
fundamentales I (Corinante), II (Aspidospermas) Y III (Ibogal) (Fig. 1).
Los grupos vincosano, vallesiacotamano, corinanteano, estrichnano y
aspidospermatano adoptan el esqueleto I, los grupos plumerano y eburnano
el esqueleto II y el ibogano y tacamano el III (Fig. 1).
NH
N
89
1
3
45
6
7
-Carbolina
NH8
91
2
3
45
6
7
Carbazol
NH
NH21
23
4
5
6
7
Triptamina
Esqueleto ICorinante
Esqueleto IIAspidosperma
Esqueleto IIIIboga
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FIGURA 1. Estructura de Alcalóides Indólicos
Los alcaloides de los grupos plumerano, aspidospermatano, corinanteano e
ibogano, se dividen en subtipos, dependiendo de la variación estructural
del fragmento alicíclico o en unos pocos casos de la porción indólico, estos
subtipos se nombran de acuerdo al miembro más representativo del
mismo. (fig. 2).
NNH
H
TIPO VALLESIACOTAMANO
O
TIPO VINCOSANO
NHNH
H
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FIGURA 2. Subtipo de Alcaloides Plumerano, Aspidospermatano,
Corinanteano e Ibogano
TIPO CORINANTEANO
NNH
H
NH
N
OCH3
H3COOC
H
H
Subtipo Corinanteina
NH
N
OH3COOC
H
H H
Subtipo Ajmalicina
NH
N
CH2OH
H
H
Subtipo Sarpagina
NN
H
H3COOC
HH
Subtipo Pleiocarpamina
NH
N
O
CH3
H
CH2OH
H3COOC
Subtipo Vobasina
NN
CH3
H
OH
Subtipo Sarpagina
NN
H
H
COOCH3AcOH2C
Subtipo Akuammilina
NH
N
H
CH3H3COOC
H
O
Subtipo Akuammilina
NH
N
H
H
O
CH3
Subtipo Ervitsinia
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FIGURA 2. (Continuación) Subtipo de Alcaloides Plumerano,
Aspidospermatano, Corinanteano e Ibogano
NH
N
H
TIPO ESTRICHNANO
NH
N
H
TIPO ASPIDOSPERMATANO
N
N
H3COOC COOCH3
H
H
Subtipo Precondiocarpina
NH
N
H
H3COOC CH2OH
Subtipo Stemmadenina
NH
N
H
H3COOC COOCH3
Subtipo Vallesamina
NH
N
TIPO PLUMERANO
NH
NO
Subtipo Voaphillina
NH
N
COOCH3
H
Subtipo Tabersonina
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FIGURA 2 (Continuación) Subtipo de Alcaloides Plumerano, Aspidospermatano,
Corinanteano e Ibogano.
N
TIPO EBURNANO
N
TIPO TACAMANO
NH
N
NH
N
TIPO IBOGANO
COOCH3
Subtipo Coronaridina
N
N
COOCH3
Subtipo Coronaridinahidroxindolenina
OH
NH
N
O
COOCH3
Subtipo Iboluteina
NH
NH3COOC
OH
O
NH
N
Subtipo Tabernoxidina Subtipo Cleavamina
NH
N
COOCH3
H H
Subtipo Pseudotabersonina
NH
O
NH
Subtipo Dichomina
NH
N
COOCH3
OH
H
H
Subtipo Pandina
NH
NH
H
H
COOCH3
Subtipo Ibophillidina
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Hay que decir que esta clasificación no es única (Geoffrey A. Cordell,
1981) y aunque atractiva por su sencillez deja de ser exhaustiva, dejando
fuera a un numeroso grupo de estos compuestos, que involucran otros
reagrupamientos, y entre los que citaremos los oxoindoles, como la
gelsemina y la mitraphillina; los piridocarbazoles, como la ellipticina; los
del grupo secodina, en los que el esqueleto secologanina está abierto; y el
numeroso grupo de los bisindólicos, los cuales se clasifican según la
identidad de las unidades monómeras constituyentes.
Figura N° 03. Alcaloides Oxindólicos
1.2.4 DISTRIBUCIÓN DE LOS ALCALOIDES INDÓLICOS.
Dejando a un lado los alcaloides indólicos simples, los cuales pueden
encontrarse en al menos 35 familias de plantas (Philippe. 1985), los de
mayor complejidad. los alcaloides monoterpénicos, se encuentran
distribuidos casi en su totalidad entre las familias, Apocynaceae,
Loganiácea y Rubiáceas, aunque también han sido encontradas en las
familias Anonáceae, Euphorbiaceae, Sapotaceae, Alangiaceae e
Icacinaceae. (M.V. Kisakürec).
NH
O
O
NCH3
Gelsemina
NH
NH
H3COOC
OCH3
H
O
H
Mitraphillina
NH
N
CH3
CH3
Ellipticina
NH
N
H3COOC
Secodina
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La mayoría de los botánicos dividen la familia Apocinaceae (la más
prolífica) en tres subfamilias: Plumerioideade, Cerberoideade y
Echitoídeade. Aunque de todas ellas se han aislado alcaloides, solo en la
subfamilia es además dividida en siete tribus de las que en solo cuatro,
Carisseae, Tabernaemontana, Alstonieae (Plumerieae) y Rauwolfíeae, los
alcaloides indólicos están presentes.
Los alcaloides representativos del esqueleto I (Corinante) son los más
ampliamente distribuidos habiéndose encontrado abundantemente en los
géneros Alstonia, Amsonia, Aspidospermas, Catarantus, Ochrosia,
Pleicoarpa, Rauwolfia, Tabernaemontana y Vinca (Apocinaceae), en el
género Estríchnos (Loganiaceae) y los géneros Chinchonas Corinante,
Mitragina y Uncaria (Rubíaceae). Los alcaloides representativos del
esqueleto II (Aspidospermas) están restringidos a los géneros de
Apocinaceae Alstonieae, Kopsia, Pleicoarpa, Stemmadenia,
Tabernaemontana y Vinca, y los del esqueleto III (Iboga) se encuentran en
los géneros Apocinaceae, Ervatamia, Tabernaemontana, Stemmadenia y
Voacanga.
Especial mención por su importancia merece el género Rauwolfia
(Apocinaceae) que incluye alrededor de 150 especies distribuidas a lo
largo de las zonas tropicales y subtropicales del mundo, encontrando su
hábitat típico en selvas y sabanas. Los sistemas anulares básicos
encontrados son comunes a la mayoría de las especies y están
representados por los compuestos yohimbina, Ajmalicina, Sarpagina y
Ajmalina. (Manske, 1965) (Fig. 2). Estos alcaloides son también
encontrados en otros géneros, la yohimbina es el constituyente principal de
la corteza del árbol africano Corinante yohimbe (Rubíaceae) y también se
ha encontrado en los géneros, Amsonia, Vallesia, Aspidosperma y Vinca
(Apocinaceae), Gelsenium y Estríennos (Loganiaceae), Corinante,
Pausinitalia (Rubíaceae) y Achorrea (Euphorbiaceae). La Ajmalicina se
aisló por primera vez de la Rauwolfia serpentina, pero está distribuida en
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otros géneros como Vinca y Corinante. Los esqueletos tipo Sarpagina y
Ajmalina, representados por los alcaloides del mismo nombre, están
ampliamente distribuidos y han sido obtenidos, entre otros, de los géneros
Aspidosperma, Catarantus, Picralima, Rhazia y Estríennos.
1.2.5 BIOGÉNESIS DE LOS ALCALOIDES INDÓLICOS
Los alcaloides indólicos derivan biogenéticamente del triptófano. La
mayor parte de los alcaloides de este tipo poseen un grupo indol que se
presenta casi de forma invariable como triptamina. En los alcaloides
indólicos complejos, la unidad de triptófano o triptamina se condensa con
un fragmento alicíclico de 9 o 10 átomos de carbono al que Thomas,
Wenkert y otros, atribuyen un origen monoterpenoide (Cordell, 1974). (Fig.
4 y 5). El conjunto sufre consecutivas transformaciones hasta adoptar
alguno de los tres tipos de estructura que establecen la base para su
clasificación (Fig. 4). El descubrimiento de alcaloides indol glucosídicos
como la estrictosidina (Fig. 5), supuso un gran avance en la elucidación de
las rutas biogenéticas que conducen a estos alcaloides. La estrictosidina se
sintetiza fácilmente en el laboratorio a partir de cultivos celulares de
diversas especies de Apocinaceae, que catalizan la condensación de
secologanina y triptamina para dar estrictosidina. (Fig. 5). La
administración de estrictosidina (Veerporte, 1997) marcada isotópicamente
a plantas de Catarantusroseus, produjo una conversión eficaz y especifica
del mismo en alcaloides representativos de los tres principales grupos
estructurales. Por otro lado, la administración de loganina marcada (Fig.
4), monoterpeno natural que se produce junto con los alcaloides indólicos,
a plantas de Vinca rosea produjo alcaloides representativos de los tres
grupos fundamentales de unidad C-9 ó C-10 marcados en las posiciones
previstas. Estos experimentos, sitúan a la secologanina como el último
precursor no nitrogenado de los alcaloides indólicos y determinan con
exactitud la etapa de 'introducción del nitrógeno en el proceso biosintético.
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HO
COOH
COOH
OHHO
OH
23
4
5
6
OH
23
45
6
2
4
5
63
NH
N
H3COOC
NH
OH
HH
H3COOC
CH3
N
N
COOCH3
COOCH3
OH
CH3
H3CO
Mevalonato Geraniol
Esqueleto AspidospermaEsqueleto CorinanteEsqueleto Iboga
Coronaridina Ajamalicina Vindolina
FIGURA 04. Biogénesis de los Alcaloides Tipo Iboga y Aspidosperma
FIGURA 05. Biogénesis de los Alcaloides indol glucosídicos
NH
NH2
O
CHO
H
HOGlu
H3COOC
Triptamina
Secologanina
NH
NH
O
H
H
H3COOC
OGlu
O
H
H
H3COOC
OGlu
HO
Estrictosidina Loganina
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En la Figura 6, se esquematizan las principales rutas biogenéticas
conducentes a los tres principales tipos de esqueletos, donde los alcaloides
estrictosidina, geisoschicina y stemmadenina ocupan un papel relevante.
FIGURA 6. Biogénesis de alcaloides tipo yohimbina, Ajmalicina y Corinanteina.
NH
NH
O
H
H
H3COOC
OGlu
Estrictosidina
HNH
NHCHO
CHO
H
H3COOC
HNH
N
CHO
H
H3COOC
H
NH
N
C
H
H3COOC
H
H
O
NH
N
H
H3COOC
H
OH
NH
N
H
H3COOC
H
OH
H
A B
NH
N
H
H3COOC
HB
OCH3
HNH
N
H
H3COOC
H
OH
NH
N
OH
H3COOC
H H
Yohimbina
NH
N
H
H3COOC
H
OH
A
Ajmalicina
Geisoschizina
Corinanteina
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FIGURA 07. .Biogénesis de los alcaloides tipo Iboga y Aspidosperma
NH
N
H3COOC CH2OH
NH
N
H3COOC CH2OH
NH
N
COOCH3
Stemmadenina
NH
NH
COOCH3
NH
N
COOCH3
NH
N
COOCH3
NH
N
COOCH3
NH
N
COOCH3
Tabersonina
(Tipo Aspidosperma)
Coronaridina
(Tipo Iboga)
Catarantina
(Tipo Iboga)
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Aunque a primera vista los piridocarbazoles tales como la ellipticina
parecen estar fuera de las rutas biogenéticas generales, puede postularse su
biogénesis a partir del alcaloide Stemmadenia (Kansal. 1986) (Fig. 6).
FIGURA. 8 Biogénesis de los alcaloides tipo Piridocarbazol.
1.2.6 FARMACOLOGÍA
El género Tabernaemontana ha sido mencionado en la literatura
etnobotánica por su amplio uso en medicina tradicional. Su uso médico es
común a muchas de sus especies, y está basado en sus propiedades
antimicrobianas, frente a infecciones, heridas, inflamación de ojos, uñas y
garganta; contra la sífilis y el mal de Hansen; antiparasitaria, frente a la
disentería, diarrea y lombrices intestinales; y en el tratamiento de
ulceraciones en la piel. Algunas especies son usadas como analgésicos en
NH
N
H3COOC CH2OH
Stemmadenina
NH
N
H3COOC CH2OH
OX
NH
N
H3COOC CH2OH
NH
N CH3
H2ONH
N CH3
CH2
O
H
-CH2ONH
N CH3
NH
N
CH3
CH3
CH3
NH
N
CH3
CH3
Ellipticina
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 25 Erick Vidal Taricuarima
dolores de cabeza y muelas mientras que otras actúan sobre el sistema
nervioso central. Estas actividades son probablemente debidas a la
presencia de alcaloides, los cuales constituyen los principales metabolitos
secundarios de las plantas. Se ha descrito una amplia miscelánea de
actividades farmacológicas de diversos alcaloides de la Tabernaemontana,
muchos de ellos comunes a otros géneros. Un estudio de la actividad
farmacológica sobre 40 alcaloides obtenidos del género Tabernaemontana
(Palmisano. 1986), indican que sólo la camptothecina, su 9-metoxi
derivado, y la Vincamina, poseen actividad relevante, habiendo sido
evaluada su viabilidad clínica (Palmisano. 1986; Monroe. 1998).
Curiosamente estos alcaloides no son representativos del género, siendo
encontrados en gran variedad de plantas. Así, la camptothecina, aislada
originariamente del tronco del árbol chino Camptotheca acumminata,
llamó la atención por la presencia en su estructura de un anillo indólico
expandido, y por qué inhibía el crecimiento de un amplio rango de tumores
experimentales (carcinosarcoma Walker 256, linfoma L5178Y, tumor
celular de plasma YPC-1, etc...). Posteriores estudios indicaron que la
camptothecina actuaba inhibiendo la enzima topoisomerasa I, la cual está
implicada en varias funciones del ADN, incluyendo la síntesis de
macromoléculas. Además, se encontró que esta enzima tenía una actividad
exaltada en etapas avanzadas del cáncer de colon y otros tumores
malignos. Actualmente, dos derivados solubles en agua de la
camptothecina, son usados clínicamente en combinación con otras drogas
antitumorales como cisplatinas, etoposido y taxol en Francia y Japón,
mientras que otras están en fases avanzadas de evaluación clínica en
Europa.
Se han descrito también propiedades antibióticas en los alcaloides del
género Tabernaemontana, encontrándose la máxima actividad en los
alcaloides bisindólicos del tipo Iboga frente a las bacterias gram-positivas.
(Van Beek, 1984, 1985).
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La ellipticina, cuya síntesis se ha logrado en sólo tres pasos, es un
alcaloide ópticamente inactivo aislado originariamente de las ramas de la
Ochrosiaacumminata (Apocinaceae).Subsecuentemente la ellipticina y
derivados se han aislado de otras especies de los géneros Aspidosperma,
Tabernaemontana y Estriednos. En 1967, un grupo de científicos
australianos mostró que la ellipticina y la 9-metoxiellipticina eran activas
frente a varios tumores. (Sarcoma-180, adenocarcinoma 755 y leucemia L-
1210). Otro de sus derivados, el elliptinium, (N -2-metil -9-
hidroxiellipticina), ha sido probado clínicamente contra diversos cánceres
(mama, nasofaríngeo, mal de Hodgkin, renal, hepático etc.). Los autores
concluyeron que tiene una modesta pero inconfundible actividad y que
necesita ser evaluada en combinación con otras drogas. Así, en un estudio
en el que su uso se combinó con mitomicina, vinblastina y/o etoposido
puso de manifiesto que esta mezcla de agentes es activa y bien tolerada en
pacientes con cáncer de mama avanzado. (Gribble. 1990) La forma en la
que interactúan in vivo los piridocarbazoles, tales como la ellipticina, es
todavía desconocido, aunque la investigación al respecto apunta a que
deben estar involucrados en más de un mecanismo de acción. (Kansal.
1986).
Figura N° 09. Estructura de la Ellipticina
NH
N
CH3
CH3
1
2
3
457
68
9
10 11
Ellipticina
NH
N
CH3
CH3
1
3
457
68
10 11
Ellipticina
HO CH3
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1.2.7 PROPIEDADES FÍSICAS Y QUÍMICAS
Los alcaloides poseen pesos moleculares que varían entre 100 y 900.
Aunque la mayoría de las bases no oxigenadas son líquidas a temperatura
ambiente (nicotina, esparteína, coniína), las que contienen oxígeno en su
fórmula como ocurre en la casi totalidad de las estructura conocidas, son
normalmente sólidos cristalizables, raramente coloreados (berberina).
Casi siempre son capaces de desviar la luz polarizada, las bases
cristalizadas dan puntos de fusión netos, sin descomposición sobre todo
por debajo de 200°C. Por regla general, en su forma libre, los
alcaloides bases son insolubles o muy poco solubles en agua, solubles en
disolventes orgánicos apolares (éter, cloroformo, hexano) o poco polares
(acetato de etilo) y solubles en disolventes orgánicos polares (alcoholes de
elevada graduación).
La basicidad de los alcaloides es muy variable y esta propiedad se
encuentra estrechamente ligada a la disponibilidad del doblete libre de
nitrógeno. Los agrupamientos electro-atrayentes adyacentes al átomo de
nitrógeno disminuyen la basicidad, los grupos electro-donadores la
exaltan: colchicina y piperina son, debido a la existencia del carbonilo de
la amida, prácticamente neutros.
El sistema heterocíclico puede poseer por sí mismo una basicidad variable:
así en la piridina –con seis electrones - y también en la quinoleína e
isoquinoleína, el doblete de nitrógeno está disponible y su basicidad es
manifiesta. En el caso del pirrol o del indol, el doblete del nitrógeno
participa en la aromaticidad por lo que no son básicos (incluso tienen
cierto carácter ácido), también: la pirrolidina, insaturada, es una base
fuerte. La basicidad se encuentra así mismo influida por los impedimentos
estéricos (al menos en moléculas policíclicas complejas). Subrayemos
finalmente que la basicidad es un factor de inestabilidad en estas
moléculas, que al estado de base y en disolución, son sensibles al calor, a
la luz y al oxígeno.
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 28 Erick Vidal Taricuarima
La basicidad de los alcaloides les permite formar sales con ácidos
minerales (clorhidratos, sulfatos, nitratos) u orgánicos (tartratos,
sulfamatos, maleatos). Las sales de alcaloides son generalmente solubles
en agua y en alcoholes diluidos, salvo raras excepciones, son insolubles en
disolventes orgánicos. Las sales cristalizadas se conservan bastante bien y
constituyen habitualmente la forma comercial de estas moléculas.
(Bruneton. 2001).
Figura N° 10. Diferentes Esqueletos Alcaloidales
1.2.8 EXTRACCIÓN DE ALCALOIDES.
La extracción de alcaloides se fundamenta, por regla general, en el hecho
de que se encuentran habitualmente en la planta al estado de sales y en su
basicidad, es decir, en la diferente solubilidad de las bases y de las sales en
agua por una parte y en disolventes orgánicos.
El material vegetal contiene a menudo cantidades apreciables de grasas
(especialmente en las semillas), así como ceras, terpenos, pigmentos y
otras sustancias lipófilas que pueden interferir en el proceso extractivo,
sobre todo induciendo la formación de emulsiones. Para evitar en todo o
en parte estos problemas tecnológicos, se debe proceder a una
N N N N N
H H HH
Pirrol Pirrolidina Piperidina Piridina Indol
NN
NO
O
O
Quinoleina Isoquinoleina Piperina
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 29 Erick Vidal Taricuarima
deslipidación previa de la materia molturada. El éter de petróleo o el
hexano se utilizan frecuentemente en esta operación: excepcionalmente los
alcaloides pueden extraerse con estos disolventes si se emplean en medio
neutro.
CAPITULO II
2. MATERIALES Y MÉTODOS
2.1. Material Botánico. Se utilizó las hojas y tallos de la Tabernaemontana
siphilitica, las cuales fueron recolectadas en el rio Yarapa, Provincia de
Maynas, Distrito de Fernando Lores, al extremo Suroeste de la reserva
Pacaya-Samiria, comunidad Haldar, departamento de Loreto, Fue
identificado por un botánico del Herbarium Amazónico de la UNAP, la
exicata se encuentra depositada y codificada con el N° 025580 J. Ruiz.
2.2. Materiales de Laboratorio y otros.
2.2.1. Materiales de vidrio
Matraz
Vaso de precipitado 500ml.
Vaso de precipitado 50 ml.
Embudo
Envase (para macerar).
Balón (1000, 250, 100 ml).
Balón buchi
Rotavapor y balones boca
esmerilada para rota vapor.
Bomba de vacío
Viales (pequeño para colocar
los extractos).
Pipetas Pasteur
Baquetas
Gradilla
Tubos de ensayo
Probeta (1000,100,
10 y 5 ml)
Agua destilada
Peras de separación
Capilares
Papel filtro
Papel aluminio
Espátulas
Papel higiénico
Nueces para soporte
Soporte universal.
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 31 Erick Vidal Taricuarima
2.2.2. Adsorbentes
Cromatofolios de Oxido de Aluminio 60- F254. Merck.
Cromatofolios de Oxido de Silicio 60 – F254. Merck.
Silicagel y alúmina neutra para cromatografía de columna.
2.2.3. Solventes Orgánicos
Hexano (Hx)
Ciclo Hexano
Cloroformo (CHCl3)
Acetato de etilo (OAcet)
Di etilamina
Metanol (MeOH)
Etanol (EtOH)
2.2.4. Reactivos
Ácido cítrico (C5H8O7)
Hidróxido de sodio (NaOH)
Hidróxido de amonio (NH4OH)
Yoduro de potasio (KI)
Sulfato de sodio anhidro (Na2SO4 anhidro)
Agua destilada (H2O)
Reactivo de Dragendorff. Se disuelve 8.0 g. de Bi (NO3)3. 5 H2O en
20 ml de HNO3 y 27,2 g. de KI en 50 ml de agua destilada se mezclan
las 2 soluciones y se deja reposar por 24 horas. Se decanta la solución
y se enrasa a 100 ml.
2.3. TÉCNICAS INSTRUMENTALES Y EQUIPOS.
2.3.1. RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR (RMN)
Los espectros de RMN 1H y 13C, han sido realizados en
espectrómetros Bruker, Avance 400 MHz y Bruker, AMX 500 MHz.
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 32 Erick Vidal Taricuarima
Los productos se disolvieron en CDCls y como referencia interna se
usó CHCl3.
Los experimentos de correlación homo y heteronuclear 1
H - COSY,
NOESY, HSQC y HMBC fueron realizados en el espectrómetro
Bruker AMX de 500 MHz, usando los programas suministros por la
firma de Bruker.
Los valores de los desplazamientos químicos (6) se expresaron en
ppm en relación con el disolvente empleado como referencia interna y
las constantes de acoplamiento (J) en Hz.
2.3.2. ESPECTROMETRÍA DE MASAS (EM).
Los espectros de masas de baja y alta resolución fueron realizados con
un espectrómetro Vg – Micromass modelo Zab 2F. La temperatura de
la fuente fue de 220°C y la energía de ionización de 70 eV. Para cada
producto se indica los picos más significativos y su intensidad
relativa.
2.3.3. ESPECTROSCOPÍA DE INFRARROJO (IR)
Los espectros de IR se realizaron en un espectrofotómetro Perkin -
Elmer modelo 1600 / FTIR. El producto puro disuelto en CHCls seco
se aplicó en la superficie de una pastilla de NaCl (5mm de espesor),
evaporándose el disolvente a continuación. Los valores de frecuencia
(v) se expresaron en cm-1
2.4. TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS.
2.4.1. CROMATOGRAFÍA DE COLUMNAS (C.C).
Para las cromatografías en columna, se usaron como fase estacionaria
Alúmina básica Actividad I art 1076, alúmina 90 Actividad II y III art
1097 y Silicagel 60 art 1.07734. Como fase móvil se utilizó mezclas
de disolventes de hexano- hexano, hexano - acetato de etilo y acetato
de etilo - metanol en polaridad creciente.
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 33 Erick Vidal Taricuarima
2.4.2. CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA (CCF).
El seguimiento de las columnas cromatográficas se hizo por
cromatografía de capa fina (CCF), utilizando placas comerciales:
Cromatofolios de óxido de aluminio 60 F254 neutro, tipo E (MERCK),
Cromatofolios de óxido de aluminio básico Polygram Alox N/UV254
(NACGEREY-NAGEL), Cromatofolios de gel de sílice F 1500/LS
254 (MERCK) y Cromatofolios de Oxido de Silicio POLIGRAM SIL
G/U V254. MACHEREY - NAGEL. Como eluyente se usaron los
mismos solventes que para las columnas cromatográficas. Para la
visualización de los alcaloides se empleó el reactivo de Dragendorff.
2.4.3. CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA PREPARATIVA (CCFP).
Para la separación de los productos se utilizaron los mismos
Cromatofolios que en cromatografía en capa fina 20 x 20cm, dichas
placas se usaron a escala preparativa, sembrándose en éste caso entre
10 y 25 mg. de producto por placa.
Como fase móvil se usó los mismos disolventes que en cromatografía
de columna y en algunos casos se eluyó con ciclohexano y
dietilamina.
2.5. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
2.5.1. PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS.
Las hojas y tallos de la Tabernaemontana siphilitica colectada, fue
finamente dividida, secada a temperatura de 20°C durante 15 días,
molida y pesada, obteniendo un peso de 1.27 Kg, la que se utilizó para
preparar el extracto.
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 34 Erick Vidal Taricuarima
2.5.2. EXTRACCIÓN DE ALCALOIDES DE LAS HOJAS Y TALLOS
DE LA TABERNAEMONTANA SIPHILITICA.
A 1.27 kg de hojas y tallos de Tabernaemontana siphilitica seca y
molida se adiciono 7 litros de etanol y se dejó en maceración durante
72 horas, se filtró; este proceso se repitió 5 veces hasta agotamiento.
El filtrado se concentra a presión reducida en un rotavapor,
obteniéndose el extracto Etanólico (161.9 g).
El extracto Etanólico (161.9 g) se disolvió con H2SO4 0.5 N, Se
extrajo con CH2Cl2, obteniéndose 2.72 g de extracto alcaloidal acido.
El extracto acuosa se basificó a pH= 9, con solución de NH4OH,
después de extraer con CH2Cl2 repetidas veces y evaporar se obtuvo
552.1 mg de extracto alcaloidal básico y 376 mg de residuo
alcaloidal. El extracto alcaloidal acido se volvió a extraer a pH= 9 y
se obtuvo 60.9 mg. Por cromatografía de capa fina se unieron los
extractos alcaloidales dando un peso de 989 mg.
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 35 Erick Vidal Taricuarima
DIAGRAMA N° 01. EXTRACCIÓN DE ALCALOIDES DE LAS HOJAS Y
TALLOS DE LA TABERNAEMONTANA SIPHILITICA.
Agitar 3 horas
Filtra y Extraer con CH2Cl
2
Solución acuosa se desecha
Basificar a pH 9, con NH4OH Agitar 3 horas Filtra y Extraer con CH2Cl2
Solución acuosa se desecha
Disolver en H2SO4 0.5N Agitar 3 horas Filtra y Extraer con CH2Cl2
Extracto Etanólico
161.9 g
Residuo
Ext. Alcaloidal Acido (2.72 g)
Solución acuosa
Ext. Alcaloidal Básico (552.1 mg)
Residuo 376 mg
Basificar a pH 9, con NH4OH Agitar 3 horas Filtra y Extraer con CH2Cl2
Ext. Alcaloidal básico (60.9 mg)
Hojas y Tallos secos de
Tabernaemontana siphilitica
1.27 Kg
Etanol (Temp. 20°C) Filtrar
Solución acuosa
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2.5.3. FRACCIONAMIENTO CROMATOGRÁFICO DEL EXTRACTO
ALCALOIDAL ÁCIDO DE LAS HOJAS Y TALLOS DE LA
TABERNAEMONTANA SIPHILITICA.
A 2.72 g del extracto alcaloidal acido 1, se fraccionó en una columna
cromatográfica de diámetro interno de 4.5 cm, se utilizó como fase
estacionaria el adsorbente óxido de aluminio actividad II y III (Al2O3),
como Fase móvil se utilizó mezclas de solventes como: hexano
acetato de etilo, metanol de polaridad creciente. Se obtuvo 75
fracciones de 250 ml, cada una de estas fracciones se concentraron en
rotavapor hasta sequedad. El análisis cromatográfico de las fracciones
obtenidas en cromatografía de capa fina y observados a la luz de la
lámpara de U.V. y revelado con el reactivo de Dragendorff nos
permitió agrupar 2 fracciones: A 4-10 (848 mg), B 31-33 (121.6
mg).
2.5.3.1. AISLAMIENTO Y PURIFICACIÓN DE LAS FRACCIONES
ALCALOIDALES OBTENIDAS DEL EXTRACTO ALCALOIDAL
ACIDO DE LAS HOJAS Y TALLOS DE TABERNAEMONTANA
SIPHILITICA.
La fracción A 4-10 (848 mg), se fraccionó en una columna
cromatográfica de diámetro interno de 5 cm, se utilizó como fase
estacionaria el adsorbente óxido de aluminio básica actividad I (Al2O3),
como Fase móvil se utilizó mezclas de solventes como: hexano acetato
de etilo de polaridad creciente. Se obtuvo 74 fracciones de 250 ml, cada
una de estas fracciones se concentraron en rotavapor hasta sequedad. El
análisis cromatográfico de las fracciones obtenidas en cromatografía de
capa fina y observada a la luz de la lámpara de U.V. y revelado con el
reactivo de Dragendorff nos permitió agrupar 3 fracciones: C 13-15
(83.5 mg), D 14-21 (36.5 mg), E 35-42 (121.6 mg), F 59-64 (33.7 mg)
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 37 Erick Vidal Taricuarima
La fracción C 13-15 (83.5 mg) después de realizar los estudios de:
EM, RMN de 1H Y 13C experimentos homo y bidimensionales se
identificó como: CORONARIDINA (codificado como C).
La fracción D 14-21 (36.5 mg), se sembró en 03 cromatofolios de
Óxido de Silicio – 60 a escala preparativa, se eluyó 3 veces en mezcla
de Hexano – Acetato de Etilo (90:10), a la luz de la lámpara del U.V.
Se observa dos alcaloides siendo uno de ellos mayoritario. Después de
separar los alcaloides del adsorbente se obtuvo: PTLC- 1 (17.9 mg),
PTLC- 2 (1.2 mg).
La fracción 14-21, PTLC 1 (17.9 mg), después de realizar los
estudios de: EM, RMN de 1H Y 13C experimentos homo y
bidimensionales se identificó como: CORONARIDINA
HIDROXINDOLENINA (codificado como H).
La fracción E 35-42, (121.6 mg). Se fraccionó en una columna
cromatográfica de diámetro interno de 2 cm, se utilizó como fase
estacionaria el adsorbente oxido de silicio 60 (0.063-0.200 mm)
(SiO2), como Fase móvil se utilizó mezclas de solventes como:
hexano, acetato de etilo de polaridad creciente. Se obtuvo 34
fracciones de 100 ml, cada una de estas fracciones se concentraron en
rotavapor hasta sequedad. El análisis cromatográfico de las fracciones
obtenidas en cromatografía de capa fina y observada a la luz de la
lámpara de U.V. y revelado con el reactivo de Dragendorff nos
permitió agrupar 1 fracción: P 12-19 (9.2 mg).
La fracción P 12-19 (9.2 mg), Después de realizar los estudios de:
EM, RMN de 1H Y 13C experimentos homo y bidimensionales se
identificó como: 19-S-HEYNEANINA (codificado como S).
La fracción F 59-64 (33.7 mg), Se sembró en 03 cromatofolios de
Óxido de Silicio – 60 a escala preparativa, se eluyó 2 veces en mezcla
de Hexano – Acetato de Etilo (50:50), a la luz de la lámpara del U.V.
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 38 Erick Vidal Taricuarima
Se observa un alcaloide mayoritario. Después de separar el alcaloide
del adsorbente se obtuvo: PTLC- 1 (19.3 mg).
La fracción 59-64, PTLC- 1 (19.3 mg), Después de realizar los
estudios de: EM, RMN de 1H Y 13C experimentos homo y
bidimensionales se identificó como: 3-OXOCORONARIDINA.
(Codificado como O).
La fracción B 31-33 (121.6 mg). Se fraccionó en una columna
cromatografica de diámetro interno de 2 cm, se utilizó como fase
estacionaria el adsorbente oxido de aluminio actividad II y III
(Al2O3), como Fase móvil se utilizó mezclas de solventes como:
hexano, acetato de etilo de polaridad creciente. Se obtuvo 35
fracciones de 100 ml, cada una de estas fracciones se concentraron en
rotavapor hasta sequedad. El análisis cromatográfico de las fracciones
obtenidas en cromatografía de capa fina y observada a la luz de la
lámpara de U.V. y revelado con el reactivo de Dragendorff nos
permitió agrupar 2 fracciones: G 12-19 (9.5mg); H 31-35 (56.1 mg).
2.5.4. FRACCIONAMIENTO CROMATOGRÁFICO DEL EXTRACTO
ALCALOIDAL BASICO, Y RESIDUO DE HOJAS Y TALLOS
DE TABERNAEMONTANA SIPHILITICA.
A 989 mg del extracto alcaloidal residuo 1, se fraccionó en una
columna Flash de diámetro interno de 9 cm, se utilizó como fase
estacionaria el adsorbente oxido de silicio 60 (0.063-0.200 mm)
(SiO2), como Fase móvil se utilizó mezclas de solventes como:
hexano, acetato de etilo, metanol de polaridad creciente. Se obtuvo 53
fracciones de 1L, cada una de estas fracciones se concentraron en
rotavapor hasta sequedad. El análisis cromatográfico de las fracciones
obtenidas en cromatografía de capa fina y observados a la luz de la
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 39 Erick Vidal Taricuarima
lámpara de U.V. y revelado con el reactivo de Dragendorff nos
permitió agrupar 2 fracciones: G 2- 4 (34.7 mg), H 5-12 (66 mg),
2.5.4.1. AISLAMIENTO Y PURIFICACIÓN DE LAS FRACCIONES
ALCALOIDALES OBTENIDAS DEL EXTRACTO ALCALOIDAL
BÁSICO Y RESIDUO DE LAS HOJAS Y TALLOS DE
TABERNAEMONTANA SIPHILITICA.
La fracción G 2 - 4 (34.7 mg), se fraccionó en una columna
Cromatográfica de diámetro interno de 1.5 cm, se utilizó como fase
estacionaria el adsorbente oxido de aluminio actividad II y III
(Al2O3), como Fase móvil se utilizó mezclas de solventes como:
hexano, acetato de etilo de polaridad creciente. Se obtuvo 45
fracciones de 100 ml, cada una de estas fracciones se concentraron en
rotavapor hasta sequedad. El análisis Cromatográfico de las fracciones
obtenidas en cromatografía de capa fina y observados a la luz de la
lámpara de U.V. y revelado con el reactivo de Dragendorff nos
permitió agrupar 2 fracciones: I 8-9 (12.2 mg), J 14-19 (0.2 mg).
no se trabajó por ser una mezcla compleja y poca cantidad
La fracción I 8-9 (12.2 mg, Después de realizar los estudios de: EM,
RMN de 1H Y 13C experimentos homo y bidimensionales se
identificó como: 19- S HEYNEANINA. (Codificado como S).
La fracción H 5-12 (66 mg). Se fraccionó en una columna
cromatográfica de diámetro interno de 2 cm, se utilizó como fase
estacionaria el adsorbente óxido de silicio 60 (0.063-0.200 mm)
(SiO2), como Fase móvil se utilizó mezclas de solventes como:
hexano, acetato de etilo de polaridad creciente. Se obtuvo 112
fracciones de 100 ml, cada una de estas fracciones se concentraron en
rotavapor hasta sequedad. El análisis Cromatográfico de las fracciones
obtenidas en cromatografía de capa fina y observados a la luz de la
lámpara de U.V. y revelado con el reactivo de Dragendorff nos
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 40 Erick Vidal Taricuarima
permitió agrupar 3 fracciones: I 36-38 (1.3 mg), J 63-65 (21.6 mg),
La fracción 36-38 no se trabajó por ser una mezcla compleja y poca
cantidad.
La fracción L 63-65 (21.6 mg), Se purificó en una micro columna, se
utilizó como fase estacionaria el adsorbente oxido de Aluminio
actividad II y III (Al2O3), como Fase móvil se utilizó mezclas de
solventes como: hexano, acetato de etilo (90:10). Se obtuvo 13
fracciones. El análisis Cromatográfico de las fracciones obtenidas en
cromatografía de capa fina y observados a la luz de la lámpara de
U.V. y revelado con el reactivo de Dragendorff nos permitió agrupar
2 fracciones: M 5-7 (2.3 mg), N 20-26 (1.7 mg).
2.5.5 DATOS FISICOS Y ESPECTROSCÓPICOS DE LOS ALCALOIDES
AISLADOS
De los extractos alcaloidales se aislaron cuatro alcaloides:
Coronaridina, 19 S- Heyneanina, Coronaridina Hidroxindolenina,
3-Oxocoronaridina.
La estructura química de estos alcaloides se determinaron mediante
datos físicos: punto de fusión, y por sus datos espectroscópicos: U.V,
E.M, I.R, RMN, 1H y 13C.
La estructura de los alcaloides se determinaron haciendo uso de las
correlaciones Homo y Hetero nucleares: HSQC y HMBC; y las
correlaciones escalares y espaciales COSY y NOESY.
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 41 Erick Vidal Taricuarima
2.5.5.1. CORONARIDINA.
Sólido amorfo, 25
Dα - 31.5º(c,
0.314g/100mL, CHCl3).
IR (CHCl3) max. cm-1
: 3366, 2930, 1676, 1238, 751.
EM de baja resolución, m/z (int. relativa. %): 338 M+
(100), 323
(40), 309 (8), 279 (11), 253 (14), 214 (36), 215 (11), 208 (19), 207
(11), 195 (11), 194 (9),180 (12), 168 (17), 167 (19), 154 (35), 148
(12), 136 (94), 135 (26), 130 (19), 124 (44), 122 (32), 108 (10).
EM de alta resolución, m/z: [M]+ 338.2004 calculado para un
C21H26N2O2, 338.2053.
RMN de 1H (500 MHz, CD Cl3): δH8.04 ( 1H,sa, N-H), 2.97 (1H,m,
H-3R), 2.85( 1H,m, H-3S), 3.44 (1H, m, H-5R), 3.24 (1H, m, H-5S),
3.20 (1H, m, H-6R), 3.03 (1H,m, H-6S), 7.51 (1H,d, J= 7.6 Hz,H-
9),7.12 (1H,ddd, J=1.2, 7.7, 8.9 Hz, H-10), 7.18 (1H, DDD, J=1.2,
7.1,8.1 Hz, H-11),7.27(1H, da, J=7.8Hz, H-12), 1.96 (1H,m, H-14),
1.63 (1H,m, H-15R), 1.20 (1H,m, H-15S), 1.78 (1H, m, H-17R), 2.64
(1H, da, H-17S), 0.95 (1H,t, J=7.4, H-18), 1.49 (2H,m, H-19), 1.38
(1H,m, H-20), 3.62 (1H,sa, H=21), 3.75 (3H,S, COOCH3).
RMN13
C (400 MHz, CDCl3) :δC 136.0 (s, C-2), 52.1 (t, C-3), 53.4 (t,
C-5), 21.0 (t, C-6), 110.7 (s, -7), 127.2 (s, C-8), 119.0 (d, C-9), 119.6
(d, C-10), 122.7 (d, C-11), 110.8 (d, C-12), 136.0 (s, C-13), 27.4 (d,
C-14), 32.1 (t, C-15), 54.9 (s, C-16), 36.5 (t, C-17), 11.9 (q, C-18),
26.8 (d, C-19), 39.2 (d, C-20), 57.5 (d, C-21), 52.6(q, COOCH3),
176.2 (s, COOCH3).
N
N
H
COOCH3
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 42 Erick Vidal Taricuarima
2.5.5.2. 19 S- HEYNEANINA
Alcaloide aislado como sólido amorfo
(36.5mg): 25
Dα -25º(c,0.18 g/100mL,
CHCl3).
IR (CHCl3) máx. cm-1
: 3259, 1728,1658, 1462,1372, 1240,
1163,1068, 750.
EM de baja resolución, m/z (int. relativa. %): 354(100), 353 (20),
340(15), 339 (63), 337 (31), 336 (51), 310(16), 309(18), 277 (6),
249(6), 228(8), 224(10), 214(38),206(10),195(13), 180(13),
99(4),97(11), 96(20),94 (17) ,85(48), 83 (68), 81(11), 71(14),
69(20), 67(15),57(22), 55(23).
EM de alta resolución, m/z: [M]+ 354.1945 calculado para un
C21H26N2O3, 3541943.
RMN de 1H (500 MHz, CD Cl3) :δH7.82 (1H, sa, N-H), 3.03 (1H,
m, H-3R), 2.83(1H, d, J=9.2 Hz, H-3S), 3.50 (1H, m, H-5R), 3.17
(1H, m, H-5S), 3,19 (2H, m, H-6R), 7.71 (1H, d, J = 8.1 Hz, H-9),
7,11 (1H, ddd, J =1.0, 7.9, 8.8 Hz, H-10), 7.15 (1H, ddd, J= 1.2, 7.2,
8.1, Hz, H-11), 7.27 (1H, d, J=8.0, Hz, H-12), 2.05 (1H, sa H-14),
1,92 (1H, m, H-15R), 1.56 (1H, m, H-15S), 2.01 (1H, da, J=13.3 H-
17R), 2.61 (1H, dt, J=2,0, 9,5, H-17S), 1.10 (1H, d, J = 6.4 Hz, H-
18), 4.18 (1H, q, J = 5.6 Hz, H-19), 1.49 (1H, m, H-20), 3.90 (1H,
sa, H-21), 3.74 (3H, s, COOCH3).
RMN13
C (400 MHz, CD Cl3) :δC135.6 (s, C-2), 51.3 (t, C-3), 52.4
(t, C-5), 21.4 (t, C-6), 109.9 (s, -7), 128.5 (s, C-8), 118.5 (d, C-9),
119.6 (d, C-10), 122.4 (d, C-11), 110.5 (d, C-12), 135.5 (s, C-13),
26.8 (d, C-14), 22.9 (t, C-15), 54.0 (s, C-16), 37.0 (t, C-17), 20.5 (q,
C-18), 71.3 (d, C-19), 39.6 (d, C-20), 59.8 (d, C-21), 53.0 (q,
COOCH3), 174.8 (s, COOCH3).
N
N
H
COOCH3
OH
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 43 Erick Vidal Taricuarima
2.5.5.3. CORONARIDINA HIDROXINDOLENINA
Alcaloide aislado como sólido amorfo
(17.9mg), 25
Dα -8º(c, 1.04 g/100mL,
CHCl3).
IR (CHCl3) máx. cm-1
: 3473, 1732,
1660, 1461, 1236, 1144, 1087, 982,754.
EM de baja resolución, m/z (int. Rel. %): 354(100), 334 (17), 338
(17), 337(52), 325 (6), 295 (10),230 (7), 223 (4), 208 (4), 188(16),
160 (13), 136 (9), 122 (14), 108 (10), 96(8).
EM de alta resolución, m/z: [M]+ 354.1938 calculado para un
C21H26N2O3, 3541943.
RMN de 1H (500 MHz, CD Cl3):δH 2.71 (2H,sa, H-3), 3.45 (1H, m,
H-5S¨), 2.91(1H, d, J=12.5Hz-H-5R), 1.93 (1H, da, J=14.4 Hz, H-
6R),1.77 (1H, m, H-6S), 7.47 (1H, d, J = 7.6 Hz, H-9), 7,36 (1H, d,
J = 7.3 Hz, H-10), 7.32 (1H, d,7.3 Hz, H-11), 7.24 (1H, d,7.6Hz, H-
12), 1.89 (1H, sa, H-14), 1.80 (1H, m, H-15R), 1.12 (1H, m, H-15S),
2.69 (1H, m, H-17S), 2.44 (1H, da,J=12.7 Hz17R), 0.83 (3H, t, J =
7.2 Hz, H-18), 1.42 (2H, m, H-19), 1.37 (1H, m, H-20), 3.76 (1H, sa
H-21), 3.70 (3H, s,COOCH3).
RMN13
C (400 MHz, CDCl3) :δC189.3 (s, C-2), 48.8 (t, C-3), 49.1 (t,
C-5), 33.9 (t, C-6), 88.4 (s, -7), 142.7 (s, C-8), 120.9 (d, C-9),
121.5(d, C-10), 129.2 (d, C-11), 126.8 (d, C-12), 151.4 (s, C-13),
27.1 (d, C-14), 32.1 (t, C-15), 58.8 (s, C-16), 34.8 (t, C-17), 11.5 (q,
C-18), 26.6 (d, C-19), 37.6 (d, C-20), 58.5 (d, C-21), 53.2 (q,
COOCH3), 173.8 (s, COOCH3).
N
N
COOCH3
HO
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 44 Erick Vidal Taricuarima
2.5.5.4. 3-OXOCORONARIDINA.
Alcaloide aislado como sólido amorfo
(9.0 mg), 25
Dα -12º(c, 0.38 g/100mL,
CHCl3).
EM de baja resolución, m/z (int. rel. %): 352 M+
(100), 351 ( 23),
350(41), 293 (8), 254 (9), 229 (23), 228 (26), 216(16), 214 (20), 197
(42), 195 (20), 180 (12), 168 (23), 150(10),143 (14), 138 (17), 124
(79), 84 (10).
EM de alta resolución, m/z: [M]+ 352.1780 calculado para un
C21H24N2O3, 3541943.
RMN de 1H (500 MHz, CD Cl3):δH 7.96 (1H,sa, N-H),4.50 (1H,m,
H-5R), 3.22 (1H, m, H-5S¨), 3.22 (2H, m H-6), 7.48 (1H, d, J = 7.4
Hz, H-9), 7,11 (1H, t, J = 7.9 Hz, H-10), 7.15 (1H, t,7.9 Hz, H-11),
7.24 (1H, d, 8.0 Hz, H-12), 2.63 (1H, m, H-14), 1.41 (1H, m, H-
15R), 1.99 (1H, m, H-15S), 2.63 (1H, d, J=1.6, 15.0H-17S), 2.33
(1H, dt,J=2.6, 13.0, Hz, H-17R), 0.99 (3H, t, J = 7.4 Hz, H-18),
1.53(1H, m, H-19 A), 1.43 (1H, m, H-19B), 1.75 ( 1H,m, H-20),
4.55 (1H, s H-21), 3.65 (3H, s,COOCH3).
RMN13
C (400 MHz, CDCl3) :δC136.1(s, C-2) 173.4 (s, C-3), 42.7
(t, C5), 21.1 (t, C-6), 109.9 (s, -7), 128.3 (s, C-8), 118.4 (d, C-9),
119.6(d, C-10), 122.4 (d, C-11), 110.6 (d, C-12), 134.2 (s, C-13),
38.2 (d, C-14), 31.0 (t, C-15), 55.9 (s, C-16), 35.9 (t, C-17), 11.4 (q,
C-18), 27.6 (d, C-19), 35.5 (d, C-20), 56.1 (d, C-21), 53.0 (q,
COOCH3), 176.1 (s, COOCH3).
N
N
H
COOCH3
O
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 45 Erick Vidal Taricuarima
DIAGRAMA N° 02. : FRACCIONAMIENTO, AISLAMIENTO Y PURIFICACIÓN DE
LAS HOJAS Y TALLOS DE LA TABERNAEMONTANA
SIPHILITICA DEL EXTRACTO ALCALOIDAL ACIDO
EXTRACTO
ALCALOIDAL ÁCIDO
2.72gr
C.C. Al2O2 Actividad II y III Hx/OAcet/MeoH
4-10 848 mg
31-33 121.6 mg
C.C. Sílica gel Hx/OAcet/MeoH
14-21 36.5 mg
35-42 121.6 mg
59-64 33.7mg
13-15 83.5 mg
C
31-35 56.1
31-35 56.1 mg
C.C. Sílica gel Hx/OAcet/MeoH
LEYENDA
O: 3-OXO-CORONARIDINA
C: CORONARIDINA
H: CORONARIDINA HIDROXINDOLENINA
S: 19 S- HEYNEANINA
PTLC-2 1.2 mg
PTLC-1 19.3 mg
O
PTLC-1 17.9 mg
H
12-19 9.5 mg
S
C. C. P. Sílica gel Hx/OAcet
C.C. silica gel Hx/OAcet /MeoH
C. C. P. Sílica gel Hx/OAcet
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DIAGRAMA N° 03: FRACCIONAMIENTO, AISLAMIENTO Y PURIFICACIÓN DE
LAS HOJAS Y TALLOS DE LA TABERNAEMONTANA SIPHILITICA
DEL EXT. ALCALOIDAL. BÁSICO Y RESIDUO.
C.C. Al2O2 Actividad II y III Hx/OAC
C.C. Sílicagel 60(0.063-0.200mm) Hx/oAcet
C.C. Al2O2 Actividad II y III Hx/OAC
EXTRACTO ALCALOIDAL BÁSICO Y RESIDUO
989 mg
2-4 34.7 mg
5-12 66 mg
14-19 0.2 mg
8-9 12.2 mg
S
36 -38 1.3 mg
5-7 2.3 mg
20-26 1.7 mg
63-65 21. 6 mg
C.C. Sílicagel 60(0.063-0.200mm) Hx/oAcet/MeoH
CAPITULO III
3.0. DISCUSIONES Y RESULTADOS
3.1. RESULTADOS
Del extracto alcaloidal básico (1.27g), se aislaron los alcaloides: Coronaridina,
19 S- Heyneanina, Coronaridina Hidroxindolenina, 3-Oxocoronaridina.
La estructura química de los alcaloides se determinaron mediante la
comparación, de los datos espectroscópicos como: 1H, EM, IR, RMN, RMN
13C,
Y por comparaciones con los datos publicados en la biografía y haciendo uso de
las correlaciones homo nucleares (protón-protón) COSY Y NOESY y
Heteronucleares: (Carbono-protón o protón-carbono).
3.2. DETERMINACIÓN ESTRUCTURAL DE LOS ALCALOIDES AISLADOS
3.2.1. ALCALOIDE CORONARIDINA
Base aislada como sólido amorfo. En el espectro de IR se observan absorciones a
3366 cm-1
que corresponden a un N-H ; 2930 (C-H); 1676 y 1238 (COOCH3);
751 (C-H, anillo aromático).
El espectro de masas dio unión molecular a m/z 338 (100%), y fragmentos a: m/z
323 que representa la pérdida de un grupo CH3, 279, perdida del grupo éster
(COOCH3), y otros fragmentos a m/z: 253 (14%), 214 (36%), 195 (11%), 154
(35%) 136 (95%) 124 (44%) y 122(32%) típicos de un alcaloide tipo iboga.
(Teris A. 1984, T.R. Govindachari. 1965)
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 48 Erick Vidal Taricuarima
Figura 11. Fraccionamiento de masas de Coronaridina.
N
N
H
COOCH3
m/e 338 (100%)
N
N
H COOCH3
CH2+
m/e 253 (14%)
N
CH2
N
CH2
+ +
m/e 136 (95%) m/e 124 (44%)
N
CH2
+
m/e 122 (33%)
NCOOCH3
H
CH2
CH2
+N
H
CH2
N
H
+
+
m/e 214 (36%)m/e 130 (19%)
m/e 154 (35%)
+
+
M+ -1H m/e 337 (28%)
M+ -CH3 m/e 323 (40%)
M+ -C2H5 m/e 309 (8%)
M+ -CO2CH3 m/e 279 (11%)
c
ab
ca
b
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 49 Erick Vidal Taricuarima
En el espectro de 1H y
13C se observan las señales a: 0.95 (1H, t, J=7.4 Hz) 11.9 q,
3.75 (3H, s) ,52.6q y 176.2 s, que corresponde a ún grupo etilo y un grupo
metoxicarbonilo ubicado en el C-16. La señala : 8.04 ppm (1H,sa) se asignó a un
N-H aromático. Las señales de los protones δ: 7.51 (1H,d, J= 7.6 Hz,H-9),7.12
(1H,ddd, J=1.2, 7.7, 8.9 Hz, H-10), 7.18 (1H, ddd, J=1.2, 7.1,8.1 Hz, H-11),7.27(1H,
da, J=7.8Hz, H-12) y 13
c a δ:119.0 d,119.6 d, 122.7 d, 110.8 d, indica la presencia
en la molécula de un anillo aromático sin sustituir
La identidad de nuestro compuesto quedó establecida principalmente por
comparación de sus datos de 13
C-RMN con los publicados para Coronaridina
(Perera. 1983, Hans Achenbach. 1994, Perveen. 1988).
Figura N° 12. Alcaloide Coronaridina Publicado
Figura N° 13. Alcaloide Coronaridina Aislado en el LIPNAA-UNAP
N
N
H
COOCH3
23
56
789
10
1112
13
14 15
16
1718
1920
128.8119.0
121.8
110.3
135.6 136.5
110.3
22.253.1
51.5
55.1
36.7
52.4175.9
27.2
32.0
38.9
26.6
11.6
118.3
57.2
CORONARIDINA "Publicado"
21
N
N
H
COOCH3
23
56
789
10
1112
13
14 15
16
1718
1920
127.2119.6
122.7
110.7
136.0 136.0
110.8
21.053.4
52.1
54.9
36.5
52.6176.2
27.4
32.1
39.2
26.8
11.9
119.0
57.5
21
CORONARIDINA "Aislado en el LIPNAA"
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 50 Erick Vidal Taricuarima
3.2.2. ALCOLOIDE 19 S - HEYNEANINA
Alcaloide aislado como resina, en el espectro de IR se observan absorciones
a 3252 y 1728 cm-1
que corresponden a un N-H y a un éster
respectivamente, su fórmula molecular C21H26N2O3, se confirmó por
espectrometría de masa de baja y alta resolución.
El espectro de masas registró el ión molecular am/z 354 (100%), así como
también fragmentos a m/z 353 (20%)[M+-1H],339 (63%) [M
+ -CH3], 337
(31%) [M+
- OH], 309 (18 %) [M+ - C2H5OH], 295 (7%) [M
+ - CO2CH3] y
otros fragmentos característicos de un alcaloide del tipo iboga.
Los espectros de RMN dieron señales a δ 3.75 (3H, s) y 53.0 q y 174.8 s
para un grupo metoxicarbonilo, el grupo metilo a 1.10 (3H, d, J = 6.4 Hz) y
20.5q, en el experimento COSY mostró acoplamiento escalar con otra señal
a d 4.16 (1H,q) y 71.3d, asignable a un alcohol secundario que indica la
funcionalización del grupo etilo esta señal se asignó al H-19.
La señal a δ: 1.49 (1H, m), 39.9d, se asignó al H-20 por su conectividad
espacial con los protones H-18, H-17S en el experimento NOESY, el protón
H-21 por su desplazamientos químicos a δ3.90 (1H, sa), 59.8d, y su
correlación espacial con los protones H-5S, H-6S, H-19, en el experimento
NOESY.
Las demás señales se asignaron por las correlaciones existentes de 1H,
13C,
los experimentos HSQC, COSY y NOESY y por comparación con los datos
espectroscópicos publicados en la bibliografía química. (Christiane Kan.
1996; Kamesh. 1980).
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 51 Erick Vidal Taricuarima
Figura N° 14. Alcaloide Heyneanina Publicado
Figura N° 15. Alcaloide Heyneanina Aislado en el
LIPNAA-UNAP
N
N
H
COOCH3
23
56
789
10
1112
13
14 15
16
1718
1920
129.7120.4
123.3
110.9
136.6 136.9
111.5
22.153.1
52.2
37.7
53.4176.2
27.5
23.7
40.6
72.1
20.9
119.4
60.5
19s-HEYNEANINA "Publicado"
OH
21
N
N
H
COOCH3
23
56
789
10
1112
13
14 15
16
1718
1920
128.5119.6
122.4
110.9
135.5 135.6
110.5
21.452.4
51.3
54.0
37.0
53.0174.8
26.8
22.9
39.6
71.3
20.5
118.5
59.8
OH
21
19s-HEYNEANINA "Aislado en el LIPNAA"
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 52 Erick Vidal Taricuarima
Tabla 2.Datos de RMN de 1H,
13C, HMQC, COSY, NOESY DE 19S- HEYNEANINA
(JH-H en Hz) (1) HSQC COSY NOESY 7.82 sa (N-H) H-12, H-17R 136.5 s (C-2)
H-3R 2.83m 51.3 t H-3S, H-15R H-14, H-15S
H-3S 3.03 m 51.3 t H-14 H-17R, H-6R
H-5S 3.17 m 52.4 t H-5R, H.6S H-21
H-5R 3.50 (m) 52.4 t H-5S, H-6R
H-6R 3.19 (m) 21.4 t H-5R, H-6S
H-6S 3.77 m 21.4 t H-5S, H-6R H-9
109.9 s (C-7)
124.5 s (C -8)
H- 9 7.71 d (8.1) 118.5 d H-6
H-10 7.11ddd (1.0, 7.9, 8.8) 119.6 d
H-11 7.15ddd (1.2, 7.2, 9.1 ) 122.4 d
H-12 7.27 d (8.0) 110.5 d
135.5 s (C-13)
H-14 2.05 (sa) 26.8 d H-3R, H-3S, H-15R H-15R, H-3R, H-3S, H-17S
H-15S 1.92 m 22.9 t H-15R, H-20 H-18, H-3R
H-15R 1.56 m 22.9 t H-3R, H-14, H-15S H-18, H-17S,
54.0 s (C-16)
H-17S 2.61dt (2.0, 9.5) 37.0 t H-17R H-15S, H-20
H-17R 2.01 da (13.3) 37.0 t H-17S H-3S, N-H H-18 1.10d (6.4) 20.5 q H-19 H-20, H-15R, H-15S
H-19 4.18 q (5.6) 71.3 t H-18, H-20 H-18, H-19, H-21
H-20 1.49(m) 39.6 d H-19 H-18, H-17S,H-19
H-21 3.90 (ss) 59.8 d H-5S, H-6S, H.19,H-20
COOCH3 3.74 (s) 53.0 q
COOCH3 174.8 s
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 53 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 16: NOESY del Alcaloide 19S-Heyneanina
3.2.3 ALCOLOIDE CORONARIDINA HIDROXINDOLENINA.
Alcaloide aislado como sólido amorfo, en el espectro de IR se observan
bandas características a 2956- 2859 cm-1
(vibraciones C-H ), 1731 cm-1
de
un grupo éster, 1660-1461 cm -1
(C=C extensión del anillo aromático),
754 cm-1
flexión del anillo del benceno. En el espectro de IR también se
observa la banda a 3437 cm-1
y el fragmento a m/e 337 (M+-17) que
confirma la presencia de un grupo hidroxilo en la molécula.
El espectro de masa mostró el ión molecular a m/z 354 (100%) M+, y el
pico característico a m/z 337 (65%) [M+ -OH], típico de una
Hidroxindolenina, 295 (10%) [M+- CO2Me], y otros fragmentos a m/z:
230 (7%), 188(16%), 173 (2%), 162 (4%) y 122 (14%). (T. R.
Govindachari. 1965) (figura 2). La ausencia de la señal para el N-H
aromático y las señales para carbono a 88.4 s y189.3 s, y la absorción a
3437 cm-1en el espectro de IR, confirmaron la estructura 7-
hidroxindolenina para el compuesto.
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Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 54 Erick Vidal Taricuarima
Figura 17: Fraccionamiento de masa de Coronaridina Hidroxindolenina
En el espectro de 1H, se observan señales comprendidas entre 7.24 -7.47 ppm que
corresponden a un grupo de señales en la zona aromática y que confirman que el
anillo indólico de la molécula no está sustituido. La presencia de la señal a δ: 3.70
(3H,s), 53.2 q y 173.8 s, indican la presencia de un grupo éster. Los protones
metilénicos, H-3, H-5, H-6, H-15, H-17, H-19, se asignaron teniendo en cuenta los
desplazamientos químicos, constantes de acoplamiento, las conectividades a un
enlace en el experimento HSQC, y por comparación con los datos publicados en la
bibliografía química (Hans. 1994; Christiane Kan. 1981).
N
N
COOCH3
HO M+ -1H m/e 353 (5%)
M+ -CH3 m/e 339 (17%)
M+ -OH m/e 337 (65%)
M+ -C2H5 m/e 325 (6%)
M+ -CO2CH3 m/e 295 (10%)
m/e 354 (100%)
N
CH2
+
N
H
OH
COOCH3
+
m/e 232 (7%) m/e 122 (14%)
N
OH
m/e 188 (16%)
N
CH2
N
OH
m/e 173 (2%)
H
+
H3COOC
m/e 162 (4%)
NN
H
H
OH
+
NN
H
H
OH
m/e 188 (16%)
m/e 160 (13%)
a
b
a b
+
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 55 Erick Vidal Taricuarima
Figura N°18. Alcaloide Coronaridina Hidroxindolenina Publicado
Figura N° 19. Alcaloide Coronaridina Hidroxindolenina
Aislado en el LIPNAA-UNAP
3.2.4. ALCALOIDE 3-OXOCORONARIDINA
Alcaloide aislado como sólido amorfo. El espectro de masas de baja
resolución muestra un ion molecular a m/z 352 (100%), Calculado para un
C21 H24 N2 O3, 352.1787, así como fragmentos a m/z: 351 [M+- H] 293 [M
+-
CO2 CH3], 229 (23), 228 (26), 227 (9), 216 (16), 214 (20), 197(42),195 (20),
180 (30), 168(23), 151 (31), 143 (14), 124 (79).
N
N
COOCH3
23
56
789
10
1112
13
14 15
16
1718
1920
142.4121.3
129.1
88.1
151.0 189.1
126.6
33.6
48.9
48.5
58.5
34.7
53.1173.5
26.8
31.8
37.4
26.3
11.4
120.6
58.2
HO
21
CORONARIDINA HIDROXINDOLENINA "Publicado"
N
N
COOCH3
23
56
7
89
10
1112
13
14 15
16
1718
1920
142.7121.5
129.2
88.4
151.4 189.3
126.8
33.9
49.1
48.8
58.8
34.8
53.2173.8
27.1
32.1
37.6
26.6
11.5
120.9
58.5
HO
21
CORONARIDINA HIDROXINDOLENINA "Aislado en el LIPNAA"
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 56 Erick Vidal Taricuarima
En el espectro de RMN 13
C se observan 21 señales correspondientes a 21
carbonos de los cuales siete son metilenos, cinco metinos, dos metilos y
siete carbonos cuaternarios.
En el espectro de 1H, se observan señales muy parecidas al espectro de
Coronaridina, a excepción del protón H-3 que se encuentra sustituido por un
oxígeno, en el espectro de masas se observa 14 unidades más con respecto
al ión molecular de la Coronaridina, la señal a δ: 4.50 (1H,m) fue asignado al
H-5, adyacente a un nitrógeno, las señal a δ: 7.96 (1H, sa) se asignó a un N-
H aromático, la señal singlete a δ 3.65 (3H) y la señal triplete a δ:0.99 (3H)
fueron a signadas al metoxicarbonilo . (Hans. 1994; Kamesh. 1980) En
él experimento NOESY se observa conectividades espaciales entre el protón
a δ: 2.63dd (1,6, 15.0) con las señales a δ: 1.99 (m) y 1.75 (m), por lo
que esta señal se asignó al H-17 S y al protón a δ: 2.33 dt (2.6, 13.0) como
17 R. Del mismo modo la estereoquímica del protón a δ:1.99 (m) por su
conectividad en el experimento NOESY , con los protones a δ: 2.63dd (1,6,
15.0), 0.99 t (7.4), 1.75 (m) lo cual implica una configuración S para el H-
15 y una configuración 15 R para el protón a δ: 1.41 (m). (Tabla 03). La
señal δ: 4.55 (s) quedó establecida como H-21, por su conectividad con el
experimento HSQC con el carbono a 58.5 ppm y su conectividad en el
experimento NOESY con los protones H-5S, y H-19A. Las demás señales
fueron asignadas teniendo en cuenta las correlaciones escalares y espaciales
de los 1H y 13C y por comparación con los datos publicados en la
bibliografía. (Sarath. 1980).
La comparación de las actividades ópticas en este tipo de compuestos se
hace necesaria, toda vez que se han encontrado en la naturaleza compuestos
con la configuración enantiomérica tales como la catharantina (K. Bláha.
1972).
Los valores del de los cuatro compuestos aislados son similares a los
publicados en la bibliografía.
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 57 Erick Vidal Taricuarima
Figura N° 20 Alcaloide 3- Oxo Coronaridina Publicado
Figura N° 21 Alcaloide 3- Oxo Coronaridina Aislado en el LIPNAA-UNAP
N
N
H
COOCH3
2 3
56
789
10
1112
13
14 15
16
1718
1920
127.6119.3
122.1
109.1
133.8
136.5110.4
20.942.6
172.8
55.4
35.6
52.9175.6
35.3
30.8
38.0
27.5
11.2
118.1
55.9
3-OXOCORONARIDINA "Publicado"
O
21
N
N
H
COOCH3
2 3
56
789
10
1112
13
14 15
16
1718
1920
122.8119.6
122.4
109.9
134.2
136.1110.6
21.442.7
173.4
55.9
35.9
53.0176.1
35.5
31.0
38.2
27.6
11.4
118.4
56.1
O
21
3-OXOCORONARIDINA "Aislado en el LIPNAA"
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 58 Erick Vidal Taricuarima
Tabla 3. Datos de RMN de1H, 13C, HMQC, COSY, NOESY DE 3- OXO- CORONARIDINA
(JH-H en Hz) (1) HSQC COSY NOESY N-H 7.96 (sa) H-17R, H-12 136.5 (C-2)
173.4 s(C-3)
H-5R 4.50 (m) 42.7 t H-5S, H-6R
H-5S 3.22 (m) 42.7 t H-5R, H- 6S H-21
H-6R 3.22 (m) 21.1 t H-5R, H-6S
H-6S 3.22 (m) 21.1t H-5S, H-6R H-9
109.9 s (C-7)
128.3 s (C -8)
H- 9 7.48 d (7.4) 118.4 d H-6S
H-10 7.11 t (7.9) 119.6 d
H-11 7.15 t (7.9) 122.4 d
H-12 7,24 d (8.0) 110.6 d
134.2 s (C-13)
H-14 2.63 (m) 38.2 d H-15R, H-15S H-15R, H-15S
H-15S 1.99 (m) 31.0 t H-14, H-15R, H-20 H-18, H-17S, H-20
H-15R 1.41 (m) 31.0 t H-15S, H-14 H-18, H-19B
55.9 s (C-16) H-17 S 2.63dd (1,6, 15.0) 35.9 t H-17R H-20, H-15S H-17R 2.33 dt (2.6, 13.0) 35.9 t H-17S H-14 H-18 0.99 t (7.4) 11.4 q H-19A, H-19B H-15S, H-19A, H-19B, H-20 H-19A 1.53 (m) 27.6 t H-18 H-21 H-19B 1.43 (m) 27.6 t H-18 H-15R, H-20 1.75 (m) 35.5 d H-15S H-15S- H-17S, H-18 H-21 4.55 (s) 56.1 d H-5S, H-6S, H.19A COOCH3 3.65 (s) 53.0 q COOCH3 176.1 s
Figura Nº 22: NOESY del Alcaloide 3-Oxo-coronaridina
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 59 Erick Vidal Taricuarima
3.3. CONCLUSIONES.
1. De Tabernaemontana siphilitica hojas y tallos se han aislado 06
alcaloides, se determinó la estructura química de cuatro alcaloides.
2. No se determinó la estructura química de dos alcaloides, porque estos
compuestos se descomponen con mucha facilidad al estar en contacto
con solventes clorados. (CHCl3, CH2Cl2, CDCl3, CD2Cl2).
3. Se determinó la estructura química de 04 alcaloides tipo ibogano, dos
sub- tipo Coronaridina identificados como: Coronaridina y 19S
Heyneanina y dos sub- tipo Coronaridina Hidroxindolenina:
Coronaridina Hidroxindolenina y 3- Oxocoronaridina.
4. El extracto Etanólico de hojas y tallos de Tabernaemontana siphilitica
presento una moderada actividad frente a Plasmodium falciparum con
un % de inhibición del parasito del 68%
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 60 Erick Vidal Taricuarima
3.4. RECOMENDACIONES
1. Realizar, la evaluación de la actividad Antimalárica de los alcaloides aislados, ya
que el extracto bruto presentó moderada actividad antimalárica.
2. Comparar los tipos de metabolitos secundarios que pueden presentar la, corteza y
raíz de la especie en estudio y otras especies de Tabernaemontana.
3. Investigar alcaloides y/o otros metabolitos en otras especies amazónicas, reportadas
como antimalárica, aislándolos, elucidando su estructura química y verificando su
actividad biológica.
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 61 Erick Vidal Taricuarima
3.5. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. A. Amico (1977) Fitoterapia 48, 10.
2. Ajarem JS. Effects of fresh kola-nut extract (Cola nitida) on the
locomotor activities of male mice. Acta Physiol Pharmacol Bulg;
1990.16(4): 10-5.
3. A.M. Bui, M.M. Debray, P. Boiteau and P. Potier (1977) Phytochemistry
16, 703.
4. Andrade-Neto VF, Brandão MGL, Stehmann JR, Oliviera LA, Krettli AU.
Antimalarial activity of Cinchona-like plants used to treat fever and
malaria in Brazil. J Ethnopharmacol; 2003; 87:253-6.
5. Análisis de la Situación de Salud del Perú 2003-Pag 91
6. Análisis de Situación de Salud del Pueblo Achuar (2006)-Libro- Pág.
166.
7. Aramburú J, Ramal C, Witzig R. Malaria Reemergence in the Peruvian
Amazon Region. Emerging Infectious Diseases. (1999). Vol 5, No. 2,
209-215, Mar-Apr.
8. Asociación latinoamericana de academias nacionales de medicina-
Libro. (2008).
9. B. Danielli, g. Palmisano en ―Alkaloids from Tabernaemontana‖. The
Alkaloids. Ed. Por ArnoldBrossi. Academic press, Inc. 1986, vol. 27,
p.1.chemistry and biology. Ed. Geoffrey A. Cordell academic Press.
1998. Vol. 27, p.1
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 62 Erick Vidal Taricuarima
10. B. Gabetta, E.M. Martinelli and G. Mustich (1975) Fitoterapia 46,195.
11. Boletín epidemiológico 2011-04 de marzo de 2011-volumen. 4 nº2
PAG.7.
12. Boletin de1 Instituto de Quimica de la Universidad National Autonoma
de Mexico 14,3.
13. B.P. Korzun, A.F. StAndre, P: R. Ulshafer, J. Am. Pharm. Assoc. Sci. Ed.
46, 720 (1957).
14. Brandao, M. Survey of medicinal plants used as antimalarials in the
Amazon. Journal of Ethnopharmacology; (1992). 36(2):175-182.
15. Brunenton, Jean (2001): ―Farmacognosia, Fitoquímica plantas
medicinales‖ Edit. Acribia S.A España.
16. B. Talapatra, A. Patra and S.K. Talapatra (1975) Phytochemistry 14,
1652.
17. Burkart A., ―Flora ilustrada de Entre Ríos (Argentina). Colección
científ. de INTA. Buenos Aires, (1979).Tomo V: 96-98.
18. Cáceres, A. Plantas de uso Medicinal en Guatemala. Primera Edición.
Editorial Universitaria. Guatemala; (1996). p.402.
19. C. Chaverri and J.F. Ciccio (1980) Revista latinoamericana de Química
11, 64.
20. C. Gomez-Gonzalez, C. Navajas Polo, S. Corzo Rodríguez and A.L.
Padilla Méndez (1981) Revea Cubana Farmacia 15,192
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 63 Erick Vidal Taricuarima
21. C. Kan, H.P. Husson, S.K. Kan and M. Lounasmaa (1980) Tetrahedron
Letters 1980.3363.
22. C. Kan, H.P. Husson, S.K. Kan and M. Lounasmaa (1981) Planta
Medica 41,72.
23. Cordell, G.A. Quimn-Beattie, M.L., Farnsworth, N.R. Phytotherapy
Research; 2001.p.15, 183-205.
24. Christiane Kan, Henri- Philippe Husson, Siew- Kwong Kan and
Mauri Lounasmaa, PlantaMédica, Vol 41, pp. 72-74 (1981).
25. D.G.I. Kingston (1978) Journal of Pharmaceutical Sciences 67, 271.
26. Dijkstra G., et al. Conformational Study of Cinchona Alkaloids. A
Combined RMN and Molecular Orbital Approach. Phytochemistry;
1990.Vol. 55. Nº 25. pp 6121-6131.
27. DISA-Loreto. Semana Epidemiológica 15. Boletín Epidemiológico.;
2003.
28. DISA-Loreto, Semana Epidemiológica 10. Boletín Epidemiológico. ;
2004.
29. Dirección Regional de Salud de Loreto 2003.
30. DOMÍNGUEZ, X (1990), Métodos de Investigación Fitoquímica,
Editorial Limusa, México. 303-307pp.
31. Duke, J. A. 2009. Duke’s handbook of medicinal plants of Latin America.
CRC Press Taylor & Francis Group. Boca Raton, USA. 962 p.
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 64 Erick Vidal Taricuarima
32. E. Bombardelli, A. Bonati, D. Gabetta, E.M. Martinelli and G. Mustich
(1976)
33. E. Schnitzler en ―Rauwolfia Alkaloids withspetial referenceto the
chemistry of reserpine‖ the Alkaloids, chemistry physiology. Ed. Por
R.H.F. Manske, Academic Press, New York, 1965, Vol. 8, p. 287.
34. F.J. Abreu Matos, R. Bras Filho, O.R. Gottlieb, S. Welbaneide, L.
Machado and M.I.L.M. Madruga (1976) Phytochemistry 15,551.
35. Frederich, M., Depauw-Gillet, M.C., Llabres, G., Tits, M., Hayette,M.P.,
Brandt, V., Penelle, J., De Mol, P., Angenot, L., 2000. New antimalarial
and cytotoxic sungucine derivatives from Strychnosicaja roots. Planta
Med. 66, 262—269.
36. G. A. Cordell. LLoydia. 37 (2). 219, 1974.
37. G. deile Monache, IL. De Albuquerque, F. delle Monache and G.B.
Marini-Bettblo (1972) Ahi Accademia Nationale del Lincency, Memorie,
Classe di Scienze Fist &,Matematiche e Naturali [VIII] 52, 375.
38. G. delle Monache, S.M. de Matta, F. delle Monache and G.B. Marini-
Bettolo (1977) Atti Accademia Nazionale dei Lincei, Memorie, Classe di
Scienze Fisiche, Mate- matiche et Natumli [viii] 62, 221.
39. Geoffrey A. Cordell en ―Introduction to Alkaloids‖, ed. Por John Wiley y
Songs. 1981, p. 657.
40. Gonzales et al. Uso de plantas medicinales para el tratamiento de
malaria, en dos distritos de la provincia de Maynas. Loreto-Perú.
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 65 Erick Vidal Taricuarima
Conocimiento; 2006(1): 109-23.
41. Geran, R,I., Greenberg, N.H, Mac Donald, M. Schumacher, A. M. and
Abboott, B. J (1972) Cancer Chemother. Rep. 3,1.
42. G.W Gribble en ―Synthesis and Antitumor activity of Ellipticine
Alkaloids and related Compounds2. The alkaloids, Chemistry and
Pharmacology. Ed. Por Arnold Brossi, 1990, vol 39, p. 239
43. G.M.T. Robert, A. Ahond. C. Poupot, P. potier, H. Jacquemin.1983.
Journal of Natural Products: Vol. 46, N° 5, pp. 708-722, sep- oct.
44. GROS, E (1995). Introducción al estudio de los Productos Naturales.
45. H. Achenbach (1966) Tetrahedron Letters 1966,5027.
46. H. Achenbach (1967) Tetrahedron Letters 1967,1793.
47. H. Achenbach and E. Schaller (1975) Chemische Berichte 108, 3842.
48. H. Achenbach and E. Schaller (1976) Tetrahedron Letters 1976, 351.
49. H. Achenbach and E. Schaller (1976) Chemische Berichte 109, 3527.
50. H. Achenbach (I98 1) Personal communication.
51. Hans Achenbach, Bernd Raffelsberger and gert- ulf brillinger,
chemisches laboratorium der universitat freiburt br., west germany
(revised received 21 february 1980).
52. Hans Achenbach, reiner waibel and manfred zwanzger, phytochemistry,
vol.37, nº6, pp. 1737-1743 (1994).
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 66 Erick Vidal Taricuarima
53. Henri- Philippe Husson en ―Simple Indole Alkaloids Including β-
Carbolines and Carbazoles‖. The alkaloids, ed. Por Arnold Brossi.
Academic Press, Inc. 1985, Vol. 27 pp. 1.
54. H.P. Husson, I. Chardon-Loriaux, M. Andriantsiferana and P. Potier
(1978) Journal of the Indian Chemical Society 60, 1099.
55. I. Chardon-Loriaux, M.M. Debray and H.P. Husson (1978)
Phytochemistry 17, 1605.
56. Iniciativa Amazónica contra la Malaria (AMI) Red Amazónica de V
igilancia de la Resistencia a los Antimaláricos (RAVREDA)
Información para la IX Reunión Anual-PERU .
57. Instituto Apoyo-Salud-Libro Pág. 14.
58. Instituto Interamericano de cooperación para la agricultura. (IICA)
Plantas medicinales en atención primaria de salud, agroindustria,
Fitoquímica y ecoturismo: perspectivas del desarrollo en la región los
libertadores Wari Lima-Perú, junio 1999. Pág. 107.
59. J.A. Weisbach, R.F. Raffauf, 0. Ribeiro, E. Macko and B. Douglas (1963)
Journal of Pharmaceutical Sciences 52, 350.
60. J. Bruneton, A. Cave and C. Moretti (1979) Fitoterapia 50, 123.
61. Jean Bruneton, Farmacognosia. Fitoquímica. Plantas medicinales ,2
edición. 2001.
62. Jiménez, T. A., Búsqueda, Obtención y Evaluación de Nuevos
Antiparasitarios. Programa CYTEC. Panamá; 1999. Pp 105.
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 67 Erick Vidal Taricuarima
63. Jorge Vidal. Curso de química orgánica y nociones de química
biológica. 17ª edición, editorial Stella, viamonte , Buenos Aires;
1984.pag. 481.
64. Journal of the hernia Society, Per-kin Z; (1976) Pág. 1432.
65. K. Bláha, Z. Klblicová, Trojánek, Tetrahedron Lett. 27, pp, 2763(1972).
66. Kam, T. S. In Alkaloids: Chemical and Biological Perspectives; Pelletier,
S. W., Ed.; Pergamon: Amsterdam, 1999; Vol. 14, Chapter 2, pp 285-
435.
67. KAMESH RASTOGI, RANDHIR S. KAPIL and SATYA P. POPLI,
Phytochemistry, Vol. 19, pp. 1209-1212 (1980).
68. Kirby G.C. Medical plants and the control of parasites. Medical plants
and the control of protozoal disease, with particular reference to
malaria.Trans.R. Soc. Trop. Med. Hyg; 1996.Vol. 90: 605-609.
69. Klayman D.L. Quinghaosu (Artemisinin): An antimalarial drug from
China. Science; 1985. Vol. 228: p. 1049-1055.
70. K. Raj, A. Shoeb, R.S. Kapil and S.P. Popli (1974) Phytochemistry~ 13,
1621.
71. K. Rastogi, R.S. Kapil and S.P. Popli (1980) Phytochemistry 19, 1209.
72. Krettli AU, Andrade-Neto V, Brandao MGL, Ferrari WMS. The search
for new antimalarial drugs from plants used to treat fever and malaria or
plants ramdomly selected: a review. Mem Inst Oswaldo Cruz 2001;
96:1033-42.
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 68 Erick Vidal Taricuarima
73. Krüss Optronic: Medidores del punto de fusión,
http://www.kruess.com/laboratorio/productos/dispositivos-de-medicion-
del-punto-de-fusion/.
74. Leeuwenberg, A. J. M. Tabernaemontana: The Old World Species; Royal
Botanic Gardens: Kew, 1991.
75. Leeuwenberg, A. J. M. Tabernaemontana: The New World Species &
Stemmadenia; Royal Botanic Gardens: Kew, Richmond, Surrey, UK,
1994.
76. Link de Páginas Web:
http://www.biovirtual.unal.edu.co/ICN/?controlador=ShowObject&ac
cion=show&id=217871(herbario nacional Colombia)
(http://www.travelvaccines.com/travelvacs/front/index.jsp?siteCode=
TRAVELVACS&codeRubrique=9&codePage=MALARIA&lang=ES)
(Consulta 20 de Abril 2010)
http://www.pucp.edu.pe/departamento/economia/images/documentos/
DDD185.pdf (Consulta 18 de Abril 2010)
http://www.plantastoxicas.unal.edu.co/tabernaemontana.html
http://www.upch.edu.pe/famed/rmh/5-3/v5n3e1.htm (Consulta 17 de
Abril 2010)
http://www.gipeit.com/imagenes/pirupiru.PNG (Consulta 18 de Abril
2010).
http://www.traveljournals.net/explore/peru/map/m549796/rio_yarapa.
html.
http://species.wikimedia.org/wiki/Tabernaemontana_siphilitica
http://Tabernaemontana siphilitica From Wikisource.Taxona vigation
Classification del sistema: APG III (hasta el nivel de la familia)
Página principal.
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 69 Erick Vidal Taricuarima
77. LOCK, O. 1999. Investigación Fitoquímica, métodos en el estudio de
productos naturales, Ediciones PUC, Lima 300p.
78. M.A. Elkeiy, S.M. Abd Elwahab and A.Y. Zaki (1966) Journal of
Pharmaceutical Sciences of the United Arab Republic 7, 97.
79. M. Gorman, W. Neuss, N.J. Cone and J.A. Deyrup (1960) Journal of the
American Chemical Society 82, 1142.
80. M.J. Hoizey, L. Olivier, M. Debray, M. Quirin, J. Le Men and K.C. So
(1970) Annales Pharmaceutiques Francaises 28, 127.
81. M.M. Chaves (1960) Reuisia Ceres 11, 146 cited from: Biological
Abstracts 38 (1962) 7547).
82. Maco M. y Ruiz L. Tesis: Evaluación Antimalárica in Vitro y Tamizaje
Fitoquímico de 26 especies vegetales de la cuenca del río Nanay 2006
Iquitos –Perú 2007.
83. Madureira MC, Martins AP, Gomes M, Paiva J, Cunha AP, Rosario V.
Antimalarial activity of medicinal plants used in traditional medicine in
S. Tomé and Príncipe Islands. J Etnopharmacol; 2002. 81:23-9.
84. M.B. Patel, L. Thompson, C. Miet and J. Poisson (1973) Phytochemistry
12, 451.
85. Mejía y Rengifo. Plantas medicinales de uso popular en la Amazonía
peruana. Segunda edición. Agencia española de Cooperación
Internacional; (2000). Pp 284.
86. Meshnick SR. The form quinine to Quinghaosu (1998): Historic
perspectives. En: Irwin W, Sherman J, editores. Parasitebiology,
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 70 Erick Vidal Taricuarima
pathogenesis and protection. Washington DC: ASM; p.341-53.
87. M. Gorman, W. Neuss, N.J. Cone and J.A. Deyrup (1960) Journal of the
American Chemical Society 82, 1142.
88. M.J. Hoizey, MM. Debray, L. Le Men-Olivier and J, Le Men (1974)
Phytochemistry 13, 1995.
89. M.V. Kisakurec, m. Hesse, en “Indole and Biogenetically related
alkaloids”. Ed. Por J.D. Phillipson, M.H. zenk, Academic Press, London,
1982, p. 11.
90. Ministerio de Salud Oficina General de Epidemiología.
91. M. Zeches, M.M. Debray, G. Ledouble, L. Le Men-Olivler and J. Le Men
(1975). Phytochemistry 14,1122.
92. M. Zeches, B. Richard, P. Thepenier, L. Le Men- Olivier y J. Le
Men.Alcaloides des Feuilles du Cinchonaledgeriana. Phytochemistry.
Pergamon Press Ltd. Preinted in England; (1980).vol, 19. pp 2451-2454.
93. Muñoz V. et al. A search for natural bioactive compounds in Bolivia
through a multidisciplinary approach Part I. Evaluation of the
antimalarial activity of plants used by the Chacobo Indians. J
Ethnopharmacol2000a; 69:127-37.
94. O. Collera, F. Walls, A. Sandoval, F. Garcia, J. Herran and M.C.
Perezamador. (1962).
95. OET. 2012. Flora Digital de la Selva. Organización para Estudios
Tropicales. Costa Rica.
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 71 Erick Vidal Taricuarima
96. Pérez and P. Sierra (1980) Revista Latinoamericana de Quimica 11,
132.
97. Pereira P.S.; Dias D.A.; Franca S.C.; Sampaio S.V.; Indole Alkaloids
from Tabernaemontana catharinensis A. DC. Acta Horticult, 1999.
501:171-6.
98. Perveen Sharma and Geoffrey A. Cordell Journal of Natural Products,
Vol. 51, Nº 3, pp., 528-531 (1988).
99. P.G. Rao and B.P. Singri (1979) Indian Journal of Chemistry 17 B, 414.
100. Premila Perera, Finn Sandberg, TerisA.VanBeek and Robert Verpoorte,
PlantaMédica, Vol 49, pp.28-31 (1983).
101. Proyecto: plantas medicinales y Biocidas de la Amazonia Peruana,
Informe Técnico 2000 IIAP. Perú.
102. R. Veerporte, R. Van Der Heijden, P. R. H. Moreno en ―Biosynthesis of
Terpenoids Indole Alkaloids in Catharantus Roseus Cells‖. The
Alkaloids, Ed. Geoffrey A. Cordell academic Press, 1997, vol. 49, p. 221.
103. Randriana Rivelojosia M, Rasidimanana VT, Rabarison H, Cheplogoi
PK, Ratsimbason M, Mulholland DA, et al. Plants traditionally
prescribed to treat tazo (malaria) in the eastern region of Madagascar.
Malar J; (2003). 2:1-9.
104. Ramal, C.; Vargas, J.; Aramburu, J. Epidemiología de la Malaria en la
Región Loreto, Año. Libro de resúmenes de Trabajos Libres. VI
Congreso Peruano de Enfermedades Infecciosas y Tropicales. SPEIT;
(1999); 1997; Agosto. Pág. 85.
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 72 Erick Vidal Taricuarima
105. Ramanitrahasimbola, D., Rasoanaivo, P., Ratsimamanga-Urverg, S.,
Federici, E., Palazzino, G., Galeffi, C., Nicoletti, M., 2001. Biological
activities of the plant-derived bisindole voacamine with reference to
malaria. Phytother. Res. 15, 30—33.
106. Ridley R.G. Medical needs scientific opportunity and the drive for
antimalarial drugs. Nature; 2002. Vol. 415: 686-693.
107. Roberts, M.F., Wink, M. Introduction. In ―Alkaloids: Biochemistry,
Ecology and Medicinal Applications‖, Roberts, M.F., and Wink M, (eds).
Plenum Press, New York; 1998.p. 1-7.
108. Rodríguez, M. Tendencia de la Malaria y su relación con la variable de
tiempo en la ciudad de Iquitos 1995 -2001. Tesis para optar el título de
Enfermero-UNAP. Iquitos; (2002).
109. Ruiz Mesia, L. Tesis Doctoral. 1993 pág. 15.
110. Sarath P. Gunasekera, Geoffrey A. Cordell and Norman R.
Farnsworth, Phytochemistry, Vol.19, pp.1213-1218. (1980).
111. Sharapin Nikolai, Fundamentos de Tecnología de Productos
Fitoterapéuticos. Programa CYTEC. Colombia.
112. Tagboto S, Townson S. Antiparasitic properties of medicinal plants and
other naturally occurring products. AdvParasitol; (2001). 50:199-295.
113. T.A. Van Beek, F. T. C. Kuulaars, P. H. A. M. Thomassen, R. Verporrte
and A. Raerheim Sevendren, Department of Pharmacognosy, Garlaeus
Laboratories, University of Leiden, P.O. Rex 9502, 2300 RA Leiden, The
Netherlands (Received 30 August 1983).
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 73 Erick Vidal Taricuarima
114. Teris A.Van Beek And Marian A. J.T. Van Gessel; Alkaloids of
Tabernaemontana Species, Alkaloids: Chemical andBiological
perspectives Ed. John Wiley and Sons inc 1988.Vol6, 2:75-85.
115. Teris a. van Beek,* Robert Verworte and Anders Baeiuen svens,
Tetrahedron 40 Nº4, pag.737- 748 (1984).
116. T. R. Govindachari, B.S.Joshi, A.K.Saksena, S.S. Sathe and N.
Viswanathan, Tetrahedron Letters Nº 43, pp.38-73-3878(1965).
117. Van Beek T.A.; Deelder A.M.; Verpoorte R.; BaerheimSvendsen A.;
―Antimicrobial, Antiamoebic and Antiviralscreening of some
Tabernaemontana species‖, Planta Med. 1.984 Apr, 50(2):180-5.
118. Van Beek, T. A.; Verpoorte, R.; Baerheim Svendsen, A.; Leeuwenberg, A.
J. M.; Bisset, N. G. J. Ethnopharmacol. 1984, 10, 1-156.
119. Van Beek, T. A.; van Gessel, M. A. J. T. In Alkaloids: Chemical and
Biological Perspectives; Pelletier, S. W., Ed.; J. Wiley and Sons: New
York, 1988; Vol. 6, Chapter 2, pp 75-226.
120. Van Der Heijden R.; Hermans Lokkerbol A.; Verpoorte R.; Baerheim
Svendsen A.; ―Pharmacognostical studies of Tabernaemontana species.
Ion- pair droplet counter-current chromatography of indole alkaloids
from suspension cultures‖, J. Chromatogr. 1987.396:410-415.
121. V. K. kansal, p. Potier. Tetrahedron, 42, 2389, (1986).
122. Vasquez Martinez Rodolfo« Florula de las Reservas Biológica de
Iquitos, Perú » Allpahuayo – Mishana Ed. Missouri Botanical Garden..
IN USA; (1997).
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 74 Erick Vidal Taricuarima
123. V. Munoz, C, Moretti, M. Sauvain, et al ―Isolation of Bis-Indole
alkaloids with antileishmanial and antibacterial activities from
Peschiera van heurkii. Planta Med. 1994.60:455-459.
124. V. Snieckus en ―The distribution of the indole Alkaloids in plants‖. The
Alkaloids, Chemistry and physiology. Ed. Por R.H.F. manske, academic
Press, New York, 1968, Vol. 11, p. 1.
125. Verporte, R.; Ruigrok, C.L. M. Svendsen, A.B.; Planta Med. 1997, 46,149
126. Vikas Dhingra K, Vishweshwar R, Lakshmi Narasu M. Current status of
artemisinin and its derivatives as antimalarial drugs. Life Sci2000;
66:279-300.
127. Volhardt C. Peter K. (1992), Química Orgánica, Ediciones Omega S.A.
España.
128. V. S. Prakash Chaturvedula, Shannon Sprague, Jennifer K. Schilling,
and David G. I. Kingston. Department of Chemistry, M/C 0212, Virginia
Polytechnic Institute and State University, Blacksburg, Virginia 24061
Received November 27, 2002 Bioassay-directed fract
129. V.S. Prakash Chaturvedula, Shannon Sprague, Jennifer K. Schilling,
and David G.I. Kinston Department of Chemistry, M/C 0212, Virginia
Polytechnic institute and State University, Blacksburg, Virginia
24061Received November 27, 2002.
130. Waterman PG. Chemical taxonomy of alkaloids. In ―Alkaloids:
Biochemistry, Ecology and Medicinal Applications‖. Roberts MF, Wink
M (eds). Plenum Press, New York; 1998.87-107.
Facultad de Ingeniería Química-UNAP CIRNA-LIPNAA
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 75 Erick Vidal Taricuarima
131. W. E. Monroe, w. c. mansukh en history and future posoects of
campthothecin and Taxol, The Alkaloids The Alkaloids, Ed. Geoffrey A.
Cordell academic Press, 1998. Vol. 50, p 509.
132. Willcox ML, Cosentino MJ, Pink R, Bodeker G, Wayling S. Natural
products for the treatment of tropical diseases. Trends Parasitol;
(2001).17:58-60.
133. Wingrover Alan S. & Caretl. (1984), Química Orgánica, Editorial Karla,
Mexico.
134. X.Z. Feng, C. Kan, P. Potier, S.K. Kan and M. Lounasma (1982) Planta
Medico 44, 212.
135. Zocoler, M.A., Oliveira, A.J.B., Sarragiotto, M.H., Grzesiuk, V.L.,
Vidotti, G.J., 2005. Qualitative determination of indole alkaloids of
Tabernaemontana fuchsiaefolia (Apocynaceae). J. Braz. Chem. Soc. 16,
1372—1377.
ANEXOS
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 77 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 23. Espectro de Masa del alcaloide CORONARIDINA.
Figura N° 24. Espectro de IR del alcaloide CORONARIDINA.
N
N
H
COOCH3
2
3
56
78
9
10
11
1213
14
15
16
1718
19
20
21
N
N
H
COOCH3
2
3
56
78
9
10
11
1213
14
15
16
1718
19
20
21
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 78 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 25. Espectro de RMN de1H del alcaloide CORONARIDINA
8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0Chemical Shift (ppm)
0.9731
0.9916
1.3200
1.3267
1.3379
1.4101
1.4286
1.5213
1.8020
1.8066
1.9377
1.9463
1.9516
1.9801
1.9854
2.1066
2.6375
2.6428
2.6461
2.6706
2.6753
2.8567
2.8779
3.1023
3.2234
3.2274
3.2426
3.2539
3.2632
3.2724
3.2883
3.6472
3.7511
3.7630
3.7710
3.7869
7.1263
7.1435
7.1607
7.1634
7.1819
7.1852
7.2018
7.2044
7.2951
7.3150
7.5301
7.5493
8.0664
N
N
H
COOCH3
2
3
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
19
2021
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 79 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 26. Espectro de Masa del alcaloides 19S-HEYNEANINA
Figura Nº27. Espectro de IR del alcaloide 19S-HEYNEANINA
2
3
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
1920
21N
N
H
COOCH3
OH
8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0Chemical Shift (ppm)
0.8863
0.8995
1.1195
1.1328
1.2677
1.4959
1.5104
1.5602
1.5816
1.6383
1.9283
1.9459
2.0550
2.6015
2.6053
2.6091
2.6280
2.6324
2.6362
2.8247
2.8430
3.1443
3.1544
3.1651
3.1802
3.1852
3.1897
3.5055
3.7463
3.7500
3.9026
4.1844
7.1143
7.1162
7.1301
7.1666
7.1691
7.1830
7.2624
7.2700
7.2788
7.4768
7.4931
7.8317
2
3
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
1920
21N
N
H
COOCH3
OH
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 80 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 28. Espectro de RMN de
H
+ de alcaloide 19S-HEYNEANINA
Figura Nº 29. Espectro de RMN de
13C del alcaloides 19S-HEYNEANINA
176 168 160 152 144 136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32 24Chemical Shift (ppm)
20.3687
22.9049
26.7219
36.9595
39.5632
51.2922
52.3370
53.0027
59.7519
71.2282
76.7472
77.0000
77.2612
109.8194
110.4934
118.4645
119.5514
122.3826
128.4493
135.5440
174.8009
2
3
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
1920
21N
N
H
COOCH3
OH
2
3
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
1920
21N
N
H
COOCH3
OH
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 81 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 30. COSY del alcaloide 19S-HEYNEANINA
7 6 5 4 3 2 1ppm
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
5.5
6.0
6.5
7.0
7.5
ppm
2
3
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
1920
21N
N
H
COOCH3
OH
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 82 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 31. NOESY del alcaloide 19S-HEYNEANINA
7 6 5 4 3 2 1ppm
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
5.5
6.0
6.5
7.0
7.5
ppm
2
3
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
1920
21N
N
H
COOCH3
OH
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 83 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 32. HSQC de13
C del alcaloides 19S-HEYNEANINA
7 6 5 4 3 2 1ppm
24
32
40
48
56
64
72
80
88
96
104
112
120
ppm
2
3
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
1920
21N
N
H
COOCH3
OH
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 84 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 33. Espectro de Masa del alcaloide CORONARIDINA HIDROXINDOLENINA
Figura Nº 34. Espectro de IR del alcaloide CORONARIDINA HIDROXINDOLENINA
2
3
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
19
20
21N
N
COOCH3
HO
2
3
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
19
20
21N
N
COOCH3
HO
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 85 Erick Vidal Taricuarima
10.5 10.0 9.5 9.0 8.5 8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5Chemical Shift (ppm)
0.7866
0.8005
0.8150
0.8339
1.0337
1.1837
1.2127
1.3520
1.3665
1.3936
1.5966
1.7082
1.8021
1.8519
1.9206
1.9515
2.4035
2.4312
2.6664
2.6872
2.8838
2.9078
3.4228
3.4663
3.6081
3.6321
3.6718
3.7373
7.1577
7.1722
7.1886
7.1905
7.2403
7.2617
7.2762
7.3827
7.3979
9.9868
Figura Nº 35. Espectro de RMN de1H del alcaloide Coronaridina Hidroxindolenina
Figura Nº 36. Espectro de RMN de13
C del alcaloide Coronaridina Hidroxindolenina
192 184 176 168 160 152 144 136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32 24 16 8Chemical Shift (ppm)
11.5382
26.5113
27.0168
29.6710
32.0472
33.8840
34.7603
37.5578
48.7054
49.0762
53.1796
58.4038
58.7492
76.7472
77.0000
77.2528
88.3583
120.8490
121.4220
126.7725
129.1655
142.6809
151.3260
173.7055
189.2684
2
3
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
19
20
21N
N
COOCH3
HO
2
3
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
19
20
21N
N
COOCH3
HO
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 86 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 37. COSY del alcaloide CORONARIDINA HIDROXINDOLENINA
7 6 5 4 3 2 1ppm
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
5.5
6.0
6.5
7.0
ppm
2
3
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
19
20
21N
N
COOCH3
HO
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 87 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 38. NOESY del alcaloide CORONARIDINA HIDROXINDOLENINA
7 6 5 4 3 2 1ppm
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
5.5
6.0
6.5
7.0
ppm
2
3
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
19
20
21N
N
COOCH3
HO
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 88 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 39. HSQC del alcaloide CORONARIDINA HIDROXINDOLENINA
7 6 5 4 3 2 1ppm
16
24
32
40
48
56
64
72
80
88
96
104
112
120
128
ppm
2
3
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
19
20
21N
N
COOCH3
HO
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 89 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº40. Espectro de Masa del alcaloide 3-OXOCORONARIDINA
Figura Nº41. Espectro de RMN de
1H del alcaloide 3-OXOCORONARIDINA
8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0Chemical Shift (ppm)
0.9809
0.9960
1.0105
1.2670
1.4133
1.4284
1.4404
1.4549
1.4700
1.5186
1.5331
1.5476
1.5602
1.7669
1.9812
2.0077
2.0140
2.3109
2.3380
2.6330
2.6368
2.6444
2.6715
2.6746
3.1865
3.2004
3.2174
3.2218
3.2294
3.2432
3.2464
3.2603
3.7381
3.7601
3.7671
4.4800
4.4914
4.5021
4.5153
4.5267
7.0979
7.0992
7.1130
7.1156
7.1559
7.1584
7.2460
7.2618
7.2700
7.4799
7.4957
7.9722
23
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
19
20
21N
N
H
COOCH3
O
23
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
19
20
21N
N
H
COOCH3
O
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 90 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 42. Espectro de RMN de13
C del alcaloide 3-OXOCORONARIDINA
176 168 160 152 144 136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32 24 16Chemical Shift (ppm)
11.3374
21.0829
27.4301
27.6267
29.6839
31.0179
35.5115
35.9539
38.2287
42.7083
52.9874
55.5712
56.1680
76.6840
77.0000
77.3159
109.4592
110.5685
118.3902
119.6399
122.4133
127.8688
133.8509
135.7115
173.0505
175.7115
23
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
19
20
21N
N
H
COOCH3
O
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 91 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 43. COSY del alcaloide 3-OXOCORONARIDINA
7 6 5 4 3 2 1ppm
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
5.5
6.0
6.5
7.0
7.5
ppm
23
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
19
20
21N
N
H
COOCH3
O
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 92 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 44. NOESY del alcaloide 3-OXOCORONARIDINA
7 6 5 4 3 2 1ppm
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
5.5
6.0
6.5
7.0
7.5
8.0
ppm
23
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
19
20
21N
N
H
COOCH3
O
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 93 Erick Vidal Taricuarima
Figura Nº 45. HSQC del alcaloide 3-OXOCORONARIDINA.
7 6 5 4 3 2 1ppm
8
16
24
32
40
48
56
64
72
80
88
96
104
112
120
128
ppm
23
56
78
9
10
11
1213
1415
16
1718
19
20
21N
N
H
COOCH3
O
Hivelli Ericka Ricopa Cotrina Pág. 94 Erick Vidal Taricuarima