Post on 19-Sep-2018
Infección respiratoria agudaInfección respiratoria aguda• Importante causa de morbimortalidad en todos
los grupos etareos
• Representa 1/3 de las muertes en niños < 5 años
Argentina:
• 60 % de las consultas en menores de 5 años.
• Quinta causa de ingreso hospitalario en población g ral.
• Tercera causa de mortalidad en niños < 1 año.
Virus respiratorios
• Tienen como vía de entrada el tracto respiratorio.
• En general, replican en tracto respiratorio produciendo una respiratorio produciendo una infección localizada .
• Algunos pueden producir viremia e infecciones sistémicas: Ej. sarampión, paperas, rubéola.
Transmisión
• Vía aerógena a través de las gotitas de “Flugge”
• A través de manos u otros objetos contaminados con las secreciones respiratorias
Tipos de infecciones respiratorias
• Altas o del tracto respiratorio superior: por encima de la laringe: Rinitis, faringitis, sinusitis, otitis.
• Bajas o del tracto respiratorio inferior: laringotraqueítis, traqueítis, bronquitis, bronquiolitis, neumonía.
Virus Respiratorios HumanosFamilia G énero Especie Serotipos Enfermedad
Orthomixoviridae Influenza A, B, C Muchos Gripe
ParamixoviridaeSubflia
Paramyxovirinae
Rubulavirus ParainfluenzaParotiditis
2 y 41
IRA alta y baja
Respirovirus Parainfluenza 1 y 3 IRA alta y Parainfluenzabaja
Morbillivirus Sarampi ón 1 Sarampi ón
ParamyxoviridaeSubflia
Pneumovirinae
Pneumovirus Sincicial Resp.
GruposA y B
IRA baja y alta
MetapneumoVirus
hMPV 2 genotipos
IRA baja y alta
Virus Respiratorios HumanosFamilia G énero Especie Serotipos Enfermedad
Adenoviridae Mastadenovirus Adenovirus 51 IRA alta y bajaOcularesGastrointestinales
Picornaviridae Rhinovirus Rinovirus 130 IRA alta y baja
Enterovirus EchoCoxackie
varios IRA alta
Coronaviridae Coronavirus OC43 y 229ESAR S-CoVNSL63, NKU
Varios IRA altaSARSIRA baja
Parvoviridae Bocavirus Bocavirus ?? IRA baja y alta
Virus Respiratorios HumanosEn Inmunocomprometidos
Familia Especie Serotipos Enfermedad
Herpetoviridae Herpes simplex
2 Neumonía
Varicella 1 NeumoníaVaricella zoster
1 Neumonía
CMV 1 Neumonía
EBV 1 Neumonía
Estudios en Argentina• Las infecciones respiratorias en < 1 año es la
segunda causa de mortalidad• Mayoría de los estudios se han realizado en
niños menores de 5 años hospitalizados. • En 1003 niños < de 4años , Buenos Aires,
1984-1988 REVIEWS OF INFECTIOUS DISEASES. VOL. 12, SUPPLEMENT 8. NOVEMBER-DECEMBER 1990REVIEWS OF INFECTIOUS DISEASES. VOL. 12, SUPPLEMENT 8. NOVEMBER-DECEMBER 1990
HOSPITAL-BASED STUDIES ON
ACUTE RESPIRATORY TRACT INFECTIONS IN YOUNG CHILDRE N
Etiologic and Clinical Evaluation of Acute Lower Re spiratory Tract Infections in Young Argentinian Children: An Overview
Mercedes Weissenbacher, Guadalupe Carballal, From the Department of Microbiology, Faculty of Medicine,
Maria Avila, Horacio Salomón, Julia Harisiadi, University os Buenos Aires; Ricardo Gutierrez Hospital;
Mariana Catalano, M. Cristina Cerqueiro, and Bernardo Houssay Hospital, Buenos Aires, Argentina
and Patricia Murtagh
30% Viral
Bacteriano
Mixta
Etiología de IRA baja en ArgentinaEtiología de IRA baja en Argentina
Weissenbacher y col RID (12), supl. 8: 889-898.1990
11%
3%
56% Mixta
Negativo
19%VSR
ADV
Distribución de frecuencias de las Distribución de frecuencias de las IRAs viralesIRAs virales
n= 1003 niños < 5 años con IRA baja
Métodos: IFI y cultivo
Etiología viral : 30% (301 niños)
61%
9%
7%
1%
3%
ADV
Parainfluenza
Flu A
Flu B
otros
Weissenbacher y col RID (12), supl. 8: 889-898.1990
Distribución estacional de virus respiratoriosDistribución estacional de virus respiratoriosVSR
0
50
100
150
E F M A M J J A S O N D
Influenza
02468
1012
E F M A M J J A S O N D
Flu B
Flu A
MESES
Carballal G y col. J.Med. Virol. 64:167174, 2001
Adenovirus
02468
10
E F M A M J J A S O N D
Parainfluenza
0
5
10
15
E F M A M J J A S O N D
E F M A M J J A S O N D
Estudios en Argentina
Dentro de la etiología viral el 70% correspondió a VSR asociado mayormente a bronquiolitis
• Frecuencias de detección: (diferentes estudios) estudios) VSR más frecuente 18-36%Adenovirus 2- 14% Parainfluenza 2-3%Influenza A 2-3%
Estacionalidad de Virus Respiratorios Estacionalidad de Virus Respiratorios en niños < 5 años con IRA bajaen niños < 5 años con IRA baja
Buenos Aires, 1995 Buenos Aires, 1995 -- 20012001
50
60
70 RSVAdenovirusInfluenza AParainfluenza
% n = 603
0
10
20
30
40
En
e
Fe
b
Ma
r
Ab
r
Ma
y
Jun
Jul
Ag
o
Se
p
Oct
No
v
Dic
eje Y: % de positividad de cada virus respecto del total de muestras estudiadas en cada mes durante los 7 años de estudio
Virus Respiratorios según Semana Epidemiológica. Total País. Año 2010. n=16716
700
800
900
1000
1100
1200
1300
1400
1500
1600
0
100
200
300
400
500
600
SE
1
SE
2
SE
3
SE
4
SE
5
SE
6
SE
7
SE
8
SE
9
SE
10
SE
11
SE
12
SE
13
SE
14
SE
15
SE
16
SE
17
SE
18
SE
19
SE
20
SE
21
SE
22
SE
23
SE
24
SE
25
SE
26
SE
27
SE
28
SE
29
SE
30
SE
31
SE
32
SE
33
SE
34
SE
35
SE
36
SE
37
SE
38
SE
39
SE
40
Virus Sincicial Respiratorio Virus ParainfluenzaAdenovirus Virus Influenza BMetapneumovirus Virus Influenza A no subtipificado*Influenza pandémica (H1N1) 2009 Virus Influenza A H1 EstacionalVirus Influenza A H3 Estacional
Flia Paramixoviridae
• Infecciones localizadas en tracto respiratorio superior y/o inferior: Parainfluenza, VSR, metapneumovirus
No viremiaInmunidad depende de Ig A secretoriaInmunidad depende de Ig A secretoriaInmunidad de corta duraciónFrecuentes las reinfecciones No existen vacunas
VSR : EstructuraVSR : EstructuraFamilia Paramixoviridae, Subfamilia Pneumovirinae, Género Pneumovirus
Genoma: ARN no segmentado de polaridad negativa
Codifica para 10 ARNm
Bicapa lipídica
Proteína hidrofóbica SH
Proteínas de
Proteína G de unión
Proteína de fusión F Otras proteínas:
NS1, NS2,
M2-1 y M2-2Proteínas de matriz M
Gran complejo de la
polimerasa L
Nucleoproteína N
Fosfoproteína P
M2-1 y M2-2
Virus Sincicial Respiratorio
Glicoproteínas de envoltura:G adsorción virus a la célula
Acs NeuAcs NeuF fusión entrada virus a la célula
formación de sincicios
2 grupos antigénicos : A y B Dentro de cada uno: gran variabilidad antigénica numerosos genotipos
VSR: Glicoproteína G VSR: Glicoproteína G
Mayor variabilidad genética y antigénica
Blanco principal para la respuesta de
anticuerpos neutralizantes
y protectoresy protectores
Región hipervariable Región hipervariable
Región conservada central
Dominio de transmembrana ECTODOMINIONH3 COOH
Dominio intracitoplasmático
Virus Sincicial Respiratorio
• Entrada vía respiratoria. Período de Incubación :2- 4 días.
• Período de eliminación: 5 días, en IC: >7 días
• Puede diseminarse a través• Puede diseminarse a travésdel epitelio respiratorio sin saliral espacio extracelular. Se disemina de cél a cél a través de fusión de células• Cuadros clínicos: IRA alta, crup, traqueobronquitis ,
Bronquiolitis (40-90%), neumonía (5-40%).
Virus Sincicial Respiratorio
• Principal causa de hospitalización en lactantes
• Causa más frecuente de bronquiolitis en niños menores de 1 año: 50% de bronquiolitis y 25% Neumonía
• Acs maternos no protegerían totalmente.• Acs maternos no protegerían totalmente.Inmunidad de corta duración: Niños pequeños, Infección localizada + variabilidad antigénica.......Frecuente reinfecciones
• Puede ser grave y fatal en niños de riesgo, en IC y ancianos
• En adultos IRA alta y neumonía de la comunidad
Epidemiología VSR
• Circulación mundial. Co-circulan ambos grupos, A y B en diferentes proporciones de acuerdo al lugar geográfico y año. Predomina el A
• Incidencia estacional muy marcada: picos en los meses fríos del Invierno.
• Mayor incidencia en < de 1 año y dentro de ellos 3- 6 meses.
• Período de transmisión prolongado. Altos título de virus en secreciones de niños. Gran contagiosidad .
• Frecuentes brotes en nurseries y salas de pediatría .
Grupos de Riesgo
< 3 meses
Niños prematuros
Dieta maternal basada en hidratos de carbono en el
embarazo
Displasia broncopulmonarDisplasia broncopulmonar
Enf. Cardíaca congénita
Fibrosis Quística
Pacientes inmunocomprometidos
Ancianos
TRATAMIENTO
Remoción de secreciones, oxígeno.
Hipoxia severa ARM.
Ribavirina Análogo sintético de la guanosina
Inmunización
pasiva
1 vez al mes en
bebes de alto
riesgo
VSR-IGIV
(inmunoglobulina
intravenosa)
Ac. Anti F Monoclonal
Humanizado
(Palivizumab) vía im
PREVENCION
Lavado de manos
Aislamiento de los pacientes
Lactancia prolongada
NO EXISTE UNA VACUNA EFECTIVA PARA RSV
NUEVAS VACUNAS EN ESTUDIO
Virus vivo atenuadocp RSVts-1ts-2Cpts 248/404
Mutantes termosensibles
Subunidades proteicasPFP-1PFP-2
Bioingeniería genéticaF y G de A y B
Parainfluenza
• 2 géneros: Respirovirus (1 y 3) Rubulavirus (2 y 4 AQ y 4B)
• Síntomas similares a influenza y posee actividad de hemoaglutinación y neuraminidasaneuraminidasa
• 41% crup, especialmente tipo 1.• En IC IRA baja severa, especialmente
tipo 1
Parainfluenza. Cuadros clínicos
ParainfluenzaSerotipo
Síndrome más frecuente Edad
Tipo 1 Crup (laringotraqueítis) 6 meses-6 años
Tipo 2 Crup ,Rinitis, rinofaringitis 6 meses a 6 añosTipo 2 Crup ,Rinitis, rinofaringitisBronquitis
6 meses a 6 años
Tipo 3 Crup, rinitis, rinofaringitisBronquitis, bronquiolitis, neumonía, otitis media
0-6 meses
Tipo 4 A y B Rinitis, rinofaringitisIRA bajas
0-5 años
Flia Adenoviridae• Virus a ADN dc lineal, desnudos• Nucleocápside icosaédrica• 2 géneros: Mastadenovirus Hombre, 51 serotipos Aviadenovirus anfibios y peces• Producen: Infecciones respiratorias
ocularesocularesgastrointestinalespersistentes en tejido linfoide y riñonsistémicas (IC)
• Virus estables a pH ácido, secreciones gástricas y biliares.
• Gran variabilidad antigénica. Respuesta inmune específica de serotipo
Adenovirus: Cuadros clínicos
Especies Serotipos Enfermedad
A 12,18,31 Intestinal
B 3, 7, 11, 14,21,34,35 Inf. respiratoria alta y baja, ocular, persistente en riñón
C 1,2, 5,6 Respiratoria, linfoidea persistente
D 8,9,10,13,15,17,19,20,2230,32,33,36,37,38,3940-49
Queratoconjuntivitis
Nuevos en SIDA
E 4 Conjuntivitis,Respiratoria
F 40,41 Diarrea
Adenovirus
INFECCIONES RESPIRATORIAS. • 5% IRA en niños, 10% requiere hospitalización
• Cuadro más frecuente es la neumonía, pudiendo ser fatales y con secuelas.fatales y con secuelas.
• Otros cuadros: bronquiolitis, laringotraqueítis
• Infecciones intrahospitalarias, en regimientos. Permanecen en las superficies por largos periodos .
• INFECCIONES OCULARES:Fiebre faringoconjuntival Queratoconjuntivitis epidémica
Adenovirus
• INFECCIONES GASTROINTESTINALES:3-15% GE infantiles Ad 31,40,412da causa de diarrea viral después de Rotavirus
Adenovirus.Epidemiología molecular
Estudio del ADN con enzimas de restricción dentro de cadaSerotipo en genotipos .Ad 7 a, AD 7b, Ad7 h etc
Cada genotipo tiene unadistribución geográfica determinada
Origen: recombinación entrediferentes serotipos que coinfecta una célula
Estudios en Argentina
• Adenovirus 2do en importancia después de RSV
• Epidemiología molecular: En 1984 se describió la circulación de un nuevo genotipo del subgénero B: Genotipo Ad7h
• Ad 7h autóctono de Argentina, Uruguay y Chile.Asociado a casos graves de bronquiolitis necrotizante y neumonía mutifocal con alta mortalidad y con secuelas pulmonares.Mortalidad 3 a 24%.
OrthomyxovirusOrthomyxovirus
RNA virus de simple cadena y sentido RNA virus de simple cadena y sentido negativonegativo
8 segmentos genómicos separados.8 segmentos genómicos separados.
Caracterizados por su habilidad para cambiar Caracterizados por su habilidad para cambiar
VIRUS DE INFLUENZAVIRUS DE INFLUENZA
Caracterizados por su habilidad para cambiar Caracterizados por su habilidad para cambiar continuamente:continuamente:
Drift antigénicoDrift antigénico
y a veces drásticamente: y a veces drásticamente:
Shift antigénicoShift antigénico
TIPOS DE VIRUS INFLUENZA TIPOS DE VIRUS INFLUENZA
3 Tipos de Influenza: A, B, C.3 Tipos de Influenza: A, B, C.
Tipos basados en diferencias de 2 Tipos basados en diferencias de 2 proteínas estructurales: Nucleoproteína proteínas estructurales: Nucleoproteína y Matriz.y Matriz.y Matriz.y Matriz.
Influenza A y B son responsables de los Influenza A y B son responsables de los brotes anuales.brotes anuales.
Influenza C produce una enfermedad Influenza C produce una enfermedad mas leve, no asociada a brotes mas leve, no asociada a brotes extendidos.extendidos.
VIRUS DE INFLUENZA AVIRUS DE INFLUENZA A
Subtipos basados en las glicoproteínas de Subtipos basados en las glicoproteínas de superficie, HA y NA.superficie, HA y NA.
Causa infecciones en una variedad de huéspedesCausa infecciones en una variedad de huéspedes
Existen 16 HA y 9 NAExisten 16 HA y 9 NAExisten 16 HA y 9 NAExisten 16 HA y 9 NA
Todos los subtipos de HA y NA se encuentran en Todos los subtipos de HA y NA se encuentran en avesaves
H1 y H3,y N1 y N2 se encuentran actualmente en H1 y H3,y N1 y N2 se encuentran actualmente en virus humanos circulantes.virus humanos circulantes.
NA
HA
A/ Vietnam / 55 / 2004 ( H5N1)
Año de toma de la muestra
Identificación dada por el laboratorio que procesó la muestra
Tipo viralCiudad donde se toma la muestra
Subtipo viral
A) Infección Directa
B) Pasaje en un huésped intermediario sin reasociación
Aves Humanos
C) Reasociación en un huésped intermediario
Virus influenza A Aviar
Virus influenza A Humano
DRIFT DRIFT ANTIGÉNICOANTIGÉNICO
O Variaciones menoresO Variaciones menores
••Proceso continuo y gradual.Proceso continuo y gradual.
••Resulta de la acumulación de mutaciones Resulta de la acumulación de mutaciones puntuales en los genes de HA y NA puntuales en los genes de HA y NA puntuales en los genes de HA y NA puntuales en los genes de HA y NA durante la replicación viral.durante la replicación viral.
••Permite infecciones repetidas a lo largo Permite infecciones repetidas a lo largo de la vida y los brotes recurrentesde la vida y los brotes recurrentes
••La vacuna se actualiza 2 veces al año.La vacuna se actualiza 2 veces al año.
SHIFTSHIFT ANTIGÉNICOANTIGÉNICO
o Variaciones mayoreso Variaciones mayores
Cambio de HA ó NA ó ambas Cambio de HA ó NA ó ambas
> 50 % diferente a cepas anteriores > 50 % diferente a cepas anteriores
ReasociaciónReasociaciónReasociaciónReasociación
Adaptación de un virus de un Adaptación de un virus de un
huésped no humano huésped no humano
Evento esporádicoEvento esporádico
Puede resultar en una pandemiaPuede resultar en una pandemia
AÑO AÑO SUBTIPO SUBTIPO ORIGENORIGEN MUERTESMUERTES**
1918 (española) 1918 (española) H1N1 Reasociación con H1N1 Reasociación con aves aves 500.000 500.000 1947 1947 H1N1 Drift mayorH1N1 Drift mayor1957 (asiática) 1957 (asiática) H2N2 Reasociación con aves 69.000 H2N2 Reasociación con aves 69.000 1968 (Hong Kong)1968 (Hong Kong) H3N2 Reasociación con aves 33.000H3N2 Reasociación con aves 33.000
PANDEMIAS DEL SIGLO XXPANDEMIAS DEL SIGLO XX
1977 (rusa) 1977 (rusa) H1N1 Reemergencia de una H1N1 Reemergencia de una cepa de 1950.cepa de 1950.
1997 (Hong Kong) H5N1 Adaptación al humano 18 casos 1997 (Hong Kong) H5N1 Adaptación al humano 18 casos 6 muertes 6 muertes
1999 (Hong Kong) H9N2 Adaptación al humano 7 casos 1999 (Hong Kong) H9N2 Adaptación al humano 7 casos
**fuente, CDCfuente, CDC--P.P.
?
aviar aviaraviar?
PB1
HA
NA
PB1
HA
Virus Influenza A Pandémicos
? H2N2 H3N2 H1N1
1957
H1N1
1968 19771918
PA
NP
MNS
PB2PB1
HA
NA
PB1
HA
NA
PB1
HA
?
H5
de Tipos y Subtipos de Virus InfluenzaPeríodos de Circulación en Humanos
H9
H7
H5
H7
1933 1977 99
H2
H1
19681957
B
H1
H3
97 200395
GRIPE ESTACIONALGRIPE ESTACIONAL GRIPE AVIARGRIPE AVIAR
Período de Período de incubación incubación
11-- 4 días4 días 2 2 –– 4 y hasta 8 días4 y hasta 8 días
Máxima Máxima excreciónexcreción
1 día antes y 3 días luego 1 día antes y 3 días luego del inicio de síntomas.del inicio de síntomas.
48 hs. pi. Excreción 48 hs. pi. Excreción hasta 16 días desde hasta 16 días desde inicio de síntomas.inicio de síntomas.
TransmisiónTransmisión Persona Persona -- persona vía persona vía aerosoles. Contacto aerosoles. Contacto directo con secreciones directo con secreciones infectadas.infectadas.
Ingest. oral, Ingest. oral, inoculac. intranasalinoculac. intranasal--conjuntival por conjuntival por contacto con aguas contacto con aguas infectadas.infectadas. contacto con aguas contacto con aguas contaminadas, con contaminadas, con fomites de aves fomites de aves infectadas.infectadas.
Rango clínico Rango clínico Asintomática a neumonía Asintomática a neumonía viral 1ª y muerte.viral 1ª y muerte.
ETI mas IRAB. ETI mas IRAB. Diarrea acuosa, Diarrea acuosa, vómitos. Falla vómitos. Falla respiratoria.respiratoria.
Grupos de Grupos de riesgoriesgo
Altas tasas de ataque en Altas tasas de ataque en niños; alta proporción de niños; alta proporción de ancianos hospitalizados. ancianos hospitalizados.
Contacto estrecho Contacto estrecho con aves o con aves o elementos elementos infectados.infectados.
¿Qué se requiere para una pandemia de influenza ?
• Emergencia de una nueva cepa de influenza con una nueva HA o una nueva HA y NA (shift antigénico)
• Susceptibilidad de la mayoría de la población para la nueva cepapoblación para la nueva cepa
• Transmisión humano -humano eficiente del nuevo virus
• Brote simultáneo en el mundo entero Elevadas tasas de morbilidad y mortalidad
• Comienzo de una nueva era viral
Composición genética del nuevo virusComposición genética del nuevo virusComposición genética del nuevo virusComposición genética del nuevo virusComposición genética del nuevo virusComposición genética del nuevo virusComposición genética del nuevo virusComposición genética del nuevo virusinfluenza A (H1N1) influenza A (H1N1) influenza A (H1N1) influenza A (H1N1) influenza A (H1N1) influenza A (H1N1) influenza A (H1N1) influenza A (H1N1)
Agente detectados nStreptococcus pneumoniae 62Haemophylus influenzae 104hRSV A 11hRSV B 1
Se identificó la presencia de otro agente con potencial
patogénico en 152 muestras
hRSV B 1hRV A 1hRV B 4hCoV 229E 1hCoV OC43 2Acinetobacter baumannii 2Serratia marcescens 1Staphylococcus aureus 35S. aureus meticilino resistente 6
S. pneumoniae 54 % de los casos graves
25 % de los casos severos
35.5 % de los casos con S. pneumoniaetenían enfermedad severa p=0.0004tenían enfermedad severa p=0.0004
Ptes. 6-55 años de edad ORR : 125.5 para
enfermedad severa con presencia de
S. pneumoniae
Tratamiento de influenza
• Inhibidores de la proteína M2
Amantadina, rimantadina.
• Inhibidores de la neuraminidasa
Oseltamivir, zanamivir.
DetecciDetecciDetecciDetección de una cepa resistente a oseltamivir n de una cepa resistente a oseltamivir n de una cepa resistente a oseltamivir n de una cepa resistente a oseltamivir en un individuo receptor de transplante de men un individuo receptor de transplante de men un individuo receptor de transplante de men un individuo receptor de transplante de médula dula dula dula osea.osea.osea.osea.
Se estudiaron 3 muestras tomadas 24-8-09, 1-9-09 y 4-9-09.
En el día 70 pos transplante fue diagnosticada la i nfección por AH1N1 pdm y en dos muestras posteriores.
Recibió tratamiento con Oseltamivir a 10, 29 y 47 d ías pos transplante. transplante.
Se pudo amplificar de la última muestra la porción de la NA que contiene la posición 275 .
El segmento amplificado contenía el cambio H274Y qu e indicaría resistencia a Oseltamivir.
Cané y col. Pediatr Infect Dis J. 2010 Apr;29(4):384 .
0
20000
40000
60000
80000
100000
120000
140000
160000
180000
1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 51
Ca
sos
SE
Casos de Enfermedad Tipo Influenza (ETI) por semana. Total país. 2008 a 2010.
2008 2009 20102008 2009 2010
Fuente: Ministerio de Salud, Boletín Epidemiológico semanal
Casos de Neumonía por semana epidemiológica. Total país.
Años 2008 a 2010.
0
2000
4000
6000
8000
10000
12000
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1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 51
SE
Ca
so
s
2008 2009 2010
Vacuna antiinfluenza
• La vacuna anti-influenza es una vacuna trivalente, compuesta por tres virus inactivados, lo que la hace una vacuna de buena calidad inmunógena y con muy pocos efectos secundarios a su administración.
• La composición recomendada por la OMS para la vacuna del hemisferio sur de 2012 fue con 3 cepas de influenza:
• A/California/7/2009(H1N1)- símil; • A/Perth/16/2009(H3N2)- símil; • B/Brisbane/60/2008- símil
Indicación del uso de vacuna influenza
1. Adultos mayores de 65 años
2. Mujeres en segundo y tercer trimestre de embarazode embarazo
3. Niños entre 6 meses y 2 años
4. Personal de salud y cuidadores de hogares de ancianos
5. Personas, adultos y niños, en riesgo de complicaciones por influenza
Personas, adultos y niños, en riesgo de complicaciones por influenza
• - Enfermedades pulmonares crónicas - Cardiopatías congénitas o adquiridas - Terapia esteroidal crónica - Terapia crónica con aspirina - Pacientes con transplantes de órganos sólidos o médula ósea. - Pacientes con transplantes de órganos sólidos o médula ósea.
• - Pacientes inmunosuprimidos con terapia inmunosupresora actual. En estos casos la respuesta humoral es mínima por lo que se recomienda vacunar también a todos los contactos intradomiciliarios de estos pacientes de riesgo. (padres, hermanos, cuidadores, personal de salud)
¿ Cuales son los nuevos virus respiratorios ?
☯ Metapneumovirus
☯ Bocavirus☯ Bocavirus
☯ Coronavirus
☯ Polyomavirus
☯Rinovirus (no nuevo)
Metapneumovirus humano(hMPV)
Se identificó en Holanda en 2001
”A newly discovered human pneumovirus isolated from young children with respiratory tract disease”
Van den Hoogen B, Jan C. de Jong, Jan Groen, Thojs Kuiken, Ronald de Groot, Ron Fouchier, Albert Osterhaus.
Nature 7: 719-724, 2001
Virología Clínica-CEMIC
Microscopía elecrónica de hMPV
Partículas pleomórficasCon envoltura,Espículas cortas
PARAMIXOVIRUS
Virología Clínica-CEMIC
Estudios serológicos: infecta a la población desde hace 50 años.
70% de niños > de 5 años poseen Acs.
Detectado en Norteamérica, Europa, Australia, Canadá, CNorteamérica, Europa, Australia, Canadá, China, Japón, Argentina con frecuencias de 1.5 a 17% en IRA baja
En IRA alta 15%
2º lugar como productor de infección respiratoria aguda en niños Virología Clínica-CEMIC
hMPV: Manifestaciones clínicas
Cuadros clínicos indistinguibles del VSR
Desde infecciones respiratorias altas hasta
bronquiolitis y neumoníabronquiolitis y neumonía
Afecta a todo grupo etáreo
Puede co-infectar con otros virus
Presenta un patrón estacional: invierno y
primaveraVirología Clínica-CEMIC
CoCo--circulación de circulación de hMPVhMPV con otros virus con otros virus respiratorios en niños <5 años respiratorios en niños <5 años
Buenos Aires, 1998Buenos Aires, 1998--20022002
10
15
20
38 62 30n
0
5
10
Ene
Feb
Mar
Abr
May
Jun
Jul
Ago
Sep
Oct
Nov
Dic
RSV AdenovirusInfluenza ParainfluenzahMPV Muestras estudiadas para hMPV
Virología Clínica-CEMIC
Bocavirus
Familia Parvoviridae
Sub-Familia Parvovirinae
Parvovirus (B -19)Género Erythrovirus
DNA scVirus desnudo, icosaedrico
Parvovirus (B -19)Género Erythrovirus
Género Dependovirus
Bocavirus
Descubierto en 2005 por Allander et al
Virus asociados Adeno (AAV)
Género Bocavirus
Bocavirus
☯Descubierto en Suecia en el 2005 por met. molecular es
☯ Todos grupos etarios, especialmente en niños
☯Neumonía, bronquitis, bronquiolitis y IRA alta
☯ Alta frecuencia de co -infecciones con otros virus☯ Alta frecuencia de co -infecciones con otros virus
☯Se lo detectó en casos de diarrea y en sangre
☯ Fines del invierno/principio de la primavera
JID 2006:194,1283. Manning et al.JID 2006:194, 1276 Kesebir et al.JID 2007:195, 1044 . Fry et al.
Distribución estacional de Virus respiratorios. Años 2005 -2006
hBoV circuló todo el año, más frecuente finesinvierno y primavera
Coronavirus Humanos
• HUCoV 229-E (1966)• HUCoV OC 43 (1967)• HUCoV SARS (2003)• HUCoV SARS (2003)• HUCoV NL63 (2004)• HUCoV HKU1 (2005)
Coronavirus
Familia Coronaviridae
Sub-Familia Coronavirinae
Microbiology and Molecular Biology Reviews, Dec. 2005, p. 635–664
Virus RNA +
Envuelto
Picornaviridae: Rinovirus
� RNA +; Desnudo, icosaédrica, + de 100 serotipos, ICAM-1 receptor, cultivo lábil a PH ácido
� IRA alta: resfrío común en todo grupo etáreo� Otitis media en niños, sinusitis en adultos� Otitis media en niños, sinusitis en adultos
�IRA baja: 2ª causa de bronquiolitis Bronquitis, neumonía
Exacerbaciones de asma (niños) Exacerbaciones de EPOC (adultos)Frecuencia de coinfecciones: Alta
RNA + PARA RINOVIRUS EN NIÑOS CON SIBILANCIAS Y CONTROLES
Niños RNA POSITIVO__________________________Con sibilanciasCon sibilanciasAdmisión 52% ( 84/161)
2 semanas despu és 19% (16/84)
Controles sanos (n=79) 12- 35%
Jartti y col J Med Virol 2004
Virus Respiratorios en menores de 5 años con IRA (n =347)Buenos Aires.
24%
10%
41%
Ambulatorios
31%
11%
2%
19%
Hospitalizados RVH
VSR
AdV
Flu A
Flu B
PIV
hMPV 10%
1%
4%5%
5%6%
1%3%
27%
2%2%
0%1%
5%hMPV
RVH+otro
Coinfección
Negativos
� RVH 38%; VSR 28%; hMPV 5.5%;�VSR y RVH > frecuencia en Hospitalizados vs ambulat orios p<0.05�Coinfecciones >en hospitalizados 13% vs 5% y RVH con otros virus
Infección respiratoria aguda viral en niños menores de 5 años. Estudios Epidemiologico en dos centros de Buenos Aires, Arge ntina. Vidaurreta S et al. Arch.Argent.Pediatr. 2011; 109 (4): 296-304.Arch
☯ Virus sincicial respiratorio (Paramixoviridae)
☯ Adenovirus (Adenoviridae)
¿ Normalmente, que virus buscamos en un panel respiratorio ?
☯ Adenovirus (Adenoviridae)
☯ Influenza A (Orthomixoviridae)
☯ Influenza B (Orthomixoviridae)
☯ Parainfluenza (Paramixoviridae)
¿Por qué es importante estudiar ¿Por qué es importante estudiar los virus respiratorios?los virus respiratorios?
• Evitar el uso indiscriminado de antibióticos
•Aislamiento de los pacientes infectados para restri ngir infecciones intrahospitalarias por VSR y AdV.
• En casos de influenza con pocos días de evolución y en pacientes seleccionados, administrar antivirales específicos.
• Permite conocer la situación epidemiológica en una comunidad y las cepas circulantes, lo que tiene importancia en relación a futuras vacunas .
Directos
Métodos rápidos: * IF (indirecta o directa)
* ELISA
Métodos clásicos: Aislamiento en cultivos celulares
(gold standard) (tubo o shell vial) + identificación por
S>97% E>90%
Diagnóstico de Virus respiratorios
(gold standard) (tubo o shell vial) + identificación por
IFI
Métodos nuevos: PCR (multiplex)
Indirectos: Serología Ig M específica Conversión serológica
Obtención de la muestra: esencial !
Aspirado nasofaríngeo Hisopados nasal/faríngeo combinado
¿Cuando? Dentro de los 3 días del inicio del cuadro
/faríngeo combinadoHisopado nasofaríngeoHisopado nasalAspirado traquealLav bronquioalveolarBiopsia
Transporte y conservación
�Medios de transporte para virus: Caldo triptosa/Solución salina Hanks + gelatina ó albúmina al 1% +atbs-antimicóticos 1%
�Transporte: en frío. A 4 C menos de 72 hs. �Transporte: en frío. A 4 C menos de 72 hs. No congelar.
�Conservación por tiempos mayores a 72 hs –70 C ó N2 líquido (Para aislamiento)
MUESTRAS PARA VIROLOGÍA TRANSPORTE EN CONDICIONES
DE BIOSEGURIDAD
• Recipiente con tapa hermética rotulado con marcador indeleble
• Bolsa plástica con cierre• Bolsa plástica con cierre• La orden por separado por fuera de la bolsa• Enfriadores o hielo
ASPIRADO NASOFARINGEO
Métodos RápidosMétodos clásicos
Centrifugación
Cultivo IFI
Centrifugación sedimento
tinción IFI
sobrenadante
HEP 2 o MRC 5 ó MDCK ó LLC-MK2
ACP IFI células de cultivo
Virología Clínica-CEMIC
ACP de RSV
CULTIVO DE VIRUS: “Gold estándar” clásico
Identificación por IFI
Uso de Vs líneas celulares: MDCK, LLC-MK2, A549, F H
ACP: 7-15 ds
Cultivo Clásico: TubosRápido: “shell vial”
Uso de cultivo mixto
Detección directa de antígeno: IFI en ANF
Ventajas: Rápida< costo
Desventaja:
Personal entrenado
Adecuado Nº células
Requiere microscopio IF
IFI : Sensibilidad en relación al método patrón ( aislamiento)Es mayor que otros métodos rápidos:
• Influenza A: 70-95%• Influenza B: 60-85%• RSV: 70-95%
S: 80 - 90 %
E: 95 – 100 %
• RSV: 70-95%• Parainfluenza: 65-85%• Adenovirus: 50%
Ventaja: Rápida< costo
Desventaja: Personal entrenadoAdecuado Nº cel
Rápido (20-30 min)Menor Sensibilidad que IFNo evalúa calidad de muestra
Inmunocromatografía
Detección directa de antígeno rápidaDetección directa de antígeno rápida
Para períodos epidémicosSolamente !
Sensibilidad: 60-70%Especificidad: 80-90%
Depende de edad pacientes, tipo muestra, subtipo virus
Diagnóstico molecular• PCR• Rt-PCR
• PCR en tiempo real. Permite cuantificar
individual
Permite cuantificar
• Multiplex “in house”• Multiplex: 7 virus (Hexaplex), 20 virus o más• Multiplex seguido de hibridización con
sondas en microesferas (Luminex) ó “microarrays”
DIAGNÓSTICO MOLECULAR: Ventajas
� Aumento de la detección viral
Clásicos 30% versus Moleculares 60%
� Detectan infecciones múltiples
� PCRs múltiples: permiten detectar 20-26 virus en una muestra
� Posibilidad de cuantificación
� Permiten estudiar virus que no se cultivan o no hay Mabs (Rinovirus, Entero, Corona virus y los nuevos virus)
Multiplex o PCR en tiempo real Multiplex o PCR en tiempo real comparación con métodos tradicionalescomparación con métodos tradicionales
Población pediátrica:
Diagnostico viral
IFI: 26-38%
Real time PCR: 34-53%
El uso de Real time: aumenta la detección de:RSV 7% Influenza A 13%Adeno 76%PI V 1 64%PIV 2 89%PIV 3 30%
DIAGNOSTICO MOLECULAR: Desventajas
�Costo �Estandarización� Muchas son técnicas “in house” � Muchas son técnicas “in house” �No todos los kit comerciales están
aprobados para diagnóstico�Falta de controles internos�Falsos positivos y negativos