Pruebas bioquimas para enterobacterias.

Lic. Benjamín Castillo

Características de las enterobacterias

Crecen en agar MacConkey Bacilos Gram negativas Desdoblan los nitratos a nitritos Aerobios facultativos Oxidasa (-) Catalasa (+) Fermentan glucosa

Bioquímica

LIA UREA

TSI (Triple Sugar Iron)

• Color: rojo ladrillo

• Inhibidores: no tiene

• Indicador: rojo de fenol

• Sustratos principales: lactosa, sacarosa y glucosa (la proporción en el medio de lactosa y sacarosa es de 10: 1 con la glucosa)

• Sustratos secundarios: tiosulfato sódico, peptona, citrato férrico amoniacal y extractos.

• Se siembra por picadura profunda con aguja y luego se siembra por estrías en el pico

TSI (Triple Sugar Iron)

TSI (Triple Sugar Iron)

TSI (Triple Sugar Iron)

1.- Rx en bacterias glucosa, lactosa y sacarosa +

A/A +;-

Ej.: Escherichia coli

A/A -;-

TSI (Triple Sugar Iron)

A/A ++, ++

Ej.: Citrobacter freundii

TSI (Triple Sugar Iron)

2.- Rx en bacterias solo fermentadoras de glucosa (glucosa +; lactosa y sacarosa -)

K/A -, ++++

Ej.: Proteus mirabilis

K/A -;-

Ej.: Shigella flexneri

TSI (Triple Sugar Iron)

N/N -;-

Pseudomonas

* Este resultado no es de una enterobacteria

3.- Bacilos no fermentadores

LIA (Lysine Iron Agar)

• Color: lila

• Inhibidores: no tiene

• Indicador: púrpura de bromocresol

• Sustratos principales: lisina y glucosa

• Sustratos secundarios: peptona, tiosulfato de sodio, extracto de levaduras.

• Se siembra por picadura profunda con aguja y luego por estrías en el pico

LIA (Lysine Iron Agar)

LIA (Lysine Iron Agar)

LIA (Lysine Iron Agar)

1.- Lisina descarboxilasa +

Lisina cadaverina (alcaliniza el medio)

lisina descarboxilasa

Ej.: Escherichia coli

LIA (Lysine Iron Agar)

2.- Lisina descarboxilasa +, H2S +

Ej.: Salmonella

LIA (Lysine Iron Agar)

3.- Lisina descarboxilasa -

Ej.: Shigella

LIA (Lysine Iron Agar)

4.- Lisina deaminasa +

Lisina alfa cetácidoLisina deaminasa

Ej.: Proteus mirabilis

LIA (Lysine Iron Agar)

N/N -;-

Pseudomonas

* Este resultado no es de una enterobacteria

Citrato de Simmons

• Color: verde

• Inhibidor: no tiene

• Indicador: azul de bromotimol

• Sustrato principal: citrato de sodio

• Sustratos secundarios: fosfato dipotásico, cloruro de sodio, sulfato de magnesio y fosfato monoamónico.

• Se siembra por picadura profunda con aguja y luego por estrías en el pico.

Citrato de Simmons

Citrato de Simmons

Este medio nos permite comprobar la capacidad de la bacteria de utilizar el citrato como fuente exclusiva de carbono.

La degradación del citrato conlleva a la alcalinización del medio y el viraje del indicador azul de bromotimol de verde a azul prusia.

Citrato de Simmons

1.- Citrato positivo:

La bacteria consume el citrato como fuente exclusiva de carbono

Cit- Na+ Cit+ Na+ OH –

alcaliniza el medio

Ej.: Klebsiella pneumoniae

citritasa

Citrato de Simmons

2.- Citrato negativo

La bacteria no consume el citrato como fuente de carbono.

Ej.: Escherichia coli

Úrea

En este medio se observa la capacidad de la bacteria de degradar la úrea por medio de la enzima ureasa formando amoniaco y carbonato de amonio, que alcalinizan el medio por lo cual el rojo de fenol vira a un rojo cereza.

• Bacterias úrea + rápida: Proteus y Providencia

• Bacterias úrea + retardada: Klebsiella, Citrobacter y Enterobacter.

• Bacterias úrea negativa: Escherichia coli, Salmonella, Shigella

Urea

Ej.: Escherichia coli Ej.: Morganella morganiiEj.: Klebsiella pneumoniae

MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)

• Color: lila

• Inhibidor: no tiene

• Indicador: púrpura de bromocresol

• Sustratos principales: ornitina y glucosa.

• Sustratos secundarios: peptona, triptona y extractos.

• Se siembra por picadura profunda

MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)

Este medio se usa para la identificación de enterobacterias en base a su movilidad, producción de indol y actividad de ornitina descarboxilasa.

MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)

M: negativa

I: positivo

O: negativo

Ej.: Klebsiella oxytoca

MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)

M: positiva

I: negativo

O: positiva

Ej: Enterobacter aerogenes

MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)

M: positiva

I: positivo

O: positivo

Ej.: Escherichia coli

GRACIAS!!!!!!