Post on 13-Apr-2018
PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotor
Unidad de Cirugía
Translational Research on PR-therapies Vitoria Group
BTI Biotechnology Institute Unidad de Cirugía Artroscópica
¿Por qué usar factores de crecimiento?
¿Qué sistema emplear?
¿Cómo usarlos?
¿Por qué usar factores de crecimiento?
¿Qué sistema emplear?
¿Cómo usarlos?
¿Por qué usar factores de crecimiento?
¿Qué sistema emplear?
¿Cómo usarlos?
Platelet Rich Plasma
Having a Platelet rich plasma fully characterized is only the
first part of the puzzle.
Platelet Rich Plasma
It is just as important as to understand how to use it,
where, when and how long...
Having a Platelet rich plasma fully characterized is only the
first part of the puzzle.
Platelet Rich Plasma
Infiltration site
Dosage
Duration of the treatment
Volume
Injection numbers...
¿Podemos mejorar los mecanismos de reparación utilizando estrategias biológicas
como los factores de crecimiento?
History
The clinical relevance of PRPs
HISTORIA
STANLEY COHEN RITA LEVI-MONTALCINI
Descubre el NGF en 1948
Descubre el EGF en 1952
Plaquetas + trombina
Fibrinógeno + trombina
COMO TRATAMIENTO (1984)
Úlceras
COMO COADYUVANTE QUIRÚRGICO (1972)
Anastomosis nerviosas
PLASMA AÚTOLOGO
- MATRAS 1972 fibirna adhesiva - FERRARI 1987 cirugia cardiaca - ANDREWS 1996 reparaciones de menisco - ISHIMURA 1997 reparaciones de menisco - AKIZUKI 1997 artroplastias de rodilla - WHITMAN 1997 maxilo-facial - MARX 1998 maxilo-facial
ANITUA 1999 PRGF
PRP totalmente autologo Volumenes pequeños de sangre
Anitua E. PPAD 2001;13:487-493
Anitua E. Implantologie Orale 2001;3:38-43 Anitua E. Maxillaris 2001:39:38-43
Anitua E. Spanish Perio Soc 1997
Anitua E. Int J Oral Maxillofac Implants 1999;14:529-535 Anitua E. Amer Acad Osseoint 1998
The clinical relevance of PRPs
PRGF: First reported 100% autologous PRP prepared from small blood volumes
¿Por qué usar factores de crecimiento?
¿Qué sistema emplear?
¿Cómo usarlos?
Regulated by multiple growth factors
Angiogenesis
Chemotaxis
Proliferation & Differentiation
Synthesis of ECM...
Mechanisms:
Understanding Tissue Regeneration
Growth factors & proteins
VEGF, TGF-B, PDGF, IGF, FGF, EGF, TF, Angiopoietins...
Matrix or scaffold
Fibronectin, integrins, vitronectin...
Controlling cell fate
Fibrin matrix: an excellent scaffold
fibronectin, vitronectin, fibrin...
Platelets: endogenous source of GFs VEGF, TGF-B, PDGF, IGF, FGF, EGF...
Potential of Endogenous Regenerative Medicine
The fibrin scaffold provides for adhesion sites for cells
Discher DE et al. Science 2009;324:1673-1677.
Motility
Contraction
actin-miosin stress fibers
Controlling cell fate
PRGF
IGF-I type I Insulin-like GF TGF-b1 Transforming GF PDGF Platelet Derived GF HGF Hepatocyte GF VEGF Vascular Endothelial GF EGF Epithelial GF CTGF Connective tissue GF bFGF basic Fibroblastic GF
PROLIFERACIÓN CELULAR
1000 cells/cm2
6 days
PPP, (non-activated platelet Poor plasma)
PPCR, Releasate of platelet poor plasma
PRGF, Releasate of platelet-rich plasma
Anitua E, Andía I, Sánchez M, et al.. J Orthopaedic Res 2005; 23: 281-286
LABORATORY EVIDENCE
PRGF
IGF-I type I Insulin-like GF TGF-b1 Transforming GF PDGF Platelet Derived GF HGF Hepatocyte GF VEGF Vascular Endothelial GF EGF Epithelial GF CTGF Connective tissue GF bFGF basic Fibroblastic GF
ANGPT1, VEGF-A, VEGF-B, HGF, AGGF1, CRIM1
ANGIOGÉNESIS PARACRINE MECHANISM
PRGF
IGF-I type I Insulin-like GF TGF-b1 Transforming GF PDGF Platelet Derived GF HGF Hepatocyte GF VEGF Vascular Endothelial GF EGF Epithelial GF CTGF Connective tissue GF bFGF basic Fibroblastic GF
30.000x
30.000x
Síntesis de matriz extracelular
Matriz extracelular Tenoblasto sintetizando colágeno
núcleo
PRGF-Endoret Control
Cultivo de sinoviocitos
MIGRACIÓN CELULAR
16:00 h 16:00 h
PRGF-Endoret Control
Cultivo de sinoviocitos
MIGRACIÓN CELULAR
16:00 h 16:00 h
EFECTO ANTIINFLAMATORIO - ANTAGONIZES THE EFFECT OF: IL-1, TNF, NITRIC OXIDE.
- INHIBITS ADHESION OF NEUTROPHILS TO ENDOTHELIAL CELLS.
- INHIBITS DEGRADATION ENZYMES MMP, ADAMTS.
- INDUCES TIMP. - ESTIMULATES RESTORATIVE ANGIOGENESIS (VGH + HGF).
Bendinelli P et al. J Cell Physiol 2010 Jun 21. [Epub ahead of print]
Molecular basis of anti-inflammatory action of platelet rich plasma on human chondrocytes: Mechanisms of NF-kB inhibition via HGF.
POTENCIAL BACTERIOSTÁTICO
% Inhibition
t4 t8
F1 F3 F3Leu
100
50
0
Leukocytes DO NOT increase the bacteriostatic potential
Experimentación animal
Infiltración con suero fisiológico No se observan cambios macroscópicos
Infiltración con PRGF Aumento vascularización
1801 ± 454*#cells/mm2
1546 ± 421*#(cells/mm2)
463 ± 181 cells/mm2
vaisseaux
vaisseaux
366 ± 116 cells/mm2
Estrategias biológicas de tratamiento
El PRGF estimulará la repoblación celular y la neovascularización del injerto, mejorando la remodelación del tejido y sus propiedades
mecánicas
¿Por qué usar factores de crecimiento?
¿Qué sistema emplear?
¿Cómo usarlos?
Utilización clínica de las proteinas autólogas Platelet-Rich plasma, PRPs ?, Concentrado de plaquetas?, gel de plaquetas?, PCCs, AGF, PG, PRF, PRGF.... Hablamos de lo mismo ??
Utilización clínica de las proteinas autólogas Platelet-Rich plasma, PRPs ?, Concentrado de plaquetas?, gel de plaquetas?, PCCs, AGF, PG, PRF, PRGF.... Hablamos de lo mismo ?? Los PRPs no son un producto unico
Utilización clínica de las proteinas autólogas Platelet-Rich plasma, PRPs ?, Concentrado de plaquetas?, gel de plaquetas?, PCCs, AGF, PG, PRF, PRGF.... Hablamos de lo mismo ?? Los PRPs no son un producto unico
PRGF
Dosis (volumen) Tiempos Método aplicación
Diferencias en la composición de los PRPs y la administración
- Moderada concentración de plaquetas
- Ausencia de leucocitos
- Uso de cloruro cálcico en lugar de trombina exógena
Estandarización y definición del PRGF
¿Por qué sin leucocitos? Degradan la matriz !!!
Fuente principal de metaloproteasas (MMPs)
Red blood cells Platelets Macrophages Neutrophils Lymphocytes
MMP-8 y -9 son conocidas como colagenasas derivadas de neutrófilos. Degradan colágeno tipo I. Liberan radicales libres
¿Por qué usar factores de crecimiento?
¿Qué sistema emplear?
¿Cómo usarlos?
PRGF en fase líquida activada La coagulación se produce in vivo
Forma coagulada
Membrana de fibrina
Pruebas de bioseguridad en modelo animal
No fibrosis. No sinovitis
Patología ligamentosa
Injerto tendinoso
Aplicación PRGF en LCA
Túnel femoral
Túnel femoral
Taco óseo tibial
Zona donante
6-24 meses post-op
PRGF n= 22 CONTROL, n= 15
Convencional PRGF assisted
Hipótesis: el PRGF añade una ventaja biológica para una mejor y más predecible ligamentización del injerto
ST/RI autólogo brocado transtibial de túnel femoral localización de túnel: 10 o 12 horas taco óseo en tunel tibial
6-24 meses tras reconstrucción
Evaluación de injerto en artroscopia de revisión
Evaluación artroscópica Histología
Grosor y tensión Cobertura sinovial
20 meses post-implantación
PRGF Grupo control
Otros hallazgos...
PRGF No PRGF
Patología musculotendinosa
Aplicación en Cartílago
1 2
3 4
Aplicación en hueso
RCTs using PRPs A Brief Discussion
RCTs using PRPs A Brief Discussion
There is still a big confussion with the PRP terminology
There is still a big confussion with the PRP terminology
There is still a big confussion with the PRP terminology
RCTs using PRPs A Brief Discussion
There is still a big confussion with the PRP terminology
The existing PRPs are different (quality & quantity)
The existing PRPs are different (quality & quantity)
PRGF-Endoret
RCTs using PRPs A Brief Discussion
There is still a big confussion with the PRP terminology
The existing PRPs are different (quality & quantity)
PRP is not a magic bullet
PRP is not a magic bullet
PRP is not a magic bullet
PRP is not a magic bullet
¿Podemos tratar una enfermedad degenerativa crónica con sólo una
inyección de PRP?
RCTs using PRPs A Brief Discussion
There is still a big confussion with the PRP terminology
The existing PRPs are different (quality & quantity)
PRP is not a magic bullet: lost in translation
Lost in translation: dosing, timing, adm. protocols...
Lost in translation: dosing, timing, adm. protocols...
before after
Muchas gracias