EVALUACIÓNDE LOS NIVELES DE INMUNOGLOBULINA

A SECRETORA ANTI-Helicobacter pylori Y TEST DE UREASA

EN UNA POBLACIÓN INFANTIL DE CUMANÁ, ESTADO

SUCRE

Introducción

Introducción

Helicobacter pylori Enfermedad

Crónica

OMS 1994

Carcinógeno tipo I

IntroducciónTaxonomía

Reino: Procarionte

Orden: Eubacteriales

Superfamilia: Proteobacteria

Familia: Helicobacteriaceae

Género: HelicobacterSiglo XIX

Bacilo Gram

negativo, forma de

S, móvil, 4-6

flagelos

Introducción

Factor de Virulencia

Citotoxina(CagA)

Codificada por el gen CagA

Gastritis crónica, atrófica, úlcera

péptica

Citotoxinavacuolizante

(VagA)

Codificada por el gen VagA

Formación de las vacuolas en

células del epitelio gástrico

Introducción

Tratamiento erradicadorOmeprazol

Claritromicina

Amoxicilina

Signos y Síntomas

Dolor epigástrico

Náuseas

Vómitos

Pérdida del apetito

Asfixia

Flatulencia

Introducción

Diagnóstico de H. pylori

Técnicas Invasivas

Técnicas no InvasivasPrueba rápida de ureasa

Sensibilidad 98,0%

Especificidad 97,0%

Introducción

Pacientes infectados

por H. pyloriIgG, IgA, IgM

Producen

Indican infección inicial

o activa

ELISA

Sensibilidad 90,0%

Especificidad 85,0%

Introducción

Inmunoglobulinas

La IgA constituye

De 10-15%

La IgAs puede jugar un

papel protector contra la

colonización de H. pylori.

Los individuos con deficiencias

de IgA, pueden mostrar una

mayor frecuencia de infecciones

gastrointestinales causadas por

patógenos entéricos.

Introducción

• Tasas elevadas de infección en la infancia

• 70-80%

Países con bajas

condiciones higiénico-sanitarias

• La infección se concentra en la edad adulta

• 11-60%

Naciones desarrolladas

Se observan mayores tasas de

infección en clases socialmente

bajas con nivel cultural escaso,

con malos hábitos higiénicos-

dietéticos y hacinamiento .60% de la población

venezolana, portadora

de H. pylori

Úlcero-péptica

Gastritis atrófica

Adenocarcinoma

gástrico

Introducción

Observándose una tendencia

al aumento de los niveles de

IgAs, siendo estos niveles

más elevados en pacientes

con gastritis crónica activa y

H. pylori positivo.

Cavazza et al., 2005

Introducción

La detección de IgAs presentó una

buena correlación con los hallazgos

histológicos y bioquímicos; además,

cuando se confrontó con los valores de

IgG en suero, expresó una mejor

correspondencia con la enfermedad.

Ortíz et al., 2009

Objetivos

Objetivos

General

Evaluar la presencia de Inmunoglobulina

A secretora (IgAs) anti- Helicobacter pylori

(H. pylori) y la prueba de ureasa en una

población infantil de Cumaná, estado

Sucre.

ObjetivosEspecíficos

Determinar la presencia de la IgAs anti- H.pylori ensaliva utilizando ensayo inmunoenzimático (ELISA)en la población infantil en estudio.

Determinar mediante la prueba de ureasa lapresencia de H. pylori en las muestras de biopsiasde la población infantil estudiada.

Asociar los niveles de IgAs anti- H. pylori con laprueba de ureasa en la población infantil estudiada.

Metodología

Metodología

Edad: 2-12 años

Ambos sexos

Autorización

firmada por el

representante

Recolección de

la muestra

Población

MetodologíaRecolección de la muestra de saliva

Las muestras fueron

transportadas en dichos envases

estériles y se conservaron a -

20ºC.

Recolección de la muestra de biopsia

Olympus XQ10-OES

La muestra se colocó

en el medio comercial

CLO-test.

Metodología

ELISA

Lectura a 450 nm, con un

lector de ELISA marca

Rayto, modelo RT-

2100C.

100 de saliva

en microplacas

Se lavo 3 veces

con 300 de sln

de lavado

30’ 18-25ºC

100 de

antisuero anti-

IgA

Se lavo 3 veces

con 300 de sln

de lavado

30’ 18-25ºC

100 de sustrato

crómogeno

15’ 18-25ºC

100 de sln de

parada

Procedimiento

Metodología

Procedimiento

CLO-test

Biopsia colocada

en el test

3 h a

37ºC

Transcurrido el tiempo

de incubación, se

colocó a TA.

Positivo

Negativo

(NH2)2CO+2H2O+H+

2NH4++HCO3

-

ureas

a

MetodologíaAnálisis Estadístico

Estadística Descriptiva (Tablas)

Chi-cuadrado ( 2) con un nivel de

confiabilidad de 95,0%

Resultados y Discusión

Resultados y DiscusiónTabla 1. Relación porcentual de los resultados de la Inmunoglobulina A secretora anti-

H. pylori en saliva en pacientes que acudieron al servicio de gastroenterología infantil

del Servicio Autónomo Hospital Universitario “Antonio Patricio de Alcalá”, Cumaná,

estado Sucre, septiembre-diciembre de 2011.

Inmunoglobulina

A secretora anti-

H. pylori

Número (Nº) Porcentaje (%)

Positivo 16 44,4

Negativo 20 55,6

Total 36 100

Cavazza et al., (2005)

Ortiz et al., (2003)

Resultados y DiscusiónTabla 2. Relación porcentual de los resultados de la prueba de ureasa en pacientes

que acudieron al servicio de gastroenterología infantil del Servicio Autónomo Hospital

Universitario “Antonio Patricio de Alcalá”, Cumaná, estado Sucre, septiembre-

diciembre de 2011.

Test de Ureasa

para H. pylori

Número (Nº) Porcentaje (%)

Positivo 13 36,1

Negativo 23 63,9

Total 36 100

Salvatierra et al., (2000)

Sánchez et al., (2008)

Resultados y DiscusiónTabla 3. Asociación entre la Inmunoglobulina A secretora anti-H. pylori y la

prueba de ureasa en pacientes que acudieron al servicio de gastroenterología

infantil del Servicio Autónomo Hospital Universitario “Antonio Patricio de Alcalá”,

Cumaná, estado Sucre, septiembre-diciembre de 2011.

Test de

Ureasa

Inmunoglobulina A secretora

Presencia Porcentaje

(%)

Ausencia Porcentaje

(%)

Total Porcentaje

(%)

2

Positivo 12 33,3 1 2,8 13 36,1

15,97Negativo 4 11,1 19 52,8 23 63,9

Total 16 44,4 20 55,6 36 100

*: p<0,01 (significativo); ns: p>0,01 (no significativo)

Cavazza et al., (2005)

ConclusionesLa prueba de la Inmunoglobulina A secretora anti-H. pylori arrojo excelentes resultados queconcuerdan con la patología del paciente.

La técnica de la Inmunoglobulina A secretora anti-H. puede ser utilizada para elpylori monitoreo deltratamiento durante la infección.

La prueba de ureasa, confiere resultadosdirectamente proporcionales a la cantidad debacterias presentes en la muestra.

La prueba de ureasa y la Inmunoglobulina Asecretora anti-H. pylori son variablesindependientes, no se encuentran asociadasentre sí.

Existe asociación entre la Inmunoglobulina Asecretora anti-H. pylori y la forma activa de lagastristis crónica causada por H. pylori.

RecomendacionesEs recomendable utilizar, al menos, dos métodos para eldiagnóstico de H. pylori.

Promover cursos y campañas de entrenamiento dirigidos a losbioanalistas y a estudiantes para dar a conocer las nuevastécnicas para el diagnóstico de H. pylori.

Para la determinación de H. pylori a través de técnicas noinvasoras y fácilmente aplicables, destaca la Inmunoglobulina Asecretora en saliva por su facilidad de obtención, sensibilidad,especificidad y que además muestra una alta certeza paratamizar pacientes positivos para H. pylori, es por ello que serecomienda el uso de esta técnica en los laboratorios depruebas especiales.

Para futuros estudios, podrían incluirse un número mayor depacientes con un rango de edad más amplio, un número mayorde pruebas a emplear o realizar monitoreo del tratamiento através de la Inmunoglobulina A secretora anti-H. pylori.