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BIBLIO
TECA D
E POSGRADO - U
NT
UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
ESCUELA DE POSGRADO
UNIDAD DE POSGRADO EN CIENCIAS AGROPECUARIAS
Aislamiento, identificación y evaluación de la resistencia
antimicrobiana de Escherichia coli en pollos de
engorde. Piura 2017
TESIS
PARA OBTENER EL GRADO ACADÉMICO DE:
MAESTRO EN CIENCIAS
MENCIÓN:
PRODUCCIÓN Y SANIDAD ANIMAL
Autor: Br. Chiara Vilchez, Fernando Ernesto
Asesor: Dr. Saavedra Sarmiento, Heraclides Hugo
TRUJILLO –PERÚ
2019
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JURADO DICTAMINADOR
__________________________________
Dr. Pablo Javier Morachimo Borrego
PRESIDENTE
__________________________________
Ms. Mario Attilio Narro Saldaña
SECRETARIO
_____________________________________
Dr. Hugo Heraclides Saavedra Sarmiento
ASESOR
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DEDICATORIA
A Dios por darme salud, sabiduria y fortaleza.
A mis padres, por ser mi motivación.
A mis hermanos por su constante apoyo.
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AGRADECIMIENTO
A mi asesor de tesis Dr. Hugo Heraclides Saavedra Sarmiento por su apoyo
incondicional y por ser guía en la realización de la tesis.
A mi mejor amiga, la Dra. Julia Celis Moreno por la constante motivación en mi vida
profesional.
A mis compañeros de la Empresa Chimu Agropecuaria S.A. que contribuyeron de
alguna forma a la realización de esta tesis.
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INDICE
DEDICATORIA ................................................................................................................... iii
AGRADECIMIENTO .......................................................................................................... iv
ÍNDICE .................................................................................................................................. v
RESUMEN ........................................................................................................................... vi
ABSTRACT ........................................................................................................................ vii
I. INTRODUCCIÓN .......................................................................................................... 1
II. MATERIALES Y METODOS..................................................................................... 12
III. RESULTADOS ............................................................................................................ 19
IV. DISCUSION ................................................................................................................. 22
V. CONCLUSIONES ........................................................................................................ 24
VI. RECOMENDACIONES .............................................................................................. 25
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ....................................................................... 26
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RESUMEN
El presente estudio tiene como objetivo aislar e identificar Escherichia coli en
lesiones de órganos internos en pollos de engorde, para evaluar su resistencia a los
antimicrobianos. Para lo cual se determinaron casos de Colibacilosis en base a los signos
clínicos en un total de 50 pollos. Se realizaron necropsias a los pollos seleccionados, y se
hizo hisopado del saco aéreo afectado, ya que la de la lesión encontrada en todos los casos
fue aerosaculitis y se introdujo el hisopo en un tubo de ensayo estéril conteniendo caldo
lactosado e incubado por 24 horas a 37°C. Luego el caldo fue sembrado en medio de cultivo
Agar VRB por 24 horas a 37°C, obteniendo como resultado que el 100 % de las muestras
fueron identificadas como colonias de Escherichia coli. Se tomó cada colonia y fue diluida
en un tubo de ensayo conteniendo cloruro de sodio, la suspensión fue cultivada en agar
Muller Hinton, se utilizaron discos de antibióticos de Sulfatrimetoprim 29 μg, Amoxicilina
25 μg, Oxitetraciclina 30μg, Enrofloxacina 5 μg. Doxiciclina 80 μg, y las placas fueron
cultivadas por 24 horas a 37°C. Basándose en el tamaño del halo de inhibición de
crecimiento de la cepa se determinó que las cepas aisladas de Escherichia coli tienen una
resistencia a 2 antimicrobianos de uso frecuente en la terapia como son la oxitetraciclina en
un 54% y doxicliclina en un 12 % del total de muestras; sólo el 24 % de las muestras mostró
una sensibilidad intermedia a la doxiciclina. El 100 % de las muestras mostraron una
sensibilidad a sulfatrimetoprim, amoxicilina y enrofloxacina, los cuales son los antibióticos
más eficaces para el tratamiento de infecciones bacterianas causadas por Escherichia coli en
pollos de engorde de la provincia de Piura.
PALABRAS CLAVES:
Antimicrobiano, cultivo, cepa, Escherichia coli, aerosaculitis, pollo
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ABSTRACT
The present study aims to isolate and identify Escherichia coli from internal organ lesions
in broilers to assess its resistance to antimicrobials. For this aim, cases of Colibacillosis were
determined based on clinical signs in a total of 50 broilers. Necropsies were performed on
the selected chickens, and swab samples were taken from the air sack because airsacculitis
was the common finding in all cases. Each swab was placed in a sterile test tube containing
lactose broth and incubated for 24 hours at 37 ° C, then plated in VRB Agar culture medium
for 24 hours at 37 ° C. 100% of the samples were identified as colonies of Escherichia coli,
then each colony was taken from the plate and diluted in a test tube containing sodium
chloride. This suspension was plated in Muller Hinton agar with antibiotic discs of
Sulfatrimethoprim 29 μg, Amoxicillin 25 μg, Oxytetracycline 30 μg, Enrofloxacin 5 μg and
Doxycycline 80 μg. The plates were cultured for 24 hours at 37 ° C. Based on the size of the
zone of inhibition it was determined that the isolated strains of Escherichia coli are resistant
to two antimicrobials frequently used in therapy: oxytetracycline (54%) and doxycycline
(12%), doxycycline (24%) shown intermediate sensitivity. Sulfatrimethoprim, amoxicillin
and enrofloxacin, shown a sensitivity of 100%, which indicate that these are the most
sensitive antibiotics for the treatment of bacterial infections caused by Escherichia coli in
broilers in the province of Piura.
KEYWORDS:
Antimicrobial, culture, strain, Escherichia coli, airsacculitis, broilers
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I. INTRODUCCIÓN
La avicultura en el Perú es una de las actividades pecuarias con mayor crecimiento en la
última década. En la provincia de Piura hay una crianza de 1 233 000 pollos de carne al
mes (MINAGRI 2017). Si bien se presenta un crecimiento sostenido de la producción,
aún se tienen limitaciones principalmente del tipo sanitario, ocasionando grandes
pérdidas económicas. Dentro de los patógenos bacterianos de mayor importancia se
encuentra Escherichia coli, causante de la colibacilosis aviar.
La colibacilosis es un síndrome complejo caracterizado por lesiones multiorgánicas, tales
como aerosaculitis asociada a pericarditis, perihepatitis y peritonitis, que resulta en alta
morbilidad y mortalidad (Jansen et al., 2003). Este síndrome, causado por cepas
patogénicas de Escherichia coli, puede presentarse tanto de forma local como sistémica
(Barnes et al., 2008). Escherichia coli, es un habitante natural del tracto intestinal de las
aves, pero algunos serotipos pueden tornarse patógenos debido a la presencia de algunos
factores predisponentes (Apolo 2015).
Se sabe que la colibacilosis aviar es una enfermedad secundaria y que el agente etiológico
es un oportunista; sin embargo, nuevas evidencias sugieren que cepas patogénicas pueden
actuar como agentes primarios y producir la enfermedad (Ewers et al., 2003;
Kariyawasam et al., 2006; Barnes et al., 2008).
En medicina veterinaria, es una práctica habitual el uso de antimicrobianos para la
prevención, control y tratamiento de enfermedades infecciosas. También su uso ha sido
extendido como promotores del crecimiento en aves.
La resistencia de los patógenos a los antibióticos es un grave problema que enfrenta la
avicultura en la actualidad; por lo tanto, conocer el patógeno será la base principal en la
lucha contra esta afección ya que permitirá utilizar el antibiótico correcto respetando los
tiempos de retiro.
Ante la evidencia que el principal agente microbiano de enfermedad bacteriana en pollos
de engorde es Escherichia coli, el objetivo del presente estudio fue aislar, identificar y
evaluar la resistencia antimicrobiana de Escherichia coli en pollos de engorde de la
provincia de Piura.
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1.1.Colibacilosis
La colibacilosis aviar es una enfermedad infecciosa ocasionada por Escherichia coli. La
importancia de la colibacilosis en animales radica en las grandes pérdidas económicas
que se generan debido a la disminución de determinados parámetros productivos, pérdida
de peso, aumento en los índices de conversión y de la mortalidad y por los elevados
costos de los tratamientos (Blanco et al., 2002).
La mayor parte de los cuadros clínicos de colibacilosis son de origen respiratorio, aunque
no se descarta que algunos sucedan al atravesar las bacterias la pared intestinal (Blanco
et al., 2002). La colibacilosis suele ser considerada como una enfermedad secundaria
(Barnes et al., 2003).
1.1.1. Agente causal
Escherichia coli (E. coli) es la especie tipo del género Escherichia. Que pertenece al
Filum Proteobacteria, en la Clase Gammaproteobacteria, Orden Enterobacteriales,
incluido en la Familia Enterobacteriaceae. cuyas características generales son las
siguientes (Blanco et al., 2002),
Bacilos Gram negativos, catalasa positivos y oxidasa negativos.
No formadores de esporas.
Anaerobios facultativos, con un amplio rango de temperatura de incubación.
Inmóviles o móviles mediante flagelos perítricos.
Necesidades nutricionales sencillas.
El criterio que se ha utilizado durante muchos años para diferenciar los E. coli
patógenos de los comensales, ha sido la determinación del antígeno somático, pero
ha sido necesario conocer la fórmula antigénica completa, así como la determinación
de otras características de virulencia, para considerar a una cepa como patógena. Las
cepas patógenas de E. coli se engloban en diferentes grupos o categorías, con unas
características y mecanismos de virulencia determinados que actúan conjuntamente
para potenciar su patogenicidad, produciendo infecciones y síndromes diferentes.
(Blanco et al., 2002)
1.1.2. Antecedentes
Desde finales del siglo pasado se conoce la capacidad de E. coli de producir
enfermedades en las aves domésticas. En 1885, Theodor Escherich consiguió aislar
E.coli en muestras clínicas humanas, denominándolo inicialmente como Bacterium
coli commune (Blanco et al., 2002)
En 1894, Lignieres describió una enfermedad en gallinas causada por E. coli y se
confirmó, mediante estudios in vivo, su patogenicidad en las aves. En 1897 se
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detectan casos de pericarditis en pollos y pavos, con aislamientos de E. coli en
algunos casos. Claussen, en 1907, concluyó que en determinadas condiciones E. coli
podría atravesar la pared intestinal, adquiriendo factores que le confirieran virulencia
y causar septicemias en gallinas (Sojka et al., 1961). Esto ocurría especialmente
cuando las defensas del animal disminuían como consecuencia de enfermedades,
situaciones de hambre, sed, frío, malas condiciones de ventilación, etc. Es decir, ya
se puntualizaba sobre la importancia de las medidas de bioseguridad deficientes y los
factores predisponentes en el desarrollo de la colibacilosis (Blanco et al., 2002).
En 1947, Kauffmann propone una forma de diferenciar las cepas de E. coli en base a
la determinación de los antígenos de superficie. Esta forma de clasificación resultó
muy útil en los estudios epidemiológicos y de patogénesis de E. coli, facilitando la
diferenciación entre cepas virulentas e inocuas. Estudios realizados pusieron de
manifiesto la importancia de determinados serotipos (O1, O2 y O78) en la virulencia
de las cepas aviares. Sin embargo, la elevada diversidad de serotipos implicados en
los cuadros clínicos de colibacilosis ha hecho necesario el desarrollo de nuevas
técnicas que indiquen el grado de virulencia de las cepas, mediante la determinación
de genes de virulencia. La virulencia designa el carácter patogénico de un
microorganismo, es decir, su capacidad de causar enfermedad. (Blanco et al., 2002)
Estudios realizados en la década de 1980 sobre los mecanismos de patogenicidad de
E. coli confirman la teoría en la se defiende que aquellas cepas del microbiota normal
intestinal que presenten determinados factores de virulencia serían las responsables
de provocar enfermedad (Morris et al., 1985; Blanco et al., 1991). Hasta mediados
de la década de 1990, la gran mayoría de los estudios sobre colibacilosis se centraban
en la producción de broilers (producción avícola de carne). A pesar de la importancia
de la enfermedad, se desconocen muchos de los mecanismos de virulencia de las
cepas aviares de E. coli. En años recientes se han descubierto varios genes implicados
en mecanismos de virulencia de la bacteria, adquiriendo los E. coli patógenos aviares
la denominación específica de APEC, Avian Pathogenic Escherichia coli. (Blanco et
al., 2002)
Brito y col (2011) realizaron un estudio en Brasil sobre resistencia antimicrobiana y
patogenicidad de muestras de Escherichia coli aisladas de lesiones de celulitis en
pollos, donde verificaron la resistencia antimicrobiana y la patogenicidad de 48
muestras de Escherichia coli aisladas de celulitis de pollos de engorde. La resistencia
antimicrobiana se evaluó la a través del método de difusión del antibiótico
impregnado en disco y la patogenicidad bacteriana a través de pruebas en pollos de
un día de nacidos. Concluimos que todas las muestras de Escherichia coli fueron
patogénicas para los pollos y que los fármacos de mayor eficacia in vitro fueron el
florfenicol y el ceftiofur. Estas bacterias presentaron una alta resistencia a la
tetraciclina y a la doxiciclina.
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Medina E. (2011) realizó un estudio en España sobre Resistencia antimicrobiana en
aislados de Escherichia coli de aves, encontrando mayor porcentaje de resistencia a
la doxicilina.
1.1.3. Zoonosis
E. coli es la especie bacteriana predominante del microbiota normal aerobia y
anaerobia facultativa del aparato digestivo de la mayor parte de los animales y del
hombre y, por tanto, se elimina por las heces al exterior. Se trata, dependiendo de los
serotipos, de una de las zoonosis alimentarias más frecuentes e importantes en el
hombre debido a la gravedad de los cuadros clínicos y al número de afectados,
pudiendo suponer un grave riesgo para la salud pública. En el hombre, la colibacilosis
entérica se produce por la penetración de Escherichia. coli a través de los alimentos
permaneciendo en el epitelio intestinal causando, en general, cuadros de diarrea que
en casos más graves pueden evolucionar a disentería, colitis hemorrágica (CH), el
síndrome urémico hemolítico (SUH) e incluso a púrpura trombocitopénica (PTT).
Estas cepas, constituyen la principal causa de infecciones urinarias (ITU), meningitis
neonatales, septicemias, peritonitis, mastitis, neumonía, etc. (Blanco et al., 2002).
1.1.4. Epidemiología de la colibacilosis
La mayor parte de los cuadros clínicos de colibacilosis son de origen respiratorio. La
colibacilosis suele ser considerada como una enfermedad secundaria que es
producida por diversos factores.
Tabla 1. Factores predisponentes para el desarrollo de una infección por E. coli
(Barnes et al., 2003)
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Todos estos factores conllevan a una situación óptima para el desarrollo y
transmisión de la colibacilosis.
Además de ser considerada una enfermedad secundaria, Barnes et al., 2003,
describen la colibacilosis aviar como una entidad propia, defendiendo a E. coli como
un agente patógeno primario. Se trataría de una enfermedad septicémica
caracterizada por una mortalidad aguda y presencia de poliserositis, sin afectación en
la producción. Se ha logrado reproducir experimentalmente la enfermedad en aves
libres de microorganismos patógenos específicos (SPF) mediante inoculación por
aerosol de E. coli en sacos aéreos y también oralmente, determinando que los brotes
de elevada mortalidad no se encuentran relacionados necesariamente con otras
enfermedades predisponentes. Numerosos autores hacen referencia al origen cloacal
de las cepas patógenas causantes de septicemias en aves. Las cepas patógenas
presentan unas características diferenciales que no siempre poseen los aislados
comensales ni aquellas cepas con baja o escasa patogenicidad. Hay estudios en los
que se indica que el 10-15% de la población de bacterias coliformes intestinales
pertenece a serotipos patógenos (Barnes et al., 2003).
Las cepas patógenas pueden diseminarse ampliamente por la formación de aerosoles
a partir de las heces contaminadas y adherirse a las células del epitelio del tracto
respiratorio superior mediante fimbrias F1, iniciándose la colonización bacteriana.
En las aves, las zonas de intercambio de oxígeno de los sacos aéreos y de los
pulmones son dos puntos altamente susceptibles a la colonización e invasión
bacteriana debido a la inexistencia de macrófagos alveolares que puedan contener la
infección a este nivel y a que la barrera existente entre la región capilar aérea y la
sangre es extremadamente fina. Posteriormente se produce la diseminación de E. coli
por el torrente circulatorio y la colonización de órganos internos, gracias a la
capacidad de adhesión mediada por fimbrias P (que se expresan en el tracto
respiratorio inferior y en los órganos internos), es decir, en fases más avanzadas de
la infección (Barnes et al., 2003).
1.1.5. Patogenia
E. coli es una bacteria cosmopolita que coexiste con la biota intestinal por lo que se
disemina con facilidad en el medio ambiente de las aves. En el surgimiento de la
enfermedad influyen las condiciones de temperatura extrema, mala ventilación,
hambre, sed, sobrepoblación, exceso de polvo y de vapores de amoniaco y cualquier
otro factor que estrese a las aves y disminuya sus defensas. Es frecuente encontrar
infecciones con asociadas a estados inmunes depresivos cuando hay infección con el
virus de la enfermedad de Gumboro, pero la gran mayoría de casos Escherichia coli
se encuentra asociado a infecciones con Micoplasma (Mejía, 2012).
Las aves se infectan después de respirar las bacterias, mismas que se fijan en la
mucosa de las vías respiratorias superiores, colonizando el epitelio respiratorio
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traqueal, después pasan a pulmones y sacos aéreos, causando en combinación con
micoplasma la enfermedad de los sacos aéreos o aerosaculitis. A su vez, esta
enfermedad se puede complicar en septicemia aguda, emigrando la bacteria a
diversos órganos parenquimatosos, produciéndose perihepatitis, pericarditis y
poliartritis, aunque el tipo de lesiones depende del curso de la enfermedad. Son
muchos los cuadros específicos en los cuales puede estar complicada la E. coli
(Lopez, 1975).
Las infecciones de E. coli en las aves se compone de cuatro etapas:
1. Colonización de las vías respiratorias.
2. Cruce del epitelio respiratorio y penetración de la mucosa de los órganos
respiratorios. Pude pasar las células superficiales de los sacos aéreos.
3. Supervivencia y multiplicación en el torrente sanguíneo y en los órganos internos.
4. Producción de efectos nocivos sobre las células de los órganos que invade y donde
se reproduce, con las consiguientes lesiones macroscópicas por las cuales se
identifica a la infección en aves: aerosaculitis, pericarditis, perihepatitis, artritis
purulenta, salpingitis (López, 1975).
1.1.6. Sintomatología y lesiones
La característica clínica más importante de la colibacilosis aviar es la colisepticemia
y se produce por la afectación de numerosos órganos internos como el corazón,
hígado, bazo, ovario, etc. Existe una gran diferencia entre las variedades de E. coli y
su habilidad para causar enfermedad, entre los dos extremos se encuentran todos los
rangos de patogenicidad. Los síntomas varían con el lugar preferente de localización
de la infección, reconociéndose las siguientes formas (Barnes et al., 2003):
Forma respiratoria
La colibacilosis aviar, suele iniciarse a nivel del tracto respiratorio. La alteración de
la mucosa del aparato respiratorio, debida a la acción de determinados agentes,
supone una importante vía de entrada para E. coli. Cuando E. coli atraviesa la mucosa
del tracto respiratorio y alcanza el torrente circulatorio, se origina una infección
sistémica generalizada o colisepticemia, donde se observan lesiones como
perihepatitis, peritonitis y pericarditis fibrinosa. A nivel respiratorio las lesiones se
localizan en la tráquea, pulmones y sacos aéreos, pudiendo presentar estos últimos
un aspecto opaco y con exudado caseoso de intensidad variable. Suele afectar a
animales jóvenes, de forma aguda, alcanzándose valores aproximados del 50% de
morbilidad y del 5-10% de mortalidad. Entre los síntomas clínicos que se
manifiestan, se puede observar dificultad respiratoria o disnea acompañada de
estertores. (Barnes et al., 2003).
Forma genital o reproductora
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La principal vía de infección del oviducto suele producirse por contaminación fecal
a partir de la cloaca. También están descritas otras vías de infección como la
producida a partir del tracto respiratorio por invasión, diseminación y colonización
de órganos internos e incluso por el paso de las bacterias a través del lumen intestinal.
Se han descrito casos de infecciones ascendentes desde el oviducto a la cavidad
peritoneal, cursando con peritonitis. (Barnes et al., 2003).
Es una enfermedad crónica y de curso lento, con una mortalidad en torno al 2-3%.
Los rendimientos productivos de las gallinas ponedoras disminuyen ya que se
produce una leve caída de la puesta. El oviducto presenta una notable congestión y
dilatación de la mucosa pudiendo encontrar un contenido purulento en el interior,
incluso masas caseosas, en animales mayores. (Blanco et al., 2002).
Otras presentaciones menos frecuentes de la colibacilosis son:
Enteritis: habitualmente suele existir una lesión primaria a nivel intestinal
debido a la acción de virus entéricos (Barnes et al., 2003), lo que se convierte
en un excelente factor predisponerte para E. coli. Se produce una fuerte
inflamación del intestino, enteritis catarral, acompañada de un engrosamiento
de la pared. El principal síntoma es una diarrea severa acompañada de
mucosidad excesiva.
Sinovitis y artritis: se produce una inflamación a nivel de los tendones y
articulaciones de las aves (Blanco et al., 2002). Puede afectar a los espacios
vertebrales causando espondilitis e incluso cursar con parálisis (Barnes et al.,
2003). Suele producirse tras una colisepticemia y en combinación con otros
microorganismos, como los pertenecientes a los géneros Staphylococcus (S.
aureus) y Mycoplasma (M. synoviae).
Coligranulomatosis: se presenta ocasionalmente y se caracteriza por la
aparición de nódulos de tamaño considerable en el hígado, ciego, duodeno y
mesenterio (Blanco et al., 2002). Aunque los síntomas y lesiones dependen
de la extensión del tejido afectado, suele diagnosticarse sólo a través de la
necropsia.
Onfalitis (infección del ombligo): la infección del huevo en formación se
produce gracias a la transmisión transovárica (Barnes et al., 2003)
generándose una infección del saco vitelino y una onfalitis (Blanco et al.,
2002), produciendo un incremento de la mortalidad embrionaria.
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1.1.7. Diagnóstico
El diagnóstico presuntivo de la colibacilosis puede realizarse en función de la
sintomatología y, aunque las lesiones clínicas son bastante significativas, siempre es
conveniente realizar la confirmación mediante el análisis microbiológico de las
muestras tomadas. El diagnóstico diferencial es de vital importancia ya que muchos
agentes infecciosos como Aerobacter spp., Klebsiella spp., Salmonella spp., Proteus
spp., Bacillus spp., han sido aislados a partir de lesiones compatibles con
colibacilosis. Así, la pericarditis puede producirse en infecciones por
Chlamydophilas pp., y en determinadas condiciones, por Pasteurellas pp. y
Streptococcus spp. M. gallisepticum y Chlamydophilas pp. han sido aislados a partir
de lesiones de aerosaculitis y Pasteurella spp., Salmonella, spp. Y Streptococcusspp.
podrían producir cuadros agudos de septicemia. (Barnes et al., 2003).
El diagnóstico de las colicepticemias y otras infecciones colibacilares en el
laboratorio se hace a base de heces fecales, secreciones faríngeas o traqueales,
muestras órganos internos como: pulmón, bazo, hígado, bilis contenido intestinal,
etc. (Blanco et al., 2002)
1.1.8. Aislamiento e identificación
Tras la toma de muestras, se procede al aislamiento en medios de cultivo, los más
utilizados son: Agar Columbia con 5% de sangre de cordero, excelente medio de
cultivo general (no selectivo) altamente enriquecido en el que se puede valorar la
capacidad hemolítica de los microorganismos patógenos. Agar BHI “Brainheart
infusión agar”, medio muy nutritivo excelente para el crecimiento y aislamiento de
microorganismos exigentes y Agar Luria-Bertani (LB), de gran valor nutritivo y
óptimo para el crecimiento y mantenimiento de E.coli sobre todo en protocolos
moleculares Medios de cultivo selectivos diferenciales como el Agar McConkey (. Se
utiliza fundamentalmente para el aislamiento de miembros de la Familia
Enterobacteriaceae y diferenciación de E. coli de otros patógenos intestinales de la
misma familia. Los componentes selectivos lo constituyen el Cristal Violeta
(inhibidor de los microorganismos Gram positivos) y las Sales Biliares. (Blanco et
al., 2002).
Identificación con pruebas bioquímicas
Los medios para identificación de bacterias son empleados para detectar reacciones
bioquímicas, con carácter diferencial de grupos, géneros o especies microbianas,
mediante el viraje de color del indicador presente en el medio, demostrando algunas
de sus características. Alguna de las pruebas que se utilizan con mayor frecuencia
son las que determinan la producción de Indol a partir del triptófano, la fermentación
del 14 ácido fórmico (rojo de metilo y Voges-Proskauer) y la utilización del citrato
de simmons como única fuente de carbono (Blanco et al., 2002). Los medios
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diferenciales son: TSI (Triple 9zúcar Hierro), Citrato de Simmons, SIM (Sulfuro-
Indol- Motilidad) y Agar Urea. Cuadro 3. Reacciones bioquímicas del E. coli con los
medios diferenciales TSI, Citrato de Simmons, SIM y Agar Urea
Métodos moleculares
Son técnicas moleculares destinadas a la identificación de pequeñas zonas de
heterogeneidad dentro del cromosoma bacteriano. Con el fin de complementar a los
métodos tradicionales de tipificación (serotipado,biotipado y fagotipado) se han
desarrollado, en los últimos años, una serie de técnicas moleculares basadas en la
caracterización del genotipo de los microorganismos mediante el análisis del ADN
cromosómico y plasmídico. Entre los métodos de tipificación basados en la
caracterización del ADN plasmídico podríamos citar la identificación de plásmidos
que contienen genes de virulencia. Más recientemente, se han desarrollado técnicas
moleculares destinadas a la identificación de pequeñas zonas de heterogeneidad
dentro del cromosoma bacteriano. Los métodos basados en el estudio del ADN
cromosómico utilizados en el presente estudio son los métodos basados en la reacción
en cadena de la polimerasa (PCR) (Blanco et al., 2002).
1.1.9. Medidas preventivas y tratamiento
Para prevenir la colibacilosis es imprescindible conocer y eliminar las fuentes de
contaminación, así como evitar factores predisponentes que contribuyan a la
aparición de la enfermedad (Barnes et al., 2003). Estos parámetros, cuando no son
adecuados, tienen una gran repercusión en el bienestar animal e influyen
negativamente en la producción, incrementando la susceptibilidad a las infecciones
por E. coli (Blanco et al., 2002).
La prevención de la colibacilosis puede llevarse a cabo mediante el control y
vigilancia de los siguientes factores fundamentales (Barnes et al., 2003):
Manejo
Densidad de animales correcta, ventilación eficaz, ausencia de suciedad y polvo,
retirada periódica de gallinaza, intensidad lumínica y temperaturas adecuadas,
suministro de agua y pienso, programas de desinfección, desinsectación y
desratización adecuados. El polvo con contaminación fecal se considera una de las
principales vías de infección y diseminación de la enfermedad (Blanco et al., 2002).
Profilaxis y estatus sanitario
Debe minimizarse la incidencia de enfermedades como la coccidiosis, bronquitis
infecciosa, Enfermedad de Newcastle, Gumboro, M. gallisepticum, M. synoviae y
micosis ya que son enfermedades que predisponen al desarrollo de la colibacilosis.
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Por tanto, los programas de vacunación deben ser los adecuados para la explotación.
Existen en el mercado distintas vacunas inactivadas frente a E. coli (Ceva, Hipra,
Syva), pero es importante tener en cuenta que la vacuna sólo protegeeficazmente
frente a las cepas homólogas de E. coli y no frente a cepas heterólogas de otros
serotipos, quizá debido al elevado número de serotipos existentes (Buxadé et al.,
2000; Biarnés, 2006).
Debido a la problemática en cuanto al control de esta enfermedad mediante
vacunación, se han realizado estudios de valoración de los antígenos óptimos para la
elaboración de las vacunas, como adhesinas F1 y P, proteína receptora de aerobactina
y lipopolisacáridos (LPS) obtenidos de la cepa E. coli O78, indicando su relevancia
a la hora de proteger contra las infecciones del tracto respiratorio causada por cepas
patógenas de E. coli (Kariyawasam et al., 2002).
Los programas de nutrición
Es importante la aplicación de fórmulas nutricionales correctas para cada fase de
producción, así como un buen suministro de pienso a los animales. Un suministro
incorrecto del pienso podría provocar estrés en los animales favoreciendo la
aparición de enfermedades. La realización de controles del pienso y materias primas
es esencial para garantizar una buena calidad (Barnes et al., 2003).
La terapia antimicrobiana
Es una herramienta indispensable para reducir las importantes pérdidas ocasionadas
por las infecciones por E. coli en la industria avícola (Amara et al., 1995; Blanco et
al, 1997a; Zhao et al., 2005). E. coli posee la sensibilidad característica de las
bacterias Gram negativas, siendo parte de las cepas sensibles a penicilinas,
cefalosporinas, aminoglucósidos, tetraciclinas, cloranfenicol, colistina, sulfamidas,
trimetoprim y quinolonas (Blanco et al., 2002). Se ha demostrado que varios factores
contribuyen a la virulencia de las cepas aviares de E. coli, y muchos se encuentran
alojados en plásmidos de conjugación de gran tamaño. En ellos, también pueden
encontrarse genes responsables de resistencias a agentes antimicrobianos, y es
posible que el uso de éstos seleccione de manera específica las cepas de E. coli que
contienen estos plásmidos, aumentando así la persistencia de estas entre las aves
(Barnes et al., 2003).
Buxadé et al., (2000) señala que los casos de colibacilosis suelen ser recurrentes y
los lotes deben ser medicados con frecuencia a lo largo de su vida productiva.
Aparentemente, según algunos autores, la utilización masiva de antimicrobianos
junto con la práctica habitual de utilizarlos a concentraciones sub-inhibitorias con
fines profilácticos, ha incrementado considerablemente las resistencias bacterianas.
Es decir, el empleo inadecuado de antibióticos podría considerase como una
importante fuente de emergencia, selección y diseminación de resistencias.
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La utilización de antimicrobianos puede producir el efecto indeseado de seleccionar
cepas bacterianas resistentes a los mismos, ya sean o no patógenas. Este fenómeno
se puede producir sobre bacterias resistentes que de forma natural se encuentren en
el medio antes de que se produzca el tratamiento antimicrobiano o bien porque se
generan durante el proceso infeccioso y su tratamiento. Las bacterias responden ante
la presión selectiva ejercida por los antibióticos de forma que en el nuevo ambiente
sólo sobreviven los microorganismos más aptos en sentido evolutivo, es decir los
más resistentes (Johnson et al., 2004; Schroeder et al., 2004)
Estas resistencias están codificadas y reguladas a nivel genético y por tanto son
heredables. Además, y debido a los mecanismos de transmisión y recombinación
genética que poseen los procariotas, estos genes de resistencia pueden diseminarse
horizontalmente a otras bacterias, multiplicando exponencialmente el riesgo de
encontrar bacterias patógenas resistentes a los antibióticos en los animales y su
entorno (Barnes et al., 2003).
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II. MATERIALES Y METODOS
2.1 Objeto de estudio
El objeto de estudio fueron los pollos de carne de la línea Cobb 500 de edad
comprendía entre 21 y 28 días, de los cuales se realizaron muestreos de lesiones
compatibles con colibacilosis
2.2 Instrumentación
2.2.1 Materiales de campo
Material Cantidad
Caja de cartón 10 unidades
Guantes estériles 25 unidades
Overol 1 unidad
Botas 1 par
Marcadores permanentes 2 unidades
Libreta de anotaciones 2 unidades
Lapiceros 1 unidad
Cámara fotográfica 1 unidad
2.2.2 Material de laboratorio
Material Cantidad
Placas Petri 100 unidades
Tubos de ensayo 50 unidades
Matraz Erlenmeyer 2 unidades
Gradillas 2 unidades
Asas y mangos de kolle 2 unidades
Mechero de alcohol 2 unidades
Hisopos estériles 150 unidades
Pinzas 2 unidades
Cloruro de Sodio 2 litros
Caldo lactosado 100 gramos
Agar Agar VRB (Violeta
cristal-Rojo neutro-Bilis-
Lactosa)
500 gr
Agar MullerHinton 500 gr
Alcohol de 96º 1 litro
Agua destilada 5 litros
Agua oxigenada 1 litro
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Discos de actividad
antibiótica (Doxicilina,
oxitetraciclina, amoxicilina,
sulfatrimetoprim,
enrofloxacina).
50 unidades
2.2.3 Equipos
Equipo Cantidad
Autoclave 1
Incubadora 1
Refrigeradora 1
Balanza digital 1
Cocina eléctrica 1
Olla 1
Baño maría 1
Horno 1
Estufa 1
2.2.4 Material de oficina
2.2.5 Lugar
Los pollos fueron tomados en una empresa en la zona de Piura, que tiene una
población semanal de 250 000 pollos. La empresa cuenta con laboratorio de
análisis de muestras en la zona de Piura.
Material Cantidad
Lapicero marcador 4
Lápiz 1
Borrador 1
Calculadora 1
Regla 1
Laptop 1
Papel A4 100
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2.3 Métodos y técnicas
2.3.1 Animales utilizados
Se seleccionaron pollos que tengan signos clínicos compatibles de
colibacilosis (depresión, postración y secreción nasal). Por cada centro
productivo se muestreó 5 pollos sin tratamiento antimicrobiano previo,
haciendo un total de 50 animales.
Se trabajó con una pequeña ficha de registro de muestra, donde consignaba
granja de procedencia, sintomatología clínica, brote o caso aislado, órgano
tomado para hisopado. (ver anexo)
Tabla 2. Ficha de registro de muestras de pollo de engorde (elaboración
propia)
FICHA DE REGISTRO DE MUESTRA
Granja:
Fecha:
Edad de las aves:
Sintomatología:
Brote (solo marcar): SI NO
Caso aislado (solo marcar): SI NO
Tratamiento (solo marcar): SI NO
Órgano hisopado:
El muestreo fuero realizado por conveniencia no fue realizado de forma
aleatoria ni al azar.
Las muestras fueron tomadas en el periodo comprendido entre junio del
2017 y octubre del 2017.
2.3.2 Transporte de muestras y necropsia de aves
Cada 15 días se realizaban muestreos de pollos que aparentemente
podían tener contaminación bacteriana: secreción nasal, depresión y
depresión (pollos con características viables que resistan el transporte y
puedan llegar vivos a laboratorio para su procesamiento). Los pollos
seleccionados se trasladaron al laboratorio en una caja de cartón rotulada.
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Se realizó sacrificio humanitario a las aves, mediante el método de
dislocación cervical (método de sacrificio considerado por la sociedad
mundial para la protección animal, Charli Beatriz Ludtke, 2015).
Se realizó la necropsia y se evaluaron las lesiones observadas, según el
protocolo de necropsia descrito por Natalia Majó y Roser Dolz, 2011.
2.3.3 Procesamiento de muestras
Una vez que las muestras fueron identificadas, se procesaron el mismo día
siguiendo una modificatoria al procedimiento especificado por (Brito et
al, 2011), para la realización del ensayo “Investigación de E. coli en
muestras de origen aviar” y cuyo esquema se muestra en la siguiente figura
(Figura 1).
Figura N°1. Esquema de procedimiento de Investigación de E.Coli en
muestras de origen Aviar. (Brito et al, 2011)
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Aislamiento microbiológico
Preenrequecimiento
Utilizando hisopos estériles, se realizó hisopado de la lesión encontrada
en cada órgano y se colocó el hisopo en un tubo de ensayo conteniendo 10
mililitros de caldo lactosado.
Se empleó el caldo lactosado, el cual es un medio rico en nutrientes, que
no contiene inhibidores, lo que facilita el crecimiento de las bacterias
orientando la presencia de coliformes, como E. coli, por el mecanismo
degradativo (CO2) con formación de burbujas debido a la fermentación de
lactosa ya que produce gas y acido. El extracto de carne y peptona, son la
fuente de carbono y nitrógeno, mientras que la lactosa es el hidrato de
carbono (Gutiérrez y Sánchez, 2017).
Los tubos conteniendo la muestra y caldo lactosado fueron colocados en
incubación por 24 horas a 37°C.
Medio selectivo
En el agar VRB es un medio selectivo que contiene sales biliares, violeta
cristal, rojo neutro con lactosa, que se emplea fundamentalmente como
medio selectivo y diferencial para la detección y enumeración de
coliformes (Cultimed 2002).
La presencia simultánea de violeta cristal y sales biliares asegura la
inhibición del crecimiento de las bacterias Grampositivas. A su vez la
fermentación de la lactosa da lugar por un lado a la formación de ácido,
que hace cambiar a rojo el indicador, y por otro a la precipitación de las
sales biliares alrededor de las colonias. Las colonias, presentan un color
rojo púrpura y aparecen rodeadas por una franja rojiza. (Cultimed 2002)
Para preparar el agar se suspendieron 41,5 g en 1 litro de agua destilada;
se calentó y agitó hasta ebullición y se llevó a hervir durante 1 minuto. No
fue necesaria la esterilización, se dejó enfriar a una temperatura de 44-
47°C.
Se transfirió a cada placa Petri 15 ml de medio líquido y homogenizar
suavemente girando lateralmente las placas en un sentido y otro. Dejar
enfriar hasta solidificación.
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Siembra
Se sumerge un hisopo estéril en el tubo de caldo lactosado incubado y se
siembra en las placas solidificadas. Se llevó a incubar a 37ºC durante 24
horas.
La identificación de colonias compatibles a E. coli se determinó por las
características de colonia, de bordes bien definidos y de color rojo.
2.3.4 Prueba de sensibilidad
Se determinó la sensibilidad in vitro de los aislados de E. coli frente a
diferentes antimicrobianos mediante el sistema de difusión con discos
impregnados con antimicrobianos (Brito y col 2011).
Se tomaron las colonias de cada cepa previamente identificadas, se suspenden
en 9 ml de cloruro de sodio y la suspensión bacteriana se homogeniza y se
incuba a 37ºC por 6 h.
Luego la suspensión se sembró con hisopo estéril en placas contenido 15 a 20
ml de agar Muller Hinton realizando estrías en todas direcciones. Las placas
se secaron en una estufa a 37°C por 10 minutos.
Los discos de antibióticos que se usaron en este ensayo se seleccionaron en
base a su frecuente utilización en la terapéutica aviar. Los antibióticos y
concentraciones: Sulfatrimetoprim 29 μg, Amoxicilina 25 μg, Oxitetraciclina
30μg, Enrofloxacina 5 μg. Doxiciclina 80 μg.
Estos se depositaron en condiciones de esterilidad sobre las placas y se
presionaron cuidadosamente para asegurar el completo contacto con la
superficie del agar.
Se distribuyeron cinco discos por placa con el fin de mantener una distancia
de 2,5 cm entre ellos.
Las placas se incubaron durante 24 h a 37ºC y en función del tamaño de los
halos de inhibición, las cepas fueron clasificadas como sensibles (S),
intermedias (I) o resistentes (R) según los criterios de interpretación que se
encuentran detallados en la tabla 3 (Brito y col 2011).
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Tabla 3. Interpretación del diámetro de las zonas de inhibición para patógenos a los agentes
antimicrobianos (Brito y col 2011),
*Para el caso de la oxitetraciclina y doxiciclina se utilizaron concentraciones de 30 μg y 80
80 μg respectivamente, ya que es la presentación comercial de los discos de antibióticos, y
se utilizó como referencia el diámetro de zona de inhibición de las tetraciclinas, ya que
estos dos antibióticos pertenecen a la misma familia.
2.3.5 Análisis de datos
Se realizó un diseño estadístico descriptivo. Para determinar el comportamiento de
esta cepa frente a cada uno de los antibióticos, se empleó la Prueba exacta de Fisher.
Agente
antimicrobiano
Concentración Zona de inhibición (mm)
Sensible Intermedio Resistente
Amoxicilina 25μg ≥20 - ≤19
Enrofloxacina 5 μg ≥20 - ≤ 19
Penicilina 10 μg ≥29 - ≤ 28
Tetraciclina* 30 μg ≥19 15 – 18 ≤ 14
Sulfatrimetoprim 29μg ≥16 11 – 15 ≤ 10
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III. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
3.1.RESULTADOS
3.1.1. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE Escherichia coli
Durante el periodo de estudio, se procesaron 50 pollos correspondientes a 10 centros
productivos.
A partir de las necropsias realizadas, se obtuvo que el 100% de pollos presentó
aerosaculitis como única lesión interna a la sintomatología clínica presentada.
Tabla 4. Distribución de lesiones en órganos internos
Al realizar el protocolo de aislamiento e identificación para Escherichia coli. descrito
anteriormente, se obtuvieron 50 aislados identificados como Escherichia coli,
mediante el uso de agar selectivo VRB, que representa el 100% de las muestras
obtenidas.
Según los resultados obtenidos en el presente estudio, podemos catalogar a
Escherichia coli, como el principal agente patógeno de infecciones bacterianas en
pollos de engorde criados en la zona de Piura.
Órgano Tipo d lesión Muestras
procesadas
Porcentaje
Hígado Perihepatitis 0 0%
Peritoneo Peritonitis 0 0%
Saco aéreo Aerosaculitis 50 100%
Pericardio pericarditis 0 0%
Tráquea Traqueítis 0 0%
TOTAL 50 100%
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Grafica 1. Porcentajes de cepas de Escherichia coli aisladas de muestras de órganos
internos de pollos de engorde en la Provincia de Piura.
3.2 PRUEBA DE SENSIBILIDAD A ANTIBIÓTICOS
Para evaluar los perfiles de resistencia de las cepas de Escherichia coli, se realizaron
pruebas de sensibilidad in vitro frente a 5 agentes antimicrobianos de uso frecuente
para el tratamiento de infecciones bacterianas en pollos
Tabla 2. Resultados de sensibilidad in vitro de Escherichia coli frente a 5
antimicrobianos empleados en el tratamiento de infecciones bacterianas en
pollos de engorde en la Provincia de Piura.
ANTIBIÓTICO Sensible Intermedio Resistente
N° % N° % N° %
Oxitetracicina 23 46,0 - 27 54
Sulfatrimetoprim 50 100 - -
Doxiciclina 32 64,0 12 24 6 12
Amoxicilina 50 100 - -
Enrofloxacina 50 100 - -
Como podemos ver en la tabla 2, el 66% de las muestras fueron resistentes a dos
antibióticos. El 54 % del total de las cepas de Escherichia coli fueron resistentes a
oxitetraciclina, y el 12 % de las cepas resultaron resistentes a doxiciclina. El 12% de
las cepas mostraron sensibilidad intermedia a la doxiciclina. Respecto a los
resultados de sensibilidad, se encontró que tres de los 5 medicamentos
(Sulfatrimetoprim, amoxicilina y enrofloxacina) mostraron una sensibilidad del
100% (Grafica 2).
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Grafica2. Porcentajes de sensibilidad de Escherichia coli frente a los antibióticos
comúnmente empleados en el tratamiento de infecciones bacterianas en pollos de
engorde en la Provincia de Piura.
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IV. DISCUSION
4.1 DEL AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE Escherichia coli
El 100% de pollos evaluados presentaron aerosaculitis. como única lesión interna.
Barnes et al. (2003) manifiesta que la colibacilosis suele ser considerada como una
enfermedad secundaria, originada por un estado de inmunodepresión debida a otras
enfermedades víricas o bacterianas como Bronquitis Infecciosa, Enfermedad de
Newcastle, Enfermedad de Gumboro, Micoplasmosis, Clostridiosis, etc. La
presencia de lesiones primarias, como daños en los cilios traqueales y alteraciones
en el sistema respiratorio, facilitaría la entrada, colonización y diseminación
secundaria de E. coli. Además de un origen infeccioso, pueden existir otros factores
que incrementan la susceptibilidad de las aves para padecer una infección por E. coli
También puede haber factores capaces de disminuir dicha susceptibilidad como
factores inmunológicos (inmunidad activa y pasiva, adición de inmunoestimulantes),
fisiológicos (genética, aves adultas, hembras, estrés moderado, etc.) y nutricionales
(aporte de proteínas, vitamina A, D, C y E, carotenos, selenio, etc.). Blanco et al.
(2002) manifiesta que la mayor parte de los cuadros clínicos de colibacilosis son de
origen respiratorio, aunque no se descarta que algunos sucedan al atravesar las
bacterias la pared intestinal. Barnes et al. (2003) también manifiesta que la
colibacilosis aviar, suele iniciarse a nivel del tracto respiratorio. La alteración de la
mucosa del aparato respiratorio, debida a la acción de determinados agentes, supone
una importante vía de entrada para E. coli. Cuando E. coli atraviesa la mucosa del
tracto respiratorio y alcanza el torrente circulatorio, se origina una infección
sistémica generalizada o colisepticemia, donde se observan lesiones como
perihepatitis, peritonitis y pericarditis fibrinosa. A nivel respiratorio las lesiones se
localizan en la tráquea, pulmones y sacos aéreos, pudiendo presentar estos últimos
un aspecto opaco y con exudado caseoso de intensidad variable. Suele afectar a
animales jóvenes, de forma aguda, alcanzándose valores aproximados del 50% de
morbilidad y del 5-10% de mortalidad.
Al realizar el aislamiento e identificación para Escherichia coli, se obtuvieron 50
aislados identificados como Escherichia coli, que representa el 100% de las muestras
obtenidas. Debido a que el presente estudio se ha realizado por conveniencia (no al
azar) es por eso por lo que se obtiene un alto porcentaje de presentación de
Escherichia coli. En el Perú un estudio realizado por Carranza et al (2012) encontró
el 37.96 % de las muestras procesadas que resultaron positivas a Escherichia coli
provenientes de pollos broiler aparentemente sanos, donde se obtuvieron 41 colonias
positivas (41/ 108) a Escherichia coli.
En Ecuador, Apolo (2015) analizaron un total de 275 muestras de órganos de pollos
con sintomatología respiratoria y lesiones compatibles con colibacilosis; tras el
análisis microbiológico de las muestras se aislaron 204 cepas de E. coli que equivale
al 74.2% del total de las muestras.
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Gomis et al. (2001), lograron un porcentaje de aislamiento de E. coli del 70,7%, (58
de 82 aves) a partir de lesiones compatibles con colibacilosis, como pericarditis,
aerosaculitis y perihepatitis.
4.2 DE LA PRUEBA DE SENSIBILIDAD A ANTIBIÓTICOS
Se realizaron pruebas de sensibilidad in vitro frente a 5 agentes antimicrobianos de
uso frecuente para el tratamiento de infecciones bacterianas en pollos, el 66% de las
muestras fueron resistentes a dos antibióticos. Apolo (2015) encontró una resistencia
de 49,5%, asimismo manifiesta que en un estudio realizado por Bravo et al, en Perú
en pollos broiler (2014), encontraron datos que tienen mucha similitud con los
encontrados en esta investigación, sin embargo, sus porcentajes son superiores en
resistencia con un 54%.
El 54 % del total de las cepas de Escherichia coli fueron resistentes a oxitetraciclina,
y el 6 % de las cepas resultaron resistentes a doxiciclina. Apolo (2015) encontró una
resistencia de 89.7% para la oxitetraciclina y de 68.6% para la amoxicilina. Apolo
(2015) manifiesta que el antibiótico Oxitetraciclina (reportado por Valencia el 2012)
encontró valores de 94% de resistencia y Martinez et al, en México (2012) encontró
valores de resistencia menores con un 78.1% de resistencia. La elevada resistencia
observada para diferentes aislamientos de E. coli a antibacterianos como
oxitetraciclina y doxiciclina refleja la amplia utilización y el mal uso que se ha dado
en los últimos años.
El 12% de las cepas mostraron sensibilidad intermedia a la doxiciclina. Apolo (2015)
encontró un resultado similar de sensibilidad intermedia e de 13.2% para la
doxiciclina.
Respecto a los resultados de sensibilidad, se encontró que tres de los 5 medicamentos
(Sulfatrimetoprim, amoxicilina y enrofloxacina) mostraron una sensibilidad del
100%. Apolo (2015) obtuvo resultados diferentes, una sensibilidad de 20.6% para
sulfatrimetoprim, 14.7% para amoxicilina y 38.2 para enrofloxacina. Esto puede
ocurrir debido a que en la zona de crianza de Piura no es común el uso de antibióticos
en el proceso de crianza debido a los tiempos de retiro que son prolongados y la corta
edad al momento de la venta (35 a 40 días) y a las condiciones climáticas de las zonas
(zona calurosa durante casi todo el año) que no acentúan los procesos respiratorios.
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V. CONCLUSIONES
Del 100 % de las muestras, se identificó Escherichia coli, que demuestra que es el
principal agente causante de infecciones bacterianas en pollos de engorde de la
provincia de Piura.
Las cepas de Escherichia coli aisladas mostraron una mayor resistencia a 2
antimicrobianos de uso frecuente en la terapia como son la oxitetraciclina y
doxiciclina en un 54 % y 12 % respectivamente. Sin embargo, solo un antibiótico
mostro sensibilidad intermedia, siendo este la doxiciclina con un 24 %. La
sulfatrimetoprim, amoxicilina y enrofloxacina, mostraron una sensibilidad del 100%.
Se concluye que los antibióticos sulfatrimetoprim, amoxicilina y enrofloxacina son
eficaces para el tratamiento de infecciones bacterianas causadas por Escherichia coli
en pollos de engorde de la provincia de Piura
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VI. RECOMENDACIONES Y/O PROPUESTAS
El Servicio Nacional de Sanidad Agraria SENASA en coordinación con las empresas
productoras de pollo de carne deben promover el estudio de sensibilidad y resistencia de
microorganismos de importancia zoonótica, además de aplicar medidas para el control de
tiempos de retiros de uso de los antimicrobianos en la terapéutica animal.
El estudio de agentes patógenos debe realizarse utilizando métodos oficiales, las técnicas
microbiológicas como el método empleado en el presente estudio no alcanzan la sensibilidad
de los métodos cuantitativos, como PCR; sin embargo, por su adecuada confiabilidad, fácil
ejecución y bajos costos, deberían ser consideradas en nuestro país para emplearse como
métodos de rutina en la vigilancia de enfermedades como la colibacilosis aviar.
Es necesario que médicos veterinarios sean los únicos profesionales encargados en el manejo
de medicamentos de uso animal, prestando especial énfasis al uso adecuado de los
antimicrobianos y al cumplimiento de los tiempos de espera. Además de tomar las medidas
adecuadas de manejo y control en los planteles avícolas que permitan minimizar el efecto
patológico del E. coli en las aves.
Se recomienda realizar estudios y análisis similares al menos una vez por año a fin de tener
datos sobre el comportamiento de la sensibilidad y resistencia frente a los antimicrobianos
de Escherichia coli en pollos de carne, además de replicar este estudio en las demás regiones
avícolas del país para tener una base de datos que permita determinar cuál es la mejor
alternativa en el momento de realizar una antibioterapia.
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