Post on 18-Jun-2015
MICROBIOLOGIA GENERAL II
AISLAMIENTO DE HONGOS DE DIFERENTES FUENTES
EQUIPO:7
INTEGRANTES: AGUILAR ZAPIAIN MARTHA AMAYALI
DELGADO TOTO MAGDALENA
RIOS CORTÉS PATRICIA
SÁNCHEZ SOMOHANO MAYRA E.
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
QUÍMICO FÁRMACO BIOLÓGICA
OBJETIVOS
El alumno deberá demostrar la presencia y
distribución de los hongos que se
encuentran en el medio ambiente.
El alumno deberá analizar la morfología de
los hongos que se han obtenido de diversas
fuentes.
El alumno deberá realizar la identificación y
clasificación de los hongos aislados de los
diferentes especímenes trabajados.
CARACTERÍSTICAS GENERALES DE
LOS HONGOS
ORGANISMOS EUCARIOTAS
CARECEN DE CLOROFILA
QUIMIOORGANOTRÓFICOS
TIENEN PARED CELULAR RÍGIDA (Quitina+Polisacáridos+Polipéptidos
CARACTERÍSTICAS GENERALES DE LOS
HONGOS
UNICELULARES, MULTICELULARES
MICROSCÓPICOS
MACROSCÓPICOS
REPRODUCCIÓN SEXUAL (ESPORAS)
REPRODUCCIÓN ASEXUAL (ENDOSPORAS)
CARACTERÍSTICAS GENERALES DE
LOS HONGOS TALO (CUERPO DEL HONGO)
* MICELIO AEREO (REPRODUCCIÓN)
CARACTERÍSTICAS GENERALES DE LOS
HONGOS
TALO (CUERPO DEL HONGO)
*MICELIO VEGETATIVO
(SOSTÉN Y ABSORCIÓN DE NUTRIENTES)
CARACTERÍSTICAS GENERALES
DE LOS HONGOS HIFAS
*NO SEPTADA (Cenocítica) *SEPTADA UNINUCLEADA
COMPORTAMIENTO FISIOLÓGICO
pH (acidófilos)
promedio: 2-9
óptimo: 5.6
TEMPERATURA (Mesofílicos)
promedio: 0-62ºC
óptimo: 22-30ºC
GASES: Aerobios
LUZ: Ninguna
COMPORTAMIENTO FISIOLÓGICO
[ ] AZUCAR EN EL MEDIO
MATERIA NITROGENADA: Peptona
SOPORTE SÓLIDO: Gelosa
COMPORTAMIENTO NUTRICIONAL
Hongos Saprófitos (o saprobios):
viven sobre materia orgánica en descomposición,
es decir sobre materia muerta (restos orgánicos de
la descomposición de plantas y animales que
contiene el suelo, partes muertas de la madera de
un árbol, excrementos de animales).
COMPORTAMIENTO
NUTRICIONAL
Hongos Parásitos:
se alojan sobre algún ser vivo que los hospede, viviendo a expensas de éste sin ofrecerle ningún beneficio a cambio. Los hongos parásitos pueden producir daños de muy diversa consideración, desde pequeñas molestias para el huésped hasta causarle enfermedades graves o incluso la muerte. Pueden parasitar plantas, animales (incluido el hombre),o incluso a otros hongos.
COMPORTAMIENTO
NUTRICIONAL
Hongos Micorrízicos:
viven en simbiosis con alguna especie vegetal
(normalmente árboles), obteniendo ambos un
beneficio mutuo. Estos hongos viven rodeando las
partes más finas de las raíces de los árboles,
envolviéndolas y alimentándose de unas sustancias
que éstas segregan llamadas exudados
radiculares.
ESTRUCTURA CELULAR DE UNA HIFA
HIFA VEGETATIVAHIFA VEGETATIVA
FENÓMENOS
FÚNGICOS.
DIMORFISMO FÚNGICO.
Fenómeno por el cual un
hongo puede pasar de una
forma de micelio
(filamentosa) a levadura de
manera reversible.
Los hongos que los pueden
presentar son:
a) Nutriente dependientes:
Como C.albicans que en
medios pobres y tensos
presenta forma filamentosa
y en medios ricos de
levadura.
Temperatura y nutriente
dependientes:
Como la mayoría de los hongos
dimórficos. La fase filamentosa
o saprofítica se presenta en
medios pobres de nutrientes y
a 25-28°C, la levaduriforme en
medios ricos a temperatura de
35-37°C.
Por ejemplo: S. schenckii, H.
capsulatum,
P. brasiliensis y B. dermatitidis.
PLEOMORFISMO FÚNGICO.
Se presenta en los medios de cultivo, consiste en la transformación irreversible de una cepa por un exceso de carbohidratos, ésta tiende a cambiar dando un micelio blanco, algodonoso y estéril.
Se cree que se debe a mutaciones cromosómicas.
Se puede presentar en cualquier hongo filamentoso, pero es propio de los dermatofitos ( T. mentagrophytes y E. floccosum.)
POLIMORFISMO LESIONAL.
Capacidad de un agente etiológico
de generar distintos cuadros clínicos.
Por ejemplo:
La tiña del cuerpo o de la cabeza
puede ser producida por un solo
hongo: M. canis.
HONGOS BIFÁSICOS.
Aquellos hongos que presentan dos
formas, una filamentosa y a diferencia
de los hongos dimórficos, no
presentan fase levaduriforme, sino de
otro tipo.
Por ejemplo:
Las esférulas de C. immitis o las células
fumagoides de la cromomicosis.
REDUCCIÓN MORFOLÓGICA
FÚNGICA.
Cambio en la forma de un hongo,
dando un mínimo estado al
presentarse como parásito. Se puede
considerar también a la inversa, es
decir, complicación morfológica del
hongo en su forma saprofítica ( en la
naturaleza o medios de cultivo).
PLURALIDAD ETIOLÓGICA.
Una misma micosis se puede ocasionar por diferentes agentes.
Por ejemplo:
La tiña de la cabeza puede ser causada por:
T. tonsurans o M. canis; o una onicomicosis pude producirse por T. rubrum o Scopulariopsis.
SÍNDROMES CLÍNICOS DE
LAS ENFERMEDADES
MICÓTICAS
CLASIFICACIÓN DE LAS MICOSIS.
En general se clasifican en cuatro grupos
según el grado de acción a nivel cutáneo:
Micosis superficiales.
Micosis subcutáneas.
Micosis profundas o sistémicas.
Micosis oportunistas.
MICOSIS SUPERFICIALES.
Se subdividen en dos grupos que incluyen:
MICOSIS SUPERFICIALES.
1. Dermatofitosis (Tiñas).
2. Pitiriasis versicolor.
3. Tiña negra.
4. Piedra.
PSEUDOMICOSIS SUPERFICIALES.
1. Tricomicosis axilar
2. Eritrasema.
3. Queratolisis puntata.
Eritrasema en región
axilar
MICOSIS SUBCUTÁNEAS.
Dentro de este grupo se encuentran
los siguientes síndromes:
Micetoma.
Esporotricosis.
Cromomicosis.
Rinosporidiosis.
Lobomicosis.Micetoma por Norardia
MICOSIS PROFUNDAS O
SISTÉMICAS
Los síndromes clínicos más
representativos de este grupo son:
Coccidioidomicosis.
Histoplasmosis.
Paracoccidioidomicosis.
Blastomicosis norteamericana.
Paracoccidioidomicosis
“boca de tapir”
MICOSIS OPORTUNISTAS.
Se dividen en cuatro grupos
dependiendo del tipo de hongo estos
son:
POR HONGOS LEVADURIFORMES:
1. Candidosis.
2. Criptococosis.
3. Geotricosis.
4. Infecciones por Pityrosporum sp.
Quelitis nicácea
por C. albicans
POR HONGOS MOHOS.
1. Aspergilosis.
2. Zigomicosis.
3. Feohifomicosis.
4. Miscelánea (Scopulariopsis,
penicillium, onicomicosis)
POR ACTINOMICETOS.
1. Actinomicosis
2. Nocardiosis.
INFECCIONES MICÓTICAS DE OJOS Y
OÍDOS.
1. Queratitis micótica.
2. Otomicosis.
Aislamiento de hongos
HONGOS EN SUELO
Clase Phycomycetes:
1. Mucor sp.
2. Rhizopus sp.
Clase Deuteromycetes:
1. Aspergillus sp.
2. Penicillium sp.
3. Fusarium sp.
4. Trichoderma sp.
5. Cephalosporium sp.
Clase Phycomycetes:
Producen colonias de crecimiento rápido, inicialmente blancas pero que se vuelven marrones o gris-negro con la edad, llenando la placa con un denso micelio lanudo. Las colonias se desarrollan entre 48 y 72 horas incubadas a temperatura ambiente.
Son blanco vellosas, algodonosa, el tamaño de los esporangios son los que le dan el color a la colonia.
COLONIA JOVEN DE Phycomycetes, MICELIO VELLOSO, INICIO EL
MICELIO ES BLANCO ( medio sabouraud )
COLONIAS VIEJAS DE Phycomycetes, CON LA MADURACION Y
PRODUCCION DE ESPOROS, SE OBSERVAN GRIS O MARRON OSCURA (
medio sabouraud )
Aspecto microscópico de Phycomycetes a)
esporangio maduro, b) esporangioforo, C)
hifas no tabicadas.
HONGOS DEL AIRE
El aire no es un medio en el que pueden desarrollarse
los microorganismos pero es el portador de aerosoles
biológicos como polvo, gotitas de agua y otros, que
pueden estar cargados de los diversos grupos de
Microorganismos
De las capas de aire se han encontrado esporas de
hongos que proceden principalmente del suelo, de la
vegetación y del mar.
El aire es también el medio de diseminación de hongos
saprófitos
Géneros mas comunes encontrados en el aire:
Penicillium
Aspergillus
Rhizopus
Mucor
Cladosporium
Rhodotorula
Candida
Hormodendrum
Hongos Comunes en Polvo Domestico
•Cladosporium sp. ( C. cladosporoides, C. herbarum, y/o C.
sphaerospermum) (>80% de muestras)*
•Penicillum sp. (80% de muestras) (20%-30% de muestras)
•Sistrotema brinkmannii (>70% de muestras)
•Levaduras rosas y blancas (>79% de muestras)
•Botrytis cinérea (>50% de muestras)
•Aspergillus sp. ( A. fumigatus, A. niger, A. ochroaceus, A.
oryzae, A. versicolor, y/o A. glaucus) (37% de muestras)
•Paecillomyces variotii
•Stachybotrys atra
•Phoma sp
•Aureobasidium pullulans (20%30% de muestras)
•Alternaria alternata
•Epicoccum purpurascens (20%-30% de muestras)
•Geotrichum candidum (20%-30% de muestras)
•Ulocladium sp. ( U. chartarum y/o U. consortiale) (20%30%
de muestras)
•Trichoderma viride
•Trichoderma harzianum
•Mucor sp
En la década de los 70, con el fin de controlar
los microorganismos del aire, se comenzaron
a dejar placas abiertas unos minutos, pero
este método:
•Carece de repetitividad
•Es sólo cualitativo
•Las ufc obtenidas no se pueden
relacionar con un volumen
determinado de aire.
La mayoría de las frutas son sensibles a
varias especies de hongos, pero algunas de
estas especies afectan sólo a una clase de
fruta. En la práctica, el aspecto externo de
los distintos tipos de lesiones originados por
hongos, denominadas genéricamente
podredumbres o enmohecimientos, son
difíciles de diferenciar.
HONGOS EN FRUTAS Y VERDURAS
Las principales formas de podredumbres y alteraciones que se producen son:
Húmeda: producida por Rhizopus y algunas bacterias.
Seca: originada por Gloeosporium y Sclerotinia.
Frutas de pepita (peras y manzanas): se debe a Fusarium, Botrytis, Alternaria, Penicillium, Trichotechium, Cladosporium.
Amarga: Gloeosporium, Trichotechium.
Roña o moteado: Venturia y Fusicladium.
Fusarium
Medio de Sbouraud
Medios de cultivo:
Fórmula
original:
Glucosa 20g
Peptona 10g
Agar agar 20g
Agua
destilada
1000ml
USO:
Para cultivo de hongos patógenosy no patógenos, particularmentedermatofitos, levaduras y m.o.acidúricos. pH final 5.6 +- 0.2
FUNDAMENTO:
Medio peptonado suplementadocon carbohidratos, en el que laspeptonas proporcionan factoresde crecimiento y fuentes denitrógeno. L os carbohidratoscon la fuente de energía para elcrecimiento. El pH ácidofavorece el crecimiento dehongos, e inhibe otros m.o. Sepueden adicionar sustanciasantimicrobianas.
Littman Agar. Fórmula original:
Peptona
Bilis bovina
Dextrosa
Agua destilada
Cristal violeta
USO:
Medio selectivo, que suplementado con estreptomicina, se
emplea para el aislamiento primario y cultivo de hongos,
especialmente dermatofitos.
FUNDAMENTO:
La peptona proporciona factores de crecimiento y nitrógeno y
aminoácidos. La Dextrosa es una fuente adicional de carbono. El
cristal violeta y la estreptomicina son elementos bacteriostáticos
selectivos.
Agar papa-
dextrosa
Usos: Comúnmente usado
para aislamientode hongos
fitopatógenos y
algunoshongos
micorrícicos.
Fórmula original:
Dextrosa o
Glucosa
Infusión de
papa
Agar agar
Agua destilada
Micosel
agar
Fórmula original:
Estreptomicina 0,5%
Peptona de soya,.
Dextrosa,
Cloranfenicol
Agar agar
Agua destilada
Cicloheximida,
Usos: Selectivo para el
aislamiento de
hongospatógenos de
muestras que puedan
tener alto contenido de
flora bacteriana.
Necesidades de
crecimiento de hongos:
Peptonas
Azúcares
Soporte sólido
pH ácido
Humedad
PRODUCTOS DE HONGOS:
Alimento:
Saccharomyces cerevisiae
PRODUCTOS DE HONGOS:
En procesos industriales:
Ácido cítrico
Penicilina
Cefalosporinas
Ácido fusídico
Aspergillus niger
Penicillium notatum
Cephalosporium
Mucor
Diluciónes…???
MICOTOXICOSIS
AFLOTOXINAS:
METABOLITOS O
SUSTANCIAS
PRECURSORAS DE
TOXINAS
Aislamiento de aire:
Caja de agar saboraud exponer al aire 15 minutos e incúbela
Reporte las
características
de a colonia:
Repita el paso con una caja de agar littman
Aislamiento en suelo
Cernir la
muestra de tierra,
realizar diluciones hasta 10-6
pasar 0.5g de tierra
pasar a un tubo (4.5
mL) de solución salina
estéril dilución (1:10);
Funda los medios
De saboraud y
littman y agregue a
una caja
añada 1mL del
contenido del
tubo
agita la
muestra;
incube.
reporte
crecimiento
macroscopico
Aislamiento en frutas y verduras
Cortar pequeños pedazos de fruta contaminada
Sembrar en una
caja petri con
saboraud
repita con
todas sus
muestras
Realice la
lectura
macroscópi
ca de las
muestras
Datos para reportar
Apariencia de la colonia:
Color de frente(centro)
Borde de la colonia(contorno)
Crecimiento
Superficie
( al reverso)
Crecimiento
Superficie
Contorno
Centro
BIBLIOGRAFÍA.
Bonifaz A. Micología médica básica. Edit.
Méndez. 2a edición. México D.F. 1991.
Arenas, Roberto, Micología médica ilustrada,
Edit. Interamericana McGraw-Hill. 1°edición,
1993